肠球菌、溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基
肠球菌、溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基
葡萄糖肉浸液肉汤Dextrose Meat Infusion Broth 用途：用于溶血性链球菌的增菌培养配方：（g/L）牛肉粉氯化钠蛋白胨磷酸氢二钾葡萄糖pH值7.5 ± 0.1 3.0 5.0 10.0 2.0 10.0 25℃原理：蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钾为缓冲剂；葡萄糖提供碳源。
用法：称取本品 30.0g,煮沸溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
质量控制：在36±1℃培养24小时。
质控菌株ATCC生长情况溶血性链球菌（10-8）+++单增李斯特氏菌27853 （10-8）+++大肠杆菌25922 +/-沙门氏菌14028 +/-匹克氏肉汤基础APick’s Broth BaseA用途：用于溶血性链球菌的增菌培养配方：（g/L）胰蛋白胨牛心浸粉叠氮钠结晶紫pH值7.3-7.5 10.0 20.0 0.065 0.002 25℃原理：胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；脱纤维兔血（或羊血）为溶血性链球菌提供大量生长因子；结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。
用法：称取本品 30.0g,加热溶于1000ml 蒸馏水中,分装, 121℃高压灭菌 15 分钟, 冷至 50℃左右时,加入脱纤维羊血,混匀。
质量控制：在36±1℃培养18-24小时。
质控菌株ATCC生长情况溶血现象溶血性链球菌+++ +（大）单增李斯特氏菌27853 ++ +（小）大肠杆菌25922 - -沙门氏菌14028 - -肉浸液肉汤培养基Meat Infusion Broth用途：用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB标准）配方：（g/L）牛肉粉氯化钠蛋白胨磷酸氢二钾pH值7.5 ± 0.1 3.0 5.0 12.0 2.0 25℃原理：蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；磷酸氢二钾为缓冲剂；氯化钠可维持均衡的渗透压。
肠球菌属标准操作规程
肠球菌属标准操作规程1.概述肠球菌属于1984年从链球菌属划出，单独成为一个菌属，包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、坚韧肠球菌、铅黄肠球菌、蒙氏肠球菌、海氏肠球菌、鹑鸡肠球菌和病臭肠球菌等18个种和1个变异株。
临床上常见的菌株为粪肠球菌。
2.标本类型血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。
3.鉴定3.1 形态与染色革兰阳性球菌，单个、成双或短链状排列。
3.2 培养特性在血琼脂平板上形成较小、灰白色，有a 溶血或β溶血环的菌落。
在麦康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。
3.3 生化反应触酶试验阴性，分解甘露醇、山梨醇、胆汁七叶苷试验阳性、在含6.5%氯化钠的肉汤中生长，多数菌株PYR试验阳性，对杆菌肽耐药。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌特征革兰阳性球菌，触酶试验阴性，在65g/L 氯化钠中生长，胆汁、七叶苷试验阳性，45℃中生长。
3.4.2与屎肠球菌的鉴别：粪肠球菌不分解阿拉伯糖，而屎肠球菌能分解阿拉伯糖3.4.3 与链球菌属和乳球菌属的鉴别：见表5-353.4.4 粪肠球菌与其他各主要菌种间的鉴别：见表5-36操作步骤3.5.1 触酶试验阳性参见触酶试验标准操作规程3.5.2 鉴定从血平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。
4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件.5.质量控制参见《质量控制程序》6.检验结果解释与分析在β-内酰胺酶阴性球菌肠球菌中，氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等敏感性。
青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。
粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。
对于血培养和脑脊液中分离到的肠球菌，需做β-内酰胺酶检测，β-内酰胺酶阳性，则对青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素均耐药。
肠球菌、溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基
