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苦瓜茎_叶中皂苷类物质的提取及分离纯化

苦瓜叶
6.90
13.60
50.10
由表 1 可知,在苦瓜茎叶中含有丰富的皂苷类物 质,尤其是苦瓜叶中,含量高达 6.90 %(干叶),茎叶中 平均含量也达到了 4.90 %左右。按照本实验室确定的 提取工艺和技术条件,苦瓜茎叶中皂苷粗提物提取率 分别为 5.90 %和 13.60 %,其中总皂苷的含量都达到 了 50 %左右,可见,被废弃的苦瓜茎叶具有很高的开 发利用价值。 3.2 苦瓜茎、叶皂苷纯化结果
加甲醇溶液定容到 5 mL,摇匀,作为对照品溶液,即 2.2.2.2 苦瓜叶中皂苷的提取
1 mg/mL 的人参皂苷标准溶液。准确称取标准皂苷溶
称取苦瓜叶(干叶)1.2 kg,加 15 L 60 %乙醇与 70 ℃
液 0.00、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14、0.16、0.18、 下浸提 3 h,过滤,再加 12 L 60 %乙醇与 70 ℃下浸提 3 h,
苦瓜(Momordicac harantia L.)别名锦荔枝、凉瓜、 癫 蛤 蟆 、红 羊 、癫 葡 萄 ,是 葫 芦 科 苦 瓜 属 蔓 性 草 本 植 物,苦瓜性味苦寒,具有清热解毒、滋养强壮、抗肿瘤[1] 以及提高人体免疫力[2-3]等功效。近十年来对苦瓜皂苷 的研究比较多,研究表明,苦瓜的醇提物,水提物均含 有皂苷类物质,具有降血糖等功效[4-6]。但是大部分的 研究都是以苦瓜的果实,果肉或种籽为原料,对苦瓜 茎叶中皂苷类物质的提取及功效的研究鲜见报道。植 物茎叶中往往含有丰富的次生代谢产物,并具有明显 的生物活性,如沙棘黄酮[7-9]、苦荞黄酮[10-11]、银杏茎叶 黄酮[12-13]等等。本研究对苦瓜茎叶中的皂苷类物质进 行提取、纯化,并测定其含量,为对其生物活性进行研
几种金属离子的柱层析实验报告

几种金属离子的柱层析实验报告一、原理:有些高分子物质含有一些可以分离的基因,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的离子产生交换反应。
如:R-SO3H+M+ ————R-S3M+H+或R-NH3OH+CL-—————R-NH3CL+OH-这类高分子物质通称离子交换剂,其中使用最普遍的是离子交换树脂。
由于一定的离子交换剂对不同离子的亲和力不同,因此在洗提过程中,不同的离子在离子交换柱上的迁移速度也不同,最后得到分离。
二、目的与要求:本实验是采用Zerolit225型阳离子交换树脂所装的柱,选以特定的PH缓冲洗脱液来分离含有两个性质不同的氨基酸溶液。
通过实验要求掌握装柱、上样、洗脱、收集等离子交换柱层析技术的要点。
三、仪器与装置:玻璃层析柱:长475px,内径30px,3# 砂芯。
HL-2B型恒流泵。
HD-4型电脑核酸蛋白检测仪。
BS-100A自动部份收集器。
250ml烧杯。
1ml吸管。
水浴锅。
72型(或721型)分光光度计。
四、试剂与药品:树脂:Zerolit225型阳离子交换树脂。
洗脱液:0.45N,PH5.3柠檬酸缓冲液,取285g柠檬酸(C6O7H8·H2O);186g 97℅NaOH;105ml浓硫酸溶于水中稀释至10升。
样品液:0.005M ASP和LYs的0.02N HCL混合溶液。
显色剂:显色剂列出两种可任选一种。
显色剂(Ⅰ)茚三酮-TiCL3溶液。
10g茚三酮溶于500ml乙二醇甲醚,再加入0.85 ml TiCL3(15%)显色剂(Ⅱ):茚三酮-KCN溶液。
