免疫学实验教案
免疫学实验教案
实验一凝集反应一、目的要求学习和掌握用试管凝集反应测定抗血清效价的方法。
二、实验说明细菌、螺旋体、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后，在有适量电解质存在的情况下，抗原颗粒相互凝集成肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。
参加反应的抗原称凝集原，抗体称凝集素。
三、实验材料1．试剂抗原、石炭酸生理盐水、阳性血清、被检血清、阴性血清。
2．器材及其他载玻片、小试管（1 cm×6.5 cm）、试管架、移液管、吸管、水浴锅。
四、方法步骤1．玻片凝集实验（1）在载玻片两端各滴一滴大肠杆菌菌悬液。
（2）在一端的菌悬液中加入一滴1:10稀释的大肠杆菌抗血清，另一端悬液加入一滴生理盐水。
（3）将载玻片小心地振动使混合液混匀后静置于室温，数分钟后便可观察到加抗血清的一端产生凝集块，而另一端生理盐水对照没有凝集块产生。
若反应不明显，可放入培养皿中（皿内放入湿滤纸，以保持一定湿度），37℃保温30 min后观察结果。
亦可将载玻片放置显微镜下，凝集块明显可见。
2．试管凝集试验（1）抗血清的稀释抗血清稀释采取倍比稀释法。
取干净小试管7支，排列在试管架上，依次注明号码，每支试管用移液管加入0.5 ml生理盐水。
（2）按下表操作用0.5%石炭酸生理盐水，将待检血清稀释成4个稀释度，5、6、7管分别设为抗原对照、阳性对照和阴性对照。
（3）加入抗原各管中加入抗原0.5ml，充分混匀。
（4）抗原抗体反应把各管混合液振摇混匀，置37℃水浴箱中水浴4 h或在室温中过夜，观察结果。
（5）结果观察与效价判断①生理盐水对照管中的抗原（细菌）应分散，无凝集块沉淀而呈混浊菌悬液。
②实验管如有凝集，管底可见到凝集块，液体上部澄清、半澄清或混浊度降低，管底凝集块轻摇即浮起，呈片块状。
③凝集强弱的判断（以“+”表示）“-”：细菌不被凝集，液体混浊、无透明度，管底无伞状沉淀，但由于菌体自然下沉，管底中央出现圆点状沉淀，振荡时复呈均匀混浊状态。
“+”：液体透明度不明显（25%清亮），25%菌体凝集，管底有少许不明显的伞状沉淀。
免疫学的教案
免疫学的教案教案标题：免疫学的教案教学目标：1. 了解免疫学的基本概念和原理。
2. 理解免疫系统的结构和功能。
3. 掌握免疫系统对病原体的识别和应对机制。
4. 了解免疫系统在疾病预防和治疗中的应用。
教学内容：1. 免疫学的定义和研究对象。
2. 免疫系统的组成和结构。
3. 免疫系统的功能和作用。
4. 免疫系统的细胞和分子基础。
5. 免疫系统的识别和应对机制。
6. 免疫系统在疾病预防和治疗中的应用。
教学方法：1. 讲授：通过讲解免疫学的基本概念、原理和相关知识，引导学生建立起对免疫学的整体认识。
2. 示范：通过展示实验操作、免疫系统的模型或动画等方式，帮助学生更直观地理解免疫系统的结构和功能。
3. 讨论：组织学生进行小组或全班讨论，探讨免疫系统在不同病原体感染中的应对机制，促进学生的思维交流和合作学习。
4. 实验：设计简单的免疫实验，让学生亲自操作并观察实验结果，培养他们的实验技能和科学思维能力。
教学步骤：第一课时：1. 引入：通过提问或展示相关图片，引导学生思考免疫学的重要性和应用领域。
2. 讲授：介绍免疫学的基本概念和研究对象，让学生了解免疫学的研究内容和意义。
3. 示范：展示免疫系统的模型或动画，让学生对免疫系统的结构有初步认识。
4. 讨论：组织学生讨论免疫系统与其他生物系统的关系，引导学生思考免疫系统的功能和作用。
第二课时：1. 复习：回顾上节课的内容，检查学生对免疫学基本概念的掌握情况。
2. 讲授：介绍免疫系统的组成和结构，重点讲解免疫细胞和免疫分子的种类和功能。
3. 示范：进行免疫实验的示范，让学生了解免疫实验的基本步骤和操作技巧。
4. 实验：组织学生进行简单的免疫实验，让他们亲自操作并观察实验结果。
第三课时：1. 复习：回顾上节课的内容，检查学生对免疫系统的组成和结构的掌握情况。
