植物组培中的炼苗名词解释
植物组织培养

1.植物组织培养(离体培养):是指在无菌条件下,将植物体的任何一部分,培养在人工配制的培养基上,并给予合适的培养条件,使之发育形成完整植物体的过程。
2、植物组织培养的类型(1)根据培养基的类型分为:固体培养液体培养半液半固体培养(2)根据培养材料(外植体类型)分为:植株培养器官培养组织培养原生质体培养胚胎培养细胞培养(3)按培养过程分:初代培养继代培养生根培养3、植物组织培养的一般工作流程1.准备阶段:(1)查阅资料,制定培养方案;(2)清洗组培用器皿、工具;(3)配制所需试剂和培养基;(4)试剂、培养基及器皿、工具的灭菌。
2.外植体的选择与消毒;3.初代培养;4.继代培养;5.生根培养;6.炼苗移栽4、植物细胞的全能性概念:指植物体的每个活细胞都携带有该物种的全套遗传信息,在适宜条件下,离体细胞都具有发育为一个完整植株的潜在能力。
注意:(1)活细胞(2)离体细胞(3)细胞全能性表达的难易程度取决于细胞的分化程度5、细胞全能性的强弱表现:(1)植物细胞全能性根据细胞的性质不同由强到弱:营养生长中心>形成层>薄壁细胞>厚壁细胞(木质化细胞)>特化细胞(导管等)(2)植物细胞全能性根据所处的组织不同由强到弱:顶端分生组织>侧生分生组织>居间分生组织>薄壁组织>厚角组织>输导组织>厚壁组织6、植物组织培养中全能性表达的条件:1.无菌条件;2.离体条件;3.一定的营养物质;4.植物生长调节物质;5.适宜的外界条件。
7、胚性细胞的特点:未分化状态;细胞具有旺盛分裂能力;具有两极性8、脱分化:指在一定条件下,已分化成熟的细胞、组织或器官恢复到未分化的分生状态,并进行细胞分裂形成未分化的细胞团,如愈伤组织的形成过程。
9、愈伤组织形成的三个时期:(1)诱导期又称启动期(最难)。
(2)分裂期(3)分化期10、优良愈伤组织的特征:(1)具有旺盛的增殖能力;(2)容易散碎;(3)具有高度的胚性或再分化能力,便于植株再生;(4)经过长期的继代保存而不丧失胚性。
试管苗的炼苗

炼苗1、试管苗的生长环境试管苗和一般的田间幼苗不同,试管苗长期生长在培养容器中,与外界环境隔离,形成了一个恒温、高温、高湿、弱光、无菌的独特生态环境。
恒温:在试管苗整个生长过程中,常采用恒温培养,即使某一阶段稍有变动,温差也是极小的。
而外界环境中的温度由太阳辐射的日辐射量决定,处于不断变化之中,温差较大。
高湿:组织培养中培养容器内的水分移动有两条途径,一是试管苗吸收的水分,从叶面气孔蒸腾;二是培养基向外蒸发,而后又凝结进入培养基的水分。
循环的结果会使培养容器内相对湿度接近于100%,远远大于培养容器外的空气湿度。
弱光:组织培养中采取人工补光,其光照强度远不及太阳光,组培苗生长较弱,移栽后经受不了太阳光的直接照射。
无菌:试管苗所在环境是无菌的。
不仅培养基无菌,而且试管苗也无菌。
在移栽过程中试管苗要经历由无菌向有菌的转换。
2、试管苗的特点试管苗的根系不发达:有些不容易生根的植物有时只能形成1~2条根,而且经常没有侧根和根毛,例如:牡丹、杏、梨、苹果等往往不能形成完整的根系。
有些愈伤组织上产生的根没有和维管束相连接,这种根基本上没有吸收和运输水分和无机盐的能力。
试管苗叶片幼嫩,叶片表面角质层或蜡质层不发达,因此水分蒸发快,很容易失水萎蔫。
一般的叶片正面有角质层或蜡质层,背面多有茸毛,叶背面气孔有很多茸毛可以保护气孔,减少水分蒸发。
而试管苗表皮基本没有茸毛,所以水分蒸发量大。
试管苗的细胞排列疏松,细胞间隙大,容易失水。
试管苗的机械组织发育较差,茎杆嫩而不坚挺,在缺水时易萎蔫和倒伏。
3、试管苗的炼苗因为试管苗在培养瓶中与温室的条件差别很大,主要是培养瓶中的温度稳定、湿度高、光照较弱等。
为了使试管苗适应移栽后的环境并进行自养,必须要有一个逐步锻炼和适应的过程,这个过程叫驯化或炼苗。
炼苗的目的在于提高试管苗对外界环境条件的适应性、提高其光合作用的能力、促使试管苗健壮、最终达到提高试管苗移栽成活率的目的。
试管苗从试管内移到试管外,由异养变为自养,由无菌变为有菌,由恒温、高湿、弱光向自然变温、低湿、强光过渡,变化十分剧烈。
