碱解氮测定
土壤碱解氮的测定
实验四土壤碱解氮的测定一、目的和要求掌握扩散法测定土壤碱解氮的方法。
二、内容与原理土壤水解性氮或称碱解氮包括无机态氮(铵态氮、硝态氮)及易水解的有机态氮(氨基酸、酰铵和易水解蛋白质)。
用碱液处理土壤时，易水解的有机氮及铵态氮转化为氨，硝态氮则先经硫酸亚铁转化为铵。
以硼酸吸收氨，再用标准酸滴定，计算水解性氮含量。
三、主要仪器及试剂配制主要仪器：电子天平、扩散皿、毛玻璃、恒温箱、半微量滴定管(5毫升)试剂：(1)1.07molL-1Na0H：称取42.8克NaOH溶于水中，冷却后稀释至1升。
(2)2％H3BO3指示剂溶液：称取H3BO320克加水900毫升，稍稍加热溶解，冷却后，加入混合指示剂20毫升(0.099克溴甲酚绿和0.066克甲基红溶于100毫升乙醇中)。
然后以0.1m0lL-1NaOH调节溶液至红紫色(pH约为5)最后加水稀释至1000毫升，混合均匀贮于瓶中。
(3)0.005molL-1H2SO4标准液：取浓H2S041.42毫升，加蒸馏水5000毫升，然后用标准碱或硼砂(Na2B47·10H2O)标定之。
(4)碱性甘油：加40克阿拉伯胶和50毫升水于烧杯中，温热至70——80℃搅拌促溶，冷却约1小时，加入20毫升甘油和30毫升饱和K2CO3水溶液，搅匀放冷，离心除去泡沫及不溶物，将清液贮于玻璃瓶中备用。
（5）硫酸亚铁粉：FeSO4.7H2O(三级)磨细，装入玻璃瓶中，存于阴凉处。
四、操作方法与实验步骤1、称取通过1毫米筛的风干土样2克(精确到0.01克)和硫酸亚铁粉剂0.2克均匀铺在扩散皿外室，水平地轻轻旋转扩散皿，使土样铺平。
2、在扩散皿的内室中，加入2毫升2％含指示剂的硼酸溶液，然后在皿的外室边缘涂上碱性甘油，盖上毛玻璃，并旋转之，使毛玻璃与扩散皿边缘完全粘合，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿露出一条狭缝，迅速加入10毫升1.07molL-1NaOH液于扩散皿的外室中，立即将毛玻璃旋转盖严，在实验台上水平地轻轻旋转扩散皿，使溶液与土壤充分混匀，并用橡皮筋固定；随后小心放入40℃的恒温箱中。
碱解氮测定实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解碱解氮测定原理及其在土壤肥力分析中的应用。
2. 掌握碱解氮测定的实验操作步骤。
3. 学习使用扩散皿和滴定仪进行碱解氮的测定。
二、实验原理碱解氮测定是土壤氮素分析的重要方法之一，主要用于测定土壤中易被植物吸收利用的氮素形态。
碱解氮是指土壤在碱性条件下，易水解的有机氮和铵态氮转化为氨气，通过吸收和滴定测定氨气的量，从而计算出土壤中碱解氮的含量。
实验原理如下：1. 土壤样品与氢氧化钠溶液混合，加热碱解，使土壤中的易水解有机氮和铵态氮转化为氨气。
2. 氨气被硼酸溶液吸收，生成硼酸氨。
3. 使用标准盐酸溶液滴定硼酸氨，根据消耗的标准盐酸溶液的体积计算出土壤中碱解氮的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：扩散皿、滴定仪、天平、加热装置、烧杯、移液管、容量瓶等。
2. 试剂：氢氧化钠溶液（0.1mol/L）、硼酸溶液（0.1mol/L）、盐酸标准溶液（0.01mol/L）、甲基红指示剂等。
四、实验步骤1. 准备土壤样品：称取5g土壤样品，放入扩散皿内。
2. 加入氢氧化钠溶液：向扩散皿中加入5ml氢氧化钠溶液。