2. 讲授：介绍免疫系统的识别和应对机制，包括免疫细胞的识别和免疫分子的作用机制。
3. 讨论：组织学生进行小组讨论，探讨免疫系统在感染病原体时的具体应对方式。
《免疫学》教案范文
《免疫学》教案范文一、教学目标1.理解免疫学的基本概念和原理。
2.掌握人体免疫系统的组成和免疫应答的基本过程。
3.了解常见的免疫疾病和免疫技术的应用。
4.提高学生的科学素养和思辨能力。
二、教学内容1.免疫学的概念和发展历程。
2.免疫系统的组成和功能。
3.免疫应答的基本过程。
4.免疫疾病的分类和常见疾病的介绍。
5.免疫技术的应用。
三、教学重点1.免疫系统的组成和功能。
2.免疫应答的基本过程。
四、教学难点1.免疫应答的机制和调控。
2.免疫技术的原理和应用。
五、教学方法1.讲授与讨论相结合。
2.板书和多媒体呈现教学内容。
3.实验探究和案例分析。
六、教学过程1.免疫学的概念和发展历程（15分钟）a.免疫学的定义和研究对象。
b.免疫学的发展历程和里程碑。
2.免疫系统的组成和功能（30分钟）a.免疫系统的主要器官和细胞。
b.免疫系统的功能和免疫识别。
3.免疫应答的基本过程（40分钟）a.免疫应答的分子机制和细胞机制。
b.免疫记忆和免疫调节。
4.免疫疾病的分类和常见疾病的介绍（25分钟）a.免疫疾病的分类和概念。
b.常见的免疫疾病和其病因、症状和治疗。
c.以自身免疫病为例进行案例分析。
5.免疫技术的应用（30分钟）a.免疫技术的原理和分类。
b.常见的免疫技术和其应用领域。
c.进行一个免疫技术实验，让学生亲自操作。
七、教学评价1.课堂表现评价：学生是否积极参与讨论和回答问题。
2.作业评价：布置相关的作业，以提高学生的理解和应用能力。
3.实验评价：实验操作的正确性和结果分析的准确性。
八、教学资源1.板书、多媒体、实验仪器和试剂。
2.案例分析和资料阅读。
九、教学反思免疫学作为生物医学领域的重要学科，对于学生的科学素养和思辨能力的培养具有重要意义。
本节课综合运用了讲授、讨论、实验探究和案例分析等多种教学方法，旨在将抽象的理论知识与实际应用相结合，提高学生的学习兴趣和主动性。
通过这样的教学设计，希望能够引起学生对免疫学的兴趣，培养其对免疫学的深入探索和研究的兴趣。
免疫学实验技术教学设计
04
实验技术在教学中的意义
01
提高学生的实践能力
0 2 培 养 学 生 的科学素养 和创新能力
03
帮助学生理解免疫学的基本原理和 概念
提高学生的实验操作技能和实验设 计能力
04
05
培养学生的团队合作精神和沟通能 力
实验技术发展现状与趋势
免疫学实验技术在医学、生物学等 领域的应用越来越广泛
实验技术的发展与创新，推动了免 疫学研究的深入
教师姓名：李明 教学经验：10年 教学成果：发表多篇论文，获得多项教学奖项 教学方法：注重实践操作，注重学生动手能力的培养 教学特色：注重实验技术的创新和应用，注重培养学生的创新思维和实践能力
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免疫学实验技术教学设计
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目录
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免疫学实验技术概述
免疫学实验技术教学目标与内容
免疫学实验技术教学方法与手段
免疫学实验技术教学评价与反馈
免疫学实验技术教学资源与平台 免疫学实验技术教学师资队伍与建
设
01
免疫学实验技术概述
实验技术定义与分类
实验技术的自动化、智能化趋势明 显，提高了实验效率和准确性
实验技术的标准化、规范化，提高 了实验结果的可靠性和可比性
实验技术的绿色化、环保化趋势， 减少了对环境的污染和破坏
02
免疫学实验的基本原理和方法
添加 标题
掌握免疫学实验的数据分析和结果 解释
01
免疫学实验技术：研究免疫反应和 免疫机制的实验方法
03
细胞免疫学实验技术：研究细胞免 疫反应的实验方法，如细胞培养、 细胞融合等
05
《免疫学基础与病原生物学》教案(实验)
