苹果转基因研究PPT课件
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第十章 转基因技术及应用 ppt课件
• 转基因生物对农田生态系统的潜在风险
增加杀虫剂的使用。由于转基因生物可能造成的影响是抗药基因的特性选 择和转移或漂流到可相容的其他植物中，形成抗性杂草或超级杂草， 具有很强的抗药性。 产生新的农田杂草。其原因是由于基因漂流或基因逃逸，如通过昆虫传播 花粉引起杂交或基因污染，使近缘种变成新杂草或超级杂草。 转基因植物自身变为杂草。由于插入性状的竞争而演变退化为杂草。 产生新的病毒。由于不同病毒基因组和转基因作物的病毒外壳蛋白重组而 出现新型病毒。 广谱抗除草剂堆积基因群（HT）的超级杂草。 产生新的作物害虫。由于病原体与转基因植物相互作用或是草食动物与转 基因植物相互作用而出现的新型转基因害虫。比如常见害虫产生抗性， 并进化增强。 对非目标生物的伤害。由于误食或基因污染导致。例如2002年10月美国 内布拉斯加的一块约一英亩的刚收获大豆的田里，发现了三株转基因 玉米。这是因为上一年种植的含一种胰岛素蛋白的药用转基因玉米的 种子遗留下来在田里发芽，结果导致总价值270万美元的这一季大豆不 得不付之一炬。
转基因微生物
第一节 转基因植物 p85
目的基因和受体的获得 转基因方法 转基因植物的鉴定
转基因植物的应用
转基因植物研究存在的问题
一、目的基因的来源
1. 采用限制性内切酶，从生物组织中获取目的基因；
2. 通过mRNA合成cDNA；
3. 人工合成的DNA片段；
4. 聚合酶链式反应（PCR）扩增特定基因片段。
农 杆 菌 ori
大 肠 杆 菌 筛 选 标 记
大肠杆菌ori
农 杆 菌 筛 选 标 记
病毒介导法
随着植物病毒分子生物学及遗传学研究的不断深入，用病毒 基因组作为载体转化植物细胞日益受到人们的重视，因为病 毒载体能将外源基因导入植物的所有组织和细胞中，而且不 受单子叶或双子叶的限制。 在大约300种特征清楚的植物病毒中，单链RNA病毒约占 91%，双链RNA病毒、双链DNA病毒、单链DNA病毒各占 3%。利用植物病毒载体转化植物细胞大致有以下两种战略： 转染植物细胞原生质体
苹果转基因鉴别方法
苹果转基因鉴别方法嘿，咱今天就来聊聊苹果转基因鉴别方法这档子事儿。
你说这苹果，平常咱都吃得不少吧。
可这转基因的苹果和普通苹果，到底咋区分呢？这可真是个技术活！咱先看看外观吧。
一般来说，正常的苹果长得各有各的模样，有的红点儿，有的黄点儿，形状也不一定都那么规则。
可要是转基因的呢，说不定就长得特别标准，圆溜溜的，颜色也特别均匀，就好像是一个模子里刻出来的。
你想想，大自然里哪有那么多完美的东西呀，对吧？这就好比每个人的长相都不一样，要是突然出现一群长得一模一样的人，那是不是挺奇怪的？再闻闻味道。
普通苹果的味道那是各有各的特点，有的甜香，有的稍微带点酸味儿。
可转基因苹果呢，味道可能就没那么丰富，比较单一。
这就好像一道家常菜，妈妈做的和饭店大厨做的，总是感觉不一样，妈妈做的更有那种独特的味道，而大厨做的可能就比较标准化。
还有口感。
正常苹果咬下去，那感觉是有层次的，有的地方脆，有的地方可能稍微有点软。
转基因苹果呢，口感可能就比较一致，没啥变化。
这就好像听音乐，一首好歌有高音有低音，有起有伏，才好听。
要是整首歌都是一个调调，那多没意思呀！有人可能会说，哎呀，这能分得清吗？咱又不是专家！别急呀，咱老百姓也有自己的办法。
就好比你去买苹果，多挑几家，多比较比较，总能发现点不同。
就像找对象一样，多接触几个，不就知道谁更适合自己啦？你说这转基因苹果到底好不好呢？这还真不好说。
有人觉得它可能更抗病虫害，产量高，能让更多人吃到苹果。
但也有人担心它会不会对身体有啥不好的影响。
咱也不是科学家，也搞不清楚那些高深的道理。
不过咱可以从自己的感受出发呀，要是吃着觉得不对劲，那咱就少吃点呗。
反正呢，鉴别苹果转基因这事，咱得留个心眼。
别光看外表好看就买，得尝尝味道，感受感受口感。
咱老百姓过日子，不就讲究个实在嘛。
要是花了钱买了不喜欢的东西，那多冤呀！总之，咱在买苹果的时候，多观察观察，多比较比较，总能找到适合自己的那一款。
别盲目跟风，也别轻信那些不靠谱的说法。
转基因食品的危害PPT演示课件
转基因食品的安全性不确定
由于转基因食品的长期影响尚未得到充分研究和证明，因此无法确 定其长期安全性。
提高公众对转基因食品的认识和意识
1 2
提供全面的转基因食品信息
政府和媒体应该向公众提供全面、客观的转基因 食品信息，包括其潜在危害、安全性和利益等。
