FAD葡萄糖脱氢酶
FAD葡萄糖脱氢酶
来源 重组 Pichiapastoris 酶号 E.C Number 1.1.99.10 产品用途 用于血糖监测、葡萄糖传感器和科学研究 产品规格 外观：亮黄色液体 活性：不低于 541U/mg 蛋白 检测原理 FAD-GDH 在有电子受体存在的情况下催化葡萄糖的氧化
FAD-GDH
具体图 5
图 1. 最适反应 pH
图 2. 最适反应温度
图 3. pH 稳定性
图 4. 温度稳定性（62℃）
图 5. 底物专一性
β-D-Glucose + Acceptor
Glucono-1,5-lactone + Reduced Acceptor
酶活定义
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
25℃时，在标准检测方法条件下，每分钟转化 1μmol 葡萄糖所需的酶量
性质
1.分子量（分子筛层析）：65.6 kDa
2. Km：86.4±1.8 mM（D-葡萄糖）
3.最适 pH（图 1）： pH7.5
4.最适温度（图 2）：55℃
5.pH 稳定性（图 3）：pH 3.5~9.0
6.温度稳定性（图 4）：62℃处理时半衰期为 82min
底物专一性
将反应体系的底物分别换成 1M D-麦芽糖，D-木糖，D-半乳糖，L-阿拉伯糖，D-乳糖，海
藻糖，D-果糖，D-山梨醇和蔗糖，测定酶活并跟以 D-葡萄糖为底物的时测定的酶活比较。
重组葡萄糖脱氢酶的酶学性质及其偶联辅酶再生
重组葡萄糖脱氢酶的酶学性质及其偶联辅酶再生余涛;胡蝶;邬敏辰;汪俊卿;冯峰;顾颖【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2014(033)009【摘要】为解决生物催化氧化还原反应中辅酶循环问题,人工合成密码子优化后的嗜酸热源体Thermoplasma acidophilum葡萄糖脱氢酶基因Sygdh,于E.coli BL21 (DE3)中表达,粗酶液经镍柱亲和层析获得纯化的重组葡萄糖脱氢酶SyGDH.SDS-PAGE显示相对分子质量为41.0 kDa.酶学性质分析表明:该酶的最适pH值为7.5,在pH 6.0～8.0稳定;最适反应温度为40℃,在55℃以下稳定;最适条件下其比活性达4.5 U/mg; Zn2+对其有明显激活作用;该酶对NADP+的亲和力大于NAD+且对大多数有机溶剂有良好的耐受性;对D-葡萄糖的Km和Vmax值分别为28.2 mmol/L和6.5 U/mg.在葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶偶联构建的NADPH辅酶循环体系中,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,羰基还原酶催化产物4-氯-3-羟基丁酸乙酯的产率为99.0％,是未添加葡萄糖脱氢酶时产物产率的3.11倍,表明重组SyGDH具有为生物催化氧化还原反应提供辅酶NADPH再生的能力.【总页数】7页(P910-916)【作者】余涛;胡蝶;邬敏辰;汪俊卿;冯峰;顾颖【作者单位】江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学生物工程学院,江苏无锡214122;江南大学无锡医学院,江苏无锡214122;江南大学生物工程学院,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学无锡医学院,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】TQ925【相关文献】1.重组葡萄糖脱氢酶酶学性质研究 [J], 唐江涛;覃益民;杨梅;王顺成;姚评佳;魏远安2.重组葡萄糖脱氢酶的表达及辅酶再生应用研究 [J], 李凌凌;刘曜宁;吕早生;杨忠华;左振宇;宋采薇3.FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶发酵、纯化及酶学性质 [J], 林荣; 宋祖坤; 张玲; 王男; 杨海麟4.重组毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶的酶学性质研究 [J], 范丙友;陆海;蒋湘宁5.包括辅酶原位再生的偶联酶反应联产1，3-二羟基丙酮和2-氨基丁酸 [J], 苗维娟;王平;张松平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