《免疫学基础与病原生物学》教案(实验)第一章：免疫学概述1.1 免疫学的定义1.2 免疫系统的组成1.3 免疫反应的类型1.4 免疫学的发展历程第二章：抗原与抗体2.1 抗原的概念与分类2.2 抗原的性质与检测方法2.3 抗体的概念与结构2.4 抗体的性质与检测方法第三章：细胞免疫3.1 淋巴细胞的概念与分类3.2 细胞免疫反应的过程3.3 细胞免疫的应用3.4 细胞免疫与疾病的关系第四章：体液免疫4.1 体液免疫反应的过程4.2 主要免疫球蛋白的功能与检测方法4.3 体液免疫的应用4.4 体液免疫与疾病的关系第五章：病原生物学的概念与方法5.1 病原生物学的定义与意义5.2 病原体的分类与特点5.3 病原体的检测方法5.4 病原生物学在疾病诊断与控制中的应用第六章：免疫学实验技术6.1 免疫学实验技术概述6.2 抗原-抗体反应的实验技术6.3 细胞分离与检测技术6.4 免疫组化与免疫荧光技术第七章：临床免疫学应用7.1 血清学诊断7.2 免疫接种与免疫预防7.3 免疫治疗与生物制品7.4 免疫学在临床疾病中的应用实例第八章：病原生物学实验技术8.1 病原体分离与培养8.2 病原体鉴定与分类8.3 分子生物学技术在病原生物学中的应用8.4 病原生物学的实验室安全第九章：病原生物学与公共卫生9.1 病原体与传染病的传播9.2 流行病学与公共卫生9.3 感染控制与公共卫生实践9.4 病原生物学在公共卫生研究中的应用第十章：实验操作与数据分析10.1 实验操作规范与安全10.2 实验数据的收集与处理10.4 实验操作与数据分析的实践案例重点和难点解析一、抗原与抗体的相互作用重点关注抗原的性质与检测方法，以及抗体的性质与检测方法。
抗原的性质包括抗原的种类、结构、性质以及抗原表位等。
抗原的检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术等。
抗体的性质包括抗体的种类、结构、功能以及抗体的制备方法等。
《免疫学基础与病原生物学》教案(实验)
《免疫学基础与病原生物学》教案(实验)第一章：免疫学简介一、实验目的1. 理解免疫学的基本概念。
2. 掌握免疫学实验的基本技能。
二、实验原理1. 免疫学是研究生物体对抗原物质免疫反应的科学。
2. 实验通过观察和分析免疫反应的结果，了解免疫学的基本原理。
三、实验材料与仪器1. 材料：小鼠血清、抗原物质、酶标板等。
2. 仪器：酶标仪、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 制备小鼠血清。
2. 制备酶标板，分别加入小鼠血清和抗原物质。
3. 观察和记录免疫反应结果。
五、实验结果与分析1. 观察酶标板上的免疫反应结果，分析免疫反应的特点。
2. 结合实验原理，解释免疫反应的发生机制。
第二章：细胞免疫实验一、实验目的1. 理解细胞免疫的基本概念。
2. 掌握细胞免疫实验的基本技能。
二、实验原理1. 细胞免疫是机体通过T细胞对抗原物质的免疫反应。
2. 实验通过观察和分析细胞免疫反应的结果，了解细胞免疫的基本原理。
三、实验材料与仪器1. 材料：小鼠脾细胞、抗原物质、细胞培养基等。
2. 仪器：细胞培养箱、流式细胞仪等。
四、实验步骤1. 制备小鼠脾细胞。
2. 将小鼠脾细胞与抗原物质共同培养。
3. 观察和记录细胞免疫反应结果。
五、实验结果与分析1. 观察细胞培养后的细胞形态和功能变化，分析细胞免疫反应的特点。
2. 结合实验原理，解释细胞免疫反应的发生机制。
第三章：体液免疫实验一、实验目的1. 理解体液免疫的基本概念。
2. 掌握体液免疫实验的基本技能。
二、实验原理1. 体液免疫是机体通过B细胞产生抗体对抗原物质的免疫反应。
2. 实验通过观察和分析体液免疫反应的结果，了解体液免疫的基本原理。
三、实验材料与仪器1. 材料：小鼠血清、抗原物质、酶标板等。
2. 仪器：酶标仪、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 制备小鼠血清。
2. 制备酶标板，分别加入小鼠血清和抗原物质。
3. 观察和记录体液免疫反应结果。
