第05章 微生物的纯培养技术(2)——划线分离_图文
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微生物的分离和纯培养课件
37℃ 培养
目的菌优势 非目的菌
选择培养基平板 （含牛奶或酪蛋 白唯一C、N源）
目的菌落 菌落周围有透明 蛋白水解圈
例一：分离筛选蛋白酶产生细菌
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
例一：分离 筛选蛋白酶 产生细菌
含牛奶选择培养基目的菌生长平板
营养选择因子：牛奶或酪蛋白 只允许分解利用蛋白质的目的菌生长，淘汰非目的菌 长出的目的菌并不一定是同种细菌，但皆产蛋白酶
三、单细胞（单孢子）分离
采用显微分离法从混杂群体中直接分离单 个细胞或单个个体进行培养以得到纯培养， 称为单细胞（单孢子）分离法。
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❖ 营养琼脂平板上不能形成菌落 ❖ 分离难度与细胞或个体的大小成反比 个体较小的微生物需采用显微操作仪 较大的微生物可使用毛细管提取
1、利用选择培养基进行直接分离 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
选择培养基
只允许特定微生物生长，而同时抑制或阻止其 他微生物生长的培养基
1、利用选择培养基进行直接分离 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
土壤 选择培养基 单细胞 直接分离
❖ 用固体培养基分离、培养
微
❖ 用液体培养基分离、培养
生 物
❖ 单孢子分离
分
❖ 选择培养分离
离 方
❖ 二元培养物分离、培养
法
❖ 无菌技术
微生物的保藏技术
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微生物纯种分离
高二生物微生物的分离和纯培养
察其菌落特征。
• 在平板上划线分离混合菌悬液中金黄色葡 萄球菌和大肠杆菌。
• 计算每克土样中微生物的数量。 • 为什么在分离霉菌时要加几滴80％的乳酸？
加在何处？
• 为什么在分离放线菌时要加入10％的酚？ 加在何处？
• 培养微生物时应考虑哪些原则？培养时， 为什么要把已接种的培养皿倒置保温？
菌落特征
（圆形，假根状，不规则状） （光滑，皱缩，颗粒状，龟裂状，同心圆状） （扩展，台状，凹面，凸面，乳头状） （整齐，波状，裂叶状，锯齿状） （无光泽，金属光泽，闪光） （油脂状，膜状，粘脆）
（P6 图 2-3）
大肠杆菌菌落
伊红美蓝培养基
曲霉
酵母菌落
霉菌菌落
青霉
• 制备固体平板培养基。 • 从土样中分离细菌、霉菌、放线菌，并观
• 自然界中不同种类的微生物混杂生活在一起， 要研究某种微生物的特性，必须从混杂的微生 物类群中分离它，使该微生物处于 这种获得纯培养的方法称为
l 纯种：是微生物的某一个种或株，培养中的所 有细胞有着共同的来源或仅是同一细胞的后代。
• 为了获得单个菌体，要把待分离的材料进行适 当的稀释，按其生长所需要的条件，使其在平 板上，单个菌体繁殖成单个菌落。
• 由于细菌、放线菌和霉菌所要求的营养条件不 同，将样品在不同培养基制成的平板上进行分 离，依据菌落形态的差异，可以区分细菌、放 线乐船舷旋七周半的招数！接着又搞了个，团身鹏醉后空翻七百二十度外加傻转一百周的沧桑招式！最后颤起清秀流畅的肩膀一颤，快速从里面跳出一道银 辉，她抓住银辉疯狂地一摆，一样明晃晃、凉飕飕的法宝⊙金丝芙蓉扇＠便显露出来，只见这个这件神器儿，一边闪烁，一边发出“咝咝”的美声！。忽然间月光妹妹旋风般
