感染管理环境卫生学采样及检查方法
医院感染防控环境卫生学最新监测方案
医院感染防控环境卫生学最新监测方案一、背景和目的医院感染防控是医院管理的重要组成部分，环境卫生学监测是医院感染防控的重要手段。
为进一步提高医院感染防控水平，确保患者和医务人员的健康安全，制定本方案。
本方案旨在规范医院环境卫生学监测工作，提高监测质量，及时发现和控制医院感染隐患，降低医院感染发生率。
二、监测对象和内容1. 监测对象：包括医院各个科室、部门和场所，如病房、门诊、手术室、ICU、消毒供应室、食堂、卫生间等。
2. 监测内容：包括空气质量、物体表面、医务人员手、消毒液、无菌物品、紫外线灯管强度等。
三、监测方法和频率1. 空气质量监测：采用空气采样器进行采样，每月进行一次监测。
2. 物体表面监测：采用棉签法或拭子法进行采样，每季度进行一次监测。
3. 医务人员手监测：采用棉签法或拭子法进行采样，每月进行一次监测。
4. 消毒液监测：采用比色法或PH试纸进行监测，每月进行一次监测。
5. 无菌物品监测：采用灭菌剂试验纸进行监测，每季度进行一次监测。
6. 紫外线灯管强度监测：采用紫外线强度计进行监测，每季度进行一次监测。
四、监测结果判定和处理1. 监测结果判定：根据国家和行业的相关标准，对监测结果进行判定。
合格的指标为：空气质量菌落总数≤500CFU/m³，物体表面和医务人员手菌落总数≤10CFU/cm²，消毒液染菌量≤100CFU/ml，无菌物品合格率≥95%，紫外线灯管强度≥70μW/cm²。
2. 监测结果处理：对于不合格的监测项目，应立即采取相应的控制措施，并进行跟踪监测，直至合格。
同时，对相关科室和人员进行通报批评，并督促其整改。
五、监测数据分析和应用1. 监测数据应进行详细的记录和分析，及时发现医院感染防控的薄弱环节，为制定和改进感染防控策略提供依据。
2. 定期将监测数据报告给医院感染管理委员会，并与去年同期数据进行比较，评估感染防控工作的效果。
3. 根据监测数据，开展针对性的感染防控培训和宣传活动，提高医务人员和患者的感染防控意识。
环境卫生学监测方法
当滤膜法可计数时：菌落总数（cfu/件）=m（cfu/平板）+mf（cfu/滤膜）（A.5）式
装有10mL采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm2）计算。若采样时手上有消毒剂残留，采样液应含相应中和剂。
3、检测方法
把采样管充分振荡后，取不同稀释倍数的洗脱液l.OmL接种平皿，将冷至40°C〜45°C的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL〜20mL,36C±1C恒温箱培养48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。
3、可使用经验证的现场快速检测仪器进行环境、物体表面等微生物污染情况和医疗器材清洁度的监督筛查；也可用于医院清洗效果检查和清洗程序的评价和验证。
一、空气微生物污染检查方法
1、米样时间
I类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；II、III、W类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。
2、检测方法
4、消毒后内镜：取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50mL含相应中和剂的洗脱液，从活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集（可使用蠕动泵）送检。将洗脱液充分混匀，取洗脱液1.0mL接种平皿，将冷至40C〜45°C的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL〜20mL,36C±1C恒温箱培养48h,计数菌落数（cfu/件）。将剩余洗脱液在无菌条件下采用滤膜
5、结果计算
平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍数
物体表面菌落总数（cfu/m2）=
采样面积（cm2）
€
三、医务人员手卫生检查方法
环境卫生学消毒效果采样方法
面积,采集后放在一个试管中送检)。 • 剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液的试管中送检。 • 门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面采样。 • 采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。
中混匀送检。
消毒液染菌量采样方法
注意事项
• 1.采样前做好物品准备，规范洗手或手消毒（七步洗手 法）；
• 2.用无菌注射器抽吸1ml被检消毒剂，直接送检验科微生物 实验室；
• 3.采样后1小时之内送检。
消毒液染菌量采样方法
结果判定
• 1.灭菌用消毒液必须无菌； • 2.使用中消毒剂细菌菌落总数应≤100cfu/ml，致病微生物
内
外
夹
弓
大
立
腕
医务人员手卫生检查方法
医务人员手卫生检查方法
医务人员手卫生检查方法
卫生手消毒效果监测流程
医务人员手卫生检查方法
外科手消毒效果监测流程
医务人员手卫生检查方法
卫生手消毒:
手
监测的细菌菌落总数应≤10cfu/cm2
的
监
测
外科手消毒:
正
监测的细菌菌落总数应≤5cfu/cm2
常
值
不能检出致病性微生物
Ⅳ类 普通门急诊及其检查、治疗室，感染性 疾病科门诊和病区
标准：物体表面cfu/皿 ≤4（30min） ≤4（15min） ≤4（5min）
≤4（5min）
空气检查方法
空气采样中常见的误区
