武生院基因工程期末试题
2013-2014年度第二学期基因工程期末考试
卷型：A考试时间：90分钟满分：100分
一、名词解释（3X 5）
限制性内切酶（或其它工具酶）：能在特异位点上催化双联DNA分子断裂，产生相应的限制性DNA片段
荧光定量PCR所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法（半定量PCR是近年来常用的一种简捷、特异的定量RNA测定方法，通过mRNA反转录成cDNA再进行PCR扩增，并测定PCR产物的数量，可以推测样品中特异mRNA勺相对数量）星活性：非标准条件下切割相似序列，产生非特异性片段同裂酶（或同尾酶）：来源不同但具有相同识别序列，产生相同或不同末端转基因技术（或转基因动植物等）就是将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中，从而达到改造生物的目的。
二、填空（1 X 15）
1. Cosmid实际上是由cos位点和质粒构成的杂合载体,也可以说是带有cos序列的质粒。
2. 超螺旋质粒DNA开环质粒DNA线状质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳的特点是：电泳的泳动速度由大到小分别是：超螺旋质粒＞线状质粒＞开环质粒。
3. 质粒DNA的提取方法有碱裂解法、煮沸法、去污法。
4. 基因工程中常用载体是质粒、噬菌体、动植物病毒。
5. 设计引物是一般要求C+G的比例在40%-60%,长度在17-30bp 。
6. BAC载体与常规载体的区别在于复制单元的特殊性。
三、选择题（2X 15,实卷应是1X 35）
1. 基因工程创始人（D）
A A. Kornberg
B W. Gilbert
C P. Berg
D S. Cohen
2. 迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于（C）
A. 既可以作用于双链DNA，又可以作用于单链DNA
B. 只能作用于单链DNA
C. 只能作用于双链DNA
D. 只能作用于RNA
3. 氨苄青霉素的工作原理为（A ）
A. 可以抑制细胞壁肽聚糖的合成
B.可以抑制核糖体的转位
C. 可以与核糖体50S亚基结合并抑制蛋白质合成
D. 可以与核糖体30S亚基结合并抑制蛋白质合成
4. 反转录酶是一种（C ）
A. 依赖DNA的DNA聚合酶
B. 依赖DNA的RNA聚合酶
C.依赖RNA的DNA聚合酶
D. 依赖RNA的RNA聚合酶
5.11类限制性内切核酸酶（A ）
A. 仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
B. 限制性识别非甲基化的核苷酸序列
C. 有外切核酸酶和甲基化酶活性
D. 仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
6. 下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是II类酶的识别序列（C）
A. GAATCG
B.AACCTT
C. GATATC
D.ACGGCA
7. （多选）在基因工程中，可用碱性磷酸酶（AB ）。
A.止DNA的自身环化
B•同多核苷酸激酶一起进行DNA的5'端标记
C•制备突出的3'端
D. 上述说法都正确
8. K1enow酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了（ C ）的活性。
A. 5'—3'合成酶B . 3'—5'外切酶
C. 5'—3'外切酶D .转移酶
9. 自然界中存在的植物植物基因工程载体是（D）
A.YAC
B.根癌农杆菌
C. Puc18
D.Ti 质粒
10. 质粒具备下列特征，因此适合作为克隆载体，除了（B）。
A. 赋予宿主细胞某种可检测的特性
B. 甲基化防止宿主的限制性内切核酸酶对其降解
C•独立复制的能力
D. 可复制自身DNA以及插入的外源DNA
11. 用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为（C）。
A. 染色体DNA断成了碎片
B. 染色体DNA分子质量大，而不能释放
C. 染色体变性后来不及复性
D. 染色体未同蛋白质分开而沉淀
12. DNA提取过程中，异戊醇的作用是（D）。
A.使蛋白质脱水B .使DNA兑水
C•帮助DNA进入水相D .减少气泡，促进分相
13. PCR反应的必备条件是（B）o
A.至少有100个起始DNA分子B .拟扩增的目的DNA片段的部分序列信息
C. 扩增需要cDNA模板
D.至少100kb长度的模板
14•你打算扩增下面所示的两段序列之间的DNA
5' -GACCTGTGGAAGC-------------------- CATACGGGATTG-3 ' 3 '
-CTGGACACCTTCG ---------------------- GTATGCCCTAAC-5 '最适合的弓I物序列
是（B ）o
A. 弓I物1，5' -CTGGACACCTTCG^ 2，5' -GTATGCCCTAAC
