冻干管开启规程
冻干机标准操作规程
冻干机标准操作规程冻干机是一种专门用于冻干食品、药品等物品的设备，为了确保冻干机的正常运行和有效利用，需要严格遵守标准的操作规程。
下面是冻干机的标准操作规程，共计1200字。
一、安全操作规程1.1 操作人员必须经过相关培训并具备相关操作证书，不得擅自操作冻干机。
1.2 在进行任何操作之前，必须先确保设备上的电源开关已关闭，断开电源。
1.3 操作人员应穿着防护服并佩戴安全帽、防护眼镜、手套等防护装备，保证个人安全。
1.4 在操作冻干机时，严禁使用长发梳理、穿戴宽松衣物和饰物等非常规行为，防止被夹住或缠绕导致伤害。
1.5 使用冻干机时，应遵守现场消防规定，保证设备周围环境清洁，防止火灾和爆炸事故。
1.6 操作人员离开岗位前，必须将冻干机关闭并断开电源，清理好操作台面，确保设备处于安全状态。
二、设备正常运行规范2.1 在使用冻干机前，必须先进行设备检查，确保各部件完好无损，电源连接正常。
2.2 工作之前，应将冷冻室清洁干净，清除残留物，减少交叉污染。
2.3 操作时，应根据具体产品的要求，设置适当的温度、真空度和时间等参数，并选择合适的工作模式。
2.4 冷冻室内应严格按照规定的容量放置待冻干的物品，避免过量装载导致冻干效果不理想。
2.5 在操作过程中，不得随意开启设备门，以免破坏真空度和温度稳定性。
2.6 设备运行过程中如发现异常情况（如噪音过大、温度升高等）应立即停机检查，并及时报修。
2.7 设备使用完毕后，应及时清理和消毒设备内外部分，防止交叉污染。
三、安全用电规范3.1 在使用冻干机前，操作人员必须确保电源符合相关安全规定，使用接地插头并正常接地。
3.2 在使用过程中，应注意电源线不得连接或放置在易受损的地方，并确保线路不会被拉扯、握压或绕在设备周围。
3.3 在检修、维护设备时，必须先切断电源，并贴好警示标识，杜绝误操作。
3.4 使用电源线时，不得将电线修补、更换或搪塞以避免电线短路或其他安全事故。
菌种冻干操作规程
菌种冻干操作规程
《菌种冻干操作规程》
一、冻干操作前准备
1. 准备工作台、传染性物质隔离柜等操作设备，保持洁净。
2. 取出所需的冻干管和培养基，确保其完整和干燥。
3. 消毒操作台面、设备和工具。
二、冻干操作步骤
1. 将需要冻干的菌种培养液倒入冻干管内，每支管液面高度不超过管壁的一半。
2. 在管盖上打蜡封，确保密封性。
3. 将密封的冻干管放入冻干机内，设置适当的温度和压力。
4. 开启冻干机，开始冻干操作。
三、冻干后处理
1. 冻干结束后，关闭冻干机，取出冻干管。
2. 在无菌条件下，将密封蜡封刮除。
3. 将冻干管存放在低温冰箱内保存。
4. 记录冻干操作的日期、菌种信息等相关信息。
四、冻干操作注意事项
1. 操作过程中要保持无菌操作，避免外源污染。
2. 注意操作台面和工具的消毒，确保操作环境清洁。
3. 冻干机的设置和操作要符合菌种所需的温度和时间条件。
4. 冻干管的密封要确保严密，避免冻干过程中的氧化。
5. 冻干操作结束后，要及时记录菌种信息，方便后续的使用和
管理。
以上就是关于《菌种冻干操作规程》的操作步骤和注意事项，希望对相关工作人员能有所帮助，确保菌种冻干操作的顺利进行。
冷冻干燥机操作规程
冷冻干燥机操作规程
1.负责人员必须经过相关培训并持有操作证书，方可进行冷冻干燥机的操作。
2.在操作前，需要检查冷冻干燥机的各项设备是否正常运行，包括压缩机、冷凝器、真空泵等，确保其能正常工作。
3.清理和消毒相关工作台，确保工作环境的卫生。