五、实验结果与分析1. 观察酶标板上的免疫反应结果，分析体液免疫反应的特点。
医学免疫学实验课程教案
医学免疫学实验课程教案（2007 ---2008 学年度第一学期）教学内容：细胞免疫检测Ⅰ：细胞因子的检测（设计性实验）授课对象：20XX级全体教学时间及学时：3学时实验任务：市场上有一广告产品，据说有免疫增强作用，请设计一个方案证实之（从细胞因子的角度考虑）。
教学目的和要求：一、初步掌握从细胞因子的角度证实某产品有免疫增强作用的实验设计。
二、了解五种标记技术的原理、特点和应用。
三、掌握ELISA的实验原理、操作方法及其临床实用意义。
教学重点和难点：1、从细胞因子的角度证实某产品有免疫增强作用的实验设计。
2、ELISA的实验原理、操作方法。
教学方法：1．注重学生综合、分析能力培养，调动学生学习的主观能动性。
2．启发式、互动式教学手段，强调学生的协作性和团体精神。
3、对学生严格把关，保证实验课的过程和结果。
思考题：一、有哪些实验可以检测机体的细胞免疫功能？二、常见的免疫标记技术包括哪些？三、试述ELISA常用的三种方法都是什么，何种检测抗原、何种检测抗体。
参考书目：1、《医学免疫学》（面向21世纪课程教材）主编：龚非力科学出版社20XX年版2、医学微生物与免疫学实验指导，三峡大学医学院生物病原学部编。
3、医学免疫学实验指导，主编：张秋萍，武汉大学出版社。
教学内容及时间分配：一、讨论设计方案 30分钟二、总结方案及讲解五种免疫标记技术15分钟方案归纳：1、人体免疫包括细胞免疫和体液免疫。
本次实验从T细胞分泌的细胞因子着手检测细胞免疫功能。
2、确定研究对象，给药途径，剂量，样本量。
给药后检测血清中细胞因子的含量。
3、因为体内细胞因子含量低，故选取免疫标记技术检测细胞因子的含量。
五种免疫标记技术：1、免疫荧光技术：2、放射免疫分析法：3、酶联免疫分析法4、化学发光免疫分析法5、金标记技术三、酶联免疫吸附试验的原理及操作步骤（双抗体夹心法）30分钟原理：1．抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；2．抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；3．酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。
免疫学实验教学备课教案免疫实验的设计与操作
免疫学实验教学备课教案免疫实验的设计与操作免疫学实验教学备课教案一、实验目的本实验旨在通过设计与操作免疫学实验，让学生了解免疫学的基本理论知识与实验操作技巧，培养学生的实验思维能力和科学实验的技能。
二、实验原理免疫学实验是通过模拟真实的免疫反应过程来研究机体对抗疾病的机制。
实验中常用的技术包括免疫沉淀、免疫印迹、酶联免疫吸附试验等。
通过这些技术，可以检测抗原和抗体的相互作用，研究疫苗效果以及诊断免疫相关疾病等。
三、实验仪器与材料1. 电泳仪2. 分析天平3. 电源供应器4. 显微镜5. 细胞培养装置6. 活体小鼠7. 抗原和抗体标记试剂盒四、实验操作步骤1. 实验前准备a. 准备所需材料，并确认实验仪器的正常工作状态。
b. 为实验室提供良好的实验环境，确保安全与卫生。
c. 细心阅读实验操作步骤，了解实验的整体流程。
2. 抗原与抗体的制备a. 根据实验要求，选择合适的抗原并进行提取与纯化。
b. 制备抗体，可以通过免疫小鼠获得，或选择商业试剂盒。
3. 免疫沉淀实验a. 准备测试样品和控制样品。
b. 将抗原与抗体混合，反应一定时间。
c. 加入免疫沉淀试剂，沉淀免疫复合物。
d. 用电泳将复合物分离，观察结果。
4. 酶联免疫吸附试验(ELISA)a. 准备ELISA板，涂覆抗原。
b. 加入标准品和待测样品，与包被的抗体反应。
c. 加入辣根过氧化物酶结合的二抗，形成抗原-抗体-酶复合物。
d. 加入底物，观察颜色变化，并使用酶标仪测定吸光度。
五、实验结果与分析根据实验所得数据和观察结果，进行免疫实验的定量与定性分析。
通过对比实验组与对照组的结果，判断实验的有效性以及所研究问题的回答。
