Periodical_sclyj200610092(1)

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Information
不同阶段、不同层面都发挥着不同的角色作用。 2.3.2客体的特异性 教育信息服务的客体是十分明确的,就是所有有学习需要 的人。这一客体涉及的人群非常广泛,不同年龄、不同性别、不同 社会地位以及不同背景的人只要有学习需求,都可以享受教育 信息服务。因此,教育信息服务客体的特异性就是人群分布上的 普遍性和学习倾向上的同一性。同时,由于教育信息服务的客体 包括了各个年龄层次和不同社会背景的人,所以他们对于学习 内容和学习方式的追求必然各不相同。由此可以看出,教育信息 服务的客体义在学习需求和个人学习风格上呈现出多样化的特 异性。 2.3.3服务形式的特异性 教育信息服务面对的是层次背景各异、条件需求不同的所 有人。他们对于学习的需求是各种各样的.为了适应他们多种多 样的学习方式,教育信息服务提供的服务形式必须是不拘一格 的,要具有灵活开放的特异性。教育信息服务形式的多元化和灵 活性就是耍向人们提供尽可能多的、可行的以及个性化的学习 方式来适用于各个学习者。 2.3.4服务内容的特异性 一方面教育信息服务的内容量呈“海量”化。教育信息服务 体系为了满足客体纷繁复杂的学习需求,必须积累和提供大量 而且全面的教育信息。凶此。教育信息服务内容的一个明显的特 异性就是数量上多得惊人。 另一方面教育信息服务表征的内容类别繁多。教育信息服 务提供的信息类别包罗万象,涉及人文和自然科学的各个领域, 而且它所提供的信息不局限于纸质媒介的文字信息,还包括了 声音、图像等多媒体信息。实践证明信息表征的内容多样化可以 提高人们的学习兴趣和学习效果。 2.3.5服务技术方法的特异性 综合应用现代信息技术和各种高科技手段是教育信息服务 技术方法的特异性。通过现代信息技术和多种高科技手段综合 运用,可以实现信息的远距离传送、无线传输和完成庞杂的信息 编辑整理T^作和信息的瞬时调用,这为客体的学习提供了极大 的方便和便利。教育信息服务的特点见表1。 表l教育信息服务的特点

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第35卷第4期第421页2006年8月华中科技大学学报(医学版)ActaMedUnivSciTechnolHuazhongV01.35No.4P.421Aug.2006COS一7细胞上转染的人类三型酸敏感离子通道的生理学和药理学特性*郑云洁唐明△刘长金宋元龙骆红艳胡新武JurgenHescheler华中科技大学同济医学院基础医学院生理学系,武汉430030摘要目的研究人类三型酸敏感离子通道(hASIC3)的生理学和药理学特性。

方法应用全细胞电压钳技术检测转染在COS-7细胞上的hASIC3通道的生理学和药理学特性。

结果hASIC3通道能通过迅速降低胞外pH值而被激活,并在酸性环境中迅速脱敏。

脱敏后的hASIC3通道恢复到50%备用状态时所需的时间为(6184-21)ms。

胞外pH值在(6.40±0.05)时可使50%的hASIC3通道激活。

pH值低于8时hASIC3通道的利用率降低,在生理状态pH值条件下,通道利用率降低了大约50%。

阿米洛利能特异性阻断快速激活快速失活hASIC3通道且半数抑制浓度为(12.5±3.o)雎mol/L。

hASIC3通道的电流电压(I-V)关系曲线在很宽广的电压范围内呈线性关系(一80~+80mV),翻转电位为(+43±5)mV。

结论hASIC3通道作为一种酸感受器,可能对感受人体pH值的变化起很重要的作用。

关键词酸敏感离子通道;COS-7细胞;pH值;阿米洛利中图法分类号R349.54PhysiologicalandPharmacologicalCharacterizationsofHumanASIC3ExpressedinCOS-7CellsZhengYunjie,TangMin96,LiuChangjinetalDepartmentofPhysiology,SchoolofBasicMedicalSciences,TongJiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030AbstractObjectiveToinvestigatethephysiologicalandpharmacologicalcharacterizationsofhumanASIC3(hASIC3)expressedinCOS-7cells.MethodsByusingcellculture,genetransfectionandwholecellpatchclamptechnique。