葡萄糖脱氢酶（GCDH）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2690规格：50T/48S产品简介：GCDH（EC 1.1.1.47）催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H，主要存在于多种微生物和高等动物的肝脏中。
GCDH是一种制备高含量低聚果糖的理想用酶，同时也是临床血糖测定的诊断用酶，可广泛用于食品工业及医药工业领域中。
GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH，利用NADH在340nm处吸光值的变化即可反映葡萄糖脱氢酶的活性。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、台式低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入15mL试剂一溶解，用不完的试剂4℃保存。
试剂三：粉剂×2瓶，-20℃避光保存。
临用前每瓶加入5mL试剂一溶解，用不完的试剂建议分装后-20℃避光保存，避免反复冻融。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）︰提取液体积(mL)为1︰5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
细胞或细菌：先收集细胞或细菌到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）︰提取液体积（mL）为500~1000︰1的比例（建议500万个细胞或细菌加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞或细菌（功率20%或200W，超声3s，间隔7s，总时间5min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
血浆（清）：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、工作液的配制：按照试剂一︰试剂二︰试剂三为4︰3︰2的体积比例充分混匀，备用，用前37℃预热10min。
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶
磷酸葡萄糖酸脱氢酶（Phosphogluconate dehydrogenase，PGD）是一种酶，参与底物——磷酸葡萄糖酸（6-phosphogluconate，6PG）的氧化还原反应，使其产生一分子的
CO2和一分子的NADPH。
PGD是巴氏循环的关键酶之一，也是细胞内NADPH的重要来源之一。
PGD是一个单元酶，大约含有460个氨基酸残基。
在进化过程中，从原核细胞向真核
细胞的转变中，PGD也经历了一些结构和功能上的改变。
比如在哺乳动物中发现的PGD是
一种亲水性膜蛋白，而在原核细胞和植物细胞中则是一种溶解于胞浆中的酶。
PGD的催化过程是一个复杂的氧化还原反应，反应过程中由于底物6PG与酶的活性中
心结合，产生一个混合酸酐化合物。
随后，由FAD作为辅因子参与底物6PG的氧化反应，
生成乙酰葡萄糖酸和FADH2。
接着，由NAD+作为另一种辅因子参与，将FADH2还原为FAD，同时生成CO2和NADPH。
PGD酶活性的调节很重要。
PGD本身是一种具有较高活性的酶，但在一些情况下，例
如细胞内NADPH的含量过多时，往往需要降低PGD酶的活性，以控制细胞内NADPH的水平。
事实上，PGD酶的活性可以通过磷酸化、去磷酸化等多种方式调节，而磷酸化对PGD酶活
性的抑制作用更强。
总之，PGD是一种在能量代谢及氧化还原反应中具有重要作用的酶，其独特的催化机
制和酶活性调节机制为科学家们深入探索细胞内代谢及调控机制提供了有益的帮助。
三羧酸循环的各个反应的酶
三羧酸循环的各个反应的酶三羧酸循环（TCA循环），也称为克雷布循环或柠檬酸循环，是生物体内的一种重要代谢途径，是细胞中能量供应的主要来源之一。
它通过一系列反应将葡萄糖分解为二氧化碳和水，并释放出大量的能量。
本文将以三羧酸循环的各个反应的酶为标题，介绍这些反应的具体过程。
1.异柠檬酸合成酶（citrate synthase）异柠檬酸合成酶是三羧酸循环的起始酶，它催化乙酰辅酶A与草酰乙酸结合，生成柠檬酸。