葡萄糖肉浸液肉汤Dextrose Meat Infusion Broth 用途：用于溶血性链球菌的增菌培养匹克氏肉汤基础APick’s Broth BaseA用途：用于溶血性链球菌的增菌培养肉浸液肉汤培养基Meat Infusion Broth用途：用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB标准）叠氮钠葡萄糖肉汤Azide Dextrose Broth 用途：用于链球菌的增菌培养乙基紫叠氮钠肉汤用途：用于链球菌的增菌培养KF链球菌琼脂KF Streptococcus Agar 用途：用于链球菌的选择性分离及计数（GB、SN标准）肠球菌琼脂(胆盐－七叶苷－叠氮钠琼脂)Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 用途：用于食品和水中肠球菌的计数CATC琼脂CATC Agar 用途：用于食品和饮料肠球菌的分离培养胆盐七叶苷琼脂Bile Esculin Agar用途：用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养哥伦比亚血琼脂基础Columbia Blood Agar Base 用途：营养非常丰富，用于各种细菌的基础培养基LIM培养基LIM Medium 用途：用于链球菌的分离培养（Japan方法）BETA-SSA琼脂BETA-SSA Agar用途：用于链球菌的选择性分离培养粪肠球菌琼脂Enterococcus faecalis Agar 用途：用于粪肠球菌的选择性分离缓冲蛋白胨水Buffered Peptone Water 用途：用于阪崎杆菌前增菌培养（GB2008标准）胆汁液态培养基Bile broth用途：用于粪链球菌的胆汁耐受试验。
M-肠道菌琼脂M-Enterococcus Agar用途：用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数（滤膜法或划线法）THB培养基THB Medium 用途：用于链球菌增菌培养PS琼脂PS Agar 用途：用于消化球菌的培养肠球菌肉汤Enterococcus Broth 用途：用于肠球菌增菌培养脑心浸液肉汤（BHI）Brain Heart Infusion Broth 用途：用于细菌的增菌培养脑心浸萃液肉汤Brain Heart Infusion Broth 用途：用于营养苛求细菌的增菌培养脑心浸液琼脂（BHIA）Brain Heart infusion Agar 用途：用于营养苛求细菌的增菌培养Pfizer肠球菌选择性琼脂（PSE琼脂）Pfizer Enterococcus Selective Agar 用途：用于粪链球菌的选择性分离和计数（SN标准）MEI培养基MEI Medium 用途：用于一步滤膜法显色检测或计数水中的肠球菌。
肠球菌属标准操作规程
肠球菌属标准操作规程1.概述肠球菌属于1984年从链球菌属划出，单独成为一个菌属，包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、坚韧肠球菌、铅黄肠球菌、蒙氏肠球菌、海氏肠球菌、鹑鸡肠球菌和病臭肠球菌等18个种和1个变异株。
临床上常见的菌株为粪肠球菌。
2.标本类型血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。
3.鉴定3.1形态与染色革兰阳性球菌，单个、成双或短链状排列。
3.2培养特性在血琼脂平板上形成较小、灰白色，有a 溶血或0溶血环的菌落。
在麦康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。
3.3生化反应触酶试验阴性，分解甘露醇、山梨醇、胆汁七叶苷试验阳性、在含 6.5%氯化钠的肉汤中生长，多数菌株PYR试验阳性，对杆菌肽耐药。
3.4鉴别要点3.4.1本菌特征革兰阳性球菌，触酶试验阴性，在65g/L氯化钠中生长，胆汁、七叶苷试验阳性，45℃中生长。
3.4.2与屎肠球菌的鉴别：粪肠球菌不分解阿拉伯糖，而屎肠球菌能分解阿拉伯糖3.4.3与链球菌属和乳球菌属的鉴别：见表5-353.4.4粪肠球菌与其他各主要菌种间的鉴别：见表5-36操作步骤3.5.1触酶试验阳性参见触酶试验标准操作规程3.5.2鉴定从血平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。
4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20 最新版本文件.5.质量控制参见《质量控制程序》6.检验结果解释与分析在台内酰胺酶阴性球菌肠球菌中，氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等敏感性。
青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。
粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。
对于血培养和脑脊液中分离到的肠球菌，需做B-内酰胺酶检测，B-内酰胺酶阳性，则对青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素均耐药。
为耐万古霉素肠球菌做氯霉素、红霉素、四环素和利福平药敏试验，根据结果进行治疗。
中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验.
