CLSI血培养推荐指南
血培养的原则和流程之消毒篇

样本采集和运输
• 血培养采集部位
• 血培养应被采集自静脉而非动脉 • 采自静脉植入装置如留置导管或留置口的血培养会伴有高的 污染率 • 如果血培养是通过静脉植入管道采集的,则不必
• 弃去起始部分的血液,或 • 使用生理盐水冲洗管道以去除残留的肝素或其他抗凝剂
• 在皮肤消毒前,血培养瓶的橡皮塞需使用70%异丙基酒精消 毒并干燥 • 采血部位皮肤消毒步骤:
抽取血培养的数量
• • • 最佳的血培养数量是不确定的,但是只抽单瓶的血培养是不够的 多套的血培养可以帮助区别血培养假阳性(如皮肤污染等) 建议:对于可能的心内膜炎患者,起始采集3套血培养,如果在24小时内 仍报告为阴性,则继续采集2套血培养,全部培养一共为5套。
方法和步骤 –影响血液标本中病原菌检出率的重要因素
• 先使用70%异丙基酒精消毒并干燥 • 再进行正式消毒步骤 • 整个过程严格遵从无菌操作,不允许在消毒后按压静脉,除非带 有无菌手套
• 许多研究表明采血和接种是否需要换针头并无明显的污染率 差异,更换针头会增加针刺伤的风险
定义:污染:血培养中生长的细菌是在样本采集或操作过程中被带入培养的,而非来 自病人的血液
样本采集和运输 • 血培养的数量
• 研究表明,采用全自动的血培养系统每套血 培养采血20ml时
• 一套检出率:65% • 二套检出率:80% • 三套检出率:96%
血培养操作指南

血培养操作指南血培养是一种常见的实验技术,用于检测病原微生物在血液中的生长。
它可以帮助诊断生物样本中的病原微生物感染,并确定其对不同抗生素的敏感性。
本文将介绍血培养的操作指南,包括准备工作、操作步骤和结果解读等内容。
一、准备工作1. 清洁操作区域:确保操作区域干净整洁,避免细菌的交叉污染。
可以使用70%酒精或其他消毒剂对操作台面进行消毒。
2. 准备培养基和试剂:血培养通常使用含有富营养物质的寒天培养基,如血琼脂(Blood agar)或巧克力琼脂(Chocolate agar)。
此外,还需要溶血素试剂用于检测细菌的溶血能力。
3. 样本采集器具:准备血液采集器具,如一次性血管采血器、针头和注射器等,确保采集的血液样本干净无菌。
4. 实验器具消毒:对使用的实验器具进行彻底消毒,如培养皿、注射针、试管等。
二、操作步骤1. 血液样本采集:选择合适的采集部位和采集方法,确保血液样本的质量。
常见的采集部位包括静脉、手指或动脉,具体采集方法请按照医学标准操作。
2. 分配样本:使用无菌的技术将采集的血液样本分配到不同的培养皿中。
常见的分配量为每个培养皿2-5毫升。
3. 涂布培养基:使用无菌的匀涂棒或玻璃棒,将血液均匀涂布在准备好的血琼脂或巧克力琼脂培养基上。
4. 培养条件设置:将涂有血液的培养皿放入恒温培养箱中,设置适当的温度和培养时间。
一般情况下,37℃是最常用的培养温度。
5. 观察培养结果:在培养箱中观察培养皿的生长情况。
如果有细菌或真菌的生长,会在琼脂表面形成菌落。
通常需要培养24小时以上才能获得可靠的结果。
6. 溶血试验:将生长的培养物用溶血素试剂滴于琼脂表面,观察是否有细菌对血细胞进行溶血作用。
7. 结果解读:根据生长的菌落形态和溶血试验的结果,可以初步判断感染的病原菌种类和性质。
进一步的鉴定和确认需要进行进一步的实验和检测。
三、注意事项1. 严格遵守无菌操作:整个实验过程中应遵守严格的无菌操作,防止细菌和真菌的污染。
临床微生物血培养操作指南最新版

临床微生物血培养操作指南最新版下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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(优选)临床血培养的指导原则

皮肤和血培养瓶的消毒方法
美国CLSI推荐皮肤的消毒方法为:
感染性心内膜炎采血方法
血培养采血套数及血量
• CLSI要求每次采集2-3套标本,每套应包括一个需氧培养瓶,一个厌氧 培养瓶
• 一个静脉穿刺点只能采集1套血培养,采集第2套血培养应该选择第2 个静脉穿刺点
• 成年病人不能只采1瓶血培养标本,采血量不足和只做1套血培养所 得得结果是很难正确解释的
Cockrill2004年报告:163位病人,血培养仪
How reliable is a negative blood culture result?