4.开启冷冻干燥机电源开关，并按照操作手册上的要求调整温度、真空度和时间，进行预热和预冷操作。
5.将待干燥的物料放入冷冻干燥机的料仓中，并注意合理分布，确保每个物料能得到均匀的干燥。
6.关闭料仓门，并按照程序要求开始真空抽取，并开启冷冻循环。
7.在真空度到达要求后，输入干燥时间和温度，确保物料完全干燥。
8.干燥完毕后，关闭冷冻循环，并打开排气阀，使干燥室恢复正常气压。
9.打开料仓门，取出干燥完成的物料，并进行质检。
10.关闭冷冻干燥机电源开关，并进行清理和消毒。
11.对冷冻干燥机的各部位进行巡检，及时发现并修复故障。
12.完成日常操作后，将相关记录进行整理并归档。
安全注意事项：
1.在操作冷冻干燥机时，要戴好防护手套，避免冷冻或其他伤害。
2.注意操作过程中是否有异常噪声或异味，如有，要及时停机检查。
3.在封闭空间工作时，要确保通风良好，以防止有害气体积聚。
4.切勿随意更改操作参数，以免影响干燥效果或引发事故。
5.在清理和维护冷冻干燥机时，务必切断电源，并遵守有关安全操作规定。
6.在进行维修或检修时，必要时需进行带电工作，要使用带绝缘手套和工具。
冷冻干燥机操作规程（正式）
冷冻⼲燥机操作规程（正式）
冷冻⼲燥机操作规程(正式)
Standardize The Management Mechanism To Make The Personnel In The Organization Operate According To The Established Standards And Reach The Expected Level.
使⽤备注：本⽂档可⽤在⽇常⼯作场景，通过对管理机制、管理原则、管理⽅法以及管理机构进⾏设置固定的规范，从⽽使得组织内⼈员按照既定标准、规范的要求进⾏操作，使⽇常⼯作或活动达到预期的⽔平。
下载后就可⾃由编辑。
1、在使⽤冷冻⼲燥机前必须向⼯程部报告，经⼯程部同意，由设备责任⼈操作。
2、按冷却⽔循环系统操作规程开启冷却⽔循环系统。
打开冷凝器进⽔阀。
3、打开制冷系统两个膨胀阀，检查捕⽔器上的排⽓阀是否为关闭状态。
4、接通稳压器电源，检查电压是否为380V，符和要求，则开启控制⾯板上的总电源，并按下仪表键，⾯板上出现温度及真空度显⽰，打开真空泵出⽓盖。
5、按⼯艺要求将物料放⼊动⼲托盘，装好温度探头，冻⼲最⼤装料量不得超过30kg。
6、关闭冻⼲室门，按冻⼲⼯艺开始进⾏操作，所有操作由专职操作⼈员完成，在⼯作期间不得离⼈，并注意压缩机压⼒及油压指⽰，如有异常及时排除。
7、完成冻⼲操作，卸完物料，清洁⼲燥箱及温度探头，进⾏化霜操作。
8、关闭制冷系统两个膨胀阀，关闭冷凝器内进出⽔阀，切段稳压器电源，锁上⾯板上的电源。
请在这⾥输⼊公司或组织的名字
Please enter the name of the company or organization here。
冻干机操作规程
真空冷冻干燥机操作规程
1、打开仪器主电源，真空泵，电脑。
2、打开软件。
点击MANUAL 设置：SHELFSETPT
（托盘温度，即为目标温度）：10℃
VACUMSETPT（真空度）： 100MT。
温度和压力可根据方法自行修改。
3、点击POWER。
开盖确认内部无水分，密封圈完好
后，把冻好的样品放入托盘，放入冻干机。
4、打开VACUMN ，20秒左右后关闭。
5、打开SHELF CONTROL和CONDENSER，开始冷冻。
6、当CONDENSER TEMP降至-50℃以下时，打开
VACUMN，开始抽真空。
