云南省东北等地区蚊虫及蚊媒病毒调查研究
2015—2022年云南省传染病突发公共卫生事件流行特征分析
2015—2022年云南省传染病突发公共卫生事件流行特征分析2015—2022年云南省传染病突发公共卫生事件流行特征分析一、引言云南省是中国西南地区的一个重要省份，境内自然环境复杂多样，地理位置与气候条件对传染病的流行产生重要影响。
在过去的八年时间里，云南省发生了多起传染病突发公共卫生事件，对人民群众的生命和健康造成了一定的影响。
本文旨在通过对2015年至2022年间云南省传染病突发公共卫生事件的流行特征进行分析，为预防和控制传染病提供参考。
二、传染病突发公共卫生事件概述2015年至2022年期间，云南省共发生了X起传染病突发公共卫生事件，其中包括A、B、C、D等多种传染病。
这些事件主要是由于病原体的传播途径复杂、人类活动对生态环境的影响、人口流动等因素导致的。
三、借鉴国内外经验的传染病流行特征分析1. 传染病的季节性流行：云南省的气候温暖湿润，适宜许多传染病病原体的生长与繁殖。
因此，一些传染病在特定的季节内容易暴发流行，如登革热在雨季时期高发。
此外，还有一些传染病如流感，会在寒冷的冬季出现高峰。
2. 人类活动对传染病的影响：云南省是中国边境省份，与周边国家接壤。
境外输入或者出境人员携带传染病病原体进入或者离开该地区，容易引发传染病的暴发。
此外，云南省也有一些与矿山、农田劳动等相关的聚集性人群活动，这些活动可能导致某些传染病在人群中的快速传播。
3. 传染病在地理区域上的分布特点：云南省地理环境复杂多样，不同地域的传染病流行特点也存在一定区别。
例如，西双版纳地区气候炎热潮湿，非典型性肺炎等热带传染病患病率较高；昆明地区气候适宜，蚊虫滋生较多，登革热等蚊媒传染病患病率相对较高。
四、传染病突发公共卫生事件的预防与控制策略1. 建立完善的早期监测系统：通过建立传染病早期监测系统，可以实时掌握传染病的发病情况和流行趋势，及时制定应对措施，降低风险。
2. 强化卫生健康教育：加强社会公众的卫生健康宣传教育，引导居民掌握科学的健康知识和个人防护措施，提高对传染病的认识和应对能力。
云南阿蚊属形态分类及多态研究
寄生虫与医学昆虫学报Acta Parasitol. Med. Entomol. Sin.第 27 卷第 4 期2020年12月Vol.27, No.4Dec. ， 2020doi ：10. 3969/j.issn.l005-0507. 2020. 04. 005云南阿蚊属形态分类及多态研究**基金项目：国家自然科学基金(30460124； 30660160)** 通信作者:E-mail ： ****************董学书 周红宁**董利民 郭小连 吴林波 罗春海(云南省寄生虫病防治所，云南省虫媒传染病防控研究重点实验室，金宁一院士工作站，云南省寄生虫病防治所虫媒传染病防控关键技术省创新团队(培育),面向南亚东南亚热带病国际科技人员交流与教育培训基地，云南普洱665000)摘要为掌握阿蚊属(Armigeres )形态及多态特征，进而准确地分类鉴定，本研究采集云南不同纬度、不 同海拔、不同植被地区的阿蚊幼虫，进行隔离饲养，获取成蚊(Q, 3)、蛹皮、幼虫成套标本，在此基 础上进行系统的形态及分类研究。
经过1995—2018年的调查，在上述地区共采获约450套阿蚊标本及相关的生态生物学资料，其中发现阿蚊18种，包括阿蚊亚属(Subgenus Armigeres ) 7种，励蚊亚属(SubgenusLeicesteria ) 11种；在18种阿蚊中，形态研究显示有7分类特征提出修正意见。
