石蜡切片步骤
石蜡切片制作流程
石蜡切片制作流程以石蜡切片制作流程为标题，写一篇文章。
石蜡切片制作是一项常见的实验技术，在生物学、医学和材料科学等领域广泛应用。
石蜡切片可以用于显微镜下的观察和分析，能够提供关于细胞和组织结构的详细信息。
下面将介绍一下石蜡切片的制作流程。
1. 组织固定：首先，需要从感兴趣的样本中取得组织样本，并将其进行固定。
固定是为了保持组织的形态结构和化学成分，常用的固定剂有福尔马林、乙醛等。
固定过程中，需要确保样本完全浸泡在固定液中，通常需要数小时至数天的时间，以确保组织被充分固定。
2. 脱水：固定后的组织样本需要进行脱水处理，以去除其中的水分。
脱水是将样本中的水分逐渐替代为有机溶剂，常用的有乙醇、丙酮等。
通常采用递增浓度的有机溶剂，从低浓度逐渐提高到高浓度。
每个浓度的脱水液中，样本需要浸泡一定的时间，以确保脱水彻底。
3. 渗透：脱水后的组织样本需要进行渗透处理，以使其与石蜡更好地结合。
渗透剂通常为石蜡溶液，可以将样本浸泡在石蜡溶液中，以使其逐渐渗透进入组织内部。
渗透过程中，需要注意控制温度和时间，以确保渗透均匀。
4. 包埋：渗透后的组织样本需要进行包埋处理，即将其嵌入到石蜡中。
首先，将组织样本放置在石蜡模具中，并加入适量的石蜡。
然后，将模具放入石蜡包埋机中，利用加热和真空等处理，使石蜡与组织样本充分结合。
包埋过程中需要严格控制温度和时间，以确保石蜡固化完全。
5. 切片：包埋后的组织样本需要进行切片处理，以获取薄片供观察。
首先，使用切片机将石蜡块切割成薄片。
然后，将薄片置于载玻片上，并加热使其与载玻片结合。
最后，使用刮片等工具将石蜡薄片修整成所需的形状和大小。
6. 然后，对切片进行染色处理，以增强对组织结构的观察。
常用的染色方法有血液学染色、免疫组化染色等。
染色后，可以使用显微镜观察和分析切片中的细胞和组织结构。
总结起来，石蜡切片制作流程包括组织固定、脱水、渗透、包埋、切片和染色等步骤。
每个步骤都需要严格控制条件和时间，以确保制作出高质量的石蜡切片。
石蜡切片的主要步骤
石蜡切片的主要步骤石蜡切片是一种常用的制备薄片的技术，广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。
本文将介绍石蜡切片的主要步骤，并详细说明每个步骤的操作方法和注意事项。
1. 样品固定和处理在进行石蜡切片之前，首先需要对待切样品进行固定和处理。
固定样品的方法可以根据实验的需要选择，常用的有乙醛固定、冰醋酸固定和福尔马林固定等。
处理样品的方法也根据实验目的而定，可以包括染色、脱水、透明化等步骤，以便更好地观察和研究样品。
2. 包埋将处理好的样品包埋在石蜡中，以便进行切片。
首先，将样品放入石蜡溶液中，使其充分浸泡。
然后，将石蜡溶液转移到恒温水浴中，使其逐渐固化。
在固化过程中，要确保样品均匀分布在石蜡中，避免出现气泡和空洞。
3. 切片切片是石蜡切片过程中最关键的一步。
首先，将固化的石蜡块从模具中取出，并放置在切片机的夹持装置上。
然后，调整切片机的切片厚度和速度，根据需要选择合适的参数。
接下来，使用切片刀将石蜡块切割成薄片。
在切割过程中，要保持手稳定，避免切片厚度不均匀或出现断层。
4. 切片取片切片切割完成后，需要将切片从切片刀上取下。
首先，使用镊子将切片从切片刀上小心取下，避免损坏或弯曲切片。
然后，将切片放置在预先准备好的载玻片上。
在放置切片时，要注意避免气泡的产生，可以使用专门的工具如细管吸气来帮助排除气泡。
5. 去除石蜡和染色切片取片后，需要将切片上的石蜡去除，并进行染色处理。
首先，将切片放入去石蜡剂中，使其充分浸泡。
然后，将切片转移到浸泡染色剂中，进行染色处理。
在去石蜡和染色过程中，要注意时间控制和温度控制，以确保染色效果和切片质量。
