转基因大米培育过程
转基因粮食的种植方法
转基因粮食的种植方法
转基因粮食的种植方法指采用基因工程技术，将外源基因导入粮
食作物，以改善其生长特性和抗性，提高作物产量和品质。
下面为大
家简要介绍转基因粮食的种植方法：
1.选择适合的基因载体：基因载体是将外源基因导入到植物中的
工具。
科学家根据不同植物和外源基因的特性，选择适合的基因载体。
2.将目标基因导入到基因载体中：将目标基因和选择好的基因载
体进行复制，形成新的 DNA 分子，并利用工具将其导入到植物细胞中。
3.筛选目标细胞：转基因植物成活率低，需要在细胞水平上进行
筛选。
利用选择性培养基，将只有目标基因的细胞分离出来，再进行
培养和扩增。
4.将目标细胞培养成符合要求的植株：目标细胞经过培养，发育
成符合要求的植物营养体，随后将其移植到土壤中，进行进一步的生
长和验收。
5.粮食生产与应用：转基因粮食在生产过程中，通过采取合适的
种植方法和加强管理等手段，达到提高产量、减少病虫害等目的。
在
应用方面，转基因粮食经过审批后，可以投入市场销售，供人消费。
水稻转基因实验方法与步骤
水稻转基因实验操作方法步骤一、水稻愈伤组织的诱导（一）以水稻幼胚为试材诱导愈伤组织1．消毒：取水稻未成熟种子（灌浆期），按以下步骤消毒：1）用自来水冲洗种子，去掉浮起的瘪谷；2）将种子放入250ml无菌烧杯中(种子数量约占1/3体积)，用200ml 70%酒精消毒2分钟；（在操净工作台上进行无菌操作）3）加入250ml 25%次氯酸钠（NaClO）溶液，同时加数滴吐温-20，浸泡90分钟；4）倒去NaClO溶液，用无菌蒸馏水清洗种子4-5遍。
2．诱导与继代培养：（以下步骤需无菌操作）1）用镊子夹住种子，在无菌滤纸上用钢钩挤出幼胚，置入诱导培养基中；2）操作完毕后封好培养皿(一般保鲜膜)，在暗处适温下（25-28℃）培养5天；3）继代培养。
用镊子剥下胚性愈伤组织（去掉芽及膜状物），置入继代培养基中（凸起面向上），暗处适温下（25-28℃）培养3天。
（二）以水稻成熟胚为试材诱导愈伤组织1．消毒：取水稻成熟种子，人工或者机械脱壳，挑选饱满光洁无菌斑的种子，按以下步骤消毒：1）将适量种子放入10ml离心管中（100颗左右），倒入75%酒精消毒2分钟；2）倒去酒精，加入一定量的0.1%升汞溶液，浸泡10分钟；3) 倒去次氯酸钠溶液，用无菌蒸馏水清洗种子5-6遍，最后一遍浸泡30分钟。
2．诱导与继代培养：（以下步骤需无菌操作）1）种子放在无菌滤纸上吸干，置入成就胚诱导培养基中，每皿12－14颗；2）操作完毕用封口膜（Micropore TM Surgical Tape）封好培养皿，在28℃光照培养箱，暗培养培养3周；3）在超净工作台上打开培养皿，用镊子挑取自然分裂的胚性愈伤组织（淡黄色，致密呈球状，去除种子和芽），置入继代培养基中，在28℃光照培养箱，继代培养1周（2周愈伤组织更为松散）。
（如不马上用，需转移至暗处，于22℃继续培养1周）二、农杆菌培养挑取农杆菌单克隆或吸取所保藏的农杆菌菌液100µl于4ml YEP（含50mg/lKan和50mg/l Str）培养液中，28℃，250rpm振荡培养20-36h至菌液OD600为0.8-1.0（颜色接近橙黄色）。
转基因大米的利与弊
转基因大米的利与弊当下转基因食品开始流行在人们的餐桌上，但是每一种事物都有它的两面性，可以说转基因食品是一把双刃剑。
（一）转基因大米对人类体质弊转基因大米进入人体以后,可能对人体健康产生危害。
首先,大多数转基因食品中引入的外源蛋白质进入人体以后可能产生新的过敏物质,引起人体的过敏反应。
其次,在构建转基因食品过程中使用的载体大部分是抗生素标记基因,虽然一般情况下抗生素标记基因在肠道中水平转移的可能性很小,但是在人体的体质很弱或抵抗力下降时,抗生素标记基因在肠道中水平转移的可能性会增大,通过转移可能诱导耐药菌株的产生,从而使人体产生对某些抗生素的抗药性。
再次,转基因食品中导入的基因来自于各种各样的其他生物,这些外来基因转入到食品中以后,可能打破生物原有基因的内在管理体制,使原先关闭的基因被打开,产生一种新的毒素,还有可能产生病毒重组问题。
利转基因大米摆脱了育种对时间的束缚，可以选择任何1个基因转进去，就可得到1个相应的新品种，不用再花那么长的时间筛选了。
