(整理)兽医传染病试验.
兽医传染病学实验指导

兽医传染病学实验室须知一、注意个人防护、避免病原传播人类活动是促成动物传染病在不同地区和动物群间传播与流行的主要因素。
一些人畜共患传染病如炭疽、狂犬病、布鲁氏菌病、结核病、禽流感、猪链球菌病、鼻疽等不仅能够引起动物发病,而且可以造成人类感染,甚至在人群中广泛流行。
目前已知能够感染人类的病原体达1415种,其中868种(61%)可在人和动物间交叉感染和传播。
在兽医传染病学实验中,由于实验对象和材料大多与患病动物及其病原微生物有关,操作者的疏忽可能感染自身、危及生命, 甚至造成病原扩散,引起疾病流行。
因此,实验过程中必须严格遵循兽医传染病学实验室操作规程,具体注意事项如下: 1.接近患病动物或进行实验操作时,必须穿着工作衣帽,必要时(接触或操作危险材料时),要佩戴口罩、眼罩、穿戴胶靴及手套等。
上述衣物在实验结束后需要立即就地消毒清洗;必须携回处理时,要包扎严密,保证安全,防止病原体散播。
2.实验操作期间,务须严肃认真、聚精会神。
操作时,不得进食、饮水和吸烟,勿以手指或其他器物等接触口唇、眼、鼻及面部。
手及面部有伤口时,应避免操作危险材料,必要时应涂碘酒,或用胶布包扎伤口或戴防护手套。
3.危险材料及污染器物的处理(1)使用病理性材料,尤其是危险材料时应严格遵循无菌操作,盛放液体的器皿应轻拿轻放,确保液体不外溢。
(2)实验用过的动物尸体、内脏、血液等废弃病料,以及废弃的病原培养物、生物制品等须深埋或经过严格消毒处理(焚烧、煮沸、高压灭菌等)后丢弃到公共垃圾处理场,严禁将未经消毒的危险性材料直接丢弃。
(3)用过的棉球、纱布、吸水纸等污物须置于固定容器内统一消毒处理,不得任意丢弃。
(4)使用后被污染的器械、器具应定点存放,统一清洗、消毒。
4.意外事故的处理:一旦危险性材料滴出或打翻,或出现其它意外,应立即报告指导教师,以便及时、正确处理。
(1)皮肤被扎伤、污染,应立即用2%来苏儿(或其他适当的消毒药)洗涤,或2%碘酊棉球擦拭,然后75%酒精棉球再次涂擦。
动物传染病学(彭大新)实验一鸡白痢的检疫

实验一鸡白痢的检疫(一)实验目的熟悉和掌握鸡白痢的血清学检疫方法。
(二)实验原理快速全血平板凝集反应(三)实验准备1.抗原:鸡白痢全血凝集反应抗原,由农业部中国兽药监察所购得,或其他来源的合格产品。
抗原为福尔马林灭活的细菌悬液,每毫升含菌100亿。
2.用具:洁净玻璃板、干净纱布、7#或9#注射针头、75%酒精棉球、酒精灯、移液器、手电筒。
(四)实验步骤1.先将抗原瓶充分摇匀,用移液器吸取抗原20 μL,垂直滴于玻片上;2.用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖,以移液器吸取血液一满环(约0.02m1)混入抗原内;3.随即搅拌均匀,并使散开至直径约2cm为度;4.用手电筒反照玻璃板,仔细观察并判定。
(五)结果分析1.抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性。
2.2分钟以内不出现凝集,或出现均匀一致的极微小颗粒,或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应。
3.在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性者,判为可疑反应。