6. 封片和封边染色完成后，需要将切片做成封片，以保护切片并便于保存。
首先，将切片用透明胶片或玻璃片覆盖。
然后，使用封片胶或封片胶带将切片和覆盖物固定在一起。
接下来，将切片的边缘进行封边处理，以避免切片脱落或污染。
7. 干燥和贴标封片完成后，需要将切片进行干燥处理，并进行贴标。
石蜡切片方法步骤
石蜡切片方法步骤每次操作切片刀和标本，或更换标本前一定要锁定手轮，并用护刀罩将刀刃遮住！1. 锁定手轮，夹紧标本再装刀片.（10分）2. 将蜡块装在标本夹上，小心误切！3. 转动粗转轮，将标本退到后面的极限位置，将护刀罩移向刀架中间（盖上护刀罩）4. 调节切削角度5. 将基体上的刀架尽可能靠近蜡块标本6. 调整标本表面位置,使之与刀刃平行.7. 松开手轮,匀速转动,修片8. 修平蜡块表面到达标本层时停止修片,调整切片厚度.9. 一切调整好后可以开始切片。
此时右手摇动转轮，让蜡块切成蜡带，左手持毛笔将蜡带提起，摇转速度不可太急，通常以40-50r/min。
10. 切成的蜡带到20-30cm长时，右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带，平放在蜡带盒上准备漂片和捞片.11. 切片结束后锁定手轮, 盖上护刀罩.12. 把蜡块从标本夹上取下.13. 将切片机上的废片清理干净.1. Locking hand wheel, put wax blocks on sample folder.2. Turn rough runner, return the wax block back to the limit position, covered with knife protection cover.3. Adjust cutting angle4. Push the base knife holder to block as close as possible5. Adjust the specimen surface position, so that in parallel with the blade.6. Loosen the hand wheel, cutting paraffin block with uniform rotation, rim excessive paraffin7. Stop trimming, adjust the section thickness.8. Cutting sections in a regular rhythm9. The sections are gently lifted off the knife with bushes and floated out on a water bath.10. Stop cutting, after slicing lock the hand wheel, cover knife cover nursing11. Remove the block from the samples folder, clean the microtome.评分标准。
石蜡切片详细步骤
石蜡切片1.仪器石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。
2. 试剂FAA固定液(70%酒精90ml、冰醋酸5ml、福尔马林5ml)、10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。
3.取材幼嫩的油菜植株叶片和茎4.方法与步骤(参照)1．固定：FAA固定液固定48小时以上。
2．脱水：50%酒精→70%酒精→83%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。