7、此时冻干工作已开始，记录冻干时间。
8、待冻干时间已达到，依次关闭VACUMN、
CONDENSER、SHELF CONTROL。
9、打开RELEASE排气，待VACUMN.P达到630000以
上时，可以打开盖门，取出样品。
10、除霜，点击DEFROST，输入10min，开始除霜。
待仪器冷却管上的冰霜都融化时，用干毛巾擦净仪器内室，保证下次工作仪器内部干燥洁净。
11、关闭仪器主电源、真空泵、电脑。
注意事项：
1.使用前检查仪器内室，必须干燥（不能有液态水存在）。
2.样品必须冷冻好，不能有液态水。
3.样品取出后需将托盘清洗干净，并用毛巾擦干。
4.开启真空泵前注意检查真空泵油的油位和颜色，真空泵油的更换在500小时左右。
冻干机SOP操作标准
标准操作规程(Standard operation protocol, SOP)项目名称：LYOlAB 3000 冻干系统制定单位：暨南大学医学院病理生理实验室适用范围：本实验室使用人员：全体实验人员和研究生制定者：审定者：颜亮批准者：陆大祥签署日期：修订日期：生效日期：LYOlAB 3000 冻干系统一、目的使富含水的液态物质在真空低温状态下干燥成固态。
二、原理任何物质都有三种存在方式：气态、液态和固态。
以水为例，它的存在形式主要取决于其所处环境的气压和温度。
冻干机主要是通过控制样品所处环境的气压和温度，达到干燥目的，大致可分为三个过程：首先，将样品冷冻成固态，使其中的水变成冰；其次，冰点状态下，冰通过升华作用从样品中去除；最后，样品在较高温度时，与其紧密结合的水可通过解吸作用直接变为气态去除。
三、主要操作规程（一）多管干燥（manifold）1、开始实验前应注意检查法兰（三通装置）是否牢固及盖子是否关闭。
关闭排气水管及真空阀，关闭所用橡胶阀。
2、在实验过程中保持真空泵的气镇阀在开状态，（主要是在抽除含有少量水蒸气的空气时，可避免水蒸气凝聚，水混入油中）。
检查真空油液面（正常情况在1/ 2-3/4之间）以及油气分离器，注意及时加油及更换新油。
3、分别打开冻干系统及真空泵电源开关。
4、等冻干系统指示灯转位绿灯（大概30分钟左右），即腔内温度低于–40℃时，打开真空阀。
5、打开真空阀后，等冻干系统指示灯变为绿色时表示可以进行冻干实验。
6、连接冻干瓶到合适的橡胶阀，然后打开阀门，进行冻干实验。
等冻干系统指示灯变绿之后再连接另一冻干瓶。
7、冻干过程结束后，旋转橡胶阀180°，平衡冻干瓶内和外界气压，然后取下冻干瓶。
8、在取下最后一个样品后关闭真空泵。
9、最后为平衡冻干系统腔体内气压，打开排水阀或一个橡胶阀装置即可。
（二）chamber干燥1、保证正确安装chamber以及样品架，实验前仔细检查样品架是否牢固以及ch amber是否关闭。
冻干机操作规程
冻干机操作规程冻干机操作规程第一章总则第一条为了确保冻干机操作的安全和高效，制定本操作规程。
第二条本操作规程适用于冻干机的操作人员。
第二章操作人员第三条冻干机操作人员应具备以下条件：1. 掌握冻干机的基本原理和工作流程。
2. 了解相关的安全操作规程。
3. 具备基本的电气知识和操作技能。
4. 具备应急处理能力和常规维护能力。
第四条冻干机操作人员应该保持身体健康，不得饮酒和服用药物。
第五条冻干机操作人员应穿戴符合安全要求的工作服和防护用品。
第六条冻干机操作人员应在经过培训并通过考核后方可操作设备。
第三章操作准则第七条在操作冻干机之前，应先检查设备是否具备良好的工作状态。
第八条操作人员应在操作冻干机之前，了解冻干机的正常工作参数，包括温度、压力等。