3. 密封扩散皿：用毛玻璃片盖住扩散皿，并密封。
4. 加热碱解：将扩散皿放入加热装置中，加热至40℃左右，保持24小时。
5. 冷却扩散皿：将加热后的扩散皿取出，冷却至室温。
6. 加入硼酸溶液：向扩散皿中加入5ml硼酸溶液。
7. 密封扩散皿：用毛玻璃片盖住扩散皿，并密封。
8. 滴定：使用盐酸标准溶液滴定硼酸溶液，直至溶液颜色由黄色变为粉红色。
9. 计算碱解氮含量：根据消耗的盐酸标准溶液的体积，计算出土壤中碱解氮的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：本次实验测得土壤碱解氮含量为30mg/kg。
2. 分析：根据实验结果，该土壤碱解氮含量处于中等水平，表明土壤氮素供应状况良好。
六、实验总结1. 本次实验成功完成了碱解氮的测定，掌握了碱解氮测定的实验操作步骤。
2. 碱解氮测定是土壤氮素分析的重要方法，对于了解土壤氮素供应状况具有重要意义。
测量土壤碱解氮实验报告
一、实验目的1. 了解土壤碱解氮的概念及测定方法。
2. 掌握碱解扩散法测定土壤碱解氮的原理和操作步骤。
3. 学会正确使用实验仪器，提高实验操作技能。
4. 通过实验，了解土壤碱解氮在土壤肥力评价中的重要性。
二、实验原理土壤碱解氮是指土壤中易被碱液水解的氮，主要包括铵态氮、硝态氮和易水解的有机态氮。
碱解扩散法是测定土壤碱解氮的一种常用方法，其原理如下：在碱性条件下，土壤中的铵态氮和硝态氮以及易水解的有机态氮在碱性溶液中发生反应，生成氨气。
氨气在硼酸溶液中被吸收，形成硼酸氨，再通过滴定法测定氨气的含量，从而计算出土壤碱解氮的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：碱解扩散仪、滴定管、锥形瓶、烧杯、移液管、玻璃棒、温度计等。
2. 试剂：硫酸亚铁、硼酸溶液、氢氧化钠溶液、硫酸溶液、甲基红-溴甲酚绿指示剂、0.01mol/L盐酸标准溶液等。
四、实验步骤1. 准备土壤样品：取一定量的土壤样品，风干、磨细，过筛，装入干净、干燥的瓶中备用。
2. 碱解扩散法测定土壤碱解氮：（1）准确称取土壤样品0.5g（精确到0.0001g）放入锥形瓶中。
（2）加入10ml硫酸亚铁溶液，振荡均匀。
（3）加入2ml硼酸溶液，振荡均匀。
（4）加入5ml氢氧化钠溶液，振荡均匀。
（5）将锥形瓶放入碱解扩散仪中，在25℃条件下反应30min。
（6）取出锥形瓶，用0.01mol/L盐酸标准溶液滴定至溶液呈黄色为终点。
3. 计算土壤碱解氮含量：土壤碱解氮含量（mg/kg）=（V1-V2）×C×14.005/土壤样品质量其中，V1为滴定前盐酸标准溶液体积，V2为滴定后盐酸标准溶液体积，C为盐酸标准溶液的浓度，14.005为氮的摩尔质量，土壤样品质量为实验中所取土壤样品的质量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：本次实验测得土壤碱解氮含量为（mg/kg）XX。
2. 结果分析：（1）根据实验结果，可以判断土壤中氮素供应状况，为农业生产提供依据。
土壤速效氮(碱解氮)的测定
土壤速效氮（碱解氮）的测定（碱解扩散法）一、试验仪器扩散皿、半微量滴定管、恒温箱、毛玻璃、橡皮筋、碱性胶液二、试验药剂NaOH、H3BO3、甲基红---溴甲酚绿、盐酸、浓硫酸、硫酸亚铁、阿拉伯胶、甘油、K2CO3、硫酸银三、溶液配制1、NaOH溶液（1.0 mol/L）称取NaOH 40.0g溶于水，冷却后稀释至1L。
