D二聚体的检测及临床应用
D二聚体的检测及临床意义

D二聚体的检测及临床意义D二聚体是一种纤溶系统的参数,是指血浆中的纤维蛋白原(Fibrinogen)在凝血系统激活后,被凝血酶裂解产生的产物。
它反映了体内纤溶过程的活性和程度,因此可以用于检测和评估机体炎症、血栓形成及其他相关疾病的风险和临床意义。
1.血栓疾病的评估:D二聚体水平与血栓形成密切相关,因此可以作为评估血栓疾病风险的指标。
例如,D二聚体的测定可以用于评估深静脉血栓形成、肺血栓栓塞症等血栓相关疾病的风险程度。
一般来说,D二聚体水平升高可能意味着血栓形成的风险增加。
但需要注意的是,D二聚体的升高并不一定意味着血栓形成已经发生,因此还需要结合临床病史和其他检查结果进行综合判断。
2.炎症反应的监测:炎症反应的激活也会导致D二聚体水平升高。
因此,D二聚体的测定可以用于监测炎症疾病的病情进展和疗效评价。
例如,在感染、炎症性肠病、风湿性关节炎等疾病中,D二聚体水平的变化可以反映机体炎症反应的活跃程度,有助于指导治疗和判断预后。
3.恶性肿瘤的诊断和疗效评价:一些研究表明,恶性肿瘤患者体内的凝血系统和纤溶系统活性增加,导致D二聚体水平的升高。
因此,D二聚体的测定可以作为恶性肿瘤的辅助诊断指标。
此外,通过监测D二聚体水平的变化,还可以评估抗肿瘤治疗的疗效和预后。
4.预测和评估心血管疾病的风险:高血压、冠心病、心肌梗死等心血管疾病与血栓形成密切相关。
研究发现,D二聚体水平的升高与心血管疾病的风险增加有关。
因此,D二聚体的测定可以作为预测和评估心血管疾病风险的指标。
需要指出的是,虽然D二聚体在临床上有重要意义,但由于其水平受多种因素影响,因此临床医生在解读检测结果时应综合考虑病史、临床症状和其他相关检查结果。
此外,D二聚体的升高并不一定意味着存在病理过程,因此在临床实践中仍应结合其他检查结果进行综合判断。
总之,D二聚体的检测和临床意义主要包括评估血栓疾病风险、监测炎症反应、恶性肿瘤的诊断和疗效评价,以及预测和评估心血管疾病风险等。
D二聚体的检测及临床意义(整理).pptx

D-二聚体的检测及临床意义
近年由于血栓性疾病的增多,检验医学即时检验(POCT)在免 疫测定技术方面,特别是在出凝血和血栓性疾病的研究上取得了 重大的进展。D-二聚体的检测方法,从传统的定性试验,变为简 单快速准确定量的即时检验。金标全定量快速检测对于血栓性疾 病的及时准确诊断、以及对溶栓治疗的疗效监测,是必不可少的 重要指标。 一、D-二聚体的形成
4
学海无 涯
静脉血栓栓塞症(VTE)的危险因素
较低的危险因素
中度危险因素
高危险因素
卧 床 >3 日
膝关节手术
骨折(髋或腿)
长时间的处于静止状态 中央静脉狭窄
髋或膝复位
(如乘车或乘长途飞机)
年龄增大
恶性肿瘤、化疗
大手术
腹腔镜外科
充血性心衰、呼衰
大创伤
减肥
荷尔蒙代替物口服避孕药 脊髓损伤
怀孕/产后
偏瘫性中风
D-二聚体的升高反映了体内存在着凝血及纤溶活性增强的 重要分子标志物。因此它既可反映体内存在着血栓或继续形成的 状况,又可反映体内纤溶活性增强的指标,因为纤维蛋白降解产 物中,唯有 D-二聚体可反映血栓形成后的溶栓活性,对于临床血 栓性疾病的诊断和溶栓治疗有着极其重要的价值。
