几种培养基的配方
几种主要培养基配方
几种主要培养基配方在微生物学和生物化学实验中，培养基是一种提供营养物质，促进微生物或细胞生长和繁殖的人工培养介质。
培养基配方的选择取决于所培养的生物的特性和需要。
以下是几种常见的主要培养基配方：1.液体培养基液体培养基是一种透明液体，主要由多种有机和无机化合物组成。
它提供了细胞所需的所有营养物质，并具有较高的溶解性。
液体培养基可以用于菌苗投放、菌种产生等实验。
常见的液体培养基配方包括：-LB培养基：由蛋白胨、酵母提取物和盐酸混合而成。
适用于大多数细菌的培养。
-TB培养基：类似于LB培养基，但含有甘油和磷酸盐缓冲液。
适用于产生大量细胞质或蛋白质的生物学实验。
-BHI培养基：由脑心肝提取物和酵母提取物组成。
适用于革兰氏阳性菌的培养。
-TSB培养基：由胨、酵母提取物和盐溶液混合而成。
适用于细菌和真菌的培养。
2.固体培养基固体培养基是将适当的凝固剂添加到液体培养基中，形成固体状态。
它用于细菌、真菌和许多其他微生物的分离和培养。
常见的固体培养基配方包括：-培养基琼脂：由琼脂和液体培养基配方混合而成。
适用于各种微生物的培养。
-布置气体：含有牛血、蔗糖和琼脂的培养基。
适用于肺炎球菌和其他嗜血菌的培养。
-罗盘琼脂：含有羊血、肉蔗糖和琼脂的培养基。
适用于嗜肺军团菌的培养。
-马铃薯葡萄糖琼脂：由马铃薯汁、葡萄糖和琼脂组成。
适用于真菌的培养。
3.选择性培养基选择性培养基是一种能够选择特定细菌生长的培养基。
它包含了一些抑制其他微生物生长的成分，以便于所需微生物的分离。
常见的选择性培养基配方包括：- MacConkey琼脂培养基：含有胆盐、素碱和结晶紫的培养基。
适用于革兰氏阴性菌的培养。
-EMB琼脂培养基：含有艾希希氏菌靛蓝和素碱的培养基。
适用于弧菌、大肠杆菌等细菌的培养。
- Pseudomonas琼脂培养基：含有铜硫酸、锌酸和金属钠的培养基。
适用于绿脓杆菌的培养。
4.部分定义培养基部分定义培养基是一种含有部分有机和无机成分的培养基。
几种培养基的配方
几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。
根据微生物的特性和应用需求，可以设计出不同成分和配方的培养基。
以下是几种常见的培养基配方：1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）的配方：-牛肉膏：5g-蛋白胨：5g-水解酵母膏：1.5g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中，添加纯化琼脂，混合并加热直至溶解，然后倒入培养皿中。
2. EMB（Eosin Methylene Blue）培养基的配方：-蛋白胨：17g-明胶胨：3g-乳糖：10g-酵母提取物：3g-果糖：1g- Eosin Y：0.4g-亚甲蓝：0.065g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中，加热并搅拌至溶解，然后添加Eosin Y和亚甲蓝，最后加入纯化琼脂，混合并倒入培养皿中。
3. 铡锰培养基（Sabouraud Agar）的配方：-葡萄糖：40g-酵母膏粉：5g-水解麦粉：15g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中，加热并搅拌至溶解，然后添加纯化琼脂，混合并倒入培养皿中。
4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基（TRYPTICASE™SOYBROTH）的配方：-胰蛋白酶胨：15g-大豆酪蛋白胨：5g-食盐：5g-葡萄糖：20g-蒸馏水：1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中，混合并加热至溶解，然后冷却至室温。
5. M9盐碱培养基（M9 minimal medium）的配方：-磷酸一氢二钾：3g-硫酸镁：0.5g-氯化钠：0.5g- 氨氯化铁：7.5mg-葡萄糖：4g-去离子水：1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中，混合并加热至溶解，然后冷却至室温后添加葡萄糖。
这只是几种常见的培养基配方，实际上还有很多不同成分和配方的培养基。
146种常用培养基配方
146种常用培养基配方常用培养基是微生物学实验室中常见的一种实验材料，用于培养和繁殖微生物。
根据不同的微生物种类和培养需求，常用培养基可以有多种不同的配方。
下面将介绍一些常用的培养基配方，并对其成分和应用进行简要介绍。
1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）成分：肉汤、琼脂、葡萄糖、盐等。