• 采样时开启循环风消毒机时间不足及开着消毒机进行采样； • 室间未清洁消毒，开着门进行采样； • 采样时培养皿放置位置及高度不符合要求； • 采样时有人员走动； • 采样者未洗手，衣帽不整齐，未戴口罩； • 培养皿受到污染。
环境卫生学监测采样方法
六、环境卫生学监测结果分析流程
监测频度 医院应对感染高风险部门每季度进行监测；洁净手术部
(室)及其他洁净场所.新建与改建验收时以及更换高效过滤 器后应进行监测；遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时 随时进行监测，并进行相应致病微生物的检测。
注意事项
采样前，应关好门、窗，在无人走动的情况下，静止 10分钟后采样。
四、使用中消毒液染菌量监测
图 104—1 局部百级、周围千级
2、局部千级、周围万级：手术区布放 3 点（对脚布点），周边区布放 6 点（长 边内 2 点，短边内 1 点）（图 104—2）
图 104—2 局部千级、周围万级
3、局部万级、周边十万级：手术区布放 3 点（对角布点），周边区布放 4 点（每 边内 1 点）（图 104—3）
5 10 000 级 100 000 级
手术室
（75 个/m）
（150 个/m）
IV 准洁净
5 个/（30min·90 皿）（175 个/m）
5
300 000 级
手术室
注：1.浮游法的细菌最大平均浓度采用括号内数值。细菌浓度是直接所测的结果，不是沉降 法和浮游法互相换算的结果。
2.I 级眼科专用手术室周边区按 10 000 级要求。 3.表面最大染菌数（单位：个/㎡）推荐采用涂抹法，每次采样面积为 100 ㎡。
100 级 1 000 级
手术室
（5 个/m）
（ 10 个/m）
II 标准洁净 0.75 个/（30min·90 皿） 1.5 个/（30min·90 皿） 5 1 000 级 10 000 级
手术室 （25 个/m）
（50 个/m）
III 一般洁净 2 个/（30min·90 皿） 4 个/（30min·90 皿）
医院感染管理手册--环境卫生学监测制度及方法
三十一、环境卫生学监测制度及采样检查方法包括对空气、物体表面和医护人员手消毒效果的监测，及使用中消毒剂染菌量测定。
科室每季度空气监测一次。
医院感染管理科每月对感染高风险部门的物体表面、使用中灭菌消毒剂监测一次；每季对医务人员的手、使用中消毒剂染菌量监测一次。
当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素有关时，应及时进行监测。
（一）环境卫生学采样及检查原则采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过4h（一般不超过2h）,若样品保存于0--4℃条件时，送检时间不得超过24h 。
（二）空气的消毒效果监测1、空气采样（1）采样要求选择室内消毒后或医疗活动之间进行空气标本的采样，或怀疑与医院感染暴发有关时采样，使用普通营养琼脂平板采样。
（注意：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。
）（2）采样高度（沉降法）平板置距地面垂直高度0.8m～1.5m处。
（3）布点方法室内面积≤30㎡，设内、中、外对角线3点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30㎡，设东、南、西、北、中5点采样，其中东、南、西、北点距离墙壁1m处。
（4）采样方法放：由内外，将直径9cm普通营养琼脂平皿放置各采样点，将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规范时间（Ⅲ、Ⅳ类环境暴露5min；Ⅱ类15 min；Ⅰ类30 min）后。
收：由外内，盖上平皿盖，立即送检。
2、空气样本的检测与报告（1）检测培养将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的鉴定。
（2）结果处理计算所有平板菌落数，按公式换算结果。
（3）计算公式：每个房间所有平板菌落总数/采样点/（皿．暴露时间）（4）报告: 沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿．暴露时间）例如：2cfu/(5min·直径9cm平皿) 。
3、空气样本的结果判定（1）Ⅰ类环境：洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循ＧＢ50333．（2）Ⅱ类环境：平均每皿的菌落总数≤4cfu／(15min·直径9cm平皿)。
院感环境卫生学采样方法
医院空气消毒与监测
目前普通科室取消常规空气监测
重点科室有针对性的采样监测
1
通风 集中空调通风系统 空气洁净技术 紫外线消毒 循环风紫外线空气消毒器 静电吸附式空气消毒器 化学消毒法
空 气 净 化 方 法
2
3 4 5
6
7
通风
自然通风
机械通风 机械送风与自然排风 自然送风与机械排风 机械送风与机械排风
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空气消毒效果监测
采样时间
采用洁净技 术净化空气的 未采用洁净 技术净化空气
怀疑与医院
感染暴发有关时 采样
房间在洁净系
统自净后与从 事医疗活动前
的房间在消毒
或规定的通风 换气后与从事
采样
医疗活动前采
样
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监测状态