Australia, 2007
• Adequate blood culture volume
• < 1 month: ≥ 0.5 mL • 1 month – 36 months: ≥ 1.0 mL • ≥ 36 months: ≥ 4.0 mL
采血套数及血量
1套(20ml)
2套(40ml)
检出率
65%
80%
3套(60ml) 96%
血培养在需氧瓶和厌氧瓶中的分配及血量
• CLSI建议常规的血培养应该包括至少一个需氧培养瓶和一个厌氧 培养瓶(称“一套”)
• 最近的研究表明:用需氧瓶加厌氧瓶的组合检测出的葡萄球菌, 肠杆菌科菌中某些菌和苛氧菌比一对需氧瓶多。
•
对于婴幼儿患者,采血量不超过患者总血量的1%
体重kg
<=1 1.1-2 2.1-12.7 12.8-36.3 >=36.3
总血量ml
50-99 100-200 >200 >800 >2200
第一套取血量ml( 第二套取血量ml 占全身血量%)
微生物CLSI文件集锦(你想要的都在这里)

微生物CLSI文件集锦(你想要的都在这里)说起临床微生物的CLSI文件,大家首先想到的就是CLSI M100S——《抗微生物药物敏感性试验的执行标准》。
但是其实,与临床微生物相关的CLSI文件很多,截至2017年7月,已多达43个。
下面,小编就给您简单介绍一下吧。
1、M02-A12:Approved Standard中文:抗菌药敏试验的性能标准英文:Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests内容与解释:介绍药物纸片扩散法的质量控制标准和最新折点标准。
2、M06-A2: Approved Standard中文:脱水MH琼脂的评估程序英文:Protocols for Evaluating Dehydrated Mueller-Hinton Agar内容与解释:略3、M07-A10:Approved Standard中文:需氧菌稀释法抗菌药物敏感性试验英文:Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility T ests for Bacteria That Grow Aerobically内容与解释:描述了肉汤稀释法和琼脂稀释法,而且还包含这些方法的标准化操作流程和CLSI推荐方法的性能,局限性,适应性。
4、M11-A8:Approved Standard中文:厌氧菌抗菌药物敏感性试验英文:Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria内容与解释:在过去的几年内,大部分厌氧菌的耐药表型都发生了很大的改变,导致了许多菌种的经验用药的面临很大的挑战。
对于厌氧菌,琼脂稀释法仍然是参考方法,对于调查研究和科研同样都适用。
而且其他的方法的对比标准也进行了说明,肉汤稀释法也应用于临床实验室,但是现在对脆弱拟杆菌和一些抗生素没有标准。
ICU:CRBSI与血培养(全版)

皮下囊感染:
指完全植入血管内装置皮下囊内有感染性积液;常有外表皮肤组织触痛、红斑 和/或硬结;自发的破裂或引流,或外表皮肤的坏死。可伴或不伴有血行感染
CRBSI发病机制
微生物引起导管感染的方式有以下三种:
〔1〕皮肤外表的细菌在穿刺时或之后,通过皮下致导管皮内段至导 管尖端的细菌定植,随后引起局部或全身感染;
Journal of Hospital Infection 〔2007〕 65〔S2〕 171–173
2009- 2010 年上海市65所医院ICU导管相关性感染 目标性监测分析〔复旦大学附属中山医院〕
CRBSI的常见病原菌
国外报道引起CRBSI的病原菌主要是凝固酶阴 性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和念珠菌。
导管留置时间
CRBSI的危险因素
2、操作相关因素
穿刺部位: 股静脉>颈内静脉>锁骨下静脉
无菌操作标准性: 操作人员和患者皮肤上的表皮葡萄球菌是最主要的病原 菌来源。维护时消毒不严格可将细菌带入管腔
置管的熟练程度: 置管的熟练程度与感染发生率成反比 研究说明放置锁骨下静脉导管<50根的医生导管脓毒症的 风险大于熟练医生的2倍以上