B. 引物1，5' -GACCTGTGGAAGI（物2，5' -CAATCCCGTATG
C. 弓I物1, 5' -CGAAGGTGTCC引（物2, 5' -GTTAGGGCATAC
D. 弓I物1, 5' -GCTTCCACAGGTC物2, 5' -CATACGGGATTG
15、Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是（C ）。
A.用RNA探针检测DNA片段B .用RNA探针检测RNA片段
C•用DNA探针检测RNA片段 D .用DNA探针检测蛋白质片段
四、简答题（5题X 6）
1、基因工程的操作步骤是什么？制备目的基因方法有哪些？（或CTAB SDS原理？）答：1.获取目的基因2.从大肠杆菌中分离质粒 3.酶切目的基因与质粒
4. DNA连接酶连接目的基因与质粒
5.导入受体细胞表达
6.筛选与鉴定
获取目的基因方法：（1）以氨基酸序列为基础的功能克隆法（2）以核苷酸序列为基础的同源序列克隆法（3）基因组DNA文库（4）cDNA文库（5）图位克隆法（6）转座子标签法（7）T-DNA B入法（8）mRNA!异显示法（9）化学合成法（10）直接分离法（11）PCF分离法
2、何为载体？一个理想的载体应具备那些特点？
答：将外源DNA或目的基因携带入宿主细胞的工具称为载体。
载体应具备：
①在宿主细胞内必须能够自主复制（具备复制原点）；②必须具备合适的酶切位点，供外源DNA片段插入，同时不影响其复制；③有一定的选择标记，用于筛选；
④其它：有一定的拷贝数，便于制备。
⑤遗传稳定
3、影响限制性内切酶的活性因素？
答：①DNA的纯度②DNA甲基化程度③DNA勺分子结构④限制性核酸内切酶的缓冲液⑤酶切消化反应的时间和温度⑥反应体积和甘油浓度
4、简述cDNA文库的构建过程。
答：⑴细胞总RNA的提取和mRNA勺分离
⑵第一链合成：由mRNA^ cDNA的过程为反转录，由反转录酶催化。
⑶第二链合成：①自身引物合成法②置换合成法③引导合成法④引物一衔接头合成法
⑷双链cDNA里连接到质粒或噬菌体载体并导入大肠杆菌中繁殖
5、常用的工具酶有哪些？其主要用途是什么？（备选）
答：限制性内切核酸酶，DNA聚合酶和Klenow大片段,DNA连接酶，
碱性磷酸酶，末端脱氧核苷酸转移酶•
限制性内切核酸酶：能够识别特异的DNA碱基序列，DNA碱基序列往往呈回
文对称结构；
DNA聚合酶a位于细胞核内，也许是复合物，有催化细胞增生的作用；Klenow 大片段：它也可以通过基因工程得到，分子量为76kDa 。
DNA连接酶：负责双链DNA中相邻3、-OH与5'-磷酸基团之间的磷酸二酯键的形成。
碱性磷酸酯酶：从DNA或RNA的三磷酸核苷酸上除去5'磷酸根残基。
末端转移酶的作用是将脱氧核糖核苷酸通过磷酸二酯键加到DNA分子的3'-OH末端。
6重组分子筛选方法有哪些？并简述蓝白斑筛选原理。
（或基因工程在工农商的应用）
答：重组体的筛选方法：1遗传表型筛选法2结构特征筛选法3核酸分子杂交筛选法4免疫化学筛选法。
蓝白斑筛选原理：-半乳糖苷酶基因（Lac Z）的片段（竄基端），其上有外源DNA勺插入位点。
受体菌基因组中- IPTG诱导表达。
载体和受体菌基因组可以互补形成完整有功能的-半乳糖苷酶。
互补而产生的lacZ+细菌在诱导剂IPTG （异丙基-B -D-硫代半乳糖苷）的作用下，在生色底物X-Gal
（5-溴-4-氯-3-吲哚-B -D-半乳糖苷）存在时产生蓝色沉淀物，使菌落显蓝色。
如果外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，无法实现互补，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。
五、综合论述（15分）
现有pBR322质粒载体，你想将小鼠（真核）中的一个序列已知、编码单体酶蛋白的基因在大肠杆菌（原核）中表达，怎样进行？你又如何确保最终能得到产物？
Hindlll EcoRI | EcoRV
2000。
基因工程期末考试试题.docx
基因工程试卷B名词解释（每个2分，共20分）1、转化：2、质粒转移性：3、DNA文库：4、RACE:5、选择标记基因:6、降落PCR7、载体：8、感受态细胞：9CaMV35s:10、ORF:二、选择题（每题1分，共15分）2(）限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A修复自身的遗传缺陷C强化自身的核酸代谢）生物工程的下游技术是基因工程及分离工程促进自身的基因重组提局自身的防御能力蛋白质工程及发酵工程D分离工程及蛋白质工程1(3）基因工程操作常用的酶是:（1内切酶II连接酶III末端转移酶IV聚合酶A.I + IIB. I + III + IVC. II + III + IVD. I +11 + IV + III4 ()限制性内切核酸酶的星活性是指：A在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性。