(六)注意事项1.抗原应在2~15℃冷暗处保存,从杀菌之日算起有效期6个月。
2.本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡,幼龄鸡敏感度较差。
3.本试验应在20℃以上室温中进行。
4.手电筒反照可以不分阴晴天或白昼。
5.每次使用金属管可以用酒精棉球擦干、消毒。
6.使用酒精灯要特别注意安全:防鸡翅掀翻酒精灯或防工作服碰到火焰。
(七)思考题1.试比较鸡白痢检疫的全血平板凝集反应与血清平板凝集反应的异同点。
2.我国绝大多数鸡群鸡白痢的阳性率比较高,试分析其原因和拟定防制对策。
实验二巴氏杆菌病的实验室诊断(一)实验目的初步掌握巴氏杆菌病的微生物学诊断步骤和方法。
了解巴氏杆菌病的病理变化。
(二)实验准备染色液:美兰染色液、瑞氏染色液、革兰氏染色液(草酸铵结晶紫、革兰氏碘液、95%酒精、沙黄水溶液)、用具:搪瓷盘、碘酊棉、75%酒精棉、组织镊、手术刀(带柄)、普通剪刀、塑料洗瓶、纱布、酒精灯、载玻片、吸水纸(载玻片大小)、铂耳、显微镜、擦镜纸、染色废液缸、甲苯、镜油、血培养基平板、巴氏杆菌病死鸡(三)实验步骤1、分离培养(划线培养)①无菌解剖病死鸡暴露胸腹腔,露出其心、肝、肺等。
兽医传染病学试验

《兽医传染病学实验》
课程名称兽医传染病学实验课程编号1720271
英文名称Experiment Techniques of Veterinary
Lemology
课程类型专业核心课
总学时18 学分 1
实验项目数 6 验证性实验个数 2 综合性实验个数 2 设计性实验个数 2 预修课程兽医微生物学、兽医免疫学、兽医病理学适用对象动物医学
课程简介
兽医传染病学实验是《兽医传染病学》的配套课程,以畜禽重大疫病的实验室诊断与免疫监测技术的实践为核心,以人畜共患病、猪病和禽病为重点。
本课程共安排6个实验,其中畜禽舍的消毒、病畜剖检以及病料的取材是兽医基本常识;禽流感的免疫效果检测是兽医基本技能;细菌病的诊断以巴氏杆菌病为典型病例,病毒病的诊断以猪瘟为典型病例。
系列实验的开展将强化学生应用凝集试验、血凝/血凝抑制试验、ELISA等基本技能,熟悉疫病的诊断与防治技术规程,对畜禽疫病的诊断达到具一反三的效果。
《兽医传染病学》(汇总版)

兽医传染病学引言概述:兽医传染病学是研究动物传染性疾病的一门学科,涉及动物健康、公共卫生和环境保护等领域。
通过对传染病的病原体、传播途径和防治措施进行深入研究,可以有效地防控和治疗动物传染病,并保障人类的健康和生产的持续发展。
正文内容:一、病原体的种类和特征1.细菌病原体1.1线形菌属1.2嗜酸菌属1.3弧菌属1.4菌样体1.5隐球菌属2.病毒病原体2.1RNA病毒2.2DNA病毒2.3反转录病毒2.4空壳病毒2.5复制酶3.真菌病原体3.1霉菌属3.2酵母菌属3.3放线菌属3.4真菌代表种3.5真菌的生物学特性4.寄生虫病原体4.1约线虫属4.2蛔虫属4.3蚂蚁虫属4.4疟原虫属4.5并殖吸虫属5.衣原体和支原体病原体5.1衣原体5.2支原体5.3衣原体感染与支原体感染二、传播途径1.直接传播1.1联系性传播1.2父子传播1.3同种群传播1.4接触性传播1.5分泌物传播2.空气传播2.1飞沫传播2.2细菌病原体空气传播2.3病毒病原体空气传播2.4真菌病原体空气传播2.5寄生虫病原体空气传播3.食物传播3.1水源传播3.2食物原料传播3.3食品加工传播3.4食品贮存传播3.5食品接触传播4.