关键词 阿蚊属；多态特征；分类；修正；云南阿蚊属 Armigeres 1901 年由 Theobald 建立， 属下分为阿蚊亚属Subgenus Armigeres 和励蚊亚属Subgenus Leicesteria ,但在建立初期，由于励 蚊亚属中的黄色阿蚊Ar. flavus 中胸后背片有一小从细毛，后足胫节比前、中足胫节略短，幼虫尾鞍有腹片等特征，而立为类励蚊亚属Subgenus Leicesteriomgia ,而其他特征均在励蚊亚属范围内，另立一亚属没有分类学上的价值，因此长期 以来未被广泛应用。
中缅边境地区不明原因发热病人蚊媒病毒性疾病分子流行病学调查
A total of 1»738 serum sam ples from patients w ith an unexplained fever and a negative dengue fever virus (D E N V ) NS1 an tig en test w ere collected in Ruili from 2014 to 2015. O f those sa m p le s, 657 (3 7 . 8 0 % ) w ere collected in 2014 and 1,081 (62. 2 0 % ) w ere collected in 2015. P atien ts consisted of 930 m ales (53. 5 1 % ) and 808 fem ales (46. 4 9 % ). T he youngest patient w as 2 m o n th s old and th e oldest w as 96 years o ld . w ith a m edian age of 24 years. O ne thousand seven hun d red and five sam p les (9 8 . 1 0 % ，1 7 0 5 /1 7 3 8 ) w ere collected from Ju n e to O cto b er. O ne tho u san d tw o hun d red and fifty se ru m sam p les (7 1 . 9 2 % ) w ere collected w ith in one w eek of o n se t, 19 (1 . 1 0 % ) w ere collected m ore th an one w eek after o n se t, and the date of onset w as unknow n for 469 (2 6 . 9 9 % ). R eal-tim e R T -P C R w as used to detect D E N V , C h ik u n g u n y a v iru s ( C H I K V ) ， Z ika virius ( Z I K V ) ， S in d b is v iru s ( S I N V ) ， B anna v iru s ( B A V ) ， B atai v iru s ( B A T V ) ，
蚊虫分类研究(双翅目:蚊科)的历史回顾与我国现状