1
学海无涯
二、D-二聚体检测的方法学的进展 1、三 P 试验:FDP 碎片X 和可溶性纤维蛋白单体 FM 复合物的 定性试验。
2
学海无涯
告,其值正好相差一半。所以在评价 D-二聚体结果时应注意上述 问题。
3
学海无涯
三、D-二聚体检测的临床应用 D-二聚体增高提示了与体内各种原因引起的血栓性疾病相
关。同时也说明了纤溶活性的增强;临床上常见于弥慢性血管内 凝血(DIC)、深静脉血栓(DVT)、肺栓塞(PE)、急性心肌梗 塞 、脑梗塞、恶性肿瘤、卵巢癌、肺癌、败血症、肝病、妊高征 孕妇、先兆子痫、烧伤、外科手术、创伤和脓毒血症等均可使 D-二聚体升高,但是 D-二聚体检测的升高并不能说明血栓形成 的原因及位置,必须结合临床和其他检测分析结果。
D二聚体检测的临床应用

VS
研究显示,重症肺炎患者的D-二聚体 水平往往较高,提示其凝血系统存在 一定程度的激活。此外,D-二聚体水 平与患者的预后也存在一定关联,高 D-二聚体水平可能提示不良预后。
04
D二聚体检测在肿瘤疾病 中的应用
恶性肿瘤
辅助诊断
D二聚体检测有助于诊断恶性肿瘤,特别是 结直肠癌、胃癌、肺癌等。高水平的D二聚 体可能提示肿瘤的存在。
在败血症发生时,纤维蛋白在纤溶酶的作用下可降解为可溶性纤维蛋白降解产物,包括D-二聚体、 FDP,故D-二聚体检测、血浆FDP检测可反映共同凝血途径的功能;且D-二聚体检测、血浆FDP检测 与APACHE II评分呈正相关,提示疾病严重程度。
感染性休克
D二聚体检测在感染性休克中也具有应用价值。感染性休克时,炎症介质释放会 引起凝血系统激活,纤维蛋白在纤溶酶的作用下可降解为可溶性纤维蛋白降解产 物,包括D-二聚体、FDP。
子宫内膜异位症
要点一
总结词
D二聚体检测可以辅助诊断子宫内膜异位症,并有助于 评估其严重程度。
要点二
详细描述
子宫内膜异位症是一种常见的妇科疾病,患者往往会 出现痛经、不孕等症状。D二聚体检测可以检测到子宫 内膜异位症患者血清中升高的D-二聚体水平,这有助 于辅助诊断该疾病,并有助于评估其严重程度。
卵巢囊肿蒂扭转
肺栓塞
总结词
D二聚体检测可帮助诊断肺栓塞,并评估其严重程度。
详细描述
肺栓塞是指肺动脉被栓子堵塞导致的一系列病理生理变化,D二聚体检测可以通 过检测栓子的主要成分纤维蛋白在纤溶酶作用下可降解为可溶性纤维蛋白降解 产物的含量来帮助诊断肺栓塞,并评估其严重程度。
急性心肌梗死
总结词
D二聚体检测有助于诊断急性心肌梗死。
D-二聚体检测与临床应用ppt课件全

在凝血过程中,凝血酶使纤维蛋白原水解,释放出纤维蛋白FPA和FPB,然后构成纤维蛋自单体〔SFM〕,SFMY链之间构成ε〔—γ谷氨酰胺〕—赖氨酸交联,然后构成纤维蛋白。这种γ链之间的共价交联是构成DD的构造根底。交联纤维蛋白在溶解过程中,释放出X’、Y’、D’、E’等碎片,这些碎片进一步降解为最小的片段DD、DD/E、YD/YD、YY/DD等复合物。 DD分子量约62000D,在体内半衰期>3h,主要经肾脏排泄。
谢谢!