第九条操作人员应根据产品要求设置合适的工作参数，如温度、压力和时间等。
第十条操作人员应按照规定的步骤操作冻干机，不得随意更改或省略任何操作步骤。
第十一条操作人员应定期对冻干机进行检查和维护，确保设备的正常工作状态。
第十二条在操作冻干机期间，操作人员应密切观察设备的运行情况，如有异常应及时报告，并采取措施进行处理。
第四章安全措施第十三条操作人员在操作冻干机期间，应注意安全，并采取相应的措施避免事故的发生。
第十四条操作人员应保持清醒状态，不得在工作过程中或操作台附近吸烟、饮食。
第十五条操作人员应熟悉使用与冻干机相关的灭火器材并能正确使用。
第十六条操作人员应定期参加培训，了解安全操作规程的更新和变化。
第十七条操作人员应遵守作业现场的安全要求，不得擅自进入禁止区域。
第五章处罚措施第十八条对于违反冻干机操作规程的操作人员，将根据情节轻重进行相应的处罚。
第十九条对于因违反操作规程引起的事故，责任人应承担相应的法律责任。
第六章附则第二十条对冻干机操作规程的任何修改或补充，均需经过专业人员审批。
第二十一条本操作规程自发布之日起实施。
以上是冻干机操作规程的内容，希望对您有所帮助。
冻干岗位操作规则
冻干岗位操作规则冻干岗位操作规程1目的：建立冻干岗位操作规程，规范岗位操作。
2范围：适用于冻干岗位。
3职责：冻干岗位操作人员。
4内容： 4.1准备工作4.1.1检查设备是否处于备用或已安装。
4.1.2检查设备、中转用具是否已清洁。
4.2进料4.2.1将交接完成的冻干的，使用烧杯分别装入冻干盘内，每冻干盘注入0.8-1升放入冻干机内，15个盘一层，分别计算一共多少盘，做好记录。
4.2.2进料后，检查冻干箱的门关闭的气密性是否能够达到要求，漏气阀和放气阀是否正常进气。
4.3冻干4.3.1启动电脑，进入主界面，输入冻干批次和产品名称。
4.3.2启动手动，开启循环泵，开启压缩机1（间隔5秒分别开启压缩机2和压缩机3）。
4.3.3开启板冷阀（前箱预冷，进口温度达到-15℃，停止降温），当品温温度达到-40℃，制品加固开始，保温4小时，制品加固结束，关闭板冷阀，开启捕水阀，当捕水温度低于前箱温度5℃后（30分钟），开启真空泵1、2预抽真空 4.3.4真空系统抽真空，开启小蝶阀，确认真空表数值应有变化，以确保开启。
开启罗茨泵，待真空降至0.10mbar，开启电加热，开始进入升华阶段。
4.3.5一次升华，通过电加热开关（手动），调节导热油温度，或自动设定在90分钟内导热油温度升高至35℃，使品温稳定在-32---42℃ ,经30min没有超出范围，则确认稳定，不再调整导热油温度 (约-12℃)，开始一次升华（控制真空度0.32mbar-0.15 mbar并呈稳步上升趋势（每四小时调整0.04mbar），为了制品更好的升华，一次升华时间应持续在14到22小时。
4.3.6结合整个升华过程温度变化趋势，当制品温度明显上升时，一次升华结束。
4.3.7关闭中隔阀，做压力升测试，观察箱体真空度，若没有快速下降（两分钟内下降10%以上），则确认升华结束。
4.3.8解析干燥，打开中隔阀，制品进入解析阶段，逐步调节导热油温至最高温度35℃，过程维持8-12小时，调整幅度5℃/3hr，逐步调节真空数值，控制真空度由0.15mbar 升至0.02m bar。
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冻干管的开启及制作规程一、培养基的配制要求：1. 按照菌种库相应要求配置培养基，6支液体试管（5ml/支），三角瓶4个（30-50ml/瓶），斜面5支。