传统的育种只能是同种生物杂交，而转基因技术不但可以把不同植物的基因进行组合，而且还可以把动物的基因人的基因组合到植物里去。
通过转基因技术可培育出高品质的新品种，以减少对农药化肥和水的依赖，降低农业成本，从而降低食品的价格。
转基因食品可以摆脱季节、气候的影响，让人们一年四季都可吃到新鲜的食物。
（二）转基因大米与环境弊大量的转基因作物进入自然界以后,还可能会对自然界的生物以及生态系统造成危害。
首先,进入到自然界的转基因作物的抗性基因可能传递到其野生亲缘物种中,造成难以控制的基因扩散和基因污染。
加拿大在第一次大面积种植转基因油菜后,在其农田里便发现有多种抗除草剂特性的杂草化油菜植株。
其次,插人了抗虫或抗真菌基因的作物除了对目标生物起作用之外,还可能对非目标生物起作用。
用转基因抗虫玉米分别饲喂玉米害虫钻心虫和益虫草聆,在钻心虫的死亡率高达60%的同时,草岭的成熟期也比正常时间晚了3天。
转基因大米培育过程-PPT课件
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10月24日的武汉凉爽宜人，华中农业大学校园的法国梧桐 依然郁郁葱葱。该校园林植物遗传改良小组曾培育成功一 批无毛梧桐树，春天梧桐飞絮的问题靠转基因技术得以解 决。 在这所学校的南端是一大片实验田，未收割的转基因水稻 金黄一片，一部分饱满的稻穗被选作种子，晾晒在地头。 虽然水稻是一种自花授粉植物，但是为了防止小概率花粉 飘移的发生，转基因水稻实验田一边筑起高墙，一边是近 60亩的湖面，以保证实验田与外界环境的完全隔离。 10月初，这里收获了十来斤黄金大米，除去给实验室、上 级单位和品尝会的那部分，还剩两斤多。现在黄金米田里 只有簇簇稻蔸和零星几粒碎米。这里的研究人员每次离开 田埂前总要拍打衣裤，避免无意带出种子。黄金大米项目 负责人陈浩教授说，依据转基因作物实验的规范要求，包 括稻秆在内的一切材料不允许运出实验范围，只能就地点 火销毁。华中农大严建兵教授解释，如此严格的实验要求 并不表明转基因作物存在什么难以预料的风险，仅仅是实 验程序要求，从科学角度看并无必要。
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一袋有机米是如何养成的
一袋有机米是如何养成的作者：暂无来源：《环境与生活》 2016年第4期一袋有机米，最初只是一粒粒的种子，它们从青青的秧苗长成金灿灿的稻穗，再进入千家万户的锅里，让人齿颊留香，期间的经历颇多曲折。
它们可能在幼苗时受过小鸭子的呵护，可能在抽穗时目睹过火山的爆发，可能在收获季匆匆告别东南亚的梯田……本文将为大家讲述有机米在世界各个角落的生长故事。
柬埔寨：种出世界最佳稻米自古以来，中南半岛就是最著名的稻米产区之一，这里具有得天独厚的气候和地理条件，著名的有机大米柬埔寨隆多花香米（PhkaRomduol）就在这里生长。
2012 ～ 2014年，隆多花香米连续3年蝉联世界最佳稻米评比冠军。
茶胶省特里昂盛产隆多花香米。
以往该地农民种植水稻需要依赖农药才能高产，农田开销有五六成花在了种子、农药与化肥上，经济成本高昂，也给环境带来了沉重负担。
在非政府组织柬埔寨农业研究与发展中心的帮助下，当地人纷纷转向种植有机水稻隆多花，不过，这个品种一年只能种1季，而以往其他品种一年可种植3季。
茶胶省特里昂的妇女妮恩2011年转向有机种植后，每年净收入增加到7500美元。
每年她会保存大约20至30公斤优质稻种作为下季的稻种，从不购买种子。
种植中只用牛来犁田，她说为了环境、消费者和个人健康选择种植有机大米。
在柬埔寨农业研究与发展中心举办的比赛中，妮恩获得“最成功稻农奖”，因此获得3头耕牛。
此外经该中心的技术培训，她还利用沼气发电，确保农业的可持续经营。
印度：用植物制成绿肥印度有机香米以其独特的外形（粒特长）和风味受到消费者的欢迎，2/3的产量供出口，在欧盟有机大米市场上颇受追捧。
从印度有关农业媒体发布的信息来看，其有机大米的栽培可谓精耕细作。
种子下地前先用浓度15%的盐溶液浸泡，播种时间在每年6月15日前后。
在肥料选择上，印度农民经常施用绿色植物体制成的绿肥，养分全面，且改良土壤效果明显。
此外，人畜粪便经过堆肥处理也是他们经常施用的有机肥料。
水稻转基因组织培养步骤
