石蜡切片制作
石蜡切片制作流程

石蜡切片制作流程以石蜡切片制作流程为标题,写一篇文章。
石蜡切片制作是一项常见的实验技术,在生物学、医学和材料科学等领域广泛应用。
石蜡切片可以用于显微镜下的观察和分析,能够提供关于细胞和组织结构的详细信息。
下面将介绍一下石蜡切片的制作流程。
1. 组织固定:首先,需要从感兴趣的样本中取得组织样本,并将其进行固定。
固定是为了保持组织的形态结构和化学成分,常用的固定剂有福尔马林、乙醛等。
固定过程中,需要确保样本完全浸泡在固定液中,通常需要数小时至数天的时间,以确保组织被充分固定。
2. 脱水:固定后的组织样本需要进行脱水处理,以去除其中的水分。
脱水是将样本中的水分逐渐替代为有机溶剂,常用的有乙醇、丙酮等。
通常采用递增浓度的有机溶剂,从低浓度逐渐提高到高浓度。
每个浓度的脱水液中,样本需要浸泡一定的时间,以确保脱水彻底。
3. 渗透:脱水后的组织样本需要进行渗透处理,以使其与石蜡更好地结合。
渗透剂通常为石蜡溶液,可以将样本浸泡在石蜡溶液中,以使其逐渐渗透进入组织内部。
渗透过程中,需要注意控制温度和时间,以确保渗透均匀。
4. 包埋:渗透后的组织样本需要进行包埋处理,即将其嵌入到石蜡中。
首先,将组织样本放置在石蜡模具中,并加入适量的石蜡。
然后,将模具放入石蜡包埋机中,利用加热和真空等处理,使石蜡与组织样本充分结合。
包埋过程中需要严格控制温度和时间,以确保石蜡固化完全。
5. 切片:包埋后的组织样本需要进行切片处理,以获取薄片供观察。
首先,使用切片机将石蜡块切割成薄片。
然后,将薄片置于载玻片上,并加热使其与载玻片结合。
最后,使用刮片等工具将石蜡薄片修整成所需的形状和大小。
6. 然后,对切片进行染色处理,以增强对组织结构的观察。
常用的染色方法有血液学染色、免疫组化染色等。
染色后,可以使用显微镜观察和分析切片中的细胞和组织结构。
总结起来,石蜡切片制作流程包括组织固定、脱水、渗透、包埋、切片和染色等步骤。
每个步骤都需要严格控制条件和时间,以确保制作出高质量的石蜡切片。
石蜡切片的制作

石蜡切片的制作石蜡切片的制作染色液和固定液的配制①Carnoy’S固定液:无水酒精60mL,氯仿30mL,冰醋酸10mL。
②Harris苏木精染色法:10%苏木精(950或无水酒精)溶液10mL10%钾矾水溶液200mL先将钾矾水溶液加热溶解,然后将溶的苏木精酒精溶液倒入,继续加热煮沸lmin,停火后缓慢加氧化汞0.5g,再加热煮沸lmin,速将三角瓶放入冷水内冷却。
同时加入冰醋酸6~10mL。
⑨奥新兰一沙黄染液配制:奥新兰0.3g,沙黄0.03g,铁铵矾0.4g,醋酸一盐酸缓冲液(PH=1.42)100mL,上液临用时混合。
④阿利新兰醋酸液:阿利新兰(Alcian.blue,简称AB) lg,3%醋酸水溶液100mL。
⑤1%高碘酸液:1g高碘酸溶解在100mL蒸馏水中。
⑥Shifr试剂的配制方法:煮沸蒸馏水200mL,停火后加入碱性品红1g,不停搅拌使溶解。
待溶液冷至50℃,加入1N HCl20mL冷至室温(25℃)加偏重亚硫酸钠1g摇荡,置暗处过夜。
又加活性碳2g充分摇荡数分钟,过滤。
滤液应呈无色或淡黄色,盛入有色瓶内,于冰箱(4℃)保存。
1 %冰醋酸水溶液:冰醋酸1ml , 蒸馏水100 ml 。
HE染色显示肠道黏膜上皮淋巴细胞奥新兰—沙黄染色显示肠道内肥大细胞AB/SO染色法阿利新兰醋酸染色显示肠道内杯状细胞AB-PAS染色法3.3.3 肠道的石蜡切片的制作(1)取材:用锋利的刀切取罗非鱼的一小段前肠(据胃5cm左右位置的前肠),组织块的规格为3~5mm×3~5mm×10~15mm。
(2)固定:采用Bouin氏固定液装瓶固定,固定液用量一般为组织块体积的10~20倍。
(3)冲洗:固定12~24h后,将材料自固定液中取出后,在70%酒精中换洗几次,可在酒精中加几滴氨水至洗去黄色为止。