蚊虫分类研究(双翅目：蚊科)的历史回顾与我国现状瞿逢伊;朱淮民【摘要】本文根据历年和近年蚊虫分类研究代表性文献作历史回顾和评述.蚊虫的传统形态分类在20世纪初开始发展,蚊虫的分类理念在反复争议和修订的历史中演变,直至《世界蚊虫名录,第二版》出版,一个相对稳定的蚊科分类系统才被公众认可.通过“细胞遗传”和“分子鉴别”方法用于蚊种鉴别,缓解了复合体成员种形态分类鉴别中发生误订和混淆的困扰.21世纪初,以形态特征量化数据分析为基础的蚊虫系统发育分类研究,对提高蚊虫分类鉴别水平产生明显的影响.新分类理念体现蚊类的系统发育关系是一个重大的进步.传统分类的改革不仅是分类理念,还应提供合理的方法和操作程序.近年伊蚊族及相关分类单元的研究中发现许多新属,新组合属及属级分类地位的变更,可以显示其活力和效率.新的分类理念认为传统分类系统缺乏对蚊科系统发育关系的体现是一个重要障碍,并将蚊科新分类系统修订为2亚科11族.关于我国蚊虫分类现状,作者试对以往记录予以修订,并提出新分类系统包括:2亚科10族45属420种(包括伊蚊族分类地位待定的已知蚊11种).其中我国蚊属新记录:路蚊属Lutzia和金蚊属Kimia在文内作了简介.【期刊名称】《寄生虫与医学昆虫学报》【年(卷),期】2013(020)004【总页数】12页(P223-234)【关键词】蚊科;分类;鲍蚊属;金蚊属;路蚊属【作者】瞿逢伊;朱淮民【作者单位】第二军医大学病原生物学教研室,上海200433;第二军医大学病原生物学教研室,上海200433【正文语种】中文1 蚊虫分类研究的历史回顾研究资料表明20世纪是蚊虫形态分类发展的重要历史阶段，世界各地广泛采集标本，描述了许多新属、新种，并反复对已知蚊类记录及其分类地位和名称进行校订，以经验的途径形成了相对稳定的蚊科(Culicidae)各类群的分类系统。
针对传疟蚊媒复合体(complex)和隐种(cryptic species)混淆的发现，探索各种新技术应用于蚊虫分类鉴定，其中细胞遗传，分子鉴别，以及系统发育数值分析等方法与形态分类相结合，已经广泛应用，成为现代蚊虫分类的新趋势。
云南省勐腊县蚊虫调查
须 喙 按 蚊 Ａｎ ａ ｂ ｏｔ ｓ ．ｂｒｉ ｓ ｉ ｒ ｒ
姜 彩 按 蚊 Ａｎ ｐｅ ｄ ｄ ｓ ．ｓ ｌ ｉ ｕ ｎ
集 蚊虫 。冷冻 致死 后 ，解 剖镜下分 类计 数 。
２ 结 果
乌 头 按 蚊 Ａｎ ｏ ｏｉ ｓ ． ｃｎ ｕ ｔ
２ １ 蚊虫 种群 组 成 ．
共捕获 ２ ３种蚊 虫 ， 中库 蚊 其
１ １ 具 有煤 卫 独用 设 施 的 二居 室 以上 的新 村 住房 ．
及 其 居 民
５ｍ×５ｍ） ｃ ｃ ，检测 细 菌总数 、大肠 菌群和霉 菌 。
属 ８种 ， 蚊 属 ９ ， 蚊 属 ５ ，阿 蚊 属 １种 （ 按 种 伊 种 表 １ 、表 ２ 。蚊 虫 名 录 如 下 ： ）
三 带 喙 库 蚊 Ｃ ｌ ｉｅｉｒｙ ｃｕ ｕｅ ｔ ａ ｎｏｈ ｎｈ ｓ ｘｒ
伪杂鳞库 蚊 Ｃ ．ｐｅｄ ｖｓｎ ｉ ｘ ｓｕ ｏｉ ｕ ｈ
棕 头库 蚊 ．ｆｓｏｅｈ ｌｓ ｕｃｃｐ ａｕ
究
表 ２ 勐 腊 县 关 累 镇 农 村 亩 圈 及其 局 萄在 闻 采 集 蚊 虫的 种 群 组 成
２ ２ 优 势 种 组 成 优 势 种 组 成 是 采 用 Ｂ ｒｅ— ． ｅｇ ｒ
Ｐ ｒ ｅ 优 势 度 指数进 行测 定 ，当优势 度 指数 Ｉ 大 ａｋ ｒ 值
于 或 等 于 ０ １时 确 定 为 优 势 种 。１ ｎ／ （ｉ Ｉ ． 一 ｉＮ ｎ 是 物
维普资讯
医学 动 物 防 制 ２ ０ 年 ５ 第 １ ０２ 月 ８卷第 ６ 期
・２４ ・ ７
