常用培养基的配制
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常用培养基的配制
(一)营养琼脂培养基
【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基基础之用。
【成分】牛肉膏 3g
NaCl 5g
蛋白胨 10g
琼脂 20g
【pH值】7.2±0.2
【制法】上述成分称取38g加蒸馏水1000ml,经121.3℃ 30min高压灭菌备用。
(二)蛋白胨水培养基
【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。
【成分】蛋白胨 10g
氯化钠 5g
【pH值】7.6
【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装于试管,每管2~3ml,经121.3℃20min高压灭菌备用。
(三)半固体培养基
【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。
【成分】蛋白胨 10g
氯化钠 5g
琼脂 2.5~3g
【pH值】7.6
【制法】上述成分加入1000ml蒸馏水中,加热溶解,分装于试管,每管3~4ml,经121.3℃ 20min高压灭菌备用。
(四)营养肉汤培养基
【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等,也可用于消毒效果的测定。
【成分】蛋白胨 10g
氯化钠 5g
牛肉粉(牛肉浸汁) 3g
【pH值】7.2±0.2
【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,分装小试管,每管2~3ml,经121.3℃ 20min 高压灭菌备用。
(五)葡萄糖蛋白胨水培养基
【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。
【成分】蛋白胨5g
葡萄糖5g
K2HPO4 (K2HPO4·3H2O) 5g (0.65g)
【pH值】7.0~7.2
【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装试管,每管2~3ml,经112.6 ℃ 20min高压灭菌备用。
(六)伊红美蓝培养基(EMB培养基)
【用途】弱选择性培养基,用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。
【成分】蛋白胨10g
乳糖10g
伊红 0.4g
美兰 0.065g
琼脂14g
K2HPO4 2g
【pH值】7.2±0.4
【制法】上述成分称取36g加蒸馏水1000ml摇匀,经121.3℃ 15min高压灭菌,待冷
却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。
(七)S-S琼脂培养基
【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的选择性分离培养之用。
【成分】蛋白胨 5g
乳糖10g
牛肉粉 5g
三号胆盐 3.5g
琼脂 17g
柠檬酸钠 8.5g
柠檬酸铁 1g
硫代硫酸钠 8.5g
中性红 0.025g
煌绿 0.00033g
【pH值】7.0±0.1
【制法】上述成分称取60g加蒸馏水1000ml,加热煮沸至完全溶解,待冷却至60℃左
右倾注灭菌平皿备用。
(八)中国蓝蔷薇酸琼脂培养基
【用途】供肠道致病菌的分离鉴别之用。
【成分】蛋白胨10g
乳糖10g
牛肉粉 3g
琼脂13g
氯化钠 5g
中国蓝 0.05g
玫红酸 0.1g
【pH值】7.0±0.2
【制法】称取本品40g加蒸馏水1000ml,煮沸溶解后,112.6℃ 30min高压灭菌,待
冷却至60℃左右时倾注灭菌平皿备用。
(九)沙保弱氏琼脂培养基
【用途】供真菌的分离培养,菌种保存之用。
【成分】蛋白胨10g
麦芽糖(葡萄糖)40g
琼脂20g
【pH值】5.5~6.0(一般不调节) 【制法】上述成分加蒸馏水1000ml,煮沸溶解后,112.6℃ 15min灭菌,待冷至60℃
左右时倾注灭菌平皿备用。
(十)血琼脂培养基
【用途】供观察某些细菌的溶血作用,分离培养营养要求较高的细菌之用。
【成分】普通营养琼脂培养基 100 ml
脱纤维羊血(或兔血) 5~10ml
【pH值】7.6
【制法】将普通营养琼脂培养基121.3℃ 20min高压灭菌,待冷却至50℃左右时,加入无菌脱纤维羊血(或兔血)轻轻摇匀,不要发生气泡,倾注灭菌平皿或制成斜面备用。
(十一)0.1%石炭酸琼脂平板培养基
【用途】供分离变形杆菌和被变形杆菌污染的其他细菌之用。
【成分】普通营养琼脂培养基 100ml
石炭酸1g
【pH值】7.6
【制法】上述成分121.3℃ 15min高压灭菌,倾注灭菌平皿备用。
(十二)液体硫乙酸盐培养基(FT)(需氧菌、厌氧菌培养基)
【用途】用于药品和生物制品的无菌检验,检测好氧菌、厌氧菌。
【成分】胰酪胨15g
L—胱氨酸 0.5g
葡萄糖 5g
酵母膏粉 5g
氯化钠 2.5g
硫乙醇酸钠 0.5g
刃天青 0.001g
琼脂 0.75g
【pH值】7.1±0.2
【制法】称取本品29.3g加入1000ml蒸馏水中,搅拌加热至完全溶解,分装于试管,121.3℃ 15min高压灭菌备用。
(十三)庖肉培养基
【用途】用于一般厌氧培养,肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB标准)。
【成分】牛肉渣、牛肉浸液。
【pH值】7.4~7.6
【制法】肉浸汤剩余的肉渣装入中试管内,约1~1.5cm高。加入肉汤培养基5ml,再加入1:3液体石蜡(或凡士林),高0.2~0.3cm。经112.6℃ 15min 高压灭菌,保存于4℃冰箱备用。