(4)脱水:70%酒精(1h)→80%酒精(1h)→90%酒精(1h)→95%酒精(1h)→无水乙醇Ⅰ(1h)→无水乙醇Ⅱ(1h)(5)透明:无水乙醇与二甲苯溶液(1:1)(1h)→二甲苯Ⅰ(1h)→二甲苯Ⅱ(1h)(6)浸蜡:浸蜡的全过程应在恒温设备中进行,将恒温箱调至58℃。
石蜡切片的制作

石蜡切片的制作石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。
石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法,它有很多优点,例如,比较省时间,容易操作,可切成极薄的切片,能制作连续切片,组织块可包埋在石蜡中永久保存等。
缺点是只能用于较小的组织块,较大的组织块不易切好容易破碎,组织在脱水透明过程中产生收缩并易变脆,制片时间太长。
一、石蜡切片的制作过程石蜡切片的制作过程主要是:取材→水洗→固定→水洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→染色。
(一)取材及水洗根据实验要求选取材料来源及部位,取要求部位的小块组织成为组织块,组织块的大小以不超过0.5立方厘米为宜。
切去组织块时动作要轻,切忌用力牵引或挟持,以免组织内部发生变化。
由动物身上切取的组织必须是新鲜的,材料越新鲜越好,一般不应超过死后24小时,因此一般情况下,将动物处死后立即取需要的材料。
组织块取下后,先用相应的生理盐水漂洗以洗去血液、污渍以及粘液等。
如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净,可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次,使其管腔冲洗干净,切忌不可用刀或其他器具刮之。
(二)固定材料由动物体取下后应当迅速固定,固定的目的是尽快使固定液渗入组织内部,将组织固定以保持其原有的结构。
不同的组织应选用适当的固定液。
固定液的用量与组织块体积之比一般在20:1,不应使组织块贴于容器壁上。
材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,应记录固定液的名称,材料的种类,动物品种及开始固定的时间。
固定的时间长短依据材料大小而定。
固定液有许多种,在固定的过程中应该根据需要选取合适的固定液,一般固定液都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化而失去固定作用。
有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早固定时就没有作用了。
(三)水洗固定后的组织块在进行脱水前必须用流水洗去固定液。
,主要目的是洗去固定液的颜色以便后续的染色。
石蜡切片的主要制备程序

石蜡切片的主要制备程序
石蜡切片的主要制备程序可以概括为以下几个步骤:
1. 准备样品:选择需要切片的样品,如组织样本、细胞样品等,并采取相应的固定、处理和染色等预处理步骤,以保证样品的稳定性、可观察性和对比度。
2. 材料准备:准备好所需的石蜡、切片盒、切片刀、载玻片等材料,并进行清洁和消毒处理,以避免污染和交叉感染。
3. 石蜡浸透:将处理好的样品转移到石蜡中进行浸透。
首先将样品置于温度逐渐升高的浸透剂(如正己烷)中,以去除组织内水分和其他溶质,然后置于石蜡中进行浸透。
4. 切片制备:将石蜡浸透的样品固定于切片盒中,将石蜡块剪碎成适当大小,并放置在切片刀的刀脊上。
调整切片机参数(如温度、角度、速度等),并逐个切割出薄片。
5. 切片贴片:将切好的薄片浮于温水中或使用其他方法,如电离子器、热平台等,以使切片展平并附着于载玻片上。
6. 干燥固定:将切片连同载玻片一起进行干燥固定处理,以去除水分并保持切片的形态稳定。
7. 切片染色:根据实验需求,对切片进行适当的染色处理(如组织学染色、免疫组化染色等),以增强样品的可视化效果和区分感兴趣的结构。
