高三生物二轮复习 第一部分 知识落实篇 专题九 现代生物科技 第1讲 基因工程和细胞工程课件
______________________水平上对转基因植物与非转
基因植物进行比较。
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核心考点 归纳整合 (3)将图乙中的外植体置于一个选择培养基中进行筛选， 筛选的过程利用了基因表达载体中的____________；由 图可知，筛选是在外植体经________________(过程)培
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核心考点 归纳整合
2．克隆动物与试管动物认识的误区 (1)误区一：试管动物与克隆动物的产生都是无性生殖。 纠正： 试管动物的产生是有性生殖， 克隆动物的产生是无性生殖。 (2)误区二：试管动物(哺乳类)的产生是在体外进行的，克隆动物 (哺乳类)的产生是在体内进行的。 纠正： 试管动物(哺乳类)和克隆动物(哺乳类)早期胚胎之前都是 在体外进行的，早期胚胎经过胚胎移植之后是在体内进行的。
解析：(1)基因表达载体包括：启动子、终止子、目的基因和标记
基因，其中启动子是转录的起点，即RNA聚合酶的识别和结合位
点；根据教材中的知识可知，T－DNA可将目的基因转移到受体 细胞的染色体DNA上。(2)基因工程的最后一步是对转基因生物
进行鉴定，鉴定过程包括分子水平和个体生物学水平，其中可直
接进行比较的是个体生物学水平鉴定。(3)利用基因表达载体中 的标记基因可进行筛选；外植体需要先经过脱分化形成愈伤组织，
再经过再分化形成新植株，最后进行分子特性鉴定时，需要从
DNA、RNA和蛋白质三个层次进行鉴定，这三个层次需要的技 术分别是DNA分子杂交技术、分子杂交技术和抗原—抗体杂交技
术。
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核心考点 归纳整合
答案：(1)终止子
目的基因
启动子
将目的基因
转移到受体细胞中，并整合到受体细胞染色体的 DNA上 (2)个体生物学
(3)标记基因
原—抗体杂交
脱分化
愈伤组织
分子杂交
抗
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核心考点 归纳整合
细胞工程
1．比较下表中的动物细胞培养和植物组织培养
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核心考点 归纳整合
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核心考点 归纳整合
2.比较下表中的植物体细胞杂交和动物细胞融合
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3
核心考点 归纳整合
①组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。启动子≠起始 密码，终止子≠终止密码。 ②构建过程：
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4
核心考点 归纳整合 (3)将目的基因导入受体细胞。
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核心考点 归纳整合
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请据图回答相关问题：
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核心考点 归纳整合 (1)利用图甲所示Ti质粒构建的基因表达载体，需要具
有复制起始位点、启动子、标记基因、______和
________，其中________是RNA聚合酶的识别位点； 而Ti质粒中T－DNA的作用是 ______________________________________________。 (2)要检测目的基因是否成功表达，可以直接在
第一部分 专题九
知识落实篇
现代生物科技专题
第一讲 基因工程和细胞工程
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1
核心考点 归纳整合 基因工程 1．比较限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和解旋酶
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核心考点 归纳整合CR技术扩增 ③用化学方法人工合成 (2)基因表达载体的构建。
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核心考点 归纳整合 (4)目的基因的检测与鉴定：
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核心考点 归纳整合 归纳提炼
1．区分一个至多个限制酶切点与每种酶一个切点 (1)一个至多个限制酶切点：作为载体必须具有一个至多个限制 酶切点，以便与外源基因连接。 (2)每种酶一个切点：每种酶的切点最好只有一个。因为一种限 制酶只能识别单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组 后可能会丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细 胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制酶的一个切点，则酶 切后既能把环打开接纳外源 DNA 片段，又不会丢失自己的片段。
