高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习新人教版选修1
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[随堂巩固]1．分离出分解尿素的细菌的方法是A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．以蛋白胨为唯一氮源的培养基中加入伊红－美蓝试剂C．以牛肉膏为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的PH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素，A项正确，B、C、D三项均错误。
答案 A2．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养细菌后，指示剂的颜色是A．蓝色B．红色C．黑色D．棕色解析分解尿素的细菌能合成脲酶，将尿素分解形成碱性物质氨，在碱性环境下，酚红指示剂变红。
答案 B3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红的目的是A．分离出能分解尿素的细菌B．给分解尿素的细菌提供营养C．对分离的菌种作进一步的鉴定D．维持正常pH抑制杂菌的生长繁殖解析尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解为氨，使pH升高，培养基中进入酚红指示剂后，氨可以使指示剂呈红色，据此可以用酚红指示剂鉴别尿素分解菌，故选C。
答案 C4．在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除含尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于A．空白对照B．自身对照C．相互对照D．条件对照解析本实验甲组为实验组，乙组为对照组，给实验组某种处理，给对照组另一条件的处理，为条件对照。
答案 D5．如表所示为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：请根据以上配方，回答下列问题。
(1)该培养基含有微生物所需要的________类营养物质。
其中最主要的碳源是________，氮源是________。
(2)该培养基按物理性质划分是________培养基；按培养基的作用划分是________培养基。
(3)在该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理________________________________________________________________ ______________________________________________________________。
(4)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可在培养基中加入____________指示剂，尿素被分解后指示剂变________色。
(5)某同学尝试使用罐头瓶在常温下制作果酒，开始时向消过毒的罐头瓶中加入了新鲜的葡萄汁和酵母菌，添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供___________________________________________________________________。
解析(1)该培养基含有微生物所需要的碳源、氮源、水和无机盐4类营养物质。
其中最主要的碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
(2)该培养基中加入了凝固剂——琼脂，所以按物理性质划分是固体培养基。
按培养基的作用——分离分解尿素的细菌所用，属于选择培养基。
(3)在该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理是在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高。
(4)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后指示剂变红色。
(5)添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供所需的各种营养物质。
答案(1)4 葡萄糖尿素(2)固体选择(3)在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高(4)酚红红(5)所需的各种营养物质(或碳源、氮源、水、无机盐和生长因子)[限时检测][时间45分钟，满分80分]一、选择题(每小题5分，共50分)1．在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是A．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基B．加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基C．加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基D．加入唯一碳源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基解析在分解尿素菌的分离和鉴定中，应该先加入尿素作为分解尿素菌的唯一氮源，分解尿素菌合成的脲酶，能分解尿素，产生氨，氨呈碱性；然后加入酚红指示剂培养细菌，指示剂将变为红色。
答案 B2．关于从土壤中分离出分解尿素的细菌，相关描述正确的是A．细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，取样时要在酒精灯火焰旁铲去3－8 cm表层土B．取土样的小铁铲、盛土样的信封在使用前都要采取干热灭菌措施C．称取土样时不能在酒精灯火焰旁，因为会使分解尿素的细菌死亡D．某些细菌将尿素分解后产生氮气和二氧化碳解析细菌分布在距地表约3～8 cm的土壤层，故要铲去表层土，大约3 cm，A错误；取样用的小铁铲和信封在使用前需要进行灭菌处理，采取干热灭菌，B正确；称取土壤时，为避免杂菌污染，需要在酒精灯火焰旁进行操作，C错误；细菌将尿素分解后产生氨气和二氧化碳，D错误。
答案 B3．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素。
综上所述，A项正确，B、C、D三项均错误。
答案 A4．在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应106培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。
下列有关叙述不正确的是A．A同学出现这种结果的原因可能是土样不同B．可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C．让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A 同学无误D．B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，而C选项的没有解析甲同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染，A正确；A同学的实验结果可能是培养基污染造成的，可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染，B正确；如果是A同学实验操作过程中污染造成的，让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误，C正确；B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，而C选项的也为对照实验，D错误。
答案 D5．从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的是A．将土壤用无菌水稀释，制备103～105稀释倍数的土壤稀释液B．将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C．用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D．从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株解析从土壤中分离以尿素为氮源的细菌时，将土壤用无菌水稀释，制备土壤稀释液，将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上，用加入酚红指示剂的鉴别培养基可以鉴别分解尿素的细菌。
从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株。
答案 C6．下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是A．分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氮气B．将实验组和对照组平板倒置，25 ℃恒温培养24～48小时C．统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在300以上的平板进行计数D．用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红解析分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳，A错误；将实验组和对照组平板倒置，30～37 ℃恒温培养24～48小时，B错误；统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30～300间的平板进行计数，求其平均值，C错误；用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红，D正确。