该反应是一个缩合反应，需要消耗一份乙酰辅酶A和一份草酰乙酸。
异柠檬酸合成酶是三羧酸循环中的限速酶，其活性受到ATP和NADH的抑制。
2.柠檬酸异构酶（aconitase）柠檬酸异构酶催化柠檬酸与水分子的反应，生成顺丁烯二酸。
这是一个脱水的异构化反应。
柠檬酸异构酶的催化过程中需要一个水分子参与，因此它也被称为水合酶。
3.顺丁烯二酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase）顺丁烯二酸脱氢酶催化顺丁烯二酸与NAD+反应，生成α-酮戊二酸和NADH。
这是一个氧化反应，同时也是三羧酸循环中的限速酶之一。
顺丁烯二酸脱氢酶的活性受到ATP和NADH的抑制。
4.α-酮戊二酸脱羧酶（α-ketoglutarate dehydrogenase）α-酮戊二酸脱羧酶催化α-酮戊二酸与辅酶A和NAD+反应，生成脱羧产物琥珀酸、NADH和二氧化碳。
这是一个氧化脱羧反应，也是三羧酸循环中的限速酶之一。
α-酮戊二酸脱羧酶的活性受到ATP 和NADH的抑制。
5.琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase）琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸与FAD反应，生成丙酮酸和FADH2。
这是一个氧化反应，琥珀酸脱氢酶是三羧酸循环中唯一与细胞呼吸链直接连接的酶。
6.丙酮酸激酶（succinyl-CoA synthetase）丙酮酸激酶催化丙酮酸与辅酶A反应，生成辅酶A连接的琥珀酸和GTP（也可生成ATP）。
这是一个酯化反应，同时也是三羧酸循环中的限速酶之一。
葡萄糖脱氢酶(Glucose dehydrogenase,GCDH)试剂盒说明书
货号：MS2627 规格：100管/96样葡萄糖脱氢酶（Glucose dehydrogenase，GCDH）试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：GCDH（EC 1.1.1.47）催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H，大量存在于高等动物的肝脏和弱氧化醋杆菌中。
在低聚果糖生产中使用GCDH，不仅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量，而且生成的葡萄糖酸与钙离子结合生成的葡萄糖酸钙是一种理想的补钙制剂。
因而，GCDH已成为制备高含量低聚果糖的理想用酶。
测定原理：GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH，在340nm下测定NADH上升速率，即可反映GCDH活性。
自备实验用品及仪器：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：提取液：100mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体19 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；样本的前处理：组织的前处理：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞的前处理：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零；2、工作液的配制：临用前将试剂二转移到试剂一中混合溶解待用；用不完的试剂4℃可保存一周；3、将工作液置于37℃预热5分钟。
fad 氧化还原
fad 氧化还原FAD氧化还原是一种化学反应，也被称为脱氢酶反应。
作为细胞呼吸的关键环节，FAD氧化还原是分解羟基化合物（比如葡萄糖）以产生能量的过程，其实也是细胞燃料。
该反应的发生是靠FAD（叶酸盐基二聚氧化物），为一种有机脱氢酶。
它位于质子泵机构内，通过它可以改变氧化状态，使能量被释放出来，从而进行细胞的燃料转换。
FAD氧化还原的反应机理，主要涉及FAD的氧化还原反应，是将FAD连接到一个甘油三酯脂质，其糖原脂蛋白结合也参与其中。
然后FAD作为催化剂，将甘油三酯中的一氧化碳去除，形成二氧化碳和一个脱氢脂质，同时交换氧和氢，从而改变FAD的氧化状态。
在FAD氧化还原反应过程中，发生了一系列催化反应，使糖原脂蛋白得到脱氢，形成一氧化碳和一个脱氢脂质，同时交换氧和氢，从而改变FAD的氧化状态。