媒介传播4.1蚊虫媒介传播4.2蜱虫媒介传播4.3蝇虫媒介传播4.4蚤虱媒介传播4.5虱螨媒介传播5.环境传播5.1土壤传播5.2水源传播5.3大气传播5.4农产品传播5.5动物籍介传播三、预防和控制措施1.疫苗防控1.1疫苗的分类和原理1.2疫苗的研发和生产1.3疫苗的接种和免疫程序1.4疫苗的安全性和效果评估1.5疫苗的应用策略和普及推广2.药物治疗2.1抗生素治疗2.2抗病毒药物治疗2.3抗真菌药物治疗2.4抗寄生虫药物治疗2.5免疫调节剂治疗3.环境卫生控制3.1动物场所的清洁和消毒3.2饮用水和饮水设备的卫生控制3.3保持动物饲养环境的整洁和卫生3.4土壤和水源的治理和保护3.5动物隔离和交通管制措施4.动物检疫和监测4.1动物进口检疫程序4.2动物出口检疫程序4.3动物集市和交易场所的监测和控制4.4野生动物的检疫和监测4.5全面性监测和报告制度建立5.公众教育与宣传5.1传染病知识的普及5.2养殖和屠宰工艺的宣传5.3食品安全和个人卫生的教育5.4疫情应对和紧急措施的宣传5.5合理使用药物和兽药的普及总结:兽医传染病学是一门涵盖广泛且重要的学科,深入研究动物传染病的病原体和传播途径对于预防和控制传染病具有重要意义。
《兽医传染病学》测试题含参考答案

《兽医传染病学》测试题含参考答案一、单选题(共30题,每题1分,共30分)1、通过疫苗免疫防控猪流行性腹泻,主要是免疫哪种猪群A、公猪B、育肥猪C、仔猪D、母猪正确答案:D2、猪接触传染性胸膜肺炎主要传播途径:A、直接接触传播B、粪口途径传播C、空气飞沫传播D、垂直传播正确答案:C3、鸡马立克病表现为劈叉姿势属于A、皮肤型B、眼型C、神经型D、内脏型正确答案:C4、流行性乙型脑炎经()传播A、老鼠B、蜱虫C、库蚊D、猫正确答案:C5、对非洲猪瘟的描述正确的有()A、核酸为线状双股RNB、传播速度很块C、可以用强酸强碱杀灭D、非洲猪瘟病毒属的唯一成员正确答案:D6、仔猪黄痢的病原是()A、产气荚膜梭菌B、沙门菌C、大肠杆菌D、巴氏杆菌正确答案:C7、圆环病毒属于什么病毒科A、副黏病毒科B、冠状病毒科C、正黏病毒科D、圆环病毒科正确答案:D8、关于链球菌描述正确的是A、葡萄状排列B、自然界广泛分布C、只有一个血清型D、革兰阴性菌正确答案:B9、鸭瘟病毒属于A、冠状病毒B、动脉炎病毒C、疱疹病毒D、圆环病毒正确答案:C10、肾型传支主要发病日龄为A、开产初期B、2-4周龄C、开产中期D、10-15周龄正确答案:B11、梭菌性肠炎主要发生于哪个阶段的猪群?()A、1~3周龄B、1~2周龄C、1周龄内D、断奶仔猪正确答案:C12、以气囊炎、心包炎、肝周炎为特征的鸡大肠杆菌病常发于()。
A、产蛋高峰期B、产蛋初期C、1周龄内D、3-6周龄正确答案:D13、以下能引起猪繁殖障碍的病毒是哪个A、口蹄疫病毒B、传染性胃肠炎C、流行性腹泻D、圆环病毒正确答案:D14、布鲁菌有致病性的有六种,其中()最易感染人。
A、马耳他布鲁菌B、流产布鲁菌C、猪布鲁菌D、犬布鲁菌正确答案:A15、传染性支气管炎病毒的基因分型多基于A、N基因B、HA基因C、M基因D、S1基因正确答案:D16、猪瘟病毒与哪一种病毒抗原关系密切A、伪狂犬病病毒B、狂犬病病毒C、牛病毒性腹泻病毒D、猪繁殖与呼吸综合征病毒正确答案:C17、传染性喉气管炎病鸡特征性表现为A、痛风B、产蛋下降C、法氏囊肿大出血D、咳出带血的黏液或血凝块正确答案:D18、伪狂犬病毒描述正确的是A、可在多种细胞上增值B、众多血清型C、RNA病毒D、只能在PK细胞上生长正确答案:A19、兔瘟病毒主要感染对象A、任何阶段B、青年兔C、老年兔D、3月龄以下的兔正确答案:B20、猪感染急性型巴氏杆菌病的特征性病变为()A、胃肠有卡他或出血性炎症B、胸腔、心包积液C、全身黏膜、浆膜、实质器官和淋巴结出血,纤维素性肺炎,D、肺有出血、气肿、水肿和不同程度的红色肝变,肺与胸腔黏连。
