蛋白粉
蛋白粉百科

二、蛋白粉的主要作用
1.预防疾病
心脏病在西方发达国家中,是导致死亡的第一杀手。血浆胆固醇含量高是导 致心脏病的主要原因。饮食中动物脂肪可以提高血浆胆固醇含量,是导致 动脉硬化、诱发心脏病的重要因素。饱和脂肪酸、胆固醇、血胆固醇过多 与心脏病有着直接联系,减少血浆胆固醇,也就减少了心脏病的发病危险。
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制作团队: 深挖健身网
目录
一、什么是蛋白粉? 二、蛋白粉的主要作用 三、食用蛋白粉需注意的问题 四、蛋白粉选择原则 五、慎用人群
Байду номын сангаас
一、什么是蛋白粉?
所谓蛋白粉,一般是采用提纯 的大豆蛋白[1] 、酪蛋白、乳清 蛋白(缺乏异亮氨酸)、豌豆 蛋白或上述几种蛋白的组合, (如大豆蛋白、乳清蛋白和豌 豆蛋白组成的复合蛋白,)构 成的粉剂,其用途是为缺乏蛋 白质的人补充蛋白质。对于健 康人而言,只要坚持正常饮食, 蛋白质缺乏这种情况一般不会 发生。
2.减轻肾脏负担
肾病是一种常见的长期糖尿病并 发症,20%多的糖尿病患者肾功能受损。摄 入动物蛋白,将增加肾脏负担,从而导致病情的加重。大豆蛋白质通过降 低血浆胆固醇含量,起到防止和减轻动物蛋白 对肾脏的损害。通过对肾病 患者的饮食治疗观察,用大豆蛋白质替代动物蛋白效果最好,肾病患者也 乐于接受含有大豆蛋白的食品。
三、食用蛋白粉需注意的问题
按推荐摄入量服用 不要空腹服用 吃温或冷,不吃热或烫 加调味品要控制 三岁以下的孩子不宜吃 不要与酸性饮料一起吃 特殊病人食用前应征求医生的意见
四、蛋白粉选购原则
确定健身目标。健身目标在选择蛋白粉时扮演着重要角色。 质量和价格。俗语讲“一分钱一分货”,这同样适用于蛋 白粉。 阅读成分列表。购买蛋白粉时了解成分很重要。 口味很重要。市场上的蛋白粉有不同口味,除了健身目标, 价格和成分等因素以外,口味也是选择最佳蛋白粉的一个 重要方面。
蛋白粉讲解

蛋白粉讲解
摘要:
1.蛋白粉的定义与作用
2.蛋白粉的分类与特点
3.蛋白粉的使用方法和注意事项
4.蛋白粉的品牌推荐与购买建议
正文:
蛋白粉是一种常见的营养补充剂,主要成分是蛋白质,具有提供优质蛋白质、促进肌肉生长和修复等作用。
它适合于许多人群,如健身爱好者、运动员和素食者等。
蛋白粉主要分为动物性蛋白粉和植物性蛋白粉两大类。
动物性蛋白粉来源于动物肌肉,如牛肉、鸡肉和乳清等,其蛋白质含量高,生物价值也较高,但可能引发过敏。
植物性蛋白粉来源于大豆、黄豆、绿豆等植物,其蛋白质含量较低,但不含胆固醇,适合于素食者和对动物性蛋白过敏的人群。
使用蛋白粉时,应根据个人需求和饮食习惯来选择合适的类型和品牌。
一般来说,每次使用20-30 克蛋白粉,与牛奶、豆浆或果汁等混合饮用,可在餐前或运动后使用。
同时,应注意避免过量摄入,以免增加肾脏负担。
市面上的蛋白粉品牌繁多,消费者在购买时应注意比较产品成分、价格和口碑等方面的信息。
一些知名品牌如美瑞克斯、康比特、汤臣倍健等,产品质量较好,消费者可根据自身需求和预算进行选择。
总之,蛋白粉作为一种方便的营养补充剂,在适当使用的情况下,对身体
健康具有一定的益处。
蛋白粉的种类和功能主治

蛋白粉的种类和功能主治一、蛋白粉的种类蛋白粉是一种高蛋白、低脂肪的食品补充剂,被广泛应用于健身和运动领域。
根据其来源和制备方法的不同,蛋白粉可以分为以下几种主要类型:1.乳清蛋白粉:乳清蛋白粉是从牛奶中提取的蛋白质,含有丰富的支链氨基酸和必需氨基酸。
它的消化速度较快,适合在训练后迅速补充蛋白质。
2.大豆蛋白粉:大豆蛋白粉是由大豆加工而成的蛋白质制品。