8. 封片封装:将切片封装至封片盖玻片上,使用透明化导电胶或其他封片剂固定切片,并尽量排除气泡、保证封片质量。
9. 切片质控:对制备好的切片进行质量控制,使用显微镜观察和评估切片的清晰度、结构完整性、染色效果等。
最后,制备完成的石蜡切片可以用于显微镜观察、组织形态分析、病理学研究等应用。
需要注意的是,在整个制备过程中,应遵循标准实验操作规程、注意安全,以及依据实验要求进行相应的优化和调整。
石蜡切片制作注意事项

石蜡切片制作注意事项石蜡切片制作是一种常用于组织学研究中的技术,具有保持组织形态和细胞结构的优势。
在进行石蜡切片制作时,需要注意以下几个方面:1. 选择合适的细胞或组织样本:石蜡切片制作的前提是有足够的组织细胞供应。
因此,在进行石蜡切片制作之前,需要对细胞或组织样本进行合适的处理和采集,确保细胞或组织的完整性和正确性。
2. 适当固定样本:在石蜡切片制作过程中,样本的固定是非常重要的环节。
固定样本的目的是保持细胞或组织的完整性和结构,防止其发生变性或破坏。
常用的固定剂包括福尔马林和乙醛。
在选择固定剂时,需要考虑到对细胞或组织的适应性以及对后续染色和切片的影响。
3. 适当脱水:样本固定后,需要对其进行脱水处理。
脱水的目的是去除细胞或组织中的水分,以便于后续的石蜡浸渍和切片。
通常采用一系列浓度递增的乙醇浸泡样本,使其逐渐脱水。
4. 合理浸渍:浸渍是将已脱水的细胞或组织样本渗透到石蜡中的过程。
在进行浸渍前,需要选择合适的石蜡溶液,根据样本的大小和类型,确定浸渍的时间和温度。
通常采用石蜡和蜡炉的结合,将样本置于石蜡中,使其充分渗透。
5. 切片均一性:在进行石蜡切片制作时,需要保证切片的均一性。
这需要在选择切片机或切片刀的同时,对切片进行适当的控制和处理。
需要调整切片机的切片速度、切片角度和切片厚度,以获得合适的切片切割。
6. 确保切片质量:在石蜡切片制作过程中,需要保证切片的质量。
这包括切片的厚度、形状和结构的完整性。
需要采用合适的切片机和切片刀,对切片进行适当的修整和处理,以获得高质量的切片。
7. 适当染色:在石蜡切片制作后,为了观察和研究样本的细胞结构和组织特点,通常需要对切片进行染色。
常用的染色方法包括常规染色和免疫组织化学染色。
在进行染色时,需要选择适当的染色剂和染色条件,以保证染色的质量和效果。
8. 妥善保存:在石蜡切片制作完成后,需要进行妥善的保存。
对于已染色的切片,可以使用封片剂将其封装并进行保存。
石蜡切片流程范文

石蜡切片流程范文石蜡切片是一种常见的组织学技术,用于制备生物组织薄片,使其可以在显微镜下观察和分析。
下面是石蜡切片制备的详细流程。
1.组织固定:首先,需要选择适当的方法将生物组织进行固定,以保持其形状和结构。
最常用的方法是使用福尔马林溶液进行组织固定。
将组织样品置于福尔马林溶液中,通常需要固定24至48小时。
2.去水:固定完毕后,需要将组织中的水分除去,以便进行后续的处理。
通过逐渐提高样品中酒精浓度(例如70%、80%、95%和100%构成的酒精梯度)来逐步去除水分,通常每次浸泡20至30分钟。
3.清洁:去水后,通常需要对样品进行清洁,以去除可能存在的污物和其他杂质。
可以用清洁的醇溶液(例如100%酒精)浸泡样品数分钟,然后用去福尔马林等溶液洗涤样品。
4.浸渍:在石蜡切片制备过程中,需要将组织样品浸泡在石蜡中,以使其渗透并得到支撑。
选择适当的石蜡类型和温度很重要。
通常使用低熔点石蜡(例如58℃石蜡),在60至65℃的恒温水浴中加热并溶解石蜡。
5.渗透:将组织样品从酒精中转移到融化的石蜡中,通常需要经历多个步骤的渗透过程。
首先将样品浸泡在75%酒精中,然后再依次转移到浓缩的酒精溶液中(例如85%、95%和100%)和石蜡中,每次浸泡时间约为1小时。
6.包埋:当样品完成渗透后,需要进行包埋,即将渗透后的组织样品放置在切片模型中,并用石蜡封住。
将切片模型倒置,将溶解的石蜡缓慢倒入模型直到完全覆盖组织样品。
然后将切片模型固定在冷却装置中,等待石蜡冷却和固化。
7.切片:当石蜡块完全固化后,可以将其切割成所需的薄片。
