土传病害生防菌哈茨木霉菌剂生产工艺的研究
哈茨木霉生产工艺流程
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土传病害生防菌哈茨木霉菌剂生产工艺的研究ppt课件
三、研究目标与内容
（二）研究内容
1、哈茨木霉固体发酵条件的研究 2、哈茨木霉固体发酵方式的研究 3、哈茨木霉固体发酵过程中营养成分的检测 4、哈茨木霉固体发酵产物的保存期及菌体稳定性检测 5、哈茨木霉菌剂的田间应用
7
四、研究方法与技术路线
（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固体发酵条件的研究6-7
2013年 8-10
2013年 11-2014.2
菌株FJAT9040固体 发酵条件 的研究
固体发酵 方式的研 究
固体发酵 过程营养 成分的检 测
固体发酵 产物保存 期及稳定 性的检测
菌剂的应 用
15
六、研究基础
（一）实验室研究基础
张衡宇等对该菌株的研究主要包括生物学、液体发酵条 件、对不同枯萎病病原菌的抑制作用。
4
二、研究意义
➢ 本实验室已筛选出一株哈茨木霉菌FJAT-9040，研究表明， 其对多种作物枯萎病有良好的防治作用。
➢为了该菌更好的产业化生产，利用微生物 发酵床养猪产生的副产物—垫料作为主要原 料进行固体发酵，形成哈茨木霉菌肥菌剂。 ➢一方面实现了资源的再利用，另一方面哈 茨木霉菌肥菌剂在应用中可起到增强植物抗 性及防病效果。
培养条件 的筛选
垫料 麸皮 比例
麦粒 含量
碳源 及其 浓度
氮源 及其 浓度
含 水 量
接 种 量
培 养 温 度
培 养 时 间
响应面法筛选最佳配方 响应面法筛选最佳培养条件
8
四、研究方法与技术路线
（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固体发酵方式的研究
灭菌条件下对菌株生长的影响 固 体 发 酵 方 式 非灭菌条件下对菌株生长的影响
•番茄、茄 子
哈茨木霉微生物菌剂在水稻上的应用研究
作用 ，是绝对产量形 成的最重要阶段［ １ ｏ ｉ 。 本试验 结果 表明 ，增施 氮肥虽然 能提高 小麦产量 ，但 氮肥施 用过 量反而 会降低小 麦的 有效穗数 、产量 。在 不同 氮肥运 筹组 别 中，增 加穗肥 施用量 ，小 麦每穗实 粒数 、千
［ ２ 】 张春明 ， 邱韩英 ， 张炬 ， 等． 不同供 氮水平对机条播小麦氮素利
试验于２ ０ １ ５ 年设在上海市 崇明区城桥镇长兴村进行 ， 试 验 田前茬为蚕豆绿肥 ，土壤为砂壤 土，肥力均匀 ，ｐ Ｈ８ ． ０ ４ 、 有机质含量 为２ ５ ． ８ ｇ ／ ｋ ｇ 、 水解 氮含量为 ８ １ ． １ ２ ｍｇ ／ ｋ ｇ 、 有
纯氮总用 量为 ２ ２ ｋ ｇ 。哈茨 木霉 菌颗 粒剂在基肥 、穗肥时各
验结果报道如 下。 １ 材 料 与方 法
１ ． １ 试 验 概 况
Байду номын сангаас
效磷 含量 为 ｌ ７ ． ７ ｍｇ ／ ｋ ｇ 、速效钾含量为 ６ １ ｍｇ ／ ｋ ｇ 。供 试
水稻品种 为 “ 花优 ｌ ４ ” ，采用人工移栽方 式 ， 每６ ６ ７ ｉ ｎ 栽插 密度为 １ ． ８ 万穴 ，每穴 ３ 株 ，５ 月２ ８日移 栽 ，移栽 时水稻平
粒重 和产量相 应增 加 ，但有效穗 数则 呈先增 加后 降低的趋
哈茨木霉对7种植物病原菌的生防机制研究
Ｆ ｕ ｓ ａ ｒ ｉ ｕ ｍ ｍ ｏ ｎ ｉ ｌ ｆ ｉ ｏ ｒ ｍｅ Ｓ ｈ ｅ ｌ ｄ ｃ ｏ ｍ ｅ ｓ ｓ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ ｌ ｙ ． Ｔ ｈ ｅ ｍｙ ｃ ｅ ｌ ｉ ａ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ ｈ ａ ｒ ｚ ｉ ａ ｎ ｕ ｍ ｈ ａ ｓ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ
关键 词 ： 哈茨木霉； 拮抗 ； 重寄生； 生防
中 图分类 号 ： ￥ ４ ３ ２
文 献标 志码 ： Ａ
文 章编号 ： １ ０ ０ ８ — ７ ５ １ ６ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ０ ３ ２ — ０ ４
Ｓｔ ｕｄｉ ｅ ｓ ｏ ｎ ｂ ｉ ｏ ｃ ｏ ｎｔ ｒ ｏ ｌ ｍｅ ｃ ｈａ ｎｉ ｓ ｍｓ ｏ ｆ Ｔ ｒ ／ ｃ ｈｏ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｈａ ｒ ｚ ｉ ａ ｎｕ ｎ ａ ｇ ａ ｉ ｎ ｓ ｔ
２ ０ １ ３年 ｌ ０月
Ｏｃ ｔ ．２ ０ １ ３
ｄ ｏ ｉ ： １ Ｏ ． ３ ９ ６ ９ ￣ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ８ — ７ ５ １ ６ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ５ ． ０ ０ ８
哈茨木霉对 ７种植物病原 茵的生防机制研 究
郎剑 锋 ， 孔凡彬， 石 明 旺， 杨 洪 生
第４ １ 卷 第 ５期
生防菌株哈茨木霉H-13固体发酵条件的研究
生防菌株哈茨木霉H-13固体发酵条件的研究王永东;蒋立科;岳永德;花日茂;江丽【期刊名称】《浙江大学学报（农业与生命科学版）》【年(卷),期】2006(032)006【摘要】研究了生防菌株哈茨木霉H-13固体发酵的条件,探索了碳源、氮源、磷酸盐、固料比、接种量及发酵温度对产孢量的影响.通过单因素试验和正交试验确定固体发酵最佳条件为:麸皮、玉米粉按3∶1比例配伍,固料比水为1∶0.4(g·mL-1),蔗糖1.5%,蛋白胨1.5%,硝酸铵1%,磷酸二氢钾0.05%,NaH2PO4 -Na2HPO4(0.5%～0.50%),接种量为9%(mL·g-1);发酵温度为24℃～22℃～26℃,在此条件下发酵10 d,产孢量高达1.0×1010个·g-1以上.固体发酵生产木霉分生孢子,与液体相比具有制作简单、成本低廉、孢子含量高、易于保存和运输等特点.【总页数】6页(P645-650)【作者】王永东;蒋立科;岳永德;花日茂;江丽【作者单位】安徽农业大学,生命科学学院,安徽,合肥,230036;安徽农业大学,生命科学学院,安徽,合肥,230036;安徽农业大学,生命科学学院,安徽,合肥,230036;安徽农业大学,生命科学学院,安徽,合肥,230036;安徽农业大学,生命科学学院,安徽,合肥,230036【正文语种】中文【中图分类】Q939.9【相关文献】1.生防菌哈茨木霉 FJAT-9040固体发酵条件的响应面优化 [J], 曾庆才;肖荣凤;刘波;陈燕萍;史怀2.哈茨木霉H-13产几丁质酶与纤维素酶液体发酵工艺的研究 [J], 魏练平;李明江;王耸;蒋立科3.哈茨木霉FJAT-9040生防菌剂固体发酵及其对苦瓜枯萎病的防治效果 [J], 肖荣凤;刘波;唐建阳;史怀;陈燕萍4.哈茨木霉FJAT-9040生防菌剂固体发酵及其对苦瓜枯萎病的防治效果 [J], 肖荣凤;刘波;唐建阳;史怀;陈燕萍;5.哈茨木霉H-13液体发酵产几丁质酶的条件 [J], 张友维;蒋立科;岳永德;花日茂;戴向荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
灵芝哈茨木霉病害生防细菌的筛选及菌剂制备研究
灵芝哈茨木霉病害生防细菌的筛选及菌剂制备研究解鹏飞;郭建峰;张春兰;徐济责【摘要】为防治灵芝的哈茨木霉病害, 对土壤细菌进行筛选, 得到1株具有抑菌效果的菌株, 编号为JSW-0601, 初步测定了JSW-0601对哈茨木霉的抑菌效果, 并与11种生防药剂进行对比, 通过分子生物学方法和生理生化特性鉴定了JSW-0601的分类地位, 确定了JSW-0601的发酵条件, 对菌剂制备进行初步探究.