每级2h。
100%酒精中1.5h。
其中70%酒精处可长期保存。
3．透明：1/2二甲苯+1/2无水乙醇 (2h) →纯二甲苯(1.5h) →纯二甲苯(1.5h)4．浸蜡：将处理的材料置于1/2石蜡(固体粉末状)+1/2二甲苯中，40℃烘箱敞口过夜。
5．包埋：先提升恒温箱的温度至60℃，换纯蜡3次，每次1-2h，用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒，置于45-60℃的烫板上，倒入材料，摆放好材料，把标签（正面向外置于底部），补足石蜡，倒好后轻轻的置于冷水盆中，注意底面要接触盆中凉水，待石蜡全部凝固后可取出晾干，也可在凉水盆中放置过夜。
6．切片对包埋的材料进行修块、粘块、整修后，保证材料四周都有石蜡包围。
但不可太多。
切面的上、下边平行。
用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑，并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平，使石蜡块牢固地粘在台木上。
检查切片机，安装切片刀、调整好刀的角度，调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始切片。
7．粘片将粘贴剂置簿玻片上，再取切片浮置粘片剂上，然后置烘片台上，使切片展开烫平，材料不现皱纹为度。
最后将切片依次排好，用滤纸吸去多余水分，同时以记号笔在玻片上编号，放入温箱中烘干，温度30～40℃中过夜。
8．脱蜡脱蜡用二甲苯，把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中：纯二甲苯(10-20min)→纯二甲苯(5-10min)9．染色将纯二甲苯脱蜡完全的材料，1/2 二甲苯十1/2纯酒精→100%酒精→95％酒精→85％酒精→70％酒精→50％酒精→1%番红染色(4h以上) →50％酒精→70％酒精→85％酒精→95％酒精→0.5%固绿(1min)→95％酒精→100%酒精→100％酒精(未注明时间各级均为3min)10．胶封滴加加拿大树胶封藏。
石蜡切片的原理和基本步骤
石蜡切片的原理和基本步骤石蜡切片是一种常用于生物医学和生物化学实验中的技术。
通过使用石蜡作为嵌入剂，将组织标本固定在特定位置，并以薄片的形式制备，方便进一步的显微镜观察。
这篇文章将介绍石蜡切片的原理和基本步骤。
石蜡切片的原理主要涉及组织标本的固定、去水、脱脂、渗透、嵌入、切割和染色等步骤。
下面将逐步详细介绍每个步骤。
第一步是组织样本的固定。
固定是将生物组织中的蛋白质和核酸固定住，防止组织变性和腐败。
常用的固定剂包括乙酸乙酯、福尔马林和缓冲盐水。
在固定过程中，组织样本通常需要用切片器切割成较小的块。
第二步是去水。
在固定样本中，常常会有一些水分存在。
水分对之后的处理步骤会造成影响，所以需要进行去水处理。
去水可以通过渐进浓度的有机溶剂（例如乙醇）进行。
通常从浓度较低的乙醇开始，逐渐提高乙醇浓度，直至100%乙醇。
第三步是脱脂。
脱脂是为了去除溶剂和固定剂中的脂类物质。
脂类物质在之后的步骤中会妨碍切片的制备。
脱脂一般使用有机溶剂（如苯和二甲苯）进行处理。
第四步是渗透。
渗透是将脱脂样本置于石蜡中，使其被石蜡渗透。
石蜡具有良好的透明性和稳定性，可以保持组织样本的形状并方便切割。
渗透一般在60-65°C的温度下进行。
第五步是嵌入。
嵌入是将渗透好的样本放入预先制备的模具中，加热使其固化。
嵌入后的样本与石蜡牢固结合，形成坚固的石蜡块，有利于后续切割操作。
第六步是切割。
切割是将嵌入好的组织样本切割成非常薄的片。
常用的切片工具有旋转式切片机和滑动切片机。