DIC 早期诊断和动态监测
血小板计数:<100×109/L,或进展性下降 血浆纤维蛋白原:< 1.5 g/L 或 > 4.0 g/L,或进展性下降 D-二聚体、FDP:进展性增高,3P实验阳性 凝血酶原时间〔PT〕:缩短或较正常对照延伸 3 sec以上, 肝病超越 5 sec 纤溶酶原〔PLG〕:含量、活性降低 抗凝血酶〔AT〕:含量、活性降低〔肝病不适用〕 FⅧ活性:<50%〔肝病必备〕
溶栓治疗的评价与检测
不同疾病的溶栓治疗,D-二聚体峰值变化的时间有所不同。 ▲ 在急性心梗、脑梗溶栓后1~6h D-二聚体到达峰值,24h降至溶栓治疗前程度; ▲ 在DVT溶栓治疗时,D-二聚体峰值常出如今24h或以后。 ▲ 慢性期DVT患者,溶栓前D-二聚体含量高于正常,而溶栓后D-二聚体含量不升高,或迅速下降至正常范围,阐明此时仅有少量新颖血栓构成,大部分为机化的陈旧血栓,溶栓常不能收到称心效果。
三、 D-二聚体的临床运用
临床运用
★深静脉血栓、肺栓塞〔早期排除诊断〕 ★ DIC的早期诊断和动态监测 ★溶栓治疗评价及血栓复发的监测 ★外科手术后的血栓监测 ★妊高症、先兆子痫的监测 ★恶性肿瘤、白血病 早期识别、抗凝治疗 ★肝脏疾病〔重症肝炎、肝硬化〕 ★肾脏疾病〔肾病综合征、肾移植术后〕 ★心血管疾病病情评价 ★脑梗死鉴别和治疗监测
D-二聚体的实验室检测和临床应用(完整版)

D-二聚体的实验室检测和临床应用(完整版)D-二聚体是交联纤维蛋白的降解产物,是凝血和纤溶系统激活的重要标志物之一,已在多种疾病的诊断及治疗中得到广泛应用。
为解决D-二聚体在实验室检测中面临的关键问题,给D-二聚体的临床合理应用和正确解读提供参考,相关专家商讨并制定了《D-二聚体实验室检测与临床应用中国专家共识》,要点如下。
D-二聚体病理生理学D-二聚体是交联纤维蛋白的降解产物,但其只在交联纤维蛋白降解时产生,因此D-二聚体可作为机体凝血活化和继发纤溶激活的标志物。
纤维蛋白(原)降解产物(FDPs)是纤维蛋白原和(或)纤维蛋白被纤溶酶降解后大小不等片段产物的混合物,D-二聚体是否包含在内,取决于是否有交联纤维蛋白形成和被降解(图1)。
实验室检测推荐意见1:(1)同一医疗机构应采用同一种D-二聚体检测方法(强推荐);(2)不同检测系统间D-二聚体检测结果难以相互比较,连续检测建议使用同一检测系统(强推荐);(3)检验工作者应熟悉本实验室D-二聚体检测的方法、检测敏感度和阴性预测值等(强推荐)。
推荐意见2:(1)D-二聚体检测的批内精密度:正常质控品或血浆标本CV应≤15%,异常质控品或血浆标本CV应≤10%;日间精密度CV应≤15%,当D-二聚体用于VTE排除诊断时,应设置质控靶值水平在cut-off值附近的室内质控,且cut-off值检测结果的日间精密度CV应≤7.5%(强推荐);(2)D-二聚体在cut-off值浓度水平处的敏感度应≥97%,阴性预测值应≥98%(可信区间的下限≥95%)(强推荐)。
推荐意见3:(1)实验室应根据所用D-二聚体检测系统的方法学、制造商声明和自己的验证结果来确定标本的拒收原则(强推荐);(2)解读D-二聚体检测结果时,应始终考虑样本因素、生理状态及药物的影响(强推荐)。