通常使用旋转切片机或手动切片机进行切片。
将切片机的刀片调整到所需厚度(通常为3至5微米),将石蜡块放置在切片机上,并逐渐将刀片与石蜡块接触,以制备薄片。
8.制片:将切好的石蜡薄片静置在温水中,让其自然展开,并将其转移到预涂有胶水的载玻片上。
轻轻将玻片压在石蜡薄片上,以确保两者之间有良好的接触。
然后将载片放置在恒温台上,以便胶水干燥。
怎样制作石蜡切片

怎样制作石蜡切片制作石蜡切片需要一系列的步骤和材料。
以下是一种常见的制作石蜡切片的方法:1.准备材料和设备:-石蜡块:石蜡是一种透明且易于切片的材料,可以在化学试剂供应商或实验室设备供应商处购买。
-刀片:使用一把锋利的微创刀片来切割石蜡。
确保刀片是干净的,滴一滴乙醇或其他清洁溶液在刀片上擦拭,然后用干净的纸巾擦干。
-切片盒:选择适合的切片盒来放置切割好的石蜡切片。
-石蜡模具:这是一个用于制作石蜡块的模具,可以在实验室设备供应商处购买。
2.制备石蜡块:-首先,将石蜡块加热至约60-70°C,直到完全融化。
-将石蜡块从加热器中取出,小心地倒入石蜡模具中。
-等待石蜡冷却和凝固。
你可以将石蜡模具放入冷却台上以加快冷却过程。
3.切割石蜡块:-将已冷却和凝固的石蜡块从模具中取出。
-使用清洁干燥的刀片将石蜡块切成适当的大小。
你可以根据实验需求来确定切割的尺寸。
4.制备石蜡切片:-准备一张玻璃载玻片。
-小心地将切割好的石蜡片放在玻璃载玻片上。
5.烘干石蜡切片:-将玻璃载玻片连同石蜡切片放入干燥炉。
-设置炉温为50-60°C,保持1个小时以消除任何残留的水分。
6.染色和封片:-如果需要,可以将石蜡切片进行染色以便更好地观察。
- 使用适当的染色剂,如伊红(Eosin)或伊红-兰红(Eosin-Methylene Blue)来染色石蜡切片。
-染色后,将石蜡切片放入一盒有封盖的容器中,以便保存和保护切片。
制作石蜡切片需要一定的实验室技巧和经验,同时注意安全,避免烫伤和刀片伤害。
在操作过程中,务必佩戴手套和护目镜,确保实验室处于通风良好的环境中进行操作。
石蜡切片制作实习报告

一、实习背景石蜡切片制作是病理学、生物学等研究领域中常用的制片方法,主要用于观察组织切片的微观结构。
为了更好地掌握石蜡切片的制作技术,我们开展了为期两周的石蜡切片制作实习。
二、实习目的1. 熟悉石蜡切片制作的基本原理和流程;2. 掌握石蜡切片制作的各项操作技巧;3. 培养团队协作精神和实验操作的严谨性。
三、实习内容1. 实验材料组织块、固定液、70%、85%、95%、100%酒精、二甲苯、石蜡、载玻片、切片刀、切片机、显微镜等。
2. 实验步骤(1)取材与固定取新鲜组织块,将其投入固定液中浸泡24小时,使组织中的蛋白质变性凝固,防止细胞自溶和细菌分解。
(2)脱水将固定后的组织块依次放入70%、85%、95%、100%酒精中,每次浸泡30分钟,逐渐脱去组织中的水分。
(3)透明将脱水后的组织块放入二甲苯中浸泡,每次浸泡30分钟,使组织块变得透明。
(4)浸蜡将透明后的组织块放入已溶化的石蜡中,浸泡30分钟,使石蜡渗入组织块。
(5)包埋将浸蜡后的组织块取出,放入熔化的石蜡中,使组织块包埋在石蜡中。
(6)切片将包埋好的石蜡块固定于切片机上,切成5-8微米的薄片。
(7)贴片将切下的薄片贴在载玻片上,放入45℃恒温箱中烘干。
(8)脱蜡将烘干后的切片放入100%酒精中浸泡,去除石蜡。
(9)染色将脱蜡后的切片放入苏木精染液中染色,再用盐酸酒精分化,最后放入伊红染液中复染。
(10)脱水、透明将染色后的切片依次放入70%、85%、95%、100%酒精中,每次浸泡30分钟,使切片透明。
(11)封片将透明后的切片覆以盖玻片,滴加树胶封片。
四、实习心得1. 通过本次实习,我深刻认识到石蜡切片制作过程中的各个环节都非常重要,任何一个环节的疏忽都可能导致切片失败。
2. 在实际操作中,要熟练掌握各项操作技巧,如切片、贴片、染色等,以保证切片质量。
3. 实验过程中要注重团队协作,合理分配任务,提高实验效率。