2、H3BO3---指示剂溶液称取20g H3BO3溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红---溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微红色，此时该溶液的pH为4.8 。
指示剂用前与硼酸混合，此试剂不宜久存。
3、H2SO4标准溶液（0.005 mol/L）量取H2SO42.83mL，加蒸馏水稀释至5000mL,然后用标准碱或硼酸标定，此为0.0200 mol/L（H2SO4）标准溶液，再将此标准溶液准确地稀释4倍，即得0.0050 mol/L（H2SO4）标准溶液。
4、硫酸亚铁粉末（FeSO4-7H2O）5、碱性胶液取阿拉伯胶40.0g和水50mL在烧杯中热温至70~80℃，搅拌促溶，约1h后放冷。
加入甘油20mL和饱和K2CO3水溶液20mL，搅拌、放冷。
离心除去泡沫和不容物，清夜贮于具塞玻瓶中备用。
6、硫酸银（AgSO4）饱和溶液四、试验步骤：1、称取通过18号筛（1mm）风干的土样2.00g置于洁净的扩散皿外室；2、轻轻旋转扩散皿，使土样均匀铺平；3、取H3BO3—指示剂溶液2 mL 放入扩散皿内室；4、在扩散皿外室边缘涂碱性胶液；5、盖上毛玻璃，旋转数次使皿边与毛玻璃完全黏合；6、再渐渐转开毛玻璃一边使扩散皿外室露出一条狭缝；7、迅速加入1 NaOH 溶液10.0 mL ，立即盖严；8、轻轻旋转扩散皿让碱溶液盖住所有土壤；9、用橡皮筋圈紧，使毛玻璃固定；10、随后小心平放在40℃恒温箱中，碱解扩散24h后取出（可以观察到内室应为蓝色）内室吸收液中的NH3用0.005或0.01 mol/L 硫酸标准液滴定注意：在样品测定的同时进行空白试验，校正试剂和滴定误差五、结果计算碱解氮（N）含量（g/kg）= c*(V-V0)*14.0*1000 m式中：c---0.005 mol/L（1/2H2SO4）标准溶液的浓度（mol/L）V----样品滴定用去0.005 mol/L（1/2H2SO4）标准溶液的体积mLV0----空白试验滴定用去0.005 mol/L（1/2H2SO4）标准溶液的体积mL14.0—氮原子的摩尔质量m----样品质量g1000---换算系数（包括mL换算为L，1/1000；g换算为mg，1/1000；换算为kg土，1/1000）注：两次平行测定结果允许绝对相差5mg/kg。
土壤碱解氮的测定
将采集的土壤样品放置在阴凉通风处自然风干，避免阳光直射
和灰尘污染。风干后的样品应保持干燥。
研磨
02
将风干后的土壤样品研磨，使其全部通过60目筛网，以便后续
测定和分析。研磨过程中应避免样品污染和损失。
称量
03
称取一定量的研磨后的土壤样品，精确至0.001g，以便进行后
续的测定和分析。
测定过程
第一季度
实验误差控制
实验前应检查实验仪器是否准 确可靠，确保测量结果的准确 性。
在测定过程中，应严格控制实 验条件，如温度、湿度、时间 等，以减小误差。
实验操作应按照标准流程进行， 避免因操作不当导致误差。
实验环境要求
实验室应保持清洁、干燥、通风 良好，避免灰尘和潮湿对实验结
果的影响。
实验室内温度和湿度应保持恒定， 以避免因环境因素导致测量误差。
在土壤类型、地形、植被和气候等代表性区域采集土壤样品，确 保样品的代表性和准确性。
确定采样点
根据土壤类型、地形和气候等因素，合理确定采样点的数量和分布， 确保采样点的代表性和均匀性。
采集方法