或 搜捕 法 ， 项 调查 捕 获数 量 均较 少 ，部分 地 区调 本 查 常束 能捕 获 或仅捕 获 数 只 ］ ，然作 者 白天 于永安 市 桃源洞 风 景 区和宁德市 南 际公 园捕获 较 多白蛉标 本 ， 查 环境 前 者 主要 为风 景 区简 易工 棚 ， 者为 调 后 石崖 避 风 或挡 雨 处 ， 围环 境主 要 为 灌木 林 ，５月 周 份 正是 福建 省 梅 雨季 节 ， 查 时适 缝下 雨 天 ，可 能 调 白蛉 困避雨 而停 栖 于工 棚 和挡雨 的石 壁 上 ，故 白岭 数 量 较 多 ，共 捕获 白蛉 ３ ５只 ， 鉴定 主 要为 鲍 氏 ０ 经 司蛉 ，占全 部 捕 获 蛉数 的 ７ 、 ２ ， 京 白蛉 和 泉 ６ ７ 南 州 白蛉 分别 占 ８ ８ ％和 Ｈ． ３ （ ２ 。 、５ ４ 表 ）
蚊媒传播疾病的研究与预防措施
蚊媒传播疾病的研究与预防措施第一章：引言蚊媒传播的疾病是世界范围内的一大公共卫生问题。
据世界卫生组织的数据显示，每年约有数十亿人感染蚊媒传播的疾病，其中数百万人因此丧失生命。
因此，对蚊媒传播疾病的研究和预防措施具有重要意义。
本章将简要介绍蚊媒传播的疾病的背景和意义。
第二章：蚊媒传播的疾病蚊媒传播的疾病是由蚊子媒介传播的疾病。
蚊子作为疾病的主要传播媒介，通过叮咬人类或其他动物将病毒或寄生虫传播给叮咬对象。
一些常见的蚊媒传播的疾病包括疟疾、登革热、寨卡病毒感染等。
这些疾病对人类健康和全球健康产生了威胁，且随着全球气候变暖和人类活动的扩大，蚊媒传播的疾病的流行范围正在不断扩大。
第三章：蚊媒传播疾病的研究蚊媒传播疾病的研究是为了更好地理解病毒和蚊虫之间的相互作用，以及发展有效的预防和控制措施。
这方面的研究包括但不限于以下几个方面。
首先，研究病毒与蚊子的传播途径。
了解不同病毒与蚊子之间的相互作用，包括传播机制、病毒在蚊子体内的复制过程等，可以揭示疾病传播的机理，为预防和控制提供参考。
其次，研究蚊子的生物学特性。
了解蚊子的生物学特性，包括种类、寿命、繁殖周期、寄生虫感染率等，有助于预测和评估蚊媒传播疾病的传播风险，并制定相应的控制策略。
再次，研究疫苗和药物的开发。
通过研究和开发相关的疫苗和药物，可以有效地预防和控制蚊媒传播的疾病。
这方面的研究包括疫苗的研发、药物的筛选和剂量的确定等。
第四章：蚊媒传播疾病的预防措施为了降低蚊媒传播疾病的发病率和病死率，采取预防措施是至关重要的。
以下是一些常见的蚊媒传播疾病的预防措施。
首先，消灭蚊虫滋生环境。
蚊虫常在水体周围繁殖，因此要定期清理和消毒水体，清除积水容器，并采用防蚊控制措施，如使用蚊帐、灭蚊剂等。
其次，个人防护措施。
个人应采取有效的个人防护措施，如穿长袖长裤、使用防蚊喷雾剂等，以减少蚊子的叮咬机会。
再次，社区卫生教育。
加强社区卫生教育，提高居民对蚊媒传播疾病的认识和防护意识，加强对儿童和老年人等易感人群的关怀和保护。
蚊媒监测开题报告
蚊媒监测开题报告蚊媒监测开题报告一、研究背景和意义蚊媒是指通过蚊子传播的各种病原体，包括疟原虫、登革热病毒、寨卡病毒等。
这些病原体通过蚊子叮咬人类，引发严重的传染病。
据世界卫生组织统计，每年有数百万人因蚊媒传播的疾病而失去生命。
因此，对蚊媒的监测和控制具有重要的意义。
二、研究目标本研究的目标是建立一种有效的蚊媒监测方法，以及提供相关的数据和信息，为蚊媒传播疾病的防控工作提供科学依据。
三、研究内容1. 蚊媒监测方法的研究和优化目前，常用的蚊媒监测方法包括蚊子捕捉和蚊子取样两种。
蚊子捕捉是通过设置蚊子陷阱或利用人工捕捉等方式收集蚊子样本，然后通过分类鉴定蚊子的种类和数量。
蚊子取样则是通过采集蚊子的体液或组织，检测其中是否携带病原体。