2. 所有培养基配制完成后，放置于相应的培养温度和37℃无菌检查48h。
注意：有很多无机盐的培养基要将能够产生沉淀的盐分开溶解（各自用10ml去离子水溶解后，再加入到主培养基中）二、超净工作台的准备1. 将新洁尔灭原液稀释50倍，喷到台面上，或者纱布浸湿后擦拭台面，或者用75%的乙醇擦拭或者喷洒（注意不要开火）。
2. 开紫外灯照射20-30min。
3. 关闭紫外灯，开启风机，10分钟以上。
4. 在开始接种前，用75%酒精棉擦拭台面，手、枪。
5. 可以在台面上铺一块灭菌的纱布。
三、冻干管的开启1. 冻干管的开启：一般有滴水法和砂轮打磨法。
从DSMZ买来的双层菌种管需要用滴水方法，从国内的有些库购买的，或NRRL得到的菌种管很细，滴水法很难打开，因此，需要用砂轮打磨。
滴水法：用酒精棉擦拭菌种管，尖头稍倾斜向下（以防菌种滚落到前面烫的区域致死，重要！），用酒精灯的外焰烧烤菌种管的前端，约1min后，用无菌水快速滴加到菌种管上，此时，管上会有裂缝，继续靠火操作，用无菌镊子轻敲破碎处，将菌种管打开。
砂轮打磨法：用玻璃砂轮在菌种管的一侧反复打磨，出现痕迹。
接着，将该处在火上灼烧灭菌。
将一张无菌牛皮纸包在菌种管上，反方向用力掰断。
2. 菌种的复水：将液体培养基吸取0.5-1ml左右（视菌体量多少而定，厌氧菌加0.5ml），充分水化后，吸取100ul左右到第一支试管中（第二支和第三只分别稀释100倍和1000倍），100ul到斜面上，晃动使其均匀分布，也可以用无菌接种针涂布均匀。
如有多余的冻干液，则接200ul左右至摇瓶中。
有些菌要求的初始菌液浓度比较大，因此需将冻干液全部接种到液体试管中。
剩余的冻干液用EP管装好，放置于4℃冰箱中，以备不测。
开启冻干管需要准备的器材：无菌水、培养基、黄蓝枪头、纱布、EP管四、传代培养从菌种库接出来的一般称为第一代，第一代其生长可能同正常的菌不一样，会出现延滞期延长等现象，因此如果一个菌出现长时间不长的现象，可以延长等候时间，直至过了其2-3个生长期后仍不长，可判断菌种死亡。
因此所有保种的菌必须用第二代或第三代来保种。
第一代菌体进行染色、涂片，对图片资料进行保存。
五、冻干管制作保护剂——脱脂牛奶的制作：大多数的菌种都可以用脱脂牛奶作为保护剂，但DSM1616等属的微生物需要用蔗糖和明胶作为保护剂。
初始菌种如果呈现米色块状，一般是用牛奶做保护剂的，如果呈现透明状，则可能是使用明胶蔗糖或DMSO做保护剂的。
a、用蓝盖瓶装20-30ml水，121℃，30min灭菌。
b、在无菌室取2-3g脱脂奶粉（BD），（10%的浓度），在无菌室中加入到蓝盖瓶中，溶解完全，盖好盖子，115℃15min灭菌。
将灭菌好的牛奶涂布在肉汤培养基平板上，37℃检查48h，验证无菌后待用。
牛奶放4℃冰箱中。
1. 冻干管一般用斜面，如果斜面生长不理想，或者厌氧菌，则可以用菌液离心后的沉淀来保种。
2. 正常传代，菌种长至对数生长期。
将待保种的菌体涂片检查，图片资料进行保存。
3. 斜面：取出新鲜斜面两支，如果菌苔较厚，则吸取1ml牛奶到EP管中，用接种环刮取菌苔，到牛奶中，混合均匀，盖好盖子，用振荡器混匀。
如果菌苔较薄，无法刮取，则吸取牛奶液到斜面中，用接种环将菌体刮到牛奶中，再用长针头吸出。
菌液：将新鲜菌液吸取无菌离心管中，离心沉淀，加入牛奶，长针头吸出。
牛奶菌悬液的浓度一般在1亿个/ml。
4. 将混合好的菌液用长针头吸出到冻干管中，冻干管事先用纸塞子塞好。
