(整理)常用哺乳动物细胞培养基配方
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂，它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。
下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。
一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中，它的使用范围很广。
常用的磷酸盐缓冲液有PBS（磷酸盐缓冲盐水），配方如下：-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中，pH值调到7.4，即可得到1×PBS缓冲液。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。
常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。
以下是Tris-HCl缓冲液的配方：- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中，然后添加水调至1 L，pH值调节到目标值即可。
Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似，只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。
3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中，用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。
以下是Glycine缓冲液的配方：- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中，pH值调至8.3，即可得到1×Glycine缓冲液。
1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一，用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。
以下是LB培养基的配方：- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中，加热至溶解，然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。
2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基，常被用于重组DNA的传输。
细胞培养的最佳生长条件和培养基配方
细胞培养的最佳生长条件和培养基配方细胞培养是一种很重要的实验技术，它可以帮助我们了解和研究细胞的生命活动过程。
在进行细胞培养之前，我们需要明确和了解细胞培养的最佳生长条件和培养基配方。
这些因素直接影响着细胞的生长和繁殖，因此选择合适的生长条件和培养基配方对于获得高质量的细胞培养是至关重要的。
细胞培养的最佳生长条件受到多个因素的影响，其中最重要的是温度、湿度和二氧化碳浓度。
对于大多数哺乳动物细胞而言，理想的生长温度往往在37摄氏度左右。
较低的温度会减缓细胞代谢活动，而过高的温度则会导致细胞脱水、代谢异常甚至死亡。
此外，细胞培养的湿度也非常重要。
过低的湿度会导致细胞脱水，而过高的湿度则可能引发细菌或霉菌的生长，对细胞培养产生不利影响。
通常情况下，细胞培养时会在培养器内加入一定浓度的二氧化碳，以维持细胞培养的最佳PH值。
大多数情况下，使用5% CO2浓度可以满足细胞的生长需求。
除了生长条件外，培养基配方也是细胞培养中不可或缺的因素。
通常情况下，培养基可以分为基础培养基和补充物两部分。
基础培养基提供了细胞所需的基本营养物质，如氨基酸、糖类、无机盐和维生素等。
常用的培养基包括DMEM （Dulbecco's Modified Eagle Medium）、RPMI-1640和MEM (Minimum Essential Medium)等。
这些培养基在组成和配方上略有区别，根据细胞的类型和需求，选择合适的基础培养基是十分重要的。
除了基础培养基外，补充物也是细胞培养中必不可少的。
补充物可以提供特定的生长因子、激素、细胞黏附因子和补充物等，以满足不同细胞的特殊需求。
常见的补充物有胎牛血清、人血清、胰岛素、转铁蛋白和脯氨酸等。
胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）是一种广泛使用的培养基补充物，它提供了丰富的生长因子、激素和营养物质，可以促进细胞的快速生长和繁殖。
然而，由于FBS来源和成分的不确定性，一些研究也开始使用人血清作为替代品，以减少动物血清对实验结果的可能影响。
细胞培养基本实验操作一般培养试剂介绍常用培养基及基本特性 HBSS的配制和使用攻略
常用培养基及基本特性1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
2、Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mM HEPES缓冲液。
6、McCoy’s 5AMcCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
经常使用哺乳动物细胞培育基配方
30
生物素
11
L-赖氨酸盐酸盐
31
D-泛酸钙
12
L-甲硫氨酸
