达肝素钠对A549细胞生长状态及细胞周期的影响(一)
槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响
槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响鲁明骞;卢宏达;许新华;卢忠心;孔庆志;雷章;徐冰清;李颖琦【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2016(036)024【摘要】目的：研究槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及周期的影响。
方法制备浓度为0、3、6、9 mg／ml的槐耳清膏与人肺腺癌A549细胞作用后，采用流式细胞检测观察细胞凋亡率，并分析药物干预36 h对细胞周期和细胞凋亡率的影响。
结果流式细胞术检测结果显示，槐耳清膏各浓度组均可发生细胞凋亡，与对照组相比差异显著（P＜0.05）。
各浓度组可使人肺腺癌A549细胞G0／G1、S期细胞比例减少，G2／M期细胞比例增多。
结论槐耳清膏能诱导人肺腺癌A549细胞增殖，可能与细胞被阻滞于G2／M期有关。
【总页数】2页(P6099-6100)【作者】鲁明骞;卢宏达;许新华;卢忠心;孔庆志;雷章;徐冰清;李颖琦【作者单位】湖北中医药大学临床学院，湖北武汉 430061; 三峡大学第一临床医学院肿瘤研究所宜昌市中心人民医院肿瘤内科;武汉市中心医院武汉市肿瘤研究所;三峡大学第一临床医学院肿瘤研究所宜昌市中心人民医院肿瘤内科;武汉市中心医院武汉市肿瘤研究所;武汉市中心医院武汉市肿瘤研究所;武汉市中心医院武汉市肿瘤研究所;三峡大学第一临床医学院肿瘤研究所宜昌市中心人民医院肿瘤内科;沈阳医学院【正文语种】中文【中图分类】R287【相关文献】1.槐耳清膏对肺腺癌细胞增殖凋亡及相关基因表达的影响 [J], 王卉;吴唐维;刘水逸;李晓怡;陈卫群;卢宏达;孔庆志;卢忠心2.槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响 [J], 鲁明骞;卢宏达;许新华;卢忠心;孔庆志;雷章;徐冰清;郭蓉3.槐耳清膏联合顺铂对人肺癌A549细胞和A549/DDP细胞Bax、Bcl-2及Survivin基因表达的影响 [J], 沈云飞;詹建伟4.槐耳清膏对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制 [J], 鲁明骞;周东奎;高嫣;冯雪松;陆海燕;李薇;孔庆志;卢宏达;李莉娥5.槐耳清膏对人乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖的影响 [J], 鲁明骞;冯雪松;卢宏达;雷章;许新华;卢驰;李薇;孔庆志因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
益气化瘀养阴解毒方药物血清对人肺癌A549细胞增殖及周期的影响
Ｔ ＡＮ Ｇ Ｚ ｈ ｅ ｎ ｒ Ｊ ． Ｔ Ｃ Ｍ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ，Ｈ ｕ ｎ ａ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｆ ｏ Ｔ Ｃ Ｍ， Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｓ ｈ ａ ４ １ ０ ２ ０ ８ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ２ ． Ｋ ｅ ｙ Ｄｉ ｓ ｃ ｉ ｐ ｌ ｉ ｎ ｅ ｏ ｆ Ｓ ｔ ａ ｔ ｅ
・
３ ４・
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ １ ｏ ｆ Ｉ ｎ ｆ ｏ ｒ ｍ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ Ｔ Ｃ Ｍ
Ｍ ａ ｒ ． ２ ０ １ ３ Ｖ ｏ １ ． ２ ０ Ｎ ｏ ． ３
・实 验 研 究
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益气化瘀养 阴解毒方药物 血清 对 人肺癌 Ａ ５ ４ ９细胞增殖及周期 的影 响
