人参总皂苷
人参茎叶总皂苷提取流程
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紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量
线性范围
反应温度和反应时间的影响
将人参总皂苷2浓
?
仪器和试剂
° 2∞
硫酸在设定的温度下反应 定时取样 测定 型和
⁄ ≅
型紫外 可
∀ 人参总
处的吸光度 ∀ 至吸光度不再升高 即可认为 反 应 已 达 完全 ∀ 结果在
2 3
见分光光度计 超声波清洗器 ⁄ 大孔吸附树脂 天津 骨胶厂 ∀ 装入玻璃层析柱 皂苷和人参 皂 苷 所 对照品 中国药品生物制品检定
3 3 3 4
蒸干 以浓硫酸溶解残渣并定容至
处的吸光度值 扣除空白样
∀
品的吸光度 代入线性方程 计算出样品中的人参总皂 计含量 见表 取 加入
∀
大孔树脂2 ∂ 法也可用于人参蜂王浆 !双宝素等 本方法的原理也适用于分析糖类和苷类 ∀ 我 们
收稿日期
加样回收率考察
粒双宝素胶囊 研匀 精 人参总皂苷 以人参皂苷 次 结果
口服液中人参总皂苷含量测定 ∀ 用此法分析过人参多糖及地黄中梓醇含量 结果满意 ∀
密称取 计 见表
按样品测定方法项下操作 重复测定
和 取已经在
ε 条件下 人参总皂苷彻
底反应所需的时间分别为 稳定性考察 苷反应液定时测其 在 内保持恒定 ∀
2 4
和
ε 水浴
∀
的人参总皂
正丁醇 !乙醇 !浓硫酸均为分析纯 ∀ 红参 !生晒参均采 自 吉 林 西 洋 参 为 美 国 进 口 三
处的吸光度值 结果 精密称取 红参于 和
七采自云南 双宝素胶囊 正大青春宝药业有限公司 ∀
2 5
即可将人参皂苷提净 ∀ 精密称取约 样品于具塞锥形
验
加入量
测得量
回收率
平均回收 率
提取人参皂苷并且检验以及在过程的一些注意事项
1.人参皂苷提取人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参皂甙和稀HCl在醇液中进行温和酸水解，可得到三种皂甙元，齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。
而不能得到原人参二醇和原人参三醇，这是因为在酸水解过程中侧链的20－位碳原子上的羟基（－OH）与该链上的双键（C＝C）易闭环，而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。
水解后，除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂甙元，经重结晶获得纯品，分别与已知皂甙的红外光谱相一致。
2.人参皂甙提取和甙元分离工艺流程①人参皂甙提取工艺：人参茎叶粗粉20g热水提取1小时，粗滤，（棉花）提取液药渣加0.6g是会乳沉淀，并调至PH9－10，放置10分钟，抽滤沉淀物滤液浓硫酸调PH7，放置10分钟。
中性提取液回收后，上大孔树脂柱，先用水洗至无色，再用70％氨性醇洗至绿色。
乙醇洗脱液回收乙醇人参总皂甙（黄白色）a)人参皂甙元的水解和甙元的分离流程人参总皂甙加含5％HCl的50％乙醇液，加热回流2小时沉淀水解液（酸性皂甙元部分）加水稀释，水浴蒸去醇，氯仿萃取3次（10，5，5ml）水层氯仿层干燥，无水NaSO4回收氯仿总皂甙元少量苯溶解，硅胶柱层析，用苯－乙酸乙脂（8：2）洗脱组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ95％乙醇重95％乙醇重丙酮结晶结晶3次结晶3次2次齐墩果酸人参二醇人参三醇mp299-301℃mp245-250℃mp244-246℃1.操作方法人参总皂甙的提取：取人参茎叶粗粉20g，放入烧杯用热水（80℃－90℃）提取1小时，然后用棉花粗滤，在所得滤液中加入0.6g水石灰乳除杂并调PH9－10放置10分钟左右，过滤，再将滤液用浓硫酸（少量）调PH7，放置10分钟左右，回收提取液至少量（5－10ml），再上大孔树脂柱（注：此柱应提前洗好，清洗办法略）先用蒸馏水洗至无色，再用70％的乙醇洗至无色，分别用小瓶接收。
人参茎叶总皂苷提取,纯化工艺优化研究
人参茎叶总皂苷提取,纯化工艺优化研究人参是一种珍贵的中药材，其主要有效成分之一为人参皂苷。
在人参中，人参皂苷主要存在于人参的茎叶部分。
人参茎叶总皂苷的提取和纯化工艺是非常重要的研究课题。
人参茎叶总皂苷的提取工艺主要包括以下几个步骤：粉碎、提取、浓缩和干燥。
而在提取和纯化的过程中，需要考虑多种因素，包括溶剂的选择、提取温度、提取时间、提取次数以及分离纯化技术等。
这些因素的选择将直接影响到人参茎叶总皂苷的提取率和纯度，因此对提取和纯化工艺的优化研究尤为重要。
粉碎是提取工艺的第一步。
一般来说，粉碎后的颗粒越小，人参茎叶总皂苷的提取率就越高。
选择合适的粉碎设备和粉碎时间非常重要。
为了保证提取物的质量，还需要注意粉碎温度和粉碎过程中的防潮处理。
提取是人参茎叶总皂苷提取工艺中最为关键的一步。
在进行提取前，需要选择合适的溶剂。
常用的溶剂有乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
不同的溶剂对人参茎叶总皂苷的提取效果有所差异，因此需要进行实验比较，选择最适合的溶剂。
在提取过程中，提取温度和提取时间也是需要考虑的重要因素。
一般来说，较高的提取温度和较长的提取时间会提高人参茎叶总皂苷的提取率，但是过高的温度和过长的时间又会导致人参皂苷的降解，因此需要在提取过程中进行温度和时间的控制。
提取次数也会影响人参茎叶总皂苷的提取率。
