双歧杆菌与乳酸菌筛选培养基

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通用医学检验科模拟题2021年(101)_真题-无答案

通用医学检验科模拟题2021年(101)(总分98.XX02,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 从混有杂菌的标本中分离葡萄球菌的首选培养基是A. 巧克力琼脂培养基B. EMB培养基C. 卵黄双抗培养基D. 高盐甘露醇培养基E. 卵黄甘露醇培养基2. 肺炎链球菌的主要致病因素是A. 鞭毛B. 菌毛C. 荚膜D. 外毒素E. 内毒素3. 与鉴别脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有关的试验是A. 葡萄糖发酵B. 乳糖发酵C. 果糖发酵D. 麦芽糖发酵E. 蔗糖发酵4. 正常人体内及体表多处有葡萄球菌存在而不引起人的疾病，其中最主要的带菌部位是A. 咽喉B. 皮肤C. 鼻腔D. 肠道E. 泌尿道5. 乙型溶血性链球菌的致病物质不包括A. 溶血素OB. 肠毒素C. 致热外毒素D. 溶血素SE. M蛋白6. 大叶性肺炎时痰液的性状多为A. 铁锈色B. 红色C. 烂桃样D. 棕褐色E. 黄色7. 人体患伤寒后的血清抗体变化，叙述不正确的是A. O与H抗体在体内的消长情况不同B. IgM类O抗体出现较早，持续约半年C. IgM类O抗体消失后不易受伤寒等病原菌的非特异抗原刺激而重新出现D. IgG类H抗体出现较早，持续约半年E. IgG类H抗体消失后易受非特异抗原刺激而重新出现8. 肥达氏反应，有诊断价值的结果是A. O凝集价≥1：80，H凝集价≥1：80B. O凝集价≥1：80，H凝集价≥1：160C. O凝集价≥1：160，H凝集价≥1：80D. O凝集价≥1：160，H凝集价≥1：160E. O凝集价≥1：160，H凝集价≥1：3209. DNA酶阳性的细菌是A. 黏质沙雷菌B. 肺炎克雷伯菌C. 产气肠杆菌D. 阴沟肠杆菌E. 大肠埃希菌10. 迁徒扩散生长的细菌可能是A. 普通变形杆菌B. 肺炎克雷伯菌C. 黏质沙雷菌D. 大肠埃希菌E. 伤寒沙门菌11. 细菌菌体抗原的特异性在于A. 脂类AB. 外侧多糖链C. 核心多糖链D. 内毒素E. 外毒素12. 肺炎患者痰标本为砖红色胶胨样，可能感染的细菌是A. 肺炎链球菌B. 葡萄球菌C. 肺炎克雷伯菌D. 铜绿假单胞菌E. 链球菌13. 耐热肠毒素的检测方法是A. 兔肠段结扎法B. 皮肤毛细血管通透性试验C. Elek法D. 乳鼠灌胃法E. 豚鼠眼结膜法14. 双歧杆菌、乳酸菌需要哪种培养A. 一般培养法B. 二氧化碳培养法C. 厌氧培养法D. 微氧培养法E. 专性需氧培养15. 我国院内感染最常见的菌属是A. 克雷伯菌属B. 肠杆菌属C. 哈夫尼亚菌属D. 沙雷菌属E. 枸橼酸菌属16. 沙门菌的H抗原是指A. 鞭毛B. 脂多糖C. 外膜蛋白D. 菌毛主要亚单位E. 荚膜多糖17. 所致的疾病似痢疾，腹泻呈脓血便，里急后重，称为志贺样大肠埃希菌的是A. 肠产毒型大肠埃希菌B. 肠侵袭型大肠埃希菌C. 肠致病型大肠埃希菌D. 肠出血型大肠埃希菌E. 肠聚集型大肠埃希菌18. 葡萄球菌感染可引起烫伤样皮肤综合征的是A. 溶血素B. 杀白细胞素C. 肠毒素D. 表皮剥脱毒素E. 毒素休克综合征毒素19. 判定致病性葡萄球菌的主要试验是A. 甘露醇发酵B. 耐热DNA酶测定C. 明胶液化D. 触酶试验E. 蔗糖发酵试验20. 金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌共有的特点是A. 产生金黄色色素B. 有核糖核酸酶C. 甘露醇发酵D. 血浆凝固酶E. SPA21. 分离脑膜炎奈瑟菌的最佳培养基是A. 血平板B. EMB培养基C. 巧克力培养基D. 卵黄平板E. 麦康凯平板22. 关于脑膜炎奈瑟菌，叙述不正确的是A. 镜下呈肾形或豆形成双排列、坦面相对的革兰阴性球菌，具有荚膜B. 本菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌C. 本菌经空气传播，定植于人的脑皮质部位D. 人类是脑膜炎奈瑟菌的惟一宿主E. 本菌对外界环境的抵抗力弱，易自溶23. 肺炎患者痰标本为黄色脓痰、黏厚，可能感染了A. 肺炎链球菌B. 葡萄球菌C. 肺炎克雷伯菌D. 铜绿假单胞菌E. 链球菌24. 某医院新生儿病房发生剥脱性皮炎流行，为追踪引起剥脱性皮炎的金黄色葡萄球菌带菌者，应对医务人员及患儿做A. 细菌学涂片染色镜检B. 细菌分离培养和鉴定C. 血清中葡萄球菌抗体效价滴定D. 金黄色葡萄球菌噬菌体分型E. 血浆凝固酶试验25. 下列可用作B群链球菌鉴定的试验是A. 杆菌肽敏感试验B. 肝汁七叶苷水解试验C. cAMP试验D. 山梨醇发酵试验E. 6．5％NaCl生长试验26. 埃希菌属是A. 革兰阴性短杆菌，散布排列，大多有周鞭毛B. 革兰阳性，菌体染色不均匀，菌体一端或两端膨大C. 革兰阴性较粗大的杆菌，有明显的荚膜，无鞭毛D. 革兰阴性，弧形或逗点状，细菌一端有单鞭毛E. 革兰阴性双球菌，无鞭毛27. 能在SS琼脂上生长的大肠埃希菌菌落的颜色是A. 浅红B. 深红C. 黄D. 无E. 深灰28. 关于志贺菌A群Ⅰ型产生的志贺毒素的特性，叙述不正确的是A. 具有神经毒性B. 具有细胞毒性C. 具有肠毒性D. 由A和B亚单位组成E. 亚单位是毒素的活性部位，能抑制蛋白合成29. 对鉴别痢疾志贺菌与其他志贺菌最有价值的试验是A. 甘露醇利用试验B. 乳糖发酵试验C. 蔗糖利用试验D. 木糖利用试验E. β－半乳糖苷酶试验30. 在肠杆菌科的细菌鉴定中，如何选用选择性培养基主要取决于A. 标本类型B. 取材的时间C. 标本量的多少D. 临床要求E. 细菌的种类31. 关于痢疾志贺菌，叙述错误的是A. 在中国蓝培养基上形成红色小菌落B. 无鞭毛C. 可产生对Vero细胞有毒性作用的Vero毒素D. 可引起败血症E. 其胞质中存在与其侵袭性和耐药性有关的质粒32. 下列哪一项不是肠产毒型大肠埃希菌的特性A. 常见于婴幼儿和旅游者腹泻B. 致病物质包括不耐热肠毒素C. 致病物质包括耐热肠毒素D. 可以是轻度腹泻，也可呈严重的霍乱样症状E. 血性结肠炎33. 大肠埃希菌H抗原是A. 耐热蛋白质B. 不耐热蛋白质C. 多糖磷脂D. B+CE. A+B34. DNA酶阳性的菌属是A. 克雷伯菌属B. 肠杆菌属C. 哈夫尼亚菌属D. 沙雷菌属E. 大肠埃希菌35. 大多数肠道杆菌是肠道的A. 强致病菌B. 正常菌群C. 弱致病菌D. A+BE. B+C36. 关于感染伤寒沙门菌后人体免疫情况的描述错误的是A. 病愈后，有牢固的免疫力B. 主要是细胞免疫C. 血液中特异性抗体对胞内菌作用很大D. 胃肠炎的恢复与局部生成的分泌型IgA有关E. 可形成健康携带者37. 葡萄球菌A蛋白是一种细菌表面蛋白，其英文简称是A. HRPB. SPAC. SAPD. SSPE. ASP38. 我国流行的脑膜炎奈瑟菌菌株主要是A. Y群B. W-135群C. C群D. B群E. A群39. 可用荚膜肿胀试验分型的细菌是A. 肺炎链球菌B. 金黄色葡萄球菌C. 甲型溶血性链球菌D. 乙型溶血性链球菌E. 丙型溶血性链球菌40. 关于耐甲氧西林葡萄球菌，叙述不正确的是A. 已成为目前葡萄球菌医院感染的主要问题B. 耐药菌携带的耐药基因是mecAC. 在琼脂筛选试验中只要有1个菌落生长，就判为耐药D. 体外药敏试验表现为敏感的药物，临床疗效也一定好E. 在药敏培养基中加入2％～4％氯化钠可提高耐药菌的检出率41. 链球菌分类的根据是A. 在血液琼脂培养基中溶血的情况B. 产生色素的颜色C. 细菌的致病作用D. 鞭毛抗原的特异性E. 对营养的要求42. 下列关于金黄色葡萄球菌的描述正确的是A. 革兰染色阴性B. 能产生凝固酶C. 不发酵甘露醇D. 培养需要特殊培养基E. 血液为主要带菌部位43. 一位中年男性自述排尿困难、尿急、尿痛、尿频，有婚外性行为。

