《植物组织培养技术》试题六答案

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植物组织培养复习题答案

植物组织培养复习题答案

植物组织培养复习题答案植物组织培养是一种生物技术,它涉及将植物的一小部分组织(如叶片、茎尖或根尖)在无菌条件下培养在特定的营养培养基上,以诱导其生长和分化成新的植物体。

以下是植物组织培养复习题的答案:一、选择题1. 植物组织培养的基本原理是什么?A. 植物细胞的全能性B. 植物细胞的分裂性C. 植物细胞的分化性D. 植物细胞的再生性答案:A2. 植物组织培养中常用的培养基是什么?A. MS培养基B. LB培养基C. 酵母提取物培养基D. 血浆培养基答案:A3. 在植物组织培养中,以下哪个因素不是影响培养成功的关键因素?A. 无菌操作B. 培养基成分C. 光照条件D. 培养基的pH值答案:C二、填空题1. 植物组织培养技术主要包括_______、_______和_______三个阶段。

答案:外植体的消毒、诱导分化、生根与移栽2. 植物组织培养中常用的生长调节剂包括_______、_______和_______。

答案:生长素、细胞分裂素、赤霉素三、简答题1. 简述植物组织培养的优点。

答案:植物组织培养具有快速繁殖、遗传稳定性、避免病毒传播、节约空间和成本等优点。

2. 描述植物组织培养的基本步骤。

答案:植物组织培养的基本步骤包括:选择适当的外植体,进行严格的消毒处理,将外植体转移到含有适宜营养成分和激素的培养基中,提供适宜的温度和光照条件,观察并记录生长情况,最后进行生根和移栽。

四、论述题1. 论述植物组织培养在现代农业生产中的应用及其重要性。

答案:植物组织培养在现代农业生产中具有重要作用,它不仅能够快速繁殖优良品种,提高生产效率,还能通过基因工程等手段改良植物品种,增强植物的抗病、抗虫和抗逆性。

此外,植物组织培养技术在植物保护、药用植物生产以及植物资源的保护和利用等方面也发挥着重要作用。

五、实验操作题1. 设计一个简单的植物组织培养实验方案。

答案:实验方案应包括实验目的、实验材料、实验设备、实验步骤、预期结果和注意事项。

植物组织培养试题

植物组织培养试题

选择题
植物组织培养中,常用于诱导愈伤组织形成的植物激素是?
A. 乙烯
B. 赤霉素
C. 生长素
D. 细胞分裂素(正确答案)
下列哪项不是植物组织培养的基本过程?
A. 外植体的选择与处理
B. 愈伤组织的诱导与分化
C. 直接种植于土壤中
D. 生根与移栽
(正确答案C)
在植物组织培养中,为了促进细胞伸长,通常使用的植物激素是?
A. 脱落酸
B. 细胞分裂素
C. 赤霉素(正确答案)
D. 乙烯
植物组织培养中,无菌操作的主要目的是?
A. 促进细胞分裂
B. 防止微生物污染(正确答案)
C. 提高生根率
D. 加速愈伤组织形成
下列哪种材料最适合作为植物组织培养的外植体?
A. 老化的叶片
B. 成熟的种子
C. 幼嫩的分生组织(正确答案)
D. 枯死的茎干
植物组织培养中,光照条件对哪一阶段尤为重要?
A. 愈伤组织诱导
B. 生根培养
C. 分化培养(正确答案)
D. 继代培养
下列哪项不是影响植物组织培养成功率的因素?
A. 培养基的pH值
B. 培养室内的湿度
C. 外植体的基因型
D. 培养基中的糖分种类(正确答案)
植物组织培养中,用于脱分化的培养基通常含有较高浓度的?
A. 生长素和乙烯
B. 赤霉素和脱落酸
C. 细胞分裂素和生长素(正确答案)
D. 乙烯和脱落酸
在进行植物组织培养时,为了保持细胞的正常生理功能,培养基中通常需要添加?
A. 大量元素和微量元素(正确答案)
B. 仅大量元素
C. 仅微量元素
D. 无需添加任何元素。