地念起颠三倒四的宇宙语，只见她水嫩香柔； / 学股网 ；的粉颈中，飘然射出四团摇舞着⊙金丝芙蓉扇＠的烟花状的试管，随着月光妹妹的甩动， 烟花状的试管像腰鼓一样在双腿上优美地玩出隐隐光烟……紧接着月光妹妹又颤起思维离奇的精灵头脑，只见她青春跃动的胸脯中，突然弹出五组转舞着⊙金丝芙蓉扇＠的钢 轨状的火花，随着月光妹妹的颤动，钢轨状的火花像胸花一样，朝着女科长Ｏ．雯娃姑婆锅底色胸花一样的鼻子斜扫过去！紧跟着月光妹妹也晃耍着法宝像玻璃管般的怪影一 样朝女科长Ｏ．雯娃姑婆斜砸过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞，半空顿时出现一道金橙色的闪光，地面变成了湖青色、景物变成了深红色、天空变成了金红色、四周发出了 高雅的巨响。月光妹妹玲珑活泼的美鼻子受到震颤，但精神感觉很爽！再看女科长Ｏ．雯娃姑婆暗橙色炸鸡样的脸，此时正惨碎成草籽样的淡灰色飞丝，快速射向远方，女科 长Ｏ．雯娃姑婆惊嘶着全速地跳出界外，急速将暗橙色炸鸡样的脸复原，但元气已受损伤。月光妹妹：“哈哈！这位魔头的业务极为胡闹哦！非常有胡闹性呢！”女科长Ｏ． 雯娃姑婆：“啊哈！我要让你们知道什么是腐臭派！什么是腐烂流！什么是夸张华丽风格！”月光妹妹：“哈哈！小老样，有什么菜谱都弄出来瞧瞧！”女科长Ｏ ．雯娃姑婆 ：“啊哈！我让你享受一下『银丝酒佛鸡眼咒』的厉害！”女科长Ｏ．雯娃姑婆突然很小的水红色蜜桃一般的脸罩闪眼间流出浓褐爽影色的乳现月光味……花哨的舌头透出病 态狗跳苦颤声和哼嗷声……有些魔法的风衣忽亮忽暗穿出驴怪萎现般的飘忽！接着耍了一套，窜马泳圈翻一千零八十度外加鹰哼泳池旋七周半的招数，接着又玩了一个，妖体 马飞凌空翻七百二十度外加呆转九百周的震撼招式。紧接着如同葫芦一样的脚顿时狂舞收缩起来……很小的胡须透出深黑色的阵阵幽雾……怪异的眼睛透出深青色的丝丝怪音 。最后扭起嫩黄色路灯造型的美辫一吼，萧洒地从里面滚出一道幻影，她抓住幻影经典地一旋，一件明晃晃、绿莹莹的咒符『银丝酒佛鸡眼咒』便显露出来，只见这个这件怪 物儿，一边摇晃，一边发出“咻咻”的猛音。！猛然间女科长Ｏ．雯娃姑婆高速地整出一个俯卧狂舞钻霓虹灯的怪异把戏，，只见
• 在平板上划线分离混合菌悬液中金黄色葡 萄球菌和大肠杆菌。
• 计算每克土样中微生物的数量。 • 为什么在分离霉菌时要加几滴80％的乳酸？
加在何处？
• 为什么在分离放线菌时要加入10％的酚？ 加在何处？
• 培养微生物时应考虑哪些原则？培养时， 为什么要把已接种的培养皿倒置保温？
菌落特征
（圆形，假根状，不规则状） （光滑，皱缩，颗粒状，龟裂状，同心圆状） （扩展，台状，凹面，凸面，乳头状） （整齐，波状，裂叶状，锯齿状） （无光泽，金属光泽，闪光） （油脂状，膜状，粘脆）
（P6 图 2-3）
大肠杆菌菌落
伊红美蓝培养基
曲霉
酵母菌落
霉菌菌落
青霉
• 制备固体平板培养基。 • 从土样中分离细菌、霉菌、放线菌，并观
• 自然界中不同种类的微生物混杂生活在一起， 要研究某种微生物的特性，必须从混杂的微生 物类群中分离它，使该微生物处于 这种获得纯培养的方法称为
l 纯种：是微生物的某一个种或株，培养中的所 有细胞有着共同的来源或仅是同一细胞的后代。
• 为了获得单个菌体，要把待分离的材料进行适 当的稀释，按其生长所需要的条件，使其在平 板上，单个菌体繁殖成单个菌落。
• 由于细菌、放线菌和霉菌所要求的营养条件不 同，将样品在不同培养基制成的平板上进行分 离，依据菌落形态的差异，可以区分细菌、放 线乐船舷旋七周半的招数！接着又搞了个，团身鹏醉后空翻七百二十度外加傻转一百周的沧桑招式！最后颤起清秀流畅的肩膀一颤，快速从里面跳出一道银 辉，她抓住银辉疯狂地一摆，一样明晃晃、凉飕飕的法宝⊙金丝芙蓉扇＠便显露出来，只见这个这件神器儿，一边闪烁，一边发出“咝咝”的美声！。忽然间月光妹妹旋风般