中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验1 主题内容与适用范围本标准规定了食品中溶血性链球菌的检验方法。
本标准适用于食品和食物中毒样品中溶血性链球的检验。
2 引用标准GB 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3 设备和材料3．1 温箱：36±1℃。
3．2 水浴：36±1℃。
3．3 显微镜。
3．4 离心机。
3．5 试管架。
3．6 灭菌平皿。
3．7 灭菌小试管。
3．8 载玻片。
3．9 灭菌吸管：1 mL、10 mL。
3．10 灭菌镊子。
3．11 均质器。
3．12 酒精灯。
3．13 接种环。
4 培养基和试剂4．1 葡萄糖肉浸液肉汤：按GB 4789.28 中4.1 规定，在肉浸液肉汤内加入1%葡萄糖。
4．2 肉浸液肉汤：按GB 4789.28 中4.1 规定。
4．3 匹克氏肉汤：按GB 4789.28 中4.62 规定。
4．4 血琼脂平板：按GB 4789.28 中4.6 规定。
4．5 人血浆。
4．6 0.25%氯化钙。
4．7 灭菌生理盐水。
4．8 杆菌肽药敏纸片（含 0.04 单位）。
5 检验程序6 操作步骤6．1 样品处理称取 25 g 固体检样；称取25 mL 液体检样，加入 225 mL 灭菌生理盐水，研成匀浆制成混悬液。
6．2 一般培养将上述混悬液吸取 5 mL，接种于 50 mL 葡萄糖肉浸液肉汤；或直接划线接种于血平板，如检样污染严重，可同时按上述量接种匹克氏肉汤，经 36±1℃培养 24 h，挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落，在血平板上分纯，然后观察溶血情况及革兰氏染色，并进行链激酶试验及杆菌肽敏感试验。
6．3 形态与染色本菌呈球形或卵圆形，直径 0.5～1 μm，链状排列，链长短不一，短者4～8个细胞组成，长者 20～30 个，链的长短常与细菌的种类及生长环境有关；液体培养中易呈长链；在固体培养基中常呈短链，不形成芽孢，无鞭毛，不能运动。
中文名称肠球菌显色培养基
中文名称: 肠球菌显色培养基英文名称：Enterococcus faecium chromogenic medium产品规格：1000ml用途：用于肠球菌的显色培养，肠球菌显红色至紫红色作用:肠球菌显色培养基是公司改良的培养基，用于快速检测食品、水质和环境中的肠球菌。
菌落显红色至紫色，其它菌显无色、黄色或被抑制。
肠球菌显色培养基是用于快速检测食品、水质和环境中的肠球菌。
菌落显红色至紫色，其它菌显无色、黄色或被抑制。
成份(g/L)此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
用法称取本品56.4g，水浴加热溶解于1000ml 蒸馏水中，冷却至45-50℃时，倾入无菌平皿，备用。
无需高压灭菌;操作步骤使用前，把制备好的培养基放置室温10-20 分钟。
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液；2、取样品液1ml加入冷却至45-50℃肠球菌显色培养基中混匀或涂布于平板上；或取样品液划线接种于肠球菌显色培养基上；3、36℃培养24～48h，选用有30～200 个菌落的平板，计数平板上出现的红色至紫色菌落。
质量控制1、外观此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈淡黄色至乳白色。
制备好的平板呈透明淡黄色培养基。
2、微生物试验在36℃培养24-48h：典型特征典型菌落为红色至紫色。
贮存制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。
干燥培养基应放置于阴暗干燥处，保存温度2-8℃，注意避光保存。
失效干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意此培养基仅供实验室使用。
肠球菌显色培养基的微生物灵敏度试验:按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24-48小时。
注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。
肠球菌、溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基
葡萄糖肉浸液肉汤Dextrose Meat Infusion Broth 用途：用于溶血性链球菌的增菌培养Pick ' s Broth BaseA用途：用于溶血性链球菌的增菌培养pH 值7.3-7.5 25 C原理：胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；脱纤维兔血〔或羊血〕为溶血性链球菌提供大量生长因子；结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。
用法：称取本品，加热溶于1000ml蒸馏水中，分装,121 C高压灭菌15分钟，冷至50C左右时，参加脱纤维羊血，混匀。
质量控制：在36 ±1 C培养18-24小时。
Meat Infusion Broth用途：用于溶血性链球菌、蜡样芽抱杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养〔GB标准〕配方：〔g/L〕原理: 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；磷酸氢二钾为缓冲剂；氯化钠可维持均衡的渗透压。
用法：称取本品，溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟，备用质量控制：在36 ±1 C培养18-24小时。
