禽流感的诊断方法有哪些
禽流感应该做哪些检查？
禽流感应该做哪些检查？*导读：本文向您详细介禽流感应该做哪些检查，常用的禽流感检查项目有哪些。
以及禽流感如何诊断鉴别，禽流感易混淆疾病等方面内容。
*禽流感常见检查：常见检查：血常规、尿常规、胸部平片、病毒感染免疫检测、流感病毒抗体*一、检查：1、外周血象白细胞总数一般不高或降低，重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞下降。
2、病毒抗原及基因检测取患者呼吸道标本采用免疫荧光法(或酶联免疫法)检测甲型流感病毒核蛋白抗原(NP)及禽流感病毒H亚型抗原，还可用RT-PCR法检测禽流感病毒亚型特异性H 抗原基因。
3、病毒分离从患者呼吸道标本(如鼻咽分泌物，口腔含漱液，气管吸出物或呼吸道上皮细胞)中分离禽流感病毒。
4、血清学检查发病初期和恢复期双份血清抗禽流感病毒抗体滴度有4倍或以上升高，有助于回顾性诊断。
5、胸部影像学检查：重症患者胸部X线检查可显示单侧或双侧肺炎，少数可伴有胸腔积液等。
*以上是对于禽流感应该做哪些检查方面内容的相关叙述，下面再来看看禽流感应该如何鉴别诊断，禽流感易混淆疾病。
*禽流感如何鉴别？：*一、鉴别：临床上应注意与流感，普通感冒，细菌性肺炎，传染性非典型肺炎(SARS)，传染性单核细胞增多症，巨细胞病毒感染，衣原体肺炎，支原体肺炎等疾病进行鉴别诊断。
与流行性感冒鉴别流行性感冒一般分为三种，即甲型，乙型和丙型，乙型和丙型流行性感冒一般只在人群中传播，很少传染到其他动物，甲型流行性感冒大部分都是禽流感，禽流感病毒一般很少使人发病，禽流感主要在鸟类中间传播，偶可感染至人，其临床表现与人类流行性感冒相似，但人禽流感症状重，并发症多，与普通流感有一定区别。
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禽流感快速诊断方法研究进展
位 素 探针 敏感 性 相 当 。 黄庚 明等 用 利
Ｐ Ｒ 术 建 立并 优 化 了检 测Ａ Ｖ 酸 的 Ｃ技 Ｉ核
Ｄ Ｇ 记 的ｅ Ｎ 探 针 杂 交 法 。 该探 针 Ｉ标 Ｄ Ａ 具 有 良 好 的 特 异 性 和 敏 感 性 ， 为 从 分 子 水 平 探 讨 Ａ Ｖ的 发 病 机 理 及 ｌ Ｉ 临 床 早 期 快 速 诊 断 Ａ Ｖ提 供 了 新 的 手 Ｉ
依 据 ，并 可 在 不 同亚 型 间产 生 交 叉 保 护 力 。 ｌ 中 ， 类 感 染 Ａ Ｖ后 ， ｌ 临床 禽 Ｉ 其临
流 感 的快 速 诊 断 方 法 有 以下 几 种 ：
１ 分 子 生 物 学 方 法 １ １ 基 因探 针 诊 断 方 法 ｌ ． ７ 】
阵 ，根 据 探 针 的特 点 不 同可 以将 基 因 芯 片技 术 分 成 ３ ： 括ｅ Ｎ 类 包 Ｄ Ａ芯 片 、 寡 核苷 酸 芯 片 、 因 芯 片 ． 基 主要 目标 是 用
素 ｆ Ａ 和 神 经 氨 酸 酶 （Ａ２ 表 面 结 Ｈ ） Ｎ ）种
构 蛋 白上 ， 核 蛋 白ｆ Ｐ 则 具 有 种 属 而 Ｎ ）
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毒 中 同 源性 较 高Ｉ 是 Ａ Ｖ 型分 类 的 １ ， Ｉ亚
对ＡＩ 快 速 、 确 、 异 的诊 断 非 常 必 要 本 文 就 禽 流 感 快 速 诊 断 方 法 的 研 究 进 ｖ的 准 特 展 进 行 了概 述 ， 以期 为 禽 流 感 的 早 期 诊 断 和 及 时 防 治 提 供 一 定 指 导 。
