生物选修一生物技术实践知识点总结
高中生物选修知识点全总结

高中生物选修知识点全总结一、生物技术实践1. 微生物的实验室培养与应用- 培养基的配制与灭菌- 微生物的分离、纯化与计数- 微生物在食品制作、医药等领域的应用2. 植物的组织培养- 组织培养的原理与操作步骤- 植物快速繁殖技术- 转基因植物的培育3. 基因工程基础- 基因的克隆与表达- 基因编辑技术(如CRISPR-Cas9)- 基因治疗与伦理问题4. 生物分子检测技术- PCR技术的原理与应用- 蛋白质的检测与分析- DNA测序与基因组学二、生态环境与生物多样性1. 生态系统的结构与功能- 生态系统的组成与能量流动- 生物多样性的意义与保护- 人类活动对生态系统的影响2. 环境保护与可持续发展- 污染物的生物降解与生物修复- 可持续发展的概念与实践- 生态农业与绿色能源3. 物种保护与自然保护区- 物种濒危的原因与保护措施- 自然保护区的建立与管理- 生态旅游与环境教育三、人体健康与营养1. 营养学基础- 营养素的分类与功能- 营养需求与膳食指南- 营养不良与营养过剩的问题2. 消化系统与营养吸收- 消化系统的解剖与功能- 营养物质的消化与吸收过程- 肠道微生物与健康3. 代谢性疾病与防治- 糖尿病、心血管疾病的成因与治疗 - 肥胖症的预防与控制- 遗传与环境因素对代谢性疾病的影响四、现代生物技术与伦理1. 克隆技术与应用- 克隆动物的制备技术- 克隆技术在医学领域的应用- 克隆人的伦理争议2. 胚胎工程与生殖技术- 体外受精与胚胎移植- 胚胎筛查与遗传病防治- 生育权与伦理问题3. 脑科学与认知功能- 脑的结构与功能- 认知障碍的成因与治疗- 人工智能与脑科学的交叉4. 生物技术的伦理、法律与社会影响 - 生物技术的安全性评估- 知识产权与生物资源的保护- 公众参与与科学传播五、生物进化与多样性1. 生物进化理论- 达尔文的自然选择与进化论- 遗传学与进化生物学的结合- 分子进化与基因组学2. 生物多样性的形成与保护- 生物多样性的起源与演化- 生态位与物种共存- 生物多样性的保护策略3. 分子系统发育与分类学- 分子标记与物种鉴定- 系统发育树的构建与解读- 分类学的新发展与争议以上是高中生物选修课程的主要知识点总结,涵盖了生物技术的实践应用、生态环境保护、人体健康营养、现代生物技术伦理问题以及生物进化与多样性等领域。
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选修1《生物技术实践》知识点归纳实验1 大肠杆菌的培养和分离 1.微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物,包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。
细菌是单细胞的原核生物,有细胞壁(肽聚糖)、细胞膜、细胞质,无成型的细胞核,只有一环状DMA分子(拟核)。
以分裂(二分裂)的方式繁殖,分裂速度很快。
用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌(革兰氏染液染色后,再脱色处理,细菌仍保留染色液的颜色)和革兰氏阴性菌两大类,区别在细胞壁的成分不同。
大肠杆菌是革兰氏阴性(细胞壁薄,有荚膜)、兼性厌氧的肠道杆菌。
2.细菌的分离方法有两种:划线分离法和涂布分离法。
是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
划线分离就是用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线的过程中菌液逐渐减少,细菌也逐渐减少,。
划线最后,可使细菌间的距离加大。
将接种后的固体培养基培养10~20小时后,一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞,形成菌落,不会重叠。
在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。
用于基因工程的大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。
由于工程菌的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素,由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。
涂布分离时,需要先将培养的菌液稀释,通常稀释10-5~10-7倍之间,然后取0.1mL不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上,用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落,每个培养基里有20个以内的单菌落为最合适。
优点:划线分离法,方法简单;涂布分离法,单菌落更易分开,但操作复杂。
在培养微生物时,必须进行无菌操作。
其首要条件是各种器皿必须是无菌的,各种培养基也必须是无菌的,转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂布等操作中的每一步都要做到无菌(防止杂菌污染)。
高中生物选修一知识点总结

高中生物选修一知识点总结高中生物选修一知识点辅修总结高中生物选修一课题一果酒和果醋的制作1、发酵:通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的。