通常情况下，多次提取可以提高提取率，但是次数过多又会增加生产成本。
需要在提取次数和提取率之间进行平衡。
是提取物的浓缩和干燥。
在这一步骤中，通常会使用浓缩设备将提取液浓缩，然后进行干燥得到人参茎叶总皂苷的粉末。
在这一步骤中，需要注意控制温度和湿度，以防止人参茎叶总皂苷的变性和降解。
总的来看，人参茎叶总皂苷的提取和纯化工艺是一个复杂的过程，涉及到多种因素的选择和控制。
在进行工艺优化研究时，需要综合考虑提取率、纯度、产率以及生产成本等因素，以找到最适合的提取工艺。
只有在提取工艺得到优化和改进后，才能更好地发挥人参茎叶总皂苷的药用价值。
人参中总皂苷含量测定的研究
人参中总皂苷含量测定的研究作者：陈薇薇来源：《食品界》2017年第06期药材与试剂5年生园参，样品经50℃烘干粉碎后（过40目筛），密封保存备用。
甲醇、乙醚、无水乙醇、正丁醇、浓硫酸、香草醛、氯仿；以上试剂均为国产分析纯，实验用水均为蒸馏水。
人参皂苷 Re 对照品购自中国药品生物制品检验所。
仪器与设备TU-1810 型紫外分光光度计（北京普析通用仪器）。
方法对照品溶液的制备。
取人参皂苷 Re 对照品 20mg，精密称定，加甲醇溶解，定容至10ml，摇匀、滤过，即得。
供试品溶液的制备。
取供试品粉末约 1.0g（细粉），精密称定，用中性滤纸包好，置索氏提取器中，加入乙醚47左右微沸回流提取1h，弃去乙醚液，供试品药包挥干溶剂，加入甲醇浸泡过夜，次日再加入适量甲醇，90℃微沸回流提取，控制滴速 100～120滴/min，虹吸次数5～6次/h，回流3次，每次2h，以人参皂苷提尽为准（定性鉴别为阴性），合并甲醇提取液，回收溶剂，少量甲醇提取液置蒸发皿中，水浴蒸干。
蒸馏水溶解提取物，加水30ml置分液漏斗中，用水饱和正丁醇50ml进行萃取，共4次。
取上层液蒸干，加甲醇溶解后，转移至10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀、滤过即得。
人参总皂苷提取定性鉴别。
供试品回流提取3次以后，取索式提取器中载供试品瓶中的溶液少量点于硅胶G薄层后的下层溶液，用10%硫酸乙醇显色，将薄层板置通风橱内，喷10% 硫酸乙醇溶液，105℃加热。
标准曲线的绘制。
精密吸取人参皂苷Re对照品10μl、20μl、30μl、40μl、60μl 置具塞玻璃试管中，水浴挥干甲醇。
分别加入8%香草醛无水乙醇试液0.5ml，72%硫酸试液 5ml，充分振荡摇匀后置60℃恒温水浴锅上加热10min，立即用冰水冷却10min，摇匀。
以试剂做空白，照分光光度法于544nm处分别测定吸光度，以吸光度为纵坐标，对照品取样量为横坐标绘制标准曲线。
稳定性考察。
精密吸取样品溶液20μl，按3.4项下方法显色，并分别在显色后0、10、20、30min测定吸光度，计算样品中的总皂苷含量。
人参总皂苷
黄白色或淡黄色无定形粉末
01 来源
03 鉴别 05 特征图谱
目录
02 制法 04 检查 06 含量测定
07 贮藏
09 其它用途
目录
08 制剂
基本信息
人参总皂苷(Total Ginsenoside Ginseng Root)为黄白色或淡黄色无定形粉末；微臭，味苦；具吸湿性。 本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙醚或石油醚中几乎不溶。
特征图谱
特征图谱
照高效液相色谱法(附录 Ⅵ D)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（柱长 25cm，内径 4.6mm，粒径 5μm，载碳量 11% ）；以乙腈为流动相 A，以 0.1%磷酸溶液为流动相 B，以下表进 行梯度洗脱；柱温为 30 ℃ ；检测波长为 203nm ；流速为每分钟 1.3ml。理论板数按人参皂苷 Re峰计算应不 低于 6000，按人参皂苷 Rd峰计算应不低于。时间（分钟）流动相 A （%）流动相 B （%） 0 ～ 30 19 81 30 ～ 35 19→24 81→76 35 ～ 60 24→40 76→60参照物溶液的制备分别取人参皂苷 Re和人参皂苷 Rd对照 品适量，加甲醇制成每 1ml各含 0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品适量，加甲醇制成每 1ml含 2mg的溶液，用 0.45μm滤膜滤过，即得。测定法精密吸取供试品溶液及参照物溶液各 10μl，分别注入液相色 谱仪，记录 60分钟的色谱图，即得。供试品特征图谱中应有 7个特征峰，与参照物峰相应的峰为 S 1和 S 2峰， 计算各特征峰的相对保留时间比值，应符合以下规定：峰 1和峰 2 （ S 1 ）为一组，相对保留时间比值为 0.91 （峰 1 ）、 1.00 （峰 2 ）；峰 3，峰 4，峰 5，峰 6和峰 7 （ S 2 ）为另一组，相对保留时间比 值为 0.84 （峰 3 ）、 0.91 （峰 4 ）、 0.93 （峰 5 ）、 0.95 （峰 6 ）、 1.00 （峰 7 ），其相对 偏差不得过 5%。
中国药典 2020版中人参总皂苷含量测定方法
【导言】我国药典是国家药典的统称，是指对我国境内生产、流通和使用的药品质量标准的权威性规定，是保障药品质量和使用合理、安全的基本依据。
其中，人参总皂苷含量是人参药材质量的重要评价指标，其测定方法对于保证人参药材的质量具有重要意义。
本文将对我国药典2020版中人参总皂苷含量测定方法进行详细介绍。
【正文】1. 依据依据我国药典是国家药典，是依法规定的药品标准，它规定了符合标准的药品质量要求、规范药品生产、流通和使用。