兽医传染病学题库(含答案)

兽医传染病学题库(含答案)一、单选题(共31题,每题1分,共31分)1.流行性乙型脑炎经()传播A、老鼠B、蜱虫C、猫D、库蚊正确答案:D2.猪瘟病毒描述错误的是A、只有一种血清型B、毒株之间无毒力差异C、RNA病毒D、E2蛋白是重要的结构蛋白正确答案:B3.种鸡鸡白痢检疫净化主要是避免A、空气传播B、垂直传播C、水平传播D、蚊虫传播正确答案:B4.猪接触传染性胸膜肺炎的敏感猪群是:A、一周龄仔猪B、断奶仔猪C、育肥猪D、妊娠母猪正确答案:B5.猪接触传染性胸膜肺炎主要传播途径:A、空气飞沫传播B、直接接触传播C、垂直传播D、粪口途径传播正确答案:A6.猪瘟弱毒疫苗保存的条件是A、常温B、10℃C、零下冷冻保存D、4℃正确答案:D7.猪接触传染性胸膜肺炎的致病原是:A、大肠杆菌B、胸膜肺炎放线杆菌C、支气管败血波氏杆菌D、副猪嗜血杆菌正确答案:B8.犬瘟热病毒具有几个血清型A、2个B、7个C、1个D、5个正确答案:C9.不能作为猪支原体肺炎治疗的药物是A、支原净B、强力霉素C、青霉素D、泰乐菌素正确答案:C10.小反刍兽疫在我国被划分为A、二类动物传染病B、三类动物传染病C、一类动物传染病D、其他正确答案:C11.急性兔瘟的主要临诊表现A、体温正常B、死亡率低C、气管流带血的泡沫样液体D、皮毛脱落正确答案:C12.鸡马立克病表现为劈叉姿势属于A、眼型B、神经型C、内脏型D、皮肤型正确答案:B13.小反刍兽疫最主要感染的动物A、猫B、羊C、老鼠D、犬正确答案:B14.怀疑动物发生口蹄疫时,需采集病料送检,通常采集的是:A、出血的胃黏膜B、水疱皮或水疱液C、出血的肠黏膜D、虎斑心正确答案:B15.猪副猪嗜血杆菌病的致病原是:A、大肠杆菌B、副猪嗜血杆菌C、胸膜肺炎放线杆菌D、支气管败血波氏杆菌正确答案:B16.传染性法氏囊病的英文简称为A、NB、IBD正确答案:B17.结核病病原有致病性的有三种,感染多种动物其中()最易感染。
兽医传染病学实验内容

兽医(小动物)传染病学实验内容实验一消毒一、目的1.掌握消毒的方法2.了解常用化学消毒药及其使用方法3.掌握检查消毒质量的方法二、消毒的种类和方法消毒的种类:1.预防性消毒:结合平时的饲养管理对畜舍、场地、用具和饮水等进行定期消毒,以达到预防一般传染病的目的。
2.随时消毒(应急消毒):在发生传染病时,为了及时消灭刚从病畜体内排出的病原体而进行的临时性的消毒。
3.终末消毒:在病畜解除隔离、痊愈或死亡后,或者在疫区解除封锁之前,为了消灭疫区内可能残留的病原体所进行的全面彻底的大消毒。
消毒的方法:1.机械性清除:用清扫、洗刷、通风等机械性的方法清除存在于环境中的病原体。
2.物理学消毒:用物理学方法杀灭环境中的病原体。
阳光高温:火焰烧烤、煮沸消毒、蒸气消毒3.化学消毒:利用化学药物杀灭病原微生物。
4.生物热消毒:这是消毒粪便常用的消毒方法。
在粪便的堆沤过程中,利用粪便中的微生物发酵产热,可以使温度高达70℃以上,经过一段时间(1~3个月),可杀死细菌、病毒、寄生虫卵等而达到消毒的目的。
