常用显色剂配制方法审批稿
常用几种显色剂及其配制方法

10% 硫酸铈 (IV)+15% 硫酸的水溶液 1% FeCl 3 + 50% 乙醇水溶液 0.1% 桑色素 +甲醇
1.5g 茚三酮 + 100mL 正丁醇 + 3.0mL 醋 酸
12g 二硝基苯肼 + 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇
15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫 酸
高锰酸钾
含还原性基团化合物, 比如羟基,氨基,醛
1.5g KMnO 4 + 10g K 2CO 3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水 . 使用期 3 个月
溴甲酚绿
钼酸铈 茴香醛 (对甲氧基苯甲醛 )
茴香醛 (对甲氧基苯甲醛 )2
羧酸, pKa<=5.0 广谱 广谱
在 100ml 乙醇中, 加入 0.04g 溴甲酚绿, 缓 慢滴加 0.1M 的 NaOH 水溶液, 刚好出现蓝
茴香醛 :HClO 4: 丙酮 :水 (1:10:20:80)
磷钼酸 (PMA)
广谱
10 g 磷钼酸 +100 mL 乙醇
色即至。 235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈
氨 + 15 mL 浓硫酸
135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL 冰醋 酸 + 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均
匀
萜烯,桉树脑 (cineoles), withanolides, 出油柑碱
(acronycine)
常用几种显色剂及其配制方法
显色剂
检测物质
不饱和或者芳香族化合 碘
实验室常用显色剂

碘:适用于不饱和或者芳香族化合物配制方法:在100ml 广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g 碘粒,30g 硅胶高锰酸钾:适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法:1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH +200mL 水. 使用期3 个月磷钼酸(PMA):广谱配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇紫外灯:适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物硫酸铈::生物碱配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁:苯酚类化合物配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮):广谱, 有荧光活性配制方法:0.1% 桑色素+甲醇茚三酮:适用于氨基酸配制方法:1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸二硝基苯肼(DNP):适用于醛和酮配制方法:12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL乙醇香草醛(香兰素):广谱配制方法:15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸溴甲酚绿:适用于羧酸,pKa<=5.0配制方法:在100ml 乙醇中,加入0.04g 溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH 水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈:广谱配制方法:235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1:广谱配制方法:135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2:适用于萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)实验室最常用的显色剂及配制方法(1)硫酸(sulphuri acid)通用显色剂。
显色剂的配制方法[

显色剂配置方法碘:不饱和或者芳香族化合物配制方法在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶紫外灯含共厄基团的化合物,芳香化合物硫酸铈:生物碱配制方法10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱, 有荧光活性配制方法0.1% 桑色素+甲醇茚三酮氨基酸配制方法1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸二硝基苯肼(DNP)醛和酮配制方法12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇香草醛(香兰素)广谱配制方法15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸高锰酸钾含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月溴甲酚绿羧酸,pKa<=5.0配制方法在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈广谱配制方法235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1广谱配制方法135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)磷钼酸(PMA)广谱配制方法10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇用于有机液体较强的去水剂来源:中国化工论坛整理:chemnews1有机化合物的鉴别来源:中国化工论坛整理:chemnews1在药品的生产、研究及检验等过程中,常常会遇到有机化合物的分离、提纯和鉴别等问题。
