迪尔血培养标准操作
血培养采集技术操作规范
血培养采集技术操作规范
血培养采集技术操作规范
一、操作目的
严格无菌操作要求，正确留取血标本，做微生物培养，协助诊断、治疗及护理。
二、评估要点
1、评估患者病情、治疗、心理状态及配合程度。
2、了解患者寒战或发热的高峰时间。
3、了解患者的用药情况，如抗生素。
4、评估患者穿刺部位皮肤、血管情况和肢体活动度。
三、物品准备
治疗盘、弯盘、碘伏、棉签、止血带、血培养瓶、采血针、手套、治疗巾。
四、操作要点
1、核对医嘱及培养瓶条码。
2、评估患者的病情、抗生素的使用情况以及血管等基本情况。
3、告知患者及家属采血的目的、方法及如何配合、采血后的注意事项。
4、根据要求准备用物。
5、再次核对患者手腕带和培养瓶信息，确认统一后，按要求正确留取血标本。
可选用静脉直接穿刺法或经外周穿刺的中心静脉导管进行采血。
6、协助按压穿刺部位5-10分钟至无出血。
7、协助取舒适卧位，询问患者需要。
8、整理床单位。
9、洗手，取口罩。
10、及时送检。
11、操作速度：完成时间8分钟以内。
五、指导要点
1、告知患者检查的目的、方法、注意事项以及配合方法。
2、告知患者正确的降温方法，促进舒适。
六、注意事项
1、血培养瓶应在室温下避光保存。
2、根据是否使用抗生素，准备合适的需氧瓶和厌氧瓶。
129。
血培养临床操作规范(2017版)
血培养，是一种将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上，在一定温度、湿度等条件下，使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别，从而确定病原菌的一种人工培养法。
我国卫生部在2017年9月发布了新版《临床微生物实验室血培养操作规范》，其主要内容如下：一、采血指征：可疑感染患者出现以下任一指征时,可考虑采集血培养。
1. 体温>38℃或<36℃.2. 寒战.3. 外固血白细胞计数增多(计数>10.0×10/L,特别有“核左移”时)或减少(计数<4.0×10°/L).4. 呼吸频率>20次/min或动脉血二氧化碳分压(PaCO2)<32mmHg.5. 心率>90次/min6. 皮肤黏膜出血.7. 昏迷.8. 多器官功能障碍.9. 血压降低.10. 炎症反应参数如C反应蛋白、降钙素原(PCT)、1,3-3-D葡聚糖(G试验)升高等二、采血时间寒战或发热初起时采集。
抗菌药物应用之前采集最佳。
三、采集套数成人每次应采集2套-3套,每套从不同穿刺点进行采集,2d-5d内无需重复采集。
如怀疑感染性心内膜炎,应重复采集多套。
儿童通常仅采集需氧瓶。
有以下高危因素时应考虑厌氧瓶培养：其母产褥期患腹膜炎,或慢性口腔炎或鼻窦炎、蜂窝组织炎、有腹腔感染的症状和体症、咬伤、接受类固醇治疗的粒细胞缺乏患儿。
考虑肺炎链球菌菌血症时,宜同时做脑脊液培养。
四、采血量成人每瓶采血量8mL-10mL，或按照说明书采集，婴幼儿及儿童采血量不应超过患者总血量的1%,具体采血量参考说明书。
若采血量充足,注射器采集的血液先注入厌氧瓶,后注入需氧瓶，碟形针采集的血液反之。
若采血量不足,优先注入需氧瓶。
五、采集方法1. 采集静脉血：仅在评估导管相关性血流感染时采集导管血。
血培养宜单独采血,与其他检测项目同时采血,应先接种血培养瓶,以避免污染。
2. 采集前做好手卫生,静脉穿刺点选定后,去除血培养瓶的塑料瓶帽,切勿打开金属封口环和胶塞,使用75%乙醇或70%异丙醇消毒,自然干燥60s。
血培养采集操作流程
七、常见问题及处理
1、采血不畅：应调整采血针的角度，或用手指由穿刺静脉上端向下轻轻按摩，松开止血带5s后重新扎上止血带，使血管进一步充盈，无效时则更换血管，重新穿刺。