答案 D7．下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，不正确的是A．经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置B．同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数C．在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同D．在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染解析经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A项正确；同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，并求其平均数，B项正确；细菌以二分裂的方式进行增殖，不能确保遗传物质平均分配，所以在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C项错误；在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染，D项正确。
答案 C8．分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，下列有关操作错误的是A．取表层土样制备土壤浸出液B．取土样的铁铲和装土样的信封在使用前均需灭菌C．用添加了尿素作为氮源的肉汤培养基分离细菌D．选取菌落数在30－300之间的平板用于计数解析制备浸出液的土壤取自土壤的表层，A正确；取土样的铁铲和装土样的信封在使用前均需灭菌，B正确；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，C错误；选取菌落数在30－300之间的平板用于计数，D正确。
答案 C9．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析在A中既有尿素作为唯一氮源，又有其他各种成分，可以选择出分解尿素的细菌，而C中缺少碳源，B中无尿素作氮源，D中无尿素且有牛肉膏、蛋白胨可提供氮源的成分。
答案 A10．牛或山羊的瘤胃中生活着多种微生物，若想从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物，下列哪一项操作会导致达不到实验目的A．以尿素为唯一氮源B．以葡萄糖作为碳源C．将培养基调至酸性D．培养环境有充足O2解析分离出能够分解尿素的微生物，必须制备以尿素为唯一氮源的选择培养基，A正确；培养基中可以以葡萄糖作为碳源，B正确；牛或山羊的瘤胃内为酸性环境，所以需要将培养基调至酸性，C正确；牛或山羊的瘤胃中是一个相对缺氧的环境，所以筛选分离牛或山羊的瘤胃能够分解尿素的微生物需要保证在缺氧条件下培养，D错误。
高中生物 专题二 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课堂达标(含解析)新人
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、选择题1．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( A )A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H4O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水[解析]根据题意可知，该培养基中必须要有尿素，故可排除B、D；而培养基中必须含有有机物作为碳源，又可排除C，故只有A符合题意。
2．从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的( C )A．将土壤用无菌水稀释，制备10－3～10－5土壤稀释液B．将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C．用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D．从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株[解析]将土壤用无菌水稀释，然后经过系列稀释，制备10－3～10－5土壤稀释液；A正确；将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上；B正确；用加入酚红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌，刚果红指示剂是用于分离分解纤维素的菌；C错误；分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气，氨气能使酚红指示剂显红色，从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株；D正确。
3．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。
A同学的结果产生原因可能有( A )①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②③④[解析]A同学比其他同学的实验结果数据大许多，可能是由于选取的土样不同、培养基灭菌不彻底或操作过程中被杂菌污染，也可能操作失误，如配制培养基时混入其他含氮物质、稀释度不够准确等。
4．请选出下列正确的步骤( D )①土壤取样②称取10 g土壤放入盛有90 g无菌水的锥形瓶中③吸取0.1 mL进行平板涂布④依次稀释101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①→②→③→④B．①→③→②→④C．①→④→②→③D．①→②→④→③[解析]分离分解尿素的细菌的过程是：①土壤取样→②称取10 g土样加入盛有90 mL 无菌水的锥形瓶中→④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度→③吸取0.1 mL 进行平板涂布，C正确。
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课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1。
测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。
2．稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目,但统计结果往往比活菌数目低。
3．为确保结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板上进行计数。
4．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作唯一氮源的选择培养基分离该细筛选菌株的思路及计数1．筛选菌株的思路（1)自然界中目的菌株的筛选：①依据：根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq 细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选：①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等）,同时抑制或阻止其他微生物的生长.②方法：利用选择培养基分离。
a．选择培养基：允许特定微生物生长，同时阻止或抑制其他种类微生物生长的培养基.b．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以尿素作为唯一氮源,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
2．统计菌落数目(1)常用方法:稀释涂布平板法.①原理错误!②计数原则：一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
③结果分析：统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
(2）其他方法：利用显微镜直接计数.1．阅读教材P22第一段旁栏中的相关内容，并思考回答下列问题。
(1）从物理性质上划分，此培养基属于哪类培养基？从功能上划分呢？提示：固体培养基，因为加入了凝固剂琼脂.从功能上看属于选择培养基。
（2）在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质?提示:碳源主要是葡萄糖，氮源是尿素。
（3）该培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有，是如何进行选择的?提示：该培养基对微生物有选择作用。
该培养基以尿素为唯一氮源，只允许能以尿素作为氮源的微生物生长。
2．阅读教材P22中部楷体字部分，思考：哪位同学的结果更接近真实值？他们的实验需要改进吗?如果需要，如何改进？提示:第一位同学只涂布了1个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数素材1新人教版选修1(new)
专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
教材习题点拨
(一）旁栏思考题
1．想一想,如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？
答：统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算.