三、化学消毒剂的分类根据化学结构和作用不同可分为1.碱类 6.醛类2.酸类 7.表面活性剂3. 酚类 8.醇类4.氧化剂 9.重金属类5.卤素类 10.染料类畜舍常用消毒药的特点与选用1.氢氧化钠对病毒和细菌有较强的杀灭作用,2%-3%的热水溶液喷雾消毒,用于被病毒或细菌污染的畜舍、场地和食具等。
4%-5%的热水溶液对芽胞杆菌亦有很强的杀灭力。
氢氧化钠对金属制品有腐蚀性,消毒完毕要立即用水洗干净;对皮肤、被毛和粘膜亦有腐蚀作用,因此,消毒畜舍及食具时,应移出动物,隔天用水冲洗场地及食具后,方能让其入内。
2.石灰乳石灰乳是由生石灰1份加水1份制成熟石灰,然后用水配成10%-20%的混悬液。
本品有效强的杀灭病毒和细菌的作用,但对芽孢无效,可用于畜舍地面、墙壁及畜栏等处消毒。
由于熟石灰可丛空气中吸收二氧化碳而变成无消毒作用的碳酸钙,故石灰乳应现配现用。
兽医传染病学:家畜传染病学总论

兽医传染病学:家畜传染病学总论一、引言兽医传染病学是研究动物传染病的发生、发展、传播、预防和控制的科学。
在家畜养殖业中,传染病对动物的生长发育、繁殖性能以及产品质量产生严重影响,给养殖户带来巨大的经济损失。
因此,了解家畜传染病的病因、传播途径、流行特点、诊断方法和防治措施,对于保障家畜养殖业健康发展具有重要意义。
二、家畜传染病的病因及传播途径1.病因家畜传染病的病因主要包括病毒、细菌、真菌、寄生虫等病原微生物。
这些病原微生物侵入动物机体后,破坏动物正常生理功能,导致疾病的发生。
2.传播途径家畜传染病的传播途径主要有直接接触、间接接触、空气传播、食物传播、垂直传播等。
直接接触传播是指患病动物与健康动物直接接触,如交配、哺乳等;间接接触传播是指健康动物接触患病动物排泄物、分泌物、尸体等污染物;空气传播是指病原微生物通过空气传播,如咳嗽、打喷嚏等;食物传播是指动物摄入含有病原微生物的食物或饮水;垂直传播是指病原微生物通过母体传给胎儿或新生儿。
三、家畜传染病的流行特点1.季节性家畜传染病的流行具有一定的季节性,如冬季易发生呼吸道传染病,夏季易发生肠道传染病等。
2.周期性家畜传染病的流行具有一定的周期性,如猪瘟、口蹄疫等疾病每隔一定时间就会出现一次大流行。
3.地域性家畜传染病的流行具有一定的地域性,如某些传染病在特定地区高发。
4.群发性家畜传染病的流行往往呈现群发性,如一个养殖场内的动物短时间内大量发病。
四、家畜传染病的诊断方法1.临床诊断通过观察患病动物的症状、体征,结合流行病学特点,对疾病进行初步诊断。
2.实验室诊断实验室诊断包括病原体分离、血清学检测、分子生物学检测等。
通过对病原微生物的分离、培养、鉴定,以及对动物体内抗体的检测,可以确诊家畜传染病。
五、家畜传染病的防治措施1.加强饲养管理加强饲养管理是预防家畜传染病的基础。
养殖户应保持养殖环境清洁卫生,定期消毒,合理饲养,增强动物体质,提高抗病能力。
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实验二病料的采集、保存及送检一、目的掌握被检病料的采取、保存、送检的方法。
二、材料实验动物(鸡)、瓷盘、剪子、镊子、酒精灯、酒精、接种环、载玻片、火柴棒等。
三、病料的采取1.采取病料的基本原则(1)采集最适病料理想的病料,应是无菌采取的含病原微生物量高的血液、器官组织或分泌物和排泄物。