加强公众科学素养
提高公众的科学素养，使他们能够理解转基因食 品的相关知识和技术，从而做出明智的决策。
一些环保组织、消费者协会和民间团体发起抵制转基因食品的运动，呼吁政府加强 监管和标识要求。
针对转基因食品的争议在社会上引发广泛的讨论和争议，需要加强科普宣传和公众 参与决策过程。
04 如何避免转基因食品的危 害
了解食品标签和标识
仔细阅读食品标签
在购买食品时，仔细阅读食品标 签，查看是否标注为转基因食品 ，并留意食品成分中是否含有转 基因成分。
02 转基因食品的潜在危害
对人体健康的危害
过敏反应
转基因食品中引入的外源基因可能导 致某些人出现过敏反应，尤其是对大 豆、玉米等常见转基因作物的过敏症 状。
潜在毒素
营养成分失衡
转基因食品在改造过程中可能导致营 养成分失衡，影响人体对某些营养素 的吸收和利用。
某些转基因作物可能产生新的毒素或 增加原有毒素的含量，长期食用可能 对人体健康造成危害。
美国
对转基因食品采取自愿标 识制度，要求食品生产商 在产品中含有转基因成分 时进行标注。
欧盟
对转基因食品实行严格的 监管和标识制度，要求所 有含转基因成分的食品必 须进行强制性标注。
中国
对转基因食品实行严格的 审批和标识制度，确保消 费者的知情权和选择权。
民间对转基因食品的态度和抵制行动
民间对转基因食品的态度存在分歧，一些人支持转基因技术以解决粮食短缺问题， 另一些人则担心其对环境和健康的潜在影响。
由于转基因食品的长期影响尚未得到充分研究和证明，因此无法确 定其长期安全性。
提高公众对转基因食品的认识和意识
1 2
提供全面的转基因食品信息
政府和媒体应该向公众提供全面、客观的转基因 食品信息，包括其潜在危害、安全性和利益等。
加强公众科学素养
提高公众的科学素养，使他们能够理解转基因食 品的相关知识和技术，从而做出明智的决策。
一些环保组织、消费者协会和民间团体发起抵制转基因食品的运动，呼吁政府加强 监管和标识要求。
针对转基因食品的争议在社会上引发广泛的讨论和争议，需要加强科普宣传和公众 参与决策过程。
04 如何避免转基因食品的危 害
了解食品标签和标识
仔细阅读食品标签
在购买食品时，仔细阅读食品标 签，查看是否标注为转基因食品 ，并留意食品成分中是否含有转 基因成分。
02 转基因食品的潜在危害
对人体健康的危害
过敏反应
转基因食品中引入的外源基因可能导 致某些人出现过敏反应，尤其是对大 豆、玉米等常见转基因作物的过敏症 状。
潜在毒素
营养成分失衡
转基因食品在改造过程中可能导致营 养成分失衡，影响人体对某些营养素 的吸收和利用。
某些转基因作物可能产生新的毒素或 增加原有毒素的含量，长期食用可能 对人体健康造成危害。
美国
对转基因食品采取自愿标 识制度，要求食品生产商 在产品中含有转基因成分 时进行标注。
欧盟
对转基因食品实行严格的 监管和标识制度，要求所 有含转基因成分的食品必 须进行强制性标注。
中国
对转基因食品实行严格的 审批和标识制度，确保消 费者的知情权和选择权。
民间对转基因食品的态度和抵制行动
民间对转基因食品的态度存在分歧，一些人支持转基因技术以解决粮食短缺问题， 另一些人则担心其对环境和健康的潜在影响。
转基因植物50张幻灯片PPT教案
2021/8/23
4
发展中国家为了能在有限的耕地上生产 出更多的粮食，依赖化肥和化学农药的程度 越来越高。过量施用化学农药和化肥所造成 的环境污染和耕地、水质的破坏，用传统的 手段难以去除。同时，食物和饮用水中农药 的残留量居高不下，并由此带来了种种疾病。
2021/8/23
5
转苏云金芽孢杆菌（Bt）毒蛋白基因抗 棉铃虫的棉花受到各国农民的青睐。这种转 基因棉花明显减少杀虫剂使用量。据报道， 种植这种棉花，杀虫剂使用量可以减少50%， 而我国报道可减少70%；保护了水质和土壤； 调查还表明肥料利用率也得到明显提高，促 进了土地的保护性耕种。这样就有可能使世 界农产品的生产走出怪圈，步入良性循环， 从而解决世界上的饥饿和贫困。
2021/8/23
54
事实上，根据育种专家的研究表明：所称的 专利根本不是发明。含有高产性状标志的大豆早 已存在自然界中，并可以传统方法培育出来。有 明显的证据表明，孟都山申请的专利保护的大豆 在中国的华东地区已被农民长久种植。如果此项 申请获得批准，意味着孟山都对所有大豆的高产 品质拥有垄断权，实际上允许了孟山都对中国野 生大豆的遗产资源的控制。
2021/8/23
39