养成____________________________之后进行的，筛选
之后经过再分化培育成新的植株，最后再对植株进行 分子特性鉴定，该鉴定过程需要用到DNA分子杂交技 术、________________技术和____________技术。
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核心考点 归纳整合
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核心考点 归纳整合
(3)误区三：胚胎移植的优势是充分发挥雌性优良个体的繁殖潜 力，因此胚胎移植的胚胎只能来自体内受精的胚胎。 纠正：胚胎移植的胚胎有三个来源：体内正常受精产生的胚胎、 核移植产生的重组细胞培养而来的胚胎、体外受精产生的早期胚胎。
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核心考点 归纳整合
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核心考点 归纳整合 3.下图为克隆动物的培育过程
(1)①～⑤的过程名称为：①去核；②取核；③核移植4； ④卵裂；⑤胚胎移植。 (D新个体的绝大多数性状与B动物相同。
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核心考点 归纳整合
归纳提炼 1．容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞 (1)杂种细胞：植物体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之 后形成的原生质体融合， 融合的原生质体出现细胞壁之后形成的细胞 叫杂种细胞。 (2)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞之后形成 的细胞叫重组细胞。 (3)杂交细胞：动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。
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核心考点 归纳整合 2．基因工程与蛋白质工程的比较
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核心考点 ►对位训练 归纳整合 1．土壤农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能侵染双 子叶植物和裸子植物，其细胞中含有一种特殊质粒叫Ti质
粒，图甲表示Ti质粒的结构，图乙表示Ti质粒的转化过程，
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高考生物二轮复习 专题九 现代生物科技专题 第1讲 基因工程、细胞工程课件
(2)②过程应采集处于_M__Ⅱ__中_期 __的卵母细胞，且去掉其细胞 核，去核的目的是：使__克__隆__牛__的__遗__传__物__质__几。乎全部来自供体细胞
(3)③过程不同于植物细胞融合的诱导方法为__生__物__法__，用
灭活__的__病 __毒 __促使动物细胞发生融合。 (4)上述图示用到的生物工程技术有：基__因__工__程__、
基因之后，如果它们都相连，则所产生的黏性末端必须相同。 Ecoli DNA连接酶可以连接黏性末端，T4DNA连接酶可以连接两种 类型的末端。反转录法合成目的基因是以mRNA为模板，先逆转 录合成单链DNA，再人工合成双链DNA，利用PCR技术可进行 DNA的大量扩增。基因工程中可以选用质粒、λ噬菌体的衍生物、 动植物病毒等作载体。当受体细胞是细菌时，为了增加导入的成 功率，常用Ca2＋处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的 通透性增大，容易吸收重组质粒。
受体细胞为大肠杆菌，则使用方法为_C_a_2_＋_处__理_。法 3．重组Ti质粒中除含有抗虫基因外，还应含有_启__动__子___、
___终__止__子_及标记基因。
4．(1)基因工程操作的核心步骤如图示中的⑦构__建 __基 ___因_表 ___达_。载体
(填名称)
(2)①过程是由人的垂体细胞转录出的生长激素mRNA获得 的，这种获取目的基因的方法称为_反即___T_4____DNA连接酶和___E_c_o_li__DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是_m__R_N_A___，产物是单__链__D__N_A_。若要在
体外获得大量反转录产物，常采用__P_C__R___技术。 (5)基因工程中除质粒外，_动__植__物__病__毒_和_λ_噬__菌__体__的__衍__生__物_也可