植物组织培养试题库

一、填空题1、植物组织培养成功与否,一方面取决于培养材料本身的性质;另一方面取决于培养基的种类和成分;2.一个已停止分裂的成熟细胞转变为____分生______状态,并形成___细胞团_______的现象称为"脱分化";3植物组织培养技术的三大难题分别为褐变、污染和玻璃化 ;4具有防止褐变作用的维生素是_____维生素C____;5病毒在植物体内的运转方式有短距离运转和长距离运转两种,前者经过胞间连丝向邻近细胞中扩散,速度很慢;后者通过寄主植物韧皮部的疏导组织随着营养输送进行转移,速度很快;6、6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进_____根_____的生长,这时___分化_____占主导地位;比值高促进__苗___的生长,这时__分裂__占主导地位;悬浮培养的材料必须达到悬浮培养物质分散性多、细胞核较小均一性好和生长迅速等三个要求;7、连续培养是指在培养过程中,以不断抽取用过的培养基并注入新鲜的培养基 ,使培养不断得到养分补充,保持其稳定状态的培养;8.培养基的母液一般是配成大量元素,微量元素,维生素和_氨基酸_4类存放备用;MS培养基中组成大量元素的盐类分别是_硝酸钾_和_硝酸铵_;9.一般情况下,细胞分裂/生长素的比值高,有利于愈伤组织长_芽_,比值低有利于长_根_;10.在植物的材料灭菌中,酒精的浓度用70%~75%,处理时间一般在几秒至几十秒范围,是靠_使蛋白质凝固_杀菌的;升汞的浓度一般用1%~2%,处理的时间在5~10min范围,升汞是靠_Hg2+_杀菌的;杀菌剂中的次氯酸钠是靠_ClO-_杀菌的;11.培养植物适宜的温度大多在_25±2℃_,光照强度在_1000lx_,光照时间在_16h_;12、进行热处理植物脱毒的温度在__85℃___左右;13、配制螯合态铁盐需要的成分是__FeSO4·7H2O__和_Na2-EDTA_;14、培养基中有机态N素营养主要是硝态氮和铵态氮 ;15、原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交,其融合的方式分为_自发融合_和_诱导融合__两类;16、从再生植株倍性来看,小孢子培养通常产生单倍体植株,胚培养通常产生二倍体植株, 胚乳培养通常产生三倍体植株;17.进行植物组织培养最基本的前提条件是配置培养基 ;18.离体叶片在诱导愈伤组织的培养基上培养,一般从叶缘或叶脉处容易发生愈伤组织;19.某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定,对其灭菌时不能进行高压蒸汽灭菌,而要进行过滤方法除菌;20配制培养基时,一般先配制母液,其目的在于__使用方便__和__用量准确_;21分生区域内无维管束,病毒只能通过___胞间连丝__传递;22在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成__正比__,而与脱毒效果成_反比_;二、单项选择题1、 C 可作为植物外植体的表面消毒剂是 ;A. 漂白粉和水B. 次氯酸钠溶液和聚乙二醇C. 氯化汞和新洁尔灭D.酒精和氯化钠2、 B大多数植物组织培养最适温度一般为℃;±1℃±2℃±2℃±2℃3、 A 在适宜的培养条件下,还可使愈伤组织长期传代生存下去,这种培养称为 ;A. 继代培养B. 再分化培养C.胚状体培养D. 驯化4、 B 大多数植物组织培养培养基最适pH为 ;B. C. D. 、 A 外植体褐变的原因是 ;A.外植体中的多酚氧化酶被激活,使细胞的代谢发生变化;B. 外植体中的琥珀酸脱氢酶被激活,使细胞的代谢发生变化;C. 外植体中的磷酸化酶被激活,使细胞的代谢发生变化;D. 外植体中的三磷酸腺苷酶被激活,使细胞的代谢发生变化;6.植物组培初代接种易污染的可能原因_BC_;A材料过嫩B材料过老C接种材料过大 D每瓶接种数量太少7.影响培养基凝固程度因素有__AD_______;A琼脂的质量好坏;B 高压灭菌的时间;C 高压灭菌的温度;D 培养基的PH8.