2、有氧发酵:醋酸发酵无氧发酵:含酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌:真菌兼性厌氧菌型生殖方式:出芽生殖(主要)分裂生殖细胞核生殖4、有氧:酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖。
C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O(酶)5、无氧:酵母菌进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH+2CO2(酶)6、20℃左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入绿发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中,芽孢可以生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
1、醋酸菌:异养需氧型生殖方式:二分裂2、氧气、糖源充足:醋酸菌将枫糖中的糖分解成醋酸;缺少糖源:醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
2C2H5OH +4O2→CH3COOH+6H2O3、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气迟钝的含量特别敏感,当进行深层发酵时,即使只是短时间中断通入氧气,也会引起吡啶菌死亡。
②醋酸菌最适生长温度为30~35℃,控制好发酵温度,使发酵时间缩短,又减少科散囊污染的机会。
③有两条支付方式生成醋酸:轻易氧化和氧化以酒精为底物的氧化。
4、实验流程:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒(→醋酸发酵→果醋)5、酒精检验:重铬酸钾[酸性]重铬酸钾与酒精反应呈现酒精紫红色。
6、排气口要与一个长而弯曲的胶管相连接目的:防止空气当中微生物的污染。
开口向下目的:利于二氧化碳吸出。
选用该装置制酒时,应关闭充气口;制醋时,充气口应连通气泵,输入氧气。
疑难解答(1)你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?应该先冲洗,再除去枝梗,避免之前除去枝梗时招致葡萄破损,增加被杂菌环境污染的机会。
高中生物选修一生物技术实践知识点总结材料

高中生物选修一生物技术实践知识点总结材料生物技术实践是高中生物选修一课程中的重要内容,其涉及的知识点较多。
下面是关于生物技术实践相关知识点的总结材料。
一、细胞培养技术1.细胞培养基本理论:细胞培养的定义、种类和应用2.细胞培养技术的步骤:细胞的分离、传代、化学培养基的制备等3.细胞培养的影响因素:温度、培养基成分、培养器具等4.细胞培养的应用:生物药物的生产、组织工程、基因工程等二、基因工程技术1.基因工程的基本概念:基因重组、基因表达等2.基因工程中的重要技术:限制性酶切、DNA连接、DNA复制等3.基因工程的应用:转基因技术、蛋白质表达与纯化、分子诊断等4.基因工程的伦理问题:风险评估、生物安全等三、单细胞技术1.单细胞技术的基本原理:单细胞分离、扩增等2.单细胞技术的应用:单细胞测序、单细胞克隆等3.单细胞技术在医学研究中的应用:癌症研究、免疫细胞研究等4.单细胞技术的发展前景:个体化医学、药物开发等四、酶工程技术1.酶工程的基本概念:酶的定义、性质等2.酶工程技术的步骤:酶的筛选、改造、固定化等3.酶工程技术的应用:生化制剂的生产、环境保护等4.酶工程技术的发展趋势:多功能酶的研究、酶催化反应的优化等五、生物传感器技术1.生物传感器的基本原理:生物元件的识别、信号转导等2.生物传感器的种类:酶电极、抗体电极等3.生物传感器的应用:生物分析、临床诊断等4.生物传感器技术的发展:微纳制造技术的应用、多样化生物传感元件的研究等六、生物安全技术1.生物安全的概念:生物实验的风险评估、安全管理等2.生物安全技术的措施:生物实验室建设、生物废弃物处理等3.生物安全的法律法规:《生物安全法》等相关法律法规4.生物安全技术的发展:新兴疾病、转基因生物等生物安全问题的研究与应对以上是高中生物选修一生物技术实践的知识点总结材料。
这些知识点涵盖了细胞培养技术、基因工程技术、单细胞技术、酶工程技术、生物传感器技术和生物安全技术等方面,希望对你的学习有所帮助。
高中生物知识点总结选修1

高中生物知识点总结选修1一、细胞的分子基础1. 细胞的概念与结构- 细胞是生命的基本单位,具有自主代谢和遗传信息传递的能力。
- 细胞的主要结构包括细胞膜、细胞质和细胞核。
2. 生物大分子- 蛋白质:由氨基酸组成,是生命活动的主要承担者。
- 核酸:包括DNA和RNA,是遗传信息的载体。
- 糖类:由单糖组成,主要提供能量。
- 脂类:包括甘油和脂肪酸,构成细胞膜的主要成分。
3. 酶的作用- 酶是生物体内的生物催化剂,能够加速化学反应的速率。
- 酶的特性:高效性、专一性、作用条件温和。
4. 细胞呼吸- 有氧呼吸:在氧气存在的条件下,有机物彻底氧化分解,释放大量能量。
- 无氧呼吸:在缺氧条件下,有机物不完全氧化,释放较少能量。
5. 光合作用- 光依赖反应:在光照下,水分子分解,产生氧气和ATP。
- 光合磷酸化:ATP的生成过程。
- 光合暗反应:固定二氧化碳,合成有机物。