【课件】乳酸菌的筛选及应用PPT

2、筛选过程
样品预处理→梯度稀释至10-6→选择合适的稀释度涂布→37℃培养48h→挑选产生溶钙圈的菌落反复在MRS培养基上划线→挑起单菌落染色，经镜检确认为纯种→挑选革兰氏阳性单菌落→试管穿刺4℃冰箱保存。
（二）溴甲酚绿指示剂法
1、培养基：MRS培养基（含溴甲酚绿酒精溶液） 2、筛选过程：同上，不同之处是稀释涂布后长
3、双歧杆菌
样品来源：婴儿新鲜粪便培养基：MRS培养基、NPNL培养基、TYP培养基、
PTYG培养基
培养温度：37℃ 需氧情况：严格厌氧筛选方法：常规的稀释涂布和划线分离法
第三部分、乳酸菌的应用
一、乳酸菌的生理功能
①维持肠道菌群的微生态平衡； ②增强机体免疫功能； ③预防和抑制肿瘤发生； ④提高营养利用率、促进营养吸收； ⑤控制内毒素、降低胆固醇； ⑥ 延缓机体衰老。
聚乳酸是以微生物发酵产物乳酸为单体用化学合成方法聚合而成的一种高分子材料，它无毒、无刺激性。
聚乳酸制品废弃后在土壤或水中，30天内会在微生物、水、酸和碱的作用下彻底分解成CO2和H2O，不会对环境产生污染，因而是一种完全可生物降解的材料。
（2）聚乳酸的生产过程
目前聚乳酸的生产和制备主要有：
（4）前景
PLA作为一个新型的医用、生物可降解塑料在我国有广阔的市场发展前景。生物降解塑料大多数是天然高分子与常用塑料复合体系，或基于天然高分子(主要是淀粉、纤维素)的改性。
PLA合成直链脂肪族聚酯，在医用领域是最重要的可降解高分子材料，已越来越受到重视。PLA 树脂替代现有降解材料已成为市场发展的必然趋势，并具有与烯烃类聚合物竞争的能力，“绿色生态塑料”的市场前景将十分看好!
3、明串珠菌属（Leuconostoc）