愈伤组织不分化、生长过旺、疏松,其原因有_C_A糖的浓度过高 B培养基的渗透压过低C生长素和分裂素过高 D生长素和分裂素过低9.有一种植物经初代培养得到4株无菌苗,以后按每36天继代增殖一次,每次增殖倍数为3倍,一年后繁殖苗有_CA 3×410株B 4 × 312株C 4× 310株 D3× 412株10. 下列不属于生长素类的植物激素是___AC______;A BA;B NAA;C ZT;D -D611. 植物组织培养可用于:_____ABCD________;A 快速繁殖;B 脱除病毒;C 提高品质;D 育种;E 减少品种变异12、诱导试管苗分化丛芽,培养基的调整应______B_______;A加大生长素的浓度B加大分裂素的浓度 C加活性炭 D 降低盐的浓度;13. 下列不属于MS中微量元素的盐是____ABD_____;A NH4NO3;B KNO3;C ;D14. 对生根培养不起作用的激素是:__A__;A GA;B IAA;C NAA;D IBA15、 D 在下列选项中,不需要采用植物组织培养技术的是 d;A、利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株B、利用细胞工程技术培养“番茄一马铃薯”杂种植株C、利用花药离体培养得到单倍体植株D、利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,得到染色体数目加倍的植株16、 C 植物组织培养形成的愈伤组织进行培养, 又可以分化形成根、芽等器官,这一过程称为 ;A、脱分化B、去分化C、再分化D、脱分化或去分化17、 B 下列哪种不是原生质体分离所用的酶___B____;A、纤维素酶B、淀粉酶C、果胶酶D、半纤维素酶18、 A 在花药培养中下列哪种不是花粉的发育过程__A______;A、营养细胞发育途径B、生殖细胞发育途径C、胚状体发育途径D、花粉均等分裂途径19、 D 下列哪种在MS培养基中不起促进生长作用___D______;A、氨基酸B、肌醇C、维生素D、琼脂20、 B 下列技术培育出的新个体中,遗传物质只来源于一个亲本的是 ;①细胞组织培养②细胞融合③扦插④诱导产生多倍体⑤杂交育种⑥转基因工程A、①④B、①③C、②④D、⑤⑥21、 a 下列那种不是无性繁殖的器官_________;A、种子B、枝条C、块茎D、块根22、 b 植物离体保存的主要步骤是 ;①离体培养物的保存②离体培养与祛除病原物③种质离体收集④遗传稳定性鉴定A、①②③④B、③②①④C、②④①③D、①②④③23、 c 原生质体纯化步骤大致有如下几步 ;①将收集到的滤液离心,转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准,一般以500r/min离心15min;用吸管谨慎地吸去上清液;②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中除不含酶外,其他成分和酶液相同,再次离心,去上清液,如此重复三次;③将原生质体混合液经筛孔大小为40~100um的滤网过滤,以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质,收集滤液;④用培养基清洗一次,最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养;一般原生质体的培养密度为104~106/ml;A、①②③④B、③②①④C、③①②④D、②③①④24、 c 下列有关细胞全能性的含义,正确的是 ;A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能D、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程25、d 