农杆菌介导的转化一．试剂1 6-BA (6-BenzylaminoPurine) Sigma Cat No. B-58982 KT (Kinetin) Sigma Cat No. K-07533 NAA (Napthalene acetic acid) Sigma Cat N-06404 IAA (Indole-3-acetic acid) Sigma Cat No. I-51485 2,4-D (2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) Sigma Cat No. D-84076 Kanamycin USB Cat No. 179247 CH (Casein Enzymatic Hydrolysate) Sigma Cat No. C-72908 Hn (hygromycin B) GiBco BRL Cat No. 10687-0109 Cn (Carbenicillin) 国产分装10 Nicotinic acid Sigma Cat No. N-076511 Pyridoxine HCl Sigma Cat No. P-866612 Thiamine HCl Sigma Cat No. T-390213 Inositol Sigma Cat No. I-301114 Phytagel Sigma Cat No. P-816915 Dimethyl Sulfoxide-DMSO Sigma Cat No. D-587916 X-gluc (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-D-galactoside) Sigma Cat No. B-378317 AS (Acetosringone) Aldrich chem., CO 01531 EG二．溶液1.MS maxNH4NO316.5gKNO319.0gKH2PO4 1.7gMgSO4∙7H2O 3.7gCaCl2∙2H2O 4.4g 或CaCl2 3.32g逐一溶解药品后，加dH2O定容到1000ml。
水稻转基因实验方法与步骤
水稻转基因一、实验目的1.学习水稻组织培养的方法2.学习水稻转基因的方法二、实验原理目的基因克隆到双元载体中，双元载体转入农杆菌，然后携带双元载体的农杆菌侵染水稻愈伤组织，通过T-DNA插入，把我们的目的基因整合到水稻染色体上。
历史：农杆菌感染受伤的植物产生冠瘿瘤病，发现是由Ti质粒引起，同时做杂交，发现只有T-DNA（transferred DNA）这一部分被整合到植物染色体上了。
三、试验步骤：一、水稻愈伤组织的诱导（一）以水稻幼胚为试材诱导愈伤组织1．消毒：取水稻未成熟种子（灌浆期），按以下步骤消毒：1）用自来水冲洗种子，去掉浮起的瘪谷；2）将种子放入250ml无菌烧杯中(种子数量约占1/3体积)，用200ml 70%酒精消毒2分钟；（在操净工作台上进行无菌操作）3）加入250ml 25%次氯酸钠（NaClO）溶液，同时加数滴吐温-20，浸泡90分钟；4）倒去NaClO溶液，用无菌蒸馏水清洗种子4-5遍。
2．诱导与继代培养：（以下步骤需无菌操作）1）用镊子夹住种子，在无菌滤纸上用钢钩挤出幼胚，置入诱导培养基中；2）操作完毕后封好培养皿(一般保鲜膜)，在暗处适温下（25-28℃）培养5天；3）继代培养。
用镊子剥下胚性愈伤组织（去掉芽及膜状物），置入继代培养基中（凸起面向上），暗处适温下（25-28℃）培养3天。
（二）以水稻成熟胚为试材诱导愈伤组织1．消毒：取水稻成熟种子，人工或者机械脱壳，挑选饱满光洁无菌斑的种子，按以下步骤消毒：1）将种子放入100ml无菌烧杯中，倒入70%酒精消毒2分钟；2）倒去酒精，加入100ml 20%次氯酸钠（NaClO）溶液，浸泡30分钟；3) 倒去次氯酸钠溶液，用无菌蒸馏水清洗种子4-5遍，最后一遍浸泡30分钟。
2．诱导与继代培养：（以下步骤需无菌操作）1）种子放在无菌滤纸上吸干，置入成就胚诱导培养基中，每皿12－14颗；2）操作完毕用封口膜（Micropore TM Surgical Tape）封好培养皿，在28℃光照培养箱，培养3周；3）在超净工作台上打开培养皿，用镊子挑取自然分裂的胚性愈伤组织（淡黄色，致密呈球状），置入继代培养基中，在28℃光照培养箱，继代培养1周。
