流式细胞凋亡分析
流式细胞凋亡原理
流式细胞凋亡原理
细胞凋亡是一种由细胞内部调控的程序性死亡过程，它在生物体的正常发育过程中起到重要的作用。
在这个过程中，细胞通过一系列的生物化学反应，自我分解并最终死亡。
流式细胞凋亡分析是一种常用的方法，用于检测细胞凋亡的程度和特征。
流式细胞凋亡分析的基本原理是利用流式细胞仪对细胞进行分析。
通常，细胞凋亡会引起细胞中DNA的断裂和核蛋白的降解。
在实验中，细胞被染色剂如荧光素一亚胺（propidium iodide，PI）等染色，这种染色剂只能进入破损的细胞核，并与DNA结合。
通过流式细胞仪的激光器激发这些染色剂，然后根据细胞核中DNA的含量，可以将细胞分为不同的群体。
正常细胞的DNA含量通常是稳定的，而凋亡细胞的DNA会出现不同程度的断裂。
因此，通过分析细胞在不同区域的分布情况，可以推断细胞中凋亡的程度。
常用的方法是使用峰值计数，即测量细胞在不同区域的峰值数量，并将其与正常细胞进行比较。
此外，还可以使用其他标记物如ANNEXIN V等来检测细胞的凋亡程度。
流式细胞凋亡分析具有高通量、高准确性和高灵敏度的特点，因此在基础研究和临床诊断中得到了广泛应用。
它可以用于检测细胞凋亡的发生机制、筛选药物的活性以及评估治疗效果。
同时，流式细胞凋亡分析还可以与其他技术如细胞培养和基因表达分析等相结合，为细胞凋亡的研究提供更全面的信息。
《细胞实验》13 流式细胞仪检测细胞凋亡操作流程
流式检测细胞凋亡Annexin V 检测细胞凋亡 (2)实验原理 (2)实验用品 (2)操作步骤 (3)Annexin V Blocking (5)凋亡细胞的DNA 断裂片段分析 (7)实验原理 (7)实验用品 (8)操作步骤 (9)BrdU Flow Kits 检测细胞增殖 (12)实验原理 (12)BrdU Flow Kits 试剂盒 (12)结果分析 (17)流式仪器设置指南 (18)线粒体膜电位变化检测细胞凋亡 (22)实验原理 (22)实验用品 (22)样本制备 (23)结果分析 (24)注意事项 (24)Active Caspase-3 检测细胞凋亡 (26)实验原理 (26)实验步骤 (27)结果分析 (28)Annexin V 检测细胞凋亡实验原理Annexin V 是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。
它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。
在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS) 由质膜内侧翻向外侧。
Annexin V 与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。
由于在发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变，因此，与DNA 碎片检测比较，使用Annexin V 可以更早地检测到凋亡细胞。
因为细胞坏死时也会发生磷脂酰丝氨酸外翻，所以Annexin V 常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI 或7-AAD)合并使用，来区分凋亡细胞(Annexin V+/核酸染料-)与死亡细胞(Annexin V+/核酸染料+)。
实验用品1. 一次性12×75mm Falcon试管。
2. PBS缓冲液：含0.1%NaN ，过滤后2-8°C保存。
33. 微量加样器和加样头。
4. Annexin V Binding Buffer缓冲液（Cat. No. 66121E）：浓度为10×，使用时，用稀释为1×浓度的应用液。
流式细胞仪检测细胞凋亡
流式细胞仪检测细胞凋亡:PI单染色法基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。
这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面：1. 细胞核的改变：由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变。