下列不属于活性炭在组织培养中的作用是_________;A、吸附有毒物质B、减少褐变,防止玻璃化C、创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长D、增加培养基中的养分三、判断题1、√胚状体的维管组织与母体结构和外植体的维管组织一般没有联系;2、×培养基当中生长素与细胞分裂素的比例高时,仅形成愈伤组织;3、×对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞或小细胞团进行培养,形成单细胞无性系或再生植株的技术称为植物组织培养技术;4、√植物组织与细胞培养方法生产出药品,农药,香料,色素及食品添加剂;5、×超低温保存是指在-100℃温下使细胞代谢和生长处于基本停止的状态,在适宜的条件下可迅速繁殖,生出新的植株,并保持原来的遗传特性;6、×FAD法可显示细胞内脱氢酶的活性,脱氢酶使FAD还原生成一种红色的物质,作为检验活细胞的方法 ;7、×蔗糖可作为渗透性冰冻保护剂;8、×一方亲本的细胞核和细胞质分另一方亲本的少量核物质和全部细胞质融合9、√有些植物对病毒极为敏感,一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特有的病斑,把这种植物称为病毒敏感植物或指示植物;10 √花药和花粉培养可获得单倍体植株;叫细胞质杂交 ;四、名词解释1、脱分化有高度分化能力的植物组织或器官,产生愈伤组织的过程;2、愈伤组织植物各器官的外植体在离体的条件下,经细胞脱分化等一系列过程改变了它们原有的特性而形成的一种能迅速增殖的不特定结构和功能的细胞团,称为愈伤组织;3、人工种子是指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜的条件下发芽出苗的颗粒体;4、胚状体在离体或活体条件下,通过体细胞经原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷胚期和子叶期等阶段形成的胚叫体细胞胚状体;5、植物快速繁殖利用离体培养技术,将来自优良植株的器官、组织和细胞进行离体培养,在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法6、看护培养把单个细胞置于一块活跃生长的愈伤组织也称看护愈伤组织,nursecalli上培养,在愈伤组织和培养的细胞之间用一片滤纸相隔;这培养的单细胞长出微小的细胞团之后,再移至琼脂培养基上;7、植物种质保存利用天然或人工创造的适宜环境,使个体中所含有的遗传物质保持遗传完整性,有高的活力,能通过繁殖将其遗传特性传递下去;8、连续培养是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种方式;连续培养过程中,不断注入新鲜培养基,排掉等体积的用过的培养基,培养液中的营养物质得到不断补充;9、驯化或炼苗:在移植之前必须对试管苗进行提高其适应能力的锻炼,使植株生长粗壮,增强小苗体质以提高移苗成活率;同时进一步将瓶内植物打开进行炼苗;使试管苗慢慢适应外界环境;这个过程叫做驯化或炼苗;有瓶炼和盘炼,移栽方式有容器移栽和大田移栽;五、简答题一、某培养基的配方是MS+BA mg/L+ mg/L+IBA mg/L+ %蔗糖+%琼脂粉;MS母液的浓度分别是:大量元素50倍,微量元素100倍,铁盐20倍,有机物100倍;BA母液浓度 mg/ml ,NAA母液浓度ml,IBA母液浓度ml;要配制800ml该培养基,需要吸取各种母液各多少ml分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克要求写出计算步骤BA=1=NAA==4mlIBA=1/=4ml蔗糖=800%=20g琼脂粉=800%=Ms 绿色书23页表 二、如何减轻试管苗玻璃化现象如何防止外植体的真菌污染1. 