2、面色苍白、晕厥、心悸应停止穿刺，密切观察患儿病情并给予必要处理，如吸氧、按压人中，合谷等穴位或其他急救措施；为低血糖诱发的眩晕可立即静脉注射葡萄糖或口服糖水。
3、局部血肿及皮下淤血：与患儿家属按压不当、穿刺过程中损伤静脉后壁所致，应指导患儿家
属的正确按压方法，如按压手法、按压时间、按压面积（以皮肤和血管的两个穿刺点为中心尽量大于两个穿刺点，按压力度适中），穿刺时尽量做到一次成功。
血培养采集
一、目的
1、检查血液中是否有细菌存在。
2、确定血液中存在的菌种，可作为用药治疗的依据。
3、做抗生素的敏感试验。
4、确定患儿病情的进展程度。
二、适应症
1、菌血症
患儿出现发热（≥38℃）或低温（≤36℃），或寒颤；白细胞计数增多（计数＞10.0×109/L，中性粒细胞增多；或白细胞计数减少（计数＜3.0×109/L）；有皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、休克等全身感染症状体征，只要具备其中之一，又不能排除细菌、真菌血流感染的，就应进行血培养。
4、采血次数、血培养瓶选择：应同时分别在两个部位采集血标本，分别注入儿童瓶，厌氧瓶一般不需要，除非怀疑患儿存在厌氧菌血流感染。
5、皮肤、血培养瓶消毒：为减少皮肤、培养瓶口等对血培养造成的污染，在穿刺前，应对皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥，以减少假阳性的发生概率。
6、扎止血带不可过紧、压迫静脉时间不宜过长，以不超过40s为宜。
血培养操作流程及评分标准
内容
分值
扣分标准
扣分
目的
按照正确的方法采集血培养，排除污染。
5
-5
用物准备
注射盘、75%酒精棉球（独立包装）、碘酊、2付针筒、采血针、2套培养瓶、手消剂。
5
-1
素质要求
仪表大方，衣帽整洁，修剪指甲，洗手，戴口罩。
5
-1
操
作
步
骤
1、携用物至床边，用2种方法确认患者身份进行核对
5
-5
2、向患者/家属解释血培养的目的
3、在标本量少的情况下，应首先满足需氧瓶用量；己采集的血培养标本必须立即送检，如不能立即送检，可放置室温，勿放冰箱保存；从外周静脉导管和中心静脉导管采取的血标本很可能存在非感染菌的污染，检验单上须注明采血部位。
总分
100分
10
-5
-5
10、导管暂停输液，抗生素封管。
5
-5
11、2小时内送检
5
-5
12、整理用物，洗手，记录、签名
5
-2
注意
事项
1、用75％乙醇消毒瓶盖，不能用碘酒消毒；严格做好抽血部位的消毒及执行无菌操作。
10
-3
2、同时抽几个项目的血标本时，注入容器的顺序是先注入血培养瓶；同时做需氧和厌氧培养时，先将标本注入厌氧瓶，再注入需氧瓶。
105575乙醇去除血培养瓶上的血液并进行消乙醇消毒导管及其周围皮肤再用碘酊按同样的方法消毒待干05lmin拔去导管盖消毒针心先插入无菌注射器抽取至少0510ml血液弃去以消除干扰因素和导管末端的污染另取一无菌注射器抽取10ml血液注入儿童培养瓶内送检然后在导管内注入肝素或无菌生理盐水
血培养操作流程及评分标准
10
血培养临床操作规范（2017版）
血培养临床操作规范（2017版）血培养，是一种将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上，在一定温度、湿度等条件下，使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别，从而确定病原菌的一种人工培养法。
我国卫生部在2017年9月发布了新版《临床微生物实验室血培养操作规范》，其主要内容如下：一、采血指征：可疑感染患者出现以下任一指征时,可考虑采集血培养。