细菌菌体制成的菌液对病原菌有抑制作用, 其中20μL的菌液抑菌率为63.33％, 作为毒介质菌体原液的抑菌率最高可达94.93％, 2.5％滤菌液抑菌率达30.80％, 20％灭菌液抑菌率也可达80.20％, 菌体分泌的胞外活性物质和化学物质均有较好的抑制效果.JSW-0601为短小芽胞杆菌, 抑菌效果优于11种生防药剂, 最佳发酵条件为0.1％接种量、培养48 h, 培养机制为麦芽糖0.25％、蛋白胨1％、硫酸镁0.5％, 最优载体为硅藻土.筛选得到的短小芽胞杆菌对灵芝哈茨木霉病害的抑制作用较好, 为灵芝木霉病害的生物防治提供科学参考, 同时也为短小芽胞杆菌的应用提供了新方向.%In order to control Trichoderma pleuroticola disease of Ganoderma lingzhi, in this study, bacteria isolated from soil were screened and obtained a strain JSW-0601 that having bacteriostatic effect.The bacteriostatic effect of JSW-0601 on T.pleuroticola was initially determined and compared with 11 kinds of biocontrol agents.Classification of JSW-0601 was determined by molecular biology and physiological and biochemical characteristics and confirmed its fermentation conditions, and investigated the bacterial preparation tentatively.Bacterial cell liquid made of the bacteria possessed inhibitory effect on the pathogen, of which 20μL of bacterial liquid had a bacteriostasis rate at63.33％.As a toxic medium,the bacteriostatic rate of bacteria fermentation broth could reach up to 94.93％, and the biostatic rate of 2.5％filtrate liquid of the strain reached as high as 30.80％, 20％of sterilized ferment liquid could reach as high as 80.20％of inhibition rate, extracellular active substances and chemical substances secreted by the strain had a good inhibitory effect.JSW-0601 is Bacillus pumilus with its bacteriostatic effect outwent 11 kinds of bio-agents.The optimum fermentation conditions are 0.1％inoculum, culture for 48 hours.The culture mechanism is:0.25％maltose, 1％peptone, 0.5％magnesium sulfate, and the optimal carrier was diatomaceousearth.Bacillus pumilus screened for better bacteriostatic effect onT.pleuroticola disease of G.lingzhi, and provided scientific reference for the bio-control against T.pleuroticola, at the same time for its application a new direction.