它不含乳糖和胆固醇,适合乳糖不耐受和素食者食用。
3.麦芽蛋白粉:麦芽蛋白粉通常由大麦芽发酵制成,含有丰富的氨基酸、维生素和矿物质。
它有助于肌肉修复和恢复,提高训练能力。
二、蛋白粉的功能主治蛋白粉在健身和运动领域的应用越来越广泛,其功能主治主要包括以下几个方面:1.促进肌肉生长:蛋白粉是肌肉生长的重要营养物质,可以提供大量的氨基酸,促进新陈代谢和肌肉合成。
2.促进肌肉修复:剧烈运动后,肌肉会受到一定程度的损伤,蛋白粉的摄入可以加速肌肉的修复和恢复。
3.提供能量支持:蛋白粉提供丰富的能量,可以补充运动过程中消耗的能量,延缓肌肉疲劳。
4.增强免疫功能:蛋白粉中的氨基酸对免疫系统的功能有着重要的影响,可以增强身体的抵抗力。
5.控制食欲:蛋白粉可以提供饱腹感,有助于控制食欲,减少摄入的卡路里。
6.促进骨骼健康:蛋白粉中富含钙和维生素D等营养物质,有助于骨骼的发育和保持健康。
7.辅助减肥:蛋白粉可以增加代谢率,促进脂肪燃烧,对减肥起到一定的辅助作用。
8.增强精力和注意力:蛋白粉中的氨基酸可以改善大脑的神经传递,增强精力和注意力。
需要注意的是,蛋白粉并不是万能的,其对身体的影响因人而异,对于某些人群来说可能存在一定的不适应性和副作用。
因此,在选择和使用蛋白粉时,应根据个人的身体状况和需求来进行合理的选择。
总之,蛋白粉的种类和功能主治十分丰富多样。
了解不同种类的蛋白粉以及其功能主治对于健身和运动爱好者来说非常重要,可以帮助选择最适合自己需求的产品,并最大化地发挥蛋白粉的功效。
蛋白粉的功效与作用及食用方法

蛋白粉的功效与作用及食用方法蛋白粉是一种营养补充品,它含有丰富的蛋白质,可以帮助人体进行肌肉修复和生长。
蛋白粉的功效与作用广泛,不仅在运动员和健身爱好者中受欢迎,也逐渐成为普通人日常饮食中的一部分。
本文将详细介绍蛋白粉的功效与作用,以及正确的食用方法。
首先,蛋白粉的主要功效之一是增强肌肉修复能力。
在进行高强度运动或者健身训练后,肌肉会受到一定程度的损伤,而蛋白粉中的蛋白质可以帮助肌肉迅速修复,加速康复过程,从而减少运动后的肌肉疲劳和酸痛感。
其次,蛋白粉还可以帮助增加肌肉量。
蛋白质是构成肌肉的重要营养物质,而蛋白粉中的蛋白质含量较高,长期适量摄入可以帮助肌肉生长,提高肌肉质量,使身体更加强壮。
此外,蛋白粉还有助于控制体重。
蛋白质可以提高饱腹感,减少对高热量食物的摄入,有助于控制饮食,减少体脂积累,从而帮助减肥或者维持健康体重。
除了上述功效外,蛋白粉还可以提高免疫力,促进骨骼健康,改善皮肤质量等。
可以说,蛋白粉在促进健康的方面有着多方面的益处。
那么,如何正确食用蛋白粉呢?首先,选择适合自己的蛋白粉产品非常重要。
不同的蛋白粉产品成分和功效有所不同,应根据自身需求和身体状况选择合适的产品。
其次,控制好摄入量也很重要,过量摄入蛋白粉会给肾脏带来额外负担,甚至引发肾脏问题。
建议在专业人士的指导下确定适量摄入。
此外,蛋白粉最好在饭后或者运动后食用,以促进蛋白质的吸收和利用。
总的来说,蛋白粉作为一种营养补充品,其功效与作用非常广泛,包括增强肌肉修复能力、增加肌肉量、控制体重等。
正确的食用方法也至关重要,应选择适合自己的产品并控制好摄入量。
希望本文能够帮助大家更好地了解蛋白粉的功效与作用,以及正确的食用方法。
蛋白粉

蛋白粉的基本资料【中文名称】蛋白粉蛋白粉【英文名称】compound amino acid【性状】无臭色粉末。
【溶解情况】微溶于水,不溶于乙醇、乙醚及氯仿。
【用途】一种营养性饲料添加剂,作为氨基酸补充物,可代替鱼粉、豆饼等。
【制备或来源】动植物蛋白通过水解制得。