银离子抗性细菌质粒的分离与鉴定

银离子抗性细菌质粒的分离与鉴定

银离子抗性细菌质粒的分离与鉴定应用生态2006年2月第17卷第2期CHINEsEJOURNALOFAPPLIEDECOLOGY,Feb.2006,17(2):305~308银离子抗性细菌质粒的分离与鉴定*李钧敏金则新一(台州学院生态研究所,临海317000)1引言【摘要】通过对不同化工厂废水处理池的活性污泥进行富集,不同浓度银离子驯化后,分离得到3O株银离子抗性细菌,最大硝酸银耐受量可达80mg-ml~.对这些细菌进行质粒抽提与鉴定,质粒检出率为76.67%.40mmol?LI1的苯甲酸钠对HAg4细菌质粒的消除率可达98.75%;而350g-mlI1的吖啶橙对HAg4细菌质粒的消除率只有77.78%.细菌质粒与银离子抗性密切相关.关键词细菌质粒银离子抗性文章编号1001~9332(2006)02—0305一O4中图分类号Q242文献标识码A Isolationanddeterminationofsilver-resistantbacteriaplasmids.LIJunmin,jiNZexin(Ecolo gyInstituteofTaizhouUniversity,Linhai317000,China).一C^n.JApp1.Ecol,,2006,I7(2):305~308. Throughtheenrichmentoftheactivemudobtainedfromthreechemic~plantsandthedomesti cationwithdiffer.entconcentrationAgsolution,thirtybacteriastrainswithsilver(Ag)一resistancewereisolated,amongwhich,thehighestAg.resistantconcentrationWaS80mg-ml一.Theplasmidsinthesebacteriawereextracted.withthedetectionrateof76.67%.TheeliminationrateoftheplasmidinHAg4bacteriawas98.75% by40mmol-L~sodiumbenzoate,and77.78%by350g.ml~acridineorange.ItwassuggestedthattheAg 一resistanceofbacteriaWashighlycorrelatedwiththeirplasmids.KeywordsBacteria,Plasmid,Silver,Resistance.质粒是微生物细胞内独立于基因组DNA的能够自我复制的双链DNA分子.在正常条件下,质粒对微生物细胞的生存并非必要,但在特殊环境下(如营养缺乏,有毒物质存在等),却起着重要作用[2,7?11,21].在污染环境中,微生物通过调节其结构和生理状况,形成能在自然环境中广泛传播的质粒,完善或增加那些降解异生物质酶系的遗传基因,以适应日益污染的环境[,.,.质粒的生态学研究表明,污染环境中细菌质粒的检出率大大高于清洁环境[,8.10,0,并且细菌质粒的检出率与污染程度存在正相关[H-18_.重金属抗性细菌质粒控制的性状主要集中于汞离子和有机汞制剂,镍,钴,铅,镉,铋,锑,锌,银等抗性上…1.本文对3种不同来源化工厂的活性污泥中的微生物用硝酸银进行了富集与驯化培养,从中筛选出银离子抗性细菌并对其质粒进行了分析,以期为进一步了解微生物质粒与抗性的相关性及抗重金属微生物质粒分子育种E6]奠定基础.2材料与方法2.1污泥来源实验用污泥来自浙江临海,黄岩和路桥的化工厂废水处理池中的活性污泥.2.2细菌的富集和驯化培养取1ml的活性污泥,接入5Om1的牛肉膏液体培养基中【15],30℃活化培养48h.取富集培养的微生物以1:100的比例接入含一定浓度硝酸银的牛肉膏液体培养基中,3O℃培养48h后再转接,连续转接5次.硝酸银的浓度分别为1O,2O,3O,4O和50mg?ml~.2.3银离子抗性菌株的分离和细菌的鉴定取最后一次驯化培养细菌lO稀释后,分别涂布于含有2O,4O和60mg-ml硝酸银的牛肉膏固体培养基中,3O℃倒置培养48h后,在含菌落最少的培养皿中挑取单菌落lO株,接入含10mg-ml-1硝酸银的牛肉膏液体培养基中,3O℃培养24h.