可溶性糖含量的测定
可溶性糖的测定方法
可溶性糖的测定方法可溶性糖的测定方法有多种，常用的方法包括显色法、比色法、电化学法和色谱法等等。
下面将详细介绍这些方法的原理和步骤。
1. 显色法：显色法是通过特定的试剂与可溶性糖发生反应，产生有色产物来测定糖含量的方法。
常用的试剂有硝酸铜和菲林试剂。
步骤：1）将待测样品与硝酸铜溶液混合，加热沸腾，反应生成红色沉淀。
2）离心沉淀，取上清液用氨水中和。
3）将中和后的溶液与菲林试剂混合，加热沸腾，产生显色反应。
4）使用分光光度计测定显色溶液的吸光度，根据吸光度与可溶性糖浓度之间的关系，计算样品中可溶性糖的含量。
2. 比色法：比色法是通过将待测样品与特定试剂反应，产生有色产物，并与标准溶液进行比色，从而计算样品中可溶性糖含量的方法。
常用的试剂有邻苯二酚、菲林试剂和磷酸重铈。
步骤：1）将待测样品与试剂混合，使其发生特定反应生成有色产物。
2）根据反应产物的颜色强度，与标准溶液的颜色强度进行比较，计算样品中可溶性糖的含量。
3. 电化学法：电化学法是通过利用可溶性糖在电极表面发生氧化还原反应，测定电流、电势或电导率的变化来确定糖浓度的方法。
常用的电化学方法有极谱法和电导法。
步骤：1）将待测样品与电解质溶液混合，形成电解质溶液。
2）将电解质溶液置于电极中，测量电流、电势或电导率的变化。
3）根据电流、电势或电导率的变化，计算样品中可溶性糖的浓度。
4. 色谱法：色谱法是通过使用色谱柱将样品中的可溶性糖分离，并通过检测分离后的峰面积或浓度来测定糖含量的方法。
常用的色谱技术有气相色谱和液相色谱。
步骤：1）将待测样品溶解，注入色谱柱。
2）通过调节流动相的组成和流速，使样品中的可溶性糖分离。
3）通过检测分离后的峰面积或浓度，计算样品中可溶性糖的含量。
总结：可溶性糖的测定方法有显色法、比色法、电化学法和色谱法等等。
选择合适的测定方法需要根据具体的需求和实验条件来确定。
无论采用哪种方法，都需要在严格控制实验条件的前提下进行，以确保结果的准确性和可重复性。
植物组织中可溶性糖含量的测定
植物组织中可溶性糖含量的测定碳素营养中，作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。
它们在营养中的作用主要有：合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为NH 3 的受体而转化为氨基酸；糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。
由于碳水化合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。
Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖一、原理糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量测定。
该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。
在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。
但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。
此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为 620 nm ，故在此波长下进行比色。
二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料任何植物鲜样或干样。
（二）试剂1. 80 ％乙醇。
2. 葡萄糖标准溶液（ 100 μg/mL）：准确称取 100 mg 分析纯无水葡萄糖，溶于蒸馏水并定容至 100 mL ，使用时再稀释 10 倍（ 100 μg/mL）。
可溶性糖测定方法
可溶性糖测定方法可溶性糖测定方法是一种常用的分析方法，用于测定食品、饮料、果汁等中的可溶性糖含量。
可溶性糖是指在水中能够溶解的糖类化合物，如葡萄糖、果糖、蔗糖等。
测定可溶性糖含量可以帮助我们了解食品的甜味程度，还可以用于质量控制和产品开发等方面。
目前常用的可溶性糖测定方法主要包括比色法、光度法和高效液相色谱法等。
下面我将分别介绍这些方法的原理和步骤。
首先是比色法。
这种方法基于可溶性糖分子与特定试剂的反应，生成具有一定颜色的复合物。
比色法最常用的试剂是菲龙试剂、安利试剂和硝酸铜试剂等。
测定步骤一般包括样品的准备、试剂的配制和比色测定。
样品的准备通常是将食品或饮料样品经过适当处理后，将溶液通过滤纸滤除杂质。