切割时，需要将石蜡切割成5-10微米厚度的切片。
最后一步是染色。
染色是为了使细胞结构更清晰可见。
常用的染色剂有血红蛋白染剂和亚甲基蓝染剂等。
染色可以根据需要选择染色时间和染色剂。
石蜡切片的制备过程需要一定的实验技巧和仪器设备。
为了获得高质量的切片，需要注意固定、去水和渗透的处理时间和温度，以及切割的速度和厚度。
切割后的切片需要进行适当的质控，确保切片的质量并方便进一步的显微镜观察。
石蜡切片的主要制备程序
石蜡切片的主要制备程序
石蜡切片的主要制备程序可以概括为以下几个步骤：
1. 准备样品：选择需要切片的样品，如组织样本、细胞样品等，并采取相应的固定、处理和染色等预处理步骤，以保证样品的稳定性、可观察性和对比度。
2. 材料准备：准备好所需的石蜡、切片盒、切片刀、载玻片等材料，并进行清洁和消毒处理，以避免污染和交叉感染。
3. 石蜡浸透：将处理好的样品转移到石蜡中进行浸透。
首先将样品置于温度逐渐升高的浸透剂（如正己烷）中，以去除组织内水分和其他溶质，然后置于石蜡中进行浸透。
4. 切片制备：将石蜡浸透的样品固定于切片盒中，将石蜡块剪碎成适当大小，并放置在切片刀的刀脊上。
调整切片机参数（如温度、角度、速度等），并逐个切割出薄片。
5. 切片贴片：将切好的薄片浮于温水中或使用其他方法，如电离子器、热平台等，以使切片展平并附着于载玻片上。
6. 干燥固定：将切片连同载玻片一起进行干燥固定处理，以去除水分并保持切片的形态稳定。
7. 切片染色：根据实验需求，对切片进行适当的染色处理（如组织学染色、免疫组化染色等），以增强样品的可视化效果和区分感兴趣的结构。
8. 封片封装：将切片封装至封片盖玻片上，使用透明化导电胶或其他封片剂固定切片，并尽量排除气泡、保证封片质量。
9. 切片质控：对制备好的切片进行质量控制，使用显微镜观察和评估切片的清晰度、结构完整性、染色效果等。
最后，制备完成的石蜡切片可以用于显微镜观察、组织形态分析、病理学研究等应用。
需要注意的是，在整个制备过程中，应遵循标准实验操作规程、注意安全，以及依据实验要求进行相应的优化和调整。
石蜡切片的流程及注意事项
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1. 组织固定，使用福尔马林或派氏液将组织固定，确保组织结构和成分得到保存。
石蜡切片流程范文
石蜡切片流程范文石蜡切片是一种常见的组织学技术，用于制备生物组织薄片，使其可以在显微镜下观察和分析。
下面是石蜡切片制备的详细流程。
1.组织固定：首先，需要选择适当的方法将生物组织进行固定，以保持其形状和结构。
最常用的方法是使用福尔马林溶液进行组织固定。
将组织样品置于福尔马林溶液中，通常需要固定24至48小时。
2.去水：固定完毕后，需要将组织中的水分除去，以便进行后续的处理。
通过逐渐提高样品中酒精浓度（例如70％、80％、95％和100％构成的酒精梯度）来逐步去除水分，通常每次浸泡20至30分钟。
3.清洁：去水后，通常需要对样品进行清洁，以去除可能存在的污物和其他杂质。
可以用清洁的醇溶液（例如100％酒精）浸泡样品数分钟，然后用去福尔马林等溶液洗涤样品。
4.浸渍：在石蜡切片制备过程中，需要将组织样品浸泡在石蜡中，以使其渗透并得到支撑。
选择适当的石蜡类型和温度很重要。
通常使用低熔点石蜡（例如58℃石蜡），在60至65℃的恒温水浴中加热并溶解石蜡。
5.渗透：将组织样品从酒精中转移到融化的石蜡中，通常需要经历多个步骤的渗透过程。
首先将样品浸泡在75％酒精中，然后再依次转移到浓缩的酒精溶液中（例如85％、95％和100％）和石蜡中，每次浸泡时间约为1小时。
6.包埋：当样品完成渗透后，需要进行包埋，即将渗透后的组织样品放置在切片模型中，并用石蜡封住。
将切片模型倒置，将溶解的石蜡缓慢倒入模型直到完全覆盖组织样品。