重组DNA进入水体、土壤后，将流向何方？ 存活多久？他们会不会与细菌杂交，出现对 人体有害的、新的致病菌？现在已知DNA在 土壤中至少可以存留40万年。1992年意大利 科学家就发现，被认为最安全的大肠杆菌K12 菌株，进入下水道后竟可以存活72小时，在 这么长时间里它完全可以与其他细菌进行基 因交换。
2021/8/23
49
抗虫玉米与大花斑纹蝴蝶
2021/8/23
பைடு நூலகம்
50
事实上这并不意外，因为Bt玉米中 的杀虫晶体蛋白是特意毒杀鳞翅目害虫 的，斑蝶属鳞翅目昆虫，自然会受到Bt 蛋白的影响。
转基因技术——动植物转基因方法ppt(共22张PPT)
【DAWN_ZX】
•优点:不依赖组织培养人工再生植株，技术简单，
不需要装备精良的实验室，常规育种工作者易于掌握
。
转基因
技术
【DAWN_ZX】
动物转基因方法
原核显微注射法 胚胎干细胞介导法
逆转录病毒载体法 精子介导的基因转移
核移植转基因法
体细胞核移植法
线粒体介导法
转基因
技术
【DAWN_ZX】
动物转基因方法
原核显微注射法（最常用）
【启动子】是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因
转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 【终止子】也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。
【DAWN_ZX】
转基因技术的步骤
STEP3：将目的基因导入受体细胞
（1）导入植物细胞一般用农杆菌转化法，也可 用基因枪法或花粉管通道法。 （2）导入动物细胞一般用显微注射法。 （3）导入微生物细胞一般用感受态细胞吸收DNA 分子的方法。
转基因
技术
【DAWN_ZX】
转基因技术的步骤
STEP4：目的基因的检测和表达
1.检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因
。
方法：采用DNA分子杂交技术。 2.检测目的基因是否转录出了mRNA。
方法：采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。
方法：从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行 抗原－抗体杂交。 4. 进行个体生物学水平的鉴定。
•根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有 一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入 到植物基因组中。因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目 的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因 向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转 基因植株。 •近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中得到了广 泛应用。
转基因PPT2012
2 通过基因漂流影响其他物种
在自然条件下,栽培作物种内，栽培作物与其近缘 野生种间,栽培作物和杂草之间都有可能发生基因 漂流。 转基因作物中的一些抗除草剂、杀虫剂和病 毒的抗性基因就有可能通过花粉杂交等途径向其 同种或近缘野生种转移,使其获得转基因生物体的 抗逆特性，对其他作物构成严重威胁的“超级杂 草”。而自然界生物间的协同进化或生物与非生 物抑制因子间的对抗最终会出现适应或淘汰的结 果。转基因抗虫作物的长期、大规模种植可能使 目标害虫或非目标害虫对毒素蛋白的适应在群体 水平上产生抗性，有可能产生侵染力、致病力更 强的“超级害虫”，造成更大的危害。
Байду номын сангаас
目前已有的转基因品种 主食类：水稻、玉米、大豆、豇豆等 蔬菜类：西红柿、茄子、土豆、胡萝卜、 油菜、甜菜、生菜、甜椒、辣椒、木瓜等 水果类：樱桃、甘蓝、苹果、猕猴桃、 葡萄、柑橘、草梅、梨等 转基因动物食品：猪、牛、羊、鸡、鲤鱼、 鲫鱼、泥鳅、大马哈鱼、红鳟鱼等。
2.优点主要在农作物方面
1.解决粮食短缺问题。 2.减少农药使用，避免环境污 染。 3.增加食物营养，提高附加价 值。
转基因——双刃剑
2012级遗传学
概念
转基因食品（Genetically Modified Foods， GMF）是利用现代分子生物技术，将某些 生物的基因转移到其他物种中去，改造生 物的遗传物质，使其在形状、营养品质、 消费品质等方面向人们所需要的目标转变。