对于消毒效果监测，都做静态检测。一般动态检测只是作为 参考，常用于一些课题研究等，因为每个人的动作幅度大小 不一，人员数量不一。如果ICU是洁净环境的，通常动态标 准为静态条件下乘以5倍。如果是普通ICU，则是200cfu/m3 乘以5倍。 静态：室内设施及功能齐全，空调净化系统正常运行，但无 人员的状态 空态：空调净化系统正常运行，没有安装设备，也没有人员 动态：一切系统正常运行、医护人员进行正常手术操作的状 态，是我们日常工作的状态 布点顺序：放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始布置， 依次向外布，最后人员撤出。每间房间也是从房间最靠里的 地方开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取 培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每个房间从最 靠门的培养皿开始收，最先布置的皿最后收，沉降时间略有 差别。
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空气消毒效果监测
医院环境微生物采样方法
人在时的空气消毒方法，可选用循环风消毒机或静电等空气消毒器进行连续动态消毒处理。使用这种空气消毒方法时，应结合室内表面的卫生清洁处理或先用消毒剂对污染表面进行消毒，以保证空气消毒效果。
2
空气消毒方法的选择
2
1
对物品的腐蚀，过氧乙酸、臭氧等消毒剂对物品有不同程度的损坏，使用时浓度不宜过高、喷量不宜过大，必要时，消毒后应及时用清水擦洗。
空气消毒效果监测
手消毒效果监测
物品和环境表面消毒效果监测
使用中消毒液染菌量测定
医疗器械灭菌质量监测
灭菌质量监测
采样时间：消毒处理后，操作前进行采样。
采样方法：平板暴露法和微生物采样器法。
非洁净区域空气消毒效果监测
一、空气消毒效果监测
布点方法：
平板暴露法（我院采用的方法）
1、布点方法： （1）室内面积≤30 m2，设置内、中、外对角线3 个点，内、外布点部位距墙壁1m处；
紫外线照射时，不能直接照射暴露皮肤，眼睛不能直视紫外线灯。以免对皮肤、眼睛造成伤害。
用消毒剂进行空气消毒时需关闭门窗，人员应离开消毒场所，消毒完成后应先打开门窗通风，待消毒剂驱除后方可进入。
3
空气消毒注意事项
谢谢大家！
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01
02
我院使用的
环境卫生学监测结果分析流程
正视结果，不要盲目 的重复采样
细菌学数据超标
回忆采样过程 是否存在污染
到一线去查看设施和 每个操作环节，询问 相关人员的日常操作 方法，检查操作记录
判断是否存在问题
重复采样
否
采取措施改进操作流程
是
否
是
环境卫生学监测及标本采集方法(PPT 69页)
常用消毒剂中和剂及其浓度表
消毒剂
甲醛
戊二醛
过氧乙酸 含氯消毒剂类
季铵盐类
碘（溴）制剂 酚类 氯已定 汞制剂 醇类 酸类 碱类
中和剂及其浓度
亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 氨水 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%）
甘氨酸（1.0%）；赖氨酸 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%）
正确的微生物标本采集和运送， 是准确的病原学诊断的前提
基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.棉拭子标本宜用运送培养基 7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂. 8.送检标本应注明来源和检验目的
正确留取细菌培养的临床标本
2、抽血部位及抽血量 以无菌方法从患者肘静脉、股动 脉采血。采血量以培养基的1/10为宜，成人一次采血5～ 10ｍｌ，婴儿为1～2ｍｌ，血液抽出后，立即以无菌手续 注入血培养瓶，充分混合后送检。
采血培养前质量保证: 静脉穿刺程序 1.70%酒精擦拭静脉穿刺点 >30秒钟 2.1%2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒,从穿刺点
三、医院各重点部门空气，物体表面，医护人员手 细菌数标准。
环境类别
范围
标准
空气
物体表面 医务人员手
（cfu/ m3） （cfu/ cm2） （cfu/ cm2）
I类
层流洁净手术室、层流洁净
病房
≤10
≤5
≤5
普通手术室、产房、新生儿室
（母婴同室病房）、早产儿室、
II类
普通保护性隔离室、供应室无 ≤200
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AAAA院感染管理环境卫生学采样及消毒灭菌效果监测要求根据《消毒技术规范(2002年版)》GB15979-2002、《医院消毒卫生标准》GB15982—1995及《内镜清洗消毒技术操作规范（2004年版）》等规定，特制定AAAA院环境卫生学采样及消毒灭菌效果监测要求。
一、空气消毒效果的监测1.1 采样时间:在消毒处理后或进行医疗活动之前采样。
采样高度：距地面垂直高度80～150cm1.2 采样方法：A:非层流房间(1) 布点方法:室内面积≤30m2，设内、中、外对角线布3点，内、外点布点部位距墙壁1M处；室内面积＞30m2，设 4 角及中央5 点，4 角的布点部位距墙壁1m 处。
(2) 采样方法:将普通营养琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5m 采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好立即送检。
B：层流房间层流房间根据房间不同净化级别进行布点，操作按照GB50333-2002, 9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露30min后送检培养。