采用挖掘、钻取等方法采集土壤样品，并保持土壤的原状。采集的 样品应足够用于后续的测定和分析。
样品处理
风干
01
02 土壤碱解氮的测定方法
碱解扩散法
总结词
该方法适用于大量样品的测定，但准确度相对较低。
详细描述
碱解扩散法是一种常用的测定土壤碱解氮的方法，其原理是将土壤样品与碱性物质混合，在恒温下使土壤中的有 机氮分解，生成氨气，然后扩散到碱性溶液中，再测定溶液中的氮含量。该方法操作简便，适用于大量样品的测 定，但由于其测定过程中影响因素较多，因此准确度相对较低。
土壤碱解氮的测定-08.09
实验土壤碱解氮的测定(碱解扩散法)一、目的和要求掌握扩散法测定土壤碱解氮的方法。
二、内容与原理土壤水解性氮或称碱解氮包括无机态氮(铵态氮、硝态氮)及易水解的有机态氮(氨基酸、酰铵和易水解蛋白质)。
用碱液处理土壤时，易水解的有机氮及铵态氮转化为氨，硝态氮则先经硫酸亚铁转化为铵。
以硼酸吸收氨，再用标准酸滴定，计算水解性氮含量。
三、主要仪器及试剂配制主要仪器：电子天平、扩散皿、毛玻璃、恒温箱、半微量滴定管(5毫升)、皮筋试剂：(1)1.8molL-1Na0H：称取72克NaOH溶于水中，冷却后用蒸馏水稀释至1升。
(2)2％硼酸溶液：称取硼酸20克，用热蒸馏水（约60℃）溶解，冷却后稀释至1000ml，用稀盐酸或稀氢氧化钠调节PH至4.5（定氮混合指示剂显淡红色）。
（3）定氮混合指示剂： 0.5克溴甲酚绿和0.1克甲基红放入玛瑙研钵中，加入100毫升95%的乙醇研磨溶解。
然后用稀盐酸或稀氢氧化钠调节PH至4.5。
最后加水稀释至1000毫升，混合均匀贮于瓶中。
(4)特制胶水：将适量氢氧化钠溶于丙三醇中，搅拌均匀。
即可。
（5）硫酸亚铁（粉状）：FeSO4.7H2O(三级)磨细，装入玻璃瓶中，存于阴凉处。
（6）0.01 molL-1盐酸标准溶液：将1 molL-1的溶液稀释100倍。
四、操作方法与实验步骤1、称取通过1毫米筛的风干土样2克(精确到0.001克)和硫酸亚铁粉剂1克（一般适量即可）均匀铺在扩散皿外室，水平地轻轻旋转扩散皿，使土样铺平。
2、在扩散皿的内室中，加入2毫升2％硼酸溶液，并加入1滴定氮指示剂，然后在皿的外室边缘涂上特制胶水，盖上毛玻璃，并旋转之，使毛玻璃与扩散皿边缘完全粘合，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿露出一条狭缝，迅速加入10毫升1.8molL-1NaOH液于扩散皿的外室中，立即将毛玻璃旋转盖严。
3、在实验台上水平地轻轻旋转扩散皿，使溶液与土壤充分混匀，并用橡皮筋固定；随后小心放入40℃的恒温箱中。
土壤碱解氮、速效钾、速效磷测定
一．试剂：
1.甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红放到玛瑙研钵中混合加入100mL乙醇（95%乙醇），研磨至指示剂全部溶解。（装滴瓶）
2. 2%硼酸溶液：20g硼酸溶于1L水中（PH4.5—5.5之间）。
3. 1.07N氢氧化钠：42.8g氢氧化钠溶于1L水中。
吸取滤液10mL置于50mL容量瓶中，加少量水，再加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用4N氢氧化钠和2N硫酸调至微黄色，加钼锑抗溶液5mL，用水定溶。摇匀，同时做空白试验。在300C的条件下放置半小时后，在分光光度计上波长700nm处和1cm光径的比色杯进行比色测定。
三 .工作曲线绘制：