Ｄ ０ Ｉ ：１ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ Ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ５ — ５ ３ ０ ４ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ３ ． ０ １ ４
益 气化瘀
中图分类号：Ｒ ２ ８ ５ ． ５
文献标 识码 ：Ａ
文章编号 ：１ ０ ０ ５ ． ５ ３ ０ ４ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ ． ０ ０ ３ ４ ． ０ ２
郜文辉 ， 曾普华 。 ， 滕久祥 ， 唐珍
１ ． 湖南中医药大学中医学院， 湖南 长沙 ４ １ ０ ２ ０ ８ ：
２ ． 国家中医药管理局重点学科， 湖南省 中医药研究院附属医院肿瘤科， 湖南 长沙 ４ １ ０ ０ ０ ６
缺氧对人非小细胞肺癌细胞系A549生物学行为的影响
浙江实用医学 ２ ０ １ ３ 年２ 月第 １ ８ 卷第 １ 期Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｐ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｙ ， ２ ０ １ ３ ＂ ． Ｖ ｏ １ ． １ ８ ， Ｎ ｏ ． １
・ ｌ ５ ・
【 关键词】 靠小细 胞肺癌 Ａ ５ ４ ９ 缺氧
生物学行 为中肿瘤微 环境的一个显著特点 就
是局 部低 氧 ， 恶性 肿瘤 在 生 长 过 程 中 由于 组 织增 生 过快 必然 会 造 成 局 部 缺 氧 和供 能 与 消 耗 之 间 的不
培养 ４ 小时， 弃上清液加 ２ ０ ０ ｔ ｔ Ｌ Ｄ Ｍ Ｓ Ｏ ， 振荡 １ ０ 分钟 ， 用酶标仪 测定 ４ ９ ０ ｎ ｍ处各孔 的吸光度值 。计算 生 存率 ： 生存率 ＝ 实验孔 Ａ值／ 对照孔 Ａ值 ×ｌ ｏ ｏ ％。 １ ． ３ 缺氧对 Ａ ５ ４ ９ 细胞系凋亡 的影响 取对数生 长期细胞进行缺氧和常氧培养 ２ ４ 小时 ， 干预结束
ｔ ｒ ｉ ｇ ｅ ｌ 胶 和上 室 内 的 细胞 ， 乙醇 固定 后 结 晶紫 染 色 ，
胞培养基为含 １ ５ ％胎牛血清的 Ｒ Ｐ Ｍ Ｉ １ ６ ４ ０ ， ３ ７ ｏ Ｃ、 ５ ％ ｃ Ｏ ２ 和９ ５ ％０ ２ 的培养箱 中传代培养。取对数生长 期细胞 ， 传代后 （ 未贴壁 ） 立 和９ ５ ％０ ２ 的培养箱 中培养 ， 缺氧培养
达肝素钠抑制人肺腺癌细胞增殖作用的实验观察
达肝素钠抑制人肺腺癌细胞增殖作用的实验观察芮艳;胡丹凤;黄礼年【期刊名称】《蚌埠医学院学报》【年(卷),期】2014(39)3【摘要】目的:探讨达肝素钠抑制人肺腺癌细胞增殖的作用机制.方法:采用流式细胞术检测达肝素钠处理后A549细胞的细胞周期变化.建立肺腺癌鼠模型后,将12只荷瘤鼠随机分为达肝素钠组和对照组,分别给予达肝素钠1 500 IU/kg(0.2 ml)皮下注射和0.9％氯化钠注射液0.2ml腹腔注射,1天1次,连续用药35 d.定期测量瘤体最大及最小直径,计算瘤体积、绘制肿瘤生长曲线.第35天用戊苯巴比妥钠全身麻醉处死裸鼠,剥取瘤体称重、计算抑瘤率,并用免疫组织化学方法测瘤组织中细胞周期蛋白E(Cyclin E)的表达.结果:肺腺癌细胞株A549处理48 h后,与对照组比较,达肝素钠组G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低(P＜0.01);与对照组比较,达肝素钠组瘤重明显减小(P＜0.05);达肝素钠组抑瘤率为0.000％和64.081％;对照组及达肝素钠组瘤组织中Cyclin E的表达阳性率为6/6、3/6,差异无统计学意义(P=0.182);达肝素钠组主要表现为低表达(5/6),对照组为高表达(5/6),差异无统计学意义(P=0.081).结论:达肝素钠可阻滞人肺腺癌A549细胞于G0/G1期,使进入S期和M期的细胞减少,减少DNA的合成,抑制细胞增殖,此作用可能与其抑制细胞周期调控因子Cyclin E的表达有关.【总页数】4页(P284-287)【作者】芮艳;胡丹凤;黄礼年【作者单位】蚌埠医学院第一附属医院呼吸病科,安徽蚌埠233004;安徽省蚌埠市第三人民医院呼吸内科,233300;蚌埠医学院第一附属医院呼吸病科,安徽蚌埠233004【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.重楼皂苷Ⅶ对耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的抑制作用 [J], 王震;李亚荣;郝杰;杨晶波;李孝男2.EGF及其受体在二甲双胍抑制人肺腺癌细胞增殖中的作用 [J], 李霞;王伟;孙希霞;李延海;王志强3.