层流房间应在空态或静态条件下采样。
1.3 检测方法: 细菌菌落总数检查：将已采样完毕的培养皿在6h内送进实验室，置于37度温箱内培养48h…。
培养皿培养48h后，计算菌落总数，1.4 计算结果：非层流房间：按照公式计算：细菌总数（cfu/m3）=50000N/（A ×T）式中A为平板面积（cm2）；T为平板暴露时间（min）；N为平均菌落数（cfu）。
层流房间直接以个/30min.90皿为单位计算结果1.5 结果判定非层流房间：Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3(或0.2cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；Ⅱ类区域：细菌总数≤200cfu/m3(或4cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；Ⅲ类区域：细菌总数≤500cfu/m3(或10cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。
层流房间：按照GB50333-2002要求判定二、物品和环境表面消毒效果的监测2.1 采样时间:在消毒处理后4h内进行采样。
消毒后的采样一定要采用中和剂，不同消毒剂所用中和剂则不同。
2.2 采样面积及采样方法:用5cm×5cm 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样 4 个，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5 次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检，送检时间不得超过6h。
门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。
2.3 检测方法(1) 细菌总数检测: 将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80 次，用无菌吸管吸取1.0ml 待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的45℃～48℃的营养琼脂15ml～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36℃±1℃温箱培养48h，计数菌落数。
采样结果计算方法：平板上菌落数×稀释倍数细菌总数(cfu/cm2)＝────────────────采样面积(cm2)小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示。
2.4 结果判定Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
Ⅲ类区域细菌：总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
Ⅳ类区域细菌：总数≤15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。
三、医护人员手及皮肤黏膜采样及检查方法3.1 采样时间：在消毒后立即采样或在接触患者、进行诊疗活动前采样。
3.2 采样方法(1) 手的采样: 被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指端到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
(2) 皮肤粘膜采样:用5cm×5cm 的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5 次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，立即送检。
不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。
3.3 细菌菌落总数检查将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80 次，用无菌吸管吸取 1.0ml 待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的45℃～48℃的营养琼脂15ml～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36℃±1℃温箱培养48h，计数菌落数。
3.4 采样结果计算方法：细菌总数(cfu/cm2)＝平板上菌落数×稀释倍数/采样面积(cm2)(2) 致病菌检测:按九的原则执行3.5结果判定：a)卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/ cm2。
b)外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/cm2。
四、消毒液的监测4.1 使用中消毒液染菌量测定(1) 检测方法：1）涂抹法:用无菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml 含有相应中和剂的采样管内混匀，用无菌吸管吸取上述溶液0.2ml，滴于干燥普通琼脂平板，每份样品同时做2个平行样，一平板置20℃培养7d，观察霉菌生长情况，另一个平板置35℃温箱培养72h记数菌落数，同时按八的原则检测致病菌。