应用：常用于一般微生物的培养和分离。
2. 大肠杆菌培养基（Luria-Bertani Agar）成分：酵母提取物、琼脂、葡萄糖、氯化钠等。
应用：适用于大肠杆菌等革兰氏阴性菌的培养。
3. 菌落计数培养基（Plate Count Agar）成分：琼脂、肉汤、葡萄糖、琼脂胆盐、酵母提取物等。
应用：用于菌落计数和微生物总数的测定。
4. 选择性培养基（Selective Agar）成分：琼脂、肉汤、葡萄糖、抗生素等。
应用：通过添加抗生素等物质，选择性地培养特定的微生物。
5. 巴斯德培养基（Pasteur Agar）成分：琼脂、肉汤、葡萄糖等。
应用：常用于无菌实验和微生物的贮存。
6. 铁琼脂培养基（Iron Agar）成分：琼脂、肉汤、葡萄糖、硫酸亚铁等。
应用：用于微生物对铁的利用能力的测试。
7. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar）成分：马铃薯汁、葡萄糖、琼脂等。
应用：常用于真菌的培养和繁殖。
8. 洗涤剂含氧琼脂培养基（Tween 80 Agar）成分：琼脂、肉汤、葡萄糖、洗涤剂Tween 80等。
应用：用于细菌的产气试验。
9. 黄曲霉培养基（Aspergillus Agar）成分：琼脂、麦芽提取物、葡萄糖等。
应用：用于黄曲霉等真菌的培养和繁殖。
10. 洋葱素琼脂培养基（Onion Extract Agar）成分：洋葱提取物、琼脂、葡萄糖等。
应用：用于细菌的培养和繁殖。
以上仅列举了一些常用的培养基配方，实际上常用培养基有很多种，每种都有其特定的用途和应用范围。
不同的微生物对培养基成分的要求也有所不同，因此在实验中选择适合的培养基对于培养和繁殖微生物是非常重要的。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境，其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一，其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下：-琼脂：15g-蔗糖：10g-牛肉膏粉：3g-磷酸二氢钾：1g-氯化钠：5g-氯化镁：0.5g-氯化钾：0.2g-高锰酸钾：0.0001g-蛋白胨：3g-酵母提取物：3g- 菜子油：0.5ml- 蒸馏水：1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基，其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下：-牛肉膏粉：3g-蛋白胨：5g-葡萄糖：2g-氯化钠：5g-磷酸二氢钾：2g-氯化镁：0.5g- 蒸馏水：1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基，其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下：-紫砂：15g-蔗糖：30g-蛋白胨：2g-磷酸二氢钾：1g-氯化钠：5g-氯化钙：0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基，其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下：-麦芽粉：10g-蔗糖：30g-蛋白胨：5g-氯化钠：5g-氯化钙：0.1g- 蒸馏水：1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基，其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下：-铁蛋白：10g-蔗糖：10g-蛋白胨：2g-氯化钠：5g-磷酸二氢钾：1g-氯化钙：0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良，以提高微生物的生长和培养效果。
同时，在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作，以避免试验的污染和杂质的干扰。
70种常用培养基配方
70种常用培养基配方培养基是一种在实验室中用于培养和生长微生物的基质。
根据微生物的不同需求，培养基可以分为许多不同类型。
下面列举了70种常用的培养基配方。
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）Tryptone 10 gYeast extract 5 gNaCl10gAgar 15 g加水至1L，调pH至7.0用途：培养大肠杆菌等广泛应用于分子生物学实验。
2. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar）胰蛋白胨4g葡萄糖20g马铃薯提取物200gAgar 15 g加水至1L用途：用于真菌的培养和研究。