蛋白粉常识编辑本段回目录蛋白质是保证机体健康最重要的营养素,它是维持和修复机体以及细胞生长所必需的,它不仅影响机体组织如肌肉的生长,还参与激素的产生、免疫功能的维持、其它营养物质和氧的转运以及血红蛋白的生成、血液凝结等多方面。
一般脑力劳动者每天所需的蛋白质为每千克体重0.8-1.0克,从事大强度的运动员及健美爱好者的需要量则为他们的2-3倍。
因为高强度的运动会不同程度地破坏肌细胞,引起肌肉蛋白的分解,蛋白质的及时补充能减少肌肉组织的破坏,促进蛋白的合成,甚至超量恢复,从而使肌肉得到增长,力量得到提高。
传统做法通过吃肉补充蛋白质往往会摄入过多的脂肪,引起体脂增加,甚至影响心血管的健康。
处于生长发育期的儿童需要大量的蛋白质满足身体发育的需要,怀孕妇女则需要大量的蛋白质以制造红血球和胎儿的发育,而传统的大鱼大肉的补法往往让许多女性生完孩子后仍然大腹便便,因为她们在补蛋白质的同时,也补进去了大量的脂肪。
手术之后以及大病初愈的病人也需要大量的蛋白质以促进机体康复,提高免疫力。
另外食欲不好或消化功能不良的人以及通过节食方法来减肥者、素食主义者都可能蛋白质摄入不足,这不仅会导致儿童发育迟缓,影响机体水份代谢,还可能导致免疫功能低下,睡眠不良和贫血等多种疾病。
在这些情况下,优质蛋白粉就成为一种良好的补充品。
蛋白粉的主要作用编辑本段回目录1、促进肌肉生长2、提高免疫力3、修补细胞与建造组织4、构成体内所有的细胞和组织5、维持细胞的正常功能与新陈代谢6、形成酵素系统,维持正常的消化机能7、制造血液的运送物质,维持身体的渗透压8、酶的催化作用9、荷尔蒙的调节作用10、氧气的运载作用11、肌肉的收缩作用12、身体的免疫作用13、身体的支架作用14、调节免疫,抗疲劳15、体液的中和作用蛋白粉编辑本段回目录蛋白质是人体生长发育维持各种新陈代谢所必需的营养素,是人体生命的物质基础,专门提供能量,人体一切组织活动都靠蛋白质完成,帮助输送氧气和养分,所以每天摄入足够的蛋白质是非常重要的。
蛋白粉的副作用

蛋白粉的副作用
蛋白粉是一种常用的膳食补充剂,它含有丰富的蛋白质,可以帮助促进肌肉生长和恢复。
虽然蛋白粉在健身界被广泛使用,但是一些人可能对它的副作用有所关注。
以下是一些可能的蛋白粉副作用:
1. 消化问题:某些人可能会出现蛋白粉引发的消化问题,如腹胀、腹泻、胃酸过多等。
这可能是因为蛋白粉很难消化或对某些人的肠道敏感。
2. 过量摄入蛋白:蛋白粉含有高蛋白,如果过度摄入蛋白质会给肾脏增加负担,尤其是对于那些本来已经存在肾脏问题的人来说。
此外,高蛋白摄入还可能导致钙丢失,从而增加骨质疏松风险。
3. 含有添加剂:一些蛋白粉产品可能含有添加剂,如人工甜味剂、防腐剂等。
长期摄入大量添加剂可能对健康产生负面影响,尤其是那些对某些添加剂过敏的人。
4. 替代食物:一些人可能过分依赖蛋白粉作为食物的替代品,而忽视了从其他食物中获取维生素、矿物质、纤维等其他营养物质的重要性。
这可能导致营养不均衡。
总的来说,蛋白粉的副作用并不会影响每个人,但某些人可能对其敏感或存在一定风险。
因此,在使用蛋白粉之前,最好咨询专业医生或营养师的建议,以确保安全和适量的摄入。
同时,
选择优质的蛋白粉产品,并注意保持均衡的饮食和健康的生活方式,可以最大程度地减少潜在的副作用。
优质蛋白粉的成分配料

优质蛋白粉的成分配料优质蛋白粉是一种非常受欢迎的补充剂,尤其在健身和体育训练领域。
它可以为身体提供高质量的蛋白质,帮助促进肌肉生长和修复。
下面将介绍一些常见的优质蛋白粉成分配料。
1. 乳清蛋白粉:乳清蛋白粉是蛋白质粉中最常见的成分之一。
它是从牛奶中提取出来的,含有丰富的必需氨基酸,尤其是支链氨基酸(BCAA)。