CRBSI送检方法:
首先判断导管是否仍有保存的必要性 按导管保存与否分别采用不同的送检方法
如需保存导管:
采取至少2套血培养,其中 至少1套来自外周静脉,并 做好标志,另外的1套则从 导管中心或硅酮隔膜无菌 采获,两个来源的采血时 间必须接近〔≯5min〕, 各自做好标记。
如无需保存导管:
ICU各类病原菌导致BSI的发病率及死亡率
导管相关性血流感染
血培养操作规程

血培养检测规范化操作(世上最全基本操作流程)2016-08-22来源:南方检验医学网阅读: 1291次【字号:大中小】导读:一、血培养检测采血指征:对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养,患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征: 1.发热(38℃)或低温(36℃)。
2.寒战。
3.白细胞增多(1010 9/L,特别有核左移未成熟的或带状的白细胞一、血培养检测采血指征:对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养,患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征:1.发热(≥38℃)或低温(≤36℃)。
2.寒战。
3.白细胞增多(>10×10 9/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。
4.粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1×10 9/L)。
5.血小板减少。
6.皮肤粘膜出血。
7.昏迷。
8.多器官衰竭。
或同时具备上述几种体征时应采血培养。
在评估可疑新生儿败血症时,除发热或低烧外,很少培养出细菌,应该补充尿液和脑脊液培养。
肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿(特别是2岁以下的幼儿)一般多见于门诊,常伴有明显发热(≥38.5℃)和白细胞增多(≥20×109/L)。
老年菌血症患者,可能不发热或不低热,如伴有身体不适,肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要指征。
血培养检测皮肤消毒程序:血培养为防止皮肤寄生菌污染,可使用消毒剂(碘酊或碘伏)对皮肤进行严格仔细的消毒处理,最大限度地减低皮肤污染。
感染性心内膜炎,特别是心脏瓣膜修复术的感染,可能由皮肤寄生的微生物引起(例如:表皮葡萄球菌或棒杆菌属)。
因此,在采集过程中血培养的污染一定要减小至最低程度。
用做培养的血液均不应该在静脉或动脉的导管中抽取,除非静脉穿刺无法得到血液或用来评价与导管感染相关性指标。
如果抽取了导管血,也应同时在其他部位穿刺获取非导管内静脉血液进行血培养。
皮肤消毒严格按以下步骤进行:1.首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。
血培养原则(CLSI)

血培养的时机
菌血症的菌量
寒颤
血培养
体温
0
30
60
时间(分)
血培养的数量
• 2004年Cockerill’s研究表明:当每套血培养采血20 mL ,且使用自动 化血培养系统时
• 一套检出率:65% • 二套检出率:80% • 三套检出率:96% • 感染性心内膜炎第一套检出率90% % • 血培养的数量 • 目前的指南推荐采集2-3套血培养 • 成年病人单一套的血培养从不被建议操作,因为这是不合适的数量, • 培养结果将很难做出临床解释 • 在采取血培养后的2-5天内,不需要再重复采取血培养,因为进行治 • 疗后的2-5天血液中的感染细菌不会马上消失 • 大部份细菌或真菌血症感染的移除,是以临床的症状表现来评估, • 唯有两个例外 • 感染性心内膜炎 • 金葡感染菌血症但非感染性心内膜炎相关
• 碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏 • 碘酊和洗必太的消毒效果大致相当 • 碘酊需作用30秒以发挥杀菌效能