3.NIH3T3细胞培养基DMEM培养基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 500 mL胎牛血清 (Fetal bovine serum) 10%青霉素/链霉素 (Penicillin/Streptomycin) 1%用途：常用于培养和传代小鼠成纤维细胞株。
4. 酵母饼干培养基（Yeast Extract Peptone Dextrose Agar）酵母提取物10g蛋白胨10g葡萄糖20gAgar 15 g加水至1L用途：适用于酵母菌的培养和繁殖。
5. BHIA培养基（Brain Heart Infusion Agar）大脑提取物17.5g胃蛋白胨10g葡萄糖2gAgar 12 gNaCl5g加水至1L用途：常用于培养细菌。
6. M9盐基液（M9 Minimal Medium）Na2HPO46gKH2PO43gNaCl0.5gNH4Cl1g1MMgSO41mL加水至1L用途：适用于大肠杆菌等菌种。
7. SJ培养基（Sabouraud Dextrose Agar）蔗糖40g蛋白胨10gAgar 15 g加水至1L用途：适用于真菌的培养。
8.R2A培养基Dipotassium phosphate 0.3 g Monopotassium phosphate 0.3 gSodium pyruvate 0.3 gSodium glutamate 0.3 gYeast extract 0.5 gPeptone 0.5 gTryptone 0.5 gGlucose 0.5 gAgar 15 g加水至1L用途：适用于环境中的微生物。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质，能够为微生物提供所需的营养和环境条件。
不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件，因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。
下面是几种常见的培养基配方。
1.大肠杆菌液体培养基配方：-蛋白胨或复合氮源：10g-酵母浸出物：5g-葡萄糖：1g-NaCl：5g-K2HPO4：2g-MgSO4：0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方：-牛心提取物：3g-高级琼脂糖：15g-葡萄糖：10g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方：-玉米浸出物：4g-高级琼脂糖：15g-酵母浸出物：1g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方：-液体LB培养基：10mL-高级琼脂糖：15g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方：-羊血：50mL-肉浸出物：3g-酵母浸出物：3g-肉汤培养基：1L-红细胞素：5g-高级琼脂糖：3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方：-肉浸出物：5g-酵母浸出物：5g-NaCl：5g-蒸馏水：900mL- 加入0.1%的L-cysteine：10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项：-培养基中的成分应严格按照配方比例加入，并保持无菌。
-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。
-不同的微生物可能对一些成分非常敏感，需要根据实际情况进行微调。
-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整，一般在7.0左右。
-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中，避免阳光直射以防止成分分解。
这只是一些常见的培养基配方，不同的微生物有不同的需求，可以根据具体的情况进行配方的调整。
在实际使用中，还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。
146种常用培养基配方
146种常用培养基配方以下是一些常见的培养基配方：1.LB培养基：-牛肉浸液：10g-酵母浸粉：10g-纯化水：1L-加热溶解牛肉浸液和酵母浸粉在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