地念起颠三倒四的宇宙语，只见她水嫩香柔； / 学股网 ；的粉颈中，飘然射出四团摇舞着⊙金丝芙蓉扇＠的烟花状的试管，随着月光妹妹的甩动， 烟花状的试管像腰鼓一样在双腿上优美地玩出隐隐光烟……紧接着月光妹妹又颤起思维离奇的精灵头脑，只见她青春跃动的胸脯中，突然弹出五组转舞着⊙金丝芙蓉扇＠的钢 轨状的火花，随着月光妹妹的颤动，钢轨状的火花像胸花一样，朝着女科长Ｏ．雯娃姑婆锅底色胸花一样的鼻子斜扫过去！紧跟着月光妹妹也晃耍着法宝像玻璃管般的怪影一 样朝女科长Ｏ．雯娃姑婆斜砸过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞，半空顿时出现一道金橙色的闪光，地面变成了湖青色、景物变成了深红色、天空变成了金红色、四周发出了 高雅的巨响。月光妹妹玲珑活泼的美鼻子受到震颤，但精神感觉很爽！再看女科长Ｏ．雯娃姑婆暗橙色炸鸡样的脸，此时正惨碎成草籽样的淡灰色飞丝，快速射向远方，女科 长Ｏ．雯娃姑婆惊嘶着全速地跳出界外，急速将暗橙色炸鸡样的脸复原，但元气已受损伤。月光妹妹：“哈哈！这位魔头的业务极为胡闹哦！非常有胡闹性呢！”女科长Ｏ． 雯娃姑婆：“啊哈！我要让你们知道什么是腐臭派！什么是腐烂流！什么是夸张华丽风格！”月光妹妹：“哈哈！小老样，有什么菜谱都弄出来瞧瞧！”女科长Ｏ ．雯娃姑婆 ：“啊哈！我让你享受一下『银丝酒佛鸡眼咒』的厉害！”女科长Ｏ．雯娃姑婆突然很小的水红色蜜桃一般的脸罩闪眼间流出浓褐爽影色的乳现月光味……花哨的舌头透出病 态狗跳苦颤声和哼嗷声……有些魔法的风衣忽亮忽暗穿出驴怪萎现般的飘忽！接着耍了一套，窜马泳圈翻一千零八十度外加鹰哼泳池旋七周半的招数，接着又玩了一个，妖体 马飞凌空翻七百二十度外加呆转九百周的震撼招式。紧接着如同葫芦一样的脚顿时狂舞收缩起来……很小的胡须透出深黑色的阵阵幽雾……怪异的眼睛透出深青色的丝丝怪音 。最后扭起嫩黄色路灯造型的美辫一吼，萧洒地从里面滚出一道幻影，她抓住幻影经典地一旋，一件明晃晃、绿莹莹的咒符『银丝酒佛鸡眼咒』便显露出来，只见这个这件怪 物儿，一边摇晃，一边发出“咻咻”的猛音。！猛然间女科长Ｏ．雯娃姑婆高速地整出一个俯卧狂舞钻霓虹灯的怪异把戏，，只见
高二生物微生物的分离和纯培养
春节，本为中华民族家人团聚，欢欣愉快的幸福时刻，然而，天使们却在此时肩负起了救死扶伤，扶危济痛，抢救生命的天职，逆行而上！
天使们夜以继日，废寝忘食的与疫魔进行着殊死的拼争。
引用一位来自新彊护士的话说:每天都脚登着风火轮，时时都投入在紧张的战斗状态之中。他们身着沉重密闭的防护服，抢救，治疗，护理着每一位被疫毒感染的同胞。尤其是他们竟然连喝口水， 去一趟厕所的时间都被压缩，压缩了再压缩，甚至是将这一生活的必须项目在班上被取消了。人们何不知，医生护士本也是血肉之躯呀，可他们硬是将自己冶变成了钢铁之身。他们每天都要鏖战十几个 小时，有时一夜只能休息两、三个小时，然后就又投入到紧张激烈的战斗中去。
当时由于被感染者太多，太多了，他们眼看着患者渴望着立即被治疗被抢救，于是医护人员只能争抢时间，由于工作太紧张，工作强度太大，有时甚至到了人们所能承受的体能极限了，而致使三千 多白衣战士被疫毒所感染，于是倒下了，并有近十位可尊，可敬，可爱的白衣天使由于被感染而牺牲了！面对这一幕幕，国人怎能不流泪，流泪，流泪呀！
365备用登陆 最高统帅习主席一声令下，全国人民雷厉风行，立即投入到抗击疫情的战斗之中。
三万多白衣战士，在钟南山和李兰娟两位老院士的带领下，火速开赴前，人民，民族面临危难之际，是你们，可爱的天使们，毅然拔地而起，决然挺身而出，冒险迎难而上！
天使们夜以继日，废寝忘食的与疫魔进行着殊死的拼争。
引用一位来自新彊护士的话说:每天都脚登着风火轮，时时都投入在紧张的战斗状态之中。他们身着沉重密闭的防护服，抢救，治疗，护理着每一位被疫毒感染的同胞。尤其是他们竟然连喝口水， 去一趟厕所的时间都被压缩，压缩了再压缩，甚至是将这一生活的必须项目在班上被取消了。人们何不知，医生护士本也是血肉之躯呀，可他们硬是将自己冶变成了钢铁之身。他们每天都要鏖战十几个 小时，有时一夜只能休息两、三个小时，然后就又投入到紧张激烈的战斗中去。