推荐意见4:(1)实验室应使用来源明确且经本地验证的正常参考区间,同时标注当前检测系统用于VTE排除诊断的cut-off值(强推荐);(2)使用μg/L或mg/L作为D-二聚体的测量单位,FDPs测量单位应与D-二聚体统一(推荐);(3)D-二聚体报告应提供的要素包括:正常参考区间、VTE排除诊断cut-off值(如已验证)、报告方式(FEU或DDU)和计量单位(μg/L、mg/L)(强推荐)。
D二聚体的检测方法和临床应用

D二聚体的检测方法和临床应用二聚体是指由两个相同或不同的分子通过非共价键(如氢键、范德华力等)结合而形成的复合物。
在生物学中,二聚体广泛存在于蛋白质和其他生物大分子中,具有重要的结构和功能特性。
常用的二聚体检测方法主要包括生物物理学方法、生物化学方法和生物学方法。
下面将详细介绍这些方法及其临床应用。
一、生物物理学方法1.X射线晶体学:通过晶体学方法可以解析蛋白质的三维结构,从而确定其是否形成二聚体。
这种方法通常需要纯化蛋白质并生长合适的晶体,然后利用X射线进行结构解析。
X射线晶体学方法在发现和研究二聚体相关的蛋白质结构中具有重要作用。
2.核磁共振(NMR):NMR方法利用核磁共振现象对样品进行谱学分析,可以获得蛋白质高分辨率的三维结构信息。
通过对蛋白质NMR谱图的分析,可以确定蛋白质是否为二聚体。
二、生物化学方法1.凝胶过滤色谱:凝胶过滤色谱是常用的二聚体检测方法之一、通过调整凝胶孔径大小,可以将不同大小的蛋白质分离开来。
如果目标蛋白质是二聚体结构,则它将形成相对较大的峰,可以通过检测这些峰来确定是否为二聚体。
2.蛋白质交联:蛋白质交联是利用交联剂将蛋白质分子中的两个或多个结合位点连接起来,从而形成二聚体或多聚体。
通过蛋白质交联反应可以直接观察到蛋白质是否发生了二聚化。
三、生物学方法1.免疫共沉淀:免疫共沉淀是通过抗体特异性地与目标蛋白质结合,然后利用沉淀方法从混合物中沉淀出来。
如果目标蛋白质是二聚体结构,可以通过与其相互作用的蛋白质一起被沉淀下来,从而证明其为二聚体。
2.双杂交法:双杂交法是一种通过蛋白质-蛋白质相互作用来检测蛋白质二聚体的方法。
该方法通过将目标蛋白质与一个报告基因(如荧光素酶)的两个部分连接起来,当与蛋白质相互作用时,可以观察到荧光素酶活性的改变。
这种方法常用于筛选新的蛋白质二聚体对。
在临床应用方面,二聚体检测方法有着广泛的应用。
二聚体在许多疾病的发生和发展中起着重要的作用,因此对二聚体的检测对临床诊断和治疗具有重要的价值。
D-二聚体检测的方法及其临床应用
1.VIDAS DD(Biomerieux,France)是一种定量全自动ELISA法,在VIDAS免疫分析仪上进行。它 将两步的免疫夹心法与最后的荧光检测结合起来。利用现成的单剂量试剂和分析仪中储存的校准系统, 对单份样本进行检测。现成试剂由包被了鼠抗D-D单抗的固相移液装置和一试剂条组成)、洗涤剂、样品稀释剂和底物。将200ul血浆
3.Nycocard D-dimer Nycomed本法在多孔薄膜上经免疫过滤后,由单抗偶朕金抗体,后者的结合 剂所产牛的红色强度由Nycocard显示,强度与血浆中D-D水平(500-8000ng/ml)成比例,可定量检测。 几分钟内即可完成。敏感性和NPv在不同报道中差别较大,并且厂商和实验室的结果存在较大的差异。 可能的原因是被研究的人群不同,如门诊患者以及近端DVT患者的比例等。然而,无论如何解释,这种 实验室之间结果的不可重复性不可避免将影响其临床应用。 (三) 方法学的局限性