乳清蛋白粉可以被身体迅速吸收,提供快速的氨基酸供给。
2. 大豆蛋白粉:大豆蛋白粉是一种植物性蛋白质来源。
它是从大豆中提取出来的,含有多种必需氨基酸。
大豆蛋白粉对素食者和对乳制品过敏的人来说是一个很好的替代品。
3. 瘦肉粉:瘦肉粉是从瘦肉中提取出来的。
它含有高质量的动物蛋白质,提供丰富的氨基酸。
瘦肉粉对于想要增加肌肉质量的人来说是一个很好的选择。
4. 鱼肉蛋白粉:鱼肉蛋白粉是从鱼肉中提取出来的。
它含有丰富的欧米茄-3脂肪酸和高质量的蛋白质。
鱼肉蛋白粉对于增加肌肉质量、促进心脏健康非常有益。
5. 胶原蛋白粉:胶原蛋白粉是从动物骨骼和皮肤中提取出来的。
它含有丰富的胶原蛋白,可以帮助维持皮肤、关节和骨骼的健康。
6. 蛋白质混合物:蛋白质混合物是将多种蛋白质源混合在一起的配方。
它可以提供多种不同类型的蛋白质,以满足身体的不同需求。
除了上述成分外,优质蛋白粉还可能包含一些其他的配料,以增加其营养价值和口感。
这些配料可能包括:1. 碳水化合物源:碳水化合物是身体能量的重要来源。
一些蛋白粉产品可能会添加一些碳水化合物,以提供额外的能量支持。
2. 脂肪源:脂肪对于身体的正常功能也是必需的。
一些蛋白粉产品可能会添加一些健康的脂肪源,如亚麻籽油或椰子油。
3. 纤维:纤维对于消化道健康非常重要。
一些蛋白粉产品可能会添加一些纤维,以提供额外的膳食纤维。
4. 维生素和矿物质:为了增加蛋白粉的营养价值,一些产品可能会添加一些维生素和矿物质,如维生素B和钙。
总结起来,优质蛋白粉的成分配料可以包括乳清蛋白粉、大豆蛋白粉、瘦肉粉、鱼肉蛋白粉、胶原蛋白粉和蛋白质混合物等。
蛋白粉的作用与功效

蛋白粉的作用与功效蛋白粉是一种主要由乳清蛋白、大豆蛋白或蛋白质衍生物制成的补充剂。
它被广泛应用于健身和体重管理等领域。
本文将讨论蛋白粉的作用和功效。
1. 提供优质蛋白质:蛋白粉是一种非常方便的蛋白质来源。
蛋白质是身体构建和修复组织所必需的营养素。
蛋白质不仅用于肌肉的建立和修复,而且还在很多其他生化过程中起着重要的作用。
蛋白粉可以提供高质量的蛋白质,尤其是对于那些追求高蛋白质饮食的人来说,它是一种非常便捷的选择。
2. 促进肌肉生长和修复:蛋白粉是健身爱好者的常见补充剂之一,因为它可以帮助促进肌肉生长和修复。
这是因为蛋白质是构建肌肉组织的主要组成部分。
通过摄入适量的蛋白质,可以提供肌肉生长和修复所需的营养素,从而帮助增加肌肉质量和维持肌肉健康。
3. 促进饱腹感:蛋白质是一种使人产生饱腹感的营养素。
相比碳水化合物和脂肪,蛋白质需要更长时间被身体消化吸收,从而延长饱腹感。
因此,蛋白粉可以作为减肥计划中的一部分,帮助控制食欲,减少摄入的总热量。
4. 促进身体恢复:蛋白粉被广泛应用于运动员和健身爱好者中,因为它可以帮助加速身体的恢复过程。
在剧烈运动后,肌肉组织会受到损伤,身体需要更多的蛋白质来修复和重建。
蛋白粉可以提供大量的蛋白质,有助于加快身体的恢复过程,减少疲劳和肌肉酸痛。
5. 增加代谢率:蛋白质的消化和吸收过程需要身体消耗更多的热量,这被称为热效应。
相比之下,脂肪和碳水化合物的热效应较低。
因此,摄入更多的蛋白质可以增加身体的代谢率,从而有助于增加脂肪的燃烧和体重的控制。
6. 支持骨骼健康:蛋白质不仅是肌肉组织的构建材料,还对骨骼健康起着重要作用。
人体的骨骼是由蛋白质基质组成的。
蛋白粉可以提供足够的蛋白质来支持骨骼的健康,并减少骨质疏松和骨折的风险。
总结起来,蛋白粉作为一种便捷的蛋白质来源,可以提供优质的蛋白质,促进肌肉生长和修复,增加饱腹感,促进身体恢复,增加代谢率,并支持骨骼健康。