准确吸取5PPm磷标准溶液0 0.5 1 2 34 56mL分别吸入50mL容量瓶里，加少量水,加2，6一二硝基酚指示剂2滴，用4N氢氧化钠和2N硫酸调至微黄色，加钼锑抗溶液5mL，用水定溶。
8. 0.01139N硫酸氮标液：吸取0.2279N硫酸氮标液50mL置于1L容量瓶中，用蒸馏水定容。（一般用这个浓度的滴定）
9. 0.02279N硫酸氮标液：吸取0.2279N硫酸氮标液100mL置于1L容量瓶中，用蒸馏水定容。（这个浓度的一般不需要配）
二．标准溶液的计算公式：
m
(V1-V2) × 0.05299
二．工作曲线的绘制：
准确吸取100PPm钾标准溶液2 2.5 5 7.5 10 15 20mL分别吸入50mL容量瓶中，用1N中性醋酸铵定容。
四．仪器：
50mL容量瓶火焰光度计塑料瓶或三角瓶漏斗滤纸振荡机
五．计算：
测得显色液中钾质量浓度×加入浸体剂ml数×水分系数
风干样品重
测得显色液中磷质量浓度×50×水分系数
土壤碱解氮测定标准
土壤碱解氮测定标准土壤碱解氮测定是土壤养分测定中的重要内容之一，对于土壤肥力评价以及农田施肥提供了重要依据。
本标准旨在规范土壤碱解氮测定的方法和步骤，确保测定结果的准确性和可比性。
一、仪器与试剂。
1. 仪器，常用的土壤碱解氮测定仪器包括紫外-可见分光光度计、分光光度计等。
2. 试剂，主要试剂包括氢氧化钠、硼酸、碳酸氢铵等。
二、样品处理。
1. 样品采集，采集土壤样品时要避免混入杂质，保证样品的纯净性。
2. 样品干燥，将采集到的土壤样品进行自然干燥或低温干燥，避免水分对测定结果的影响。
三、测定步骤。
1. 样品预处理，取适量土壤样品，加入一定量的氢氧化钠和硼酸，进行碱解处理。
2. 过滤，将碱解后的土壤样品溶液进行过滤，去除杂质。
3. 测定，取适量过滤后的土壤溶液，加入适量的碳酸氢铵，用紫外-可见分光光度计进行测定。
四、结果计算。
1. 计算公式，土壤碱解氮的含量计算公式为，氮含量（mg/kg）=（V1-V0）×C×10/ m。
2. 结果判定，根据计算出的土壤碱解氮含量，进行肥力评价和施肥建议。
五、质量控制。
1. 平行样测定，为了确保测定结果的准确性，可以进行平行样测定，比较结果的一致性。
2. 质控样品，定期使用质控样品进行检测，评估测定方法的稳定性和准确性。
六、注意事项。
1. 操作规范，在进行土壤碱解氮测定时，操作人员要严格按照标准操作规程进行，避免操作失误。
2. 仪器校准，定期对使用的仪器进行校准，确保测定结果的准确性。
七、标准化管理。
1. 标准执行，严格按照本标准执行土壤碱解氮测定，确保测定结果的可比性。
2. 数据记录，测定结果和操作记录要进行详细的记录和归档，以备查验。
总结，土壤碱解氮测定是土壤养分测定中的重要内容，准确的测定结果对于合理施肥和提高农田产量具有重要意义。
遵循本标准进行土壤碱解氮测定，能够提高测定结果的准确性和可比性，为农田施肥提供科学依据。
土壤碱解氮测定方法比较
土壤碱解氮测定方法比较土壤中的碱解氮在农业生产中起着重要作用，它是植物生长和发育所必需的重要营养元素之一、因此，准确测定土壤中的碱解氮含量对于合理施肥和提高农作物产量具有重要意义。
目前，常用的土壤碱解氮测定方法主要有尼尔森磷酸氨氮法、碱式硼酸溶液提取法和堆肥提取液法。
本文将对这三种方法在测定土壤碱解氮方面的优缺点进行比较，并给出适用情况的建议。
尼尔森磷酸氨氮法是一种常用的土壤碱解氮测定方法。
它的原理是将土壤样品与0.5M磷酸氨溶液反应，生成铵盐，然后用蒸馏水稀释至适宜浓度，采用顶空气相色谱法测定氨气释放量，从而计算出土壤中的碱解氮含量。