第四章21页1利用固体培养方法,增加琼脂浓度,降低培养基中的渗透势,造成细胞吸水阻遏;或提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂,减少培养基中植物材料可获得的水分,这也可以抑制玻璃化的发生;2适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素的浓度;或者,适当增加培养基中Ca 、Mg 、Mn 、K 、P 、Fe 、Cu 、Zn 元素含量,降低N 和CL 元素比例,特别是降低胺态氮的浓度,提高硝态氮量;3增加自然光照; 因为自然光中的紫外线能促进试管苗成熟;4改善培养器皿的气体交换状态封口膜5在培养基中添加其他物质;如添加马铃薯汁可降低油菜的玻璃苗的产生频率;2.第三章11页在接种前要求无菌室内做到用空气循环过滤装置使空气过滤灭菌或通过紫外线照射灭菌外,再利用超净工作台接种前,应开机15min 以达到空气的充分过滤灭菌;而且接种时严格操作,如在接种前去掉橡皮筋,打开棉塞时动作要轻及去掉瓶塞后瓶子应拿成斜角,最好瓶口放在酒精火焰的前方等等;三、简答出一般茎段是怎样选材消毒和接种的选材:较幼嫩的材料,器官的生理状态和发肓年龄,外植体的大小为-第三章3页消毒:自来水较长时间冲洗+70%酒精浸泡植物种+无菌水冲洗2~3次+2%~10%NaClO%HgCl212min+无菌水冲洗3次;第三章5页接种:①左手拿三角瓶或果酱瓶,用右手轻轻取下封口膜或盖子②将三角瓶或果酱瓶的口靠近酒精灯火焰,瓶口稍微倾斜,这样瓶口外部在火焰上旋转灼烧数秒钟,后用镊子将外植体送入瓶中;第四章4页六、论述题为什么茎尖培养可获得无特定病毒植株怎样获得无特定病毒的试管苗获得的无病毒苗用一种方法鉴定其真的无特定病毒的植株1.感染病毒植株的体内病毒的分布并不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染深度越低,生长点则几乎不含或含病毒很少;2.1.了解植物携带何种病毒,病毒在体内的分布位置2.母体植株的选择和预处理3.茎尖的剥离4.脱毒效果检测3.取培养植株的叶片置于研钵中,加入少量的水和等量的L磷酸缓冲液pH,磨成匀奖,将其涂抹在指示植株叶片上,在指示植物的叶片撒上金刚砂,通过轻轻摩擦使汁浸入叶片表皮细胞而又不损伤叶片;5分钟后用清水清洗叶面;将指示植株放于防蚜虫网罩的温室内;然后视其病斑的有无,来判断是否脱除了病毒;请阐述马铃薯脱毒和快繁的程序;为什么试管苗在经过热处理和茎尖培养等方法脱毒后,还需要进行病毒的鉴定选择优良母株幼苗,茎尖的2~3cm小段,冲洗1h左右表面消毒,表面消毒剂、无菌水,在双筒解剖镜下剥去幼叶,露出圆滑的生长点,注射器针头或解剖针,切取带有1~2个叶原基的生长点,接种于培养基中培养;病毒在植物体内分布是不均一的,热处理并不能杀死病毒,只能钝化病毒的活性,使病毒在植物体内增殖缓慢停止,而失去侵染能力,所以还需要病毒鉴定;。
植物组织培养试题

/植物组织培养试题一、名词解释:(每小题3分,共15分)1、初代培养基2、脱分化3、液体培养4、细胞全能性5.再分化二、填空(每空1分,共40分)1、植物组织培养过程中,最常用的培养基是,培养基的pH因外植体的来源不同而异,常用和调节pH,大多数植物的pH要求调节在范围内。
2、可以通过、、、、等措施预防褐变的发生。
3、植物组织培养时,外植体可以是、、、。
4、应用微尖嫁接技术进行脱毒培养无病毒苗,主要程序为→→→→。
5、组织培养植株的再生途径有两条:一是发生,另一是发生。
6、在配制培养基时,可以在培养基中添加,利用其吸附能力,可以降低褐变的发生,但它对物质的吸附。
7、培养基的灭菌要求压力为、温度为、维持时间为。
8、组织培养中常用的生长素有吲哆乙酸(IAA),2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),吲哆丁酸(IBA),萘乙酸(NAA),它们的作用强弱顺序为> > > 。
9、茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段,即、、、、。
10、茎尖分生组织培养的目的主要是,其茎尖一般取毫米。
为了使脱毒效果更好,可以将茎尖分生组织培养与结合起来。
脱毒处理的试管苗,在用于生产之前,必须进行。
11、污染的原因从病源菌上分析主要有两大类、。