植物组织培养试卷及答案6套

植物组织培养试卷及答案6套

《植物组织培养》试题(一)一、填空题(每空0.5分,共10分)1.植物组织培养按培养基的物理状态分为___________培养和___________培养。

2.在组织培养中,IAA等植物激素必须用__________法灭菌,而接种室空间可采用__________或__________法灭菌。

3.植物的胚胎培养,包括________________、________________、________________以及________________等四个内容。

4.1960年,英国学者Cocking用__________分离原生质体成功,从而开创原生质体培养技术。

5.对植物材料进行表面灭菌时,常采用的灭菌药剂为__________、__________、__________。

6.器官培养时,其营养器官的培养有__________、__________、__________三种方式。

7.大多数植物组织培养的适宜温度范围是_______℃,培养基的pH值范围是_______。

8.用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1~3小时。

二、单项选择题(每题2分,共10分)1. 下列不属于生长素类的植物激素是_________。

A 6-BA;B IAA;C NAA;D IBA2. 在原生质体的培养中,渗透稳定剂的作用是_________。

A 稳定原生质体的形态而不使其被破坏;B 支持作用;C 提供营养;D 调节PH 值3. MS培养基中,下列不属于大量元素的盐是_________。

A NH4NO3;B KNO3;C ZnSO4.7H2O;D MgSO4.7H2O4. 下列实验中可能获得单倍体植株的是_________。

A 小麦的茎尖培养;B番茄花柱培养;C玉米胚乳培养;D玉米花粉培养5.同一植株下列_________部位病毒的含量最低。

植物组织培养试题(综合)

植物组织培养试题(综合)

植物组织培养综合测试题(一)一、填空题(每空0.5分,共10分)1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型。

2. 在分离原生质体的酶溶液内,需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定,避免破裂。

3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念;1943年White提出植物细胞“_________”学说,并出版了《植物组织培养手册》,从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。

4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时;烘干植物材料的温度是_________℃。

5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。

6. 1962年,Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基,其特点是__________浓度较高,且为较稳定的__________。

7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进__________的生长,这时__________占主导地位;比值高促进__________的生长,这时__________占主导地位。

二、不定项选择题(每题2分,共10分)1. 培养室里的度一般保持在_________A 30~40%;B 50~60%;C 70~80%;D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是_________。

A Kt;B IAA;C NAA;3. 影响培养基凝固程度因素有_________。

A 琼脂的质量好坏;B 高压灭菌的时间;C 高压灭菌的温度;D 培养基的PH4. .活性炭在组织培养中的作用有_________。

高二生物《植物的组织培养技术》

高二生物《植物的组织培养技术》

一、基本过程−−−→−−−→→脱分化再分化外植体(离体的组织、器官或细胞)愈伤组织根、芽或胚状体完整植株1.外植体由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。

一般取植物幼嫩部位(如茎 尖)或花药等。

2.愈伤组织原指植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织。

它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。

其特点是:排列疏松、无规则、高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞,具有未分化特性。

知识点睛第10讲 植物组织培养技术愈伤组织形成过程中,没有叶绿素和叶绿体的形成,所以愈伤组织形成初期不需要充足的光照。

通常使用细胞分裂素和生长素比例在1:l来诱导植物材料愈伤组织的形成。

3.胚状体胚状体是在离体植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或一些体细胞,经过胚的发生和发育过程,形成与合子胚相类似的结构。