B活性大大提高C切割速度大大加快D识别序列与原来的完全不同5()下列五个DNA片段中含有回文结构的是A.GAAACTGCTTTGACB. GAAACTGGAAACTGC. GAAACTGGTCAAAGD. GAAACTGCAGTTTC6 ()关于cDNA的不正确的提法是：A同mRNA互补的单链RNAB同mRNA互补的含有内含子的DNAC以mRNA为模板合成的双链RNAD以上都不正确7()下列有关连接反应的叙述，错误的是A,连接反应的最佳温度为37 °CB,连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C,连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于ImMD,连接酶通常应过量2-5倍8( )T4 -DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是A. 2' -OH 和5' —PB. 2' -OH 和3'-PC. 3'-OH 和5' —PD. 5'-OH 和3' -P9()载体的功能是A.外源基因进入受体的搭载工具B.不能为外源基因提供整合能力C.不能提供复制能力D.不能为外源基因提供表达能力10()黏性末端连接法，不仅操作方便，而且A产生新切点B易于回收外源片段C载体不易环化D影响外源基因的表达11()下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？A质粒B黏粒C酵母人工染色体(YAC)D X噬菌体12()考斯质粒(cosmid)是一种A.容量最大一种载体B,由X-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C.是一种单链DNA环状载体D,不能在受体细胞内复制，但可以表达13()某一重组DNA 的载体部分有两个BamHI酶切位点。
基因工程期末试题及答案
基因工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。
2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。
5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。
6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。
7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。
8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。
9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。
10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分）1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。
基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。
其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。
PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。
DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
2. 什么是转基因生物？请举例说明。
转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。
例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。
3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。
基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。
例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。
另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。
《基因工程原理与应用》期末考试试卷附答案
《基因工程原理与应用》期末考试试卷附答案一、名词解释(共5小题，每小题4分，共20分)1、基因工程：2、星活性：3、插入型载体：4、反转录PCR：5、感受态：二、填空题(共10空，每空2分，共20分)1、用酚—氯仿抽提DNA 时，通常要在氯仿或酚—氯仿中加少许异戊醇，这是因为异戊醇可以；分离DNA 时要使用金属离子螯合剂，如EDTA 和柠檬酸钠等，其目的是。
2、按照质粒拷贝数的多少，质粒可以分为和。
3、λ 噬菌体在感染大肠杆菌以后，可以进入Lytic growth 也可以进入Lysogenic state 。
如果其基因组DNA 通过专一性重组整合到宿主染色体中，则其进入。
；它也可以选择进入，大量复制并组装子代噬菌体颗粒。