三、判断正误,并改错。
(每小题2分,共20分)1、一般将微量元素母液均配制成10倍,在配制培养基时,使用量为10ml/L。
细胞分裂素/生长素的比值较高时,有利于愈伤组织的诱导。
2、对于金边虎尾兰等遗传学上的嵌合体植物,要是组织培养繁殖的植株保持原有的园艺价值,只能通过叶培养。
3、植物生长调节物质使用不当时,材料也容易褐变,生长素有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。
4、利用茎尖分生组织进行脱毒培养时,茎尖外植体大小与脱毒效果成正比。
5、某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗。
6、无病毒植株不具有抗病毒的能力,而且在清除病毒之后,体内营养和生理状况发生改变,因而对其他病毒和病原体的侵染更为敏感,因此在种植脱毒苗的一定要隔离种植。
《植物组织培养技术》试题六答案

《植物组织培养技术》试题六答案一、名词解释(每题3分,共15分)1、植物组织培养:是指在无菌条件下,将植物的离体器官、组织、细胞以及原生质体,应用人工培养基,创造适宜的培养条件,使其长成完整小植株的过程。
2、驯化:试管苗移植前可将培养瓶移到自然光照下锻炼3~10d,让试管苗接受自然光的照射,感受自然温度的昼夜温差现象,使其壮实,然后再开瓶移植,经过较低温、湿度的处理,以适应自然温、湿度条件。
3、接种:在无菌条件下,用灼烧过的镊子将外植体放到培养基上的操作过程。
4、细胞悬浮培养:是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
5、脱毒苗:是指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
二、填空题(每空1分,共20分)1、植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。
2、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物,一般用量为6-10g/L 之间。
3、常用的化学灭菌剂有酒精、氯化汞、次氯酸钠等。
4、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式、和胚状体方式。
5、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。
前者主要是对茎尖长度不超过0.1mm,最小只有几十微米的茎尖进行培养,目的是获得无病毒植株;后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养,目的是加快繁殖速度。
6、分子生物学鉴定脱毒苗的主要方法:①双链RNA法(dsRNA)和②互补DNA(cDNA)检测法。
7、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。
8、原生质体的纯化方法有:离心沉淀法、漂浮法和界面法。
三、选择题(每题1分,共10分)1、植物组织培养实验室不包括( D )。
A、准备室B、无菌操作室C、培养室D、显微实验室2、离体叶培养中,消毒后的叶片应整理切割成( C )大小。
A、3×3mmB、4×4mmC、5×5mmD、6×6mm3、( D )是植物离体培养常用的主要糖类。
林木组织培养繁殖

林木组织培养繁殖用组织培养技术进行植物的快速无性繁殖的方法简称为试管繁殖(propagation by tissue culture),也称微体繁殖或微型繁殖。
繁殖的植株称试管苗,以此与种子苗(实生苗)、扦插苗、嫁接苗相区别。
试管繁殖具有繁殖率高、微型、无菌的特点,能在人工控温、控光的条件下生长、繁殖。
如在间20m2的恒温室内,可年产100万株试管苗,并可不受气候条件限制,一年四季进行繁殖,到适宜的时间再移植于大田。
林业的迅速发展需要大量优质苗木;良种更新换代频繁,特别是新育成品种,良种母树少,短期内要求提供大量良种苗木,按照传统繁殖方法难以达到这个要求。