32
叶酸
13
L-苯丙氨酸
33
i-肌醇
14
L-脯氨酸
34
烟酰胺
15
L-丝氨酸
35
氯化胆碱
16
L-苏氨酸
36
盐酸吡哆醇
17
L-色氨酸
37
核黄素
18
L-酪氨酸
38
盐酸硫胺素
19
L-缬氨酸
39
维生素 B 12
20
对氨基苯甲酸
DMEM(A) 基（粉末型）成份
28
盐酸硫胺
13
L-亮氨酸
29
盐酸吡哆辛
14
L-盐酸赖氨酸
30
葡萄糖
15
L-甲硫氨酸
31
丙酮酸钠
16
L-苯丙氨酸
32
酚红
DMEM(L) 基（粉末型）成份
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
1
无水氯化钙
17
L-丝氨酸
2
硝酸铁 .9H 2 O
18
L-苏氨酸
3
氯化钾
19
L-色氨酸
L-天门冬氨酸
33
D-泛酸钙
13
L-盐酸半胱氨酸
34
叶酸
14
L-盐酸胱氨酸
35
肌醇
15
L-谷氨酰胺
36
烟酰胺
16
L-谷氨酸
37
氯化胆碱
17
甘氨酸
38
培养基配方
一、哺乳动物培养基1、DMEM培养基DMEM培养基低糖(干粉) D2902 10X1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L的葡萄糖。
不含酚红和和碳酸氢钠。
50L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5523 10×1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L葡萄糖，不含碳酸氢钠。
2×5L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
5L50L DMEM培养基低糖（干粉）D5030 10×1L 不含L-谷氨酰胺，葡萄糖，酚红，丙酮酸钠和碳酸氢钠。
10L每升培养基含8.3g干粉。
配制时每升加1.0g葡萄糖，0.584g 50LL-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5280 10×1L 可以高压消毒。
10L含1000 mg/L的葡萄糖。
不含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
50L每升培养基含9.6g干粉。
配制时每升加0.584g L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（液体）D5546 500ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺。
用盐6×500ML 酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
24×500ML1L6×1L DMEM培养基低糖（液体）D5921 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺和酚红。
500ML用盐酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
6×500MLDMEM培养基低糖（液体）D6046 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖，L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
用盐酸维500ML 生素B6代替盐酸吡哆醛。
6×500ML1LDMEM培养基低糖（液体）D2429 100ML 1×的培养基含有1000 mg/L的葡萄糖。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文以下是一些常见的培养基配方：1.LB培养基配方：-水：1000mL-蛋白胨：10g-酵母提取物：5g-NaCl：10g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。
加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
2.TSB培养基配方：-水：1000mL-蛋白胨：17g-酵母提取物：3g-葡萄糖：2.5g-NaCl：5g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。
加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
3.M9盐基培养基配方：-水：1000mL-Na2HPO4：6g-KH2PO4：3g-NaCl：0.5g-NH4Cl：1g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。
加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
4. MacConkey琼脂培养基配方：-水：1000mL-蛋白胨：17g-胆盐混合物：1.5g-红薯提取物：10g-中性红：0.03g-结晶紫：0.001g-蔗糖：10g-氯化钠：5g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.1、加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