以转基因生物为直接食品或为原料加工生 产的食品就是“转基因食品”。
3.增加食物营养，提高附加价值。
转入控制营养物质的基因，如高蛋白基 因、高含量维生素基因、低脂肪基因等。
国外转基因食品应用
《转基因食品常识》课件
转基因食品的安全性争议
科学界观点
政策制定
多数科学家认为转基因食品在安全性 方面与传统育种技术没有本质区别， 但仍有一些科学家持谨慎态度，呼吁 进一步研究。
各国政府在转基因食品的监管政策上 存在差异，一些国家采取宽松政策， 而另一些国家则采取严格限制措施。
社会舆论
公众对转基因食品的接受程度因地区 和文化背景而异，一些人担心转基因 食品的安全性，另一些人则认为其有 助于解决粮食短缺问题。
转基因食品的安全性
转基因食品的安全评估
评估过程
转基因食品在上市前需经过严格 的科学评估，包括急性毒性试验 、慢性毒性试验、致畸胎毒性试
验等，以确保其安全性。
评估标准
评估过程中需遵循国家食品安全法 规和国际食品法典委员会等标准， 确保评估结果的可靠性和科学性。
评估机构
评估工作由国家食品安全监管机构 或第三方检测机构进行，以确保评 估的公正性和独立性。
，满足不断增长的食物需求。
转基因技术将进一步应用于新品 种培育，如抗病虫害、耐旱、耐 盐碱等性，以适应气候变化和
环境压力。
转基因食品的安全性和营养价值 将得到更深入的研究和验证，以
保障消费者的健康和利益。
转基因食品面临的挑战和机遇
公众对转基因食品的接受度和信任度是影响其发展的关键因素，需要加强科学传播 和教育。
转基因食品的安全性结论
总体结论
经过科学评估和长期监测，多数权威 机构认为现有的转基因食品在安全性 方面与传统育种技术相当，但仍需持 续监测和评估。
个人建议
鉴于转基因食品的安全性存在争议， 建议消费者根据自身情况选择是否食 用转基因食品，同时关注相关机构的 监测结果和政策动态。
03
转基因PPT优质PPT资料
转基因PPT
前言
• 面对越来越多的转基因食品，人们的认识并 非一致，以 为首的主吃派和欧洲为首的反对 派在全球范围内形成了两大阵营。
• 那么，转基因食品的安全性到底怎么样？是 否能吃？
• 让我们，一起来探讨……
目录
•转基因技术的定义
转基因作物的分类
转基因动物
ห้องสมุดไป่ตู้关于转基因的图表
转基因植物 总结
耐 孟山都公司事件
转基因技术的定义
• 运用科学手段从某种生物中提 取所需要的基因，将其转入另 一种生物中，使与另一种生物 的基因进行重组，从而产生特 转基因棉花 定的具有优良遗传性状的物质。 利用转基因技术可以改变动植 物性状，培育新品种。也可以 利用其它生物体培育出人类所 需要的生物制品，用于医药、 食品等方面。
• 例如抗虫害、抗病毒、抗杂草的转 基因玉米、黄豆、油菜、土豆、西 葫芦等。
大 豆研
发 的 转 基 因
浙江省种植的 转基因油菜
关于转基因的图表
关于转基因的图表
转基因作物的分类
• 目前全球种植的转基因作物可分为三类 ： • 抗除草剂转基因作物： • 2000 年全球种植抗除草剂转基因作物的面积达
各种各样的转 基因水果
• 举例：BT玉米，抵抗三种毒素： Cry1Ab、 Cry1Ac、Cry9c。 中国的转基因羊
转基因作物的分类
•• 其毒科粮食植病酸疫病学食品物能的能他、家等”。力腐力转真利农。用大蚀。基菌用作科这大而于因病生物学种增不是作及物，家苜强被，物细遗变培蓿。破越：菌传成育来而坏来改病工能出喂且，越善的程预了小这并多产能，防一白种能的品力将疾种鼠霍激抗的普病能，乱发病。品通的预能抗人基质的神防使原体因；蔬奇霍小，对正增菜的 乱 白 能霍 在强、“的鼠经乱被抵水疫苜的受的转抗果苗蓿抗胃免入病、 用 1运遗推收它毒转1科21那转由12各转这利科用面转在 例2运遗这离1孟转由99099009这8用传出购可、基0学09么基于80种基一用学这对基猪如0用传只出9山基于21142004种当 科 性 抗 了 通 抗 因 约 家 年 年 ， 因 绿 当 年 各 因 橙 转 家 种 越 因 的抗 年 科 性 转 的 年都 因 绿苜 时学状农A过虫动翰培1P转植色时全样植剂基利苜来植基 虫全学状基“P的动色月oog蓿 在手的达原、物•育基物荧在球的物就因用蓿越物因 害球手的因绿第物荧ssr奎ii1all1c来 孟段物蓖生抗—出因是光孟种转是是技生来多是组 、种段物猴色一—光aa尼ecc日t奶奶喂 山从质麻质寒了食基蛋山植基基孟术物喂的基中 抗植从质名荧个蛋——u以电s牛牛小 都某。，体、一品因白都抗因因山可遗小转因转 病抗某。