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2018(038)006【总页数】9页(P75-83)【关键词】灵芝;哈茨木霉;短小芽胞杆菌;鉴定;生防菌剂【作者】解鹏飞;郭建峰;张春兰;徐济责【作者单位】吉林农业科技学院生物工程学院,, 吉林吉林 132101;吉林农业科技学院生物工程学院,, 吉林吉林 132101;吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心, 吉林长春 130118;吉林农业科技学院生物工程学院,, 吉林吉林 132101;吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心, 吉林长春 130118;吉林市食药用菌产业应用技术研究院, 吉林吉林 132101【正文语种】中文【中图分类】Q93-331;S436.4灵芝(Ganoderma lingzhi) 属担子菌门，伞菌纲，多孔菌目，灵芝科，灵芝属[1]，是重要的药用菌物，有着良好的营养、药用、保健和观赏等价值[2]，在古代被人们誉为瑞草，历代医学家均认为灵芝能滋补强壮、扶正固本，更有着延年益寿的功效[3]。
土传病害生防菌哈茨木霉菌剂生产工艺
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土传病害生防菌哈茨木霉 菌剂生产工艺
• 引言 • 哈茨木霉菌剂的生产工艺流程 • 哈茨木霉菌剂的质量控制 • 哈茨木霉菌剂的应用与效果 • 结论与展望
01
引言
背景介绍
农业生产中，土传病害是影响作物生 长和产量的重要因素，而化学农药的 长期使用会对环境和人体健康造成负 面影响。
生防菌剂作为一种生物防治手段，具 有环保、安全、可持续等优点，逐渐 受到广泛关注。
菌种选育过程中，需要定期对菌株进行纯化、复壮和性能测 定，以确保菌株的遗传稳定性和防治效果。
种子制备
种子制备是哈茨木霉菌剂生产的第二步，通过在种子培养 基中接种选育好的菌株，经过一定时间的培养，获得一定 浓度的种子液。
种子液的质量直接影响发酵过程和最终产品的质量，因此 需要严格控制种子的培养条件，如温度、湿度、pH值等 。
产品质量检测
1 2
有效成分含量
检测哈茨木霉菌剂中有效成分的含量，确保符合 标准。
杂菌和重金属含量
检测产品中杂菌和重金属的含量，确保符合安全 标准。
3稳定Leabharlann 检测检测产品的稳定性，确保在一定时间内产品性能 稳定。
包装与储存
包装材料
选择无毒、密封性好的包 装材料，确保产品的安全 性和有效性。
包装标识
产品包装上应清晰标注产 品名称、生产日期、有效 期等信息。
储存条件
产品应存放在阴凉、干燥、 通风良好的地方，避免阳 光直射和高温。
04
哈茨木霉菌剂的应用与效果
在农业生产中的应用
土壤改良
哈茨木霉菌剂能够改善土壤结构，增加土壤有机 质和微生物活性，提高土壤肥力和保水能力。
植物促生
哈茨木霉菌剂能够促进植物生长，提高作物产量 和品质，增加经济效益。
不同培养条件对哈茨木霉菌抑制串珠镰刀菌能力的影响
不同培养条件对哈茨木霉菌抑制串珠镰刀菌能力的影响哈茨木霉菌（Trichoderma harzianum）是一种常见的拮抗真菌，在农业生产中被广泛应用于生物防治。
而串珠镰刀菌（Fusarium oxysporum f.sp. vasinfectum）则是一种植物病原真菌，能够引起多种农作物的病害。
研究不同培养条件对哈茨木霉菌抑制串珠镰刀菌的能力的影响，对于提高生物防治效果具有重要意义。
本文将通过实验研究探讨不同培养条件对哈茨木霉菌抑制串珠镰刀菌能力的影响。
一、实验设计1. 实验材料哈茨木霉菌（T. harzianum）和串珠镰刀菌（F. oxysporum f.sp. vasinfectum）分别作为拮抗真菌和植物病原真菌。