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7．细胞融合完成的标志是新细胞壁的形成。( ×) 8．形成杂种细胞是植物体细胞杂交的终点。( ×) 9．动物细胞融合和植物体细胞杂交过程中对杂种细胞进行筛选 的方法相同。( × ) 10．对病原体灭活是指用物理或化学方法破坏病原体的抗原结 构。( × ) 11．诱导动物细胞融合与原生质体融合的方法不完全相同。( √ ) 12．体内受精过程中，精子在精液中即可获能。( × ) 13．排卵指卵子从卵泡中排出，冲卵是从子宫中冲出胚胎。( √ ) 14．桑椹胚的细胞不具有全能性。( × )
3．启动子的分布位置和生物作用(选修 3P11)
位于基因首端的 DNA 片段，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位， 它能驱动基因转录出 mRNA。
4．[全国卷]农杆菌转化法中农杆菌的作用(选修 3P12)
农杆菌可感染植物，所含的质粒能将目的基因转移并整合到受 体细胞染色体 DNA 中。
5．转移的基因能在受体细胞内表达的原因 生物界共用同一套遗传密码。
24．培养哺乳动物早期胚胎的培养液成分：_无__机__盐__类_、有机盐 类、维生素、激 ___素_、__氨__基__酸__、核苷酸等营养成分，以及血清等物
质。
25 ． 胚 胎 移 植 不 属 于 生 殖 方 式 ， 仅 属 于 一 种 技 术 ， 可 用 于 _有__性__和__无__性__生殖产生的胚胎的移植。
第 1 关：基础知识——填一填
1 ． DNA 重 组 技 术 的 基 本 工 具 有 __限__制__性__核__酸__内__切__酶____ 、 D__N_A__连__接___酶__和载__体__。
2．限制性核酸内切酶主要从原__核__生__物__中提取，具有专__一__性， 并可使特定部位的两个核苷酸之间的_磷__酸__二__酯__键___断裂。
高三生物考前必背知识点现代生物科技专题知识点
选修3 现代生物科技专题知识点
专题1 基因工程
一．知识网络
概念：又叫DNA重组技术，是指按照人们的愿望，进行严格的设计，
通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出
更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
来源：主要从原核生物分离纯化
限制性核酸内切酶（限制酶）作用：识别双链DNA中某种特定的核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯键断开
其他条件
均为无菌操作，需要适宜的温度、pH、O2等条件
（1）植物组织培养（图见教材）
（2）动物细胞培养
①概念：取动物体的相关组织分散成单个细胞后，在适宜培养基中使细胞生长和增殖的过程。
②基本过程：培养的动物细胞大都取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官组织，将组织取出来以后，先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，使细胞分散成单个细胞，然后配制一定浓度的悬浮液，在培养瓶中进行原代培养。随着细胞的生长和增殖，大多数细胞不适应悬浮生长，它们必须在固定的表面上生长和分裂，细胞在培养瓶中贴壁生长，随着细胞越来越多，贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时就停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。这样就需定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，配成细胞悬浮液，分装到两个或两上以上的培养瓶中进行传代培养。在传代培养中出现细胞株和细胞系两种类型。（如图所示）
①体细胞中某基因发生改变，生殖细胞中不一定出现该基因；
②DNA上某个碱基对发生改变，它不一定位于基因的中能编码氨基酸的部位；
③若为父方细胞质内的DNA上某个碱基对发生改变，则受精后一般不会传给子代；
④若该亲代DNA上某个碱基对发生改变产生的是一个隐性基因，并将该隐性基因传给子代，而子代为杂合子，则隐性性状不会表现出来；
现将二者的发生比较如下：
专题1 基因工程
一．知识网络
概念：又叫DNA重组技术，是指按照人们的愿望，进行严格的设计，
通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出
更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
来源：主要从原核生物分离纯化
限制性核酸内切酶（限制酶）作用：识别双链DNA中某种特定的核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯键断开
其他条件
均为无菌操作，需要适宜的温度、pH、O2等条件
（1）植物组织培养（图见教材）
（2）动物细胞培养
①概念：取动物体的相关组织分散成单个细胞后，在适宜培养基中使细胞生长和增殖的过程。
②基本过程：培养的动物细胞大都取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官组织，将组织取出来以后，先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，使细胞分散成单个细胞，然后配制一定浓度的悬浮液，在培养瓶中进行原代培养。随着细胞的生长和增殖，大多数细胞不适应悬浮生长，它们必须在固定的表面上生长和分裂，细胞在培养瓶中贴壁生长，随着细胞越来越多，贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时就停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。这样就需定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，配成细胞悬浮液，分装到两个或两上以上的培养瓶中进行传代培养。在传代培养中出现细胞株和细胞系两种类型。（如图所示）