2．为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗？
答：这是因为土壤中各类微生物的数量（单位:株/kg)是不同的，例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23。1万。因此，为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。
(二)练习
2．提示：反刍动物的瘤胃中含有大量的微生物，其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备选择培养基外,还应参照厌氧菌的培养方法进行实验设计。
尊敬的读者：
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高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习(含解析)新人教版选修1
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习（含解析）新人教版选修1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[基础全练]1．土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成( )A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶解析：土壤中的尿素分解菌体内能够产生脲酶，脲酶能够使土壤中的尿素分解为氨。
答案：B2．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养细菌后，指示剂将( )A．变蓝色B．变红色C．变黑色D．变棕色解析：细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。
答案：B3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是( )A．筛选出能分解尿素的细菌B．对分离的菌种做进一步鉴定C．作细菌的营养成分D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素解析：筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。
加入指示剂的培养基，目的是对分离的菌种做进一步的鉴定。
答案：B4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基D．接种了的选择培养基解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此可用接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。
本实验的变量是培养基种类，其他方面如接种、培养条件等应相同。
答案：C5．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )A．采用稀释涂布平板法统计的菌落数目往往少于实际的活菌数B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D．显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法解析：采用稀释涂布平板法获得的菌落有些可能是由两个或多个细菌形成的，所以统计的菌落数目往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；除平板计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，D正确。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优化练习新人教版选修1
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、选择题1．下列关于土壤取样的叙述，错误的是( )A．土壤取样时，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3 cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在酒精灯火焰旁称取土壤解析：在“分解尿素的细菌的分离与计数”实验中，必须在含微生物丰富的湿润、肥沃土壤中取样，所用小铁铲和信封必须灭菌。
答案：C2．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养尿素分解菌后，指示剂将( ) A．变蓝色B．变红色C．变黑色D．变棕色解析：尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。
答案：B3．测定土壤中细菌的数量一般选104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释液，其原因是( )A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释，真菌不易稀释C．细菌在土壤中的含量比真菌高D．随机的，没有原因解析：细菌在土壤中的含量多于真菌，因此稀释涂布时，细菌的稀释倍数要大于真菌的稀释倍数，这样才能使平板上培养出的菌落清晰易辨。
答案：C4．下列能分离出分解尿素的细菌的培养基是( )A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析：要想分离尿素分解菌，应把尿素作为培养基中的唯一氮源，而B项中无氮源，C项中无碳源，D项中牛肉膏、蛋白胨都可作为氮源。
答案：A5．用来判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是( )A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的选择培养基解析：将菌液稀释相同的倍数并接种，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，因此，应选择接种菌种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学业分层测评新人教版
专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学业分层测评(建议用时：45分钟)[学业达标]1．下列关于土壤取样的叙述错误的是( )A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3 cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤【解析】微生物的培养要注意无菌操作，土壤取样用的小铁铲和信封在使用前需灭菌，后续稀释等操作均需在火焰旁进行。
【答案】 C2．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养细菌后，指示剂将( ) A．变蓝色B．变红色C．变黑色D．变棕色【解析】细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。
【答案】 B3．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( ) 【导学号：05520015】A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基D．接种了的选择培养基【解析】将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此可用接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。
本实验的变量是培养基种类，其他方面如接种、培养条件等应相同。
【答案】 C4．下列属于菌落特征的是( )①菌落的形状②菌落的大小③菌落的多少④隆起程度⑤颜色⑥有无荚膜A．①②③④ B．①②④⑤C．②③④⑥ D．①②③④⑤⑥【解析】不同种类的细菌所形成的菌落大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征，所以，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为鉴定的重要依据。
单个细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征不能作为菌种鉴定的依据。
【答案】 B5．某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别是2 760、295和16，则菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 mL)( )A．2.76×104个/mLB．2.95×105个/mLC．4.6×104个/mLD．3.775×104个/mL【解析】为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此只有295符合要求。
高中生物 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．筛选菌株的思路(1)自然界中目的菌株的筛选：的要求，到相应的环境中去寻找。
生存环境据它对依据：根① ②实例：PCR 技术过程中用到的耐高温的Taq DNA 聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq1.测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。