六、实验注意事项1. 在实验过程中，保持实验台面整洁，避免交叉污染。
2. 操作实验仪器时，注意安全操作规范，避免发生事故。
3. 确保实验操作符合伦理要求，保护动物的福利。
4. 结果分析时，要考虑实验可能存在的误差与不确定性。
七、实验拓展在完成基本免疫实验的学习后，可以进一步拓展实验内容，比如进行免疫细胞活性检测、蛋白质互作研究等。
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[键入公司名称]免疫学实验教案研究生教育实习潘熙萍(Y20090201)2011/1/14[在此处键入文档的摘要。
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]实验一免疫血清的制备一、实验目的熟悉免疫血清的制备过程；了解动物实验的基本知识。
二、实验原理将抗原物质经适当途径，按照预先制定的免疫方案免疫动物，经过一定时间，可刺激机体产生特异抗体并释放入血液，当血中抗体达到一定效价时采血，分离血清，即为特异性免疫血清（又称为抗血清）。
因抗原具有多种表位，可激活多个克隆的B细胞活化产生抗体，因此，这种免疫血清又称为多克隆抗体。
本实验以绵羊红细胞（SRBC）作为免疫原，以家兔为免疫动物，制备兔抗养红细胞免疫血清（也称为溶血素）三、器材和材料1.动物健康成年家兔，雄性，体重2-3kg；健康成年绵羊。
2.试剂生理盐水、碘酒、75%酒精。
3.器材剪刀、镊子、无菌注射器、量筒、无菌毛细滴管、无菌试管、离心管、三角烧瓶（200ml）、动物固定架、手术器械一套、塑料放血管等。
四、实验步骤1.抗原制备（1）用碘酒和75% 消毒绵羊皮肤，抽取颈静脉血液，注入含有等量阿氏液的三角烧瓶内，混匀。
阿氏液既有抗凝作用，又适于储存SRBC。
分装后置4℃冰箱内，可使用3周。
（2）无菌取上述绵羊血于离心管中，用无菌生理盐水洗涤红细胞，2000r/min，离心5min，吸弃上清液和白细胞层，再用无菌生理盐水与SRBC混匀， 2000r/min，离心5min，重复3次。
最后一次离心10min，以使血细胞沉积于管底，弃去上清液。
（3）根据红细胞积压，用生理盐水配成20%SRBC悬液。
2.免疫动物（1）全班分为4组，每组选择健康雄性兔1只，用于免疫。
（2）用全血和SRBC悬液按下述方案免疫兔子。
（3）试血末次注射后第7天，耳静脉采血1ml ,分离血清，用试管凝集试验滴定效价。
（1：2000以上可用）3、分离血清（1）颈动脉放血（心脏采血）并收集于无菌三角烧瓶中凝固后4℃冰箱过夜，分离上层血清。
然后2500r/min离心10min，收集收集上层血清。
（2）收集的血清经鉴定纯化后，小量分装，-20℃冻存。
五、实验结果收获的血清应无菌，且无溶血现象。
兔抗SRBC免疫血清的溶血效价应高于1：2000；兔抗人IgG免疫血清的效价应高于1：16。
六、注意事项抗原制备、免疫动物及采集血清等过程应注意菌操作；免疫的途径、次数、间隔时间因抗原性状不同而异，应合理设计免疫方案，并更具具体情况加以调整；再次注射免疫原时，要防治过敏反应发生。
实验二免疫细胞的形态观察一、实验目的掌握微量采血及血涂片的制作方法；学习使用光学显微镜观察免疫细胞二、实验原理血涂片是临床化验中最常规的技术，也是血液学研究中的最基本技术。
将血液样品制成单层细胞的涂片标本，经瑞氏（Wright）染液染色后，不同免疫细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。
根据细胞中颗粒的颜色、大小及多少，再结合细胞的大小及细胞核的形态，就可以将免疫细胞进行分类计数。
三、器材和材料器材：医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片等试剂：瑞氏（Wright）染液，瑞特氏染料0.1克溶于60ml甲醇中，过滤。
贮褐色瓶中备用。
（配置时，要先将瑞特氏染料置研钵体内边研边滴加甲醇，使染料溶液得更好。
）四、实验步骤1．采血动物采血时先将耳部剪毛，酒精消毒后，刺破动物耳部皮肤，挤去第一滴血不要。