0.1M KCN:0.1628g KCN溶于水中稀释至250mlA、将1.25g茚三酮溶于25ml乙二醇甲醚,配成5%(W/V)浓度的溶液。
B、将2.5ml 0.01M KCN溶液与125ml乙醇甲醚混合。
将A和B合并置棕色瓶中过夜即可使用。
此溶剂用时,A、B两溶液在前一天合并,配好的溶液仅能在1-2天内使用,过时失效须重配。
酶法合成麦芽糖醇脂肪酸单酯的抑菌性

酶法合成麦芽糖醇脂肪酸单酯的抑菌性*何志勇,王洁,曾茂茂,秦昉,陈洁(江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡,214122)摘要采用脂肪酶NOV435 催化麦芽糖醇分别与4 种脂肪酸( 月桂酸、辛酸、油酸和硬脂酸) 反应合成相应的麦芽糖醇脂肪酸酯,并经分离纯化制备获得高纯度的单酯产品,测定了它们在0.0625 ~6 m g/m L 质量浓度下对不同细菌和酵母的抑菌率及最低抑菌浓度( M I C) 。
结果表明,麦芽糖醇脂肪酸单酯具有良好的抑菌性能,对枯草芽孢杆菌和变异链球菌显示出很强的抑制作用,对大肠杆菌有较好的抑制效果,对酵母菌也有一定抑制能力。
比较不同脂肪酸酰基麦芽糖醇单酯的抑菌性发现,月桂酸单酯抑菌能力最强,辛酸单酯和油酸单酯次之,硬脂酸单酯较弱。
麦芽糖醇月桂酸单酯对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和变异链球菌的M I C值分别为2.0 m g/m L、0.5 m g/ m L 和0.25 m g/m L,具有比麦芽糖和蔗糖等亲水基月桂酸单酯更好的抑菌性。
关键词麦芽糖醇脂肪酸单酯,分离纯化,抑菌性,最低抑菌浓度( M I C)脂肪酸酯不仅是一类优良的表面活性剂,还具有较好的防腐抗菌功能。
目前国内外研究较多的主要是蔗糖酯类和甘油单脂肪酸酯类的抑菌性[1-5],且研究发现,糖酯的酯化度会影响其抑菌性,蔗糖单酯的抑菌能力远远强于二酯或多酯[6]。
麦芽糖醇脂肪酸酯是由麦芽糖醇与脂肪酸反应而成的一类新型优良的非离子型表面活性剂[7],但有关其抗菌功能性质的研究较少。
而且现有文献报道的大多是麦芽糖醇酯混合物的性质[8-9],这样麦芽糖醇酯抑菌性与其化学结构和组成的关系就不是很清楚。
因此,为了探讨不同脂肪酸酰基和不同亲水基团对糖酯抑菌性质的影响,本论文通过脂肪酶NOV435 催化合成系列麦芽糖醇脂肪酸酯,经过分离纯化制备获得高纯度麦芽糖醇脂肪酸单酯产品,并重点研究不同单酯对细菌和酵母的抑菌性能,分析单酯结构与抑菌功能的关系,为其在食品工业中的进一步应用提供依据。
灵芝菌丝体多糖的分离纯化及其单糖组成分析与分子量测定

灵芝菌丝体多糖的分离纯化及其单糖组成分析与分子量测定王海燕;戴军;陈尚卫【摘要】前期杂交优化后赤芝菌种经液体深层发酵后,提取灵芝菌丝体多糖,并过DEAE-Sepharose Fast Flow柱分离纯化,利用高效体积排阻色谱(HPSEC)检测多糖级分的纯度,采用完全酸水解PMP柱前衍生化RP HPLC测定多糖级分的单糖组成,多角度光散射仪联用装置(SEC MALLS)测定其绝对重均分子量(Mw),并且根据分子旋转半径与分子摩尔数的关系曲线斜率初步推断其空间构象.结果显示:分离纯化得到3个多糖级分GLMP1、GLMP2和GLMP3,HPSEC检测其峰面积百分比分别为93.58%,97.64%,99.19%,单糖组成分析结果表明GLMP1、GLMP2和GLMP3均含有甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖,但单糖摩尔比各异.SEC-MALLS测试GLMP1、GLMP2和GLMP3的Mw分别为4.526×105,4.603×104,3.760×103 g/mol,3个多糖级分构象可能均为高度紧缩且具有分支结构的聚合物.