人参作为一种重要的中药材，在我国药典中有着详细的质量标准，其含有的总皂苷含量是一个至关重要的指标。
2. 人参总皂苷含量的意义总皂苷是人参中的重要有效成分之一，它具有调节免疫功能、提高机体抗氧化能力、增强心肌供血量、预防心绞痛、心肌梗死等保护心脏的作用。
测定人参总皂苷含量不仅有利于评价人参的药用价值，还能为人参的质量控制提供依据。
3. 我国药典2020版中人参总皂苷测定方法我国药典2020版中，人参总皂苷的测定方法主要包括提取、净化、分离和定量测定这几个步骤。
具体操作步骤如下：3.1 溶剂选择：首先选择合适的溶剂，如乙醇、丙酮等，将人参样品粉碎成粉末状，然后用溶剂进行提取，得到提取液。
3.2 净化分离：将提取液进行净化分离，去除杂质，得到待测液。
3.3 定量测定：采用分光光度计或者高效液相色谱仪等仪器，进行人参总皂苷的定量测定，计算出含量结果。
4. 测定方法的操作要点在操作过程中，需严格控制提取温度、时间和溶剂的体积比例，避免提取效果不佳。
净化过程中也需保证分离效果，避免杂质对测定结果的影响。
测定过程中应根据仪器的要求进行参数设置，确保测定结果的准确性。
为了保证人参总皂苷含量的测定结果的可靠性和稳定性，建议重复测定并取平均值。
5. 结论我国药典2020版中的人参总皂苷测定方法，是一种全面、准确的测定方法，可以有效地评价人参药材的质量，并为制定人参制剂的合理使用提供依据。
基于该方法，人们可以对人参药材的质量进行科学评价，保证人参产品的质量和疗效。
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Mey.）的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参".人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分，它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷（ginsenosides）.到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、—Ra1、-Ra2 、—Rb1、—Rb2、—Rb3、-Rc、-Rd、—Re、—Rf、—Rg1、—Rg2、-Rg3、—Rh1、-Rh2及—Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型：①人参二醇型—A型，②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷，其皂苷元为达马烷型四环三萜，A型皂甙元称为20（S）—原人参二醇［20（S）-protopanaxadiol］。
B型皂甙元称为20(S)—原人参三醇[20(S）—protopanaxatriol］。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物，其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid）。
[目的要求］1。
通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2。
学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能.［实验原理］人参的主要成分为人参皂苷，总皂苷含量约4％，人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶，味微甘苦，具有吸湿性.人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯，不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
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人参总皂苷
Renshen Zongzaogan
TOTAL GINSENOSIDE GINSENG ROOT
本品为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根及根茎经加工制成的总皂苷。
【制法】取人参，切成厚片，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，通过D101型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用60％乙醇洗脱，收集60％乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.08(80℃)的清膏，干燥，粉碎，即得。
【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末；微臭，味苦；具吸湿性。
本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙醚或石油醚中几乎不溶。
【鉴别】(1)取本品0.1g，置试管中，加水2ml，用力振摇，产生持久性泡沫。
(2)取本品0.1g，加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材1g，加水100ml煎煮2小时，滤过，滤液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1cm，柱高为15cm)，用水洗至无色，弃去水液，再用60％乙醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇10ml 使溶解，作为对照药材溶液。