叫光产白““公他生生白 工种棉融抗种的组起工虫水组都以传白基组入 毒虫种“蛋品起安安司妻长长科鼠 作生花合旱能安中到作转果中生改工鼠因中人 、转生安白是到迪迪植子激激学，的物这、、预全含的的基含产变程，食含的抗基物迪基糖的””物的素素家能 科中种细抗防性有标科因有的动，能品有生 杂因中”因精标猴猴生姓((1使 学提产胞涝霍到外记学作外。植将使，外长 草作提，”。记物BBM1ss日小 家取品重、乱底源作家物源物普小人源素 的物取从，作技ott))n，，宣白 们所具组抗的怎基用们的基性通白们基基 转的所外因用术sa第第布鼠 首需有、盐苜么因，首面因状的鼠的因因 基面需表为，资nto一一培的 次要抗遗碱蓿样的克次积的，蔬的认的， 因积要看含克产为种种育抗 从的农传、植？植隆从达植培菜抗识植猪 玉达的来有隆，公生生出病 基基达物抗物是物转基到物育、病并物的 米到基，这转并司物物了能 因因和质除。否。基因。新水能非。生 、因“种基88购命33技技世力 上，其转草能因上品果力一长 黄，安基因00买名万万术术界大 改将他移剂吃荧改种、大致速 豆将迪因荧了，公公产产上大 变其草、等？光变。粮大，度 、其”的光另建顷顷品品首增 了转甘染的猪了食增以增 油转与细猪一立，，获获只强 植入膦色作的植等强加 菜入其胞的家了占为占准准转。 物另基体物实物农。了 、另他会实生最总首总在在基细一除工新验细作一 土一猴呈验物初转的转因胞种草程品表胞物倍 豆种子现表研的用用基主基猴。生剂技种明。，， 、生没绿明究孟于于因吃因—物的术。体变猪 西物有色体公山商商植派植—中特获细成肉 葫中什，细司都业业物和物小，性得胞能质 芦，么因胞C公销销种欧种a恒使。，克预量 等使两此克l司售售g植洲植e河与有隆防大 。与样这隆。n。。面为面e猴另可技疾大 另，种技的积首积，一能术病提 一但“术部的的的它种改在的高 种实绿在分反11被生变猪神， 生际色猪99股对%%命物植身奇现 物上荧身份，，派名的物上的在 的“光上。其其在为基的获“这 基安蛋获中中全，因某得疫样 因迪白得以 以球意进 些 了 苗 的进 ” 基 了抗抗范指行遗成食猪 行体因成虫虫围“重传功品肉 重内”功玉玉内D组特。”已 组含被。米米形N，性。在 ，有科为为A成从，澳 从一学植主主了而培大 而种家入。。两产育利 产科用”大生高亚 生学来(i阵n特产被 特家作s营e定、请 定从标rt。e的优上 的海记dD具质了 具蜇基N有、餐 有体因A)优抗桌 优内。。良病。 良分 植物，使人们在品尝鲜果美味的同时，达到防病 的目的。
前言
• 面对越来越多的转基因食品，人们的认识并 非一致，以 为首的主吃派和欧洲为首的反对 派在全球范围内形成了两大阵营。
• 那么，转基因食品的安全性到底怎么样？是 否能吃？
• 让我们，一起来探讨……
目录
•转基因技术的定义
转基因作物的分类
转基因动物
ห้องสมุดไป่ตู้关于转基因的图表
转基因植物 总结
耐 孟山都公司事件
转基因技术的定义
• 运用科学手段从某种生物中提 取所需要的基因，将其转入另 一种生物中，使与另一种生物 的基因进行重组，从而产生特 转基因棉花 定的具有优良遗传性状的物质。 利用转基因技术可以改变动植 物性状，培育新品种。也可以 利用其它生物体培育出人类所 需要的生物制品，用于医药、 食品等方面。
• 例如抗虫害、抗病毒、抗杂草的转 基因玉米、黄豆、油菜、土豆、西 葫芦等。
大 豆研
发 的 转 基 因
浙江省种植的 转基因油菜
关于转基因的图表
关于转基因的图表
转基因作物的分类
• 目前全球种植的转基因作物可分为三类 ： • 抗除草剂转基因作物： • 2000 年全球种植抗除草剂转基因作物的面积达
各种各样的转 基因水果
• 举例：BT玉米，抵抗三种毒素： Cry1Ab、 Cry1Ac、Cry9c。 中国的转基因羊
转基因作物的分类
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❖ 目前使用的转基因植物的鉴定方法有 :分子检测、免疫 技术、利用生理生化指标、标记基因和生物鉴定法
2021/3/5
16
3 研究现状
3.4 转基因苹果的鉴定
全面检测需要：
❖ 1 检测插入外源基因：先做个普通PCR检测，传统的要 southern杂交检测插入几个拷贝，现在可以用Real-Time 检测拷贝数；
1992年程家胜等在国内报道了获得转基因的 苹果试管苗，与James等一样，用绿袖作为受 体植株，农杆菌介导法，不同的是抗卡那霉素的 标记基因为氨基葡糖磷酸转移酶[APH(3)I]基 因，报道基因为葡萄糖苷酸酶基因