然后将切片模型固定在冷却装置中，等待石蜡冷却和固化。
7.切片：当石蜡块完全固化后，可以将其切割成所需的薄片。
通常使用旋转切片机或手动切片机进行切片。
将切片机的刀片调整到所需厚度（通常为3至5微米），将石蜡块放置在切片机上，并逐渐将刀片与石蜡块接触，以制备薄片。
8.制片：将切好的石蜡薄片静置在温水中，让其自然展开，并将其转移到预涂有胶水的载玻片上。
轻轻将玻片压在石蜡薄片上，以确保两者之间有良好的接触。
然后将载片放置在恒温台上，以便胶水干燥。
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石蜡切片基本步骤（一）取材和固定根据实验目的选择材料。
将整个虫体或虫体的内部器官（如肠道、马氏管、唾液腺等）取出后，立即投入固定液。
取材大小：0.5cm×0.5 cm×0.2或者1.0 cm×1.0 cm×0.2，厚度不宜超过3mm。
固定液：2.5%的戊二醛固定液，Bouin氏液，10%甲醛等。
固定时间：4ºC固定24小时。
注意事项：取材：1．勿使组织块受挤压切取组织块所用刀、剪要锋利，切割时不可来回切割。
夹取组织时，镊子要轻，切勿挤压，以免损伤组织。
取材时，组织块可稍大一点，以便在固定后，将组织块的不平整部分修去。
2.选好组织块的切面应熟悉器官组织的组成，并根据观察目的来确定纵切或横切。
3．保持材料的清洁组织块上如有血液、污物、粘液、食物等，先用生理盐水冲洗干净，再入固定液。
4．切除（清除）不需要的部分特别是组织周围的脂肪等，应尽可能清除掉，以免影响以后的程序和观察。
固定：1．材料新鲜取出组织后须立即固定。
否则时间相隔过久，体积就要收缩变形或发生自溶现象。
2．抽气生物组织常有气体的存在，使材料不能沉入固定液中，抽气使得固定液有效渗入。
真空泵抽气或者用空针管抽气。
昆虫整体固定，固定前用解剖针刺数个小孔，以利用固定液渗透。
3．固定剂用量一般为组织体积的10~20倍。
勿使组织贴于瓶底或瓶壁，以免影响固定剂的渗入。
4．避免阳光尽可能避免接触阳光以免失去固定作用。
5．加速固定轻轻摇动盛器使组织移动有利于固定液渗入，对长期固定的标本可经常更换固定液。
（二）洗涤2.5%戊二醛固定液固定的组织：0.2M, pH7.2磷酸缓冲液漂洗三次，每次10minBouin氏固定液固定的组织：直接入70%酒精更换数次即可脱水，注意苦味酸。
甲醛固定的组织：直接投入50%或70%酒精脱水，不经水洗。
但如果在甲醛中时间过长，则仍应当用流水冲洗。
陈旧性标本和混合性固定液应及时洗涤，有利于脱水、切片和染色。
否则会影响以后的染色效果。
（三）脱水与透明漂洗后即入酒精脱水，经50%，70%，80%，90%，95%，100%酒精脱水，其中95%，100%酒精需重复两次。
每级10min。
脱水后，入1/3二甲苯+2/3乙醇混合液→1/2二甲苯+1/2乙醇混合液→2/3二甲苯+1/3乙醇混合液→二甲苯→二甲苯，每次约10min，至组织透明为止。
注意：1. 一般经水洗的材料脱水可从35%开始，柔弱的材料从15%开始，若用酒精洗涤，则可直接移入50%或70%酒精中继续脱水。
2. 每级脱水时间，依照材料的大小、性质以及留在固定液中的时间长短和固定液的溶解性而定。
动物组织每级10~30min。
3. 脱水应彻底，否则与二甲苯混合后混浊，必须倒回重脱水且效果不好；如需过夜，则停留在70%酒精中。
（四）透蜡透明后，先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍3小时，再先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍6小时左右，直至用石蜡完全置换了组织块中的二甲苯，浸蜡应在高于石蜡熔点3℃左右（60°C）的温箱中进行，以利石蜡浸入组织内。