薄层层析常用显色剂配制及显色方法

碘:适用于不饱和或者芳香族化合物配制方法:在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶高锰酸钾适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法:1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月磷钼酸(PMA)广谱配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇紫外灯适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物硫酸铈生物碱配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱, 有荧光活性配制方法:0.1% 桑色素+甲醇茚三酮适用于氨基酸配制方法:1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸二硝基苯肼(DNP)适用于醛和酮配制方法:12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇香草醛(香兰素)广谱配制方法:15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸溴甲酚绿适用于羧酸,pKa<=5.0配制方法:在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈广谱配制方法:235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1广谱配制方法:135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2适用于萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)胺类物质常用的是:(1)磷钼酸显色剂:磷钼酸5%-10% 乙醇溶液,淡黄色,久置变为浅绿色,不影响使用。
浸板或喷板,加热,浅黄色背景,还原性物质显蓝绿色斑点,如果斑点太浓,可能显深黄色。
薄层层析及纸层析常用显色剂配制及显色方法

薄层层析及纸层析常用显色剂配制及显色方法通用试剂(1) 重络酸钾-硫酸:检查一般有机物.喷洒剂:5克重络酸钾溶于100毫升40%硫酸中.薄层检查:喷洒后加热到150℃至班点出现(2) 荧光素-溴:检查不饱和化合物喷洒剂:0.1克荧光素溶于100毫升乙醇中溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液喷洒后处理:喷洒荧光素溶液后,放置存有溴溶液的缸内,可于紫外线分析灯下检查荧光,荧光素与溴化和成曙红(Eosin)(无萤光),而不饱和化合物则成溴加成物,保留了原有荧光;若点样较多,则呈黄色斑点,底板呈红色.(3) 碘:检查一般有机物.方法:a 层析谱放密闭缸内或瓷盘内,缸内预先放有碘结晶少许,大部分有机化合物呈棕色斑点。
B 层析谱放碘蒸气中5分钟(或喷5%碘的氯仿溶液)取出置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后,喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。
(4)硫酸:通用喷洒剂:5%的浓硫酸乙醇溶液,或15%浓硫酸正丁醇溶液,或浓硫酸-醋酸(1:1)喷洒后处理:空气中干燥15分钟,再热至110℃直至出现颜色或荧光。
(5)硝酸银-氢氧化铵(Tollen-Zaffaroni)试剂:检查还原性物质。
溶液I : 0.1%N硝酸银; 溶液II: 5N氢氧化铵喷洒剂: I和II以1:5混合(临用前混合)喷洒后处理: 105℃加热5~10分钟,至深黑色斑点出现.(6)磷钼酸或磷钨酸,硅钨酸:检查还原性物质,类脂体,生物碱,甾体喷洒剂: 5~10%磷钼酸或磷钨酸或硅钨酸乙醇溶液喷洒后处理: 120℃加热至斑点出现.沉淀试剂: 1克硅钨酸溶于20毫升水中,加10%盐酸至强碱性.生物碱(7)硫酸??=硫酸:检查生物碱及含碘化合物喷洒剂: 0.1克硫酸?混悬于4毫升水中,加入1克三氯醋酸,加热至沸,逐滴加入浓硫酸至澄清.喷洒后处理: 110℃加热数分钟至斑点出现.(8)碘化铋钾(Dragendorff)试剂:检查生物碱及其他含氟化合物.溶液I: 0.85克次硝酸铋溶于10毫升冰醋酸40毫升水中溶剂II: 8克碘化钾溶于20毫升水中.制备液I+II,等体积混合.可用于棕色瓶中保存较长时间,一般制备液可作沉淀试剂用.喷洒液: 制备液1毫升与2毫升醋酸,10毫升水混合即得(9).碘化汞钾(Mayer)试剂: 检查生物碱.制备液: 13.55克氯化汞和49.8克碘化钾各溶于20毫升水中,等体积混合并用水稀释至1000毫升.喷洒液: 制备液加1/10体积的17%盐酸.喷洒后处理: 观察斑点,并于紫外线荧光分析灯下检出.(10) ?酸纳-浓硫酸(Mandelin)试剂:检查生物碱.1%>酸纳的浓硫酸溶液.与多种生物碱呈不同颜色.(11)碘-碘化钾(Wagner)试剂:检查生物碱.1克碘及10克碘化钾,溶于50毫升水中,加热,加2毫升醋酸,再用水稀释至100毫升.可作纸层板显色剂,液可作沉淀试剂.酚类,鞣质(12)三氯化铁:检查酚类及??酸.喷洒剂:1~5%三氯化铁的水溶液或乙醇溶液.并加盐酸少许.??酸呈红色斑点,酚类称蓝色或绿色斑点.(13)铁氰化钾-三氯化钾:检查酚类,芳香胺类及还原性物质.喷洒剂: 1%铁氰化钾水溶液,2%三氯化铁水溶液.临用前等体积混合.喷洒后处理: 喷洒后酚性物质呈蓝色斑点.再喷2N盐酸,能使颜色加深,纸谱可用烯盐酸洗去喷洒液.