因此要根据疾病的病性采取合适的病料,如无法估计是何种疾病时,应根据临床症状和病理变化采集病料或全面采取病料。
取材时应注意病原微生物感染所致疾病的类型(如呼吸道感染疾病、胃肠道感染疾病、皮肤和粘膜性疾病、败血性疾病等)、病原微生物的侵入部位、病原微生物感染的靶器官等。
细菌检验病料应当是采自未经抗菌药物治疗的患病动物,并且应多做几张涂片。
(2)适时采集采集病料的时间一般在疾病流行早期、典型病急性期,此时病原微生物的检出率高;后期由于体内免疫力的产生,病原微生物减少,检测病原微生物比较困难,同时可能出现交叉感染,增加判断的困难性。
在采集供抗体测定用的血清时,可适时地采集急性期和恢复期的两份血清样品,一般两份血清的间隔时间为14~2ld。
内脏病料的采取,须于动物死后立即进行;夏季最迟不超过4~6h,冬天不超过24h,否则时间过长,由肠内侵入其他细菌,致使尸体腐败,有碍于病原菌的检出。
供做切片的样品采取后必须立即投入固定液,否则时间过长,会使细菌和组织细胞死亡、溶解,影响检验结果。
有条件做现场培养时,剖开尸体后应进行接种培养,然后采样,最后剖检。
(3)无菌操作采集病料所用的器械及容器要进行严格的消毒:刀、剪、镊子等金属用具可煮沸消毒30min,使用前最好用酒精擦拭,并在火焰上烧一下;器皿(玻制、陶制及珐琅制等)在高压灭菌器或干烤箱内灭菌;软木塞和橡皮塞应高压灭菌;载玻片用2%~5%碳酸钠煮沸消毒5~10min,煮沸后用清水冲洗干净,拭干保存或浸泡于95%酒精中以备使用;注射器和针头放于清洁水中煮沸30min即可,或用一次性注射器。
病料采取过程都应该无菌操作,尽量避免杂菌污染。
采取一种病料,使用一套器械,或器械酒精擦拭火焰灭菌后再采取另一种病料;一种病料放入一种容器,不可混放。
(4)剖前检查若有突然死亡或病因不明的尸体,须先采取末梢血液制成涂片,镜检,观察是否有炭疽杆菌存在。
若疑似炭疽时,不得进行解剖;如需要剖检并获取病料时,应经上级有关部门同意,选择合适的场地,做好严格的防范工作,剖后要进行严格的消毒处理。
只有在确定不是炭疽后,方可进行剖检。
2.病料采集的方法(1)液体材料一般用灭菌棉拭子采取破溃的脓汁、鼻液、阴道分泌物与排泄物。
未破的脓肿、胸水、腹水在皮肤表面消毒后,用无菌注射器抽取。
(2)血液无菌采取血液,供病原培养、抗体检测和血液检查之用。
体型较大的单蹄和偶蹄类动物少量血样可以从耳背静脉采血;毛皮动物少量采血可通过耳壳外侧静脉采取;鼠类可以通过尾尖、耳背静脉、眼窝内血管采血;兔可从耳背静脉、颈静脉、心脏等处采血;鸟类可以从肘关节内侧的翅静脉、跖部内静脉或心脏采血。
(3)乳汁乳房先用消毒药水洗净(取乳者的手也应事先消毒),并把乳房附近的毛刷湿,最初所挤的3~4股乳汁弃去,然后再采集10ml左右乳汁于灭菌试管中。
若仅供显微镜直接染色检查,则可于其中加入0.5%的福尔马林液。
(4)淋巴结及内脏组织应在尸体解剖后立即采取。
将淋巴结、肺、肝、脾及肾等有病变的部位各采取1~2cm3的小方块,分别置于灭菌容器中,并尽可能采取有病变及病变交界处的部位。
(5)胃肠及内容物可将胃肠剪下,两端扎好,送往实验室。
或用烧红的器具烧烙表面后穿一小孔,用灭菌棉拭子取其内容物,放入无菌的器皿内或放入装有生理盐水或PBS的试管内。
(6)脑、脊髓按病理解剖方法取出脑、脊髓。
取一部分放入10%福尔马林溶液的瓶中,供组织学检查;一部分放入50%甘油生理盐水瓶中,供微生物学检查。
或者将头部取下,用塑料口袋包好直接送检。