本研究将对这两种方法进行研究和优化，以提高蚊媒监测的准确性和效率。
2. 蚊媒传播疾病的风险评估蚊媒传播疾病的风险与蚊子的种类、数量以及携带病原体的感染率密切相关。
本研究将通过对蚊媒样本的分析和数据统计，评估不同地区和季节的蚊媒传播疾病的风险水平。
这将有助于政府和卫生部门制定相应的防控策略和措施。
3. 蚊媒监测数据的分析和应用本研究将对蚊媒监测数据进行统计和分析，挖掘其中的规律和趋势。
通过建立数学模型和预测算法，可以预测蚊媒传播疾病的潜在风险和扩散趋势。
这将为蚊媒防控提供重要的决策支持和指导。
四、研究方法1. 实地调查和样本采集本研究将选择不同地区和季节进行实地调查，采集蚊媒样本。
通过设置蚊子陷阱、人工捕捉等方式，收集蚊子样本，并进行分类鉴定和病原体检测。
2. 数据统计和分析通过对蚊媒监测数据的统计和分析，建立相关的数学模型和预测算法。
同时，结合地理信息系统和大数据技术，将蚊媒监测数据与环境因素进行关联分析，以揭示蚊媒传播疾病的规律和趋势。
五、预期成果1. 建立一种有效的蚊媒监测方法，提高蚊媒监测的准确性和效率。
2. 提供蚊媒传播疾病的风险评估结果，为防控工作提供科学依据。
滇东北地区北部昆虫区系初步研究
云南省滇 东北地 区属 云贵 高原 向 四川盆 地 的
过渡地 带 ， 海拔 相对较 低 ； 因为该 区域 受 金 沙汀 又 支流 的强 烈 切 割 ， 形 比较 破 碎 ， 地 为低 山河 谷 地
上 ， 过对滇 东北地 区北 部 森林 保存 较好 的永 善 、 通
大关 、 盐津 、 良 ４县 昆虫 区系 的 考察 研 究 ， 得 彝 取 了初 步成果 ．
虫》 著 之 中 ． ９ ２和 １９ 专 ｊ １ ９ ９ ３年 出 版 的 《 断 山 横
区昆虫 》 记 载 了滇 东 北 地 区 的 部 分种 类 也 。 ．
《 南 蝴 蝶 》记载 了 滇 东 北 地 区 的 部 分 蝴 蝶 种 云 类 。存《 ． 中同动物志 系列专 著 中， 别 记载 了 该 分
地区 钩 蛾科 （ ｙｌｄｉａ ） 、 蛾 科 （ ｏ ｂ ｃ Ｃ ｃｌ ｉ ｅ 蚕 ｉ ｄ Ｂ ｍ ｙｉ ．
２ 结果 分 析
２ １ 昆虫分 类群的 多样性 ． 汇总前人 研 究 报 道 和 本 次考 察 研 究 结 果 ． 在
ｄｅ ａ ）和 大 蚕 蛾 科 （Ｓｔｒｉ ａ ） 、尺 蛾 科 ａ ｎ ｄｅ ｕ ｉ （ ｅｍ ｔｄｅ 、 蛾 科 （ ｒｔｄｅ 、 蛾 科 Ｇ ｏ ｅｒ ａ ） 灯 ｉ Ａ ｃｉ ａ ） 卷 ｉ （ ｏｔｃ ａ 、 蛾 科 （ ｙ ａ ｔｉａ ）“ 舟 蛾 Ｔ ｒｉｉ ｅ） 毒 ｒｄ Ｌ ｍ ｎ ｉ ｅ 、 ｒｄ 科 （ ｏ ｄ ｎ ｄ ｅ Ｎ ｔ ｏ ｔ ａ ）“ 的部分 种类 ． ｏ ｉ 上述 前期 研究 ｌ 广 作 为该研 究奠定 了 良好 基础， 因滇 东北 地 历 史 一 直 是 人 滇 的 必 经 之
收稿 日期 ：０ ７— ６—２ ２０ ０ ５ 为通 讯 作 者
2016-2018年云南省疟疾个案和疫点调查处置情况
省的传播,结束了一 个 数 千 年 来 严 重 危 害 人 民 群 众
健康和生命 安 全 的 重 大 疾 病. 本 文 旨 在 对 ２０１６－
２０１８ 年云南省 疟 疾 病 例 个 案 和 疫 点 调 查 处 置 情 况
进行综合分析,评价 消 除 疟 疾 策 略 和 措 施 的 实 施 效
果,为下一步消除疟 疾 和 防 止 输 入 疟 疾 再 传 播 工 作
剂的敏感性监测,科学指导开展媒介控制.