(14) 4-胺基安替比林-铁氰化钾(Emerson反应): 检查酚类.喷洒剂: I . 2%4-氨基安替比林乙醇溶液;II. 8%铁氰化钾水溶液.或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液方法: 先喷洒I,再喷洒II,即显色,或再放入密闭缸中,缸内放25%氢氧化铵,即产生橙色至深红色.(15) 对氨基苯磺酸,重氮盐(Pauly试剂): 检查酚类,芳香胺类及能偶合的杂环化合物.喷洒剂: 4.5克对氨基苯磺酸,加热溶于45毫升12N盐酸中,用水稀释至500毫升,取10毫升稀释液用冰冷却,加10毫升冷4.5%亚硝酸钠水溶液,0℃放15分钟(此试剂于0℃可保存3天),用前加等体积1%碳酸钠水溶液.一般重氮化试剂,也可用联苯胺,对硝基苯胺等.(16) 对甲苯磺酸: 检查甾体,黄酮,鞣质.喷洒剂: 20%对甲苯磺酸氯仿溶液.喷洒后处理: 100℃加热数分钟,紫外线分析灯下检查荧光斑点.含氧杂环及蒽醌类*(17) 三氯化铝: 检查黄酮体.喷洒1%三氯化铝乙醇液于紫外线荧光分析灯下检示,呈黄色荧光(18)碱式醋酸铅: 检查黄酮体.喷洒剂: 饱和碱式醋酸铅(或饱和醋酸铅)水溶液.于紫外线荧光分析灯下检查荧光斑点.(19)醋酸镁: 检查蒽醌甙,甙元及黄酮体喷洒剂: 0.5%醋酸镁甲醇溶液方法: 90℃加热5分钟,呈红色至紫色斑点.(20)氢氧化钾: 检查香豆素,蒽醌甙及甙元喷洒剂: 5~10%氢氧化钾的甲醇溶液.于日光及紫外线荧光分析灯下检示斑点.萜类,甾体(21) 三氯化锑(Carr-Price试剂): 检查甾体,萜类,皂类.喷洒剂: 25克三氯化锑溶于75克氯仿中(亦可以用氯仿或四氯化碳的饱和溶液).喷洒后处理: 100℃加热5分钟,于紫外线荧光分析灯下检示荧光.(22) 五氯化锑: 检查甾体,萜类,皂甙.喷洒剂: 五氯化锑-氯仿或四氯化碳(1:4),用前新鲜配制.喷洒后处理: 120℃加热至斑点出现,并于紫外线荧光分析灯下检示.(23)香兰醛-硫酸: 检查高级醇类,酚类,甾体,萜类,芳香油.喷洒剂: 1克香兰素溶于100毫升浓硫酸,或0.5克香兰醛溶于100毫升硫酸-乙醇(4:1)中.喷洒后处理: 室温或120℃加热观察显色斑点.(24) 4-二甲氨基苯甲醛,醋酸,磷酸(E.P.试剂): 检查? Azulene 及?前体Proazulene.喷洒剂: 0.25克4-二甲氨基苯甲醛,溶于50毫升醋酸5克85%磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存数月)?:烃室温即成蓝紫色斑点,>前体于80℃加热10分钟出现蓝紫色斑点.(25) 氯胺T-三氯醋酸: 检查强心甙.喷洒剂: I. 3%氯仿T水溶液新鲜制备.II. 25%三氯醋酸乙醇溶液(能保存数天).10毫升I加40毫升II,用前混合.喷洒后处理: 110℃加热7分钟,紫外线荧光分析灯下检示呈蓝色或黄色荧光.(26) 亚硝酸基铁氰化钠-氢氧化钠(Legal试剂): 检查不饱和内酯;甲基酮或活性次甲基,常用于强心甙喷洒剂: 1克亚硝基铁氰化钠溶于100毫升2N氢氧化钠-乙醇(1:1)的水溶液.显红色或紫色斑点.(27) 3,5-二硝基苯甲酸(Legal试剂): 检查强心甙,α,β-不饱和内酯.喷洒剂: 1克3,5-二硝基苯甲酸溶于50毫升甲醇,加入1N氢氧化钾50毫升.强心甙呈紫红色斑点.糖类(28) 邻苯二甲基苯胺: 检查还原糖.喷洒剂: 0.93克苯氨,1.66克邻苯二甲酸溶于100毫升水饱和的正丁醇中.喷洒后处理: 105℃加热10分钟.(29) 2,3,5-Triphenyl-tetrazolium chloride (T.T.C.):检查还原糖及其他还原物质。
各种显色剂及配制方法和显色原理

各种显色剂及配制方法1、碘:广谱显色剂:不饱和或者芳香族化合物配制方法 :在 100ml 广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加 入 10g 碘粒, 30g 硅胶 例如反应:2、紫外灯:含共厄基团的化合物,芳香化合物3. 稀硫酸 糖类4、氯化铁: 苯酚类化合物 配制方法 :1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液 .苯酚会和氯化铁发生显色反应,原理如下用 Ar-OH 表示苯酚 ,反应如下 : 6Ar- OH + FeCl3 → [Fe(OAr)6]3 - + 6H+ + 3Cl- 其中,[Fe(OAr)6]3- 为紫色 .5、桑色素 ( 羟基黄酮 ) : 广谱 , 有荧光活性 配制方法 :0.1% 桑色素 +甲醇6、茚三酮 :一般显蓝色或紫色 ( 脯氨酸、 羟基 脯氨酸生成黄色) 与半胱氨酸 紫红色然 后无色。
氨基酸配制方法 :1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸OCHOBu+CCl 3COClH 2SO 4OOH OHBrOBr8、香草醛 ( 香兰素 ): 广谱( 甾体类)7、二硝基苯肼 (DNP ) : 醛和酮 配制方法: 12g 二硝基苯肼 + 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇Q :如何判断化合物 B 的NH 2 A NHBoc BNO 2R 1NHNR 2配制方法:15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸9、高锰酸钾:含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法:1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL水. 使用期3个月10、溴甲酚绿:羧酸,pKa<=5.0配制方法:在100ml乙醇中,加入0.04g 溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