全部做好后，用八层纱布扎好，每5-6只扎一起。
5. 菌体预冻：将制作好的冻干管先放在4℃，2h后转入-20℃，2h后转入-80℃。
多数细菌可以直接冻到-80℃，两小时或者过夜之后，上冻干机。
制作冻干管需要准备的器材：菌种、冻干管、长针头、大小纱布、牛奶、肉汤培养基（可以用LB培养基取代）、接种针、枪头、EP管六、冻干机的使用：a、将真空泵和冻干机之间的接头打至垂直，将真空泵预热。
b、将冻干机的冷冻腔开关打开，待降至-52℃时，将样品放置在冷冻腔中，接头打至平行。
c、抽干8h以上，可过夜。
d、接头打至垂直，放气，待真空度显示正常，取出有机玻璃罩，取出样品，再把玻璃罩放上，抽真空。
e、待真空度达到0.1Mpa时，先把白色旋钮垂直向上，上冻干管，待冻干管全部插满后，将白色旋钮垂直向下，开始抽真空，约10min后，开始热熔封。
f、将所有管子热熔封后，将真空泵和冻干机之间的接头打至垂直，关闭真空泵，将白色旋钮打至倾斜，开始往冷冻腔中缓慢进气，真空度慢慢解除。
关闭冻干机。
g、将冻干机前面的黑色旋钮打开，放冷凝水。
h、关闭煤气开关。
七、菌种管检查为了保证冻干管的纯度，需要对该批冻干管进行检查，随机取出一支，按三中的方法开启冻干管，分别接液体和斜面，待生长后，涂片，检查纯度。
八、入库记录演示：1. 冻干管开启。
2. 菌体涂片检查。
3. 酒精棉制作。
4. 长针头制作。
5. 冻干机使用。
亨盖特法厌氧培养基的制备一．目的:学习制备厌氧菌培养基。
二．实验原理按照微生物与氧的关系，可把微生物分成好氧菌和厌氧菌两大类，并可细分为五类。
（1）专性好氧菌：必须在有分子氧的条件下才能生长，有完整的呼吸链，以分子氧作为最终氢受体，细胞含超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶。
绝大多数真菌和许多细菌都是专性好氧菌。
（2）兼性好氧菌：在有氧或无氧条件下均能生长，但有氧情况下生长得更好；在有氧时靠呼吸产能，无氧时借发酵或无氧呼吸产能；细胞含SOD和过氧化氢酶。
许多酵母菌和许多细菌都是兼性厌氧菌。
（3）微好氧菌：只能在较低的氧分压下才能正常生长的微生物。
也通过呼吸链并以氧为最终受体而产能。
（4）耐氧菌：一类可在分子氧存在下进行厌氧生活的厌氧菌，即它们的生长不需要氧，分子氧对它也无毒害。
不具有呼吸链，仅依靠专性发酵获得能量。
细胞内存在SOD和过氧化物酶，但缺乏过氧化氢酶。
一般的乳酸菌多数是耐氧菌。
（5）厌氧菌：分子氧对它们有毒，即使短期接触空气，也会抑制其生长甚至致死。
厌氧菌在固体或半固体培养基深层才能生长，其生命活动所需能量通过发酵、无氧呼吸、循环光合磷酸化或甲烷发酵等提供；细胞内缺乏SOD和细胞色素氧化酶，大多数还缺乏过氧化氢酶。
氧气进入菌体后，能接受电子而产生不同还原性的氧离子，如过氧离子、过氧化物自由基。
过氧化物自由基和过氧离子都是很强的氧化剂，对微生物有毒，能氧化微生物生长过程中所必需的酶。
好氧菌、兼性好氧菌以及微好氧菌体内含有过氧化物歧化酶（SOD)和过氧化氢酶。
这两种酶能将过氧化物自由基和过氧离子还原成没有毒性的水分子，所以以上三种菌不会被氧气所杀死。
耐氧菌虽没有过氧化氢酶，但有SOD酶，而不会被氧毒害。
厌氧菌体内都没有这些酶，所以不能忍受氧气。
厌氧微生物的研究可采用美国微生物学家Hungate（亨盖特）于1950年提出并广泛应用的厌氧滚管技术又称亨盖特滚管技术（Hungate roll-tube technique）。
