09 辅助降血压功能检验方法
保健食品在安全性和功能性以及毒理学技术审评和功能试验
保健食品试验项目选择原则
以普通食品（含药食两用品种、营养 强化剂）为原料，但服用量大于常量 的，进行急性毒性试验、三项致突变 试验和30天喂养试验，必要时作传统 致畸试验。
保健食品试验项目选择原则
以普通食品（含药食两用品种、营养强化剂） 为原料，使用新工艺生产的，应进行第一、 二阶段毒性试验。根据试验结果确定是否进 行下一步的毒性试验。
保健食品的特征
特征：特定保健功能、调节机体功能、 不治疗疾病、食品
营养素补充剂：补充维生素、矿物质
保健食品原料的安全性管理
普通食品可作为生产保健食品的原辅料。 申请注册的保健食品中涉及食品添加剂的
，应符合《食品添加剂使用卫生标准》的 规定，即所用品种为列入《食品添加剂使 用卫生标准》（GB2760）、《食品营养强 化剂使用卫生标准》（GB14880）或卫生部 公告名单中的食品添加剂新品种。
毒理学主要概念
半数致死剂量（LD50）：试验中，引起一 半动物死亡的剂量，用来表述受试物的毒 性大小。急性分级的依据。
末观察到有害作用剂量（NOAEL）：动物实 验中，敏感指标和敏感方法观察到的剂量， 是制定标准（安全限值）的依据。
毒理学主要概念
剂量－量反应关系：表示化学物质的剂 量与个体中发生的量反应强度之间的 关系。
首次使用的新资源除对产品进行毒性试验外， 还应对食品新资源进行毒性试验。
保健食品试验项目选择原则
产品配方中加入某一已批准用于食品的物质， 按本程序有关条款的规定设置试验剂量时， 如该物质的剂量达到已知的毒作用剂量，则 应去除该物质或降低该物质剂量（如降至最 大未观察到有害作用剂量，NOAEL），再就该 保健食品中其它成分的毒性作用及该物质与 其它成分的联合毒性作用作出评价。
检测高血压方面的检验项目
高血压，作为一种常见的慢性疾病，严重危害着人类的健康。
早期准确地检测高血压对于疾病的预防、诊断、治疗以及预后评估都具有至关重要的意义。
而在检测高血压的过程中，一系列特定的检验项目发挥着关键作用。
本文将对检测高血压方面的主要检验项目进行详细的阐述与分析。
一、血压测量血压测量无疑是诊断高血压的基石，也是最基本、最常用的检验项目。
临床上常用的血压测量方法主要包括诊室血压测量、动态血压监测和家庭血压监测。
诊室血压测量是在医疗机构的诊室环境中，由医护人员使用血压计对患者进行的血压测量。
这是目前高血压诊断的主要依据，测量时患者应处于安静、放松的状态，通常测量右臂肱动脉血压，测量次数一般为两次，间隔 1～2 分钟，取两次血压读数的平均值。
诊室血压测量能够反映患者在特定医疗机构环境下的血压情况，但由于存在白大衣高血压（患者在医疗机构就诊时血压升高）和隐匿性高血压（患者在家中血压正常而在医疗机构就诊时血压升高）等现象，其诊断的准确性可能受到一定影响。
动态血压监测则是通过佩戴动态血压监测仪，在患者日常生活状态下连续 24 小时或更长时间内测量血压。
这种监测方法能够更全面、客观地反映患者血压的昼夜节律、血压波动情况以及血压在各种活动状态下的变化，有助于发现诊室血压测量难以发现的血压异常，尤其是隐匿性高血压和白大衣高血压。
动态血压监测对于评估高血压患者的靶器官损害程度、指导治疗方案的调整以及预测心血管事件的发生风险等具有重要价值。
家庭血压监测是患者在家中自己使用血压计进行血压测量。
这种监测方式可以提高患者的参与度和依从性，让患者更好地了解自己的血压情况，有助于患者自我管理和调整治疗方案。
家庭血压监测的血压值通常低于诊室血压值，一般认为家庭收缩压≥135 毫米汞柱和（或）舒张压≥85 毫米汞柱可诊断为高血压。
家庭血压监测对于早期发现高血压、评估降压治疗效果以及指导患者合理调整治疗方案具有重要意义。
二、血液生化检查血液生化检查也是检测高血压时常用的检验项目之一。
保健食品27种功能及试验检测项目
保健食品主要分为营养素补充剂和具有调节机体功能的功能性产品。
（1）营养素补充剂：指以补充一种或多种维生素、矿物质而不以提供能量为目的的产品。