凋亡抑制基因c-FLIPs对人肺腺癌细胞增殖和凋亡的作用 [J], 卫萍;李雪萍;姜凤良;罗秀成;王爽;张典;李爱连4.DACH1对人肺腺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的抑制作用 [J], 余俊杰;王建军;翟伟;赵亮;吴东5.DEAD盒多肽43小干扰RNA对司美替尼抑制人肺腺癌A549细胞增殖和诱导其凋亡作用的影响 [J], 崔黎;崔莹;赵娜;陈奎生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血管内皮抑制素的不同给药方法对肺癌A549细胞和脐静脉内皮细胞生长的影响
血管内皮抑制素的不同给药方法对肺癌A549细胞和脐静脉内皮细胞生长的影响赵强;王华贝;庞海林;马宁强;张贺龙【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2012(020)011【摘要】目的:探讨血管内皮抑制素的不同给药方法对A549肺癌细胞、脐静脉血管内皮细胞及BALB/c裸鼠移植瘤生长的影响.方法:用不同浓度的血管内皮抑制素作用于A549细胞及脐静脉血管内皮细胞,用MTT法检测其对细胞增殖的影响;构建BALB/c裸鼠A549移植瘤模型,观察不同给药方法下肿瘤体积、重量的变化;应用免疫组化法检测肿瘤组织中CD31和CD34分子的表达差异.结果:在各组不同浓度的血管内皮抑制素作用下,A549细胞增殖能力并未随抑制素浓度的增加而降低,仅在浓度为1μg/ml时与对照组有差异(P＜0.05);脐静脉血管内皮细胞增殖能力与对照组比较均无统计学意义(P＞0.05).在体内实验中,单独使用血管内皮抑制素及血管内皮抑制素联合顺铂治疗,各实验组肿瘤体积较对照组均有不同程度的缩小(P＜0.05),联合用药疗效优于单用血管内皮抑制素;单独使用血管内皮抑制素时隔日给药肿瘤抑制率最高(50.74％),联合用药3周(血管内皮抑制素1次/日+顺铂1次/周)抑瘤效果最好(96.41％);免疫组织化学结果显示各实验组肿瘤组织中CD31和CD34分子的表达均下降(P＜0.05).结论:血管内皮抑制素在体外浓度为1 μg/ml时对A549细胞生长有抑制作用,而对脐静脉内皮细胞生长没有明显抑制作用.血管内皮抑制素与顺铂联合使用较单独使用的抑瘤效果明显.血管内皮抑制素联合化疗时,每日连续给药抑瘤效果更好.%Objective:To observe the effect about different dilivery methods of endostatin on A549 cells,vascular endothelial cells andtransplanted tumor of BALB / c nude mice. Methods:To treat A549 cells and endothelial cells with different concentrations of endostatin,detected the cell proliferation by MIT assay, build BALB / c nude mice model inoculated A549 cells , observed changes of tumor volume, weight , detected differential expression of CD31 and CD34 molecules in the tumor tissue by immunohistochemical method. Results: Under the effect of different con-centrations of endostatin, value - added A549 cells were not reduced while the concentration of endostatin increased , the group of 1 μg/ml was different from the control group (P < 0. 05). The proliferation ability of endostatin was not statistically significant differenct compared with control group ( P > 0. 