试剂的配制则是根据给定的比例将试剂与溶剂混合。
比色测定时，则是将样品溶液和试剂溶液混合，并在一定时间内测量其吸光度。
根据比色复合物的吸光度与可溶性糖含量的关系，即可计算出样品中可溶性糖的含量。
其次是光度法。
这种方法是利用可溶性糖溶液对特定波长的光的吸收特性进行测定的。
光度法需要使用专用的光度计或分光光度计进行测量。
测定步骤与比色法类似，首先是样品的准备和试剂的配制，然后将试剂与样品溶液混合，并将混合溶液转移到光度计中进行测量。
光度计会根据样品溶液对光的吸收情况，输出吸光度值。
根据吸光度与可溶性糖浓度的相关关系，可以计算出样品中可溶性糖的含量。
最后是高效液相色谱法。
这种方法需要使用高效液相色谱仪进行分析。
高效液相色谱法是通过样品中可溶性糖与色谱柱中的填料分离，进而进行测定的。
测定步骤包括样品的制备和高效液相色谱仪的设置。
样品的制备一般涉及样品的提取和净化等过程。
提取过程通常使用有机溶剂将可溶性糖从样品中提取出来，净化过程则是通过固相萃取等手段去除杂质。
高效液相色谱仪的设置则是根据样品特性，选择合适的色谱柱，并设置适当的流动相条件和检测波长。
测定时，样品溶液会经过自动进样器注入色谱柱，可溶性糖在柱中与填料相互作用而分离，然后通过检测器检测吸收峰面积或浓度，最终计算出样品中可溶性糖的含量。
可溶性糖含量的测定
可溶性糖含量的测定实验九植物组织中可溶性糖含量的测定2005级生物科学(1)班赵银锁(40508010) 一(实验目的学习可溶性糖测定的蒽酮比色法二(实验原理植物在个体发育的各个时期，代谢活动也发生相应的变化，碳水化合物的代谢也不例外其含量也随之发生变化。
了解可溶性糖含量的变化，在生理上和实践上都有重要的意义。
本实验采用蒽酮比色法测定可溶性糖的含量。
糖在硫酸的作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用，形成一种绿色的络合物.在低浓度时，625nm的OD值与糖含量成正相关。
该实验方法简便，但没有专一性，对于绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮反应，产生颜色。
三(实验用品721型分光光度计分析天平研钵恒温水浴锅烧杯刻度试管大试管活性炭移液管漏斗酒精(80%)葡萄糖标准溶液:称取已在80?烘箱中烘至恒重葡萄糖100mg,配制成500mL溶液，即得每mL含糖为200μg的标准溶液。
蒽酮试剂:称取1g经过纯化的蒽酮，溶解于1000mL稀硫酸中即得。
稀硫酸溶液由760mL浓硫酸(比重1.84)稀释成1000mL而成。
四(实验步骤1.可溶性糖的提取称取0.5g的新鲜植物叶片，于研钵中加80%酒精4ml，仔细研磨成匀浆，倒入离心管内，置于80?水浴中不断搅拌30min，离心10分钟(5000转/min)，收集上清液于10ml的刻度试管中，其残渣加2ml80%酒精重复提1次，合并上清液。
在上清液中加0.5g活性炭，80?水浴脱色30min,定容至10ml，过滤后取滤液(稀释10倍或20倍后)测定。
2.显色及比色吸取上述糖提取液1mL，放入一干洁的试管中，加蒽酮试剂5mL混合之，于沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却，然后于分光光度计上进行测定，波长为625nm，测得吸光度。
从标准曲线上查得滤液中得糖含量(或经直线回归公式计算)，然后再行计算样品中含糖百分数。
3.绘制标准曲线1取标准葡萄糖溶液将其稀释成一系列不同浓度的溶液，浓度分别为每mL含糖0、5、10、20、40、60、80μg。
植物可溶性糖含量的测定
植物可溶性糖含量的测定可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的果树作物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。
对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。
因此，可溶性糖的定量讨论对果树的品质育种具有重要意义。
一、试材及用具1．试材新奇或冷冻的植物材料2．仪器及试剂高速组织捣碎机、电热恒温水浴锅、1000W调温电炉以及200mL、250mL容量瓶、250mL锥形瓶及50mL碱式滴定管等玻璃仪器；试剂主要包括费林试剂及亚甲基蓝溶液等。
二、原理本试验的主要原理：在加热条件下，用还原糖溶液滴定肯定量的费林试剂时，将费林试剂中的二价铜还原为一价铜，以亚甲基蓝为指示剂，稍过量的还原糖马上使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝。