• 碘伏需作用1.5-2分钟以发挥杀菌效能 • 洗必太发挥杀菌效能的作用时间和碘酊一样, • 但是由于没有伴随的过敏反应,所以使用后不 必擦去;但不能被用于小于2个月的婴儿皮肤消毒
血培养采集部位
采血量在需氧和厌氧瓶中的分配
• 对于常规的血培养,建议采取包括需氧 和厌氧的一套血培养瓶;将采集的血液 等量分配于需氧和厌氧血培养瓶中
• 当采血量不能满足推荐的血培养瓶需求 血量时,首先应进行接种需氧血培养瓶, 其余血量再接种厌氧血培养瓶
• 菌血症病源菌常见为需氧菌及兼性厌氧菌
血培养之皮肤消毒和污染的预防
因为该商业化培养基中添加其他成分以结合或去活化血液中抑制物质的作用多种商业化的肉汤培养基配方可用于人工及自动化血培养系统遵循clsim22指南血培养用培养基添加剂菌与酵母菌的检出?血培养的孵育条件阴性的血培养常规或盲传于是?必要的血培养的培养方法压?变化真菌和分枝杆菌血培养方法动血培养系统血培养的特殊话题crbsi导管相关性血?感染crbsi3少见细菌及苛养菌婴幼儿血培养儿童的采血?为?超过总血容?的1导管相关性血?感染crbsi1如果两套血培养为阴性而导管末梢培养为阴性?是crbsi导管相关性血?感染crbsi2如果两套血培养为阴性?是crbsi导管相关性血?感染crbsi3如果两套血培养为阴性而导管末梢培养为阴性?是crbsi感染性心内膜炎阴性则继续采集2套血培养全部培养一共5套已接受抗生素治疗的病人目前的研究表明接受抗生素治疗后的血培养检出?会有所下?也有研究表明在血培养瓶中添加的树脂或活性碳可以吸附或中和抗生素检出?比标准血培养瓶会有所提升但是在血培养瓶中添加的树脂或活性碳时污染菌的分离?亦会增加产品?贵少见细菌及苛养菌弯曲菌campylobacter转种时需微嗜氧环境孵育至少48小时才可见菌落少见细菌及苛养菌慢生长转种需要用支原体培养基sp4葡萄?培养基ph45结果报告药敏试验结果报告阳性血液培养的早期报告使用适当抗微生物制剂治疗避免抗药性菌株产生及?低病患死亡?提供适当次培养培养基及孵育环境结果报告其他结果报告初步报告结果与最终结果?吻合必须在书面报告上注明并提供详情污染问题对于有疑问的培养结果的临床意义判读如果是没有第二套同一个病人的血培养中发现同样的细菌判断血培养污染其它辅助检查的情况阳性血培养的判断真性菌血症truebacteremia
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新生儿
• • • • B群链球菌 大肠杆菌 凝固酶阴性葡萄球菌 酵母菌
陈民钧
11
方法和操作步骤
导管相关性的血流感染的血培养 • CRBSI是医院相关性最常见的原因 • 美国每年有25万病人发生 • 死亡率12-35%
陈民钧
12
导管相关性菌血症
(CRBSI)
– 取两套血培养有助于医生鉴别真假阳性
• 3-5套血培养为好 • 若阴性,要怀疑、重新考虑此诊断
陈民钧
31
HPA BSOP 3715建议的诊断
菌血症和真菌血症的诊断依赖于: • 优质血培养仪
• 优质的实验室操作
• 优质的信息传递
陈民钧
32
HPA BSOP 3715建议的诊断
• 优质血培养仪
– 培养基质量好-少量苛氧菌均可长出 – 能中和抗菌药和血中抗菌物质 – 污染机会少 – 报警迅速 不同的全自动产品各有其优缺点 厌氧瓶最好要培养出细菌、酵母菌 成人用需氧瓶和厌氧瓶 儿童只用需氧瓶
南
陈民钧
1
CLSI及总结了 30年来工作
• 不包括寄生虫,病毒,生物战、及分 枝杆菌
• 不提名任何商业血培养系统 • 明确血培养的临床意义 • 标本的收集和运送 • 最佳的培养基和操作程序 • 自动化血培养仪的评估
英国血培养研究和操作程序
展为心内膜炎
• 常见菌:口腔链球菌、金葡、肠球、牛链等
陈民钧 26
方法和操作步骤
感染性心内膜炎(IE)的血流感染
Native瓣膜心内膜炎 • 真菌心内膜炎
– 很少见 – 抗菌药不正确使用 – 严重的基础病
Native瓣膜心内膜炎 • HACEK 菌群心内膜炎
– Haemophilus aphrophilus – Actinobacillus actinomycetemcomitans – Cardiobacterium hominis – Eikenella corrodens – Kingella kingae – 艾滋病病人的Bartonella spp.