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8
2 发展历史
❖ 植物转基因的方法主要有农杆菌介导法、基因枪 法、激光法、花粉管通道法等。在植物上转化成 功的例子中，80%22是发发展由展历历农史史杆菌介导转化的 。
苹果转基因研究
田爽
1
转基因苹果
❖ 苹果为世界四大水果之一，是我国的第一大水果， 在国民经济中占有重要地位。
❖ 但是，由于果树育种周期长、遗传背景复杂，传
统的杂交育种方式很难选育出集各种优良品质于 一身的品种
❖ 近年来随着社会的发展和进步，培育优质的苹果 新品种成为民众的迫切要求。
2021/3/5
2
❖ 另外，许多实验研究表明甘露糖/PMI筛 选体系以pmi为安全标记基因，可以实现 对转化细胞安全、高效的正向选择。
2021/3/5
13
3 研究现状
3.3 外源基因导入的方法
1 直接导入法 化学物质导入法、电穿孔发、脂质体法、微注射 法、基因枪法（微弹轰击法）和花粉管通道法等
2 间接导入法 土壤农杆菌转化系统和植物病毒载体系统
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3 研究现状
3.3 外源基因导入的方法
在苹果基因转化中主要应用电穿孔法、基因枪 法和农杆菌介导法。农杆菌介导法以其简便、 高效成为应用最广泛的转化方法 。
2021/3/5
1终目的是获得能稳定表达且遗传外源目的 基因的转化植株，这就需要不断观察和检测转基因植株 在田间的表现
❖ 2 表达量检测：RT-PCR， northern杂交，Real-Time RT-PCR；
❖ 3 蛋白水平检测：western杂交 ❖ 4 报告基因检测：Gus，GFP/YFP/RFP等
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4 研究进展
苹果转基因的方法主要有: 农杆菌介导法、基因枪法、激光法、花粉 管通道法、脂质体法、微注射法、电穿孔
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10
3 研究现状
3.2 导入的外源基因
❖ 目前为止，导入的外源基因有GUS基因、 GFP基因、 Bt 基因、 LFY基因、 nptⅡ基因、CpTI基因、杀菌肽基因、 抗菌肽MB39基因、FT基因、硫堇蛋白Rs-afpl基因、 ALS基因(抗除草剂)、rol基因(生长素合成酶基因)、光 敏色素B基因、LeIRT、Ferrition等
❖是指使用基因工程或分子生物学技术(不包 括传统育种、细胞及原生质体融合、杂交、 诱变、体外受精、体细胞变迁及多倍体诱 导等技术)，将遗传物质导入活细胞或生物 体中，产生基因重组现象，并使之表达并 遗传的相关技术
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2 发展历史
自1988年首例使用农杆菌转化成的转基因 果树－核桃诞生以来，随后，1989年James等 采用农杆菌介导的叶盘共培养法获得了转基因绿 袖(Greensleeves)苹果，报告基因新霉素磷 酸转移酶基因和胭脂碱合成酶基因
于是，另外一种报道基因——绿色荧光蛋白(GFP)被 用于苹果的遗传转化
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3 研究现状
❖ 作为荧光标记分子，GFP既具有敏感的标 记检测率，又没有放射性的危害。GFP检 测方便，荧光稳定，易于构建载体且对活 细胞无毒害，对目的基因的功能也没有影 响，转化后细胞可以继续传代。目前， GFP被改造作为转基因植物的遗传标记， 成为监测生物体内基因表达的的十分重要 的报告因子
法等。
现在，在经常使用的苹果转基因技术中，
电穿孔法、基因枪法和农杆菌介导法使用 的最多。
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4 研究进展
4.1 农杆菌介导法
❖ 现在，农杆菌介导法的发展潮流是提高转化效率和扩大 转化范围。
❖ 常见的影响农杆菌转化频率的因素有三大类：侵染力,抗
生素,基因型。
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3 研究现状
3.1 苹果转基因的受体基因型
近年来，在全世界果树研究者的努力下，转基因苹果 已取得不小的成就，用于苹果遗传转化研究的受体基因 型越来越多，除了绿袖，主要还有