甘油保种子一2O℃贮存备用.细菌的鉴定按文献中【4J的常规方法进行.2.4质粒的抽提及检测取甘油贮存菌株以1:100的比例接入含一定选择试剂的牛肉膏蛋白胨液体培养基中.37℃培养24h,10000r-minI1离心收集菌体于1.5m1离心管中,用碱裂解法进行质粒的抽提【13].质粒DNA在0.8%的琼脂糖凝胶(含0.5pg-m1I1溴化乙锭)中电泳,电泳缓冲液为0.5XTBE,用GIS凝胶成像分析系统(上海天能科技服务公司)拍照保存.*国家自然科学基金项目(30471378),浙江省自然科学基金项目(Y504256)和浙江省教育厅高校科研计划资助项目(20050058). **通讯联系人*******************.cn2005—01—31收稿,2005一O6一l9接受.应用生态17卷2.5质粒的消除用吖啶橙与苯甲酸钠(c6H5COONa)进行质粒消除【l引,取20的甘油贮藏种.接入5ml含10mg?mlI1硝酸银的牛肉膏液体培养基中.30℃培养48h;再按1%的比率分别接入含150,200,250,300,350和400"g?ml-1吖啶橙的牛肉肯液体培养基中,30℃培养24h进行吖啶橙质粒消除:同时分别接入含10,20,30,40和50mmol?ml-1苯甲酸钠的牛肉膏液体培养基中,30℃培养48h进行苯甲酸钠质粒消除.同时设立不含吖啶橙及苯甲酸钠的培养基同时培养作为对照.将培养后的菌体取501影印涂布于含10mg?mlI1硝酸银的牛肉膏固体培养基和不含硝酸银的牛肉膏固体培养基中,30℃培养48h后统计菌落数,并进一步选取相应的菌落培养后进行质粒的抽提与检测,计算质粒消除率.3结果与分析3.1银离子抗性细菌的分离与鉴定对三家化工厂的活性污泥进行富集,驯化及分离共得到30株硝酸银抗性菌株,这些菌株在含硝酸银的牛肉膏固体培养基上生长良好,菌苔丰满,呈乳白色,菌落成圆形,边缘光滑整齐,菌体呈杆状,革兰氏染色阴性,经常规方法初步鉴定3O株均为假单胞菌属(Pseudomonas).经过硝酸银最大耐受性的检测,30株菌株中对硝酸银的最大耐受力可达8Omg?ml~.3.2银离子抗性细菌质粒的检测对30株硝酸银抗性细菌菌株的质粒进行抽提与检测,临海某化工厂来源的硝酸银抗性细菌质粒的检出率为75%,结果如图1所示.HAgl,HAg6和HAgl0共3株细菌未检测到质粒,而含有质粒的细菌,其质粒的拷贝数也有不同,如HAg2,HAg5和HAgl23株细菌的质粒拷贝数较低,而其余如HAg3,HAg4,HAg7,HAg8,HAg9和HAgl16株细菌的质粒拷贝数较高,所检测到的质粒大于23kb.圉1硝酸银细菌质粒电泳检测结果Fig.1AgarosegelelectrophoresisresultsofplasmldobtainedfromAg resistingbacteriastrain.M:hDNA/EcoRI+HindⅢ分子量标准参照Referencemolecll1ar weight;1~l2:lI缶海某化工厂活性污泥分离得到的银离子抗性细菌质粒TheplasmidofAgresistancebacteriastrainseparatedfromactive mudobtainedfrom[aboratoryinLinhaicity.黄岩某化工厂来源的硝酸银抗性细菌质粒的检出率为100%,而路桥某化工厂来源的硝酸银抗性细菌质粒的检出率仅为50%,总体而言,硝酸银抗性细菌质粒的检出率较高,为76.67%.而对三家化工厂来源的污泥未经驯化直接利用选择培养基进行硝酸银抗性细胞菌株的筛选,共筛选到5株抗性菌株,均未检测到质粒.3.3银离子抗性细菌质粒的消除3.3.1质粒消除剂浓度的确定为了解银离子抗性细菌质粒的存在与其抗性的相关性,利用吖啶橙及苯甲酸钠对第4号硝酸银抗性细菌(编号为HAg4)的质粒进行消除研究.由于硝酸银抗性细菌质粒无明显的选择标记,因此在做质粒消除时,需要选择一个合适的质粒消除剂浓度(表1).从表1可知吖啶橙对细菌生长有一定程度的抑制作用,如400btg?mII1吖啶橙可完全抑制细菌的生长,而用350肚g?mlI1吖啶橙处理HAg4细菌后,50l菌液在普通牛肉膏固体培养基中可得31个菌落,因此确定350gmlI1吖啶橙为最适的质粒消除浓度.