一般专指在组织培养条件下产生的非合子胚。

诱导胚状体需要的条件,因植物种类、部位和培养时组织细胞所处状况的不同而异。

胚状体的诱导与外植体所处生理状况,内源激素的变化及遗传性、倍性等都有密切关系。

①胚状体的产生不需要任何激素,如烟草、曼陀罗和水稻等的花药培养。

②培养中需要生长激素或细胞分裂素或二者的组合,如檀香和石刁柏的愈伤组织培养。

③需先在有激素的培养基上诱导,然后转入低浓度激素或无激素的培养基中,如胡萝卜在诱导愈伤组织时需2,4-D,但由愈伤组织诱导出胚状体时,则需在没有2,4-D的培养基培养。

④某些天然产物,如椰乳,西瓜汁,酵母提取物,酪朊水解物或腺嘌呤等都有利于胚状体的发生。

二、理论基础:植物细胞的全能性1. 细胞全能性的定义:指已经分化的细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能。

2. 在生物的生长发育过程中,细胞并不表现出全能性,而是分化成各种组织和器官。

3. 细胞具有全能性的原因:含有该种生物全部遗传信息。

4. 细胞的全能性高低比较:①一般,细胞分化程度越高,全能性越低②受精卵>生殖细胞>体细胞③植物体细胞>动物体细胞三、条件1.离体2.无菌3.一定的营养物质:水、无机盐、蔗糖(提供碳源和调节渗透压)、维生素等4.植物激素在配制好的培养基中,常常需要添加植物激素。

植物组织培养试卷及答案4套

植物组织培养试卷及答案4套

《植物组织培养》试题(一)一、填空题(每空1分,共20分,)1、一般培养室控制的温度是________,培养基常选用的pH值是________。

2、在组织培养中,培养基常用____________法灭菌,不耐热物质用_________法灭菌。

3、非洲菊的叶片_______,故没有直立的茎,在组织培养的继代过程中用________法繁殖。

4、1962年,Murashige 和Skoog为培养烟草细胞设计了____培养基,其特点是__________浓度较高,且为较稳定的_______________。

5、从单个细胞或外植体形成的愈伤组织,大致要经历 ______、____和___期。

6、6-BA / NAA 的高低决定着外植体的发育方向,其比值高时________,比值低时_______________。

7、脱毒苗培养的常用两种方法是_______和__________。

8、菊花在生产实践中常用 _______法繁殖,在组织培养可用______作为外植体进行培养。

9、草莓属于_____科植物,用微尖培养草莓主要使其____,从而提高产量和质量。

二、判断题(每题2分,共10分,)()1、对外植体材料用酒精消毒目的只是灭菌。

()2、菊花属于球根花卉,而兰花属于宿根花卉。

()3、诱导愈伤组织重新脱分化出各种不同的器官和组织,这个过程称为脱分化。

()4、MS0培养基是没有激素的培养基。

()5、受精卵和体细胞都具有全能性。

三、名词解释(每题2分,共10分)1、细胞全能性2、灭菌3、玻璃化现象4、指示植物5、驯化四、选择题(每题1分,共10分)()1、下列哪种不是原生质体分离所用的酶A 纤维素酶B 半纤维素酶C果胶酶D淀粉酶()2、下列哪种不是组织培养常用的维生素A:维生素B2 、B:维生素B1 、C:维生素B6、 D:维生素C()3、在花药培养中下列哪种不是花粉的发育过程。