而利用组培育苗法,可有效地应用于快速繁殖推广良种。
此外,采用试管培养可繁殖自然繁殖率低的植物、濒临绝种的资源植物、杂种F1代、三倍体与多倍体、自交不亲和系、雄性不育系等植物,并能在较短的时间内提供大量所需优良品种的植株,从而加速引种、育种与良种的推广进程,简化制种程序。
试管繁殖结合生长点培养法可大量繁殖去病毒植株,以达到复壮种性的目的。
近年来,林木组培繁殖技术的研究有较大的发展。
据不完全统计,现已研究成功的林木植物试管苗已达百余种,如松属、杉属、按属、杨属中的许多种,还有泡桐、银杏、枣、茶、棕桐、咖啡、椰子等,其中按树、杨树、辐射松和北美黄杉等已大面积应用于生产。
按树组培工厂化育苗在我国也已大面积推广,澳大利亚、新西兰已分别实现用按树和辐射松试管苗造林,用幼芽培养每年可繁殖上百万株。
通过组培建立木本植物无性系时采用的材料有茎尖、茎段、形成层、叶、根、胚、下胚轴、上胚轴。
花芽、花药、胚珠、珠心、雌配子体、果实等。
一茎尖培养最为普遍。
取样的部位不同,诱导效果亦有所不同,在杨树、杉木等的离体培养试验中均观察到这一现象。
取样的季节也有影响,冬季取样,诱导效果较差,而以春季生长旺盛季节为佳。
林木的组织培养程序主要包括4个阶段:第一阶段:无菌材料的建立与增殖的诱导。
组培复习资料

1、植物组织培养:在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞或原生质体等进行培养,使其生长、分化并再生成完整植株的技术2、组培苗:根据植物细胞具有全能性的理论,利用外植体在无菌和适应的人工条件下培育的完整植株。
3、外植体:凡是用于离体培养的植物组织器官、组织、细胞或原生质体统称为外植体。
4、细胞全能性:植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传的物质,在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。
全能性的条件:①体细胞与完整植株分离,脱离完整植株的控制;②创造理想的适于细胞生长和分化的环境,包括营养、激素、光、温、气、湿等因子。
5、植株再生过程即为植物细胞全能性表达的过程,一般经过脱分化和再分化两个阶段。
6、脱分化: 指植物组织培养中构成离体植物器官和组织的成熟细胞或已分化的细胞转变成为分生状态的过程,即诱导成为愈伤组织的过程。
7、愈伤组织: 指在人工培养基上经诱导后外植体表面上长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
脱分化的难易程度与植物的种类、组织和细胞的状态有关。
8、再分化:指由脱分化的组织或细胞转变为各种不同的细胞类型,由无结构和特定功能的细胞团转变为有结构和特定功能的组织和器官,最终再生成完整植株的过程。
9、一般而言,诱导外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历3个时期:启动期、分裂期和分化期。
(1)启动期:又称诱导期,是指细胞准备进行分裂的时期。
启动期的长短,因植物种类、外植体的生理状态和外部因素而异。
诱导启动的因素主要有外源激素,最常用的有2,4-D、NAA、IAA和细胞分裂素等。
其中,2,4-D 在诱导细胞分裂过程中,效果最明显。
(2)分裂期:是指外植体细胞经过诱导后脱分化,不断分裂、增生子细胞的过程。
分裂期的愈伤组织的特点是:细胞分裂快,结构疏松,缺少有组织的结构,颜色浅或呈透明状。
愈伤组织常呈不规则的馒头状。
(3)分化期:是指停止分裂的细胞发生生理代谢变化而形成不同形态和功能的细胞过程。
第三章-愈伤组织诱导

第三章愈伤组织的诱导与培养第一节愈伤组织的诱导与继代培养愈伤组织(callus): 在培养基上,由外植体经脱分化和细胞分裂形成的一团无序生长的薄壁细胞。
大部分外植体细胞须经脱分化形成愈伤,才能再分化成完整植株,只有茎尖等少数细胞只恢复为分生状态但不分裂,直接再分化。
愈伤组织的诱导与分化是植物组培的基本环节。