05 ) . In vivo experiments, the tumor volume of each experimental group reduced varying degrees compared with the control group in the treatment of separate en-dostatin and combination of endostatin and Cisplatin (P<0.05) ,the effect of combined therapy were more effective than the separate. Inhibition ratios of the tumor weight was highest(50.74% ) when endostatin was alone administra-ted every other day,the effect of antitumor was best (96.41% ) when combined therapy of three weeks (endostatin 1 times/day + cisplatin 1 times/week). The expression of CD31 and CD34 molecules in the tumor tissue decreased in each experimental group showed by the results of immunohistochemistry ( P < 0. 05 ) . Conclusion: The growth of solid tumor was related with angiogenesis of the tumor. In vitro, endostatin inhibites the growth ofA549 cells in the concen-tration of 1μg/ml,human umbilical vein endothelial cell growth was not significantly inhibites. Antitumor effect ofen-dostatin combined with cisplatin was better than the endostatin only. Antitumor effect of endostatin combined with chemotherapy may be better while endostatin daily continuous administration , these provids a reference for choice of the endostar scheme.【总页数】5页(P2223-2227)【作者】赵强;王华贝;庞海林;马宁强;张贺龙【作者单位】第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038;第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038;第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038;第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038;第四军医大学唐都医院肿瘤科,陕西西安710038【正文语种】中文【中图分类】R730.54【相关文献】1.重组人血管内皮抑制素结合放化疗对鼻咽癌临床疗效、预后及血清血管内皮生长因子的影响 [J], 曹淑琴;朱朝勇;张宽2.重组人血管内皮抑制素注射液佐治晚期胃癌的疗效及对血清中血管内皮生长因子、S100A4和癌胚抗原相关细胞黏附分子的影响 [J], 贾长河;王文玉;任颖;张昊;兰玲;刘博伟;于静3.胸腔内血管内皮抑制素注射液对老年恶性胸水患者胸腔积液血管内皮生长因子、表皮生长因子受体的影响 [J], 李燕;赵君慧;骆玉霜;李国元;李佳艺4.重组人血管内皮抑制素联合化疗对中晚期恶性肿瘤患者化疗效果及血管内皮生长因子水平的影响 [J], 张秦;陈华飞;朱有才5.重组人血管内皮抑制素注射液联合同步放化疗对不可切除Ⅲ期非小细胞肺癌患者血清血管内皮生长因子水平及预后的影响 [J], 文军;舒小镭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
吉非替尼对A549细胞增殖及细胞周期、凋亡的作用