4、ddNTP 与普通的dNTP 的不同之处在于ddNTP ，它们可以在DNA 聚合酶的作用下，通过其掺入到正在增长的DNA 链中，导致链延伸反应终止。
5、Klenow DNA 聚合酶是经蛋白酶裂解而从全酶中除去活性的多肽大片断，而其他活性保持不变。
三、选择题(共10题，每小题2分，共20分)1、限制性内切核酸酶可以特异性地识别（）。
A、特定的三联密码；B、双链DNA 的特定碱基对；C、双链DNA 的特定碱基序列；D、单链DNA 的特定碱基序列。
2、在切口平移方法标记DNA 探针时只能使用（）。
A、Klenow 酶；B、DNA 聚合酶Ⅰ；C、DNA聚合酶Ⅱ；D、DNA聚合酶Ⅲ。
3、在下列进行DNA 部分酶切的条件中，控制哪一项最好（）。
A、反应体积；B、酶反应温度；C、反应时间；D、酶量。
4、PCR 扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（）。
A、退火温度过低；B、退火温度过高；C、dNTP 浓度过高；D、循环次数过多。
5、以下不属于PCR 的应用的为（）。
A、随机扩增多态性DNA（RAPD）；B、扩增片段长度多态性（AFLP）；C、RACE；D、S1 酶作图。
6、pUC18 与pUC19 的区别在于（）。
基因工程期末考试试题及答案
基因工程期末考试试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然突变B. 基因的人工重组C. 基因的自然选择D. 基因的自然淘汰答案：B2. 下列哪项不是基因工程常用的工具酶？A. 限制性内切酶B. DNA连接酶C. 反转录酶D. 聚合酶链反应酶答案：C3. 基因枪技术主要用于：A. 植物基因转化B. 动物基因转化C. 微生物基因转化D. 病毒基因转化答案：A二、填空题1. 基因工程中，常用的载体有________、________和________。
答案：质粒、病毒、人工染色体2. 基因工程中，________是基因表达的调控元件。
答案：启动子三、简答题1. 请简述基因工程的基本步骤。
答案：基因工程的基本步骤包括：目标基因的获取、目标基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有重组DNA的宿主细胞、目的基因的表达和检测。
2. 基因工程在医学领域的应用有哪些？答案：基因工程在医学领域的应用包括：生产重组蛋白质药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
四、论述题1. 论述基因工程对农业生产的影响。
答案：基因工程对农业生产的影响主要体现在以下几个方面：提高作物的抗病虫能力、增强作物的抗逆性、改善作物的营养价值、提高作物的产量和质量、促进农业可持续发展。
2. 基因工程在环境保护中的应用。
答案：基因工程在环境保护中的应用主要包括：开发生物修复技术，用于污染土壤和水体的净化；利用基因工程改造微生物，用于处理工业废水和废气；通过基因工程改良植物，用于重金属污染土壤的修复等。
五、案例分析题1. 某公司利用基因工程技术成功开发了一种抗虫棉，该抗虫棉能够减少农药的使用，降低农业生产成本。
请分析该技术可能带来的社会、经济和环境效益。
答案：该技术可能带来的社会效益包括提高农民的生活质量，减少因农药使用带来的健康风险。
经济效益包括降低农药成本，提高作物产量，增加农民收入。
环境效益包括减少农药对环境的污染，保护生态平衡，促进农业的可持续发展。
基因工程期末考试题及答案
基因工程期末考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程中常用的工具酶是：A. 纤维素酶B. 限制性内切酶C. 淀粉酶D. 过氧化氢酶答案：B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因的表达C. 基因的克隆D. 基因的测序答案：D3. 基因枪法是一种：A. 植物转基因方法B. 动物转基因方法C. 微生物转基因方法D. 所有生物的转基因方法答案：A4. 重组DNA技术中，通常使用哪种质粒作为载体？A. 质粒DNAB. 线粒体DNAC. 核糖体RNAD. 染色体DNA答案：A5. 基因工程中，目的基因的表达通常需要：A. 启动子B. 终止子C. 增强子D. 所有选项答案：D二、填空题（每空2分，共20分）1. 基因工程是指按照人们的意愿，将不同来源的基因在体外构建杂合DNA分子，然后导入到活细胞和生物体内，以改变生物的遗传特性并取得新品种或新产品。
2. 基因工程中常用的宿主细胞有大肠杆菌、酵母菌和________。
答案：哺乳动物细胞3. 基因工程中，________是连接目的基因和载体DNA的关键酶。
答案：DNA连接酶4. 目的基因的表达需要________和________的协同作用。
答案：启动子；终止子5. 基因工程产品在医学领域的应用包括生产________、________和基因治疗等。
答案：重组蛋白；单克隆抗体三、简答题（每题10分，共30分）1. 请简述基因工程在农业中的应用。
答案：基因工程在农业中的应用主要包括提高作物的抗病性、抗虫性、抗旱性和提高作物的产量和品质。