其作用是补充膳食供给的不足，预防营养缺乏和降低发生某些慢性退行性疾病的危险性。
此类产品仅限于补充维生素和矿物质。
（2）国家食品药品监督管理局公布的保健食品的27种功能：（申请功能数量不受限制）
1、增强免疫力功能15、抗氧化功能★
2、改善睡眠功能16、辅助改善记忆功能★
3、对化学性肝损伤有辅助保护功能17、促进排铅功能★
4、增加骨密度功能18、清咽功能★
5、提高缺氧耐受力功能19、辅助降血压功能★
6、对辐射危害有辅助保护功能20、促进泌乳功能★
7、缓解体力疲劳功能◇ 21、减肥功能★◇
8、缓解视疲劳功能☆22、改善生长发育功能★◇
9、祛痤疮功能☆23、改善营养性贫血功能★
10、祛黄褐斑功能☆24、调节肠道菌群功能★
11、改善皮肤水份功能☆25、促进消化功能★
12、改善皮肤油份功能☆26、通便功能★
13、辅助降血脂功能★27、对胃黏膜损伤有辅助保护功能★
14、辅助降血糖功能★
注：标有★的功能，既需要进行动物功能试验又需要进行人体功能试验。
标有☆功能，只需进行人体功能试验，无需进行动物功能试验。
标有◇的项目需做兴奋剂检测。
拟申请的功能不在以上公布的27种范围内的，申请人应当自行进行动物试验和人体试食试验，并向确定的检验机构提供功能研发报告。
保健食品功能评价规范
保健食品功能评价规范第一部分功能学评价程序一、主题内容和适用范围1、本程序规定了评价食品保健作用的统一程序。
2、本程序适用于评价保健食品的增强免疫力功能，辅助降血脂功能功能，辅助降血糖功能，抗氧化功能，辅助改善记忆功能，缓解视疲劳功能，促进排铅功能，清咽功能，辅助降血压功能，改善睡眠功能，促进泌乳功能，缓解体力疲劳功能，提高缺氧耐受力功能，对辐射危害有辅助保护功能，减肥功能，改善生长发育功能，增加骨密度功能，改善营养性贫血功能，对化学性肝损伤有辅助保护功能，祛痤疮功能，祛黄褐斑功能，改善皮肤水份功能，改善皮肤油份功能，调节肠道菌群功能，促进消化功能，通便功能，对胃粘膜有辅助保护功能。
3、本程序规定了评价食品保健作用的人体试食试验规程。
二、保健食品功能评价的基本要求1 对受试样品的要求应提供受试样品的原料组成或/和尽可能提供受试样品的物理、化学性质(包括化学结构、纯度、稳定性等)有关资料。
受试样品必须是规格化的定型产品，即符合既定的配方、生产工艺及质量标准。
提供受试样品安全性毒理学评价的资料以及卫生学检验报告，受试样品必须是已经过食品安全性毒理学评价确认为安全的食品。
功能学评价的样品与毒理学评价、卫生学检验的样品必须为同一批次（安全性毒理学评价和功能学评价实验周期超过受试样品保质期的除外）。
应提供功效成分或特征成分、营养成分的名称及含量。
如需提供受试样品违禁药物检测报告时，应提交与功能学实验同一批次样品的违禁药物检测报告。
2 对实验动物的要求根据各项实验的具体要求，合理选择实验动物。
常用大鼠和小鼠，品系不限，推荐使用近交系动物。
动物的性别、年龄依实验需要进行选择。
实验动物的数量要求为小鼠每组10－15只（单一性别），大鼠每组8－12只（单一性别）。
动物应符合国家对实验动物的有关规定。
3 对给受试样品剂量及时间的要求各种动物实验至少应设3个剂量组，另设空白对照组，必要时可设阳性对照组。
剂量选择应合理，尽可能找出最低有效剂量。
【免费阅读】保健食品各功能需要做的动物及人体试验
保健食品各功能需要做的动物及人体试验（一）只要求动物实验的项目有：1. 增强免疫力功能检验方法主要指标：细胞免疫功能体液免疫功能单核－巨噬细胞功能NK细胞活性测定判定：四项指标中任两项结果阳性。
注意事项：不认可增强单项免疫力功能。
2. 改善睡眠功能检验方法主要指标：戊巴比妥纳睡眠时间实验巴比妥钠睡眠潜伏期实验戊巴比妥钠（或巴比妥钠）阈下剂量催眠实验判定：3项实验中任2项阳性，且直接睡眠作用。
注意事项：对动物进行直接睡眠实验时，也要同样注意进行30天灌胃。