研究表明，用各种染色体荧光染料对经固定的凋亡细胞进行染色，其DNA可染性降低。
许多学者把这种DNA可染性的降低认为是凋亡细胞的标志之一。
2. 光散射特性：凋亡细胞形态上的改变影响它们的光散射特性。
在流式细胞仪上，前散射光与细胞的大小有关，而侧散射光反映的是光在细胞内的折射作用，与细胞内的颗粒多少有关。
在细胞凋亡时，细胞固缩，体积变小，故前散射光降低，这一特性往往被认为是凋亡细胞的特点之一。
此外细胞凋亡时由于染色体降解，核破裂形成，细胞内颗粒往往增多，故凋亡细胞侧散射光常增加。
细胞坏死时，由于细胞肿胀，其前散射光增大；侧散射光在细胞坏死时也增大，因此可根据前散射光和侧散射光区别凋亡细胞和坏死细胞。
但需要注意的是，根据前散射光和侧散射光判断凋亡细胞的可靠性受被检测细胞形态上的均一性和核胞浆比率影响很大。
因此在某些淋巴细胞凋亡中，用光散射特性检测凋亡的可靠性较好，而在肿瘤细胞凋亡中，其可靠性就较差。
根据光散射特性检测凋亡细胞最主要的优点是可以将光散射特性与细胞的表面免疫荧光分析结合起来，用以区别经这些特殊处理发生选择性凋亡的淋巴细胞亚型。
也可用于活细胞的分类。
试剂与仪器PBS溶液；PI染液：将PI溶于PBS（pH7.4）中，终浓度为100ug/ml。
用棕色瓶4℃避光保存。
70%乙醇400目筛网流式细胞仪实验步骤1. 收集细胞｛数目约（1~ 5）×106个/mL｝，500 ~ 1000 r/min离心5min，弃去培养液。
2. 3ml PBS洗涤1次。
3. 离心去PBS，加入冰预冷的70%的乙醇固定，4℃，1—2小时。
流式细胞仪检测凋亡
流式细胞仪检测凋亡细胞凋亡的检测方法众多，流式细胞仪检测凋亡，是常用的方法。
由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。
因此，具有其它方法无可比拟的优越性。
本文主要结合我室的一些实际经验，力图简单明了的介绍流式在检测凋亡方面的应用。
下面是一幅凋亡过程图。
在凋亡诱导剂的作用下，首先是细胞色素C和apa f－1形成复合体，线粒体的功能发生衰退；后是caspase家族激活，磷脂酰丝氨酸外翻，这时细胞的形态已经发生了改变，可以看到细胞变小，胞核皱缩；最后是细胞内DNA断裂，形成凋亡小体。
在凋亡发生的各个过程当中，都有相应的流式细胞仪的检测方法，我室曾经检测过的方法包括：1线粒体功能2DNA Cycle3 Caspases4Annexin V Assay6DNA Fragmentation Assays基本上涵盖了细胞凋亡的各个期，对各种检测方法的原理和特点做一个简单介绍。
线粒体功能检测的试剂盒有深圳达科为公司代理的试剂盒（产品编号为BVK250）和BD公司出售的盒Apo-Alert试剂盒。
其检测主要采用阳离子型荧光染料。
原理是：正常细胞中，染料可以在线粒体内聚集，发出明亮的红色荧光；而细胞凋亡后，其线粒体膜电位发生改变，染料无法进入线粒体，只能在胞质中以单体形式存在，发出绿色的荧光。
可以在荧光显微镜下，或流式检测。
采用488nm激发，其检测波长分别是527nm和590nm。
整个实验过程操作简单，只需要30min就可以见到结果。
Caspase家族可以检测的分子非常多，也有不少商业的试剂盒可以应用。
即使没有相应的试剂盒，只要有相应抗体基本上是可以检测的，具体的方法是参照细胞内蛋白检测的步骤。
在细胞凋亡过程中伴随着一系列的形态特征改变，细胞膜的改变是这些特征中较早出现的一种。
在凋亡细胞中，细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的外侧。
Annexin－V是一种35－36 KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白，它对PS具有较高的亲和力。
流式细胞仪检测细胞凋亡操作流程