例如，通过基因工程培育的抗虫棉可以减少农药的使用，提高棉花的产量和质量。
2. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、单克隆抗体、基因治疗和疫苗开发等。
例如，利用基因工程技术生产的胰岛素可以治疗糖尿病，单克隆抗体用于治疗癌症和自身免疫性疾病。
3. 请解释什么是转基因生物，并简述其潜在的风险。
基因工程试题及答案解析
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
20202021大学基因工程期末课程考试试卷含答案
20202021大学基因工程期末课程考试试卷含答案2020-2021大学基因工程期末课程考试试卷（含答案）一、选择题（共40题，每题2分，共80分）1. 以下哪项不是基因工程的主要应用领域？A. 转基因植物的培育B. 基因治疗的研究C. 疾病的基因诊断D. 遗传算法的应用2. 哪个细胞器是负责蛋白质合成的？A. 叶绿体B. 中心体C. 核糖体D. 质体3. 基因工程研究中的DNA重组技术是指：A. DNA的合成B. DNA的裂解C. DNA的修复D. DNA的重排4. 下面哪种技术是基因工程研究中经常用到的？A. 西方印迹B. 南方印迹C. 北方印迹D. 东方印迹5. PCR反应中，以下哪项是PCR的三个温度阶段？A. 解链、退火、延伸B. 解链、延伸、退火C. 退火、解链、延伸D. 延伸、退火、解链... （省略部分内容）二、判断题（共10题，每题2分，共20分）请判断以下各题，正确的在括号内打“√”，错误的在括号内打“×”。
1. （√）基因工程是应用与微生物的生物技术，对生物技术的发展起到了巨大推动作用。
2. （×）扩增子是一段有相同序列的DNA重复片段。
3. （√）逆转录聚合酶是将RNA的信息转录为DNA的酶类。
4. （√）转基因技术被广泛应用于农作物的改良。
5. （×）CRISPR/Cas9是一种RNA干扰技术。
三、简答题（共5题，每题10分，共50分）1. 请简述基因工程的概念及其应用领域。
解答示例：基因工程是利用生物技术对生物体中的基因进行操作与改变的一门学科。
其应用领域涵盖农业、医学、工业等多个领域。
例如，基因工程可以通过转基因技术，将具有特定性状的基因导入植物，提高作物的产量和抗逆能力；在医学领域，基因工程可以用于基因诊断、基因治疗等，旨在改善人类健康状况；在工业领域，基因工程可以生产各种重要蛋白质和化合物，应用于药物生产、环境污染治理等方面。
2. 请简述PCR反应的原理及其在基因工程中的应用。
基因工程期末考试试题及答案
基因工程期末考试试题及答案卷型：A考试时间：90分钟满分：100分一、名词解释（3X5）限制性内切酶（或其它工具酶）：能在特异位点上催化双联DNA 分子断裂，产生相应的限制性DNA片段荧光定量PCR所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法（半定量PCR 是近年来常用的一种简捷、特异的定量RNA测定方法，通过mRNA 反转录成cDNA再进行PCR扩增，并测定PCR产物的数量，可以推测样品中特异mRNA勺相对数量）星活性：非标准条件下切割相似序列，产生非特异性片段同裂酶（或同尾酶）：来源不同但具有相同识别序列，产生相同或不同末端转基因技术（或转基因动植物等）就是将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中，从而达到改造生物的目的。
二、填空（1X15）1.Cosmid实际上是由cos位点和质粒构成的杂合载体,也可以说是带有cos序列的质粒。
2.超螺旋质粒DNA开环质粒DNA线状质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳的特点是：电泳的泳动速度由大到小分别是：超螺旋质粒＞线状质粒＞开环质粒。
3.质粒DNA的提取方法有碱裂解法、煮沸法、去污法。
4.基因工程中常用载体是质粒、噬菌体、动植物病毒。
5.设计引物是一般要求C+G的比例在40%-60%,长度在17-30bp。
6.BAC载体与常规载体的区别在于复制单元的特殊性。
三、选择题（2X15,实卷应是1X35）1.基因工程创始人（D）A A.KornbergB W.GilbertC P.BergD S.Cohen2.迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于（C）A.既可以作用于双链DNA，又可以作用于单链DNAB.只能作用于单链DNAC.只能作用于双链DNAD.只能作用于RNA3.氨苄青霉素的工作原理为（A）A.可以抑制细胞壁肽聚糖的合成B.可以抑制核糖体的转位C.可以与核糖体50S亚基结合并抑制蛋白质合成D.可以与核糖体30S亚基结合并抑制蛋白质合成4.反转录酶是一种（C）A.依赖DNA的DNA聚合酶B.依赖DNA的RNA聚合酶C.依赖RNA的DNA聚合酶D.依赖RNA的RNA聚合酶5.11类限制性内切核酸酶（A）A.仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供B.限制性识别非甲基化的核苷酸序列C.有外切核酸酶和甲基化酶活性D.仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供6.下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是II类酶的识别序列（C）A.GAATCGB.AACCTTC.GATATCD.ACGGCA7.（多选）在基因工程中，可用碱性磷酸酶（AB）。