红元帅、新乔纳金、嘎拉、金冠、 M26 、皇家嘎拉、 Elstar、Braeburn、Merlijin、乔纳金、富士、王林、 金矮生、辽伏、元帅、粉红佳人以及M7和八楞海棠等
转基因苹果
❖ 基因工程的发展为苹果品种的遗传改良提供了新的技术方法， 缩短育种周期，提高育种效率，为苹果遗传育种研究、利用 各种遗传种质资源开辟了一条新的技术途径
2021/3/5
3
转基因苹果
究竟怎样定义转基因苹果？ 转基因苹果研究进展如何？
它存在哪些问题？
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4
主要内容
❖定义 ❖发展历史 ❖研究现状 ❖研究进展 ❖存在问题
❖ 其中抗性基因分别提高了苹果的抗虫性、抗病性和抗除 草剂的能力；rol基因的导入使苹果苗在田间表现矮化； 光敏色素B基因使苹果的生长量和干重不同程度减少
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3 研究现状
同时，对转化材料的选择不再停留在最初的抗性材料 筛选上，GUS组织化学检测及分子水平的检测(PCR 或Southern杂交)技术被普遍采用。由于GUS基因 可以在农杆菌中表达，而农杆菌在转化后的离体培养 中至少能存活12个月而不表现生长，所以GUS阳性 结果不能准确反映初步转化频率
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5
1 定义
❖ 转基因技术就是将人工分离和修饰过的基因导 入到生物体基因组中，由于导入基因的表达， 引起生物体的性状的可遗传的修饰，这一技术 称之为转基因技术（Transgene technology）
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“转基因技术” （ Genetically Modified Technology）
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3 研究现状
3.4 转基因苹果的鉴定
全面检测需要：
❖ 1 检测插入外源基因：先做个普通PCR检测，传统的要 southern杂交检测插入几个拷贝，现在可以用Real-Time 检测拷贝数；
1992年程家胜等在国内报道了获得转基因的 苹果试管苗，与James等一样，用绿袖作为受 体植株，农杆菌介导法，不同的是抗卡那霉素的 标记基因为氨基葡糖磷酸转移酶[APH(3)I]基 因，报道基因为葡萄糖苷酸酶基因
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2 发展历史
❖ 植物转基因的方法主要有农杆菌介导法、基因枪 法、激光法、花粉管通道法等。在植物上转化成 功的例子中，80%22是发发展由展历历农史史杆菌介导转化的 。
苹果转基因研究
田爽
1
转基因苹果
❖ 苹果为世界四大水果之一，是我国的第一大水果， 在国民经济中占有重要地位。
❖ 但是，由于果树育种周期长、遗传背景复杂，传
统的杂交育种方式很难选育出集各种优良品质于 一身的品种
❖ 近年来随着社会的发展和进步，培育优质的苹果 新品种成为民众的迫切要求。
2021/3/5
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❖ 另外，许多实验研究表明甘露糖/PMI筛 选体系以pmi为安全标记基因，可以实现 对转化细胞安全、高效的正向选择。
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3 研究现状
3.3 外源基因导入的方法
1 直接导入法 化学物质导入法、电穿孔发、脂质体法、微注射 法、基因枪法（微弹轰击法）和花粉管通道法等
2 间接导入法 土壤农杆菌转化系统和植物病毒载体系统
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3 研究现状
3.3 外源基因导入的方法
在苹果基因转化中主要应用电穿孔法、基因枪 法和农杆菌介导法。农杆菌介导法以其简便、 高效成为应用最广泛的转化方法 。
2021/3/5
1终目的是获得能稳定表达且遗传外源目的 基因的转化植株，这就需要不断观察和检测转基因植株 在田间的表现
❖ 2 表达量检测：RT-PCR， northern杂交，Real-Time RT-PCR；
❖ 3 蛋白水平检测：western杂交 ❖ 4 报告基因检测：Gus，GFP/YFP/RFP等
2021/3/5