①体细胞中某基因发生改变，生殖细胞中不一定出现该基因；
②DNA上某个碱基对发生改变，它不一定位于基因的中能编码氨基酸的部位；
③若为父方细胞质内的DNA上某个碱基对发生改变，则受精后一般不会传给子代；
④若该亲代DNA上某个碱基对发生改变产生的是一个隐性基因，并将该隐性基因传给子代，而子代为杂合子，则隐性性状不会表现出来；
现将二者的发生比较如下：
高考生物二轮专题 专题九现代生物科技专题基因工程和细胞工程复习课件
目的
相同点
(1)两技术手段培养过程中都进行有丝分裂，都是无性繁 殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂； (2)均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件
2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
植物体细胞杂交 动物细胞融合 (单克隆抗体制备)
理论 细胞膜的流动性、细 细胞膜的流动性、细 基础 胞的全能性 胞增殖 (原理) 融合 前处 理
第二步 第三步
个体水平鉴定
抗虫、抗病的接种实验，以确定是否具有抗性以及抗性程度 ；基因工程产品与天然产品的功能活性比较，以确定功能活 性是否相同等
细胞工程
2．(2011·北京东城区模拟)对下面制备单克隆抗体的过 程示意图的叙述不正确的是
A．①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏 中提取的 B．④中的筛选是通过抗原、抗体反应进行的
基因工程是当前生命科学 研究的热点和前沿之一，基因 诊断、基因治疗、基因产品在 人们生活中的出现日渐频繁。 基因工程的原理、技术与应用 是选修3的重要考点，且经常与 胚胎工程、微生物的培养、克 隆技术、组织培养等知识进行 综合考查。动物细胞培养及应 用、植物组织培养与植物体细 胞杂交在农业生产中的应用也 是重要的考点。
③构建方法
(3)将目的基因导入受体细胞——转化
②受体种类不同，所用的受体细胞种类也不相同。
植物——一般为体细胞(可经组织培养成为完整个体)。 动物——受精卵(因为体细胞的全能性受到严格限制)。
③转化实质：目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。
(4)目的基因的检测与鉴定
类型 步骤 第一步 分子 检测 检测内容 转基因生物染色体的 DNA上是否插入了目的 基因 目的基因是否转录出了 mRNA 目的基因是否翻译成蛋 白质 方法 DNA分子杂交技术(DNA和DNA 之间) 分子杂交技术(DNA和mRNA之间 ) 抗原－抗体杂交技术(抗原和抗体 之间)
全国高考生物总复习现代生物科技专题第1讲基因工程课件
考点一
考点二
考点三
4．如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、
知识 突破
BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoRⅠ、 BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正
确的是( C ) A．将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，
第十三单元 现代生物科技专题 第1讲 基因工程
考点一
考点二
考点三
知识
突破
1．基因工程的概念 (1)供体：提供__目__的__基__因____的生物体。 (2)操作环境：___体__外____。 (3)操作水平：___分__子____水平。 (4)原理：_基__因__重__组_____。 (5)受体：表达目的基因。 (6)本质：性状在__受__体____体内的表达。 (7)优点：克服__远__缘__杂__交__不__亲__和____的障碍，定向改造生物的 __遗__传__性__状__________。 2．DNA重组技术的基本工具 (1)限制性核酸内切酶(简称：_限__制__酶___) ①来源：主要是从___原__核_____生物中分离纯化出来的。 ②作用：识别特定的__核__苷__酸__序__列__，并切开特定部位的两个核苷酸之间的 __磷__酸__二__酯__键_____。 ③结果：产生___黏__性__末__端__或平末端。
菌作为受体细胞，原因是 _未__处__理__的__大__肠__杆__菌__吸__收__质__粒__(外__源__D__N_A_)_的__能__力__极__弱__(其__他__合__理__答__案__也__可__)____ _。
考点一
考点二
考点三
知识
突破 3.下列关于载体的叙述中，错误的是( D ) A．载体与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子 B．对某种限制酶而言，载体最好只有一个切点，但还要有其他多种酶的切 点
2023年高考生物二轮专题复习讲义：专题八 现代生物科技专题