3. 缓解体力疲劳检验方法主要指标：血乳酸血清尿素肝糖原/肌糖原动物负重游泳实验判定：负重游泳实验结果阳性，血乳酸曲线下面积、血清尿素、肝糖/肌糖原3项生化指标中任2项指标阳性。
注意事项：（1）对同批受试样品进行违禁药物的检测。
（2）在负重游泳实验时，酒类样品测试当天可以不灌胃。
4. 提高缺氧耐受力功能检验方法主要指标：常压耐缺氧实验亚硝酸钠中毒存活实验急性脑缺血性缺氧实验判定：三项试验中任二项实验结果阳性。
注意事项：每批实验动物的体重尽量保持一致。
5. 对辐射危害有辅助保护功能检验方法主要指标：外周血白细胞计数骨髓细胞DNA含量或骨髓有核细胞数小鼠骨髓细胞微核实验血/组织中SOD活性实验血清溶血素含量实验判定：以上5项实验中任3选项进行实验，3项实验中任何2项实验结果阳性。
注意事项：选用小鼠，受试样品于照射前给予14～30天，照射后仍然给予受试物，必要时可延至45天。
6. 增加骨密度功能检验方法根据受试样品作用的原理不同，分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。
主要指标：体重骨钙含量骨密度判定：（方案一）骨钙含量/骨密度显著高于低钙对照组且不低于相应剂量的碳酸钙对照组，钙的吸收率不低于碳酸钙对照组。
（方案二）①不含钙的产品：骨钙含量/骨密度较模型对照组明显增加，其它指标（体重除外）不显著低于卵巢切除＋溶剂组。
降压物质检查法
1
2
降压物质检查法
（猫血压法）
BP EP ChP
组胺检查法
（豚鼠回肠法）
BP EP
《中国药典》2010版二部附录 XIX M化学药品注射剂安全性 评价应用指导原则中收载了组胺类物质检查法。
一、基本概念及原理
降压物质检查法
原理
方法
优点
•利用降压物质可引 起猫血压下降，通 过比较组胺对照品 与供试品引起麻醉 猫血压下降的程度， 以确定供试品中降 压物质含量是否超 出限度
2ml ----------------->0.5ug/ml (SM)
6mlNacl*
3ml --------------->0.75ug/ml (SH)
5mlNacl*
如品种项下规定给药体积：1ml/kg，磷酸组胺应配置的终浓度相应变为：0.05、0.1、0.15ug/ml 如品种项下规定给药体积：0.5ml/kg，磷酸组胺应配置的终浓度相应变为：0.1、0.2、0.3ug/ml
注： 对照品割开时勿使玻璃屑掉入瓶内 折算系数：0.342,即1mg磷酸组胺相当于组胺的mg数 储存液冷藏保存，使用时取出放置至室温
检查法—溶液制备
例：称取磷酸组胺21.26mg×0.342=7.27mg即相当于组胺7.27mg，加灭 菌注射用水7.27ml使溶解，即得1mg/ml。
0.5ml
0.5ml
检查法—溶液制备
2.供试品溶液
按品种项下规定的剂量，配成适当浓度的供试品溶液。实验时， 要求供试品溶液与对照品稀释液的注入体积相等。
注：除另有规定外，一般供试品与对照品注入体积为0.2ml/kg 供试品和对照品如体积相差过大，可通过补充生理盐水量调整。
举例：阿奇霉素注射液，标准规定每kg体重注入2000U，则实际应配成 10000U/ml，按0.2ml/kg注入，给药量即为2000U/kg。
血压检测的实验原理和方法
血压检测的实验原理和方法
血压是评估心血管系统重要生理参数之一,其检测原理和方法主要有:
一、血压值的临床意义
血压数值可以反映心输出量、外周血管阻力等信息,是评估心血管功能的重要指标。
高血压通常预示各种心血管疾病风险。
二、수缩表法
用充气袖套包裹上臂,放气添气达到聴诊消失和出现的压力读数,表现舒张压和收缩压。
该法简便但准确度低。
三、动脉内针刺法
直接刺入动脉,连接压力传感器,可以直接测量血压波形和数值,但创伤性强。
四、控制压迫法
用自动调控的压带压迫肢体,检测血流音的出现、消失判定血压。
精度较高,无创。
五、多点记录法
在测试期间,通过计算机同步记录多个部位的血压变化,可以分析导致血压变异的因素。
六、动脉脉冲波传导法
检测脉冲波在动脉各点的传导时间,计算脉波传导速度,评估血管弹性及血压。
七、动脉声音分析法