通过试验，学习并把握用费林试剂滴定法测定可溶性糖的原理和方法。
三、方法步骤（一）试剂配制1．费林试剂甲：称取硫酸铜（CuSO45H2O，分析纯）34.6g溶于水中，稀释至500mL，过滤，贮于棕色瓶内。
2．费林试剂乙：称取氢氧化钠50g和酒石酸钾钠（KNaC4O6H44H2O，分析纯）138g溶于水中，稀释至500mL，用石棉垫漏斗抽滤。
3．转化糖标准溶液：称取9.5g蔗糖（分析纯）用水溶解后转入1000mL容量瓶中，加入6mol/L HCl（分析纯）10mL，加水至100mL。
在20～25℃下放置三天或在25℃保温24h，然后用水定容（此为酸化的1%转化糖液，可保存3～4个月）。
测定时，取1%转化糖液25.00mL放入250mL容量瓶中，加入甲基红指示剂一滴，用1mol/L NaOH溶液中和后用水定容，即为1mg/mL转化糖标准溶液。
4．亚甲基蓝溶液：称取0.5g亚甲基蓝（分析纯）溶于10mL水中。
5．乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌[Zn(OAC)22H2O，分析纯]溶于水中，加冰乙酸3mL稀释至100mL。
可溶性糖测定
引言可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖等单糖和双糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的植物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。
对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。
因此，可溶性糖的定量研究对植物的品质育种、储藏、加工特性等具有重要意义。
而且可溶性糖广泛存在于植物的根、茎块和种子中，是人体热量的最最主要来源，具有较高的营养价值。
本文重点介绍蒽酮比色法、铜还原碘量法、费林试剂法、原子吸收法、气相色谱法、液相色谱-蒸发光散射法，及连续流动法这几种实验如何定量测定可溶性糖含量。
1 蒽酮比色法1.1 原理糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关。
在625 nm波长下的OD值与糖含量成正比。
由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。
1.2 仪器与材料1.2.1实验仪器分光光度计，电炉，铝锅，电子天平，20ml刻度试管，刻度吸管5ml 1支、1ml 2支，漏斗。
1.2.2实验试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶析出，可微热溶解。
（2）浓硫酸（比重1.84）。
1.2.3实验材料植物叶片。
1.3 实验方法1.3.1标准曲线的制作取20ml刻度试管11支，从0～10分别编号，按表24-1加入溶液和水。
然后按顺序向试管内加入1ml 9%苯酚溶液，摇匀，再从管液正面快速加入5ml浓硫酸，摇匀。
比色液总体积为8ml，在恒温下放置30min，显色。
然后以空白为参比，在485nm 波长下比色测定，以糖含量为横坐标，光密为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直线方程。
按表1加入标准的蔗糖溶液，然后按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
植物体内可溶性糖含量的测定
植物体内可溶性糖含量的测定——蒽酮法一、实验目的1.了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理2.掌握分光光度计的使用二、实验背景糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。
不同载培条件不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。
因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。
三、实验原理总糖是指样品中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。
蒽酮比色法是测定样品中总糖量的一个灵敏、快速、简便的方法。
其原理是糖类在较高温度下被硫酸作用脱水生成糠醛或糖醛衍生物后与蒽酮(C14HoO)缩合成蓝色化合物。
溶液含博量在每mL 150 pg以内，与蔥酮反应生成的颜色深浅与糖量成正比。