Azide Dextrose Broth 用途：用于链球菌的增菌培养用途：用于链球菌的增菌培养KF Streptococcus Agar 用途：用于链球菌的选择性别离及计数〔GB、SN标准〕肠球菌琼脂胆盐-七叶苷-叠氮钠琼脂Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 用途：用于食品和水中肠球菌的计数CATC Agar用途：用于食品和饮料肠球菌的别离培养Bile Esculin Agar 用途：用于肠球菌和肠道致病菌的别离培养配方：〔g/L〕Columbia Blood Agar Base 用途：营养非常丰富，用于各种细菌的根底培养基用法：称取本品39克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121 C高压灭菌15分钟，冷至45-50'C左右时, 参加相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素，混匀，倾入无菌平皿。
粪肠球菌粪链球菌使用说明
放置会导致菌种衰退；
2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；
3、一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才
能正常生长；
4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时 来电询问； 5、某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌 氧状态；培养过程中亦要保持厌氧状态； 6、某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要 5-‐10%CO2 促 进生长； 7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。 8、部分菌种有致病性、扩散性，请专业人员在专业环境下有保护性操作。 保 藏 条 件 ： -‐20℃保存（复溶液于 2-‐8℃保存） 保 藏 时 间 ： 2-‐10 年，应根据菌种状况及时转接
保存方式： 30%甘油，-‐80℃
操作说明：
1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面
蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次
数的增加，细菌的活力会逐渐下降。
粪肠球菌粪链球菌
编号
名称
北京华越洋生物 NRR00300
粪肠球菌粪链球菌
基 本 信 息 ：
名称：粪肠球菌粪链球菌
规格：300ul 甘油菌
中。轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌 株 复 壮 ：
用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培
养。细菌在 30-‐35℃培养箱中培养 24-‐48h，真菌在 23-‐28℃培养箱中培养
24-‐72h（必要时，可适当延长培养时间）。
储存温度：-‐80℃
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葡萄糖肉浸液肉汤
Dextrose Meat Infusion Broth 用途：用于溶血性链球菌的增菌培养
匹克氏肉汤基础A
Pick’s Broth BaseA
用途：用于溶血性链球菌的增菌培养
肉浸液肉汤培养基
Meat Infusion Broth
用途：用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB标准）
叠氮钠葡萄糖肉汤
Azide Dextrose Broth 用途：用于链球菌的增菌培养
乙基紫叠氮钠肉汤用途：用于链球菌的增菌培养
KF链球菌琼脂
KF Streptococcus Agar 用途：用于链球菌的选择性分离及计数（GB、SN标准）
肠球菌琼脂(胆盐－七叶苷－叠氮钠琼脂)
Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 用途：用于食品和水中肠球菌的计数
CATC琼脂
CATC Agar
用途：用于食品和饮料肠球菌的分离培养
胆盐七叶苷琼脂
Bile Esculin Agar 用途：用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养
哥伦比亚血琼脂基础
Columbia Blood Agar Base 用途：营养非常丰富，用于各种细菌的基础培养基
LIM培养基
LIM Medium 用途：用于链球菌的分离培养（Japan方法）
BETA-SSA琼脂
BETA-SSA Agar
用途：用于链球菌的选择性分离培养
粪肠球菌琼脂
Enterococcus faecalis Agar 用途：用于粪肠球菌的选择性分离
配方：（g/L）
月示胨
麦芽糖
酵母浸粉
甘油磷酸钠
氯化钠
乳糖
溴甲酚紫
叠氮钠
TTC
琼脂
pH值7.2 ± 0.2 10.0 20.0 10.0 10.0 5.0 1.0 0.015 0.4 0.1 13.0
缓冲蛋白胨水
Buffered Peptone Water 用途：用于阪崎杆菌前增菌培养（GB2008标准）
胆汁液态培养基
Bile broth
用途：用于粪链球菌的胆汁耐受试验。
M-肠道菌琼脂
M-Enterococcus Agar
用途：用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数（滤膜法或划线法）
THB培养基
THB Medium
用途：用于链球菌增菌培养
PS琼脂
PS Agar 用途：用于消化球菌的培养
配方：（g/L）
蛋白胨
牛肉浸粉
酵母浸粉
葡萄糖
半胱氨酸盐酸盐氯化钙
硫酸镁
磷酸氢二钾
磷酸二氢钾
碳酸氢钠
氯化钠
吐温80
琼脂10.0 3.0 3.0 2.0 0.5 0.008 0.008 0.04 0.04 0.4
0.08
1.0 13.0
原理：
肠球菌肉汤
Enterococcus Broth 用途：用于肠球菌增菌培养
脑心浸液肉汤（BHI）
Brain Heart Infusion Broth 用途：用于细菌的增菌培养
脑心浸萃液肉汤
Brain Heart Infusion Broth 用途：用于营养苛求细菌的增菌培养
脑心浸液琼脂（BHIA）
Brain Heart infusion Agar 用途：用于营养苛求细菌的增菌培养
Pfizer肠球菌选择性琼脂（PSE琼脂）
Pfizer Enterococcus Selective Agar 用途：用于粪链球菌的选择性分离和计数（SN标准）
MEI培养基
MEI Medium 用途：用于一步滤膜法显色检测或计数水中的肠球菌。