分析血流动脉发出的音调、音量变化,评估局部血流速度和压力变化。
八、超声多普勒法
利用多普勒效应检测血流速度,结合流体动力学计算压力。
该方法非侵入性强。
九、心电图检查
观察心电图的特征变化判断高血压引起的心肌负荷增加情况。
十、长时间监测评价变异性
采用持续监测记录日内血压变动情况,评估个体血压调节情况。
卫生毒理所检测服务项目及收费标准
（月）
备注
681
6
家兔一次眼刺
20g
1
688
7
小鼠微核
50g
2
8
阴道粘膜刺激
50g
2
9
多次阴道粘膜刺激
100g
3
10
V79实验
50g
4
11
亚急性毒性试验
2000g
3-6
12
家兔一次破损皮肤刺激
试验
20g
1
13
皮肤变态反应试验
100g
3
卫生毒理所检测服务项目及收费标准
卫生毒理所承担北京地区保健品食品、添加剂、包装容器、水质及涉水产品、化妆品及日化品的毒理检
编号
序号
检验项目
样品量
（g）
实验周期
（月）
备注
673
1
小鼠急性经口毒性试验
（LD50）
50g
1.5
674
2
大鼠急性经皮毒性试验
（LD50）
50g
1.5
677
3
小鼠急性经呼吸毒性试
验（LC50）
100g
1.5
678
4
家兔一次完整皮肤刺激
试验
20g
1
680
5
家兔多次皮刺
100g
2
编号
序号
检验项目
样品量
（g）
测及科研任务。
卫生毒理所检测检验服务项目
第一部分
毒理实验检测项目、时间
一、消毒产品
备注：
实验周期在出现以下特殊情况时可能延长：动物供应不足、同类检验
工作量超出检验能力、实验出现紧急情况影响检验进度
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功能学评价检验方法－辅助降血压功能检验方法
1 动物实验
1.1 实验原理
以受试样品给予遗传高血压动物或通过实验方法造成的高血压动物模型，观察受试样品对高血压动物模型的血压、心率等指标的影响，评价受试样品的降血压作用。
1.2 测定方法及仪器
血压、心率的测定采用间接测压法，仪器的测压原理一般为尾脉搏法。
如：日本理研发PS-100型尾动脉血压心拍数记录装置、中日友好医院临床医学研究所RBP-1型大鼠血压计等。
1.3 实验内容
1.3.1 试验项目
1.3.1.1 一般情况观察：体重，生长状况
1.3.1.2 血压、心率
1.3.2 实验动物
大鼠，首选自发高血压大鼠（SHR），SHR宜选用10-12周龄，体重180-220克，雌雄可以兼用。
其次为肾血管型高血压大鼠。
每个剂量组8-12只。
1.3.3 受试样品的剂量分组及时间
按照血压水平将模型动物随机分为三个剂量组和一个空白对照组（溶媒对照，大鼠不宜用二甲亚砜），在三个剂量组中包括一组剂量相当于人推荐量的5倍，同时设一个给予受试样品的正常动物组，受试样品剂量同中剂量组。
必要时，可设阳性对照组（给予已知作用机理相似且疗效明确的降压药）。
实验期限不少于30天，如果必要时适当延长。
1.4 实验步骤
1.4.1 模型制备
肾血管型高血压大鼠需手术制备，常用两肾一夹型。
术中选用内径为0.20-0.25mm的银夹，放置于左肾动脉尽量靠近主动脉处。
30天后，选用血压≥21.3kPa（160mmHg）且较稳定者，也可根据情况选用血压较术前升高4KPa者。
1.4.2 血压、心率测定的具体方法
实验前一周对受试动物进行多次血压测量，使其适应测压环境。
依据测压仪器的要求进行动物清醒、安静状态下的血压、心率的测定。
实验开始后每周测压1-2次。
停止给予受试样品之后，一般继续观察直至血压恢复至对照组水平或继续观察7-14天。
1.5 数据处理和结果判定：
血压测定为计量资料，采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F 值，F值＜0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥0.05，P≤0.05，用多个实验组和一对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