第1讲基因工程和细胞工程2015高考导航[答案]□1限制酶□2载体□3基因表达载体的构建□4目的基因的检测和鉴定□5转基因动物□6基因治疗□7基因□8可产生自然界没有的蛋白质□9植物细胞的全能性□10植物体细胞杂交□11作物新品种的培育□12细胞增殖□13动物细胞核的全能性□14细胞膜的流动性□15给小鼠注射特定抗原□16产生专一抗体的杂交瘤细胞[链接思考]1．基因工程和克隆技术涉及哪些工具酶？提示：基因工程的工具酶是限制酶和DNA连接酶；克隆技术的工具酶是纤维素酶、果胶酶和胰蛋白酶。
2．转基因动物的培育涉及到哪些生物工程？提示：基因工程、动物细胞工程和胚胎移植。
[真题自测]判一判(1)某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，生根时，培养基通常应含α萘乙酸等生长素类调节剂(2013重庆，5D)()(2)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不可能同时进行ATP 的合成与分解(2013四川，1C)()(3)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接(2013安徽，6C)()(4)将目的基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞(2012浙江，6D改编)()(5)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养(2012广东，2A)()(6)应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达(2011四川，5D)()(7)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体(2011江苏，14B)()(8)动物的生长激素基因转入植物体后不能表达(2010江苏，18C)()提示：(1)√。
α萘乙酸为生长素类似物，可诱导愈伤组织生根。
(2)×。
在诱导离体的组织或器官形成幼苗的过程中，伴随细胞的增殖与分化等需要能量的生理过程，一定会进行ATP的合成与分解。
(3)×。
DNA分子杂交是通过碱基互补配对原则形成的。
(4)×。
高考生物二轮复习 第一部分 专题五 现代生物科技专题 第1讲 基因工程与克隆技术
第
一
专题讲座部分
部
分
专
现代生物科技专题
题
五
第1讲
基因工程与克隆技术
——————————考纲知识排查——————————
简要概括参考答案：①DNA 分子结构的统一性；所有生物 共用一套遗传密码；基因重组、酶的专一性等等
②限制酶、DNA 连接酶、运载体；限制酶和 DNA 连接酶具 有专一性；运载体应具有限制酶切点、启动子和标记基因。
⑩胚性细胞的制备→早期胚胎培养→胚胎Байду номын сангаас植→胚胎在受 体雌性动物中发育→新个体；克隆器官用于移植、野生动物保护 等
⑪获取(效应)B 淋巴细胞→B 细胞与骨髓瘤细胞融合→第一 次筛选获得杂交瘤细胞→第二次筛选获得能产生单一抗体的杂 交瘤细胞→杂交瘤细胞的体内或体外培养
⑫特异性强、灵敏度高；a.作为诊断试剂；b.用于治疗疾病 和运载药物，如“生物导弹”
生长素向基部运输，促进下端生根。(4)检验转基因棉的抗虫性状， 常用方法是投放棉铃虫看棉铃虫是否死亡，种植转基因抗虫棉能 减少农药的使用，以减轻环境污染。
[答案] (1)限制性核酸内切酶(或限制酶) 选择 (2)T－DNA 筛选获得 T－DNA 片段的植物(棉花)细胞 (3)细胞分裂素浓度 芽顶端合成的生长素向基部运输，促进 根的分化 (4)投放棉铃虫 农药
[答案] C
2．(2015·四川卷)将苏云金杆菌 Bt 蛋白的基因导入棉花细胞 中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示(注：农杆菌 中 Ti 质粒上只有 T—DNA 片段能转移到植物细胞中)。
(1)过程①需用同种________酶对含 Bt 基因的 DNA 和 Ti 质 粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来， 应使用________________培养基。
一
专题讲座部分
部
分
专
现代生物科技专题
题
五
第1讲
基因工程与克隆技术
——————————考纲知识排查——————————
简要概括参考答案：①DNA 分子结构的统一性；所有生物 共用一套遗传密码；基因重组、酶的专一性等等
②限制酶、DNA 连接酶、运载体；限制酶和 DNA 连接酶具 有专一性；运载体应具有限制酶切点、启动子和标记基因。
⑩胚性细胞的制备→早期胚胎培养→胚胎Байду номын сангаас植→胚胎在受 体雌性动物中发育→新个体；克隆器官用于移植、野生动物保护 等
⑪获取(效应)B 淋巴细胞→B 细胞与骨髓瘤细胞融合→第一 次筛选获得杂交瘤细胞→第二次筛选获得能产生单一抗体的杂 交瘤细胞→杂交瘤细胞的体内或体外培养
⑫特异性强、灵敏度高；a.作为诊断试剂；b.用于治疗疾病 和运载药物，如“生物导弹”
生长素向基部运输，促进下端生根。(4)检验转基因棉的抗虫性状， 常用方法是投放棉铃虫看棉铃虫是否死亡，种植转基因抗虫棉能 减少农药的使用，以减轻环境污染。
[答案] (1)限制性核酸内切酶(或限制酶) 选择 (2)T－DNA 筛选获得 T－DNA 片段的植物(棉花)细胞 (3)细胞分裂素浓度 芽顶端合成的生长素向基部运输，促进 根的分化 (4)投放棉铃虫 农药
[答案] C