吉非替尼对A549细胞增殖及细胞周期、凋亡的作用周苏娜;张明鑫;王健生;莫非;张佳;王峥;王昌燕;黄辰【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2010(018)005【摘要】目的:观察吉非替尼对人非小细胞肺癌A549的生长增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响.方法:用5-40μmol/L浓度范围内的吉非替尼和A549细胞共培养24、48、72h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测吉非替尼对细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测其对细胞凋亡及细胞周期分布的影响;利用抗Capspase-3 的ELISA(酶联免疫吸附)法检测是否发生细胞凋亡.结果:在5-40μmol/L浓度范围内,吉非替尼对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,以40μmol/L作用72h时的抑制率最高.流式细胞仪检测显示10μmol/L-40μmol/L的吉非替尼作用可使细胞发生G0/G1期阻滞,但即使作用48h也未发现凋亡细胞.ELISA法显示48h内,吉非替尼组与正常细胞组的Capspase-3浓度无统计学差异,但作用72h时出现凋亡.结论:吉非替尼在5-40μmol/L浓度下作用时间小于48h时,其对A549细胞的增殖抑制可能是通过阻滞A549细胞于G0/G1期而非引起细胞凋亡实现的,但作用时间达到72h时,其可以诱导A549发生细胞凋亡.【总页数】4页(P841-844)【作者】周苏娜;张明鑫;王健生;莫非;张佳;王峥;王昌燕;黄辰【作者单位】西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;齐齐哈尔市中医院,黑龙江,齐齐哈尔,161000;西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;四川大学华西医院,四川,成都,610041;西安交通大学医学院第一附属医院,陕西,西安,710061;西安交通大学医学院,陕西,西安,710061【正文语种】中文【中图分类】R730【相关文献】1.表皮生长因子受体抑制剂吉非替尼对食管癌EC9706细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 [J], 白玉;刘尚国;姚文健;赵宝生2.曲马多对肺腺癌A549细胞增殖与凋亡和细胞周期的影响 [J], 许彦劼;夏明3.白花蛇舌草对A549肺癌干细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 [J], 曾珠;何成诗;孙剑峰;刘磊;杨秀丽;肖玮4.灯盏花素对肺癌A549细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 [J], 缪慧; 朱伯金; 邵伯云5.细胞周期素D1反义脱氧寡核苷酸对A549细胞增殖及凋亡的调控作用 [J], 蒋力;闵家新;李学昌;姚珂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
藤梨根提取物抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究
藤梨根提取物抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究
孙雪飞;杜贾军;孟龙;陈景寒
【期刊名称】《山东医药》
【年(卷),期】2006(46)9
【摘要】采用MTT检测法、集落形成试验、流式细胞术检测细胞凋亡及建立裸鼠移植瘤模型进行体内实验,观察藤梨根提取物对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用.结果显示各浓度的藤梨根提取物对肺腺癌A549细胞均有较强的抑制效应,且呈现出明显的时相性和量-效依赖性;藤梨根提取物作用后G0～G1期细胞数增加,细胞出现凋亡,并随药物浓度增大作用增强;移植瘤体内试验显示藤梨根提取物高剂量组移植瘤生长缓慢,体积明显小于对照组及低剂量组.表明藤梨根提取物对人肺腺癌
A549细胞在体内外均有生长抑制作用,并可诱导其细胞凋亡.
【总页数】2页(P40-41)
【作者】孙雪飞;杜贾军;孟龙;陈景寒
【作者单位】武警山东省总队医院,山东,济南,250014;山东省立医院;山东省立医院;山东省立医院
【正文语种】中文