培养
*导管尖片段MAKI法
导管Maki法 + 注解 是否 菌落数 CRBSI? 是
需15
1或2 套阳性
2套阴性 2套阴性
陈民钧
-
+ -
不论多 少
否
否 否
金葡、念珠菌 时不能否认
导管定置菌
20
方法和操作步骤
导管相关性的血流感染(CRBSI) 现有诊断方法
• 1997年文献 确认导管尖片断的定量培养是最准确的, • 但需要拔管或更换导管,并需同时采静脉血做血培养。 • 已经证实当评估一次新的发热、需作血培养时时,大约75%-85% 的导管是不需要拔掉的。
CLSI血培养的原则和操作程 序推荐(Proposed)指南
•
英国HPA 的血培养的研究 及操作程序
2005-09-08出版:BSOP 37 Issue 5
• 2006年10月出版:M47-P
• 只是协商后的推荐稿 (consensus proposed)
•
•
/pdf_sops.asp
导管相关性的血流感染(CRBSI) 现有第2种方法
短期外周导管的方法
• 用静脉采血法采集2套外周血作血培养,
•
用Maki半定量培养法对导管尖片段进行培养(即查导
管表面的定植菌引起的感染)
陈民钧
19
方法和操作步骤
导管相关性的血流感染(CRBSI) 现有第2种方法
• 结果解释: 血培养 1或2 套阳性
Pseudobacteraemia: • 病原菌来源于病人血流之 外
– 不正确采血 – 实验室操作 – 可产生暴发性,消毒液被菌 污染
• 仪器问题
– 白细胞过多 – 过量的血量 – 其它
陈民钧
8
血培养瓶可疑污染菌
细菌室如何分析研究污染瓶
没收到
48小时内又收 到第2套否? 收到了 生长菌是同一 菌? 是同一菌 草绿色链球菌? 是病原菌
BSOP 3715
• 多次一过性菌血症(intermittent)
– 未引流的腹腔脓肿 – 肺炎球菌肺炎
• 持续性菌血症(Continuoys)
– 感染性心内膜炎 – 化脓性 凝血性脉管炎 – 防御低下的严重感染
陈民钧
6
明确血培养的临床意义 其它菌血症的分类 BSOP 3715
• Sepsis:具有全身反应,如发热、心动过速, 的感染 • Sepsis syndrome:Sepsis 加任何一器官功能 不正常,加以下症状之一:血乳酸盐升高,尿 少,意识障碍,动脉压低 (hypoxia) • Sepsis shock: Sepsis syndrome 加低血压
• • • • • • • • • 大肠 肺链 金葡 肠杆菌科菌 脑膜炎奈瑟菌 乙链 伤寒杆菌 布氏杆菌 淋球菌
医院获得性菌血症
• 凝固酶阴性葡萄球菌 • 大肠、 • 金葡、 • 肠杆菌科菌、 • 绿脓杆菌、 • 肠球菌 • 厌氧菌 • 肺链、 • 酵母菌
10
陈民钧
明确血培养的临床意义 儿童菌血症的分类 BSOP 3715 儿童:
33
• • • •
陈民钧
HPA BSOP 3715建议的标本收集
优质的实验室操作
• 取血合适的时间
– 尽可能抗菌药使用前 – 寒颤和发热初起;心内膜炎(持续性菌血症)例外
• 标本类型和取血方法
– 不要和测血气及血沉的取血同时进行(或在先) – 穿刺点消毒: 以醇类、洗必泰为好
陈民钧
34
优质的实验室操作
静脉血 A套 静脉血 B套 同一菌
导管血 菌量
导管血 时间早
其它部 位感染 特征
CRBSI
1
2 3 4 5
+
+ + + -
- 重作
+
+ + + -
- 重作
是
是 + + 是 5倍 +
金葡菌、 定量培 加Maki 养 法证明 念珠菌
无
120
‘
是
是 可能
无
120‘
无
是 定置菌
6
陈民钧
无
是?