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2015(031)005【总页数】5页(P201-205)【关键词】灵芝;菌丝体;多糖;级分;分离纯化;分子量【作者】王海燕;戴军;陈尚卫【作者单位】江南大学食品学院,江苏无锡214022;江南大学食品学院,江苏无锡214022;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214022【正文语种】中文灵芝(G.lucidum)属担子菌纲、多孔菌目、灵芝科、灵芝属[1],按其生长过程可分为菌丝体、子实体和孢子粉3个阶段。
中国灵芝属真菌有75种,常见的有赤芝、紫芝、黑芝、松杉灵芝等。
近年来,研究发现灵芝具有降血糖[2,3]、降血脂[4]、免疫调节[5]、抗肿瘤[6]、抗氧化[7]等保健功能,其主要功效成分为多糖和三萜[8]。
香菇多糖的纯化工艺优化

香菇多糖的纯化工艺优化梁敏【摘要】为获得纯度较高的香菇多糖,以香菇为原料,采用复合酶法提取香菇多糖并对其进行纯化,在单因素试验的基础上,对脱色温度、活性炭用量、脱色时间和pH 值4个因素进行正交试验并选取香菇多糖脱色的最佳工艺条件,采用酶法结合Sevage法脱除蛋白质对脱色后的香菇多糖进行纯化.结果表明:在脱色温度20℃,活性炭用量1.0%,脱色时间90 min,pH 3的条件下,香菇多糖脱色率为71.3%,多糖损失较低,为7.8%.脱色纯化后的香菇多糖为白色,蛋白去除率为90.26%.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2013(041)010【总页数】4页(P165-167,171)【关键词】香菇多糖;纯化;工艺优化【作者】梁敏【作者单位】齐齐哈尔大学化学化工学院,黑龙江,齐齐哈尔161006【正文语种】中文【中图分类】S39香菇(Lentinus edodes)是侧耳科(Pleurota ceae)的担子菌,世界名贵食用兼药用菌之一。
香菇子实体中除含有蛋白质、氨基酸、矿物质、维生素和对人体有益的微量元素外还含有一种重要的生物活性高分子多糖。
现代研究表明,香菇多糖具有抑制肿瘤、抗病毒和抗氧化等药理活性,对提高肝炎及艾滋病人的免疫功能等均有较好的作用,且无任何毒副作用[1]。
Chihara等[2-3]从香菇子实体中分离得到一种具有抗肿瘤活性的β-(1-3)-D-葡聚糖,其抑制癌症和抗肿瘤效果不是直接作用于移植性癌细胞,而是通过宿主调节发生作用,其抗肿瘤的药理作用并非直接杀伤细胞或抑制细胞生长,而是表现在增强人体免疫调节作用。
因此,人们常称香菇多糖为生物反应修饰剂[4]。
香菇多糖通常被包裹在细胞壁内,往往和蛋白质结合在一起,以蛋白多糖的形式存在,中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质,从而将多糖释放出来,提高多糖的得率,降低多糖中蛋白质的含量,提高多糖的纯度。
传统的浸提法虽然是提取多糖的经典方法,但时间长、能耗大、效率低,酶法处理可以提高多糖的提取率、减少能源消耗、缩短提取时间。
DEAE纤维素分离猪血清蛋白

摘 要:对DEAE纤维素52(简称DE52)分离猪血清蛋白进行了研究。结果表明:pH 7.4时,以O
~0.3 mol/L的NaCl磷酸盐缓冲液梯度洗脱,DE52可以将血清蛋白分为7个部分。在梯度洗脱
的基础上,分别以NaCl浓度0、0.05、0.08、0.1、0.12、0.15、0.2 mol/L的磷酸盐缓冲液进行阶段