关 键 词 禽 流 感 快 速 诊 断 研 究进 展
禽流感各种诊断技术的比较
诊断速度较快，步骤比胶体金试纸多，适合小样
本量测定免疫酶试剂盒国内无试剂 RT-PCR*病毒
基因 NY/T772—2004 速度较快，可以鉴定亚型。 RT-PCR 试剂盒农业部兽医诊断中心荧光 RT-PCR 病 毒 基 因 GB/T19438.1-2004 （ 通 用）;GB/T19438.2-2004（H5）GB/T19438.3-2004
禽流感诊断监测方法很多，各种方法都有各 自的应用范围，有各自的优点和局限性。现将各
种方法作一总结，在诊断监测中，应根据具体需
要采用合适的方法。禽流感各种检测方法的比较
见下表。禽流感各种检测方法汇总表检测方法检 测对象依据标准适用性与局限性所用试剂试剂
来源琼脂扩散（AGID）试验*A 型 AIV 抗体
AIV 抗体 NY/T770—2004 敏感性高，适合批量测 定 ELISA 试剂盒 IDEXX 元亨免疫胶体金试纸 A 型
AIV 抗原适合现场快速诊断胶体金试纸条世纪元
亨免疫荧光（IF）试验组织、细胞病毒抗原诊断
笔也不像平常那般顺手。在这个异乡的海边，诸多回忆纷至沓来，如砂砾中的
速度较快，受主观经验影响大，不易掌握抗 AIV 荧光抗体国内无试剂免疫酶渗滤法 A 型 AIV 抗原
高敏感性，操作烦琐，易产生假阳性 NASBA 试剂 盒上海出入境检验检疫局病毒分离 * 病毒
GB/T18936 可最终确诊，周期长鸡胚
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笔也不像平常那般顺手。在这个异乡的海边，诸多回忆纷至沓来，如砂砾中的
GB/T18936 方法简单，敏感性低型抗原、抗血清
笔也不像平常那般顺手。在这个异乡的海边，诸多回忆纷至沓来，如砂砾中的
哈尔滨兽医研究所血凝（HA）及血凝抑制（HI） 试验*血凝素亚型抗原、抗体 GB/36 鉴定 HA
禽流感病毒的分离与鉴定技术
禽流感病毒的分离与鉴定技术孙建宏,刘景利,张从禄①（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨150001）①摘要：禽流感病毒的诊断一般是通过鸡胚分离病毒，检测其血凝活性，并应用琼脂扩散试验或其他试验确定其是否为禽流感病毒，再进一步进行亚型鉴定、致病力测定。
如果是H5或H7亚型，还应采用PCR等方法对血凝素裂解位点的氨基酸序列进行测定。
①关键词:流感病毒;分离;鉴定①禽流感（Avianinfluenza，AI）由正黏病毒科A型流感病毒属的流感病毒引起。
该病毒的血清型分为15个HA亚型和9个NA亚型。
禽流感病毒可感染各种家禽和野禽，但多数呈亚临床感染。
一些H5和H7亚型可引起高致病性禽流感，可使鸡群100%死亡。
高致病性禽流感因其传播快、危害大，有的血清型可感染人，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物疾病，我国将其列为一类动物疫病。
①禽流感病毒的诊断可以根据临床症状、剖检变化做出初步诊断，进一步确诊需进行实验室检测。
目前一般是通过病毒分离和血清学试验检测病毒或是检测感染鸡的抗体进行鉴定。
近年来，随着分子生物学技术的发展，RT-PCR方法日臻成熟，也逐渐成为一种常用的诊断技术。
文章对这些禽流感的诊断技术分别做一些介绍。
①1禽流感病毒的分离①样本可采集死禽样本或活禽样本。