其原则是利用物理化学的手段在制备、保存、培养等各个环节驱除和避免接触氧气，具体做法有五点：①利用高纯氮驱除小范围的空气，创造缺氧的小环境。
②培养基要经过煮沸以除氧。
③在培养基中加入低浓度的还原剂如半胱氨酸或硫化钠，以得到较低的氧化还原电位。
④用无氧指示剂刃天青指示培养基中的无氧环境。
⑤用特殊的密封器皿进行培养，如带有丁基橡胶塞的血清瓶或试管（用试管可制作亨盖特（Hungate）滚管）。
三．实验器材1. 培养基：解纤维梭菌（Clostridium cellulolyticum）培养基（配方见该实验附）2. 过滤除菌的Na2CO3(5% w/v)溶液3. 还原剂半胱氨酸，还原剂Na2S•9H2O 10%母液。
4. 高纯混合氮气钢瓶（80% N2+20% CO2 ），减压阀。
5. 其他：高压蒸汽灭菌锅，厌氧试管，厌氧瓶（即血清瓶），异丁烯橡胶塞，煤气灯，注射器、18#长针头，移液器，枪头，一次性无菌过滤器。
四．实验步骤1. 高压钢瓶的使用气体钢瓶是储存压缩气体的特制的耐压钢瓶。
使用时，通过减压阀（气压表）有控制地放出气体。
由于钢瓶的内压很大（有的高达15MPa ），而且有些气体易燃或有毒，所以在使用钢瓶时要注意安全。
（1）在钢瓶上装上与气体配套的减压阀（图1）。
（2）使减压阀处于旋松状态，此时气体不会外泄。
用时先逆时针打开钢瓶总开关，观察高压表读数，记录高压瓶内总的氮气压，然后顺时针转动减压阀，使其压缩主弹簧将活门打开。
这样进口的高压气体由高压室经节流减压后进入低压室，并经出口通往工作系统。
使用结束后，先顺时针关闭钢瓶总开关，再逆时针旋松减压阀。
图1 高压气体钢瓶及减压阀（3）利用分支管从氮气钢瓶中接出两支气路，每支气路各接长针头（图2）。
图2 氮气气路连接图2. 解纤维梭菌液体培养基的制备（1）称量：按照配方称取除钙镁盐、刃天青外所有组分。
（2）溶解定容：用500ml 左右蒸馏水溶解，然后将钙盐和镁盐溶液按需要的量滴加其中，滴加过程中不断搅拌，混合后定容至1000ml 。
（3）调节pH ：由于刃天青和半胱氨酸加入后会影响培养基的pH 值，因此将二者加入到培养基后再调节pH 。
刃天青加1ml ，半胱氨酸0.4g ，此时培养基呈现蓝紫色。
灭菌前用盐酸将pH 调整到6.0，灭菌后用过滤除菌的Na 2CO 3(5% w/v)溶液在混合气体保护下（80% N 2+20% CO 2 ）将pH 调整到7.2（一般10ml 培养基中加入0.4ml ）。
（4）煮沸除氧气：将调好pH 值的培养基放置在煤气灯上加热至沸腾，培养基保持沸腾时会显示除氧后的颜色，即刃天青变为无色，培养基显示出原本的淡黄色。
此时打开高纯氮气钢瓶，将长针头置入培养基中通气，并冷却。
（5）培养基的分装：往培养基中加入Na 2S •9H 2O 母液5ml ，将厌氧瓶或厌氧管用长针头通上氮气，然后取出定量注射器从培养基中吸取一定量的培养基注入厌氧瓶或厌氧管中，继续通气15s 左右，迅速塞好塞子。
（6）121℃高压蒸汽灭菌20min 。
3. 厌氧固体培养基的制备（1）按照步骤2（1）~（3）步进行操作。
（2）取适量上述培养基，加入适量琼脂粉，然后在煤气灯上煮沸以彻底融化琼脂并除氧。
（3）按2-（5），2-（6）的步骤进行分装和灭菌，厌氧管装量为5ml 。
（4）灭菌结束后进行滚管操作。
将灭完菌的厌氧管放置在桌面上进行匀速滚动，这样培养基会在试管壁形成一层琼脂面，且面积较大，可以进行分离的操作，也可以摆放成斜面。
4. 厌氧生理盐水的制备（1）配制0.85%的生理盐水。