蒽酮不仅能与单糖也能与双糖、糊精、淀粉等直接起作用,样品不必经过水解。
四、材料、仪器及试剂1.材料：苹果2.仪器：分光光度计恒温水箱试管漏斗容量瓶试管架研钵刀片3.试剂：蒽酮试剂(称取100 mg蒽酮溶于100 mL 98%硫酸溶液(A.R)中）葡萄糖标准溶液(100 μg)/mL(精确称取100 mg干燥葡萄糖,用蒸馏水定容至1000 mL）。
样品溶液（可自选待测物制成样品溶液。
eg：称取0.1g苹果剪碎置于研钵中加入少量蒸馏水研磨成匀浆然后转入20ml刻度试管中用10ml蒸馏水分次洗涤研钵洗液一并转入刻度试管中。
置沸水浴中加盖煮沸10分钟冷却后过滤滤液收集于100ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度摇匀备用。
）四、实验方法1.葡萄糖标准曲线的制作：取七支干燥洁净的试管编号后，按下表操作。
编号123456700.100.200.300.400.600.80葡萄糖标准液(100ug/ml)H2O 1.00.900.800.700.600.400.20蒽酮试剂10101010101010每管加人葡萄糖标准液和水后立即混匀，迅速置于冰浴中，传各管都加人蒽酮试剂后，同时置于沸水浴中，准确加热7分钟，立即取出置冰浴中迅速冷却。
实验方案
（1）可溶性糖含量测定(10月为0.1g)采用蒽酮比色法。
准确称取待测样0.3g，先在样品中加入少量石英砂充分研磨，加10ml蒸馏水后放入试管中，沸水浴提取30min，然后将提取液过滤到25ml容量瓶中，反复漂洗试管及残渣，定容至刻度线。
吸取样品提取液0.2ml于试管中，加去离子水1.8ml，然后向各试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，精确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白做参比，在630nm下测其吸光度。
可溶性总糖的含量（mg·g-1FW）=C×Vt/（Vs×W）式中C:查标准曲线得糖含量（ug）;vT:提取液总体积（ml）;vs:测定时取样量;（ml）w:样品鲜重（g）蒽酮乙酸乙酯:1g蒽酮溶于50ml乙酸乙酯中，避光，加热贮藏于棕色瓶中。
9.2mol/l高氯酸：73.7ml高氯酸定容于100ml容量瓶葡萄糖标准液：准确称取100mg分析纯无水葡萄糖溶于蒸馏水并定容至1000ml。
（2）淀粉(10月为0.1g)采用蒽酮比色法。
将提取可溶性糖的过滤液残渣用10ml去离子水转移到试管中，放入沸水浴15min，再加9.2mol/L高氯酸2ml，充分提取15min。
然后冷却过滤，用去离子水定容至25ml容量瓶中。
吸取0.2ml提取液于试管中，依次加入1.8ml去离子水、0.5ml2%蒽酮乙酸乙酯及5ml98%的浓硫酸，然后在振荡器上充分振荡混匀，立即投入到沸水浴保温1min，自然冷却后在630nm波长下测定OD值，每个处理重复3次。
得到的OD值代入葡萄糖保准曲线查找相应的葡萄糖含量，按下式计算出样品中淀粉含量。
淀粉含量（mg·g-1FW）= C×Vt×0.9 /（Vs×W）式中C:查标准曲线得糖含量;vT:提取液总体积（ml）;vs:测定时取样量;（ml）w:样品鲜重（g）标准曲线淀粉标准液：准确称取100mg纯淀粉，放入1000ml容量瓶中，加入600-700ml蒸馏水，放入沸水浴中煮30min，冷却后加蒸馏水至刻度。
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可溶性糖含量的测定
切取样品0.5g置入研钵内，加入蒸馏水和少量石英砂研磨至匀浆，将匀浆连同残渣一起定容至100mL的容量瓶中，室温下静置30～60min（每隔5min混匀一次），或离心或过滤，弃去残渣。
取干净试管若干支，分别加入样液1ml和蒽酮试剂5ml，摇匀后于沸水浴中，加热10min，冷却后于620nm下测定吸光值（以标准曲线的空白为零点），并记录数据。
根据标准曲线可计算出每个处理每1g样品所含有的可溶性糖含量。
结果与计算
C＝AN/W
C.样品可溶性糖量（ug/g）；A.标准曲线中得到的可溶性糖量（ug）；N.稀释倍数；W.样品重量（g）。
注意事项：
✧研磨要充分，否则提取样品的糖含量会偏低；
✧研磨后静置的过程要求每隔一段时间将容量瓶上下颠倒混匀这样
可以使糖充分地提取至溶液中；
✧要求严格掌握反应的时间和温度；
✧比色前，需冷却才能比色，否则温度会影响到比色的结果；
✧蒽酮试剂不稳定，易被氧化变成褐色，所以一般为当天配置；
蒽酮试剂的配制：称取0.2g蒽酮溶于100ml98%浓硫酸中。