关键词:疟疾个案;调查处置;云南省
中图分类号:
R３８２．
３ 文献标识码:
A 文章编号:
１００２－２６９４(
２０２１)
０６－０５２５－０７
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东北地区重要蚊虫种类及蚊媒病风险探讨
东北地区重要蚊虫种类及蚊媒病风险探讨随着经济的发展和城市化进程的加速，人类与蚊虫的接触日益增多，蚊媒传播的疾病也是日益频繁。
东北地区是我国的重要农业大区，但该地区的地理位置使其易受到蚊媒疾病的侵袭。
因此，了解东北地区的重要蚊虫种类及其蚊媒病风险，有助于采取有效的疾病预防和控制措施。
一、东北地区重要蚊虫种类1.白纹伊蚊白纹伊蚊是一种亚热带蚊虫，也是世界上最重要的伊蚊媒介。
它主要通过叮咬传播登革热、黄热病、寨卡病毒和基孔肯雅热等多种疾病。
在东北地区，白纹伊蚊也是重要的咬人蚊虫之一。
2.大蚊子大蚊子是许多疾病的主要媒介之一，包括疟疾、丝虫病和日本脑炎等。
在东北地区，大蚊子也是一种常见的蚊虫。
它生长在湿地和溪流附近，成年后主要在夜间活动，其幼虫则在水中生活。
3.白足蚊白足蚊是世界上最危险的蚊虫之一，主要通过叮咬传播丝虫病。
在东北地区，白足蚊也是一个常见的蚊虫种类。
与其他蚊虫相比，白足蚊的咬伤更为疼痛和刺激。
4.家蚊家蚊是一种常见的蚊虫，主要通过叮咬传播疟疾、丝虫病和白喉等疾病。
在东北地区，家蚊也是一个经常出现的蚊虫种类。
它主要生长在水箱、杂草丛和垃圾堆等地方。
二、蚊媒病风险探讨1.疟疾疟疾是由疟原虫通过蚊媒传播的传染病。
在东北地区，疟疾主要是在夏季和秋季发生。
由于东北地区的气候条件比较适宜蚊虫的生长和繁殖，所以疟疾在该地区的发病率较高。
2.丝虫病丝虫病是一种可致残和致死的传染病，主要通过蚊媒传播。
在东北地区，丝虫病主要是由白足蚊和家蚊传播。
丝虫病主要影响肢体和生殖系统，给患者带来极大的痛苦，严重的甚至会导致死亡。
3.日本脑炎日本脑炎是一种病毒感染疾病，主要由大蚊子和其他咬人蚊虫传播。
在东北地区，日本脑炎的流行主要是在夏季和秋季。
患者主要表现为发热、头痛、恶心或呕吐、颈部硬化等症状。
4.登革热登革热是一种由登革病毒引起的急性传染病，主要通过叮咬传播。
在东北地区，登革热的发病率较低，但随着人口流动和旅游业的发展，其传播的风险逐渐增加。
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摘要：目的 了解滇东北等地区蚊虫及蚊传虫媒病毒分布特点，为虫媒病毒病防治提供科学依据。方法 2009 年 在滇东北等地区的 6 个县采集蚊虫标本；蚊虫经分类鉴定后，用细胞培养法分离病毒，对病毒分离物进行分子生物学鉴 定。结果 共采集到 4 属（库蚊、按蚊、阿蚊、伊蚊）24 种 18 562 只蚊虫，其中三带喙库蚊、中华按蚊为主要蚊种，构成比分 别为 58.37%和 28.45%；从蚊虫标本中分离到 15 株病毒，经分子生物学鉴定，其中 2 株（YN0911 和 YN0967）为基因Ⅰ型流 行性乙型脑炎（乙脑）病毒，均分离自三带喙库蚊；1 株（YN0922）为版纳病毒，分离自中华按蚊；12 株为淡色库蚊浓核病 毒，其中 9 株分离自三带喙库蚊，3 株分离自中华按蚊。结论 三带喙库蚊和中华按蚊为调查地区的优势蚊种，并携带乙 脑病毒、版纳病毒和淡色库蚊浓核病毒；滇东北地区首次分离到乙脑病毒。
1 材料与方法
1.1 蚊虫标本采集 2009 年 7 月 19－22 日在滇东北 昭通市昭阳区和巧家县采集蚊虫标本，2 个采集点各 采集 2 d。2009 年 7 月 23－26 日在滇南红河州的弥勒、 绿春、元阳县采集蚊虫标本，弥勒县采集 2 d，元阳和绿 春县各采集 1 d；2009 年 10 月 11－12 日在滇西南普洱 市孟连县采集蚊虫标本。每日每个采集点均用 4 个诱 蚊灯捕蚊，18：00 至次日 07：00 在农村居民区人房及畜 圈捕蚊，并将采集到的蚊虫置-20 ℃冰箱冷冻致死后， 解剖镜下分类鉴定后，计数分装，立即液氮冻存。 1.2 病毒分离 用细胞培养法进行病毒分离，所用细 胞为 C6/36 和 BHK-21。从液氮罐中取出冻存管，将蚊 虫标本迅速倒入无菌的 2 ml 平底位于我国西南边陲，自然条件复杂，适于各 类吸血节肢动物的生存繁殖及某些虫媒病毒的存在和 传播［1］。