二、D-D的检测方法 D-D的检测方法有多种,主要是基于胶乳凝集原理的定性或半定量试验以及基于ELISA原
理的定量测定,也有—些方法采用免疫浊度原理或免疫荧光原理。胶乳法灵敏度较低,而经典ELISA 法操作费时,都不适合急诊使用。现在已经发展了数种快速的、叮检测单份标本的高灵敏度检测方法。 其中应用最广泛、得到临床研究认可的快速检测方法主要有两种:一种是在全血小进行的,只需2分钟 就可得到定性结果的试验(自身红细胞凝集,SimpliRed, Agen;金标法Simplify,Agen);另一种是 快速ELISA(VIDASD-D,Biomerieux)。两种快速D-D检测方法与经典检测方法的比较见表1。其他一些 快速检测法,无论是基于ELISA原理或是胶乳凝集原理,在推荐用于诊断可疑VTE或其他血栓性疾病前, 应进行全面的临床应用评估。
D二聚体的检测方法和临床应用
D二聚体的检测方法和临床应用D二聚体(D-dimer)是纤维蛋白原降解产物,是一种用作血栓形成的标志物。
D二聚体的水平可以用来评估血栓形成以及血栓溶解的程度。
检测D二聚体水平对于评估和监测血栓性疾病以及其他相关疾病的发展和治疗反应非常重要。
本文将探讨D二聚体的检测方法和临床应用。
1.免疫测定法:目前广泛使用的是抗体捕获和免疫测定法。
这些方法使用特异性的抗体来捕获D二聚体,并通过化学发光、酶联免疫吸附试验(ELISA)或放射免疫测定法来量化D二聚体的水平。
这些方法通常具有较高的敏感性和特异性。
2. 凝血法:经典的D二聚体检测方法之一是凝血法(如拉塞尔凝血法或D-dimer凝集试验)。
这些方法利用D二聚体在凝血酶原活化期间形成的血栓结构来检测其水平。
然而,这些方法的时间较长,并且在一些其他疾病中可能出现假阳性结果。
3.快速荧光免疫测定法(FIAT):这是一种近年来开发的新型D二聚体检测方法。
它结合了免疫捕获和荧光信号检测技术,具有较高的敏感性和特异性,并且结果可迅速得到。
1.血栓性疾病的诊断和评估:D二聚体的水平升高与血栓形成和血栓消耗相关,因此它在血栓性疾病(如深静脉血栓形成、肺血栓栓塞症)的诊断和评估中具有重要意义。
对于临床怀疑血栓性疾病的患者,检测D二聚体水平可以帮助确定是否需要进一步的影像学检查来确认诊断。
2.血栓性疾病的治疗监测:D二聚体水平的动态监测可以用于评估抗凝治疗的效果和血栓消除的进程。
例如,在患有深静脉血栓形成的患者中,随着治疗的进行,D二聚体水平应该逐渐降低。
如果D二聚体水平无法降低或持续升高,则可能提示治疗效果不佳或血栓复发。
3.癌症相关血栓风险评估:癌症患者患血栓的风险较普通人群更高。
D二聚体的检测可以用于评估癌症患者的血栓风险,并指导预防性抗凝治疗的使用。
4.慢性炎症疾病的监测:一些慢性炎症疾病(如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎)也可能导致D二聚体水平的升高。
因此,检测D二聚体水平可以用于临床监测疾病的活动性和疾病的进展。
D二聚体的检测及临床意义
D二聚体的检测及临床意义1.检测原理概述D-二聚体是交联纤维蛋白在纤溶酶作用下的特异性降解产物,它的存在反映了体内纤维蛋白的溶解活性,是体内高凝状态和纤溶亢进的分子标志物之一。