1. 体温>38℃或<36℃.2. 寒战.3. 外固血白细胞计数增多(计数>10.0×10/L,特别有“核左移”时)或减少(计数<4.0×10°/L).4. 呼吸频率>20次/min或动脉血二氧化碳分压(PaCO2)<32mmHg.5. 心率>90次/min6. 皮肤黏膜出血.7. 昏迷.8. 多器官功能障碍.9. 血压降低.10. 炎症反应参数如C反应蛋白、降钙素原(PCT)、1,3-3-D葡聚糖(G试验)升高等二、采血时间寒战或发热初起时采集。
抗菌药物应用之前采集最佳。
三、采集套数成人每次应采集2套-3套,每套从不同穿刺点进行采集,2d-5d内无需重复采集。
如怀疑感染性心内膜炎,应重复采集多套。
儿童通常仅采集需氧瓶。
有以下高危因素时应考虑厌氧瓶培养：其母产褥期患腹膜炎,或慢性口腔炎或鼻窦炎、蜂窝组织炎、有腹腔感染的症状和体症、咬伤、接受类固醇治疗的粒细胞缺乏患儿。
考虑肺炎链球菌菌血症时,宜同时做脑脊液培养。
四、采血量成人每瓶采血量8mL-10mL，或按照说明书采集，婴幼儿及儿童采血量不应超过患者总血量的1%,具体采血量参考说明书。
若采血量充足,注射器采集的血液先注入厌氧瓶,后注入需氧瓶，碟形针采集的血液反之。
若采血量不足,优先注入需氧瓶。
五、采集方法1. 采集静脉血：仅在评估导管相关性血流感染时采集导管血。
血培养宜单独采血,与其他检测项目同时采血,应先接种血培养瓶,以避免污染。
2. 采集前做好手卫生,静脉穿刺点选定后,去除血培养瓶的塑料瓶帽,切勿打开金属封口环和胶塞,使用75%乙醇或70%异丙醇消毒,自然干燥60s。
血培养采集流程标准操作
血培养采集流程标准操作
一、采集指征
当患者出现以下症状时，应考虑进行血培养：
1.高烧：体温超过38℃或低体温。
2.寒战。
3.白细胞计数异常：白细胞数量显著增加或减少。
4.疑似感染性心内膜炎患者。
5.疑似血液感染，如败血症、脓毒血症等。
二、采集时机
血培养的最佳采集时机是在患者发热或寒战发作时，或者在未使用抗生素前。
如果已经使用抗生素，应在下次用药前采集血培养。
在成人中，血培养应在发病后72小时内采集。
三、采集方法
1.准备：准备好所需器材，包括血培养瓶、注射器、消毒剂等。
2.消毒：对采血部位进行消毒，确保采血过程的无菌操作。
3.采集：从患者不同部位采集两套血培养，分别用于需氧菌和厌氧菌的培养。
每套血培养应抽取8-10ml血液，儿童为1-5ml。
4.轻摇：采血后轻轻摇动血培养瓶，确保血液与培养基充分混合。
5.送检：将血培养瓶及时送至实验室进行培养和鉴定。
四、运输和储存
血培养瓶应在室温下运输，并避免阳光直射。
在储存期间，应保持血培养瓶直立，避免剧烈震动，以确保细菌的正常生长。
以上是血培养采集流程的标准操作，遵循这些步骤可以提高血培养的阳性率，为临床诊断和治疗提供准确依据。
血液培养标准操作规程
采集标本后立即送检，不能及时送检的可室温放置，切勿放冰箱。冬季血培养瓶在送检过程应采取一定的保暖措施。
4试剂、仪器
4.1革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、沙保罗平板及相关生化试剂等。
4.2恒星BC-60血液细菌培养仪、恒星HX-21细菌鉴定药敏分析仪，成人血培养瓶，厌氧血培养瓶、儿童血培养瓶、恒星细菌鉴定药敏分析试剂板。
3标本
3.1标本类型血液及骨髓
3.2标本采集
3.2.1抗菌药物治疗前，发热初期或高峰时抽血。
3.2.2采血频率对怀疑菌血症的成人患者，推荐同时在不同部位采集2~3套（每套包括一瓶厌氧一瓶需氧）对感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集：婴幼儿患者，推荐同时不同部位采集两套，可不做厌氧培养。