2.菌落计数培养基：-蛋白胨消化物：5g-酵母浸粉：2.5g-葡萄糖：1g-纯化水：1L-加热溶解蛋白胨消化物、酵母浸粉和葡萄糖在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
3.大肠杆菌选择性培养基：-精制豆粉精：10g-纵剖海藻酸钠：10g-氯化钠：5g-硫酸镁：0.2g-活性炭：1g-纯化水：1L-加热溶解精制豆粉精、纵剖海藻酸钠、氯化钠、硫酸镁和活性炭在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
4.SDA培养基（用于真菌培养）：-磷酸二氢钾：1g-葡萄糖：20g-氯化钠：5g-氯化钠：5g-酵母浸粉：10g-酪蛋白胨：5g-地蜡：20g-纯化水：1L-加热溶解磷酸二氢钾、葡萄糖、氯化钠、酵母浸粉、酪蛋白胨和地蜡在纯化水中，煮沸溶解后，灭菌。
5.霍乱弧菌选择性富营养培养基：-精制海藻剖面：23g-麦芽浸粉：10g-氯化钠：10g-磷酸二氢钠：1.5g-纯化水：1L-加热溶解精制海藻剖面、麦芽浸粉、氯化钠和磷酸二氢钠在纯化水中，煮沸溶解后，过滤灭菌。
这只是一些常用的培养基配方的例子，根据不同的微生物需要，还有更多类型的培养基配方可供选择。
每个培养基的配方具体组成和浓度可以根据实验需要进行调整和优化，以获得最佳的培养条件。
同时，配方中的成分应根据实验目的和研究对象的特性进行选择，以确保培养基能够提供必要的营养物质和环境条件，促进微生物的生长和培养。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法：1. LB培养基（Luria-Bertani）LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基，其配方包括：- 1% 蛋白胨（tryptone）: 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉（yeast extract）: 提供维生素和生长因子-1%NaCl（氯化钠）:调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基（Yeast extract-Peptone-Dextrose）YPD培养基常用于酵母菌的培养，其配方包括：- 1% 酵母提取物（yeast extract）: 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨（peptone）: 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖（dextrose）: 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基，其配方包括：-10%胎牛血清（FBS）:提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液（Penicillin-Streptomycin Solution）: 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺（L-Glutamine）: 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水：使混合液体稀释至所需体积配制方法：将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中，调整pH值至7.4，混合均匀即可。
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一. 土壤样品的采集第一种: 选择植被群落具有代表性的固定样方,除去地面植被和地表覆盖物,每样方采用土壤剖面法和多点混合取样法采样,将土样混匀,用四分法弃去多余样品,取500g装入灭菌信封, 带回实验室后立即进行土壤微生物分离（4℃保存）、计数。
第二种: 在小区内机械抽取 6 株样木，距树干基部0.5 m 呈梅花形分布挖取根系周围0～20 cm、20～40 cm 和40～60 cm 土样，分层充分混合后作为非根际土壤样品。
同时采集各层直径小于0.2～0.5 cm 细根上粘附的土壤，分层充分混合作为根际土壤。
供微生物分析的鲜土样装入已消毒过的密封塑料袋，带入实验室。
二. 三大类土壤微生物分离与数量测定1. 细菌的分离与数量测定(1)以平板表面涂抹法计数。
称取土壤鲜样10g在无菌条件下用无菌水配成不同浓度梯度悬浮液，取稀释度为10-3，10-4，10-5，10-6，10-7土壤悬浮液各50μL，接种于盛有灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的培养皿中,用无菌刮刀涂抹均匀。