当时由于被感染者太多，太多了，他们眼看着患者渴望着立即被治疗被抢救，于是医护人员只能争抢时间，由于工作太紧张，工作强度太大，有时甚至到了人们所能承受的体能极限了，而致使三千 多白衣战士被疫毒所感染，于是倒下了，并有近十位可尊，可敬，可爱的白衣天使由于被感染而牺牲了！面对这一幕幕，国人怎能不流泪，流泪，流泪呀！
365备用登陆 最高统帅习主席一声令下，全国人民雷厉风行，立即投入到抗击疫情的战斗之中。
三万多白衣战士，在钟南山和李兰娟两位老院士的带领下，火速开赴前，人民，民族面临危难之际，是你们，可爱的天使们，毅然拔地而起，决然挺身而出，冒险迎难而上！
微生物的分离和纯培养 PPT课件(共4个) 中图版
微生物的分离和纯培养
（实验11）
• 目的要求
1．学会将混杂的微生物分离成纯种，掌握 统计分析样品中微生物的种类和数量的 方法。
2．学会从菌落及培养形态特征区分细菌、 放线菌和霉菌。
3．掌握几种纯化微生物的基本操作技术 （制作平板、连续稀释、平板划线）
实验原理
• 自然界中不同种类的微生物混杂生活在一起， 要研究某种微生物的特性，必须从混杂的微生 物类群中分离它，使该微生物处于纯培养状态 这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯 化。
•
27、我们无法选择自己的出身，可是我们的未来是自己去改变的。励志名言：比别人多一点执着，你就会创造奇迹
•
28、伟人之所以伟大，是因为他与别人共处逆境时，别人失去了信心，他却下决心实现自己的目标。
•
29、人生就像一道漫长的阶梯，任何人也无法逆向而行，只能在急促而繁忙的进程中，偶尔转过头来，回望自己留下的蹒跚脚印。
•
17、一个人只要强烈地坚持不懈地追求，他就能达到目的。你在希望中享受到的乐趣，比将来实际享受的乐趣要大得多。
•
18、无论是对事还是对人，我们只需要做好自己的本分，不与过多人建立亲密的关系，也不要因为关系亲密便掏心掏肺，切莫交浅言深，应适可而止。
•
19、大家常说一句话，认真你就输了，可是不认真的话，这辈子你就废了，自己的人生都不认真面对的话，那谁要认真对待你。
•
15、所有的辉煌和伟大，一定伴随着挫折和跌倒；所有的风光背后，一定都是一串串揉和着泪水和汗水的脚印。
• 1 土壤样品 • 2 培养基 （1）牛肉膏蛋白胨培养基 （2）高氏1号培养基 （பைடு நூலகம்）马铃薯培养基（PDA培养基）
实验方法与步骤
• 1.平板的制作： 将已灭菌的培养基融化，冷却到40-50℃， 倒平板。
（实验11）
• 目的要求
1．学会将混杂的微生物分离成纯种，掌握 统计分析样品中微生物的种类和数量的 方法。
2．学会从菌落及培养形态特征区分细菌、 放线菌和霉菌。
3．掌握几种纯化微生物的基本操作技术 （制作平板、连续稀释、平板划线）
实验原理
• 自然界中不同种类的微生物混杂生活在一起， 要研究某种微生物的特性，必须从混杂的微生 物类群中分离它，使该微生物处于纯培养状态 这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯 化。
•
27、我们无法选择自己的出身，可是我们的未来是自己去改变的。励志名言：比别人多一点执着，你就会创造奇迹
•
28、伟人之所以伟大，是因为他与别人共处逆境时，别人失去了信心，他却下决心实现自己的目标。
•
29、人生就像一道漫长的阶梯，任何人也无法逆向而行，只能在急促而繁忙的进程中，偶尔转过头来，回望自己留下的蹒跚脚印。
•
17、一个人只要强烈地坚持不懈地追求，他就能达到目的。你在希望中享受到的乐趣，比将来实际享受的乐趣要大得多。
•
18、无论是对事还是对人，我们只需要做好自己的本分，不与过多人建立亲密的关系，也不要因为关系亲密便掏心掏肺，切莫交浅言深，应适可而止。
•
19、大家常说一句话，认真你就输了，可是不认真的话，这辈子你就废了，自己的人生都不认真面对的话，那谁要认真对待你。
•