死禽样本一般采集肠内容物或泄殖腔拭子、鼻拭子、咽喉拭子以及内脏组织（气管、肺、气囊、肠、脾脏、肾、脑、肝脏和心脏等）；活禽样本可采集气管拭子、泄殖腔拭子。
由于采集棉拭子时幼禽容易受伤，所以还可取粪便。
①采集的拭子放入1.0mLPBS（pH7.0～7.4，含抗生素）的离心管中，静止作用30min。
对于泄殖腔拭子和粪便，用过滤器过滤除菌，上清液作为样本。
内脏样本应无菌取样，放于灭菌的玻璃研磨器，用PBS配成100g/L的悬液，加入1/10体积的抗生素，将处理过的样本移至离心管内，3000r/min离心10min，取上清液接种。
①采集或处理的样本在2℃～8℃条件下保存应不超过24h；如果需长期保存，需放置-70℃条件，但应避免反复冻融（最多冻融3次）。
禽流感诊断检测技术的应用
以现场操作，直接取喉气管、泄殖腔棉拭检测，
无须仪器设备，操作简单，10 分钟内即可初步判
夕年想要的是亲自的和他认识，所以她只是继续着她的方案。她们的教
断是否有禽流感病毒存在。2.实验室快速诊断采 用 RT-PCR 检测技术，可以直接鉴定 AIV 的型和 亚型。3.其它快速检测方法包括免疫酶渗滤法和
夕年想要的是亲自的和他认识，所以她只是继续着她的方案。她们的教
小样本量的监测血清学监测：少量血清样本（500 份以下），可直接使用各种亚型的血凝素抗原进 行 HI 试验，检测抗体是否存在以及抗体水平高
低。对于免疫群体，应侧重分析抗体水平和离散
度，评估群体的免疫状态和感染风险。病原学监
测：对于少量的样本（50 份以下），可直接进行 RT-PCR 检测或接种鸡胚分离病毒。（三）大样本 量监测血清学监测：应首先采用（针对 NP、H5、
H7抗体的）间接ELISA对血清样品进行初步筛选，
以提高检测效率，对 ELISA 检测为阴性的样本，
夕年想要的是亲自的和他认识，所以她只是继续着她的方案。她们的教
不必进一步检测；对筛选出的阳性样品再进行 HI 检测，以确定亚型。免疫群体可分析抗体水平的 高低和离要时可采样进行病原学检测。病原学监测：
对于大批量的样本，可用抗原捕获 ELISA 对样品
进行筛选。对阴性样品，不必进一步检测。对阳 性和可疑的样品进行 RT-PCR 检测或接种鸡胚分 离病毒。
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免疫荧光法检测禽流感病毒，如果采用血凝素特
异性的单克隆抗体，还可以初步鉴定病毒的血凝
素亚型。采用血凝素特异性的单克隆抗体介导的 抗原捕获 ELISA，还可以初步鉴定病毒的血凝素 亚型。当然，依靠快速诊断技术仅能作出初步诊
禽流感的诊断技术
禽流感的诊断技术作者：任文美来源：《新农村》2012年第20期禽流感（avian influenza，AI）是由正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的禽类从呼吸系统到全身性的感染和/或疾病综合症，根据疫情发生的严重程度，可分为高致病性禽流感（HPAI）、低致病性禽流感（LPAI）和非致病性禽流感（NPAI）。
病禽出现从无症状到厌食、精神萎顿、减蛋等临床症状，以至突然暴发、高度死亡。
其中，HPAI因其造成极其严重的疫情和损失，被国际兽疫局（OIE）列为A类传染病，我国把它定为一类传染病。
对禽流感及时而正确的诊断十分重要，以能采取果断的控制措施。
本病必须进行综合分析，尤以实验室诊断最为重要。
一、现场诊断根据流行病学，临诊症状及剖检变化只能作出可疑诊断。
由于禽流感的现场表现（发病特点、症状及剖检变化）差异较大且无典型性，所以要确诊必须依靠病原分离鉴定及血清学试验。