流式检测细胞凋亡A n n e x i n V检测细胞凋亡 (2)实验原理 (2)实验用品 (2)操作步骤 (3)Annexin V Blocking (5)凋亡细胞的D N A断裂片段分析 (7)实验原理 (7)实验用品 (8)操作步骤 (9)B r d U F l o w K i t s检测细胞增殖 (12)实验原理 (12)BrdU Flow Kits 试剂盒 (12)结果分析 (17)流式仪器设置指南 (18)线粒体膜电位变化检测细胞凋亡 (22)实验原理 (22)实验用品 (22)样本制备 (23)结果分析 (24)注意事项 (24)A c t i v e C a s p a s e-3检测细胞凋亡 (26)实验原理 (26)实验步骤 (27)结果分析 (28)A n n e x i n V检测细胞凋亡实验原理Annexin V 是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。
它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。
在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS) 由质膜内侧翻向外侧。
Annexin V 与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。
由于在发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变，因此，与DNA 碎片检测比较，使用Annexin V 可以更早地检测到凋亡细胞。
因为细胞坏死时也会发生磷脂酰丝氨酸外翻，所以Annexin V 常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI 或7-AAD)合并使用，来区分凋亡细胞(Annexin V+/核酸染料-) 与死亡细胞(Annexin V+/核酸染料+)。
实验用品1. 一次性12⨯75mm Falcon试管。
2. PBS缓冲液：含0.1%NaN3，过滤后2-8︒C保存。
3. 微量加样器和加样头。
4. Annexin V Binding Buffer缓冲液（Cat. No. 66121E）：浓度为10⨯，使用时，用稀释为1⨯浓度的应用液。
细胞凋亡流式细胞术检测
该法简单、快速，但不适于常规多功能流式细胞仪 (不具备紫外光源)的检测。 主要有Caspases-3流式细胞检测试剂盒，Caspases-
2/ Caspases-4/Caspases-6/Caspases-7/Caspases-9等抗
体
2.6 DNA 碎片分析：Apo-BrdU
核酸内切酶活化使核小体内DNA断裂为50~300kb片段，裂解为200bp
通透性和对称性均会改变。
解决方法： 形态学特征是区分凋亡和坏死的“金标准”。
3.3 样本制备过程中凋亡细胞的选择性丢失：
贴壁培养细胞的分离
凋亡早期，细胞即脱离培养瓶表面并悬浮在培养液中。因此去除培养液， 然后加胰酶或EDTA消化的方法不可避免的会失去很多凋亡细胞。 ---将培养液和消化下来的细胞合在一起 胰酶消化本身就倾向于破坏细胞膜已破损的晚期凋亡和坏死细胞，导致 丢失。
2 细胞凋亡的流式检测方法
利用流式仪测定细胞光散射可对凋亡细胞进行分析 凋亡早期细胞因体积减小，胞浆及染色质固缩，FSC变 小，SSC增大 凋亡晚期细胞FSC、SSC均变小 坏死细胞则因细胞膜通透性改变，细胞肿胀， FSC 、 SSC 变大，胞膜破裂，胞内含物释出后 FSC 、 SSC 均变 小。
此法简单、可靠，由于凋亡时 细胞膜的改变大大早于DNA 的 改变，因此Annexin V/PI(或7-
AAD )双染色是检测早期凋亡
细胞的敏感方法。 由于该法必须用活细胞，因此 检测时间受到限制，且对凋亡 晚期细胞和坏死细胞无法准确 区分。
2.3 细胞内钙离子测定
Fluo-3-Am为新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂，进入细胞后
2.1 PI单染检测
与细胞周期相同，利用PI染色，通过检测DNA含量来 同时判定细胞周期和凋亡。 凋亡过程中，细胞内核酸酶释放，细胞DNA发生有序
流式细胞凋亡结果解读
流式细胞凋亡结果解读
流式细胞凋亡结果解读是通过流式细胞术来评估细胞中的凋亡程度。
凋亡是一种正常的细胞死亡形式，它在维持机体内细胞平衡中起着重要的调节作用。