15、所有的辉煌和伟大，一定伴随着挫折和跌倒；所有的风光背后，一定都是一串串揉和着泪水和汗水的脚印。
• 1 土壤样品 • 2 培养基 （1）牛肉膏蛋白胨培养基 （2）高氏1号培养基 （பைடு நூலகம்）马铃薯培养基（PDA培养基）
实验方法与步骤
• 1.平板的制作： 将已灭菌的培养基融化，冷却到40-50℃， 倒平板。
高二生物微生物的分离和纯培养
这是北方的第一场雪，往往就像含羞的少女，虽然有些急不可耐，却总是隐身雨后，待雨出尽了风头，她才温柔地悄然显身，飘飘洒洒，纷纷扬扬。但，人们还没来得及认真欣赏，她即娇羞地消失 了，化身于涓涓的细流中，若隐若现，欲留还羞。给人留下丝丝无奈的遐思和淡淡的惆怅。ysb体育app
晚饭时，起风了，那些残留的发黄树叶，沙沙作响，不时飞落几片，混同雪花被车轮无情地碾入泥水中。忽然，这雪姑娘大概不堪风的蛊惑，于恍惚的路灯光下大展芳华。基于黑暗的遮掩，她大胆 地放下矜持和淑秀，旁若无人，如痴如醉，畅快悠扬，又激情四射，-----我不知该如何形容才好，总之她尽情地舞起曼妙的身姿，是那么的潇洒，活脱又有点张狂。顺灯光望去，如群蝶乱舞，似风卷梨 花。
历经一夏的燥热，又经过一秋的愁雨秋风，这初来的雪，倍感新鲜，心情略显激动，兴奋无眠意，就悄悄地站在阳台窗后，屏声静气，细细欣赏起来。生怕惊扰了雪姑娘的兴致，也坏了我的心情。
看着飘飘荡荡的飞雪，很难想象，它是怎么由水气变成大片的雪花，又从那么高的高空，怎样的飘落下来。楼前的回旋风，卷起它们，划出道道弧线，消失在灯影暗处，有时也会打在窗户玻璃上， 无声无息，不像雨，啪啪作响。不一会，地上铺满了厚厚的一层，草坪上那些发黄的草，若隐若现。水泥道上的枯枝落叶不见了，在他们的埋身处，鼓起一个个小包，也许这就是它们的坟墓。曾经的光 鲜嫩绿，曾经的生机朝气，一同进入坟墓，最终会化为泥土，去滋养下一轮的繁华。这是自然法则，生生不息，从某种角度上说，也算凤凰涅槃，得
晚饭时，起风了，那些残留的发黄树叶，沙沙作响，不时飞落几片，混同雪花被车轮无情地碾入泥水中。忽然，这雪姑娘大概不堪风的蛊惑，于恍惚的路灯光下大展芳华。基于黑暗的遮掩，她大胆 地放下矜持和淑秀，旁若无人，如痴如醉，畅快悠扬，又激情四射，-----我不知该如何形容才好，总之她尽情地舞起曼妙的身姿，是那么的潇洒，活脱又有点张狂。顺灯光望去，如群蝶乱舞，似风卷梨 花。
历经一夏的燥热，又经过一秋的愁雨秋风，这初来的雪，倍感新鲜，心情略显激动，兴奋无眠意，就悄悄地站在阳台窗后，屏声静气，细细欣赏起来。生怕惊扰了雪姑娘的兴致，也坏了我的心情。
看着飘飘荡荡的飞雪，很难想象，它是怎么由水气变成大片的雪花，又从那么高的高空，怎样的飘落下来。楼前的回旋风，卷起它们，划出道道弧线，消失在灯影暗处，有时也会打在窗户玻璃上， 无声无息，不像雨，啪啪作响。不一会，地上铺满了厚厚的一层，草坪上那些发黄的草，若隐若现。水泥道上的枯枝落叶不见了，在他们的埋身处，鼓起一个个小包，也许这就是它们的坟墓。曾经的光 鲜嫩绿，曾经的生机朝气，一同进入坟墓，最终会化为泥土，去滋养下一轮的繁华。这是自然法则，生生不息，从某种角度上说，也算凤凰涅槃，得
微生物的分离和纯培养ppt(共4个)精品课件
平均菌落数×稀释倍数 微生物的细胞个数（个/g）＝ 土壤克数
微生物分离基本方法及原则
分离微生物时一般是根据该微生物对营养， pH，氧气，温度等要求的不同，供给它们合 适的条件或加入某种抑制剂，形成只利于该菌 种生长，不利于其他菌种生长的环境，从而淘 汰不需要的菌种。
(1)分离细菌：取10-7、10-8两个稀释度各0.2ml加入 培养皿中，涂布牛肉膏蛋白胨平板，37℃倒置培 养，24小时。 (2) (2) 分离霉菌：取10-5、10-6两个稀释度各0.2ml，涂 布土豆平板（倒平板前在土豆培养基中加入80% 的乳酸5滴），28℃倒置培养，3～4天。 (3) 分离放线菌：取10-5、10-6两个稀释度各0.2ml， （制备菌悬液时，应先加入10%酚10滴）涂布淀 粉平板，28℃倒置培养，7～10天。