该方法操作简单，结果准确可靠，测定结果与实际情况相符。
然而，尼尔森磷酸氨氮法需要使用气相色谱仪进行分析，设备成本较高。
碱式硼酸溶液提取法是一种较新的土壤碱解氮测定方法。
它的原理是将土壤样品与碱式硼酸溶液反应，硼酸与铵盐生成硼氮酸盐，然后用蒸馏水稀释，使用紫外分光光度计测定硼的含量，从而计算出土壤中的碱解氮含量。
该方法无需使用气相色谱仪，设备成本较低，且操作简单，适用于大规模的土壤样品测定。
然而，碱式硼酸溶液提取法对土壤颗粒含量和有机质含量较低的样品测定结果较准确，但对含有较高颗粒含量和有机质含量的样品测定结果较低。
堆肥提取液法是一种常用的土壤碱解氮测定方法。
它的原理是将土壤样品与水进行浸提，然后用蒸馏水或者其他溶液稀释，采用红外光谱法或者其他适用的分析方法测定氨氮含量，从而计算出土壤中的碱解氮含量。
该方法操作简单，方法不存在误差和基质效应，准确度较高。
然而，堆肥提取液法需要一定的提取时间和水量，操作过程中需注意溶液的防腐保护，且测定结果受样品的颗粒大小和有机质含量影响较大。
综上所述，尼尔森磷酸氨氮法、碱式硼酸溶液提取法和堆肥提取液法都可以用于测定土壤中的碱解氮含量，具有各自的优缺点。
选择适用的方法应根据实际情况进行考虑。
对于需要大规模测定的样品，碱式硼酸溶液提取法是比较合适的选择；对于对结果的准确性要求较高的样品，可以选择尼尔森磷酸氨氮法；而对于含有较高颗粒含量和有机质含量的样品，堆肥提取液法可能更适合。
土壤碱解氮的测定
土壤碱解氮的测定（碱解扩散法）一、仪器与试剂1、主要仪器百分之一天平；滴管，恒温箱；扩散皿2、试剂（1）1.0mol/L NAOH溶液：称取化学纯氢氧化钠40克，用水溶解，冷却后定容至1L。
（2）甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：称取甲基红0.066克，溴甲酚绿0.099克，溶解在100ml 95%酒精中，用稀氢氧化钠或盐酸调节溶液呈紫红色。
此时溶液PH值应为4.5（3）2%硼酸溶液：称取分析纯硼酸20克，溶解于1L蒸馏水中。
（4）0.01mol/L（1/2H2SO4）标准溶液：量取密度1.84g/ml浓硫酸0.28ml，注入1L蒸馏水中，用标准硼砂溶液标定之。
标定方法如下：在分析天平上准确称取硼砂Na2B4O7.10H2O 1.9071g，溶于蒸馏水中，转移至1000ml容量瓶中，用水定容，摇匀，即为0.01mol/L的标准溶液。
吸取该溶液3份，各25.00ml，分别放入3个100-150ml三角瓶中，以甲基红作指示剂，用上述标准硫酸溶液滴定至由黄色变为红色为终点。
设硫酸溶液用量3份重复的平均值为V毫升，则c（1/2H2SO4）=0.01×25/V（5）碱性甘油：在100ml甘油中加入固体氢氧化钠1-2克，隔一定时间后搅动一次，使其达到饱和为止（使甘油变稠2-3天后即可使用）。
二、步骤1、准确称取通过100目筛(0.15mm)的风干土壤样品2.00克，均匀铺在扩散皿外室中，水平地轻轻转动扩散皿，使样品铺平。
2、在扩散皿（使用前在稀酸中浸泡）的内室中加入2ml 2%硼酸溶液，并加一滴混合指示剂，然后在皿的外室边缘上涂上碱性甘油，盖上毛玻璃盖并旋转，使之密合。
在慢慢转动毛玻璃盖使外室的一边在毛玻璃盖小缺口处露出。
3、用移液管由小缺口处向外室加入10ml 1.0mol/L NaOH溶液，立即盖严。