再取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品与人参皂苷Re 对照品，加甲醇溶解制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15：40：22：10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
【检查】粒度依法检查(附录ⅪB第二法)，能通过120目筛的粉末不少于95％。
干燥失重取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过5.0％(附录ⅨG)。
总灰分不得过6.0％(附录ⅨK)。
炽灼残渣不得过6.0％(附录ⅨJ)。
重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法(附录ⅨB)测定，铅不得过百万分之三；镉不得过千万分之二；砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万分之二十。
有机氯农药残留量照农药残留量测定法(附录ⅨQ有机氯农药残留测定)测定：六六六(总BHC)不得过千万分之一；滴滴涕(总DDT)不得过百万分之一；五氯硝基苯(PCNB)不得过千万分之一。
【特征图谱】照高效液相色谱法（附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm，载碳量11％)；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为30℃；流速为每分钟1.3ml；检测波长为203nm。
理论板数按人参皂苷’Re峰计算应不低于6000，按人参皂苷Rd峰计算应不低于200 000。
时间（分钟）流动相A(%) 流动相B(%)
0～30 30～35 35～60
19
19→24
24→40
81
81→76
76→60
参照物溶液的制备取人参皂苷Rg l对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg10.3mg、人参皂苷Re 0.5mg和人参皂苷Rd 0.2mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品30mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇超声处理使溶解
并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
供试品特征图谱中应呈现7个特征峰，其中3个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相同；与人参皂苷Rd参照物峰相应的峰为S峰，计算特征峰3～7的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％之内，规定值为：0.84(峰3)、
0.91(峰4)、0.93(峰5)、0.95(峰6)、1.00(峰7)。
峰1：人参皂苷Rg1峰2：人参皂苷Re 峰3：人参皂苷Rf 峰4：人参皂苷Rb l峰5：人参皂苷Rc 峰6：人参皂苷Rb2 峰7(S)：人参皂苷Rd
【含量测定】人参总皂苷对照品溶液的制备取人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，即得。
标准曲线的制备精密吸取对照品溶液20μl、40μl、80μl、120μl、160μl、200μl，分别置于具塞试管中，低温挥去溶剂，加入1％香草醛高氯酸试液0.5ml，置60 ℃恒温水浴上充分混匀后加热15分钟，立即用冰水冷却2分钟，加入77％硫酸溶液5ml，摇匀；以试剂作空白。
消除气泡后照紫外-可见分光光度法(附录V A)，在540nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。
测定法取本品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取50μl，照标准曲线的制备项下的方法，自“置于具塞试管中’’起依法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Re的量，计算结果乘以0.84，即得。
本品按干燥品计，含人参总皂苷以人参皂苷Re(C48H82O18)计，应为65％～85％。
人参皂苷Rg l、Re、Rd照高效液相色谱法（附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，按[特征图谱]项表中梯度进行洗脱；检测波长为203nm。
理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量，精密称定，加甲醇制成1ml中含人参皂苷Rg10.30mg，人参皂苷Re 0.50mg和人参皂苷Rd 0.20mg的混合溶液。
供试品溶液的制备取[特征图谱]项下的供试品溶液，即得。
测定法分别精密吸取供试品溶液10～20μl与对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按干燥品计算，含人参皂苷Rg1(C42H72O14)、人参皂苷Re(C48H82O18)和人参皂苷Rd(C48H82O18)的总量计，应为15％～25％。
【贮藏】密闭，置干燥处。