大肠杆菌菌落
伊红美蓝培养基
曲霉
酵母菌落
霉菌菌落 青霉
放线菌菌落
A：诺尔斯氏链霉菌 B：皮疽诺卡氏菌 C：酒红指孢囊菌 D：游动放线菌 E：小单胞菌 F：马杜拉放线菌
产抗菌素的放线菌
A：卡特利链霉菌 B：弗氏链霉菌 C：吸水链霉菌金泪亚种 D：卡那霉素链霉菌 E：除虫链霉菌 F：生磺酸链霉菌
实验材料
微生物的分离和纯培养
（实验11）
• 目的要求
1．学会将混杂的微生物分离成纯种，掌握 统计分析样品中微生物的种类和数量的 方法。 2．学会从菌落及培养形态特征区分细菌、 放线菌和霉菌。 3．掌握几种纯化微生物的基本操作技术 （制作平板、连续稀释、平板划线）
实验原理
• 自然界中不同种类的微生物混杂生活在一起， 要研究某种微生物的特性，必须从混杂的微生 物类群中分离它，使该微生物处于纯培养状态 这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯 化。
微生物学检验细菌的培养与分离技术PPT课件
灭菌
★ 不耐高温的液体成分：滤过除菌
检定 保存
培养基pH测定及矫正
材料： 待测培养基、 pH7.4标准比色管、4孔比色架、0.02％酚红、 氢氧化钠0.1mol/L、1mol/L） 盐酸（0.1mol/L、1mol/L） 蒸馏水 试管（与比色管口径一致）、 刻度吸管（5ml、1ml、0.5ml、0.25ml）、
玻璃器皿灭菌前的准备
玻璃器皿在清洗、干燥后必须经正确的 包裹和加塞后才能进行灭菌处理。
培养基的成分和作用
培养基：是指人工配制的适合细菌生长繁殖的 综合营养基质。 营养物质：蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇类、 血液、鸡蛋和动物血清、生长因子、无机盐类 水 凝固剂：琼脂、明胶 抑制剂 指示剂
培养基的种类（按用途分类）
培养基液面为黄色： － 应用：用于肠道杆菌的鉴定
靛基质试验原理
色氨酸
色氨酸酶
靛基质 （吲哚）
对二甲基氨基苯甲 醛 玫瑰靛基质 （玫瑰吲哚）
硫化氢试验
原理：细菌分解蛋白质中的含硫氨基酸， 生成硫化氢，硫化氢与培养基中的铁盐 或铅盐结合生成黑色络合物。 培养基：含硫酸亚铁或醋酸铅的培养基 结果：培养基 变黑 为阳性，不变黑为阴 性 应用：常用于肠道杆菌的鉴定
液体培养基接种法 穿刺接种法 :用于观察细菌动力 斜面接种法 倾注培养法:用于细菌计数
分区划线法
第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环
连续划线法
细菌培养法
一般培养（需氧培养）： ★培养温度：35℃（采用恒温培养箱） ★培养时间：18～24h
二氧化碳培养法：烛缸法、二氧化碳培 养箱 厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌 氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等
微生物的纯培养及显微技术
物的生长繁殖而对被消毒的物体基本无害的措施。如低温、缺氧、 干燥、高酸、高渗或防腐剂。细菌一般不死亡。
●无菌(asepsis)：不存在活菌。
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5
（1）常用物理消毒灭菌方法 ● 热力灭菌法； ● 辐射杀菌法； ● 滤过除菌法； ●超声波杀菌法。
A、 热力灭菌法
●干热灭菌法
▲焚烧：废弃物、尸体； ▲灼烧：接种环、试管口；
● 连续加压灭菌：135-140 ℃下处理5-15 s ，主要适用于大
规模的发酵工厂培养基灭菌；
● 常规加压灭菌：121 ℃（压力：1kg/cm2 或15 磅/英寸）
15~20 min，是一种最为广泛的灭菌方法。 ▲ 注意灭菌物体含菌量的影响，含菌量越高灭菌时间越长。