产细菌素双歧杆菌的筛选及其分泌条件研究_尚楠

产细菌素双歧杆菌的筛选及其分泌条件研究尚楠，王洋，任发政，李平兰*(中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京100083)摘要：以32株我国广西巴马长寿老人源双歧杆菌为材料，以植物乳杆菌PL-2为指示菌，经筛选获得1株具有明显抗菌效果的双歧杆菌L-SN 。

排除有机酸、H 2O 2等干扰因素，经硫酸铵沉淀粗提，蛋白酶敏感性实验后确定其产生的抗菌物质为细菌素。

通过形态学、生理生化以及16S rRNA 序列分析鉴定菌株L-SN 为动物双歧杆菌乳亚种(Bi ﬁ dobacterium animalis subsp . lactis L-SN)。

进一步研究菌株L-SN 产细菌素的生物学特性，确定其最佳分泌细菌素条件为起始pH6.5、培养温度30℃、培养时间28h 。

在此基础上，考察菌株L-SN 所产细菌素的抗菌谱，发现其具有广谱的抗菌效果，尤其对金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌等致病菌有显著的作用，显示出该双歧杆菌的潜在开发应用前景。

关键词：双歧杆菌；筛选；细菌素；分泌特性Screening of Bacteriocin-producing Bi ﬁdobacterium Strain and Culture Coditions for Bacteriocin Secretion SHANG Nan，WANG Yang，REN Fa-zheng，LI Ping-lan *(College of Food Science and Nutritional Engineering, China Agricultural University, Beijing100083, China)Abstract ：Bi ﬁ dobacterium L-SN capable of producing an antimicrobial substance that was effective against Lactobacillus plantarum PL-2 was screened from 32 strains of Bi ﬁ dobacterium isolated from the feces of centenarians in Bama county of Guangxi region. By eliminating the effects of organic acid and H 2O 2, we con ﬁ rmed the antimicrobial role because of bacteriocin. Based on morphological, physiological and biochemical characteristics and 16S rRNA sequence analysis, the strain L-SN was identi ﬁ ed as Bi ﬁ dobacterium animalis subsp. lactis . We investigated the secretion characteristics of Bi ﬁ dobacterium animalis L-SN and established the optimum incubation conditions for producing bacteriocin: 28 h of culture at 30 ℃ and initial medium pH 6.5. The bacteriocin had a wide spectrum of antibacterial activities against Gram-positive and Gram-negative bacteria, especially against Staphylococcus aureus , Escherichia coli and Listeria monocytogenes showing a potential application prospect.Key words ：Bi ﬁ dobacterium ；screening ；bacteriocin ；secretion characteristics 中图分类号：Q 936 文献标志码：A 文章编号：1002-6630(2013)23-0170-06doi:10.7506/spkx1002-6630-201323036收稿日期：2013-09-21基金项目：国家自然科学基金项目(31071591)作者简介：尚楠(1990—)，女，硕士研究生，主要从事益生菌的研究。

婴儿双歧杆菌BI-G201的分离与鉴定

婴儿双歧杆菌BI-G201的分离与鉴定冯仕云;龚萍;蒋德意;韩迪【摘要】从由健康母乳喂养的婴儿肠道内容物中取得的5份样品中,利用选择性培养基和需氧条件分离筛选得到6株双歧杆菌。

经菌落形态特征、生理生化特性及糖发酵试验,6株乳酸菌的鉴定结果为:2株长双歧杆菌(Bifidobacterium longum),2株乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis),2株婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)。