然而,对于普通人而言,蛋白粉并不是必需的,我们可以通过均衡饮食来摄取足够的蛋白质。
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乳清蛋白粉中蛋白质纯度的探究蛋白粉,一般是采用提纯的大豆蛋白、或酪蛋白、或乳清蛋白、或上述几种蛋白的组合体构成的粉剂,其用途是为缺乏蛋白质的人补充蛋白质。
目前,市场上销售的蛋白粉品牌众多,价格各异,有的品牌声称蛋白质含量高达80%以上,因此,我们要用科学的方法来测定其准确含量,以保护消费者的权益不受侵害。
此文将采用传统经典的凯氏定氮法,通过单因素试验,正交试验等对其测定过程进行探究,得出了最佳消化条件,硫酸钾为12.5g,硫酸铜为0.5g,浓硫酸为10 mL。
进而在最佳消化条件下,我们又得出了,在消化液变绿色澄清后继续消化45min时测定,所测定的蛋白质含量最高。
关键词:蛋白质;检测;凯氏定氮引言乳清蛋白粉是采用先进工艺从牛奶分离提取出来的珍贵蛋白质,以其纯度高、吸收率高、氨基酸组成最合理等诸多优势被推为“蛋白之王”。
乳清蛋白不但容易消化,而且还具有高生物价、高效化率、高蛋白质功效比和高利用率,是蛋白质中的精品。
含有人体所需的所有必需氨基酸,其氨基酸组成模式与骨骼肌中的氨基酸组成模式几乎完全一致,极其容易被人体所吸收。
乳清蛋白也是最丰富的天然支链氨基酸的来源,支链氨基酸有助于延缓运动疲劳,减少肌肉损伤,促进肌肉合成和缓解运动后的疼痛。
由于其含丰富的β-乳球蛋白,α-乳白蛋白,免疫球蛋白,乳铁蛋白等营养物质,所以特别适应于健身健美爱好者、运动员、需美容者、身体瘦弱者、极易疲劳者、孕妇及哺乳期妈妈、生长发育期的少年儿童、手术康复者、贫血、高血压及其它慢性病人以及素食者。
缺乏蛋白质会对人体产生危害。
譬如:对疾病的抵抗力差,体弱多病;体力下降,精神萎靡不振,易疲劳;当蛋白质摄入不足时,会出现新细胞生成速度缓慢,生长发育迟缓、体重减轻、身材矮小、智力低下、心脏及神经性疾病;缺乏蛋白质会引起腺体分泌紊乱,导致内分泌失调,并且会引起脸外侧长痘;缺乏蛋白质会导致手术、创伤、骨折、病后恢复缓慢、伤口不易愈合;缺乏蛋白还会导致睡眠质量差,记忆力衰退。
因此摄入丰富的蛋白质具有众多功效,如提供身体构造新组织所需的氨基酸,延缓人体衰老;在体内制造酶,改善肠胃功能;为免疫系统制造对抗细菌和感染的抗体;调节体内的水分、电解质平衡,增强机体抗疲劳能力;向细胞输送氧和各种营养物质,加速机体修复。
近年来,随着科学技术的发展,一些新的检测得以出现,为蛋白粉中蛋白质含量的检测提供了众多方法,但是有很多没有得以广泛的应用,现阶段仍以凯氏定氮法为主。
因此,我们通过对经典方法的采用,来做一下探究,以及通过实验条件的干扰,得到最佳的测定条件。
第一章绪论1.1乳类制品的概述乳制品(dairy products)以生鲜牛(羊)乳及其制品为主要原料,经加工制成的各种食品,也叫奶油制品。
其营养极其的丰富,根据考古学家的推测,早在12000年前,人类就开始驯服牛作为家畜,并把牛奶作为重要的食物来源。
牛乳中蛋白质含量约为2.8~3.6%,主要由酪蛋白和乳清蛋白组成,酪蛋白约占总蛋白的80%,乳清蛋白中包含有重要的免疫球蛋白:IgG、IgA、IgM,我们常能在婴儿奶粉的广告中听到说添加了IgG免疫因子,就是添加了免疫球蛋白,其主要功能是对幼子提供免疫保护。
牛乳中蛋白质含有20种以上的氨基酸,包括了人体所必须的全部8种必需氨基酸,消化率可高达98%,是人类摄取优质蛋白很好的食物来源。
乳中碳水化合物以乳糖最为重要,乳糖是婴幼儿及动物幼子哺乳期的营养的主要来源。
乳糖分解的糖是构成脑神经系统中脑磷脂成分,与婴儿出生后脑的迅速生长有密切关系。