检测D-二聚体的原理主要基于其抗原-抗体反应,利用特异性抗体与血浆中的D-二聚体结合,形成免疫复合物,进而通过比色法、免疫比浊法或荧光免疫法等手段进行定量或定性分析。
2.检测方法介绍目前,D-二聚体的检测方法主要有以下几种:免疫比浊法:最常用方法之一,通过检测反应体系中浊度的变化来推算D-二聚体的浓度,具有操作简便、快速、灵敏度高、重复性好等优点。
乳胶凝集法:利用乳胶颗粒与D-二聚体特异性抗体结合后发生凝集反应,通过观察凝集程度来判断D-二聚体的存在与否,适用于快速筛查。
ELISA(酶酶联免疫吸附试验):高灵敏度、高特异性的检测方法,通过酶促反应放大信号,定量检测D-二聚体浓度,适用于科研及特定临床需求。
3.正常参考值范围D-二聚体的正常参考值范围因检测方法、实验室条件及人群差异而略有不同,一般健康人群的血浆D-二聚体浓度小于0.5mg/L(酶具体 值需参照各实验室标准)。
老年人、孕妇等特殊人群的正常范围可能会有所调整。
4.临床应用领域D-二聚体检测广泛应用于多个临床领域,包括但不限于:血栓性疾病:如深静脉血栓、肺栓塞、心肌梗死等疾病的辅助诊断。
弥散性血管内凝血酶DIC):早期识别与病情监测。
妊娠并发症:如先兆子痫、胎盘早剥等风险的评估。
溶栓治疗监测:评估溶栓药物的效果及安全性。
5.(疾病诊断价值D-二聚体升高往往提示体内存在继发性纤溶亢进,对于上述疾病,尤其是血栓性疾病的诊断具有重要参考价值。
但其特异性不高,需结合临床症状、体征及其他检查综合判断。
6.(治疗监测指标在治疗过程中,D-二聚体水平的变化可作为溶栓、抗凝治疗疗效的监测指标之一。
有效治疗后,D-二聚体水平通常会逐渐下降,若持续升高则可能提示治疗无效或存在新的血栓形成风险。
《D-二聚体实验室检测与临床应用中国专家共识》2023解读
《D-二聚体实验室检测与临床应用中国专家共识》2023解读一、D-二聚体简介D-二聚体是交联纤维蛋白的降解产物。
纤维蛋白原在凝血酶的作用下,形成纤维蛋白单体(fibrin monomer,FM),FM 以半交错、重叠的方式自发地聚合,形成不稳定的可溶性纤维蛋白多聚体,进而在FXⅢa 催化下共价交联,形成交联纤维蛋白多聚体,即不可溶的纤维蛋白。
交联纤维蛋白多聚体在纤溶酶的作用下降解生成大量复杂的长片段X-寡聚体(X-oligomer),这些长片段继续分解生成含有由两个共价结合的D-结构域(D = D,相当于D-二聚体)的大小不一的片段组合,其最终末产物为D = D/E。
纤溶酶作用于纤维蛋白原或者未交联的纤维蛋白不会产生D-二聚体,所以无交联纤维蛋白形成情况下发生的原发性纤溶亢进也不会产生D-二聚体。
由于D-二聚体只在交联纤维蛋白降解时产生,因此 D-二聚体可作为机体凝血活化和继发纤溶激活的标志物。
D-二聚体在体内的半衰期约为8 h,主要通过肾脏和网状内皮系统从循环中清除。
二、D-二聚体检测的影响因素D-二聚体检测受众多因素影响,遇到可疑或与患者临床表现不相符的结果时,应综合考虑检验前、中、后的潜在影响因素。
01 样本采集:可使用血浆或全血样本进行D-二聚体检测。
目前CLSI 和WHO 推荐采用含3.2%(105~109 mmol/L)柠檬酸钠的抗凝血浆进行D-二聚体检测,血液与抗凝剂比例为9∶1。
采样量偏低可能导致D-二聚体结果偏低,样本中有血凝块则可导致D-二聚体结果偏高。