【中图分类】R734.2
【相关文献】
1.藤梨根提取物对肺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响 [J], 孙雪飞;裴艳涛;杨国涛;尹秋伟;吴铭生
2.双氢青蒿素抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究 [J], 陈卫强;戚好文;吴昌归;崔燕;刘斌;李焰;吴军正
3.藤梨根提取物抗肺癌作用的体内实验研究 [J], 孙雪飞;裴艳涛;杨国涛;尹秋伟;吴铭生
4.藤梨根提取物抑制肺癌A549细胞增殖作用机制研究 [J], 孙雪飞;尹秋伟;裴艳涛;杨国涛;李希波;王德江
5.太白山藤梨根提取物对人喉癌细胞HeP-2生长抑制作用分析 [J], 郭洁;张晓双;刘继平
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奥曲肽对人肺癌细胞株A549的增殖抑制作用
奥曲肽对人肺癌细胞株A549的增殖抑制作用田春桃;韩利艳;范慧娟【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2008(043)001【摘要】目的:探讨奥曲肽对于人肺癌细胞株A549生长的抑制作用.方法:以体外培养的人肺癌细胞株A549为靶细胞,运用四氮唑盐法(MTT法)观察奥曲肽作用48 h 后对于人肺癌细胞株生长的影响.以流式细胞仪分析其对细胞周期的影响.结果:MTT 法结果显示奥曲肽作用48 h可抑制A549的生长, 并呈剂量依赖性, IC50=1.62 mg/L.流式细胞仪测定结果显示:G0/G1期细胞比例增加,G2/M期细胞比例减少,且奥曲肽质量浓度增高到1.60 mg/L以上时,G2/M期比例均降为0,细胞周期直接阻滞在G0/G1期,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:奥曲肽可抑制体外培养的人肺癌细胞株A549增殖,机制可能是将肺癌细胞阻滞于G0/G1期.【总页数】3页(P139-141)【作者】田春桃;韩利艳;范慧娟【作者单位】三门峡市中心医院肿瘤科,三门峡,472000;三门峡市中心医院肿瘤科,三门峡,472000;三门峡市中心医院肿瘤科,三门峡,472000【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.索拉非尼联合吉非替尼对人肺癌细胞株A549的生长抑制作用 [J], 温莹浩;林小小;钱海华;彭济勇;汤娟;翟蓓蓓2.RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株A549增殖的抑制作用 [J], 邓征浩;周建华;曹慧秋;沈明;文继舫3.人参皂苷CK对人肺腺癌A549细胞株的增殖抑制作用及其机制 [J], 王红;邓晶;刘珊;付凤莲;蒋永新4.奥曲肽对人肺癌细胞株A549化疗增效作用的体外研究 [J], 田春桃;韩利艳;范慧娟5.吲哚-3-原醇对人肺癌细胞株A549的促凋亡和增殖抑制作用 [J], 付娟;尹宜发;姚霞;杨欣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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达肝素钠对A549细胞生长状态及细胞周期的影响(一)
作者：陈克芳陈芳兰黄龙杰
【摘要】目的研究达肝素钠对体外生长的肺腺癌A549细胞活性及细胞周期的影响。
方法用6种不同浓度(0、2、10、50、100和500IU/ml)的达肝素钠干预A549细胞的生长，用MTT 方法在4个时间点(6、12、24和36h)检测细胞活性;将经过24h普通培养的A549细胞继续在含有50IU/ml达肝素钠的培养液中培育，以正常培育的细胞作为对照组，将两组细胞24h 后以PI染液染色，用流式细胞仪检测并分析细胞周期。
结果达肝素钠降低A549细胞活性，这种作用表现出时间依赖性和浓度依赖性;达肝素钠主要抑制细胞在G1期。
结论达肝素钠对A549细胞活性的降低与对细胞周期的抑制作用有关。
【关键词】低分子量肝素;达肝素钠;肺腺癌;细胞周期
肝素及其衍生物的抗细胞增殖作用，目前在平滑肌上进行的研究较多。
Guyton等〔1〕报道，不论在体内还是在体外，肝素都能降低平滑肌细胞(SMC)的有丝分裂。
其他部位的SMC，如气道及肠道、子宫肌层及子宫肌瘤的生长也能被肝素抑制〔2〕。
也有在内皮细胞上进行的关于肝素的抗增殖作用研究，如Khorana等〔3〕报道肝素抗微血管内皮细胞(MVECs)和奇静脉内皮细胞的作用。