但是有些人在幼年的时可正常饮用牛乳,随着年龄的增长,対乳的摄入量越来越少,导致体内缺乏乳糖分解酶,饮用牛乳后,乳中的乳糖不能被分解和吸收,出现呕吐、腹胀、腹泻等不适应的症状,这种现象称为乳糖不耐症。
牛乳中钙的含量也非常的高,每100ml中约含有120mg的钙,同时食品中钙的来源以乳及乳制品最好,特别是经发酵的乳(酸奶)可提高钙、磷和铁的利用率,更有利于钙的吸收,是理想的钙源。
维生素是维持正常生命活动必不可少的一类营养素,而牛乳中含有人体所需的各种维生素,种类比较齐全,像维生素A、维生素D、核黄素等含量都比较高。
因此奶类及乳制品都是高蛋白食物,长期的食用可增加人体的抵抗力,免疫力,同时也可以增加肌肤的紧致新和弹性。
对于改善睡眠质量也能起到一定作用。
还有对于胃不好的人应该多吃一些,它可以养胃及起到一定的修复作用。
1.2乳品行业的发展现状及检测方法乳品行业近几年来发展十分迅速,其运营及发展的能力超过了大大超过了食品制造业。
但是,物极必反,随着近几年出现的大头娃娃,三聚氰胺等事件,从不同的侧面反映出我国的乳品行业在行业管理、质量标准体系、产品质量等方面出现的落后、不健全、良莠不齐等问题,使目前我国的乳业发展受到了制约。
乳清蛋白是牛乳中最为重要的部分,它可以成为衡量乳制品蛋白含量的一个重要指标。
目前,国际上对乳品中蛋白质含量的检测方法主要有凯氏定氮法,即传统的燃烧法,消化法。
分光比色法,即考马斯亮蓝G250法,双缩脲法,紫外吸收法等[1]。
其中凯氏定氮法与紫外吸收法是常用的经典方法,并且这些方法得到了同行的一致认可。
1.2.1反相高效液相色谱法反相高效液相色谱[2] (Reversed Phase High Performance Liquid Chromatog raphy,RPHPLC)分离蛋白质主要是基于蛋白质的氨基酸侧链与色谱介质的疏水表面即固定相的可逆疏水相互作用。
进行RPHPLC分离的首要条件是水溶液,即使蛋白质和静止相周围形成高度有序的水相结构,伴随着蛋白质与固定相的结合,蛋白质会暴露于溶液的疏水表面逐渐变少,此时水相有序性会降低,进而体系的熵值也增加,在该溶液条件下,蛋白质结合到RPHPLC柱的固定相上。
随后,改变流动相的组分可以使结合的蛋白质分别洗脱到流动相中。
可见蛋白质被洗脱下来的次序是由其疏水性的强弱决定的,因此疏水性最弱的蛋白质最先被洗脱下来,随后是疏水性较强的蛋白。
1.2.2高效毛细管电泳法毛细管电泳也被称为高效毛细管电泳,是以内径20-200nm的柔性毛细管柱作为分离通道、以高压直流电场为驱动力,对各种小分子、大分子以致细胞等进行高效分离、检测或微量制备等的有关技术的总称。
毛细管电泳有许多种分离模式,其中毛细管区带电泳(CZE)分离是基于样品中各组分间荷质比的差异,具有更多优点。
例如,不需要高压注射缓冲液、操作简单、缓冲液价格低廉和选择性分离效果好等。
20世纪90年代以来,毛细管电泳由于其自动化高、速度快等优点被广泛的用于蛋白的分析与研究。
Miralles等人[3]用CE法对乳中变性的β-乳球蛋白和对位-κ-酪蛋白进行了分离和定量测定,并研究了pH值、尿素浓度、柠檬酸浓度、电压等因素对试验结果的影响,结果表明该法可在30min完成乳制品中变性β-乳球蛋白和对位-κ-酪蛋白的定量检测。
1.2.3傅立叶转换红外线法傅立叶转换红外线(fourier transform infrared,FTIR)法是将收集到的干扰图纹转化为光谱,优点在于:高信噪比、高能量,能在全波段进行快速扫描。
基于该方法开发的仪器AegysMi600在欧洲、美国、澳大利亚的8个不同实验室的独立评价表明:该仪器的准确度和标准偏差均达到了AOAC的要求[4]。