转基因大米常识问答
转基因大米常识问答1. 什么是已获我国安全认证的转基因大米？答：2009年10月，中国生物安全网公布的《2009年第二批农业转基因生物安全证书批准清单》中，序号为第41的批准项目是名为“华恢1号”和“BT汕优63”的转基因抗虫水稻。
其中，“华恢1号”和“BT汕优63”转入的抗虫蛋白基因均是Bt融合型杀虫蛋白基因Cry1Ac/Cry1Ab。
2. 什么是Bt？答：很多人会误解Bt就是杀虫蛋白或者杀虫毒蛋白，这其实是不准确的。
Bt是苏云金芽孢杆菌的英文Bacillust huringiensis的缩写，即Bt。
1901年日本人石渡从病蚕尸体中分离出一株所谓碎倒细菌(sotto. bacteria)。
1911年Ernst Berliner在德国苏云金(Thuringia)的一个面粉厂的地中海粉斑螟患病幼虫中又分离到这种产伴孢晶体的芽孢杆菌。
1915年Ernst Berliner 将其定名为苏云金芽孢杆菌，一般称苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis Berliner)，并指明苏云金杆菌含有伴胞晶体。
3.什么是Bt杀虫蛋白？答：1956年Angus证实杀虫活性物质位于伴孢晶体之中。
他将伴孢晶体与孢子分开之后，单独伴孢晶体仍然存在杀虫活性，证明了苏云金芽孢杆菌中的伴孢晶体蛋白是杀虫活性的主要来源。
苏云金芽抱杆菌大多数菌株都能产生多种类型的伴胞晶体蛋白，即δ一内毒素或杀虫晶体蛋白（即Bt杀虫蛋白，简称为Bt蛋白）对鳞翅目、双翅目、鞘翅目、膜翅目、同翅目、直翅目、食毛目等多种昆虫，以及线虫、蜡类和原生动物等具有特异性的杀虫活性。
4. Bt蛋白有多少种？答：迄今为止，已分离测定了100多个杀虫晶体蛋白基因序列, 1989年Hofte和Whiteley根据晶体蛋白的氨基酸序列和杀虫谱的不同，将已经发表的42种晶体蛋白分为5群14亚类。
其中具有溶血溶细胞作用的27kDa晶体蛋白基因被命名为cyt基因，其他只有杀虫活性的13亚类命名为狭义的晶体蛋白基因，即cry基因。
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➢ 在这所学校的南端是一大片实验田，未收割的转基因水稻 金黄一片，一部分饱满的稻穗被选作种子，晾晒在地头。 虽然水稻是一种自花授粉植物，但是为了防止小概率花粉 飘移的发生，转基因水稻实验田一边筑起高墙，一边是近 60亩的湖面，以保证实验田与外界环境的完全隔离。
➢ 10月初，这里收获了十来斤黄金大米，除去给实验室、上
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金米是怎样炼成的
——转基因大米培育过程 2013.10.31
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➢ 10月19日，全国首届黄金大米品尝会在华中农业 大学举行，该院生命科学技术学院院长张启发院 士在品尝会上说：“转基因水稻产业化的决策不 应受制于民意，而应按照法规和程序走，相信科 学共同体的决定，主管部门不拍板，导致转基因 水稻产业化错失良机，再拖延将误国。”张启发 院士的言论再次引起业内外对转基因食品的讨论。 有支持者，有反对者。关注的焦点还是转基因食 品到底安全还是不安全。
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刚刚从愈伤组织中分离出来的转基因幼苗。
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可编抗辑虫版 转基因水稻的幼苗在光照培养室生长16。
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16 14
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水稻的实验田，为防止迁移性害虫影响周边农作物，此种转基因水稻被纱布笼罩起来。
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5