再经过16S r RNA基因序列测序分析对比,确认分别为长双歧杆菌、乳双歧杆菌和婴儿双歧杆菌BI-G201。

【期刊名称】《生物化工》【年(卷),期】2016(000)006【总页数】4页(P41-43,46)【关键词】婴儿肠道;双歧杆菌;分离;鉴定;16S rRNA基因序列测序【作者】冯仕云;龚萍;蒋德意;韩迪【作者单位】润盈生物工程(上海)有限公司【正文语种】中文【中图分类】R371899年，法国巴黎儿童医院的蒂赛（Henry Tissier），从婴儿粪便中分离了第1株双歧杆菌（当时称为分叉杆菌）[1]，并且他发现双岐杆菌与婴儿患腹泻的频率及营养都有关系。

双歧杆菌是人体肠道菌群中的重要成员，有着至关重要的作用，维持着肠道菌群的微生态平衡，有调节肠胃、增强免疫力、抗菌、防肿瘤甚至影响人体认知等多种重要的生理功能[2-6]。

在人体肠道中，随着年龄的增长，有益菌的种类与数量明显有所下降。

所以，在母乳喂养的婴儿体内是最多的，尤其双歧杆菌在母乳喂养儿肠道内大量存在，对婴幼儿有许多生理功能方面的好处，其中婴儿双歧杆菌就是其中一种菌种。

近年来，随着人们对健康意识的逐渐提升，双歧杆菌也被广泛地应用于医药、保健品或食品中[7]。

该文从婴儿肠道内容物中分离出婴儿双歧杆菌，对其进行生化研究及鉴定，从而为以后长期的研究和应用打下良好的种质资源基础。

1.1 样品来源采集由健康母乳喂养的婴儿的肠道内容物样品5份。

婴儿粪便中益生菌的分离筛选及培养

婴儿粪便中益生菌的分离筛选及培养作者：郑丽君吴秀英李洪亮来源：《农产品加工·上》2019年第04期摘要：采用从婴儿粪便中提取具有益生作用的菌种，为下一步的研究开发做乳酸菌种库做积累。

选取河南省洛阳市 5位志愿者进行样品采集，得到5份完全由母乳喂养的婴儿（2月龄）自然排出的粪便样，并分离纯化出5株乳酸菌（RS1， RS2，RS3，RS4，RS5）和5株双歧杆菌（SQ1，SQ2，SQ3，SQ4，SQ5），经鉴定，确定RS3和SQ1具有益生作用的。

结果表明，此2株菌具有较好的耐酸性、胆盐耐受力，对温度敏感，对模拟胃液和肠液具有较强的耐受力，且对大肠杆菌、沙门氏菌具有95%以上的抑菌率，可作为优良的益生菌候选菌种。

关键词：婴儿粪便；乳酸菌；双歧杆菌；分离鉴定中图分类号：S852.6 文献标志码：A doi：10.16693/ki.1671-9646（X）.2019.04.003Isolation and Cultivation of Probiotics from Infant FaecesZHENG Lijun，WU Xiuying，LI Hongliang，SUN Tao（Inner Mongolia Mengniu Dairy Industay（Group）Co.，Ltd，Huhot，Inner Mongolia 011517，China）Abstract：Along with increased recognition of the probiotics， however， the basic mechanism of probiotics hasn't been completely unified up to now，which needs further research and analysis. The purpose of this study was to isolate probiotic strains from the feces of infants，and to lay the foundation for constructing the library of probiotics next step. Five natural excrement samples were collected from full breastfeeding babies（2 months）of Luoyang He'nan，five Lactic acid bacteria （RS1，RS2，RS3，RS4，RS5）and five Bifidobacterium（SQ1，SQ2，SQ3，SQ4，SQ5）were isolated after purification. Furthermore，two strains（RS3，SQ1）were characterized to have probiotic function. The results showed that these two strains were well resistant to acid and bile condition，sensitive to temperature，and highly tolerant to simulated gastric and intestinal fluid. In addition，up to 95% E. Coli and Salmonella were inhibited by these two strains. Based on their phenotypic characteristics，（RS3）and（SQ1）can be excellent candidates of probiotics library.Key words：baby faeces；Lactobacillus；Bifidobacterium，；isolation and identification0 引言益生菌是一類可以对宿主细胞起到有益作用的活性微生物，定植在人体肠道和生殖系统中[1]，分为乳酸菌类、双歧杆菌类、革兰氏阳性双歧杆菌。