1996年,Lefier等人[5]使用傅立叶转换红外光谱分析法对原料奶中的粗蛋白和真蛋白含量进行测定,并与凯氏定氮法( IDF 20)进行比较,这2种方法测定粗蛋白、真蛋白含量的标准差(SD)分别为0.042%、0.065%和0.048%、0.035%。
从2种方法的性能参数可知,傅立叶转换红外光谱分析法检测结果的精确度与凯氏定氮法接近。
1.2.4凯氏定氮法测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量。
由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。
该方法是先将样品在硫酸铜存在下,以浓硫酸在加热的条件下使蛋白质分解,释放出铵根离子,铵根离子与NaOH作用放出NH3,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量[6]。
1.2.5紫外吸收法蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。
当吸收峰在280nm时,其吸光度值与蛋白质含量成正比。
此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比[7]。
利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定,所以此法的特点是简便、灵敏、快速;但测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质较多,样品中的嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质会出现较大的干扰,溶液的pH也会影响测定结果。
第二章实验部分2.1实验试剂和仪器2.1.1实验试剂表2-1 试剂T able 2-1 Agentia药品名称生产厂家乳清蛋白粉美国某品牌氢氧化钠(分析纯)上海科帆化工科技有限公司硼酸(分析纯)莱阳经济技术开发区精细化工厂盐酸(分析纯)莱阳经济技术开发区精细化工厂95%乙醇(分析纯)莱阳经济技术开发区精细化工厂碘化钾(分析纯)天津市恒兴化学试剂制造有限公司氯化汞(分析纯)天津市恒兴化学试剂制造有限公司CuSO4.5H2O(固体)(分析纯)天津市恒兴化学试剂制造有限公司氯化铵(分析纯)天津市北方天医化学试剂厂K2SO4(固体)(分析纯)天津市恒兴化学试剂制造有限公司2.1.2实验仪器表2-2仪器T able 2-2 Instrument仪器名称生产厂家电子万用炉北京市永光明医疗仪器厂T203电子天平北京赛多利斯仪器系统有限公司凯氏定氮装置自制2.2实验方法2.2.1凯氏定氮法(1)实验原理①蛋白质属于含氮的有机化合物,我们把蛋白质样品与浓硫酸和混合催化剂混合,一起加热消化,蛋白质会慢慢的分解,生成胺基,胺基与硫酸结合会生成硫酸铵。
反应式为:H2SO4=SO2+H2O+[O]R.CH.COOH+[O]=R.CO.COOH+NH3R.CO.COOH+[O]=nCO2+mH2O2NH3+H2SO4=(NH4)2SO4②然后在碱性条件下进行蒸馏,目的使铵根变为游离的氨,紧接着用硼酸吸收。
反应式为:2NH4++OH-=NH3+H2ONH3+H3BO3=NH4++H2BO3-③再用酸的标准溶液滴定,用酸的消耗量乘以换算系数(乳制品的换算系数为6.38[8]),从而得到蛋白质的含量。
反应式为:H2BO3-+H+=H3BO3(2)主要试剂的配制①混合催化剂:无水硫酸铜和硫酸钾分别研碎,按一定的比例混合均匀。