5. Sabouraud琼脂培养基配方：-水：1000mL-葡萄糖：40g-氯化钠：5g-氯化钾：1g-磷酸二氢钾：1g-氯化镁：0.5g-氯化钙：0.01g-硫酸亚铁：0.5g-红曲霉素：0.05g*将以上成分溶解在水中，并调节pH至5.6、加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
以上是一些常见的培养基配方，不同的微生物或细胞需要不同的培养基来提供适合它们生长和繁殖的营养条件。
因此，在实际使用时，需要根据具体需求和文献资料进行配方的选择和调整。
293e细胞培养方法
293e细胞培养方法293E细胞是一种常用的哺乳动物细胞系，广泛应用于生物医学研究和重组蛋白表达等领域。
本文将介绍293E细胞的培养方法，包括细胞培养基的配制、细胞的传代和细胞的冻存。
一、细胞培养基的配制293E细胞的培养基配制相对简单，常用的培养基是DMEM （Dulbecco's Modified Eagle Medium）基础上加入适当的补充剂。
1.1 DMEM的配制将DMEM粉末加入无菌的蒸馏水中，并加热至溶解。
待完全溶解后，调节pH值至7.4，并加入适量的无菌纤维素。
1.2 培养基的补充剂将DMEM中加入10%的胎牛血清（FBS），1%的L-谷氨酰胺（L-Gln），100 U/mL的青霉素和100 μg/mL的链霉素。
混匀后滤过以获得无菌的培养基。
二、细胞的传代293E细胞的传代是维持细胞生长和增殖的重要步骤。
下面将介绍293E细胞的传代方法。
2.1 细胞解离用PBS（磷酸盐缓冲液）将培养皿中的细胞洗涤一次，去除培养基。
加入适量的胰酶或胰酶-乳酸酐（Trypsin-EDTA）溶液，并在37°C的恒温培养箱中孵育5-10分钟，直至细胞从培养皿上脱落。
2.2 细胞传代将细胞解离液转移至离心管中，离心300×g，室温下离心3-5分钟。
去除上清，加入适量的培养基悬浮细胞，并用移液器进行混匀。
将细胞悬液装入新的培养皿中。
2.3 细胞的培养条件将新传代的293E细胞放入37°C的恒温培养箱中，培养基的补充和细胞的观察一般每两天进行一次。
当细胞生长至80%-90%的密度时，可以进行下一次的传代。
三、细胞的冻存3.1 冻存液的配制将培养基中的FBS浓度提高至20%，添加相同体积的DMSO（二甲基亚砜），混匀后过滤灭菌得到冻存液。
3.2 细胞冻存将培养皿中的293E细胞加入足够量的培养基，离心300×g，室温下离心3-5分钟。
去除上清，加入冻存液悬浮细胞，并用移液器进行混匀。
各种培养液的配方
各种培养液的配方不同的细胞类型和培养目的需要使用不同的培养液。
下面列举一些常见的细胞培养液配方及其用途。
1.DMEM培养液：DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种最常用的细胞培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。
以下是DMEM培养液的配方：-1×DMEM：将DMEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%胎牛血清（FBS）：将FBS加入1×DMEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素（如青霉素/链霉素）加入1×DMEM中，使最终浓度为1%。
2.RPMI1640培养液：RPMI1640是一种适用于淋巴细胞和白血病细胞的培养基。
以下是RPMI1640培养液的配方：-1×RPMI1640：将RPMI1640粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×RPMI1640中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×RPMI1640中，使最终浓度为1%。
- 2-mercaptoethanol：将2-mercaptoethanol加入1×RPMI 1640中，使最终浓度为0.05mM。
3.MEM培养液：MEM（Minimum Essential Medium）是一种用于哺乳动物细胞培养的基础培养液。
以下是MEM培养液的配方：-1×MEM：将MEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×MEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×MEM中，使最终浓度为1%。
-1×非必需氨基酸：将非必需氨基酸（如谷氨酰胺、苏氨酸等）加入1×MEM中。
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常用哺乳动物细胞培养基配方
本文档列出了几种常用哺乳动物细胞培养基的成分，包括RPMI-1640、DMEM、MEM、M199、F-10、F-12、DMEM/F-12 1:1、McCoy’s 5A 等等。
RPMI-1640 无酚红细胞培养基（粉末型）成分
RPMI-1640 细胞培养基（粉末型）成分
DMEM(A) 细胞培养基（粉末型）成分
DMEM(H) 细胞培养基（粉末型）成分
DMEM(L) 细胞培养基（粉末型）成分
MEM(A) 细胞培养基（粉末型）成分
MEM(G) 细胞培养基（粉末型）成分
MEM(H) 细胞培养基（粉末型）成分
MEM(L) 细胞培养基（粉末型）成分
MEM(α) 细胞培养基（粉末型）成分
199细胞培养基（粉末型）成分
199(无酚红)细胞培养基（粉末型）成分
199(无血清)细胞培养基（粉末型）成分
F-12细胞培养基（液体）成分
DMEM/F-12 1:1细胞培养基（液体）成分。