在流式细胞凋亡结果解读中，我们通常会关注两个参数：细胞凋亡率和凋亡程度。
细胞凋亡率是指在一定细胞总数中凋亡细胞数量所占的比例。
常用的流式细胞仪会使用特定的荧光探针，如Annexin V和PI，以区分细胞的生死状态。
Annexin V可以结合在凋亡细胞表面的磷脂，而PI则能够进入已损伤的细胞。
通过流式细胞仪的检测和分析，我们可以确定细胞的凋亡率。
凋亡程度是指凋亡细胞中发生的具体变化。
在凋亡过程中，细胞会发生DNA 断裂和染色质凝固，体积也会减小。
通过流式细胞仪可以进一步评估这些变化。
例如，可以使用荧光染料如Hoechst 33342染色核酸，以观察DNA断裂。
同时，还可以使用其他荧光探针或标记特定蛋白来检测凋亡相关的分子信号途径。
通过准确评估细胞凋亡率和凋亡程度，我们可以了解细胞对于各种刺激的响应和机体内细胞死亡的调节情况。
这对于研究疾病的发生机制、药物研发以及评估治疗效果都具有重要意义。
总之，流式细胞凋亡结果解读是通过流式细胞术来评估细胞中的凋亡程度和凋亡细胞比例。
这种评估可以为我们研究细胞死亡的机制和判断治疗效果提供重要的参考。
流式测细胞凋亡原理
流式测细胞凋亡原理
细胞凋亡是一种形态学特征独特的程序性细胞死亡方式，它在多种生理和病理状态下发挥重要作用。
流式细胞术可以用来分析和测量细胞凋亡，其中包括细胞表面标记物的检测和细胞染色。
流式细胞术是一种流式细胞仪结合荧光标记物的技术。
在细胞凋亡的研究中，最常用的荧光染料是亚碧菜素（annexin V）和PI（propidium iodide）。
亚碧菜素可以结合凋亡细胞表面的磷脂（phosphatidylserine），而PI则可以进入破损的细胞膜并结合DNA。
流式细胞术中，细胞样本首先经过适当的处理，如细胞固定和染色，以保持细胞形态并增强荧光信号。
然后，样本通过流式细胞仪中的流动通道，单个细胞经过激光束的照射而产生荧光信号。
流式细胞仪会同时检测和记录细胞的形态学特征和荧光信号。
在细胞凋亡的测量中，亚碧菜素和PI的荧光信号用于区分不同类型的细胞。
在正常细胞中，磷脂位于细胞膜的内侧，不会结合亚碧菜素。
而在凋亡细胞中，磷脂外露到细胞膜的外侧，可以与亚碧菜素结合。
通过检测亚碧菜素的荧光信号，可以确定凋亡细胞的比例。
同时，PI的荧光信号用于鉴定破损的细胞，因为PI只能进入破损的细胞并结合DNA。
通过流式细胞术，可以获得细胞凋亡的定量信息，例如凋亡细
胞的比例和凋亡细胞的亚型。
这对于研究细胞凋亡的机制以及相关疾病的发生和发展具有重要意义。
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细胞凋亡的特征
形态学特征： 形态学特征： DNA降解后，形成长度主要为180DNA降解后，形成长度主要为180降解后 180 200bp的DNA片断，随后细胞裂解成许多有 200bp的DNA片断， 片断 膜包被的小体，称为凋亡小体（ 膜包被的小体，称为凋亡小体（apoptotic bodies),最后被巨噬细胞吞噬 最后被巨噬细胞吞噬， bodies),最后被巨噬细胞吞噬，但不会引 起周围组织的炎症反应。 起周围组织的炎症反应。凋亡小体是凋亡 细胞特征性的标志。 细胞特征性的标志。如在显微镜下观察到 凋亡小体，则可确认为细胞发生了凋亡。 凋亡小体，则可确认为细胞发生了凋亡。
概 念
细胞凋亡是维持人体正常生理过程和 功能活动所必需的， 功能活动所必需的，是多细胞生物生命活 动过程中不可缺少的组成内容， 动过程中不可缺少的组成内容，是其藉以 存活的需要，贯穿了生物全部生命周期中。 存活的需要，贯穿了生物全部生命周期中。
概 念
细胞凋亡与细胞坏死（necrosis） 细胞凋亡与细胞坏死（necrosis）是 细胞死亡的两种模式， 细胞死亡的两种模式，但两者有明显的区 别。后者是由于细胞受到严重损伤或或大 剂量细胞毒药物作用后发生的被动分解过 并可导致周围组织的炎症反应。 程，并可导致周围组织的炎症反应。
流式细胞凋亡分析
概 念