二、遗传与进化1. 遗传的分子基础- DNA的复制:半保留复制原理。
- RNA的转录:DNA信息转录成mRNA。
- 蛋白质的翻译:mRNA指导蛋白质的合成。
2. 基因的结构与功能- 基因是遗传信息的基本单位,控制生物体的性状。
- 基因的结构包括启动子、编码区和终止子。
3. 基因突变- 突变的类型:基因突变、染色体变异。
- 突变的影响:有益、中性、有害。
4. 生物的进化- 进化的证据:化石记录、比较解剖学、分子生物学。
- 进化的机制:自然选择、遗传漂变、基因流、突变。
5. 分子系统发育- 通过比较DNA序列的差异,推断物种间的亲缘关系。
- 分子钟假说:物种分化的时间可以通过DNA序列的变异速率来估计。
三、生态环境与生物多样性1. 生态系统的组成- 生产者:通过光合作用制造有机物的生物。
- 消费者:直接或间接依赖生产者制造的有机物的生物。
- 分解者:分解有机物,释放营养物质的生物。
2. 生态系统的功能- 物质循环:生态系统中物质的循环利用。
- 能量流动:生态系统中能量的传递和转化。
高二生物 选修一生物技术实践 知识点总结

选修一生物技术实践知识点总结专题1 课题3 制作泡菜一、基础知识1、制作泡菜的原理:乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸。
2、测定亚硝酸盐含量的原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
将经过反应显色后的待测样品与标准液比色,大致估算出样品中的亚硝酸盐含量。
3、亚硝酸盐:白色粉末,易溶于水。
特定的条件下会转化成致癌物质亚硝胺。
二、实验设计流程图(1)泡菜盐水按清水和盐为4∶1质量比配制煮沸冷却备用。
煮沸为了杀灭盐水中的杂菌,冷却后使用为了保证乳酸菌的生命活动不受影响。
(2)倒入配制好的盐水,使盐水浸没全部菜料。
(3)盖上泡菜坛盖子,坛子边沿加水,以保证无氧环境(4)发酵时间受到温度影响。
三、操作提示1、泡菜坛的选择:火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好,否则容易引起蔬菜腐烂。
2、腌制的条件:注意腌制的时间、温度和食盐的用量。
温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短易造成细菌增殖,亚硝酸盐含量增加。
3、测定亚硝酸盐含量的操作。
四、教材答案1、含有抗生素的牛奶能不能发酵成酸奶?为什么?不能。
因为酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。
抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。
2、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的?形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。
酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌的繁殖。
3.为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?放置过久时发生变质(发黄、腐烂),蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体4.用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?保证泡菜坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。
如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。
专题2 课题1 微生物的实验室培养一、基础知识1、培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
高中生物选修1--生物技术实践知识点填空

高中生物选修1--生物技术实践知识点填空生物技术是应用生物学的知识和技术手段,以提高农业、医药等领域的产出和效益。
在高中生物选修1中学习生物技术实践的内容,主要包括基因工程、细胞工程和酶工程等方面的知识。
本文将从这几个方面逐一介绍生物技术实践的相关知识点。
一、基因工程基因工程是现代生物技术的核心内容,它通过改变生物体的遗传信息,以实现对生物体的有针对性的改造和利用。
基因工程的关键技术包括重组DNA技术、基因克隆和转基因技术等。
1. 重组DNA技术重组DNA技术是指通过体外的方法,将不同来源的DNA片段重新组合成具有新的功能的DNA分子。
在重组DNA技术中,常用的工具酶包括限制酶、连接酶和DNA聚合酶等。
通过限制酶切割DNA,然后通过连接酶将不同片段连接起来,最后通过DNA聚合酶构建完整的DNA分子。
2. 基因克隆基因克隆是指将目标基因从一个生物体中分离出来,并通过体外的方法进行复制,使其得到大量复制。
常用的基因克隆技术包括PCR扩增、基因文库构建和原核表达系统等。
通过PCR扩增可以快速复制目标基因,基因文库构建可以将目标基因储存起来,原核表达系统可以将目标基因转入细菌中并得到大量表达。
3. 转基因技术转基因技术是指将外源基因导入到目标生物体的染色体中,并使其能够正常表达。
通过转基因技术,可以改变生物体的性状、增加营养价值、提高抗病性等。
常见的转基因作物包括转基因水稻、转基因玉米和转基因大豆等。