二、病原分离、鉴定A型流感病毒常在呼吸道或/和消化道中复制增殖，所以，活禽采集病料多从喉头、气管或泄殖腔中采集。
死禽采集气管、肝、肺、脾、肾等组织样品。
以棉花或其他材料制成的拭子、器具采集病料样品，放入加抗生素的无菌肉汤或20%～50%甘油生理盐水中。
最好低温4℃或-70℃下保存，以液态氮或干冰较好。
病料样品在保存或运送前可先行处理，制成10%的悬液，并进行低速离心澄清。
经离心的病料上清液接种SPF鸡胚，取0.1ml，经尿囊腔途径接种（或同时羊膜腔接种）9～11日龄的鸡胚，置37℃孵育3～7，天弃取24h内死去的胚，收集48h至96h的胚液和绒毛尿囊膜作无菌检查，检查鸡胚尿囊液对红细胞的凝集活性。
血凝阴性者，用尿囊液盲传2～5代，如仍未出现血凝时，判为阴性，弃去。
如出现血凝活性则进一步检查。
一般来说，如样品中有病毒存在，初次传代后就足以产生红细胞凝集作用。
出现血凝活性的病毒一般为10-5-10-6 EID 50/ml。
用于病毒鉴定的标准方法是以鸡红细胞来检测胚液的血凝活性，常量法和微量法都可使用。
鸡禽流感鉴别诊断技巧及防治措施
流感病毒可分为甲（A型，可感染人类、禽类和哺乳动物）、乙（B型，主要感染人类）、丙（C型，主要感染人类、猪），其中甲型流感病毒是鸡禽流感病的病原，并能感染人类和其他动物。
禽流感病毒的致病力极强，是禽病中最致命的传染性疾病，鸡群感染后会出现发热，嗜睡，流泪，咳嗽，呆立，鸡冠、颈部、腹下水肿，蛋鸡产蛋下降或产畸形蛋，高致病性禽流感病死率约100%。
鉴于鸡禽流感的高致病率，养殖户必须给予重视，做好早期鉴别和防控措施，这样才能提高鸡群整体素质，严格控制禽流感疫情，保障禽类养殖效益。
1 病原特征鸡禽流感的病原微生物为禽流感病毒，是一种球形的RNA病毒，直径为100±20nm。
从病原菌分类来看，鸡禽流感病毒为A型流感病毒，按照外膜血凝素的不同可分为16种亚型，名称从H1～H16，按其神经氨酸酶可分为10个亚型，名称从N1～N10。
不同亚型的流感病毒的致病力不同，其中4种（H5、H7、H9、H10）对人类具有致病性。
禽流感病毒对环境具有较强的适应力。
①耐低温：禽流感病毒污染的饮水，若水源温度维持在22℃左右，病毒可存活96h，若降低至0℃，则可存活1个月之久，且病毒在低温、潮湿环境能维持较长时间的活力，如在冰冻组织或骨髓存活时间长达10～12个月；②耐干燥：该病毒可在低温、干燥的组织存活6～12个月，在干燥尘土中可存活2周；③不耐高温：56℃30min或60℃10min或70℃3～5min或100℃1～2min均能将禽流感病毒灭活；④不耐直射，阳光直射44±4h即可杀灭禽流感病毒；⑤不耐化学消毒试剂，禽流感病毒对碘复合物、来苏儿、氢氧化钠、过氧乙酸、福尔马林等化学试剂具有较高的敏感性，可通过规范消毒灭活。
2 流行病学2.1 易感动物对禽流感病毒最敏感的禽类为鸡、火鸡，鹅、鸭感染后其症状不典型，多为隐性感染。
除上述禽类外，鹌鹑、鸽、鸵鸟等禽类也可感染该病毒。
若鸡（旱禽）和鸭（水禽）混合饲养，容易出现家禽交叉感染现象，并易出现大面积流行。
如何诊断禽流感(养鸡必看)
流感诊断要点
1、病鸡精神沉郁，采食减少，有呼吸道症状。鸡冠发紫，脚鳞呈蓝紫色。
2、病鸡肿头，流泪流涕，眼睑周围浮肿，肉冠和肉垂肿胀、出血甚至坏死。
3、病鸡出现头颈抽搐或振颤等神经症状。
4、有的毒株主要感染产蛋种鸡群，育雏和育成鸡一般不表现临床症状。发病种鸡群产蛋率下降20~50%，蛋壳粗糙,软皮蛋\褪色蛋增多.