每个浓度3个重复，恒温(28 ℃) 培养3d，选取每皿菌落数为15-150的1个稀释度统计菌落数，按下列公式计算细菌数量：菌数(cfu/ g) = （菌落平均数×稀释倍数）÷干土% （Ⅰ）牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，配方如下：牛肉膏3.0 g 琼脂18 g 蛋白胨5.0 g 蒸馏水1000mL pH7.0 —7.2 2. 真菌的分离与数量测定以平板表面涂抹法计数。
即称取土壤鲜样10 g ,在无菌条件下用无菌水配成不同浓度梯度悬浮液,取稀释度为10-2，10-3，10-4的土壤悬浮液各50μL，接种于盛有灭菌的马丁- 孟加拉红培养基的培养皿中,用无菌刮刀涂抹均匀。
每个浓度3个重复,恒温(25 ℃) 培养5～7 d，选取每皿菌落数为15～150 的1个稀释度统计菌落数计算真菌数量公式同公式（Ⅰ）。
马丁- 孟加拉红培养基，配方如下：葡萄糖10.0 g MgSO4.7H2O 1.0 g KH2PO4 1.0 g 琼脂15 g 蛋白胨 5.0 g 孟加拉红(Rose Bangal) 每升加1%溶液0.33mL 1% 链霉素3 mL 蒸馏水1000 mL pH自然临用前再加入1% 链霉素3 mL3. 放线菌数量测定以平板表面涂抹法计数。
除取稀释度为10–3，10–4，10-5的土壤悬浮液各50μl接种于盛有灭菌的改良高氏一号培养基外，其余与细菌数量测定方法相同。
恒温(28℃) 培养7～10 d，按上述方法和公式统计菌落数并计算细菌数量。
培养基改良高氏一号培养基，配方如下：可溶性淀粉20g KNO3 1.0g FeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 0.5g MgSO47H2O 0.5g NaCl 0.5 g 琼脂18 g K2Cr2O40.01 g 蒸馏水1000 ml pH7.2 ～7.4临用时加10%重铬酸钾1ml/300ml, 抑制细菌生长二.土壤各类微生物生理群落数量测定1. 好气性纤维素分解菌数量测定好气性纤维素分解菌数量测定采用平板表面涂抹法计数。
在灭菌的盛有赫奇逊氏培养基的培养皿中放一块直径与培养皿等大的灭菌无淀粉滤纸(事先用1%稀醋酸浸泡一昼夜，并用2%的苏打水洗到中性)，用干净、灭菌的玻璃刮刀压平。
取稀释度为10-2，10-3，10-4的土壤悬浮液各50ｕl，接种于附有滤纸的培养基中，用无菌刮刀涂抹均匀。
每个浓度3个重复，恒温(28℃)培养14d-18d，按上述方法和公式(Ⅰ)统计菌落数，计算每g干土中的菌数。
培养基配方如下:羧甲基纤维素纳10g (NH4)2SO40.5 g KH2PO4 1.0 g CaCl20.1 g MgSO40.2 g 琼脂20 g 蒸馏水1000 ml pH7.2—7.3 培养基采用赫奇逊( Hutchinson )氏培养基，配方如下:KH2PO41.0 g NaNO32.5 g NaCl 0.1 g CaCl20.1 g 琼脂20 g MgSO4. 7H20 0.3 g FeCl3 0.01 g 蒸馏水1000 ml pH7.2—7.3 2. 嫌气性纤维素分解菌数量测定嫌气性纤维素分解菌数量测定采用稀释法。
分别将15 ml培养基分装于试管中(深层造成嫌气条件)。
各管插入1条1cm×10cm滤纸条，一个大气压灭菌30min。
将稀释浓度为10-2，10-3，10-4，10-5的土壤悬液1 ml接入试管，每稀释度重复3次。
另取3支试管接种lml无菌水作对照，于28 —30℃培养14d—18d，取出检查滤纸上的溶解区或纸屑的腐烂情况，并观察滤纸条上是否出现菌落，以判断嫌气性纤维素分解菌的生长。
若在滤纸上生长，则常缀上黄色、褐色或黑色的斑点。
滤纸条一摇动立即破裂。
根据检查得出数量指标，然后根据数量指标查Mecrady表，得出菌数近似数，按公式(2)计算出每g干土中嫌气性纤维素分解菌的数量。
培养基采用奥曼粱斯基培养基，配方如下:(NH4)2SO4 1.0g K2HPO4 1.0g MgSO4.7H2O 0.5g NaCl 0.2g CaCO3 2.0g 蒸馏水1000m13. 自生固氮菌数量测定好气性自生固氮菌数量测定采用平板表面涂抹法计数。
除恒温(28℃)培养7d——l0d外，与真菌分离及其数量测定方法相同。
(除取稀释度为10–3，10–4，10-5的土壤悬浮液各50μl接种于盛有灭菌的改良高氏一号培养基外)培养基采用改良阿须贝(Ashby)无氮琼脂培养基，配方如下：葡萄糖l0.0g K2HPO40.2g K2SO40.2g NaCl 0.2g CaCO3 5g MgSO4.7H2O 0.2 g 琼脂18.0 g 蒸馏水1000 ml 4. 反硝化细菌数量测定采用稀释法。
分别将15 ml 培养基分装于试管中（造成嫌气条件）。
一个大气压灭菌20min。