2．(2015·四川卷)将苏云金杆菌 Bt 蛋白的基因导入棉花细胞 中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示(注：农杆菌 中 Ti 质粒上只有 T—DNA 片段能转移到植物细胞中)。
(1)过程①需用同种________酶对含 Bt 基因的 DNA 和 Ti 质 粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来， 应使用________________培养基。
高考生物 一轮复习 第十章 现代生物科技专题 第1讲 基因工程
答案：(1)(×) (2)(×) (3)(×) (4)(×) (5)(×) (6)(√)
题组二 基因工程操作工具的分析 1．若要利用某目的基因(见图甲)和 P1 噬菌体载体(见图乙)构建重组 DNA(见图丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是 BglⅡ(A↓GATCT)、 EcoRⅠ(G↓AATTC)和 Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( )
(4)DNA 连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。( ) (5)E·coli DNA 连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。 () (6)质粒是小型环状 DNA 分子，是基因工程常用的载体。( )
答案：(1)(×) (2)(×) (3)(×) (4)(×) (5)(×) (6)(√)
(4)DNA 连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。( ) (5)E·coli DNA 连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。 () (6)质粒是小型环状 DNA 分子，是基因工程常用的载体。( )
(2)基因表达载体的构建。 提示：①基因表达载体的组成及作用：
(2)基因表达载体的构建。 提示：①基因表达载体的组成及作用：
②基因表达载体的构建过程：
(3)将目的基因导入受体细胞。 提示：①转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内
维持稳定和表达的过程。
②将目的基因导入受体细胞：
生物种类 植物
③ 入受体细胞 —方法b.动物：显微注射法
c.微生物：感受态细胞法
2．基因工程的应用 (1)植物基因工程：主要用于提高农作物的 抗逆能力 ，以 及改良农作物的品质 和利用植物 生产药物 等方面。 (2)动物基因工程：主要应用于动物品种改良、建立
生物反应器 、 器官移植 等方面。 (3)基因工程药物：来源于转基因的 工程菌 。 (4)基因治疗：把 正常基因 导入病人体内，使该基因的
题组二 基因工程操作工具的分析 1．若要利用某目的基因(见图甲)和 P1 噬菌体载体(见图乙)构建重组 DNA(见图丙)，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是 BglⅡ(A↓GATCT)、 EcoRⅠ(G↓AATTC)和 Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( )
(4)DNA 连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。( ) (5)E·coli DNA 连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。 () (6)质粒是小型环状 DNA 分子，是基因工程常用的载体。( )
答案：(1)(×) (2)(×) (3)(×) (4)(×) (5)(×) (6)(√)
(4)DNA 连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。( ) (5)E·coli DNA 连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。 () (6)质粒是小型环状 DNA 分子，是基因工程常用的载体。( )
(2)基因表达载体的构建。 提示：①基因表达载体的组成及作用：
(2)基因表达载体的构建。 提示：①基因表达载体的组成及作用：
②基因表达载体的构建过程：
(3)将目的基因导入受体细胞。 提示：①转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内
维持稳定和表达的过程。
②将目的基因导入受体细胞：
生物种类 植物
③ 入受体细胞 —方法b.动物：显微注射法
c.微生物：感受态细胞法
2．基因工程的应用 (1)植物基因工程：主要用于提高农作物的 抗逆能力 ，以 及改良农作物的品质 和利用植物 生产药物 等方面。 (2)动物基因工程：主要应用于动物品种改良、建立
生物反应器 、 器官移植 等方面。 (3)基因工程药物：来源于转基因的 工程菌 。 (4)基因治疗：把 正常基因 导入病人体内，使该基因的
【高中生物】2023届高三生物二轮复习课件基因工程微专题
的诞生和发展的意义 为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件
。
• ⑷1985年，穆里斯等人发明了PCR,对于基因工程的诞生和发展的意