2．涂片挤出第二滴血置于载玻片的一端，再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血涂片的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状，两玻片的角度以30~40O为宜（角度过大血膜较厚，角度小则血膜薄），轻轻将载玻片向前推进，即涂成血液薄膜（如图），推进时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀。
3．染色待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴瑞氏染液盖满血膜为止，染色1~3min。
然后滴加等量的缓冲液（pH6.4）或蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜检。
4．封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
5．观察分别用低倍、高倍和油镜观察血涂片，分辨不同的血细胞类型。
五、实验结果画出血细胞的形态，标出并分析比较各种免疫细胞类型和形态特征。
实验三大鼠外周血单个核细胞的分离一、实验目的掌握鼠外周血单个核细胞的分离的原理及操作方法。
二、实验原理血液中各有形成分的比重存在差异，利用比重为1.077、近于等渗的ficoll-hypaque混合溶液（又称淋巴细胞分层液）作密度梯度离心时，各种血液成分将按密度梯度重新聚集。
血浆和血小板由于密度较低，故悬浮于分层液的上部；红细胞与粒细胞由于密度较大，故沉于分层液的底部；PBMC密度稍低于分层液，故位于分层液界面上，这样就可获得PBMC。
三、器材和材料刻度离心管、吸管、试管、毛细吸管、橡皮乳头、载玻片、盖玻片、离心机等，pH7.2 Hanks液、肝素、生理盐水溶液，淋巴细胞分层液。
四、实验步骤1．抽取静脉取血2ml，注入含0，1mL肝素溶液的无菌试管中混匀，使血液抗凝。
用pH7.2 Hanks液将抗凝血稀释1倍。
2．离心管：3mLficoll-hypaque分离液，加入4mL稀释血液（缓慢）加至分离液上面，应注意保持两者界面清晰。
3．用水平离心机以2000r/min离心20min。
4．吸出单个核细胞转移入另一支离心管中，加4倍以上的Hanks液洗涤,混匀，1500r/min，弃上清，加入Hanks液洗涤细胞2次。
5．最后一次洗涤手,用Hanks溶液将细胞悬液还原至2mL，取样计数。
6．取2滴细胞悬液将2滴0.4%台盼蓝溶液混匀，静止5min后，取样做湿片镜检，活细胞无色，死细胞蓝色。
7. 细胞计数五、注意事项1、实验所用玻璃器皿应该洁净。
如果制备的单个核细胞悬液用于细胞培养时，上述操作过程都要在无菌条件下进行，所用器材、试剂都应为无菌。
2、实验中的细胞得率与室温及分层液比重等有关。
分层液应避光4℃保存。
实验五免疫血清的鉴定一、实验目的掌握兔抗SRBC免疫血清鉴定的原理，熟悉该方法的操作及结果判定。
二、实验原理SRBC作为颗粒性抗原在体外与其相应抗体（兔抗SRBC免疫血清）结合，可出现肉眼可见的凝集块，即凝集试验阳性，说明免疫血清中含有抗SRBC抗体，当SRBC在使馆中与其相应免疫血清结合后，在补体作用下，将导致SRBC裂解，发生免疫溶血反应。
当反应体系中的SRBC和补体一定时，其溶血反应程度与免疫血清中的抗体（溶血素）效价呈正比，此即为补体溶血试验，藉此可测定溶血素的效价。
三、器材和材料免疫血清1%SRBC悬液补体豚鼠新鲜血清生理盐水器材无菌试管、无菌吸管、试管架、恒温水浴箱、玻片等。
四、实验步骤1、取玻片一张，在两端分别加生理盐水和免疫血清各一滴，然后各加入一滴羊红细胞，轻摇玻片，经1-2min，若生理盐水侧红细胞仍均匀浑浊，而在免疫血清侧红细胞凝聚成团，出现小颗粒，即为凝集试验阳性，说明免疫血清中含有抗养红细胞抗体。
2、在玻片凝集试验阳性基础上，用补体溶血试验测定免疫血清的效价。