二、细胞工程细胞工程是利用细胞和组织的生物学特性进行的工程技术。
它主要包括细胞培养、细胞融合和细胞检测等方面的实践操作。
1. 细胞培养细胞培养是指将细胞单元从生物体中分离出来,经过体外培养,使其能够持续生长和增殖。
细胞培养可以通过组织培养、细胞培养和胚胎培养等方式进行。
细胞培养技术在医药和生物工程领域具有重要应用价值。
2. 细胞融合细胞融合是将两个或多个不同类型的细胞合并成一个细胞,并使其具有双亲细胞的特性。
高中生物选修一第一章知识点

选修一生物技术实践课题1果酒和果醋的制作一.果酒的制作菌种:酵母菌细胞构造:真核细胞代谢种类:异养兼性厌氧型生殖方式:孢子生殖有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大批生殖,适合温度:20℃左右。
反响式: C6H12O6+6O2→ 6CO2+6H 2O.无氧条件下,附在葡萄皮上的酵母菌进行酒精发酵,适合温度:18℃~ 25℃。
反响式: C6H12O6→ 2C2H5OH+2CO 2.二.果醋的制作菌种:醋酸菌细胞构造:原核细胞代谢种类:异养需氧型生殖方式:分裂生殖氧气、糖充分:反响式:C6H12O6+O2→CH3COOH.氧气充分、缺糖:反响式:C2H 5OH +O 2→乙醛→ CH3 COOH +H 2O.适合温度: 30℃~ 35℃。
三.实验流程精选葡萄冲刷榨汁酒精发酵醋酸发酵果酒果醋四.果醋和果酒的发酵装置:充气口:进行果醋发酵时通入空气;排气口:排出发酵过程产生的CO2,免得瓶子胀裂。
连结一个长而曲折的胶管:防止空气中微生物的污染。
出料口:方便实时检测产物的产生状况。
五.详细问题1.酵母菌的根源:附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。
2.葡萄酒体现深红色的原由:跟着酒精度数的提升,红葡萄皮的色素也进入发酵液。
3.发酵液中不滋长其余微生物的原由:在缺氧,呈酸性的发酵液中,酵母菌能够生长生殖,绝大部分微生物都因没法适应这一环境而遇到克制。
4.酒精的查验:( 1)试管中先加入发酵液2ml ,再滴入 3mol/L 硫酸,振荡混匀,最后滴加 3 滴重铬酸钾,重铬酸钾由橙色变灰绿;( 2)酒精比重计;( 3)闻。
5.变酸酒表面菌膜的形成原由:醋酸菌在液面大批生殖而形成的(需氧)。
6.葡萄不要频频冲刷,免得洗掉酵母菌。
7.制酒时要每隔12h 将瓶盖拧松一次,以放出CO2再拧紧;制醋时盖上一层纱布。
8.榨汁前要先冲刷再除掉枝梗:以防止除掉枝梗时惹起葡萄损坏,增添被杂菌污染的时机。
9.发酵瓶要用体积分数为70%的酒精消毒或用洗洁精清洗。
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生物选修一生物技术实践知识点总结专题一传统发酵技术的应用*菌种项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧,后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧最适温度18℃~25℃30℃~35℃15℃~18℃常温时间控制10~12天7~8天腌制8天左右腌制10天左右其他条件封闭充气口适时充气控制盐酒用量控制盐水比例课题一果酒和果醋的制作1、在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖。
C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH+6CO22、在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
3、醋酸菌是单细胞细菌.,当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O4、实验流程:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵果酒果醋7、酒精检验:在酸性条件下,重铬酸钾及酒精反应呈现灰绿色。
8. 实验装置充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的;出料口是用来取样的。
排气口要通过一个长而弯曲的胶管及瓶身相连接,其目的是防止空气中微生物的污染。
开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。
使用该装置制酒时,应该关闭充气口;制醋时,应该充气口连接气泵,输入氧气。
课题二腐乳的制作1、多种微生物参及了发酵,起主要作用的是毛霉。
毛霉是一种丝状真菌。
生殖方式是孢子生殖。
2、原理:毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
3、实验流程:让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制4、所用豆腐的含水量为70%左右,水分过多则腐乳不易成形。
*5.毛霉的生长条件:将豆腐块平放在笼屉内,将笼屉中的控制在15~18℃,并保持一定的温度。
来源:1.来自空气中的毛霉孢子,2. 直接接种优良毛霉菌种. 时间:5天亚硝酸盐含量发酵时间(d)6.加盐腌制:将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中,同时逐层加盐,随着层数的加高而增加盐量,接近瓶口表面的盐要铺厚一些。