细胞凋亡（apoptosis） 细胞凋亡（apoptosis）是指有核细 胞在一定条件下通过启动其内部自身机制， 胞在一定条件下通过启动其内部自身机制， 主要是通过内源性DNA DNA内切酶的激活而发 主要是通过内源性DNA内切酶的激活而发 生的细胞死亡过程。 生的细胞死亡过程。细胞凋亡是受基因控 制的一种主动性细胞自杀过程， 制的一种主动性细胞自杀过程，是生物体 中一种普遍存在的现象。 中一种普遍存在的现象。
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： caspase蛋白酶 蛋白酶： 1 caspase蛋白酶： caspase- 是最重要的指示蛋白酶， caspase-3是最重要的指示蛋白酶，为 17kD和12kD亚单位组成的异二聚体 亚单位组成的异二聚体。 17kD和12kD亚单位组成的异二聚体。活化 的caspase-3可以蛋白水解切割和激活其他 caspasecaspase、相关的胞质靶位点（细胞因子18 18， caspase、相关的胞质靶位点（细胞因子18， CK18)和细胞核靶位点 Caspase和细胞核靶位点。 CK18)和细胞核靶位点。Caspase-3切割 CK18是凋亡过程中caspase切割发生的早期 是凋亡过程中caspase CK18是凋亡过程中caspase切割发生的早期 指示因子。 指示因子。
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： caspase蛋白酶 蛋白酶： 1 caspase蛋白酶： 启动caspase作用于凋亡信号触发后上 启动caspase作用于凋亡信号触发后上 caspase 游的不可逆位点。效应caspase caspase由启动胱冬 游的不可逆位点。效应caspase由启动胱冬 肽酶激活，作用于下游的执行位点，裂解 肽酶激活，作用于下游的执行位点， 细胞成凋亡小体。 细胞成凋亡小体。分子结构相互联系的这 两部分影响线粒体， 两部分影响线粒体，通过线粒体方式执行 凋亡的信号。bcl凋亡的信号。bcl-2家族成员能调节执行位 点的进程。 点的进程。
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： caspase蛋白酶 蛋白酶： 1 caspase蛋白酶： caspase可能在凋亡细胞的形态变化中 caspase可能在凋亡细胞的形态变化中 起了主导作用。Caspase通常是以酶原形式 起了主导作用。Caspase通常是以酶原形式 存在，通过其自身诱发的蛋白水解而转化 存在， 为有活性的酶，活化的caspase caspase进一步激活 为有活性的酶，活化的caspase进一步激活 其他的caspase前体， caspase前体 其他的caspase前体，形成了级联放大切割 过程，裂解重要的大分子物质，导致凋亡。 过程，裂解重要的大分子物质，导致凋亡。
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： caspase蛋白酶 蛋白酶： 1 caspase蛋白酶： 细胞凋亡的发生和发展过程也可能是 水解酶级联切割的过程， 水解酶级联切割的过程，它将大分子结构 的物质如DNA、细胞骨架水解变性成小分子 的物质如DNA、 DNA 碎片，致使细胞发生凋亡。 碎片，致使细胞发生凋亡。
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： caspase蛋白酶 蛋白酶： 1 caspase蛋白酶： 其中， 其中，半胱氨酸蛋白酶家族发挥了重 要作用。 要作用。它具有一段携带活化位点的保守 氨基酸序列，可以特异性识别、切割天冬 氨基酸序列，可以特异性识别、 氨酸转氨甲酰酶残基。 氨酸转氨甲酰酶残基。由于这些蛋白酶具 有相同的结构和功能特性而被称为caspase caspase。 有相同的结构和功能特性而被称为caspase。
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： 胞质Ca pH的变化 的变化： 4 胞质Ca2+和pH的变化： 细胞内Ca 细胞内Ca2+和H+浓度的稳定对维持生命 活动至关重要。胞内Ca 库的释放， 活动至关重要。胞内Ca2+库的释放，胞质 Ca2+与细胞凋亡关系密切。胞外Ca2+内流促 与细胞凋亡关系密切。胞外Ca 使胞质Ca 持续升高， 使胞质Ca2+持续升高，作为凋亡信号启动凋 亡发生。 亡发生。