3.2.3采血量以无菌方法从患者肘静脉或股动脉采血。采血量以培养基的1/10为宜，成人一次采血10-20mL，儿童为3-5mL.血液抽出后立即以无菌操作注入血培养瓶，充分混匀后送检。
6.1.2仪器培养为阴性，报阴性后卸下血培养瓶，可报告阴性结果。
7操作流程
8结果报告
8.1.1一级报告阳性报警血培养瓶应进行革兰染色，将涂片结果电话（或其他方式）通知临床，同时记录报告日期、时间、内容及接收报告人姓名及工号。血培养阳性应列为危急值。
8.1.2二级报告报告直接药敏试验结果。
直接药敏试验，讲血培养阳性标本进行革兰染色，如涂片找到细菌，根据革兰染色结果选择药敏培养基，去阳性血培养标本约0.2ml用无菌棉签涂布于琼脂表面根据革兰氏染色结果选用抗菌药物纸片，如镜检发现革兰阴性杆菌选择肠杆菌科常用抗生素：若为革兰氏阳性球菌成对排列选择葡萄球菌常用抗生素纸片。然后置于35℃，孵育18-24h读取初步药敏结果。纯培养再进行菌株鉴定和药敏实验，发最终报告。
【2017年整理】血培养标准操作规
血培养标准操作规(SOP)一、采血指征：患者出现以下一种或同时具备几种临床表现时可作为血培养的重要指征：①发热（≥38 ℃）或低温（≤36 ℃），以间歇驰张型多见，革兰阴性杆菌，如大肠埃希菌引起的感染可见双峰热；②寒战；③白细胞增多（>10.0×109/ L，特别是有“核左移”时）；④粒细胞减少（<1.0 ×109/ L）；⑤血小板减少；⑥皮肤、黏膜出血，常见于溶血性链球菌感染的菌血症，伤寒病人第4~10天可出现玫瑰疹，斑疹伤寒第4~6天可出现暗红色斑丘血疹；⑦昏迷；⑧多器官衰竭；⑨血压降低；⑩呼吸加快（呼吸率>20/分或CO2分压<32mmHg）；以及肝脾肿大；关节疼痛；C反应蛋白、内毒素、降钙素原升高等。
对新生儿可疑菌血症,还应同时做尿液和脑脊液培养。
老年菌血症患者可能不发热或体温不低，如伴有身体不适、肌痛或卒中，可能是感染性心内膜炎的重要指征。
二、标本采集时机：只要怀疑患者有血流感染的可能，在考虑使用抗菌药物之前，都应立即采集血培养标本。
若患者已行抗菌药物治疗，则应选择含有抗菌药物吸附物的培养瓶，并在下一次抗菌药物应用前采血培养。
细菌通常在寒战和发烧前1小时入血，此时为采集血培养标本进行病原菌培养的最佳时机。
三、采血的标准流程1、标本采集部位要求：从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧”采血培养。
必要时从下肢静脉采血做第三套血培养。
说明：不建议采集动脉血，其诊断价值不高，且增加了抽血污染的机会。
尽量避免从静脉留置导管采血培养，因其常伴有高污染率［10，11，12]。
如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读（参见3.4 导管相关血流感染）。
1.1.3 血培养的次数：要求：对怀疑菌血症、真菌血症的成人患者，推荐同时或短时间间隔（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集2～3套血培养标本，做到“双瓶双侧”。
如有必要，可同时或短时间间隔内从下肢静脉采血接种第三套培养瓶。
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DL-Bt全自动血培养系统标准操作规程
文件编号：XXJYCZXJXXX
版本：
生效日期：
共4页
1．目的
规范DL-Bt全自动血培养系统操作规程，保证检验质量。
2．授权操作人
经培训并通过考核的微生物实验室工作人员。
3．原理