15
方法和操作步骤
BSOP 3715 (IVCBSI)
• 导管种类:非隧道式长期放置导管、隧道式短期放置 导管
• 很难确诊:缺少诊断标准
– 局部无迹象, – 常常是皮肤正常菌及假菌血症常见的菌
• 诊断依据:
– – – –
陈民钧
血、导管留置部位、IVCJ尖是同一菌 Sepsis、对抗菌药无反应、拔管即好了 有不同的定量培养数(静脉血:导管血=1:10) 有不同的阳性报警时间 ( 2h )
13
方法和操作步骤 导管相关性的血流感染诊断方法之一
对非隧道式、隧道式的中心静脉导管、静脉留置口(VAP) 可疑有CRBSI的患者推荐的培养方法: 至少2套血培养 • 经外周静脉穿刺 采血1套 • 从导管中心或静脉留置口隔膜采血1套 • 二者的采血时间应该接近(建议 5分钟)
陈民钧
14
方法和操作步骤 导管相关性的血流感染诊断方法之一
陈民钧
27
方法和操作步骤
感染性心内膜炎(IE)的血流感染
人工瓣膜心内膜炎(PVE)
– – – – 人工瓣膜病人的2%得PVE 占全体心内膜炎病人的20% PVE多见于人工主动脉瓣 PVE手术后的任何时间均可发 生,越后越少,细菌种类也不 同 – 早期PVE(几个月内)死亡率高于 晚期PVE (几年后) – 多为医院感染耐药株
血标本的收集 1. 从静脉取血 2. 不宜从静脉导管或静脉留置口取血 3. 若导管设施取血*,必需同时静脉取血,以求对比和解 释
*不要弃去初段血,不用抗凝剂冲洗
4.不推荐静脉血直接入瓶 5.不主张换针头入瓶 6.有血的培养瓶不可放入冰箱和冻箱保存
陈民钧
35
标本的收集和运送 瓶数及血量
• Cockrill 2004年报告:163位病人,血培养仪
INVESTIGATION OF BLOOD CULTURES (FOR ORGANISMS OTHER THAN MYCOBACTERIUM SPESIES)
• 收集来自全球的评论和建议
• 收集截止日期:2007年1月29日 • 下一步要出版投票通过的试行指
• 参编单位:
• 医学微生物协会, 临床微生物协会 苏格兰微生物协会, IBMS, Welsh 微生物协会 • 统一由卫生防护署 (Health Protection Agency)领导
• 第2种方法适于已决定要拔出导管的病人
陈民钧
24
方法和操作步骤
HPA BSOP 3715
感染性心内膜炎(IE)的血流感染
• 原因:易感的心内膜病灶或先天缺损部位,血流紊乱, 进而心内膜表面损坏,微生物驻扎,形成赘生物,并 常进入血流,治疗困难 • 急性:正常的心瓣膜被病原菌驻扎导致瓣膜快速损坏、 小病灶播散、心衰、快速死亡 • 亚急性:不正常的瓣膜被少数的几种病原菌感染。小
• 健康人能在几分钟内将血中菌消失 • 病人则不能将病原菌控制在原发部位 • 医生未能将病原菌,如:
– 清除失败 – 引流不成功
• 死亡率与病原菌、药敏谱、基础病相关,亦即提供了 预后信息
陈民钧
5
明确血培养的临床意义
按出现时间特点的菌血症的分类
• 一过性菌血症(transient):持续仅数分钟
– 感染组织、粘膜表面‘、管定居的微生物 – [钻牙、导尿、挤压毛囊]、 – 通过植入、手术进入
陈民钧
7
明确血培养的临床意义 其它菌血症的分类 BSOP 3715
污染瓶: • 约2%
• 这些菌(阳性杆菌、棒状杆菌、 丙酸杆菌、气球菌、凝固酶-葡 萄球菌、微球菌)也引起全身感 染 • 污染瓶只见于一套瓶中的1-2瓶 • 只有第二套来鉴别 • 不作药敏 • 保留此瓶几天,等待第2套结果 • JCM 2002:40:2437-2444 如何减少污染瓶