将稀释度10–2，10–3，10–4，10–5，10–6的土壤悬浮液1 ml接入试管，每稀释度重复3 次。
领取试管接种1ml 无菌水作对照，与28-30℃培养14d，检查有无细菌生长，如有菌生长，一般有气泡出现，培养液浑浊。
同时使用奈氏试剂检查是否有氨产生（加入奈氏试剂，若有氨产生，则由黄色或褐色沉淀出现）。
再用格利斯试剂检查是否有NO2-出现（加入格利斯试剂，若有NO2-出现，则呈红色），并用二苯胺试剂检查是否有NO3-出现（加入二苯胺试剂，若有NO3-出现，则呈蓝色）。
根据检查得出数量指标，然后根据最大然或法查Mecrady 表，得出菌数近似数，计算公式同公式（Ⅰ）。
培养基采用组合培养基，配方如下：蛋白胨20.0g 葡萄糖1.0g NaHPO4 2.0g KNO3 1.0g 琼脂1.0g 蒸馏水1000ml三氮显色试剂配制与使用（氨氮、亚硝态氮和硝态氮）奈氏试剂的配制：将10g碘化汞和7g碘化钾溶于10ml水中，另将24.4g氢氧化钾溶于内有70ml水的100ml容量瓶中，并冷却至室温。
将上述碘化汞和碘化钾溶液慢慢注入容量瓶中，边加边摇动。
加水至刻度，摇匀，放置2天后使用。
试剂应保存在棕色玻璃瓶中，置暗处。
向培养液中加入奈氏试剂：如有氨氮存在（氨化细菌）将产生棕黄色络合物沉淀。
格里斯氏(Griess)试剂：A 液：对氨基苯磺酸0.5g，稀醋酸(10%左右)150mLB 液：α萘胺0.1g，蒸馏水20mL, 稀醋酸(10%左右)150mL二苯胺试剂：二苯胺0.5g 溶于l00mL 浓硫酸中，用20mL 蒸馏水稀释。
在培养液液中滴加A、B 液后溶液如变为粉红色、玫瑰红色、橙色或棕色等表示有亚硝酸盐（亚硝化细菌阳性）。
先加入格里斯A液，完全去除亚硝态氮（也可直接加入醋酸和对氨基苯磺酸），然后加1～2 滴二苯胺试剂；如溶液呈蓝色则表示培养液中存在有硝酸盐（硝化细菌阳性）。
5. 硝化细菌数量测定采用稀释法。
除只用格利斯试剂检查否有NO2-出现（加入格利斯试剂，若有NO2-出现，则呈红色）外，其余与反硝化细菌数量测定方法相同。
培养基采用改良斯蒂芬逊培养基, 配方如下：（NH4）2SO4 2.0g MnSO44H2O 0.01g NaHPO40.25g MgSO4 7H2O 0.03 g CaCO30.5g K2HPO40.75g 蒸馏水1000ml 6. 氨化细菌数量测定(还不确定)采用牛肉膏蛋白胨培养基测定调节PH7.2～7.4，121℃高压灭菌30min.将接种后的蛋白胨氨化培养基在25～28℃培养箱中培养2天，用或然记数法测定。
操作步骤（1）取牛肉膏蛋白胨液体培养基四支，分别接种土壤颗粒，大肠杆菌、枯草杆菌，余下一支不接种作为空白对照，在每支试管口悬挂一经无菌水湿润的石蕊试纸，并加好试管塞。
（2）将已经接种的培养管置于28--30℃培养5--7日。
（3）结果检测：观察各管石蕊试纸变色及培养液浑浊情况，用奈氏试剂检测是否有氨产生。
最大或然数表MPN计数是将待测样品作一系列稀释，一直稀释到将少量（如lm1）的稀释液接种到新鲜培养基中没有或极少出现生长繁殖。
根据没有生长的最低稀释度与出现生长的最高稀释度，采用“最大或然数”理论，可以计算出样品单位体积中细菌数的近似值。
具体地说，菌液经多次10倍稀释后，一定量菌液中细菌可以极少或无菌，然后每个稀释度取3—5次重复接种于适宜的液体培养基中。
培养后，将有菌液生长的最后3个稀释度（即临界级数）中出现细菌生长的管数作为数量指标，由最大或然数表（见附录九）上查出近似值，再乘以数量指标第一位数的稀释倍数，即为原菌液中的含菌数。
如某一细菌在稀释法中的生长情况如下；稀释度10-310-410-5 l0-610-710-8重复数 5 5 5 5 5 5出现生长的管数 5 5 5 4 1 0根据以上结果，在接种l0-3—10-5稀释液的试管中5个重复都有生长，在接种l0-6稀释液的试管中有4个重复生长，在接种10-7稀释液的试管中只有1个生长，而接种10-8稀释液的试管全无生长。
由此可得出其数量指标为“541”，查最大或然数表得近似值17，然后乘以第一位数的稀释倍数（10-5的稀释倍数为100 000）。
那么，1ml 原菌液中的活菌数＝17×100 000 = 17×105。
即每毫升原菌液含活菌数为l700000个。
在确定数量指标时，不管重复次数如何，都是3位数字，第一位数字必须是所有试管都生长微生物的某一稀释度的培养试管，后两位数字依次为以下两个稀释度的生长管数，如果再往下的稀释仍有生长管数，则可将此数加到前面相邻的第三位数上即可。
如某一微生物生理群稀释培养记录为：稀释度l0-110-2 10-3l0-410-510-6重复数 4 4 4 4 4 4出现生长的管数 4 4 3 2 1 0以上情况，可将最后一个数字加到前一个数字上，即数量指标为“433”，查表得近似值为30，则每毫升原菌液中含活菌30×102个。