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➢ 陈浩说，黄金大米仅仅是通过转入胡萝卜素合成途 径中的两个基因改良了其营养性状，口感、种植方 式等其他方面与普通大米并无不同，所以说黄金大 米污染环境、影响生育完全没有道理。关于为什么 美国不种黄金米的问题，陈浩解释说，大米并非美 国人的主食，水稻在美国种植面积很小，而且维生 素A缺乏症主要存在于亚非地区的发展中国家，菲 律宾或将于明年推广种植。
级单位和品尝会的那部分，还剩两斤多。现在黄金米田里
只有簇簇稻蔸和零星几粒碎米。这里的研究人员每次离开
田埂前总要拍打衣裤，避免无意带出种子。黄金大米项目
负责人陈浩教授说，依据转基因作物实验的规范要求，包
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火销毁。华中农大严建兵教授解释，如此严格的实验要求
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10月初，华中农工业大学收获了十来斤黄金大米，除去给实验室、上级单位和品尝会的那
部分，还剩两斤多。现在黄金米田里只有簇簇稻蔸和零星几粒碎米。这里的研究人员每次
离开田埂前总要拍打衣裤，避免无意带出种子。图为研究人员在查看抗迁移性害虫转基因
➢ 第一代黄金大米2000年推出，2005年，美国生物 技术公司先正达大幅度提高了黄金米中胡萝卜素 的含量，并放弃所有相关专利权，无偿提供给发 展中国家使用。华中农大正是参照了先正达的技 术文献进行了黄金大米实验。
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➢ 10月24日的武汉凉爽宜人，华中农业大学校园的法国梧桐 依然郁郁葱葱。该校园林植物遗传改良小组曾培育成功一 批无毛梧桐树，春天梧桐飞絮的问题靠转基因技术得以解 决。
2013 10 24
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资料
➢ 转基因技术诞生于1971年，全世界范围内成功获 得的转基因植物至少有35科、200多种。多数人只 知道水稻、玉米、大豆等作物的转基因研究，其 实，蓝色玫瑰花、多色牵牛花、抗虫棉花、耐储 藏的“百日鲜”番茄都是转基因技术的产物。
并不表明转基因作物存在什么难以预料的风险，仅仅是实
验程序要求，从科学角度看并无必要。
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➢中国黄金大米研究始于2011年，是华中农大 的一个常规育种实验。2012年，湖南黄金 大米儿童“人体实验”掀起舆论狂潮，之 后媒体和官方澄清这是一次人体吸收转化 实验而非安全性实验，但引发民众对转基 因技术的猜疑和恐慌一直在持续。黄金大 米项目负责人陈浩说，黄金大米技术已经 成熟而且现阶段不涉及商业推广，华农版 黄金大米的实验并未受到这一事件的影响。
材料不允许运出实验范围，只能就地点火销毁。华中农大严建兵教授解释，如此严格的实
验要求并不表明转基因作物存在什么难以预料的风险，仅仅是实验程序要求，从科学角度
看并无必要。图为挑选出的饱满种子晾晒在实验田边，人工选育是历史最悠久的一种驯化
作物的方法。
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今年收获的华农版黄金大米。
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华农版黄金大米（左）与普通大米对比图。
可抗编虫辑版转基因水稻的幼苗正在愈伤组织中生长12 。
实之在在 验后华愈 。将中伤
送农组 至大织 冬的中 季光生 气照长 候培的 温养转 暖室基 的生因 海长幼 南一苗 省段。 下时幼 田间苗
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中一 分名 离实 出验 来员 。把
抗 虫 转 基 因 水 稻 幼 苗 从 愈 伤 组 织
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