A营养细胞发育途径 B 生殖细胞发育途径C 胚状体发育途径D 花粉均等分裂途径()4、下列哪种激素不属于生长素类①IAA ②IBA ③6-BA ④NAA()5、在未成熟胚胎培养中下列哪种不常见的生长方式A“胚性”生长B早熟萌发C先胚根后胚芽D先形成愈伤组织再分化()6、适于花粉培养的最佳时期是__A双核期B单核期C多核期D无核期()7、下面哪种是MS培养基大量元素所用药剂A 硫酸镁B 硫酸亚铁C硫酸锌 D 硫酸铜()8、下列哪种不是在MS培养基起作用的有机物A氨基酸 B 肌醇 C 维生素 D 琼脂()9、常见的组织培养程序包括①取材②接种③灭菌④做培养基A①②③④B①④③②C①③②④D①④②③()10、和组织培养相似的代名词是A 克隆B有性生殖C孤雌生殖 D 单性生殖五、简答题(共50分)1、6-BA在组织培养中有何作用?(6分)2、述活性炭在组织培养中有哪些作用及使用注意事项?(6分)3、什么叫花粉看护培养法?原理是什么?(6分)4、尖培养脱毒的原理是什么?接种时应注意什么?(6分)5、移栽驯化香石竹时怎样选用基质和搭配基质?(6分)6、接种室有哪些技术要求?(6分)7、用湿热法进行高压灭菌的大致步骤有哪些?(7分)8、怎样用指示植物法鉴定草莓是否含有病毒?(7分)《植物组织培养》试题 (二)一、填空题(每空1分,共20分)1、在分离原生质体酶溶液内,需加入一定_____稳定剂,其作用是_______________。

(完整版)植物组织培养试题及答案总结

(完整版)植物组织培养试题及答案总结

《绪论》复习题及参考答案一、填空:★1、根据培养的材料,植物组织培养分:愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养、悬浮培养等类型。

2、植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。

3、1902年,Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说,1934年,White出版了《植物组织培养手册》从而使植物组织培养为一门新兴学科。

二、名词解释:★1、植物组织培养(plant tissue culture):是指通过无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。

由于培养材料已脱离了母体,又称为植物离体培养(Plant culture in vitro)。

2、脱分化(dedifferentiation):由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。

3、再分化(redifferentiation):脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官,这一过程称为植物细胞的再分化。

★4、外植体(explant):由活体(in vivo)植物体上切取下来的,用于组织培养的各种接种材料。

包括各种器官、组织、细胞或原生质体等★5、愈伤组织(callus):原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞,多在植物体切面上产生。

三、问答题:1、简述植物组织培养的理论依据?植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说,即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组,并具有发育成为完整植株的潜在能力。

★2、植物组织培养有哪些特点?(1)培养条件可以人为控制(2)生长周期短,繁殖率高:(3)管理方便,利于工厂化生产和自动化控制:★3、植物组织培养的分类?(1)根据培养对象不同:组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养等;(2)根据培养物培养过程:初代培养、继代培养;(3)根据培养基的物理状态:固体培养、液体培养。

植物组织培养试题与答案(集合版)

植物组织培养试题与答案(集合版)

植物组织培养练习题1.植物组织培养:指要人工控制的条件下,将植物体的任何部分,或器官、或组织、或细胞,进行离体培养,使之发育形成完整植物体。

所谓人工控制的条件,即营养条件和环境条件;植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。

2.愈伤组织培养:将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节剂的存在,而使其细胞脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。

3.外植体:植物组织培养中的各种接种材料,包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质体等。

4.脱分化:一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。

5、接种:把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞,转放到无菌培养基上的全部操作过程。

6、褐变:外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质,这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色,而且还会抑制其他酶的活性,严重影响外植体的脱分化和器官分化,最后变褐而死亡的现象。

二填空植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。

2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。

3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。

4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。

5、一般组织培养的几道工序如下:培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌;无菌操作——材料的表面灭菌和接种,培养;试管苗的驯化、移栽与初期管理。

6、在进行植物组织培养室设计时,其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室、摄影室等分室,另加驯化室、温室和大棚。

7、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH。

8、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。

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《植物组织培养技术》试题六答案
一、名词解释(每题3分,共15分)
1、植物组织培养:是指在无菌条件下,将植物的离体器官、组织、细胞以及原生质体,应
用人工培养基,创造适宜的培养条件,使其长成完整小植株的过程。

2、驯化:试管苗移植前可将培养瓶移到自然光照下锻炼3~10d,让试管苗接受自然光的照
射,感受自然温度的昼夜温差现象,使其壮实,然后再开瓶移植,经过较低温、湿度的处理,以适应自然温、湿度条件。