结果判定：实验组动物血压明显低于对照组，差异具有显著性，且对实验组动物心率和正常动物的血压及心率无影响，可判定动物实验结果阳性。
1.6 注意事项
1.6.1 测定动物血压时室温应保持在25℃。
以尾动脉间接测压法测定大鼠血压时需要保温大鼠，应注明恒温盒温度及保温时间。
各次血压测定过程中温度条件保持一致。
1.6.2 操作应轻柔，减少动物的应激反应，大鼠放入固定笼中待大鼠安静后才可进行测量，大鼠如在测定中出现烦躁，啃咬等应激反应，应重新测量。
1.6.3 鼠尾套袖应放置于鼠尾的根部，选取用松紧适当的套袖。
套袖以约20－30mmHg/s的速度充气加压至脉搏波消失之后约20mmHg处。
每次测量间隔一定时间，记录心率变化≤10次/分、血压变化≤6mmHg 的连续三次读数，取其均数。
1.6.4 动物的饲养环境保持安静，排除环境因素对血压的影响。
2 人体试食试验
2.1 受试对象纳入标准：
原发性高血压患者，无论服用降压药物与否，收缩压≥140mmHg，舒张压≥90mmHg，满足两者任一项即可纳入。
2.2 排除者标准：
2.2.1 年龄在18岁以下或65岁以上、妊娠或哺乳妇女、对受试样品过敏者。
2.2.2 合并有肝、肾和造血系统等严重疾病，精神疾病患者。
2.2.3 凡不符合纳入标准，未按照规定食用受试样品，无法判断功效或因资料不全等影响功效或安全性判断者。
2.3 试验设计及分组要求：
采用组间和自身两种对照设计。
按受试者的血压水平随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如病程、病情、服药种类、年龄、性别等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。
每组受试者不少于50例。
2.4 受试样品的剂量和使用方法：
试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，对照组可不进行任何处理，也可服安慰剂。
受试者在试食观察期间不改变原有抗高血压药物治疗方案，观察时间不少于30天，必要时可以延长。
2.5 观察指标
各项指标于试验开始及结束时各测定一次，其中血压每周测量一次。
2.5.1 安全性指标
2.5.1.1 一般状况包括精神、睡眠、饮食、大小便等
2.5.1.2 血、尿、便常规检查
2.5.1.3 肝、肾功能检查
2.5.1.4 胸透、心电图、腹部B超检查（仅在试验开始时测定）
2.5.2 功效性指标
2.5.2.1 一般情况
详细询问病史，了解受试者饮食情况、活动量。
观察主要症状：头痛、眩晕、心悸、耳鸣、失眠、烦躁、腰膝酸软等。
2.5.2.2 血压、心率测量：每周定时定人测量血压、心率一次，测量前受试者休息15-20分钟。
2.6 数据处理和结果判定
功效判定：
有效：达到以下任何一项者。
舒张压下降≥10mmHg
收缩压下降＞20mmHg
无效：未达到以上标准者
按症状轻重（重症3分、中症2分、轻症1分）统计试食前后积分值和计算改善率（症状改善1分及1分以上为有效）。
血压测定数据为计量资料，可用t检验进行分析。
凡自身对照资料可以采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t检验；若转换数据仍不能满足正态方差齐要求，改用t’检验或秩和检验；但变异系太大（如CV＞50%）的资料应用秩和检验。
在试验前组间比较差异无显著性的前提下，可进行试验后组间比较。
改善率为计数资料，用X2检验。
四格表总例数小时40，或总例数等于或大于40但出现理论数等于或小于1时，应改用确切概率法。
结果判定
试食前后试食组自身比较，舒张压或收缩村测定值明显下降，差异有显著性，且平均下降幅度达到有效标准，试食后试食组与对照组间比较，舒张压或收缩压测定值或其下降百分率差异有显著性，可判定该受试样品具有辅助降血压作用。