小心地水平转动扩散皿，使溶液与土壤充分混匀，用橡皮筋扎好，放入40℃温箱中，恒温24小时后取出，再以0.01 mol/L 1/2H2SO4标准溶液滴定硼酸溶液中所吸收的氨，溶液颜色由蓝绿变为微红色为终点。
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碱解氮测定
一、试剂
1、1.8mol/L NaOH溶液：称取NaOH72g溶于水，冷却后稀释到1L。
（用
容量瓶）
2、20g/L硼酸：称取20g硼酸溶解于1L蒸馏水中。
（用容量瓶，硼酸不太
好溶解，最好用电炉略微加热）
甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100ml乙醇中。
（较不好溶解，需搅拌约半小时，需要全溶）
将5ml甲基红-溴甲酚绿混合指示剂加入1L硼酸，呈葡萄酒红色为pH4.8。
3、0.005mol/L（1/2H2SO4）标准溶液：量取2.83ml化学纯浓硫酸，稀释
到1L（用容量瓶），取50ml此溶液，再稀释至1L，此浓度为所需要的浓度，可用标准碱或硼酸标定之。
4、碱性胶液：用电炉将大烧杯的水加热至70度，用温度计精确量温度，
关掉电炉，取阿拉伯胶40g和水50ml混合后放入此水温下水浴加热并搅拌，搅至均为焦黄色，有均匀细小气泡为止，静置一小时，冷却后加入饱
和碳酸钾水溶液20ml和甘油20ml（饱和碳酸钾为加入少量水和无水碳酸钾，不断加无水碳酸钾，直至有晶体析出，用移液管吸取20ml，甘油用量筒量取），搅拌，放冷后，离心后除去上层泡沫和最底层的不溶物，取中间粘稠胶液，放到烧杯里用保鲜膜封住。
找最小号的扁平水彩笔涂胶。
5、1:5的锌粉FeSO4.7H2O粉末：硫酸亚铁用大号研钵研磨并过0.25mm
筛，每次使用前用硫酸亚铁粉和锌粉按5:1混合均匀。
用自封袋保存，并尽量避光保存。
二、操作步骤
1、称取1mm风干土样2g，置于洁净的扩散皿外室，轻轻旋转扩散皿，使土样均匀地铺平，再加入1g锌粉-硫酸亚铁。
（可将土样和锌粉-硫酸亚铁一次性称量，混合均匀再倒入外室，切忌土和锌粉等掉入内室，若掉入内室需更换扩散皿，每天做两个CK，用石英砂代替）
2、取2ml硼酸放于扩散皿内室。
（用枪加入，切忌讲硼酸溅到外室，切用枪之前需校正枪）
3、在扩散皿外室边缘涂碱性胶液，盖上毛玻璃，旋转数次，使皿边与毛玻璃完全粘合。
（若所制胶液粘稠，可涂较多胶，这样可以方便后面再次粘合，但忌胶液滴到扩散皿中，如果所制胶液较稀，需涂适量）
4、推开毛玻璃的一边，使扩散皿露出小口，迅速加入氢氧化钠10ml（用注射器加，由于碱液是过量的，因而若含有气泡，影响不大），立即推上（推上时需仔细检查是否密闭，看胶液是否于扩散皿的外室边缘连成一圈，这是实验成功的关键），再用橡皮筋圈紧（每个皿用4根皮筋，每次用2根，十字形圈紧），使毛玻璃固定。
（某人甲加液，某人乙推上盖子并检查密封，甲拿着扩散皿方便乙套上橡皮筋）
5、小心平放在40+-1摄氏度恒温箱中，碱解扩散24+-0.5h后取出，可以观察到内室应为蓝色，用所配标准酸滴定。
滴定时由于滴定仪较高，需拿其他盒子垫着，切下面垫着白纸，好看颜色变化，滴定时需一直用玻璃棒搅拌，切平放，
不可摇晃。
玻璃棒每滴一次需用洗瓶润洗，然后用滤纸擦干。
扩散皿取出后取皮筋的时候需放在桌子上平放的取，揭开盖子时需小心，切忌摇晃，将液体从内室溅到外室，外室溅到内室。
清洗：用稀酸稀释泡用自来水洗净的扩散皿和盖子，一到两小时即可，然后用自来水冲净，用大量蒸馏水润洗。
三、结果。