（1）取15支小试管，编号列于试管架上，加入生理盐水，第1管0.5mL，第2管0.75mL，第3管1mL，第4-15管各 0.25mL做1:100稀释后,取0.75mL,分别1、2、3号管，每管0.25mL，即成1:300、1:400、1：500稀释之溶血素，然后再进行倍比稀释。
（2）另设第16号对照管，混匀后置37℃水浴箱30min，观察结果。
五、实验结果观察溶血现象，以呈现完全溶血的血清最高稀释度为溶血素效价。
六、注意事项实验所用补体采用豚鼠新鲜血清。
补体性质极不稳定，需对实验条件和个环节加以严格控制。
兔抗人IgG免疫血清的鉴定科采用双向免疫扩散法。
实验六免疫血清的纯化一、实验目的掌握血清纯化原理与鉴定。
二、实验原理SRBC作为颗粒性抗原在体外与其相应抗体（兔抗SRBC免疫血清）结合，可出现肉眼可见的凝集块，即凝集试验阳性，说明免疫血清中含有抗SRBC抗体，当SRBC在使馆中与其相应免疫血清结合后，在补体作用下，将导致SRBC裂解，发生免疫溶血反应。
当反应体系中的SRBC和补体一定时，其溶血反应程度与免疫血清中的抗体（溶血素）效价呈正比，此即为补体溶血试验，藉此可测定溶血素的效价。
三、器材和材料免疫血清1%SRBC悬液补体豚鼠新鲜血清生理盐水器材无菌试管、无菌吸管、试管架、恒温水浴箱、玻片等。
四、实验步骤1、取玻片一张，在两端分别加生理盐水和免疫血清各一滴，然后各加入一滴羊红细胞，轻摇玻片，经1-2min，若生理盐水侧红细胞仍均匀浑浊，而在免疫血清侧红细胞凝聚成团，出现小颗粒，即为凝集试验阳性，说明免疫血清中含有抗养红细胞抗体。
2、在玻片凝集试验阳性基础上，用补体溶血试验测定免疫血清的效价。
（1）取15支小试管，编号列于试管架上，加入生理盐水，第1管0.5mL，第2管0.75mL，第3管1mL，第4-15管各 0.25mL做1:100稀释后,取0.75mL,分别1、2、3号管，每管0.25mL，即成1:300、1:400、1：500稀释之溶血素，然后再进行倍比稀释。
（2）另设第16号对照管，混匀后置37℃水浴箱30min，观察结果。
五、实验结果观察溶血现象，以呈现完全溶血的血清最高稀释度为溶血素效价。
六、注意事项实验所用补体采用豚鼠新鲜血清。
补体性质极不稳定，需对实验条件和个环节加以严格控制。
兔抗人IgG免疫血清的鉴定科采用双向免疫扩散法。
实验七酶联免疫吸附试验(ELISA)-间接法一、实验目的掌握间接法酶联免疫吸附试验的原理。
熟悉间接法的操作步骤。
二、实验原理1、ELISA基本程序：抗原和抗体发生特异性结合，吸附于固相载体上，加入酶标抗体或酶标二抗，形成抗体-抗原-酶抗体复合物（双抗体夹心法），或者抗原-抗体-酶标二抗复合物（间接法），加入底物和显色剂后，酶催化底物进行水解，氧化或还原等反应。
呈现显色反应，酶降解底物的量与呈现的颜色成正比。
2、用于标记的酶：辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶3、双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，而间接法是检测抗体最常用的方法。
三、器材和材料绵羊红细胞——抗原兔抗绵羊红细胞抗体（溶血素）——待测兔血清HRP标记羊抗兔IgG ——二抗包被缓冲液：0.05M pH9.6碳酸盐缓冲液洗涤液：含0.05% Tween 20的0.01M pH7.4 PBS底物溶液：TMB酶标板，酶标仪。
四、实验步骤1、包被抗原：使用包被缓冲液10000被稀释绵羊红细胞，加入酶标板中，4 ℃过夜；洗涤3次，每次间隔3 min，拍干；2、封闭：5%脱脂奶粉37 ℃封闭0.5 h，200 μL /孔，拍干；3、加样：每人加样2列（16孔），2孔加入5000倍或10000倍稀释的待测兔血清，设置空白对照和不抑制对照，37 ℃孵育1h洗涤3次，每次间隔3 min，拍干；4、加酶标二抗：加入1∶1000 稀释的羊抗兔酶标二抗，每孔100μL，37℃孵育1 h，洗涤同上；5、显色：加入TMB底物显色液，100 μL /孔，37℃，15 min；6、终止读数：加入2 M的浓硫酸终止显色反应，50 μL /孔，用酶标仪测定其OD450值。