义 为获取目的基因提供了有效手段。
有关核酸的方向性问题：
①核苷酸：
5
1
4
3
2
1’碳连碱基
2’碳（脱氧核糖连无氧；核糖有氧）
3’碳连羟基（-OH）
5’碳连磷酸
②一条脱氧核苷酸链（DNA单链）:
第四轮循环即DNA复制4次，共形成24＝16个DNA分子，其中含有最初模板链的2个
DNA分子含有引物A或引物B，其余14个DNA分子均含有引物A和引物B，所以第四
轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为14/16＝7/8
第四轮循环产物中含
有引物A的DNA片段
所占的比例为？
15/16
离出目的基因。 第三个循环，当以
第二个循环得到的新片段为模板时，
因为这个片段的长度就是需要扩増的
长度，所以当第三个循环完成时，这
个片段是需要的长度，且是双链DNA，
这就得到了需要的目的基因了。所以
至少要3个循环才能分离出目的基因。
PCR反应相关计算:
4．利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。
氨酸-甘氨酸），该发光基团可利用定点突变技术使第66位酪氨酸换成组氨酸，即
可发出更明亮的蓝光，成为蓝色荧光蛋白（图4）。
定点突变第一步得把突变位点设计在引物上，据图中信息人工合成短 DNA 引物
应包含的序列是 AGAGTGCTC 。
定点诱变技术是近年来生物工程研究中发展迅速的一个领域。经典的大引物PCR定
扩增，得到融合基因。 图中引物2或引物3设计的要求是
。
• ⑷1985年，穆里斯等人发明了PCR,对于基因工程的诞生和发展的意
义 为获取目的基因提供了有效手段。
有关核酸的方向性问题：
①核苷酸：
5
1
4
3
2
1’碳连碱基
2’碳（脱氧核糖连无氧；核糖有氧）
3’碳连羟基（-OH）
5’碳连磷酸
②一条脱氧核苷酸链（DNA单链）:
第四轮循环即DNA复制4次，共形成24＝16个DNA分子，其中含有最初模板链的2个
DNA分子含有引物A或引物B，其余14个DNA分子均含有引物A和引物B，所以第四
轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为14/16＝7/8
第四轮循环产物中含
有引物A的DNA片段
所占的比例为？
15/16
离出目的基因。 第三个循环，当以
第二个循环得到的新片段为模板时，
因为这个片段的长度就是需要扩増的
长度，所以当第三个循环完成时，这
个片段是需要的长度，且是双链DNA，
这就得到了需要的目的基因了。所以
至少要3个循环才能分离出目的基因。
PCR反应相关计算:
4．利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。
氨酸-甘氨酸），该发光基团可利用定点突变技术使第66位酪氨酸换成组氨酸，即
可发出更明亮的蓝光，成为蓝色荧光蛋白（图4）。
定点突变第一步得把突变位点设计在引物上，据图中信息人工合成短 DNA 引物
应包含的序列是 AGAGTGCTC 。
定点诱变技术是近年来生物工程研究中发展迅速的一个领域。经典的大引物PCR定
扩增，得到融合基因。 图中引物2或引物3设计的要求是
高考生物大二轮专题复习 选修3.1 现代生物科技专题名师精编课件
(2)以 P 基因序列为基础，获得 P1 基因的途径有修饰________基因或合成 ________基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包 括 ________________ 的 复 制 ； 以 及 遗 传 信 息 在 不 同 分 子 之 间 的 流 动 ， 即 ： __________________________________________________。
答案： (1)氨基酸序列(或结构) (2)P P1 DNA 和 RNA(或遗传物质) DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白质(或转录、逆转录、翻译) (3)设计蛋白 质的结构 推测氨基酸序列 功能
考点二 细胞工程
1．动物细胞培养与植物组织培养
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞全能性
细胞增殖
(1)杂交瘤细胞的特点：_既__能__大__量__繁__殖__，__又__能___产__生__单__一__抗__体__。
转录检测：分子杂交技术检测_m__R_N__A__ ②表达检测翻译检测：用相应的抗体进行__抗__原__—__抗__体__杂__交___ ③个体生物学水平鉴定：如对转基因作物进行_抗__虫__或__抗__病___等接种实验。
易错理清 1．DNA 连接酶≠DNA 聚合酶 DNA 连接酶连接两个 DNA 片段，而 DNA 聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添 加到脱氧核苷酸链上。 2．限制酶≠DNA 酶≠解旋酶 限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开； DNA 酶是将 DNA 水解为组成单位；解旋酶是将 DNA 的两条链间的氢键打开形 成两条单链。
(1) 质 粒 载 体 作 为 基 因 工 程 的 工 具 ， 应 具 备 的 基 本 条 件 有 __________________________(答出两点即可)，而作为基因表达载体，除满足上 述基本条件外；还需具有启动子和终止子。