FAD的氧化还原反应的反应机理不仅涉及FAD的氧化还原，还涉及质子泵的活动。
质子泵的活动能够发挥催化作用，以有效改变FAD 的氧化还原状态，从而使能量被释放出来。
FAD的氧化还原反应需要ATP（能量质子）和NADH（电子载体）的参与，以及由细胞呼吸产生的氧。
FAD的氧化还原反应能够有效地将化学能转化为热能，为细胞提供能量，从而保持细胞的正常功能。
FAD的氧化还原反应最重要的作用，在于将细胞内的能量转换成活动能，并使细胞生长、发育和繁殖，以及细胞内的其他生化反应。
FAD氧化还原反应是一种生物反应，它涉及到很多生物体，不仅仅是人类，还有鱼、鸟、昆虫、植物、真菌和细菌等，其中在细胞呼吸中都有重要作用。
FAD氧化还原反应不仅可以在生物体内发生，而且在化学实验室中也可以进行。
总之，FAD氧化还原反应是一种重要的化学反应，在细胞内有着重要的作用，包括维持细胞正常活动，产生能量等。
它可以通过FAD 的氧化还原，实现糖原脂蛋白的脱氢和能量的释放，使细胞燃料得到转换。
通过FAD的氧化还原，也可以在实验室中实现。
脂肪酸脱氢酶的名词解释
脂肪酸脱氢酶的名词解释脂肪酸脱氢酶是一个在生物体内起着重要作用的酶类分子。
它参与了脂肪酸的氧化代谢过程，通过去氢反应将脂肪酸中的氢原子移除，产生一系列不饱和脂肪酸。
本文将对脂肪酸脱氢酶进行详细的名词解释，探讨其功能、作用机制以及生物领域中的应用。
首先，我们来理解脂肪酸脱氢酶的基本定义。
脂肪酸脱氢酶（Fatty Acid Desaturase，简称FAD）是一类酶，能够催化脂肪酸分子中的氢原子移除反应，生成含有双键的不饱和脂肪酸。
这种酶在生物体内广泛存在，从细菌到植物、动物都有相应的脂肪酸脱氢酶。
在生物体内，脂肪酸是重要的能量来源，同时也是构建细胞膜和合成各种生物活性物质的基础物质。
而脂肪酸脱氢酶则参与了脂肪酸的代谢过程，调节脂肪酸结构的饱和度，进而影响生物体内脂肪酸的功能。
脂肪酸脱氢酶的作用机制相当复杂，一般可分为两种类型：饱和脂肪酸脱氢酶（Saturated Fatty Acid Desaturase）和单不饱和脂肪酸脱氢酶（MonounsaturatedFatty Acid Desaturase）。
饱和脂肪酸脱氢酶主要催化饱和脂肪酸的去氢反应，将饱和脂肪酸中的氢原子去除，生成一氧化碳，形成不饱和脂肪酸。
这种不饱和脂肪酸又被称为亚饱和脂肪酸。
饱和脂肪酸脱氢酶在生物体内起到调节脂肪酸结构的饱和度，调控细胞膜的流动性以及一系列生理过程的平衡。
单不饱和脂肪酸脱氢酶主要催化单不饱和脂肪酸的反应，在脂肪酸的碳链上形成一个新的双键。
这种双键的形成会影响脂肪酸的立体构型和生物活性。
单不饱和脂肪酸脱氢酶在细胞膜的结构和功能调节中扮演着重要角色，同时也参与了多种生物过程的调控。
脂肪酸脱氢酶在生物领域中的应用非常广泛。
在食品工业中，通过控制脂肪酸脱氢酶的活性，可以调整油脂中的不饱和脂肪酸含量，改善油脂的储存稳定性和口感。
同时，在农业领域，利用脂肪酸脱氢酶基因工程技术，可以改良作物的脂肪酸组成，提高农产品的营养价值和品质。
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具体图 5
图 1. 最适反应 pH
图 2. 最适反应温度
图 3. pH 稳定性
图 4. 温度稳定性（62℃）
图 5. 底物专一性
FAD-葡萄糖脱氢酶
来源 重组 Pichiapastoris 酶号 E.C Number 1.1.99.10 产品用途 用于血糖监测、葡萄糖传感器和科学研究 产品规格 外观：亮黄色液体 活性：不低于 541U/mg 蛋白 检测原理 FAD-GDH 在有电子受体存在的情况下催化葡萄糖的氧化
FAD-GDH
4.最适温度（图 2）：55℃
5.pH 稳定性（图 3）：pH 3.5~9.0
6.温度稳定性（图 4）：62℃处理时半衰期为 82min
底物专一性
将反应体系的底物分别换成 1M D-麦芽糖，D-木糖，D-半乳糖，L-阿拉伯糖，D-乳糖，海
藻糖，D-果糖，D-山梨醇和蔗糖，测定酶活并跟以 D-葡萄糖为底物的时测定的酶活比较。
β-D-Glucose + Acceptor
Glucono-1,5-lactone + Reduced Acceptor
酶活义
25℃时，在标准检测方法条件下，每分钟转化 1μmol 葡萄糖所需的酶量
性质
1.分子量（分子筛层析）：65.6 kDa
2. Km：86.4±1.8 mM（D-葡萄糖）
3.最适 pH（图 1）： pH7.5