培养基为马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）。
2. 不同培养条件的设置（1）温度：25℃、30℃、35℃（2）pH值：5、6、7（3）光照：12小时光照/12小时黑暗、24小时黑暗3. 实验方法以哈茨木霉菌为主要研究对象，通过对不同的培养条件进行处理，然后在不同培养条件下分别进行哈茨木霉菌和串珠镰刀菌的单菌培养和共培养实验。
观察并记录哈茨木霉菌对串珠镰刀菌的生长抑制情况。
二、实验结果经过一段时间的实验操作和观察记录，得出了以下实验结果：1. 不同温度对拮抗效果的影响在25℃和30℃的温度条件下，哈茨木霉菌对串珠镰刀菌的抑制效果明显，菌丝生长受到较大限制；而在35℃的高温条件下，哈茨木霉菌的抑制效果明显降低，两者共培养的菌丝数量差异不大。
三、实验分析根据实验结果可以得出以下分析结论：1. 温度对哈茨木霉菌的抑制效果具有明显影响。
温度对真菌的生长活性和代谢活动具有重要的调节作用，因此适宜的温度条件有利于哈茨木霉菌对串珠镰刀菌的生长抑制。
2. pH值对哈茨木霉菌的抑制效果具有一定影响。
酸性条件可能会对哈茨木霉菌的生长和拮抗活性产生不利影响，而中性或弱碱性条件能够提高其对串珠镰刀菌的抑制效果。
不同的培养条件对哈茨木霉菌抑制串珠镰刀菌的能力具有明显影响，其中温度、pH值和光照条件是影响因素。
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平均孢子数（个/ml）
4.00E+07
2.00E+07
0.00E+00 10：0 9：1 8：2 7：3 6：4 5：5 0：10
垫料与麸皮（体积比）
通过单因素方法筛选出了垫料与麸皮的最佳产孢比例 垫料：麸皮＝9：1，产孢量为4.6×107个/ml。
a
17
六、研究基础
培养基配方的筛选——麦粒含量的筛选
3.00E+08
平均孢子数（个/ml）
2.00E+08
1.00E+08
0.00E+00 0
10% 20% 30% 40% 50% 麦粒含量（体积比）
通过单因素方法筛选出了外加麦粒的含量，40%（体积比） 产孢量为2.3×108个/ml。
a
18
六、研究基础
培养基配方的筛选—碳源及其浓度的筛选
平均孢子数（个/ml） 平均孢子数（个/ml）
a
5
三、研究目标与内容
（一）研究目标
1、探究不同营养物质、培养条件对生防菌哈茨木霉产 孢的影响。
2、摸索生防菌哈茨木霉固体发酵的方式，为其扩大生 产提供可靠依据。
3、摸索生防菌哈茨木霉固体发酵过程中营养成分的变 化，为其发酵过程中补料提供技术参数。
4、探究生防菌哈茨木霉菌剂生产工艺流程，为生防菌
哈茨木霉菌剂工业化和商品化奠定基础。
植株生长情况
•番茄、茄 子
枯萎病防效
•番茄、茄 子
a
13
四、研究方法与技术路线
（二）技术路线
发酵条件 的研究
生防 菌哈 茨木
霉 FJAT9040
菌剂 生产 工艺 的研究
发酵方式 的研究
产物的 保存期 和稳定 性的检
测
菌剂 的田 间应 用
营养成分 的检测
a
14
五、研究进度安排
2012年 2013年
a
6
三、研究目标与内容
（二）研究内容
1、哈茨木霉固体发酵条件的研究 2、哈茨木霉固体发酵方式的研究 3、哈茨木霉固体发酵过程中营养成分的检测 4、哈茨木霉固体发酵产物的保存期及菌体稳定性检测 5、哈茨木霉菌剂的田间应用
a
7
四、研究方法与技术路线
（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固体发酵条件的研究
培养基配方 的筛选
土传病害生防菌哈茨木霉菌剂 生产工艺的研究
指导老师：刘 波 博士、研究员 汇 报 人：曾庆才
福州大学、福建省农业科学院
a 2013年01月07日
1
报告内容
一、国内外研究现状与趋势 二、研究意义 三、研究目标与内容 四、研究方法与技术路线 五、研究进度安排 六、研究基础 七、已具备的研究条件
a
2
一、国内外研究现状与趋势
8.00E+08
2.00E+08
4.00E+08