实验室在分析前及审核显著异常结果时应检查样本质量,以确保结果的准确性。
02 样本运送和处理:样本应在室温环境(15~22℃) 下、尽可能短的时间内(通常< 1 h)转运至实验室,样本测试前可于室温或4 ℃ 保存24 h 。
03 分析干扰物质:现有研究多数未发现一般程度的脂血、黄疸对D-二聚体检测有明显影响,但这些研究多基于某个特定的检测系统,不能代表所有检测系统。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
人体内的纤维蛋白原α(A)链和β(B)链在凝血酶 的作用下,先后释放出纤维蛋白肽A(FPA)和肽B (FPB),剩余部分分别称为纤维蛋白Ⅰ(Fb-Ⅰ)和纤 维蛋白Ⅱ(Fb-Ⅱ)。在纤溶酶的作用下,Fb-Ⅰ被降解成 Bβ1~42肽键,A、B、C、H极附属物以及X'、Y'、D、E' 碎片,Fb-Ⅱ被降解成Bβ15~42肽键,A、B、C、H极附 属物以及X'、Y'、D、E'碎片;同时Fb-Ⅰ和Fb-Ⅱ可自行 聚合成可溶性纤维蛋白单体聚合物(sFMC)。在FXⅢa 和Ca2+作用下,Fb-Ⅰ和Ⅱ形成交联纤维蛋白;在纤溶酶 作用下,交联的纤维蛋白除降解产生碎片X'、Y'、D和E' 外,还生成D-二聚体(D-Dimer,DD)、γ-γ二聚体、复 合物1(DD/E)、复合物2(DY/YD)、复合物3 (YY/DXD)等。非交联纤维蛋白和交联纤维蛋白降解产 生的碎片、二聚体、多聚体和复合物等统称为纤维蛋白降 解产物(FbDP)。
D-二聚体检测的方法
• ★胶乳凝集法:经典胶乳凝集法是将被检血浆中 D-二聚体与包被在乳胶颗粒上的单克隆抗体相作 用,产生絮状沉淀反应进行定性或半定量测定。 该法操作简便、快速,适用于床边检测 (POCT),常作为筛查试验用。 • ★酶联免疫吸附法(ELISA):ELISA法检测原理 是包被抗人D-二聚体与待测标本中抗原结合,加 入酶标抗体后形成复合物,再加入底物呈显色反 应,测得的吸光度值与标本中抗原量成正比。该 法具有灵敏度高、定量准确等特点,但经典 ELISA法操作步骤复杂、费时,不适合急诊使用。
• ③高脂血症患者纤溶系统活性受到抑制,血浆D二聚体结果常偏低,易造成假阴性。也有报道, 饮酒者较不饮酒者D-二聚体水平有显著升高。 • ④药物影响 使用尿激酶进行溶栓治疗时,D-二聚 体水平显著升高。尿激酶(UK)、链激酶(SK) 等能直接将纤溶酶原转变为纤溶酶,促使体内纤 维蛋白溶解系统活性的增强;口服避孕药和雌激 素能增加凝血活性,降低纤溶活性;肝素则可促 进组织纤溶酶原激活物(t-PA)的释放,而增强 纤溶活性 。
★干扰物质的影响
• D-二聚体在测定过程中易受血浆中多种干扰物质的影响, 如类风湿因子(RF)、胆红素、肝素、血脂等。不同测 定方法和试剂,受干扰的程度也不一致。一般认为,总胆 红素<17μmol/L,结合胆红素<6.8μmol/L,非结合胆红 素<10.2μmol/L,血红蛋白<150g/L,乳糜<1960浊度单 位,类风湿因子<5KU/L,对测定值无影响。 研究表明,测定D-二聚体时,当血浆中类风湿因子(RF) 增高时,会导致D-二聚体测定结果偏高,引起D-二聚体阳 性率明显升高;建议当临床上依据D-二聚体实验结果作为 排除静脉血栓性疾病时,应排除RF的存在。