(7)胆汁先用烧红刀片或铁片烧烙胆囊表面,再用灭菌细管或注射器刺入胆囊内吸取胆汁,置于灭菌试管中。
(8)皮肤去大小约10×10cm2的皮肤一块,保存于30%甘油缓冲溶液中,或10%饱和盐水溶液中,或10%福尔马林液中。
(9)骨头需要完整的骨头时,应将附着的肌肉和韧带等全部除去,表面撒上食盐,然后包于浸过5%石炭酸水或0.1%升汞液的纱布或麻布中,装于木箱内送到实验室。
(10)流产胎儿及小动物尸体将流产胎儿及小动物尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中,装于木箱内送到实验室。
二、病料的保存1.常用保存剂的配制(1)30%甘油缓冲溶液纯中性甘油 30mlNaCl 0.5g碱性磷酸钠 1.0g0.02%酚红 1.5ml中性蒸流水加至 100ml 混合分装后,0.105Mpa高压灭菌30min(2)50%甘油缓冲盐水溶液NaCl 2.5g酸性磷酸钠 0.46g碱性磷酸钠 10.74g纯中性甘油 150ml中性蒸流水 150ml 混合分装后,0.105Mpa高压灭菌30min(3)10%福尔马林溶液取福尔马林10ml加入蒸馏水90ml即成。
(4)饱和盐水溶液取一定的蒸馏水加入纯NaCl,不断搅拌至不能溶解为止(一般为38%~39%左右),然后用滤纸过滤。
(5)鸡蛋生理盐水溶液先将新鲜鸡蛋的表面用碘酒消毒,然后打开内容物倾入灭菌的三角瓶中,加入灭菌盐水(占总量的10%),摇匀后,用无菌纱布过滤,然后加热至56~58℃30min,第2d及第3d按上法再加热一次,即可应用。
2.常用保存方法(1)液体病料检查抗体用的血液,不加抗凝剂,待凝血后,分离血清放入青霉素小瓶中。
供病原分离培养用的液体病料,同容器一起放入有冰的保温瓶或4℃冰箱内。
(2)供细菌学检验的实质脏器若1~2d内能送到实验室,可放在有冰的保温瓶或冰箱内,也可放入灭菌液体石蜡或30%甘油缓冲盐水内。
如无冰,也可在保温瓶内放氯化铵500g加水1500ml,使保温瓶内保持O℃左右达24h。
(3)供病毒学检验的实质脏器应尽快送检,如不能即刻送检而需要保存时,必须保持在冷的环境中,48h内送到实验室。
一般放在50%甘油缓冲盐水溶液或鸡蛋生理盐水溶液中,4℃保存最好,原因是冻化过程能使病毒破坏。
如需保存较长时间才能进行检查,最好放在一20℃以下或干冰中保存。
(4)病理组织病料采取的病料立即放入10倍体积的10%福尔马林溶液或95%~100%酒精中,如用10%福尔马林溶液固定组织时,经24h应重换新鲜液一次。
神经系统组织(脑、脊髓等),需固定于10%中性福尔马林溶液内(福尔马林溶液的总容积中加入5%~10%碳酸镁)。
在寒冷季节,为了避免病料冻结,在运送前,可将预先固定的病料置于含有30%~50%甘油的10%福尔马林溶液中。
三、病料的送检供细菌检验用的病料,要防止腐败,必须及时送检。
一般可用有冰块的保温瓶或其他低温条件,以使病料不腐败。
最好由专人送检,并带好送检的有关病情、病例、剖检等记录,以供检验人员的参考。
为避免散播病原,盛有病料的容器,瓶口要盖紧,用胶布封好或石蜡封固,并用消毒液充分擦拭容器的表面。
瓶上加贴标签,注明样品来源、种类、保存方法、采集时间等。
为避免病料外漏,应立放于金属筒内,填塞防震填充料(木屑、纸渣、稻草、塑料泡沫的渣屑等)。
实验三免疫接种一、目的掌握免疫接种的方法和步骤,熟悉生物制剂的保存、运送和用前检查方法。