细胞凋亡的特征
形态学特征： 形态学特征： 凋亡细胞另一个形态特征通过总DNA提 凋亡细胞另一个形态特征通过总DNA提 DNA DNA凝胶电泳分析 可呈现出梯状图谱， 凝胶电泳分析， 取，DNA凝胶电泳分析，可呈现出梯状图谱， 可见清晰的DNA 梯子〞(ladder)。 DNA〝 可见清晰的DNA〝梯子〞(ladder)。
细胞凋亡的基因调控
细胞凋亡受基因的调控，其机制非常 细胞凋亡受基因的调控， 复杂。凋亡基因可分为两类： 复杂。凋亡基因可分为两类： 1诱导基因：野生型p53基因、c-myc、细胞 诱导基因：野生型p53基因、 myc、 p53基因 表面抗原基因Apo 1(Fas)等 Apo表面抗原基因Apo-1(Fas)等 2抑制基因：bcl-2、突变型p53基因和ras 抑制基因：bcl突变型p53基因和ras p53基因和 基因等
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： 胞质Ca pH的变化 的变化： 4 胞质Ca2+和pH的变化： 此外， 此外，Ca2+的释放打破了细胞内结构的 稳定， 稳定，使得细胞凋亡效应系统的关键成分 开始和细胞结构正常时不能接触到的基质 接触，从而触发细胞凋亡。 接触，从而触发细胞凋亡。
细胞凋亡的特征
细胞凋亡的特征
形态学特征： 形态学特征： 电镜下，细胞核内可见高电子密度区， 电镜下，细胞核内可见高电子密度区， 这是核DNA在核小体连接处断裂成核小体后， 这是核DNA在核小体连接处断裂成核小体后， DNA在核小体连接处断裂成核小体后 在异染色质区聚集形成的染色质浓缩块。 在异染色质区聚集形成的染色质浓缩块。 染色质聚集区以外的低电子密度区为透明 是由于核孔变大导致其通透性增加， 区，是由于核孔变大导致其通透性增加， 细胞质中水分不断渗入而造成。 细胞质中水分不断渗入而造成。线粒体增 殖，呈空泡化。内质网腔扩大，为凋亡细 呈空泡化。内质网腔扩大， 胞形成自噬体提供包裹膜。 胞形成自噬体提供包裹膜。细胞骨架变得 致密、紊乱。 致密、紊乱。
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： 线粒体的变化： 3 线粒体的变化： 线粒体膜电位的变化发生在细胞凋亡 的早期。 的早期。线粒体膜电位是由于其内膜两侧 质子和其他离子分布不对称造成的。线粒 质子和其他离子分布不对称造成的。 体参与了凋亡的调控和实施。 体参与了凋亡的调控和实施。与凋亡密切 相关的bcl 家族分布在细胞内膜系统， bcl相关的bcl-2家族分布在细胞内膜系统，其 中线粒体外膜上分布最多，bcl中线粒体外膜上分布最多，bcl-2具有抑制 线粒体通透性变化的能力， 线粒体通透性变化的能力，并通过此途径 抑制细胞凋亡。 抑制细胞凋亡。
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： 核酸内切酶的激活： 2 核酸内切酶的激活：
细胞凋亡的特征
生化特征： 生化特征： 线粒体的变化： 3 线粒体的变化： 线粒体发生的重要改变之一就是凋亡 诱导因子使线粒体通透性升高， 诱导因子使线粒体通透性升高，膜上巨型 通道开放，使线粒体蛋白进入细胞液中， 通道开放，使线粒体蛋白进入细胞液中， 线粒体膜两侧质子不对称性消失， 线粒体膜两侧质子不对称性消失，线粒体 膜电位迅速下降， 膜电位迅速下降，电子传递与呼吸链解偶 联。
概 念
细胞凋亡的作用主要包括以下几方面： 细胞凋亡的作用主要包括以下几方面： 清除无功能的细胞； 清除无功能的细胞； 控制细胞数量； 控制细胞数量； 清除病态的或有害的细胞； 清除病态的或有害的细胞； 清除多余的细胞； 清除多余的细胞；
细胞凋亡的特征
形态学特征： 形态学特征： 光镜下， 光镜下，凋亡细胞最突出的形态学特 征是细胞核固缩、染色质浓集、细胞变圆 征是细胞核固缩、染色质浓集、 皱缩而细胞膜保持完整， 皱缩而细胞膜保持完整，其中胞核变化尤 为突出。 为突出。染色质的浓集可能是由于凋亡细 胞核双链DNA发生裂解所致。 DNA发生裂解所致 胞核双链DNA发生裂解所致。