3、接种:在无菌条件下,用灼烧过的镊子将外植体放到培养基上的操作过程。

4、细胞悬浮培养:是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。

5、脱毒苗:是指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。

二、填空题(每空1分,共20分)
1、植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。

2、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物,一般用量为6-10g/L 之
间。

3、常用的化学灭菌剂有酒精、氯化汞、次氯酸钠等。

4、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式、和胚状体方式。

5、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。

前者主要是对茎尖长度不超过0.1mm,最小只有几十微米的茎尖进行培养,目的是获得无病毒植株;后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养,目的是加快繁殖速度。

6、分子生物学鉴定脱毒苗的主要方法:①双链RNA法(dsRNA)和②互补DNA(cDNA)检测法。

7、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。

8、原生质体的纯化方法有:离心沉淀法、漂浮法和界面法。

三、选择题(每题1分,共10分)
1、植物组织培养实验室不包括( D )。

A、准备室
B、无菌操作室
C、培养室
D、显微实验室
2、离体叶培养中,消毒后的叶片应整理切割成( C )大小。

A、3×3mm
B、4×4mm
C、5×5mm
D、6×6mm
3、( D )是植物离体培养常用的主要糖类。

A、葡萄糖
B、果糖
C、麦芽糖
D、蔗糖
4、在组培过程中,受到细菌侵染后,在培养基的表面出现( D )。

A、粉状、毛状菌斑
B、粉状、脓状菌斑
C、油状、毛状菌斑
D、油状、脓状菌斑
5 、超低温种质保存的温度为( C );
A、0~15℃;
B、-80~0℃;
C、-196℃;
D、-280℃
6 、无菌操作接种时,在操作前和操作期间要经常用( A )擦拭双手和台面。

A 、 70% 酒精
B 、 85% 酒精
C 、 95% 酒精
D 、 0.1% 升汞
7 、无机盐的浓度高,尤其硝酸盐的用量大,还含有一定数量铵盐的培养基是( C )。

A 、 White 培养基
B 、 N 6 培养基
C 、 MS 培养基
D 、 B 5 培养基
8、培养室温度一般要求常年保持在( A )左右。

A 、 25 ℃
B 、 22 ℃
C 、 28 ℃
D 、 24 ℃
9、用气雾熏蒸剂对空间和物体表面进行消毒灭菌时,用量一般为每立方米( C )
A、1~2g
B、 1~2mg
C、3~4g
D、 3~4mg
10、母液配制时要求选用( B )
A、自来水
B、蒸馏水
C、无菌水
D、矿泉水
四.判断题(对的画"√"错题画"×",每题1分,共10分)
1、茎尖培养与脱毒中,能否培养成功关键在于培养基。

(×)
2、平板培养是花粉培养的一种方式。

(√)
3、原生质体培养的适宜温度为25-30℃。

(√)
4、环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,一般要求80%-90%的相对湿度。

(×)
5、无病毒植株实际应用中最大的问题并非重复感染。

(×)
6、机械法分离原生质体的主要缺点是原生质体的产量很低、方法繁琐费力。

(√)
7、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养,又可以分化形成根、芽等器官,这一过程称为
脱分化。