2)猪血清蛋白的阶段洗脱:取0.5 mL离心后 的血清上样,以pH 7.4并选取合适NaCI浓度的 0.01 mol/L磷酸盐NaCl缓冲液进行阶段洗脱,体 积流量1 mL/min。 1.2.3 DE52色谱柱的再生和平衡用1 000 mL 20 mol/L的NaCl溶液洗脱再生,用1 000 mI。pH 7.4的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液平衡,然后即可再 次上样。 1.2.4 样品洗脱峰蛋白组成检测 用非变性 PAGE电泳检测,电泳条带扫描后用分析软件分 析[5]。 1.2.5 IgG定性检测 用ELISA法测定样品蛋白 IgG含量,鉴定样品蛋白是否是IgG[6]。
HD-3型紫外检测仪,上海沪西仪器厂制造;DB-3 型层析谱数据分析系统,南京新校园生物技术研究 所制造;HL-1型恒流泵,BSZ~100型自动分步收集 器,上海沪西仪器厂制造;TB20—1000型梯度搅拌 器,上海新波无线电厂制造;MK3型酶标仪,上海雷 勃仪器厂制造;DYCZ一24D型电泳槽,北京市六一 仪器厂制造。猪血采自无锡市肉联厂,4℃8 000 r/min离心10 min,除去血球和纤维蛋白原,得到血 清。猪IgG,白蛋白标样自Sigma公司购得。 1.2试验方法 1.2.1 DE52色谱柱的制备
2结果与分析
2.1猪血清DE52梯度洗脱
血清中蛋白质种类很多,组成复杂,为了研究
DE52对血清蛋白的分离效果,在保持洗脱液pH
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标题:JC-200B恒温培养摇床
恒温培养摇床系列JC-200B产品特点u集恒温培养箱与震荡器与一体,节约空间占地少,功能多投资少。uABS工程塑料外壳、镜面不锈钢内衬、不锈钢弹簧夹具等腔体组建。u设有来电恢复功能,不受电源间断影响,设备可自动按原设定程序恢复运行。u设有开门自停保护装置,保护人体安全并配有高强度气拉杆,开门更轻松自如。u实测温度偏离设定温度超过3℃时,自动停止加热并发出声光报警。u最先进大力矩电机保证持续工作毋须保养。u升温速度可以根据实验的具体要求进行加快或减慢。u整机静音设计,静电喷塑箱体,钢化玻璃超大可视窗,造型豪华美观。u一次成型大视角热弯化玻璃,使您能够安全看到整个工作状态。u控制加速的线路确保摇床缓缓启动,平稳加速,保证实验样品的安全。...
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数控计滴自动部分收集器(中文显示)型号:SBS-100外形尺寸:265X350X360主要技术参数:(SBS-100)收集试管100支,每支最大容量12ml;(SBS-160)收集试管160支,每支最大容量5ml;定时采样收集范围:1秒-199小时59分59秒;任意选择定滴采样收集范围:1滴-9999滴;任意选择断电数据保存时间:十年特点:新型微电脑芯片控制,液晶中文绿屏显示...
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台式恒温培养摇床型号:JC100B产品特点:l集恒温培养箱与振荡器于一体,节约空间,功能多投资少lABS工程塑料外壳,镜面不锈钢内寸,不锈钢弹簧板夹具等腔体组建,永不生锈l倾斜式人性化的控制面板,大屏幕背光液晶显示屏,具有良好的视觉效果l设有来电恢复功能,不受电源间断影响,设备可自动按原设定程序恢复运行l控制加速的线路确保摇床缓缓的启动,平稳加速,保证实验样品的安全lLCD大屏幕背光液晶显示屏显示个设定参数和实验参数l设有开门自停保护设置,保护人体安全配有高强度气拉杆,开门轻松自如l一次成型大视角热弯钢化玻璃,使你能够安全的看到整个工作状态l最先进大立矩电机保证工作毋须保养。l实测温度偏离设定温度超过3℃时,自动停止加热并发出声响警报。技术参...