20 世纪 80 年代以来，云南省地方病防治所在 云南省边境地区及澜沧江流域等地进行了大量的虫媒 病毒调查和研究，初步掌握了这些地区的虫媒病毒分 布情况，分离到流行性乙型脑炎（乙脑）病毒、登革热病 毒、辛德毕斯病毒、盖塔病毒、基孔肯雅病毒、森林脑炎 病 毒 、巴 泰 病 毒 、版 纳 病 毒（Banna virus，BAV）、 Kadipiro 病毒（Kadipiro virus，KDV）和环状病毒等，并 证实存在乙脑、登革热、森林脑炎等虫媒病毒病 。 ［1-6］ 但至今滇东北从未进行过虫媒病毒调查，因此 2009 年 我们选择滇东北的昭通市作为蚊虫标本采集点。滇南 部的红河州位于中越边境，滇西南的普洱市位于中缅 边境，以前曾做过虫媒病毒调查［5，7-8］，但是在这些地区 进行虫媒病毒调查意义重大，因此本次重新将其列为 蚊虫标本采集点，以进一步掌握云南省蚊虫和虫媒病 毒的分布特点。
Abstract: Objective To investigate the distribution patterns of mosquitoes and mosquito ⁃ borne viruses in Yunnan province to provide evidence for prevention and control of mosquito⁃borne diseases. Methods In 2009, mosquito samples were collected from 6 counties of Yunnan province. Mosquitoes were first classified, followed by cell culturing for viral isolation for molecular identification. Positive isolates were identified using SDS ⁃ PAGE and RT ⁃ PCR. The genomes of isolates were also, sequenced for phylogenetic analysis. Results A total of 18 562 mosquitos of 4 genera (Culex, Anopheles, Armigeres, Aedes) and 24 species were collected. Cx. tritaeniorhynchus and An. sinensis were the major species, comprising 58.37% and 28.45% of the total population, respectively. Fifteen strains of viruses were isolated from the mosquito pools. RT ⁃ PCR and phylogenetic analysis revealed two viral strains from Cx. tritaeniorhynchus, identified as Japanese encephalitis virus (JEV, GenotypeⅠ). One strain isolated from An. sinensis was identified as Banna virus. Twelve vrial strains were identified as Cx. pipiens pallens densovirus (CppDNV), of these, nine strains were isolated from Cx. tritaeniorhynchus, and three strains from An. sinensis. Conclusion Cx. tritaeniorhynchus and An. sinensis were the predominant species in the investigated areas. JEV, Banna virus and CppDNV were isolated. In northeast Yunnan, JEV was isolated for the first time.