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4 研究进展
苹果转基因的方法主要有: 农杆菌介导法、基因枪法、激光法、花粉 管通道法、脂质体法、微注射法、电穿孔
2021/3/5
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3 研究现状
3.2 导入的外源基因
❖ 目前为止，导入的外源基因有GUS基因、 GFP基因、 Bt 基因、 LFY基因、 nptⅡ基因、CpTI基因、杀菌肽基因、 抗菌肽MB39基因、FT基因、硫堇蛋白Rs-afpl基因、 ALS基因(抗除草剂)、rol基因(生长素合成酶基因)、光 敏色素B基因、LeIRT、Ferrition等
❖是指使用基因工程或分子生物学技术(不包 括传统育种、细胞及原生质体融合、杂交、 诱变、体外受精、体细胞变迁及多倍体诱 导等技术)，将遗传物质导入活细胞或生物 体中，产生基因重组现象，并使之表达并 遗传的相关技术
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2 发展历史
自1988年首例使用农杆菌转化成的转基因 果树－核桃诞生以来，随后，1989年James等 采用农杆菌介导的叶盘共培养法获得了转基因绿 袖(Greensleeves)苹果，报告基因新霉素磷 酸转移酶基因和胭脂碱合成酶基因
于是，另外一种报道基因——绿色荧光蛋白(GFP)被 用于苹果的遗传转化
2021/3/5
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3 研究现状
❖ 作为荧光标记分子，GFP既具有敏感的标 记检测率，又没有放射性的危害。GFP检 测方便，荧光稳定，易于构建载体且对活 细胞无毒害，对目的基因的功能也没有影 响，转化后细胞可以继续传代。目前， GFP被改造作为转基因植物的遗传标记， 成为监测生物体内基因表达的的十分重要 的报告因子
法等。
现在，在经常使用的苹果转基因技术中，
电穿孔法、基因枪法和农杆菌介导法使用 的最多。
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4 研究进展
4.1 农杆菌介导法
❖ 现在，农杆菌介导法的发展潮流是提高转化效率和扩大 转化范围。
❖ 常见的影响农杆菌转化频率的因素有三大类：侵染力,抗
生素,基因型。
2021/3/5
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3 研究现状
3.1 苹果转基因的受体基因型
近年来，在全世界果树研究者的努力下，转基因苹果 已取得不小的成就，用于苹果遗传转化研究的受体基因 型越来越多，除了绿袖，主要还有
红元帅、新乔纳金、嘎拉、金冠、 M26 、皇家嘎拉、 Elstar、Braeburn、Merlijin、乔纳金、富士、王林、 金矮生、辽伏、元帅、粉红佳人以及M7和八楞海棠等
转基因苹果
❖ 基因工程的发展为苹果品种的遗传改良提供了新的技术方法， 缩短育种周期，提高育种效率，为苹果遗传育种研究、利用 各种遗传种质资源开辟了一条新的技术途径
2021/3/5
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转基因苹果
究竟怎样定义转基因苹果？ 转基因苹果研究进展如何？
它存在哪些问题？
2021/3/5
4
主要内容
❖定义 ❖发展历史 ❖研究现状 ❖研究进展 ❖存在问题
❖ 其中抗性基因分别提高了苹果的抗虫性、抗病性和抗除 草剂的能力；rol基因的导入使苹果苗在田间表现矮化； 光敏色素B基因使苹果的生长量和干重不同程度减少
2021/3/5
11
3 研究现状
同时，对转化材料的选择不再停留在最初的抗性材料 筛选上，GUS组织化学检测及分子水平的检测(PCR 或Southern杂交)技术被普遍采用。由于GUS基因 可以在农杆菌中表达，而农杆菌在转化后的离体培养 中至少能存活12个月而不表现生长，所以GUS阳性 结果不能准确反映初步转化频率
2021/3/5
5
1 定义
❖ 转基因技术就是将人工分离和修饰过的基因导 入到生物体基因组中，由于导入基因的表达， 引起生物体的性状的可遗传的修饰，这一技术 称之为转基因技术（Transgene technology）
2021/3/5
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“转基因技术” （ Genetically Modified Technology）