全自动血培养系统通过将已接种的血培养瓶放入检测器中，利用热传导原理使血培养瓶在37℃恒温环境下持续培养，使培养瓶中微生物快速生长并产生代谢气体，从而使培养瓶的传感器发生变化，同时利用光学传感器连续监测血培养瓶的传感器的变化，由专家系统判定待检标本的阴阳性结果，通过声光报警提示阳性结果并显示在液晶屏幕上。
4. 工作条件
环境温度：5℃－35℃相对湿度：≤80% 光照度：避免强光直射
使用电源：AC220V±22V，50Hz/±1Hz 大气压力：76kPa～106kPa
5．操作程序
5.1使用血培养瓶的基本要求
5.1.1注意有效期，在有效期内使用。
5.1.2.使用前应仔细阅读说明书，使用前发现培养瓶浑浊、沉淀、变色等现象，不应使用。
5.1.3应正确采集标本，注意皮肤消毒程序，避免造成由污染菌引起的假阳性。
5.2血培养瓶的选择：
根据患者年龄段及标本实际情况选用相应血培养瓶（需氧瓶、厌氧瓶、儿童瓶）。
5.3血培养瓶的加样：
用无菌注射器采集（成人瓶8～10ml、儿童瓶采集1～3ml）血液或其它体液标本，注入到培养瓶中
5.4启动血培养系统
5.4.1打开仪器背板的电源开关，并按下仪器开关。
5.4.2等待系统启动完毕后，观察温度达到培养要求，即可使用
5.5关闭血培养系统
5.5.1遇到下列情况需关闭系统：屏幕触摸无反应、操作键盘或鼠标无应答。
5.5.2按下仪器开关，待屏幕无显示后，关闭电源开关。
5.6装载血培养瓶
5.6.1点击“装瓶”进入装瓶界面，装载前检查每一个培养瓶及其底部的颜色，若有裂缝则不能使用。
5.6.2当条形码输入栏光标闪烁时，通过扫描枪或手动键盘输入培养瓶条形码，“检测周期”可根据需要自行修改，最后将培养瓶瓶底插入可用孵育单元, 孔号出现时，单击“确认”，完成装瓶操作。
5.6.3如果不点击“装瓶”，而直接将培养瓶插入可用孵育单元，系统会自动默认为匿名瓶状态。
5.6.4装瓶状态时，必须输入条形码, 如果不输入条形码而直接点“确定”完成装瓶动作，系统将视该培养瓶为匿名瓶。
5.6.5注意培养瓶必须装入到可用单元，否则可能当废瓶处理，系统不记录数据，也没有任何提示。
加载完所有培养瓶后，关闭仪器柜门。
5.7卸载血培养瓶
5.7.1把培养瓶取出，弹出卸瓶对话框，会显示该培养瓶的条形码和孔号，此时需核对培养瓶的信息。
5.7.2如果当前取出的是匿名培养瓶，可在弹出的卸瓶对话框“条形码”为其补充条形码，点“确定”即可5.7.3取出已检测出阴、阳性结果的培养瓶，当弹出卸瓶提示时点击“确定”完成卸瓶操作，若点击“取消”则无法完成卸瓶，仪器会一直提示“有瓶卸出，请把瓶插进去”。
5.7.4取出的培养瓶如果还未有结果，还在培养状态的，点“确定”则完成卸瓶操作，点“取消”则该培养瓶在显示屏对应的孔号会提示“请装瓶”，把该培养瓶插回原来的孵育单元，继续培养。
5.7.5有特殊情况，仪器内已没有培养瓶在，但显示屏上培养孔显示区有某些孔号出现“请装瓶”，可点击“卸瓶”进入卸瓶对话框，“孔号”输入需要卸瓶的孔号，点“确定”即可完成卸瓶操作。
5.8阳性标本处理
5.8.1用75%酒精消毒瓶口，颠倒混匀培养瓶数次。
5.8.2将无菌注射器针头插入瓶口，抽取培养液接种于血平板、巧克力平板上，根据培养瓶种类的不同置于不同的环境下进行培养18～24小时。
5.8.3同时抽取少量培养液涂布于载玻片上用于革兰染色镜检，结果作为危急值报告临床，并记录。
待培养出细菌后再做鉴定药敏试验并出具最终报告。
5.8.4如临床要求立即做药敏实验,则从阳性瓶中抽出一些培养液做直接药敏实验,此结果仅供参考,待培养出细菌后再做药敏试验并出具最终报告。
6.质量控制
6.1质控方法
6.1.1血培养瓶的质控
6.1.1.1外观检查检查外观是否完整，有否破损，有否污染等。
6.1.1.2每新进一批血培养瓶应做一次质控，需用相应质控菌株做质量控制以检测血培养系统的有效性；材料和