关于未分级肝素(UFH)或低分子肝素(LMWH)对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用，目前较少有文献报道。
该研究选用LMWH之一的达肝素钠进行相关研究。
1材料与方法
1.1主要试剂与仪器A549细胞(兰州大学医学院实验中心冻存)。
CO2细胞培养箱(Biorad公司);超净工作台(CleanBlench公司);全自动酶标仪(Biorad公司)。
RPMI1640培养基(Gibco);达肝素钠(Fragmin)。
1.2实验方法
1.2.1MTT法检测细胞活性将培养的A549细胞用胰酶消化，调整细胞浓度,培养24h。
弃去培养基，加入含有所需浓度达肝素钠的RPMI1640培养基，继续培养。
实验结束前4h,加入MTT，继续培养。
4h后弃去培养基，加入DMSO，避光振荡10min。
选择570nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔的光吸收值(OD)。
1.2.2PI染色法检测细胞周期分布将培养的A549细胞用0.25%的胰酶消化，传代到6孔板的各孔中，培养24h。
弃去培养基，加入含有所需浓度达肝素钠的RPMI1640培养基，继续培养。
在设定的时间点按组收集细胞。
收集的细胞以预冷PBS洗涤2次。
离心5min，弃上清。
加入含0.5%PI和0.01%RNase染液，重悬细胞，室温避光反应30min。
1h内流式细胞仪检测，在488nm激发波长下测定DNA含量，分析细胞周期的分布情况。
1.3统计学分析数据以x±s表示，SPSS11.0统计软件分析,两组间比较用t检验。
2结果
2.1达肝素钠对A549细胞细胞活性的影响用6种不同浓度(0、2、10、50、100和500IU/ml)的达肝素钠干预A549细胞的生长，用MTT方法在4个时间点(6、12、24和36h)检测细胞活性。
达肝素钠能降低A549细胞活性，而且这种作用表现出时间和浓度依赖性。
在不含达肝素钠的培养基中培育的细胞，其12h和24h的细胞活性基本一致，但24h的细胞活性明显下降，这种下降是由培养基营养成分的耗竭所致，故24h以前的细胞活性值较能准确反应药物对细胞的影响。
该数据还显示，用高浓度的达肝素钠(100和500IU/ml)培养细胞24h后，A549细胞活性大部分被抑制，但这种抑制可能与药物的毒性作用有关。
50IU/ml达肝素钠在干预细胞生长24h后能抑制大约50%的细胞活性。
为避免培养基成分的变化和药物毒性作用对实验结果的干扰，在随后的试验中，选择50IU/ml达肝素钠为干预浓度，测定干预24h后的各项指标。
见图1。
图1达肝素钠对肺腺癌A549细胞细胞活性的影响
2.2达肝素钠对A549细胞细胞周期的影响为观察达肝素钠对A549细胞周期进展的影响，将经过24h普通培养的A549细胞继续在含有50IU/ml达肝素钠的培养液中培育，以正常培育
的细胞作为对照组，将两组细胞24h后以PI染液染色，用流式细胞仪检测并分析细胞周期的分布。
流式细胞分析显示达肝素钠抑制细胞周期的进展。
与对照组相比，实验组细胞在G1期比率显著增加〔(75.7±2.1)%、(54.8±1.9)%;P0.05〕，在S期比率明显降低〔(11.3±1.96)%、(32.1±1.5)%;P0.05〕。
处于G2/M期的细胞比率虽有增加，但这种差异与对照组比较没有统计学意义〔(9.2±1.1)%、(11.3±2.1)%;P>0.05〕。
3讨论
临床观察发现，以UFH和LMWH为主的抗凝治疗能改善小细胞肺癌(SCLC)的预后〔4〕。
在385例进展期的实体瘤患者上进行的FAMOUS(thefragminadvancedmalignancyoutcomestudy)表明，皮下注射LMWH1年后患者生存率增加5%;患者中位生存率由对照组24.3个月增加到试验组的43.5个月〔5〕。
Klerk等进行的MALT(malignancyandlow molecular weightheparintherapy)是在具有恶性肿瘤但没有静脉血栓栓塞的302例患者上进行的另外一项试验，其基本结果与FAMOUS类似〔6〕。
研究还发现，LMWH能增强化疗药物的作用〔7〕。
另外，LMWH在肿瘤治疗上表现出的良好作用不只与其抗凝作用有关〔8〕。
对于不同种类的细胞、不同状态的细胞，对不同种类的肝素可能表现不同的反应。
文献表明，脱离静止状态的血管SMC对肝素的敏感性是处于指数增长的细胞的50到100倍〔9〕;但Mason等研究发现指数增殖状态的人奇静脉SMC对肝素的反应比静止的更明显〔10〕。