天然原料＞化学试剂
▲ 空气的排除程度，必须尽量驱尽锅内空气。是依靠温度而
▲ 加热与散热的速度。
B、 辐射杀菌法；
● 紫外线：波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用。其主要作
用于DNA，使一条DNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合形成二 聚体，导致细菌变异和死亡。
●电离辐射： 高速电子、X射线、γ射线
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10
洁净工作台
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11
● 微波：波长1mm~1m
C、过滤除菌法
● 赛氏滤器； ● 玻璃滤器； ● 薄膜滤器
D、超声波杀菌法
● 是一种机械的作用因素，每秒超过2万次振动的声波即为超声 波。常用的超声波发生器能产生20-100千赫的声波。可使细菌细胞 壁裂解而死亡。
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12
超声仪
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（2）化学消毒剂：
● 消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、氧化
★ 最后一个稀释度 95%表现为不生长。
●无菌(asepsis)：不存在活菌。
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（1）常用物理消毒灭菌方法 ● 热力灭菌法； ● 辐射杀菌法； ● 滤过除菌法； ●超声波杀菌法。
A、 热力灭菌法
●干热灭菌法
▲焚烧：废弃物、尸体； ▲灼烧：接种环、试管口；
● 连续加压灭菌：135-140 ℃下处理5-15 s ，主要适用于大
规模的发酵工厂培养基灭菌；
● 常规加压灭菌：121 ℃（压力：1kg/cm2 或15 磅/英寸）
15~20 min，是一种最为广泛的灭菌方法。 ▲ 注意灭菌物体含菌量的影响，含菌量越高灭菌时间越长。
天然原料＞化学试剂
▲ 空气的排除程度，必须尽量驱尽锅内空气。是依靠温度而
▲ 加热与散热的速度。
B、 辐射杀菌法；
● 紫外线：波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用。其主要作
用于DNA，使一条DNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合形成二 聚体，导致细菌变异和死亡。
●电离辐射： 高速电子、X射线、γ射线
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洁净工作台
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● 微波：波长1mm~1m
C、过滤除菌法
● 赛氏滤器； ● 玻璃滤器； ● 薄膜滤器
D、超声波杀菌法
● 是一种机械的作用因素，每秒超过2万次振动的声波即为超声 波。常用的超声波发生器能产生20-100千赫的声波。可使细菌细胞 壁裂解而死亡。
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超声仪
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（2）化学消毒剂：
● 消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、氧化
★ 最后一个稀释度 95%表现为不生长。