试剂批号必须记录并保存。
6.1.2无菌试验
随机抽一只血培养瓶，将血培养瓶放入仪器培养，操作步骤同“操作程序”，五天后应无细菌生长，结果为阴性。
6.1.3温度质控
每次开门时需查看屏幕显示温度应在35±1.5℃。
6.2失控原因分析和处理：错误使用质控菌株；没有按照标准操作程序操作；血培养瓶超出有效期；血培养系统严重误差。
6.3无上述因素失控应进一步分析和处理：重新试验以确认误差结果；确认所有试剂均在有效期内，并妥善保存确认培养箱温度是否正常；确认标准菌株是否污染；确认标准菌株接种平板正确、孵育时间正确；确认无菌操作，以防空气污染杂菌。
6.4如误差无法解决，应联系厂家的技术支持人员。
7．维护保养
7.1常规清洁
用湿毛巾擦拭，再用完全干燥的毛巾擦拭干净。
7.2标本溢漏后的清洁
7.2.1对溢漏到仪器上的消毒
立即用5％含氯消毒剂经20倍稀释后进行消毒，将物体表面与漂白液充分接触(15—30分钟)，然后用湿毛巾擦拭，再用完全干燥的毛巾擦拭干净。
7.2.2对溢漏到仪器内部的消毒
仔细检查溢漏的程度。
如果培养箱被污染，取走发生溢漏的培养瓶。
如果支架被污染，卸载受污染支架内培养瓶。
然后用5％含氯消毒剂经20倍稀释后进行消毒，将物体表面与漂白液充分接触(15—30分钟)，然后用湿毛巾擦拭，再用完全干燥的毛巾擦拭干净。
7.3仪器在使用过程中如发现某孔位需要清洁，请参照如下方法处理：
7.3.1插入可吸收性材料，如纱布，将孔中污浊去除，小心地移动并将纱布丢弃在生物废物筒中。
7.3.2用纱布醮取10%漂白液清洗孔的内壁并将纱布丢弃在生物废物筒中。
7.3.3在孔中插入若干层在10%漂白液中浸泡过的纱布，并在孔中放15—30分钟消毒。
7.3.4将纱布取出，丢弃在生物废物筒中。
7.3.5用蒸馏水湿润过的纱布擦洗孔的内壁。
7.3.6将该检测孔在空气中自然干燥。
7.3.7如果孔仍不能使用，请做好标记，通知工程技术人员。
8.校正
8.1单元校正：校正单个检测孔，需与标准棒配合使用，1年至少有1次由专业技术员维护。
8.2屏幕校正：用户可以按照实际需要校正触摸屏点击位置的准确性。
8.3温度校正：当温度超出35±1.5℃范围，需要由专业技术人员维护，1年至少有1次由专业技术人检定。
9.应急处理
9.1温度失控的处理：可能是操作箱门开启时间过长，应关闭箱门半小时以上，再观察。
9.2操作无应答处理：可能是系统上传下载的信息量过大，应暂停操作半小时以上或重新启动系统，再观察。
9.3出现不能解决的故障应及时联系工程师处理并告知微生物实验室负责人。
10.注意事项
10.1血培养系统要求清洁环境，应尽量防尘，环境温度应在要求范围内(室温≤35℃)，且勿将空调风向直接对准仪器。
工作电压要求要稳定，建议接≥1000V A的稳压电源。
10.2由于该设备的显示屏为触摸屏，在操作过程中请勿使用尖锐物体点击屏幕，当触摸屏失效时用户可用鼠标进行操作。
10.3用户使用仪器之前，请仔细阅读使用说明书。
10.4本产品仅供有资质的医护人员在医疗单位使用。
10.5不按要求使用本仪器，可能导致个人防护失效。
10.6本仪器停止使用后，由专业性的人员进行处理，防止生物污染。
参考文献
［1］全自动血培系统说明书
［2］中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL42：2012医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明
［3］中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02：2012医学实验室质量和能力认可准则。