无 血 清 MEM 液（含 10％ 双 抗 和 1％ 谷 氨 酰 胺），用 QIAGEN 公司的组织振荡仪（Tissue lyser）高速振荡研 磨后移入 1.5 ml 离心管中，在 4 ℃，12 800 r/min 离心 30 min（离心半径 8.27 cm），取上清 200 μl 平行接种于 生长至 70%～80%单层 BHK-21 和 C6/36 细胞培养管， BHK-21 细胞置 37 ℃孵箱培养，C6/36 细胞置 28 ℃孵 箱培养，逐日观察细胞病变情况，并详细记录。盲传 3 代，保存有细胞病变的细胞培养管，弃去未发现细胞病 变的细胞培养管。 1.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS⁃PAGE） 提取病 毒分离物的 RNA 后进行垂直板电泳，先用 80 V 稳压电 泳待指示剂到分离胶时电压加到 100 V 再电泳 4 h。 停止电泳，倒掉电泳缓冲液，将凝胶放入盘内，三蒸水漂 洗 1 次。加入预先配好的硝酸银染色液，染色 30 min。 倒掉染色液，三蒸水漂洗 3 次。漂洗后加入显色剂 （NaOH 和甲醛现配），不停地摇动凝胶至出现清晰的 条带。倒掉显色剂，三蒸水漂洗 1 次，加入终止液（5％ 醋酸）。凝胶结果用扫描仪进行扫描记录。 1.4 RNA 提取、cDNA 合成、RT⁃PCR 及序列分析 用 QIAamp Viral RNA Mini Ki（t 美国 QIAGEN 公司）提取 感染病毒的第 3 代细胞的总 RNA，使用随机引物和 Ready⁃to⁃GoTM You First⁃Strand Bead（s 美国GE Healthcare 公 司）制 备 cDNA。 用 TaKaRa 公 司 的 GoTaq Green Master Mix 和本科室所备的引物进行 PCR 扩增，所用 引物见表 1。使用 DNAstar 软件包中的 SeqMan 对序列 片段进行拼接、编辑、校正；碱基的配对及核苷酸序列 同源性分析由 Clustal X（1.83）软件完成；核苷酸及氨 基酸差异度分析由 DNAstar 软件包中的 MegAlign 软件 完成；核苷酸和氨基酸位点差异分析由 GENEDOC 3.2 软件完成；应用 Mega 4.0 软件进行基于核苷酸的系统 进化分析，以 Neighbor⁃Joining 方法构建系统进化树。
Corresponding authors: LIANG Guo⁃dong, Email: gdliang@; ZHANG Hai⁃lin，Email: zhangHL715@ Supported by the China⁃US Collaborative Program on Emerging and Re⁃Emerging Infectious Diseases（No. U19-GH000004）， the Japan Health Science Foundation（No. 2002-2007），and National Natural Science Foundation of China（No. 30560142）
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中国媒介生物学及控制杂志 2011 年 8 月第 22 卷第 4 期 Chin J Vector Biol & Control, August 2011, Vol.22, No.4
·论 著·
云南省东北等地区蚊虫及蚊媒病毒调查研究
杨杜鹃 1，付士红 2，张海林 3，杨卫红 3，冯云 3，王静林 3，章域震 3，王丕玉 4，陈维欣 2，梁国栋 2
Key words: Culicidae; Arboviruses; Encephalitis virus, Japanese; Banna virus; Densovirinae