4. 在实验过程中,要严谨操作,严格按照实验步骤进行,确保实验结果的准确性。
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• 固定根尖和花药只需40-60分钟,时间太长不好(不 能超一天)。
• 固定后用95%酒精冲洗,在组织不能立即处理时, 需转入70%酒精中保存。配法有两种:
固定组织时应注意:
①保持组织新鲜,勿使其干燥,尽快固定处理。
②组织块不易过大过厚,厚度必须控制在0.3cm以内。
③固定液必须有足够的量,一般大于组织20倍以上。 ④抽气:使固定液尽快渗入材料内部,并排除材料内 气泡的干扰。
• 顺序: 二甲苯→1/2 二甲苯+1/2纯酒精→100%酒精→95 %酒精→85%酒精→70%酒精→50%酒精→30% 酒精→水→染色 以上各级约需5~10分钟。
9. 染色
• 染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的 颜色和足够强的差异以便于观察。 • 经染色可显示细胞内不同的细胞器及内含物以及不 同类型的细胞组织。 • 根据观察要求及研究内容采用不同的染色剂及染色 方法。
• 程序:在溶蜡箱中进行,55-60℃,恒温。
• 浸蜡:二甲苯透明后的组织块在二甲苯︰石蜡(1 ︰ 1)中1次,在石蜡中2次,每次1-3天左右。
• 包埋:在室温进行
6. 切片
• 包埋好的蜡块用刀片修 成规整的梯形,粘于小 木块上。
• 切片刀的锐利与否、蜡块硬度适当都直接影响切 片质量,可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬 度。
4.透明
• 纯酒精不能与石蜡相溶,还需用能与酒精和石蜡 相溶的媒浸液,替换出组织内的酒精。材料块在 这类媒浸液中浸渍,出现透明状态,此液即称透 明剂,透明剂浸渍过程称透明。
• 常用的透明剂有二甲苯、苯、氯仿、正丁醇等, 各种透明剂均是石蜡的溶剂。
• 通常组织先经纯酒精和透明剂各半的混合液浸渍1~ 2小时,再转入纯透明剂中浸渍。 • 材料进入无水的透明剂中后,若透明剂变浑浊,说 明材料中的水分未脱干净,必须回到前面一级无水 的脱水剂中再次脱水(但是效果往往不好)。 • 透明剂的浸渍时间则要根据组织材料块大小及组织 特性而定。
• 将载玻片从二甲苯中取出,务必使有材料的一面 朝上。 • 迅速在材料上加适量封固剂(不能使二甲苯干很 久后才封片),盖上干净的盖玻片。
• 切片放入42℃温箱中干燥过夜。
• 镜检,将合格的切片贴上标签。
向日葵幼茎横切片
5.浸蜡与包埋
• 用石蜡取代透明剂,使石蜡浸入组织而起支持作用。
• 通常先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等 量混合液浸渍1~2小时或者过夜,再先后移入熔化 的石蜡液中浸渍几天。 • 浸蜡应在高于石蜡熔点3℃左右的温箱中进行,以 利石蜡浸入组织内。
• 石蜡熔点:
45-50℃ 软蜡
55-60℃ 硬蜡
甲液:明胶
甘油 苯酚 乙液:甲醛 蒸馏水
1克
15毫升 2克 4毫升 100毫升
蒸馏水 100毫升
8. 脱蜡及复水
干燥后的切片需脱蜡及复水才能在水溶性染
液中进行染色。 用二甲苯脱蜡,再逐级经梯度酒精复水。
• 脱蜡(溶蜡):将切片上的石蜡溶去。一般都用二 甲苯溶脱蜡。如果脱蜡不彻底,材料的染色就困难。 • 复水:脱蜡后的材料从高浓度的酒精溶液(100%) 开始,逐级进入低浓度的酒精溶液,最后一级通常 是30%酒精或水,使材料中的水分逐渐增加。如果 不经过复水,材料脱蜡后直接进入染色剂中,材料 将会严重变形,甚至难以染色。
石蜡制片的基本步骤 1.取材 2.杀死与固定 3.脱水 4.透明 5.浸蜡与包埋 6.切片 7.粘片与烤片 8.脱蜡与复水 9.染色 10.切片脱水、透明和封固
1.取材 1.1 材料来源及部位。 ①种类
②部位
③发育阶段
④是观察横切面还是纵切面?