便于今后的包理与切片。
1. 新蜡应多次熔化，使其中所含的挥发性物质蒸发，杂质沉淀，以免包埋时出现蜡花。
2. 透蜡时必须经过数次纯石蜡，使其中剩余的二甲苯完全去尽。
3. 透蜡温度要恒定，保持石蜡溶化状态，不可忽高忽低；4. 动物材料常用的石蜡熔点为52-56ºC；植物材料为54-60ºC。
5. 为了使石蜡完全渗透，每隔一小时抽气一次。
（五）包埋纸盒包埋法：1. 包埋前准备好纸盒、金属温台（或者水浴锅代替）、镊子、酒精灯、粗解剖针及熔化的石蜡等。
2. 点燃酒精灯，准备好无齿尖镊子，在纸盒一边写好标签。
3. 先将纸盒放在温台上，然后将已熔化的石蜡倒入纸盒中，并取镊子或解剖针放在酒精灯上加热插入盒中，沿纸盒的边缘轻轻移动，以除去石蜡中的气泡，此时，可将纸盒从温台上取下，放在准桌子上。
4. 待纸盒底部石蜡凝固成一薄层时，将材料用已加热的镊子移入纸盒内，并迅速将材料按需要的切面排好。
5. 待石蜡表面凝固一薄层时，用双手平稳将纸盒放入冰水中，等到表面已凝固后，将纸盒压入水中，使石蜡迅速凝固。
6. 蜡块完全凝固后即可取出包埋模包埋法：1.将包埋底模存于烤箱的下层(或单独的一层)。
2. 根据组织块大小选取包埋底模，用镊子在酒精灯上加热，夹取组织块放于底模内，上覆装组织脱水的写有该组织块编号的一次性包埋盒，倾倒石蜡少许，以不溢出为宜，稍置片刻。
3. 把冰箱冷冻室内的冰盒取出,将包埋好的蜡块,放于冰盒冷冻片刻（约5min-10min），冬季时间短。
1.镊子要随用随烤热，以免石蜡凝结在镊子上，造成蜡块凝固不均匀2.包埋过程要迅速，组织从蜡杯中取出的时间要尽量缩短3.包埋后的蜡块应呈均质半透明状，如出现白色浑浊，应考虑：脱水不彻底；包埋蜡温度低，过早凝固；石蜡不纯4.包埋箱的温度必须保持恒定5.包埋不理想应重新将蜡块熔化，重新浸蜡和包埋6.尤其在用纸盒包埋时，蜡块表面冷却后必须放入冷水中使其迅速凝结为蜡块（六）修块在标本蜡块进行切片之前，要把包埋好的蜡块用刀片修整为可以用来切片的标本蜡块，修成规整的方形或长方形，切去组织周围过多的石蜡，一般情况下在组织周围留有约1~2mm的石蜡边，两边必须平行。
1. 分块：用单面刀片轻轻地在包埋的蜡块表面划直线分割，稍用力掰开。
2. 粘块：先用碎蜡将包埋盒填满，然后将刀片在酒精灯火焰上加热，加热的刀片迅速在蜡块和包埋盒之间一抹，使蜡块底部的石蜡融化而粘附在包埋盒的石蜡上。
3. 修块：（1）用单面刀片依据标本形状在蜡块表面轻轻划出标本四周保留的石蜡范围,大约周边预留1-2 mm宽度；（2）将单面刀片加热，将范围之外多余的石蜡逐渐融化。
蜡块切面应修整为近似的正方形和长方形，从蜡块的侧面观察应为梯形。
注意事项：蜡块四边的石蜡要用单面刀修成两两平行的直线，尤其是要与切片刀平行的那两边更为重要，否则会造成切片时所切下的蜡带向一侧弯曲。
蜡块形状要与其内的标本形状相匹配。
（七）切片前准备工作1.载玻片的处理（1）首先将载玻片浸泡在清洁液中12～24小时（利用染色架和染缸）；（2）将载玻片从清洁液中取出，自来水流水充分冲洗，1～2小时，使其表面的洗液成分被流水冲净；（3）将载玻片浸在蒸馏水中，漂洗三次，每次10～20分钟；（4）将载物片放入烤箱烤干，或用棉布逐个将载玻片擦干，装盒备用。
清洁液配制方法：重铬酸钾1份（g），浓硫酸1份（ml），蒸馏水10份（ml）常规的玻璃制品的清洁。
将重铬酸钾溶于蒸馏水，可以加热使其完全溶解，冷却后，缓缓加入浓硫酸，边搅动边加入硫酸，由于硫酸的加入可产生大量的热量，洗液配置的容器一定要耐热，否则容器因过热容易爆裂。
在配制过程中，不许将蒸馏水倒入浓硫酸中，会引起溶液的剧烈反应，造成伤亡。