(×)
8、植物组织培养的培养基PH值都在5.8-6.0之间。

(×)
9、花粉培养是将花粉从花药中游离出来,成为分散或游离态进行培养。

(√)
10、单细胞培养中选择优良细胞株常用平板培养法。

(√)
五、简答(操作)题(45分)
1、如何对外植体进行表面消毒?(8分)
(1) 将需要的材料用水洗干净。

(2) 表面灭菌:用70%酒精浸30-60s左右。

(3) 灭菌剂处理:0.1%升汞10分钟、或在10%漂白粉上清液中浸泡10-15分钟。

(4) 用无菌水冲洗3-5次左右
2、简述试管苗的驯化移植过程。

(12分)
(1)基质的混配:按配方将基质进行混合。

(2)混配基质和容器的消毒:用0.1~0.2%高锰酸钾对基质和容器进行喷洒清洗消毒
(3)装钵或穴盘:将基质装入容器中,压实,浇透水。

(4)试管苗的清洗:将试管苗根部的培养基质清洗干净,以防污染并少伤根。

(5)试管苗的移栽:在容器内用竹签扎一小孔穴,将洗净的小苗栽入其中,周围压实并轻浇薄水。

(6)做好保湿和遮荫,一般20-30d试管苗长出新根、发出新叶,高度5-10㎝就可以定植。

3、以制作配方为MS0的培养基1L为例,叙述组培培养基的配制步骤。

(大量元素母液为10×,微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为100×,激素母液浓度为1mg/ml)(12分)
(1)按配方移取各母液:大量元素母液为100ml,微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为10ml。

(2)定容:用蒸馏水定容至1L。

(3)称量蔗糖和琼脂:蔗糖25-30g,琼脂7-8g。

(4)培养基熬制:加入蔗糖和琼脂后进行培养液熬制,直至琼脂全部融化。

(5) 调PH值:先用PH计或PH试纸测量后再用0.1MNaOH或HCl调PH值为5.8-6.0。

(6)二次定容:当培养基熬制后总体积少于1L时要定容至1L。

(7)分装并扎瓶口:趁热分装,100ml的三角瓶约装入30-40ml, 35瓶/L。

(8)高压灭菌:及时灭菌,121-123℃条件下保持20-30分钟。

(9)冷却:待接种。

4、试述毛白杨组培快繁的操作程序。

(13分)
(1)外植体的选择:从毛白杨成年树基部萌生条上取当年形成的直径为5m左右的枝条,用解剖刀切成长度为1.5~2.0cm的节段,每个节带一个休眠芽。

(2)外植体灭菌及培养:将切段先用自来水冲洗干净,在超净工作台上用70%酒精消毒约30s,倒出酒精后,立即用无菌水冲洗一遍,然后放入盛有0.1%氯化汞溶液的无菌杯内,幼嫩茎尖灭菌1~3min,茎段灭菌2~7min,最后用无菌水冲洗3~4次,接种到MS+BA0.2~0.5mg/L+IBA0.lmg/L+2%食用砂糖的培养基上。

放置在23~27℃温度条件下培养,每天日光灯光照l0h。

2~3个月后,部分茎尖可分化出幼芽。

(3)增殖培养:将茎尖分化出的幼芽从基部切下,接种到MS+BA0.5~1.0+NAA+食用砂糖2%的增殖培养基上。

经10d左右培养,待腋芽萌发并伸长至带有6~7片叶时,可进行茎切段繁殖或叶切块繁殖,顶端切段带2~3片叶,其余各段带一片叶,重新接种到增殖培养基上,至其长到6~7片叶时,又可再次切段繁殖。

(4)生根培养:将继代培养中分化的嫩枝,从基部切下,或顶端带2~3片叶,以下各段只
带一片叶,转接到生根培养基1/2MS +IBA0.25mg/ L+食用砂糖1.5%,pH6.0上诱导生根。

(5)试管苗的移栽:当根的长度达1~1.5cm左右时,打开瓶口炼苗,逐渐降低湿度,并逐渐增强光照,进行驯化,经过10d炼苗后,从培养容器中取出生根苗,洗净残留在植株上的琼脂,移栽至温室内装有蛭石的苗床上或装有细沙的花盆内,开始时都要罩以塑料薄膜,以保持湿度,每天应定时掀开部分塑料膜以利通气,10d后可去掉塑料薄膜。

待植株又长出1~2片新叶后,再移至草木炭和沙土按3:1比例混合的土壤中,后移入大田栽培。

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