加盐腌制的时间约为8天左右。
注意:控制盐的用量,豆腐块及盐的质量分数比为5∶1.盐的浓度过低,不足以抑制微生物的生长,可能导致豆腐腐败变质;盐的浓度过高会影响腐乳的口味7.食盐的作用:抑制微生物的生长,避免腐败变质;析出水分,是豆腐变硬,在后期制作过程中不易酥烂;调味作用,给腐乳以必要的咸味.8.配制卤汤:卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。
卤汤中酒的含量一般控制在12%左右。
·酒的作用:1.防止杂菌污染以防腐2.赋予腐乳以特殊风味3.酒精含量的高低及腐乳后期发酵时间的长短有很大关系,酒精含量越高,使腐乳成熟期延长;酒精含量过低,杂菌繁殖快,豆腐易腐败。
·香辛料的作用:1.调味作用2.杀菌防腐作用3.参及并促进发酵过程10.防止杂菌污染:①用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用沸水消毒。
②装瓶时,操作要迅速小心。
整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后,要用胶条将瓶口密封。
封瓶时,最好将瓶口通过酒精灯的火焰,防止瓶口被污染。
课题三制作泡菜1.制作泡菜所用微生物是乳酸菌,其代谢类型是异养厌氧型。
在无氧条件下,将糖分解为乳酸。
反应式为:C6H12O6−→−酶2C3H6O3+能量2.亚硝酸盐为白色粉末,易溶于水,在食品生产中用作食品添加剂。
①膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康,亚硝酸盐被吸收后随尿液排出体外,但在适宜pH 、温度和一定微生物作用下形成致癌物质亚硝胺。
②一般在腌制10 天后亚硝酸盐含量开始降低,故在10天之后食用最好③测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐及对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,及N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料,及已知浓度的标准显色液目测比较,估算泡菜中酸硝盐含量。
试验流程4.测定亚硝酸盐的一般流程:配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色→计算专题二微生物的培养及应用课题一微生物的实验室培养1.培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
①培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。
②按照成分可分为合成培养基和天然培养基。
合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成,常用于微生物的分离鉴定。
天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成,常用于实际工业生产。
③按照培养基的用途,可将培养基分为基础培养基,选择培养基和鉴别培养基。
④培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源等。
2.无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵.·消毒及灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法,,化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。
灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
*灭菌方法:①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。
3.制作牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)方法步骤:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
(2)倒平板操作的步骤:了解①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。
②右手拿锥形瓶,将瓶口迅速通过火焰。
③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。
④等待平板冷却凝固,大约需5~10min。
然后,将平板倒过来放置。
4.纯化大肠杆菌(1)微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
(2)用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是:使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种。
(3)平板划线法操作步骤:了解①将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红。
②在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞。
③将试管口通过火焰。