溴甲酚绿是非水滴定中常用的酸碱指示剂(溶于无水乙醇中配制),在 pH=3.8 时呈黄色, pH=5.4 时呈蓝绿色, pH=4.5 时开始有颜色的明显变化11、钼酸铈:广谱配制方法:235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸12、茴香醛( 对甲氧基苯甲醛)1 :广谱配制方法:135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.13、茴香醛( 对甲氧基苯甲醛)2 :萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)14、磷钼酸(PMA):广谱配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇。
显色剂及配制

0.1%桑色素+甲醇
茚三酮
氨基酸
1.5g茚三酮+ 100mL正丁醇+ 3.0mL醋酸
二硝基苯肼(DNP)
醛和酮
12g二硝基苯肼+ 60mL浓硫酸+ 80mL水+ 200mL乙醇
香草醛(香兰素)
广谱ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
15g香草醛+ 250mL乙醇+2.5mL浓硫酸
高锰酸钾
含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛
1.5g KMnO4+ 10g K2CO3+ 1.25mL 10% NaOH + 200mL水.使用期3个月
溴甲酚绿
羧酸,pKa<=5.0
在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈
广谱
235 mL水+ 12 g钼酸氨+ 0.5 g钼酸铈氨+ 15 mL浓硫酸
各种显色剂及其配制方法
显色剂
检测物质
配制方法
碘
不饱和或者芳香族化合物
在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶
紫外灯
含共轭基团的化合物,芳香化合物
硫酸铈
生物碱
10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化铁
苯酚类化合物
1% FeCl3+ 50%乙醇水溶液
桑色素(羟基黄酮)
茴香醛
(对甲氧基苯甲醛)
广谱
135乙醇+ 5 mL浓硫酸+ 1.5 mL冰醋酸+ 3.7 mL茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀
茴香醛
各种显色剂及其配制方法

显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。
l.通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110oC烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
②0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷 1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC加热15~20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。
⑦5%磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1) 烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银0.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇l00ml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
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常用显色剂配制方法
YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
碘:
不饱和或者芳香族化合物
配制方法
在100ml广口瓶中,放入张滤纸,少许碘粒
或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶
紫外灯
含共轭基团的化合物,芳香化合物
硫酸铈:
生物碱
配制方法
10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化铁
苯酚类化合物
配制方法
1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羟基黄酮)
广谱, 有荧光活性
配制方法
% 桑色素+甲醇
茚三酮
氨基酸
配制方法
茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
醛和酮
配制方法
12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇
香草醛(香兰素)
广谱
配制方法
15g 香草醛 + 250mL 乙醇 + 浓硫酸
高锰酸钾
含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛
配制方法
KMnO4 + 10g K2CO3 + 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3月
溴甲酚绿
羧酸,pKa<=
配制方法
在100ml乙醇中,加入溴甲酚绿,缓慢滴加的NaOH水溶液,刚好出现蓝色
即至。
钼酸铈
广谱
配制方法
235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1
广谱
配制方法
135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + mL of 冰醋酸 + mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合
均匀.