基因工程期末考试
一、名词解释1、基因:是一个含有特定遗传信息的核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。
1、基因工程（狭义）：Gene engineering又gene manipulation,是在分子生物学和分子遗传学等学科综合发展的基础上，于上世纪70年代诞生的一门崭新的生物技术科学，应用基因工程技术完全打破生物界物种的界限，在体外对大分子DNA进行剪切、加工、重组后引入细胞中表达，使其具有新的遗传特性，从而定向改造生物。
2、柯斯质粒：是一类由人工构建的含有λ噬菌体的cos位点序列和质粒复制子的质粒载体。
①具有噬菌体载体特点②具有质粒载体特点③高容量特点（30kb）④常具后性基因3、克隆载体：能够携带目的DNA片段进入宿主细胞进行扩增获得大量目的DNA的一类DNA分子。
4、细菌转化：一种细菌菌株由于捕获了另一种细菌菌株DNA,而导致性状特征发生遗传改变的生命过程。
5、连接酶：是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来的酶。
6、融合基因：指两个或多个基因的编码区手尾相连，置于同一套调控序列（包括启动子、增强子、核糖体结合序列、终止子等）调控之下，构成嵌合基因。
7、核酸外切酶Exonuclease：是一类从多核苷酸链的一头开始按顺序降解核苷酸的酶。
8、表达载体：能够携带目的DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达，获得目的DNA 蛋白质产物的一类DNA分子。
9、植物基因转化受体系统：指用于转化的外植体通过组织培养途径或其他非组织培养途径，能高效稳定的再生无性系，并能接受外源DNA整合，对转化选择抗生素敏感的再生系统。
10、冈崎片段：在DNA后随链的合成中先以片段的形式合成岗崎片段，多个岗崎片段再连接成完整的链。
二、问答题1、PCR的基本原理是什么，用PCR扩增某一基因，必须先得到什么样的信息？DNA半保留复制的原理，在体外进行DNA的变性、复性和引物延伸。
至少要预先知道足够合成一对引物的靶DNA序列。
2、在细菌细胞中表达真核基因，为什么要用cDNA而不用基因组DNA？为什么要在cDNA 前加上细菌的启动子？（1）真核生物基因组的编码DNA序列是含有内含子的间断序列，而细菌是原核生物，他们的编码基因组DNA是连续的不含内含子的。
基因工程试题及答案
《基因工程》试卷一、选择题（每小题1.5分，共15分）1．基因工程的创始人是．基因工程的创始人是 ( )。
A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen 2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。
不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶序列的两种酶构成 B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统修饰系统3．在DNA的3’-5-5’’链上，基因的起始密码子是链上，基因的起始密码子是 ( ) A A TG（或GTG）B AGT C TAG D TGA 4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。
A 双链DNA的特定碱基对的特定碱基序列的特定碱基对 B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码以上都正确特定的三联密码 D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。
活性。
A 3’®5’DNA聚合酶聚合酶 C 5’®3’DNA内切酶D 5’®3’DNA外切酶外切酶聚合酶 B 5’®3’DNA聚合酶6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。
是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。
因而有较多的拷贝数。
B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7．关于cDNA的最正确的说法是( )。
A 同mRNA互补的单链DNA B 同mRNA互补的双链DNA C 以mRNA为模板合成的双链DNA D 以上都正确以上都正确8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确，下列说法中哪一项不正确? ( ) A 是最常用的DNA连接酶。