1.00E+08
0.00E+00 不加碳源 葡萄糖 蔗糖 乳糖
不同碳源
0.00E+00 0 0.1g 0.2g 0.3g 0.4g 0.5g
蔗糖质量
通过单因素方法筛选出了外加碳源为蔗糖，添加量为 0.1g/50ml。
a
19
七、已具备的研究条件
该菌株的生物学特性、液体发酵条件、对不同枯萎病 病原菌的抑制作用已进行较为系统地研究。
本实验室已成功对该菌株进行GFP标记，并具有一株 荧光性状较稳定的菌株。
本实验室仪器设备齐全，有经验丰富的老师指导，为 实验的顺利进行提供了保障。
a
11
四、研究方法与技术路线
（一）研究方法——哈茨木霉固体发酵产物保存期及菌体 稳定性检测
保存期及稳
不同
不同
不同
定性检测
湿度
温度
时间
孢子萌发情况
a
12
四、研究方法与技术路线
（一）研究方法——生防菌哈茨木霉FJAT-9040菌剂 的田间应用
菌剂的田间应用
种子出苗
•茄科：番 茄、茄子 •瓜类：黄 瓜、甜瓜
➢作物枯萎病是由尖孢镰刀菌引起的一 类土传性真菌病害。
➢病原菌从根部侵入植物，引起维管束 病变，引起萎蔫死亡。
➢目前，枯萎病的防治主要是化学药剂 防治法，抗病育种法以及轮作法。
➢化学药剂对环境的危害严重，抗病品 种培育费时费力，轮作又限制，生物防 治就成为最受青睐的办法。
a
3
一、国内外研究现状与趋势
肖荣凤等对该菌株的GFP标记进行了研究，获得了1株荧光 性状稳定的菌株FJAT-9295；同时对该菌株土壤定殖示踪进行 了研究，研究表明菌株在育苗土中定殖最好， 泥土中定殖最 差；种植茄子的定殖效果比未种植的好。
a
16
六、研究基础
（二）本实验研究基础
培养基配方的筛选——垫料与麸皮的比例
6.00E+07比例
麦粒 含量
碳源 及其 浓度
氮源 及其 浓度
含 水 量
接 种 量
培 养 温 度
培 养 时 间
响应面法筛选最佳配方 响应面法筛选最佳培养条件
a
8
四、研究方法与技术路线
（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固体发酵方式的研究
灭菌条件下对菌株生长的影响 固 体 发 酵 方 式 非灭菌条件下对菌株生长的影响
不同灭菌温度 不同灭菌时间
a
9
四、研究方法与技术路线
（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固体发酵方式的研究
浅盘培养法 固
体
发
酵
方 式
蘑菇菌棒培养法
a
10
四、研究方法与技术路线
（一）研究方法——生防菌哈茨木霉固体发酵过程中营养 成分的检测
营养成分的 检测
碳源的 变化
氮源的 变化
水分的 变化
近红外光分析仪
a
4
二、研究意义
➢ 本实验室已筛选出一株哈茨木霉菌FJAT-9040，研究表明， 其对多种作物枯萎病有良好的防治作用。
➢为了该菌更好的产业化生产，利用微生物 发酵床养猪产生的副产物—垫料作为主要原 料进行固体发酵，形成哈茨木霉菌肥菌剂。 ➢一方面实现了资源的再利用，另一方面哈 茨木霉菌肥菌剂在应用中可起到增强植物抗 性及防病效果。
10-2013.3
4-5
2013年 6-7
2013年 8-10
2013年 11-2014.2
菌株FJAT9040固体 发酵条件 的研究
固体发酵 方式的研 究
固体发酵 过程营养 成分的检 测
固体发酵 产物保存 期及稳定 性的检测
菌剂的应 用
a
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六、研究基础
（一）实验室研究基础
张衡宇等对该菌株的研究主要包括生物学、液体发酵条件、 对不同枯萎病病原菌的抑制作用。
➢ 生防微生物主要有木霉菌、丛枝菌根真菌、非致病性 尖孢镰刀菌。其中，木霉菌对多种植物病害具有很好 的生防作用，被认为具有重要生防价值。
➢ 木霉菌已广泛用于各种作物枯萎病的防治中，如 Thangavelu, 2003; 杨春林, 2008; Ling N, 2009。
➢ 国内外已有商品化木霉制剂，较多为液体发酵液及其 孢子菌剂。采用固体发酵方式的较少。