同样从表3可知苯甲酸钠对细菌的生长也有一定程度的抑制作用,如50mmol?mlI1苯甲酸钠可完全抑制细菌的生长,而40mmol?mlI1苯甲酸钠处理HAg4细菌后,5Ol菌液在普通牛肉膏固体培养基中可得45个菌落,因此确定40mmol?mlI1苯甲酸钠为最适的质粒消除浓度.表I不同消除剂浓度对HAg4细菌生长的影响TableIEffectofdifferentconcentrationsofeliminationreagnetsOll thegrowthofHAg4N:无法计数Incalculability.3.3.2质粒消除率采用350ttg?ml吖啶橙与40 mmol?ml-1苯甲酸钠对HAg4细菌进行质粒消除实验,并将培养后的5OI田菌液涂布于普通牛肉膏培养基中,做3个平行,30℃培养48h后,通过平板影印培养初步统计质粒的消除率.苯甲酸钠对HAg4细菌质粒有较好的消除效果,用40mmol?ml-1的苯甲酸钠消除后,50l菌液在含硝酸银的培养基上生长的菌落数为0.33±0.57个,而在不含硝2期李钧敏等:银离子抗性细菌质粒的分离与鉴定307 酸银的培养基上生长的菌落数为26.67±4.62个,对质粒的消除率可达98.75%;11'r啶橙的质粒消除效果较差一些,用350g?ml的吖啶橙消除后,501菌液在含硝酸银的培养基上生长的菌落数为10.00±2.45个,而在不含硝酸银的培养基上生长的菌落数为51.67±11.85个,对细菌质粒的消除率只有77.78%.3.3.3银离子抗性与质粒的相关性采用吖啶橙和苯甲酸钠对HAg4细菌的质粒进行消除后,选取在含10mg?mlⅡ1硝酸银的牛肉膏固体培养基和不含硝酸银的牛肉膏固体培养基中影印培养的菌落共20个,进行质粒的抽提,结果证实能在两种培养基上同时生长的菌落均可检测到质粒,而仅在不含硝酸银的培养基上生长的菌落质粒均已丢失.通过对30株细菌质粒的消除检测,发现所有细菌的质粒都与其抗性有关,推测重金属银离子抗性编码基因可能位于质粒上或与质粒密切相关.随着质粒的消除,菌株对银离子的抗性也随之丢失,硝酸银对细菌的毒害作用导致菌株死亡.4讨论本研究经过硝酸银的5次驯化培养,从活性污泥微生物中分离得到含有质粒的硝酸银抗性菌株, 质粒检出率为76.67%,而由于本实验采用的质粒抽提方法是常规的碱裂解法,并不可裂解所有细菌的细胞壁,质粒检出率偏低,因此银离子抗性细菌具有较高的质粒检出率.相比之下,未经驯化直接利用选择培养基进行硝酸银抗性细胞菌株筛选的5株抗性菌株(对照),均未检测到质粒,显示环境与银离子抗性细菌质粒的产生密切相关,银离子抗性细菌质粒可以通过分子育种的方式获得及加强.研究表明细菌对环境中特异性限制因子的应答能力一般是由质粒控制的[9,241.质粒的消除试验是鉴定质粒功能的一个重要手段.苯甲酸钠和吖啶橙为常用的质粒消除剂,40mmol?mlI1的苯甲酸钠对质粒的消除率可达98.75%;而吖啶橙的质粒消除效果较差一些.350g?mlI1的吖啶橙对细菌质粒的消除率只有77.78%.当HAg4细菌的质粒经吖啶橙或苯甲酸钠消除后,发现随着细菌质粒的消除, 细菌对银离子的抗性也随之消除,推测重金属银离子抗性编码基因可能位于质粒上或与质粒密切相关.这与Gupta等]的研究结果相吻合,即银离子抗性基因定位于质粒上.质粒分子较小,便于研究,为遗传毒理的研究提供了理想的分子模型[1...另外质粒所携带的基因可以提供一个利于重组,突变试验的基因库,质粒可转移到其它微生物,与其它质粒相互重组,具有产生新的排列的巨大潜力.本研究为构建高效,多能的工程菌["]补充了一个菌种来源,可用于污染环境的监测引,生物修复和治理,相应的研究正在进一步进行.参考文献1caiB—L(蔡宝立).1993.Plasmid.Microbiology(微生物学通报). 20(1):53~58(inChinese)2CaiB.L(蔡宝立).GaoGC(高才昌),1987,Advancesandapp~ca. tionperspectivesofstudiesinthedegradativeplasmids.Microbiolo? 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去甲肾上腺素介导低氧引起家兔颈动脉体神经电活动增加