1.2 取材原则: 动作:快,轻,用力均匀 体积合适 刀要锋利
• 番红与固绿染色法 • 番红用l%的水溶液,固绿用0.5%的酒精液(用95 %的酒精配制) • 染色步骤如下:
10. 切片脱水、透明和封固
• 染色后的切片经梯度酒精脱水,二甲苯透明后, 滴加适量(1~2滴)中性树胶,再将洁净盖玻片 倾斜放下,进行封片。 • 封固剂:加拿大树胶(Canada balsam)或中性 树胶
实验三
石蜡切片制作
一、实验目的与要求: 掌握石蜡切片制作的基本过程及其注意事项。
二、实验材料和仪器: 实验材料: 青海云杉叶片、石蜡、酒精、二甲苯、番红/ 固绿染色液等;实验仪器和器皿:石蜡切片机、展片机、染 色缸、载玻片、盖玻片等。 三、实验内容与方法: 1.观看石蜡切片切片制作录像。 2.制作青海云杉叶片石蜡切片。 四、作业: 提交制作合格的青海云杉叶片石蜡切片。
• 30%--50%---70%---85%---95%--100%--- 100% 每步 30-60分钟左右。
要求及注意事项
• 保证脱水梯度和每一步脱水时间,水要完全脱净。
• 不同大小的组织块脱水时间不同。
• 不能过度脱水(过久使组织变脆、收缩)
• 在50%酒精中加入曙红,用于染色。 • 材料可以放在70%酒精中保存。 • 正丁醇、叔丁醇、丙酮等也可做脱水剂。
• 通常切片厚度为8~12微米,切出一片接一片的蜡 带,用毛笔轻托轻放在纸上。
7. 粘片与烤片
• 用粘附剂将展平的蜡片牢附于载玻片上,以免在 以后操作中材料脱落。
• 在载玻片上涂抹粘片剂,再滴蒸馏水,放上蜡片, 至于展片台上铺展,最后用滤纸吸除多余水分, 将载玻片放入42℃温箱中干燥。
常用的粘片剂为郝伯特(Haupt) 粘贴剂:
2. 杀死与固定
目的---杀死各种酶,保持细胞的结构
固定液 固定时间 固定后的处理
最常用的固定液为FAA。固定时间不受限制,短则
数小时,长可延至数月或数年。
配方: 50%或70%酒精 90毫பைடு நூலகம் 冰醋酸 5毫升 福尔马林 5毫升 柔软材料用50%酒精,坚硬材料用70%酒精配制。
• 卡诺氏(Carnoy’s)固定液:有极强的渗透力
材料较硬的,用熔点较高的石蜡包埋; 切片较薄时(在8微米以下),用熔点较高的石蜡 包埋; 夏季采用熔点较高的石蜡(56,58),冬季宜选用 熔点较低的石蜡(52,54)。
• 石蜡的处理:
新蜡应溶一次,增加密度。
并用滤纸过滤去除杂质。
加5%~10%的蜂蜡,增加石蜡的韧性。
反复溶的旧蜡包埋效果更好。
组织固定后的处理
①冲洗或漂洗:组织固定后应充分水洗,除去留在组 织内的固定液及其结晶沉淀,否则会影响以后的染 色效果。 ②材料经过固定后,需要保存下来以备利用,通常使 用的保存剂是70%的酒精溶液,可以使一般的材料 保存较长的时间而不至于变坏。 ③通常在冰箱中4℃存放。
3. 脱水
• 水和透明剂不能互溶,只有脱去水分后,才能让透 明剂进入。 • 凡用酒精配制的固定液,一律用同浓度的酒清洗。 • 酒精为常用脱水剂,它既能与水相混合,又能与透 明剂相混。为了避免组织材料的急剧收缩,应按从 低浓度到高浓度递增的顺序进行.