2．稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比活菌数目低。
3．为确保结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板上进行计数。
4．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作唯一氮源的选择培养基分离该细菌。
5．鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选：抑制或阻止，同时)等pH 包括营养、温度、(生长的条件目的菌株原理：人为提供有利于①其他微生物的生长。
②方法：利用选择培养基分离。
其他种类微生物生长的培养基。
阻止或抑制微生物生长，同时特定．选择培养基：允许a 的微生脲酶作为唯一氮源，只有能合成尿素．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以b 物才能分解尿素。
2．统计菌落数目法。
稀释涂布平板常用方法：(1) ⎩⎪⎨⎪⎧a.当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌b.通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数原理① 的平板进行计数。
300～30计数原则：一般选择菌落数在② 。
原因是当两个或多个细胞连在一起低结果分析：统计的菌落数往往比活菌的实际数目③。
一个菌落时，平板上观察到的只是 直接计数。
显微镜其他方法：利用(2)1．阅读教材P22第一段旁栏中的相关内容，并思考回答下列问题。
(1)从物理性质上划分，此培养基属于哪类培养基？从功能上划分呢？提示：固体培养基，因为加入了凝固剂琼脂。
从功能上看属于选择培养基。
(2)在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？提示：碳源主要是葡萄糖，氮源是尿素。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习(含解析)人教版选修1
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、选择题1．发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种，消灭杂菌、获得纯种的方法不包括( )A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基B．根据微生物需要的生长因子的种类，在培养基中增减不同种类的生长因子C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸D．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同种类的抗生素解析：选C 由于不同的微生物对碳源、氮源、无机盐、生长因子的需求不同，可以根据微生物的生长需求来配制特殊的培养基，以获得单一的纯种；也可以根据其对抗生素的敏感性不同，加入不同的抗生素来获得单一的纯种。
2．分离土壤中分解尿素的细菌时，对培养基的要求是( )①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦解析：选C 土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自身有机物。
培养基中尿素作为唯一氮源，分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长；分离微生物要用固体培养基，需要加琼脂；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源。
3．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48 hD．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析：选D 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，一般选择菌落数在30～300的实验组平板进行计数。
4．下列操作需要在火焰旁进行的是( )①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养A．①②③④⑤ B．②③④⑤C．③④⑤ D．②③④解析：选D 实验操作过程要进行严格的无菌操作，除实验空间必须消毒外，每个操作步骤都必须在无菌区进行。
2019_2020学年高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习新人教版选修1
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[随堂巩固]1．分离出分解尿素的细菌的方法是A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．以蛋白胨为唯一氮源的培养基中加入伊红－美蓝试剂C．以牛肉膏为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的PH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素，A项正确，B、C、D三项均错误。
答案 A2．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养细菌后，指示剂的颜色是A．蓝色B．红色C．黑色D．棕色解析分解尿素的细菌能合成脲酶，将尿素分解形成碱性物质氨，在碱性环境下，酚红指示剂变红。
答案 B3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红的目的是A．分离出能分解尿素的细菌B．给分解尿素的细菌提供营养C．对分离的菌种作进一步的鉴定D．维持正常pH抑制杂菌的生长繁殖解析尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解为氨，使pH升高，培养基中进入酚红指示剂后，氨可以使指示剂呈红色，据此可以用酚红指示剂鉴别尿素分解菌，故选C。
答案 C4．在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除含尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于A．空白对照B．自身对照C．相互对照D．条件对照解析本实验甲组为实验组，乙组为对照组，给实验组某种处理，给对照组另一条件的处理，为条件对照。
答案 D5．如表所示为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：请根据以上配方，回答下列问题。
(1)该培养基含有微生物所需要的________类营养物质。
其中最主要的碳源是________，氮源是________。
(2)该培养基按物理性质划分是________培养基；按培养基的作用划分是________培养基。
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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数题型一选择培养基的作用及配制方法1．从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法不包括( )A．根据微生物对碳源需求的差别，使用含不同碳源的培养基B．根据微生物对特殊营养物质的需求，在培养基中增减不同的特殊营养物质C．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素D．根据微生物耐热性的不同，利用高温、高压消灭不需要的杂菌答案 D解析利用高温、高压消灭不需要的杂菌的同时也会将需要筛选的微生物杀死，因此不能通过该方法得到目的微生物，D错误。
2．某混合样品中微生物R含量极少，要得到大量的R，比较理想的方法是采用( ) A．天然培养基B．稀释涂布平板法C．利用适合R生长但同时抑制或阻止其他种类微生物生长的选择培养基D．用显微镜直接观察、寻找，再培养答案 C解析在培养过程中可以通过选择该微生物能生长繁殖而抑制其他微生物生长繁殖的培养基，使微生物R能在该培养基上成为优势菌种而大量繁殖，C正确。
3．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )A．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂答案 A解析分解尿素的细菌与其他细菌的重要区别是分解尿素的细菌能以尿素为氮源，该细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，我们可以准确地鉴定出该种细菌能够分解尿素。
题型二菌落数目的统计方法4．下列不属于菌种计数方法的是( )A．平板划线法B．稀释涂布平板法C．镜检法D．滤膜法解析平板划线法可用于菌种的纯化和分离，不能用于计数，A错误；稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌数目，镜检法也是测定微生物数量的常用方法，B、C正确；滤膜法常用于检测水样中大肠杆菌数目，通常是将已知体积的水样过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌数量，D正确。