一、愈伤组织的诱导及其形态特征1、愈伤组织的诱导1)起动期/诱导期(initiation/induction stage, Induction of growth)外植体细胞在外源激素作用下,经脱分化而恢复分裂状态,开始形成愈伤。
细胞外观无明显变化,代谢旺盛,合成加强,为分裂做准备。
持续十几小时~几天。
2)分裂期(divition stage/phase):外植体切口边缘膨大,外层细胞迅速分裂,体积变小,具分生细胞的特征,细胞数速增。
3)形成期(formation stage/Differentiation phase):外植体表层细胞分裂减缓,内部细胞开始分裂,大量细胞形成瘤状/泡状或片状结构。
若不及时继代,将分化出拟分生组织瘤状物和维管组织,又称分化期。
2. 愈伤组织的形态特征质地:松脆易碎的颗粒状;紧密坚实的结块状;水渍或浆糊状。
颜色:白色或淡黄色;淡绿色或绿色;黄色至褐色。
一般,淡黄或淡绿/绿色松脆(近圆形)或致密的颗粒状愈伤再生能力较强,白色/灰白色或黄褐色、浆糊状或紧实(香蕉形)的愈伤再生能力差。
3. 影响愈伤诱导的关键因素愈伤的形成是外植体、培养基和培养条件诸因素互作的结果。
迄今,几乎从各种外植体诱导形成愈伤。
其关键主要不在于外植体,而是培养基,尤其是激素的种类和浓度。
生长素为愈伤诱导和增殖所必需,细胞分裂素视外植体来源而异。
二、愈伤组织的继代培养继代培养(subculture):将原有培养物转移到新鲜培养基上继续培养的过程称为~。
愈伤组织在培养基上生长一段时间后,由于营养枯竭,水分散失,代谢物积累,致使其生长缓慢甚至停止,须进行继代培养。
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植物组培中的炼苗名词解释
植物组培是一种利用细胞培养技术培养植物的方法。
通过在无菌条件下,将植物的细胞、组织或器官转移到培养基中,利用培养基中的营养物质和激素,使其生长和分化,最终得到具有繁殖能力的植株。
在植物组培的过程中,有许多炼苗名词需要解释,下面就对其中的一些常用名词进行解释。
1. 原始组织
原始组织是指直接从植物体中获取的细胞、组织或器官,是植物组培的起始材料。
常见的原始组织包括种子、茎段、叶片等。
在组培过程中,从原始组织中获取的细胞和组织在培养基中可以进行继代培养,最终形成完整的植株。
2. 原代悬浮细胞培养
原代悬浮细胞培养是指将原始组织的细胞通过适当的处理,转移到培养基中形成悬浮状态的细胞群。
通过原代悬浮细胞培养可以大量繁殖细胞,为后续的组织或器官再分化提供足够的原料。
3. 培养基
培养基是植物组培中最重要的组成部分,是提供植物生长和分化所需的营养物质、激素等的培养介质。
通常包含无机盐、有机物、糖类、维生素、氨基酸等。
培养基的种类有很多,根据不同植物的需求可以进行调配,如MS培养基、B5培养基等。
4. 培养条件
培养条件包括温度、光照、湿度和通气等环境因素。
这些条件对于植物细胞的生长和分化至关重要。
一般来说,适宜的温度范围为20-25摄氏度,光照强度应该适中,湿度要保持在适宜的范围,通气要充分,以保证培养物的正常生长。
5. 愈伤组织
愈伤组织指的是在植物组织培养中,通过适当的处理使植物组织具有再生和分
化的能力。
常见的愈伤组织包括愈伤组织、愈伤根、胚性愈伤组织等。
愈伤组织的形成有利于植物体的再生和繁殖。
6. 转基因植物
转基因植物是指通过基因工程技术将外源基因导入到植物细胞或组织中,使其
具有新的性状或功能的植物。
在植物组培中,转基因技术被广泛应用于物种改良和功能基因的研究。
7. 无菌技术
无菌技术是指在组培操作中保持培养物无菌状态的技术。
由于细菌、真菌和病
毒等的污染会对培养物的生长和分化产生不良影响,因此必须采取相应的无菌措施,如灭菌操作、无菌操作、瓶内压力平衡等。
植物组培是一项复杂的技术,其中涉及的炼苗名词众多。
本文对一些常用名词
进行了解释,但仅仅是植物组培领域的冰山一角。
通过深入学习和实践,我们可以更好地理解和掌握植物组培技术,为植物繁殖和物种改良做出更大的贡献。