香菇中糖类物质离与测定

香菇中糖类物质离与测定————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:香菇中糖类物质的分离与测定摘要:本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖(Lentinan,LNT),利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案,得到的粗多糖回收率为14.05﹪,再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。
用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%;经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成,其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖;用Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。
气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等,其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。
关键字:香菇多糖回收率含量组成相对分子量Separation and Determination of carbohydrates in Lentinus edodesAbstract:This experiment extracts of lentinan (Lentinan LNT) by using hot water extraction and ethanol alcohol precipitation method. The orthogonal method to get the optimum extraction of polysaccharides is the best program, resulting polysaccharides recovery of 14.05%, and then to get crude polysaccharide qualitative and quantitative analysis. By using Phenol-sulfuric acid method, extracted polysaccharides single oligosaccharides and polysaccharides content was 35.9%; TLC and paper chromatography analysis monosaccharide composition, the monosaccharide composes mostly of glucose and arabinose; Relative molecular weight of polysaccharide determined by Sepharsose CL-6B column chromatography is about 5597.58 daltons. The results of gas chromatographic analysis of a monosaccharide is galactose, glucose, arabinose, fucose, sugar, and other types of monosaccharides in the lentinan. galactose and glucose are much more among them.Key words: Lentinan; Recoveries; Content; Composition; Relative molecular weight0 引言:糖类化合物是中药的重要成分,随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步,人们对糖的了解越来越多。
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2.4运行状态
在显示运行状态时,按确定键,显示收集状态,处于待机收集状态,按启动键,收集器开始收集,进入运行状态,工作完毕,仪器会报警提示“完成”,按任意键消除报警,收集器返回待机状态。
3.1本仪器必须使用标准的三芯电源插座,应有可靠接地,确保安全。
3.6在正常使用过程中不可将安全阀、警控插头等拨出,若要插拨则必须在关闭电源后进行。
3.7使用有机溶剂,请配置耐有机溶液的试管盘和进口硅胶管。
文件名称:BS-100A自动部分收集器标准操作规程
文件编号:
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审核日期
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执行日期
颁发部门: 质量保证部
分发部门:化验室
项 目
正 文
目 的
适用范围
责任对象
内 容
1 基本信息
2 操作步骤
3注意事项
建立BS-100A自动部分收集器操作规程,以便正确使用及维护保养。
3.2使用时将“漏液报警板”安放在滴管口下方的积液盘中的方框内,电线从积液盘中间孔通过,插头插入仪器后面板的“警控”插座中,可实现漏液报警。
3.3在收集过程中,若发生,漏液故障而报警,则必须关闭电源。待漏液故障排除后,方可重新开启电源。
3.4每次使用前必须重新定位。
3.5仪器按“复位”键滴管口回到第一管后,必须重新对滴管口进行ຫໍສະໝຸດ 整,确保滴管口在第一管的中心位置。
2.1.2开启电源:按“电源”开关(在仪器后面板上),试管盘自动复位至起点,液晶显示屏亮,全中文显示,按任意键,进入待机状态。
2.2滴头定位
2.2.1调节滴头管到第一个试管的中心位置(外圈第一管),拧紧竖杆固定螺丝、安全阀固定螺丝、小横杆固定螺丝,完成滴头定位。
2.3参数设置
按键,选择参数设置,按“确定”键,进入定时参数设置状态。
2.3.1按“确定”键,选择“起始管号”,进入“起始管号”的设置。按确定键,显示“起始管号”,通过 键,设置起始管号,再按“确定”键,完成起始管号的设置。
2.3.2按 键,选择“结束管号”,进入结束管号设置。按确定键,显示“结束管号”,通过 键,设置结束管号,再按“确定”键,完成结束管号的设置。
2.3.3按 键,选择“收集时间”。按确定键,显示“收集时间”,通过 键,设置收集时间,再按“确定”键,完成收集时间的设置。
BS-100A自动部分收集器。
QC人员、QC负责人。
1.1主要技术参数
使用环境条件:温度0℃-40℃,相对湿度:<85%
收集试管100支,每支最大容量12ml
定时收集范围: 1秒—9999分;任意选择.
连续工作时间:一周。
2.1准备工作(使用时请取下防尘罩)
2.1.1将电源线、试管盘、竖杆、安全阀、接液盘等按照正确方法固定链接好。