注意洗液只能用于玻璃仪器的清洁，不能浸泡金属器械，因为洗液对金属有腐蚀作用，另外，在洗液内浸泡载薄片时使用塑料篮子盛放的，也要注意洗液对塑料是否有腐蚀作用。
注意事项：在收取烤干的载物片以及其装盒收藏的过程一定要戴上手套，因为手指表面上的油脂可污染载物片的表面，会影响载物片的清洁度，影响涂片制作的质量。
2、盖玻片的清洁盖玻片在清洁液中浸泡1～2小时，流水冲洗1小时左右，注意要经常搅动盖薄片时，使酸的成分被充分洗净，但搅动的动作不得过大，否则造成盖薄片的损伤，蒸馏水浸洗2～3遍（5～10分钟），95％酒精浸泡5～10分钟，用绸布将其擦干，分类装盒备用。
3、蛋白甘油（1）将鸡蛋打孔，取出蛋清，放入量筒中；（2）加入等量体积的甘油充分混合，此时产生很多泡沫，静止半日使泡沫上升到液面，倒去此部分或用双层纱布过滤即可。
（3）倒入无水无油的棕色瓶内，加入几粒麝香草酚（或苯酚），稍加晃动即可。
配制好的蛋白甘油液放置于4℃冰箱内保存，有效期一年。
使用方法：在洁净的载玻片上滴一滴蛋白甘油（用≤5mm直径的玻璃棒），用洁净的小手指涂匀，放在晾片板上备用（4）烤片台加入蒸馏水，加热到42-45ºC。
（八）切片操作步骤1. 切片前，将蜡块放在冰盒中预冷；2. 将预冷的蜡块装在切片机固定器上，调整到稍离开切片能够切到的位置上，注意蜡块组织切面与切片刀口要垂直平行，再装切片刀；3. 调整切片刀与组织块平面的倾角关系，一般为10-15度角4. 根据需要调整切片厚度，一般情况石蜡切片厚度为5～7um。
对于特殊要求的石蜡切片，其切片厚度可在2～4um，或8～12um5. 摇动切片机手轮先进行修整切片，直到切出完整的最大组织切面后，再进行切制。
6. 切片时，左手持毛笔，右手转动轮盘，轮盘转动应匀速行进，手的用力要均匀。
当转动三、四次轮盘后，刀刃处存有较短的石蜡带，左手持毛笔轻轻转动托住切下来的蜡带，并慢慢向外抻拉，随着石蜡带的加长，毛笔托着石蜡带缓慢向后移动，与此同时，右手不断地摇动轮盘。
注意：左手移动的力量不可过大，操作中始终不要将石蜡带抻拉太紧，否则会使切下来的石蜡带断裂。
7. 当取下石蜡带时，应及时锁住切片机的轮盘开关，右手持解剖刀替换毛笔上的蜡带，用毛笔笔尖从石蜡带后面从下向上扫刀刃，同时，托住石蜡带的另一端缓慢放在干净的纸上。
操作应注意：1. 所切下的蜡带有反正面之分，与刀刃接触的蜡带面为反面，表面有光泽，应将其面放在纸上，要始终保持将石蜡带正面朝上。
2. 切片操作中切片的速度要均匀，尤其是标本蜡块经过切片刀刀刃的一段过程，不可忽快忽慢，切忌有停顿的现象。
3. 放在纸上的石蜡带要注意保存好，由于石蜡带很薄又很轻，极易受到外界的微小力量而吹散，尤其是在进行连续切片时。
4. 切下来的石蜡带应及时进行展片，存放时间越长，展片的质量就越差。
(九) 展片与烤片将一定长度的蜡带（连续切片）或用刀片断开成单个蜡片粘附于载玻片上，从展片台水浴锅中吸取温水（45℃左右）从玻片一端缓慢滴加，蜡带随着水流逐渐展平；展平后用滤纸吸除多余水分。
将载玻片放入展片板上，45℃温箱中干燥，也可在37℃温箱中干燥，但需适当延长时间。
注意：石蜡切片必须烘干，否则在以后的染色过程中会发生脱片。
（十）HE染色注意事项：（1）二甲苯脱蜡：脱蜡时间和室温高低有一定关系，室温高，脱蜡时间可短些，反之时间就要延长。
脱蜡必须彻底，室温过低时可放入温箱中脱蜡，否则，脱蜡未尽会影响下一步的进行。
（2）苏木素染色：染色时间应根据室温的高低、染色液的新旧、组织结构的差别、固定液的不同而有所区别。
如室温高，染色时间可短些，冬天室温过低时，也可放入温箱中进行。
染苏木素时，可以深染一点，以后分色时，在盐酸酒精中多停留一会，即深度重褪。
切片从苏木素取出后为深紫色。
（3）自来水浸洗：如自来水（流水）中冲洗10min左右，使切片颜色转至深蓝色为止。