去甲肾上腺素介导低氧引起家兔颈动脉体神经电活动增加

生理学报,1999年8月,51(4),407~412 407 Acta Physiologica Sinica去甲肾上腺素介导低氧引起家兔颈动脉体神经电活动增加3庞 雷 苗智慧 董 力 王燕凌(河北省医学科学院生理研究室,石家庄050021)摘 要 在30只家兔颈动脉体2窦神经(CS N)标本上,记录了窦神经中39个对低氧反应敏感的化学感受性单位由去甲肾上腺素(NA)及其拮抗剂引起的反应。

结果如下:(1)以低氧的改良台氏液(MTS)灌流标本时,19个单位放电频率由0113±0106增至0125±0112imp/s(P<01001);(2)在灌流液中加入去甲肾上腺素(10-6m ol/L)后,19个单位的自发放电频率由0114±0108增至0123±0113imp/s(P<0101);(3)4个自发放电频率为0112±0103imp/s(P>0105)的单位,在换以含有10-6m ol/L哌唑嗪MTS灌流后,单位放电频率未见改变;(4)6个自发放电频率为0112±0102imp/s的单位,换以含有10-6m ol/L育亨宾的MTS灌流后,单位放电频率也未见改变;(5)对3例以低氧液灌流时单位放电频率由0111±0103增至0126±0113imp/s(P<01001)的标本,以哌唑嗪(10-6m ol/L)预处理后,再以低氧液灌流时,单位放电频率由0111±0102增至0130±0102imp/s(P<01001);(6)对7例以低氧液灌流时,单位放电频率由0111±0102增至0130±0110imp/s(P<0101)的标本,以育亨宾(10-6m ol/L)预处理后,再以低氧液灌流时,单位放电频率由0112±0102imp/s变为0119±0102imp/s(P>0105)。

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文化差异成本与跨文化交易费用的衡量
作者:王风华, 范徵
作者单位:上海外国语大学,国际工商管理学院,上海,200083
刊名:
生产力研究
英文刊名:PRODUCTIVITY RESEARCH
年,卷(期):2006,(10)
被引用次数:0次
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10.Welch Jack Straight from the Gut 2001
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下载时间:2011年2月17日
无锡伊诺特石化机械设备有限公司为无锡澳驰过滤设备有限公司于2007年4月在中国无锡成立的全资子公司,是国内领先的微米级过滤器供应商之一,同时特别善长于苛刻工况的过滤设计。

核心产品包括分不锈钢过滤器,精密过滤器,过滤设备,气体过滤器,篮式过滤器,芯式过滤器,静态混合器、视镜等。

这一系列产品已经获得了中国海洋石油总公司、洛克石油、Fluor Corporation、Technip、中国石油天然气西气东输项目部、壳牌、南钢集团、巴斯夫,索尼等诸多客户的认可与好评。

伊诺特选用世界领先的过滤产品生产设备及制造工艺,融合多年滤芯制程上的研发经验,整合运用各种过滤分离技术,致力于为全球工业领域提供最经济、最专业的过滤解决方案。

其烧结滤芯、不锈钢折叠滤芯、楔型滤芯、膜滤芯等过滤介质配合多样化设计的过滤器壳体,已广泛应用于石化、炼油、新能源、钢铁、化学、医药、食品、水处理等行业。

伊诺特服务工业界多年,严格执行ISO9001国际质量体系。

并在全国设有多个项目部,可为您提供最完善的售后服务体系,在中国地区,我们能够24小时内到达现场为您服务。

未来,伊诺特秉承"安全、专业、创新、合作"的核心价值观,继续为客户提供更优质的产品、更高效的服务,努力为过滤技术创新做出新的贡献。

安全
我们永远坚持安全是不容妥协的理念
我们为客户提供的所有产品必须保证客户工艺的安全,在技术上我们不能忽略任何细节.
专业
我们将坚守我们的使命,不为利益而偏离我们的航向。

我们不断学习,始终为寻找最佳解决之道而努力,我们力争做行业的百年企业。

创新
我们用创新的方法解决未解决的问题。

我们利用新的技术、条件、服务更好的理解客户多元化的需求,同时也使我们在快速发展和竞争激烈的社会中保持领先优势.
激情
我们尊重个人,支持人个激发最大能力
只要是对的,我们就支持
我们永远感受竞争和成功的快乐
合作
未来优秀的人才团队是企业的核心竞争力之一,我们需要集中我们所有力量,发挥所有人的特长,为我们的使命而奋斗
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江苏金湖大华自动化仪表有限公司座落于碧荷飘香、风景秀逸、人杰地灵具有“天下第一荷花”的金湖水乡。

公司物资力量雄厚,生产设备先进,检测设施齐全,并且制定了科学合理的生产工艺和健全的质保体系,汇聚了许多对有纸记录仪制造有着特殊追求和造诣的科技人员及职工队伍。

在温度、压力、流量、显示、效验等仪表的制造均领先于同行业。

公司主营产品有热电偶、热电阻、双金属温度计、变送器、流量计、数显仪、效验装置、自动化成套设备、电线电缆、线缆桥架等。

产品主要用于电力、化工、冶金、钢铁等众多行业。

业绩的取得来源于客户的厚爱,公司一直遵循着用质量打造品牌的宗旨,以诚信待人为守则。

期盼着与各界友人的愉快协作,共同创造优越的的业绩篇章。

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