④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。
⑤将试管通过火焰,并塞上棉塞。
⑥左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。
注意不要划破培养皿。
⑦灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。
重复以上操作,在三、四、五区域内划线。
注意不要将最后一区的划线及第一区相连。
⑧将平板倒置放入培养箱中培养。
(6)涂布平板操作的步骤:了解①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。
②取少量菌液,滴加到培养基表面。
③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10s。
④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
5.菌种的保存(1)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。
缺点:这种方法保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异。
(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。
6.确定培养基制作是否合格的方法将未接种的培养基在恒温箱中保温1~2天,无菌落生长,说明培养基的制备是成功的课题二土壤中分解尿素的细菌的分离及计数1.尿素:尿素并不能直接被农作物吸收。
只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为他们能合成脲酶2.筛选菌株(1)实验室中微生物的筛选应用的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(2)配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如,培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养能固氮的微生物;加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
3.统计菌落数目(1)测定微生物数量的常用方法有活菌计数法(稀释涂布平板法)和显微镜直接计数。
(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活细菌。
为了保证结果准确,一般设置3~5个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取平均值。
4.实验设计(1)土壤取样:从富含有机物、潮湿、pH≈7的土壤中取样。
铲去表层土,在距地表约3~8cm的土壤层取样。
(2)样品的稀释:(3)微生物的培养及观察观察微生物的菌落特征:形状、大小、隆起程度、颜色5.统计某一稀释度下平板上的菌落数每克样品中的菌落数=(C/V)*M 其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数课题三分解纤维素的微生物的分离1.纤维素及纤维素酶(1)纤维素,一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物(2)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、C X酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
2.纤维素分解菌的筛选(1)筛选方法:刚果红染色法。
(2)刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理刚果红可以及像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。
当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能及培养基中的纤维素形成红色复合物。
当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
这样,我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
3.分离分解纤维素的微生物的实验流程土壤取样→选择培养(此步是否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落(1)土壤采集 选择富含纤维素的环境。
(2)刚果红染色法种类一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红。
4.课题延伸:了解对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选后,只是分离纯化的第一步,为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验,纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。
纤维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。