• ④采完血后应拔掉针头,将血液沿管壁缓缓注入 试管,要避免产生气泡,因为泡沫的产生可使纤 维蛋白原变性。血液和抗凝剂混匀时应轻轻颠倒, 避免用力振荡而破坏凝血蛋白。 • ⑤抗凝剂 • ⑥标本的贮存:血液要求采集于塑料或硅化试管 中,并采用塑料移液管分离血浆。血浆贮存在塑 料或硅化、带塞子的试管中,因为玻璃可以激活 因子Ⅻ,从而可以激活纤溶酶原,启动纤溶系统, 而影响检测结果。
• ★自身红细胞凝集法:自身红细胞凝集法采用分别针对D二聚体和红细胞膜上表位的双抗体,当血中D-二聚体水平 升高时,抗原-抗体结合的增多而导致红细胞凝集,2min 内可以判断结果,为半定量的自身红细胞凝集试验。其优 点是可用全血检测,省去了离心制备血浆的麻烦。 • ★胶体金显色反应法:该法是将单克隆抗体吸附在多孔薄 膜并粘放在有多层吸收垫的塑料盘上,被检标本加入后即 与该抗体结合,然后加入胶体金标记的抗体,在薄膜上即 产生红色强度,红色强度与血浆中抗原成比例,在几分钟 内即可完成。该法易受白细胞、血小板、类风湿因子、肝 素及血脂等物质的干扰,特异性不强,在不同的报道中其 敏感性和阴性预测值(NPV)差别较大,并且厂商和实验 室的结果存在较大的差异。
• 纤维蛋白原和纤维蛋白被降解,所产生的 各种碎片、二聚体、多聚体及复合物,即 FgDP和FbDP统称为纤维蛋白(原)降解 产物(FDP) • D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子FXⅢa 交联形成纤维蛋白后,再经纤溶酶水解所 产生的特异性降解产物。
检验项目的质量控制
分析前 质量控制
项目 申请
病人 准备
• ★胶乳免疫比浊法:胶乳免疫比浊法是样本中抗 原与包被在胶乳颗粒上的单克隆抗体发生抗原-抗 体反应,在一定的缓冲体系中产生凝集而导致浊 度增大,浊度的变化率与抗原浓度成正比。目前, 已有多种全自动血凝仪用于免疫比浊法D-二聚体 的检测,整个检测过程可以由仪器自动完成,检 测效率高,除去准备标本的时间,一般只要5min 便可报告准确的定量结果。该法有操作简便、快 速、定量准确、敏感度高等优点,可满足POCT 等需要,在临床研究中应用越来越广泛。
★检验样本的采集
• ①采血方法:采血时,一般要在病人空腹、 安静状态下进行,以早晨07:00至09:00最 为适宜,因为生物钟时间对检测指标有一 定的影响。对于多次反复采血的病人最好 在同一固定时间和同一条件下采血。 • ②止血带:一针见血,见血即去 • ③采血顺序:血培养——凝血项目——不 抗凝项目——抗凝项目
标本 采集
标本 运输
标本 接收
标本 保存
标本 处理
分析前 质量控制
检验 仪器
检验 方法
检验 试剂
检验 人员
Hale Waihona Puke 质量 控制参考 范围
检验 环境
分析后 质量控制
结果 确认
结果 解释
样本 存放
样本 处理
★病人准备(受检者状态的影响)
• ①随年龄的增长特别是老年人D-二聚体的水平有 所升高,与年轻人相比有显著性差别。随孕期的 延长妊娠妇女的D-二聚体水平也升高,且双胎妊 娠升高的更明显。 • ②在脑血管卒中、溶血栓治疗、严重感染、脓毒 血症、组织坏疽、先兆子痫、甲状腺功能减低、 重症肝病、结节病等情况下,常有凝血和纤溶系 统的激活,也可见D-二聚体升高。因此,在进行 某种疾病诊断时,应考虑病人已患疾病及病情对 诊断的影响。