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2
萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)
配制方法
茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)
磷钼酸(PMA)
广谱
配制方法
10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇
常用显色剂配制
一、通用显色剂
1.碘,检查一般有机物。碘蒸气对很多化合物显黄棕色。
在一个密闭的玻璃缸内予先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和,将薄层或
纸层放入缸内数分钟即可显色。有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿
度,可以提高显色的灵敏度。
2.硫酸:通用。
浓硫酸:水(1:10),或10%硫酸的乙醇溶液。
3.四唑兰试剂:还原性物质在室温或微加热时显紫色。
溶液I:%四唑兰甲醇溶液
溶液II:6N氢氧化钠溶液
临用前溶液I和溶液II等量混合。
4.铁氰化钾—三氯化铁试剂:还原性物质显蓝色,再喷2N盐酸溶液,则蓝
色更深。
二、生物碱显色剂
1.改良碘化铋钾试剂:生物碱和某些含氮化合物显橙红色。
取克碘化铋钾,冰醋酸10毫升,加水60毫升。
2.碘—碘化钾试剂:生物碱显棕褐色。
碘1克和碘化钾10克溶于50毫升水中,加热,加冰乙醇2毫升,用水黧到
100毫升。
3.硅钨酸试剂(沉淀试剂)
5克硅钨酸溶于100毫升水中,加盐酸至PH2左右。
4.苦味酸试剂(沉淀试剂)
1克苦味酸溶于100毫升水中。
5.鞣质试剂(沉淀试剂)
1克鞣酸加乙醇1毫升溶解后,再加水至10毫升。
6.王水 浓盐酸:硝酸(1:3)
三、甙类显色剂
1.糖的检出试剂
(1)苯胺—邻苯二甲酸试剂:喷后105~110℃烤10分钟,糖显红棕色
(检测还原糖)
[注]苯胺—邻苯二甲酸试剂的制备:苯胺克,邻苯二甲酸克,溶于水饱和正
丁醇100ml中。
(2)α—萘酚—硫酸试剂:喷后100℃烤3—6分钟,多数糖呈蓝色,鼠李
糖呈橙色。
[注]试剂制备:15%α—萘酚乙醇溶液21ml,浓硫酸13ml,乙醇87ml及
水8ml混合后使用。
(3)Fehing试剂:本品分甲液与乙液,应用时取等量混合,检查还原糖。
甲液:结晶硫酸铜克,加水至100毫升。
乙液:酒石酸钾钠克及氢氧化钠10克,加水至100毫升。
(4)百里酚硫酚剂:喷后120℃烤15—20分钟,多数糖在灰白色背景上显
暗红色,继续加热则变成浅紫色。
百里酚克及浓硫酸与毫升溶于乙醇95毫升。
2.酚类
(1)三氯化铁试剂:喷后呈溶绿色或棕红色。
5%三氯化铁水溶液或乙醇溶液。
(2)三氯化铁—铁氰化钾试剂:酚性物质呈黄色斑点。
溶液I:2%三氯化铁水溶液。
溶液II:1%铁氰化钾水溶液。
应用时溶液I和溶液II等体积混合。
(3)4—氨基安比林—铁氰化钾试剂
溶液I:2%氨基安替比林乙醇溶液
溶液II:8%铁氰化钾水溶液