二、内容及方法(一)免疫接种的方法按疫苗使用说明的方法接种,常用以下几种方法。
1.注射免疫操作简单,剂量准确。
(1)皮下注射法部位:马、牛等大家畜在颈侧,猪在耳根后方,家禽在胸部、大腿内侧。
先剪毛,用酒精或碘酒消毒,然后注入药液。
优点:操作简单,吸收较皮内快。
缺点:使用剂量多,反应较皮内大。
用途:疫苗和免疫血清。
(2)肌肉注射法部位:马、牛、猪、羊在臀部和颈部,家禽在胸部。
先剪毛,用洒精或碘酒消毒,然后把针头刺入肌肉,注入药液。
优点:操作简单,吸收快。
缺点:一个部位不能大量注射,臀部接种不当时易引起跛行。
用途:疫苗和血清。
(3)皮内注射法部位:马在颈侧、眼睑,牛羊在颈侧、尾根、肩胛中央,猪在耳根,鸡在肉髯。
优点:用量较少,反应小(副作用小),免疫力高(同量与皮下相比)。
缺点:比较麻烦。
用途:痘苗和诊断液。
(4)静脉注射部位:马牛羊在颈静脉,猪在耳静脉,鸡在翼下静脉。
优点:使用剂量大,见效快,可及时抢救病畜。
缺点:比较麻烦,易引起过敏反应(接种异种动物血清时,即血清病)。
用途:免疫血清。
2.皮肤刺种法鸡新城疫、鸡痘疫苗常用此法接种,选定翅内侧无血管处,用刺种针或钢笔尖蘸取疫苗刺入。
3.滴鼻或点眼法用滴管吸取疫苗滴在鼻孔内或眼结膜。
4.口服法用法:将疫苗混入饮水或拌入饲料通过饮水或采食经口免疫。
必须注意,饮水免疫前要停水4~6h,稀释疫苗的水要纯净,尤其不能用含有消毒剂的水稀释疫苗;用于拌疫苗的饲料要新鲜,不宜用酸败或发酵饲料,大小动物要分开喂,使其能均匀吃到含疫苗的饲料;口服免疫前后24h不得饮用任何消毒药物,用活菌制剂时不能应用抗菌药物。
优点:省时、省力。
缺点:每头(只)剂量不准。
5.喷雾法(1)使用仪器气雾发生器。
压力为2kg/cm2(使70%的微粒在1~10um)。
(2)分类室内气雾免疫动物进入室内,关闭门窗,喷头由门窗缝伸入,与动物头部同高,持续20~30min。
室外气雾免疫四周有矮墙的圈内,喷头与动物头同高,人员要走动,站上风,数分钟。
(3)注意操作者要防护自己,带大而厚的口罩穿工作服,胶靴,如出现症状,及时就医。
(4)影响因素雾化粒子大小1~10um,如过大被鼻粘膜阻止,过小吸入后被绒毛运动排除;风力、风速;温度、湿度。
(5)优点省时、省力。
适于大群动物免。
(6)缺点需要的疫苗数量多。
(二)疫苗的保存、运送和用前检查1.疫苗的保存按说明保存。
一般弱毒疫苗保存在—15℃以下,灭活疫苗在4~10℃。
2.疫苗的运送要求包装完善,防止碰坏瓶子和散播活的弱毒病原体,因此,运送疫苗,逐瓶包装,然后装箱。
弱毒疫苗(活疫苗)一般要求“冷链”运送,即需要冷藏工具如冷藏车、冷藏箱、保温瓶等,以免其性能降低或丧失。
严防在高温和日光下运输。
灭活苗运送中也要防止冻结和曝晒。
3.疫苗的用前检查玻璃瓶或安瓿应无破损,瓶塞应密封;瓶签上记载的名称、批号、有效期、容量、检查号码及使用方法等必须清楚;药品色泽及其物理性状必须和药品说明书上记载相符合,否则不得使用。
(三)免疫接种的组织工作接种时的组织工作是特别重要的,因为它可以决定全部措施的结果和成效。
接种时组织工作如下:1.进行免疫接种时,应事先取得当地场、队等领导的支持,并商请给以人力物力等保证。
并向有关人员宣传免疫接种的基本知识和注意事项等。
2.组织好接种人员,准备好场地和保定工具。
3.编订全部注射家畜的登记表册,进行编号,避免错乱而造成重复注射。