5、机体脱水、发绀。
6、气管充血，有粘性分泌物，支气管栓塞。内脏浆膜黏膜、冠状脂肪有点状出血。肺坏死水肿。
7、腺胃乳头溃疡出血，黏膜上有脓性分泌物。肌胃内膜易剥离，皱褶处有出血斑。
8、肠道广泛性出血和溃疡，充满脓性分泌物。
9、肉种鸡腹腔内有新破裂的卵黄，卵泡变形、充血，严重者卵，如支原体、大肠杆菌等。
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禽流感的诊断方法有哪些
禽流感必须通过病毒的分离、鉴定来确诊。
病毒的分离及亚型鉴定一般至少需要3-5天。
病毒的致病性必须通过人工静脉接种无特定病原鸡(SPF鸡)来最后确定。
常见的检查方法有六个。
【检查】
1、免疫荧光法(或酶联免疫法)检测
病毒抗原及基因检测取患者呼吸道标本采用免疫荧光法(或酶联免疫法)检测甲型流感病毒核蛋白抗原(NP)及禽流感病毒H亚型抗原。
2、血清学检查
发病初期和恢复期双份血清抗禽流感病毒抗体滴度有4倍或以上升高，有助于回顾性诊断。
3、胸部影像学检查
重症患者胸部X线检查可显示单侧或双侧肺炎，少数可伴有胸腔积液等。
4、血常规检查
外周血象白细胞总数一般不高或降低。
重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞下降。
5、RT-PCR法检测
用RT-PCR法检测禽流感病毒亚型特异性H抗原基因。
6、病毒分离
从患者呼吸道标本(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上皮细胞)中分离禽流感病毒。
【鉴别】
1、与流行性感冒鉴别
流行性感冒一般分为三种，即甲型、乙型和丙型。
乙型和丙型流行性感冒一般只在人群中传播，很少传染到其他动物。
甲型流行性感冒大部分都是禽流感，禽流感病毒一般很少使人发病。
禽流感主要在鸟类中间传播，偶可感染至人，其临床表现与人类流行性感冒相似，但人禽流感症状重、并发症多，与普通流感有
一定区别。
2、细菌性肺炎
主要有感染性和理化性如放射线、毒气、药物以及变态反应性如过敏性肺炎等，临床所见绝大多数为细菌、病毒、衣原体、支原体、立克次体、真菌和寄生虫等引起的感染性肺炎，其中以细菌最为常见。
3、衣原体肺炎
肺炎衣原体与鹦鹉热和砂眼衣原体有相同的属特异性抗原，而其他特异性抗原血清学特征却不同。
通常DNA杂交试验和限制性核酸内切酶分析确认其为不同于砂眼和鹦鹉热衣原体的第三种衣原体。
不要轻视重感冒，禽流感的病症与其他流行性感冒病症相似，如发烧、头痛、咳嗽及喉咙痛等，在某些情况下，会引起并发症，导致患者死亡。
因此，若出现发热、头痛、鼻塞、咳嗽、全身不适等呼吸道症状时，应戴上口罩，尽快到医院就诊，并务必告诉医生自己发病前是否到过禽流感疫区，是否与病禽类接触等情况，并在医生指导下治疗和用药。
/qlg/2014/0722/183090.html。