使用时先喷溶液I,再喷溶液II即呈色,或再放入装有25%氢氧化铵的密闭
缸中,即产生橙红—深红色。
3.蒽醌类
蒽醌及其甙本身在日光下显黄色,在紫外下则显黄红、橙色荧光,在薄层上
用氨薰或喷氢氧化钾等碱溶液,则颜色变深或变色。
(1)氨气:薰后颜色加强。
(2)10%氢氧化钾甲醇溶液。
(3)3%氢氧化钠溶液或面料酸钠溶液。
(4)1%硼酸水溶液。
(5)%乙酸镁甲醇溶液:喷后90℃烤5分钟呈橙红色到紫蓝色。
4.内酯、香豆素类
(1)%碘—碘化钾溶液:香豆素显各种颜色,很多其他类型化合物也显色。
(2)稀氢氧化钠溶液:喷前喷后在短波长的紫光下观察荧光。
5.黄酮类
黄酮类成分在紫外光下大多数显不同颜色,用氨熏,喷三氯化铝溶液或喷氢
氧人钠等碱性溶液,则颜色变深或变色。
(1)氨气
(2)10%氢氧化钠(钾)溶液
(3)1%或3%三氯化铝溶液
(4)2%乙酸镁甲醇溶液
(5)饱和的三氯化锑的氯仿溶液:100℃烤5分钟
(6)锆—构橼酸试剂
溶液I:2%氧氯化锆甲醇溶液
溶液II:2%铁氰化钾溶液
(8)罗丹明—氨试剂
溶液I:%罗丹明B的4%盐酸溶液
溶液II:浓氨溶液
(9)对氨基苯碘盐溶液
溶液I:%对氨基苯磺酸溶液
溶液II:5%亚硝酸钠溶液
(10)硼酸—柠檬酸试剂
溶液I:饱和硼酸的丙酮溶液
溶液II:柠檬酸丙酮溶液
先喷溶液I,再喷溶液II。
6.强心甙类
(1)碱性苦味酸试剂:显橙色或橙红色
1%苦味酸乙醇溶液与5%氢氧化钠水溶液用等量混合
(2)乙酐浓硫酸反应
乙酐:浓硫酸(2:3)加入几滴,反应液显黄→红→蓝→紫→绿反反应。
(3)三氯乙酸—氯胺T试剂
溶液I:25%三氯乙酸乙醇溶液
溶液II:3%氯胺T溶液
临用前取溶液I与溶液II按1:4混合,喷后110℃烤10分钟,紫外灯下观
察荧光。
(4)20%三氯化锑试剂:喷后100℃烤5分钟,日光及紫外光下观察。
7.皂甙类
(1)溶血试验:2%红血球生理盐水混悬液
(2)三氯化锑氯仿溶液:喷后90℃烤15分钟,显不同颜色。
(3)三氯乙酸—乙酸(1:2)溶液:喷后100℃烤20分钟,皆显黄色。
四、萜类、甾体类显色剂
1.香草醛—浓硫酸试剂:5%香草醛浓硫酸溶液。
2.三氯化锑试剂:克三氯化锑溶于15克氯仿中。
五、挥发油显色剂
1.4—氨基安替比林—铁氰化钾试剂:酚性物质显橙红至深红色。
溶液I:2% 4—氨基安替比林乙醇溶液
溶液II:8%铁氰化钾溶液
2.碘化钾—冰乙酸—淀粉试剂:斑点显蓝色则为过氧化物。
溶液I:4%碘化钾溶液10毫升与冰乙酸40毫升混合,再加锌粉一小匙过
滤。
溶液II:新鲜配制后1%淀粉溶液。
先喷溶液I,5分钟后大量喷溶液II,直喷到薄层透明为止。
六、有机酸显色剂
1.溴酚蓝指示剂:显黄色
%溴酚兰乙醇溶液,用氢氧化钠溶液调至微碱性
2.溴甲酚紫—柠檬酸试剂
溴甲酚紫25毫克及柠檬酸100毫克溶于丙酮:水(9:1)混合液100毫
升。
七、氨基酸、多肽、蛋白质显色剂
1.茚三酮试剂:用于氨基酸、氨及氨基糖喷后110℃加热至显出颜色。
试剂I:茚三酮克溶于正丁醇100毫升中,加冰乙酸3毫升。
试剂II:茚三酮克溶于乙醇100毫升中。
2.双缩脲试剂:
溶液I:1%硫酸铜溶液。
溶液II:40%氢氧化钠溶液
应用前溶液I与溶液II等量混合。