消毒液染菌量(cfu/ml)＝每个平板上的菌落数× 502）倾注法：用无菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入到9.0ml 含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀，分别取0.5ml 放入 2 只灭菌平皿内，加入已熔化的45℃～48℃的营养琼脂15ml～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一平板置20℃培养7d，观察霉菌生长情况;另一个平板置36℃±1℃培养72h，计数菌落数，同时按九的原则检测致病菌。
消毒液染菌量(cfu/ml)＝每个平板上的菌落数× 20(2) 结果判断:消毒液染菌量≤100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。
(3) 注意事项:采样后1h 内检测。
五、使用中消毒剂与无菌器械保存液6.1 采样时间：采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。
6.2 采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入9ml稀释液中混均，对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠；对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加入3%（W/V）吐温80和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在肉汤中加入0.3%甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需在肉汤中加入3%（W/V）吐温80，以中和被检样液的残效作用。
A6.3 细菌菌落总数检查按A2.5规定执行。
A6.3.1结果分析平板上有菌生长,证明被检样液有残存活菌,若每个平板菌落数在10个以下,仍可用于消毒处理(但不能用于灭菌),若每个平板菌落数超过10个,说明每毫升被检样液含菌量已超过100个,即不宜再用。
六、内镜消毒灭菌效果的监测5.1 采样时间:在消毒灭菌后、使用前进行采样。
5.2 采样方法: 监测采样部位为内镜的内腔面。
用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集，及时送检，2小时内检测。
5.3菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.5ml，加入2只直径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45℃-48℃营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于35℃培养48小时后计数。
结果判断：菌落数/镜=2个平皿菌落数平均值×20。
致病菌检测：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.2ml分别接种90mm血平皿、中国兰平皿和SS平皿，均匀涂布，35℃培养48小时，观察有无致病菌生长。
5.4 结果判定: 消毒后的内镜合格标准为：细菌总数<20cfu/件，不能检出致病菌；灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。
七、一次性使用医疗用品产品细菌和真菌污染的检测7.1 细菌或真菌污染总菌数的检测7.2 目的检测一次性使用医疗用品消毒后残存细菌或真菌状况，存放一定时间后是否被细菌或真菌污染及其污染的程。
7.3 适用范围临床用于病人检查、治疗、护理用指套、手套、吸痰管、阴道窥镜、肛镜、印模托盘、治疗巾、皮肤清洁巾、擦手巾、压舌板、臀垫、中单等接触完整粘膜、皮肤的各类一次性使用医疗、护理用品。
7.4试验器材（1）营养琼脂培养基：见附录A。
（2）沙堡琼脂培养基（真菌培养用）：见附录A。
（3）无菌检查用洗脱液：见附录A。
（4）磷酸盐缓冲液（PBS，0.03mol/L，pH7.2）：见附录A。
（5）100级洁净室或100级层流超净工作台（下简称超净台）。
（6）安全操作箱（用于防止真菌孢子污染周围环境）（7）刻度吸管（1.0mol、5.0mol）7.5 抽样要求（1）抽样方法为使样品具有良好的代表性，采用随机抽样方法。
随机选取不同3个批号的产品。
根据检验要求，从每个批号产品中随机抽取同等数量的样品，尽量选自多个大包装。
不得在同一批号内的同一包装内邻近部位集中选取所需全部样品。
（2）抽样数量①对单一品牌、型别（或规格）产品鉴定取样：随机选取不同3个批号的产品。
从每个批号产品中随机抽取3个大包装。
从每个大包装中随机抽取20个最小销售包装产品（每个最小销售包装产品重量应达到10g以上；棉签等每个包装内数量达到5支以上，以满足检验最低需要量。
如果重量低于10g或数量少于5支时，适当增加抽取产品的最小销售包装数量。
）作为该品牌、批号产品抽检样品。
其中1/4样品用于首次检测，1/4样品用于留样，2/4样品用于必要时的复测。
样品最小销售包装应完整无破损（包装破损即可视为不合格产品、禁止出售），检测前不得开启。
②对同一品牌、不同型别（或规格）产品鉴定取样：分别对不同型别（或规格）产品进行随机抽检。
对每个型别（或规格）产品随机选取不同3个批号产品。
从每个批号产品中随机抽取3个大包装。
以下步骤同2.1.9.1.4（2）①。
③对不同一品牌、不同一型别（或规格）产品鉴定取样：分别对不同品牌、型别（或规格）产品进行随机抽检。
对每个品牌的每一个型别（或规格）产品随机选取不同3个批号的产品。
从每个批号产品中随机抽取3个大包装。
以下步骤同2.1.9.1.4（2）①。
7.6 检测样本的制作（1）检测数量①每批样品首次检测时，检测5个样本，分别在所选的5个最小销售包装内抽取。
②必要时进行复测。