双歧杆菌微胶囊化及其应用研究

双歧杆菌微胶囊化及其应用研究双歧杆菌微胶囊化及其应用研究引言双歧杆菌是一种益生菌，常被用于维护肠道健康。

然而，双歧杆菌的存活率受限于酸性环境和胃液对其的破坏。

为了提高双歧杆菌的生存率并扩大其应用范围，学者们开始研究将双歧杆菌微胶囊化的方法。

本文将系统地探讨双歧杆菌微胶囊化及其应用的研究进展。

双歧杆菌微胶囊化的方法1. 壳聚糖微胶囊化壳聚糖作为一种生物可降解材料，被广泛应用于微胶囊化工艺中。

研究者通过静电喷雾、包埋法等方法将双歧杆菌包裹在壳聚糖微胶囊中，形成一层保护层，保护菌株不受外界环境的侵害。

2. 乳酸菌培养基微胶囊化将双歧杆菌培养在含有乳酸菌培养基的纳米胶囊中，通过微生物发酵作用，让双歧杆菌自行形成微胶囊。

这种方法能够提高双歧杆菌的存活率，并保证微胶囊内营养物质的供应。

3. 多糖复合微胶囊研究人员还尝试使用多糖材料制备微胶囊，以提高双歧杆菌的存活率和释放效果。

多糖材料能够提供良好的保护层，保持微胶囊的结构稳定性，并在合适的条件下释放双歧杆菌。

双歧杆菌微胶囊化的应用1. 食品工业双歧杆菌微胶囊可以应用于酸性食品中，如酸奶、发酵饮料等，提供更好的益生菌供给。

微胶囊化处理可以保护双歧杆菌不受环境的影响，并延长其在食品中的存活时间。

2. 药品开发双歧杆菌微胶囊化可以改善其在药物中的应用效果。

通过微胶囊化，双歧杆菌可以更好地存活于酸性胃液中，提高生物利用度。

另外，微胶囊化还可以降低药物剂量，减少副作用。

3. 动物饲料添加剂双歧杆菌微胶囊添加到动物饲料中，可以提高动物的消化吸收效果，增强免疫力。

同时，微胶囊化也可以减少营养物质的流失，提供更加可靠的营养支持。

结论双歧杆菌微胶囊化是一种提高双歧杆菌存活率和应用效果的有效手段。

壳聚糖微胶囊化、乳酸菌培养基微胶囊化、多糖复合微胶囊是常见的微胶囊化方法。

双歧杆菌微胶囊化的应用领域涉及食品工业、药品开发以及动物饲料添加剂等多个领域。

未来的研究应重点关注微胶囊化技术的改进及其在更多领域中的应用综上所述，多糖材料制备的微胶囊可以有效提高双歧杆菌的存活率和释放效果。

母乳婴儿源益生菌筛选鉴定及其潜在益生特性研究

母乳婴儿源益生菌筛选鉴定及其潜在益生特性研究母乳婴儿源益生菌筛选鉴定及其潜在益生特性研究引言母乳是新生儿最理想的营养来源，不仅含有丰富的营养物质，而且富含益生菌，对婴儿的免疫系统和肠道健康具有重要作用。

近年来，关于母乳中益生菌的研究逐渐得到关注，本文将对母乳中的益生菌进行筛选鉴定并探讨其潜在的益生特性。

一、母乳中益生菌的筛选鉴定方法1. 分离和培养：从新鲜的母乳样品中分离出益生菌，并在适宜的培养基上进行培养。

常用的培养基有MRS培养基、LBS培养基等。

2. 形态学鉴定：通过观察益生菌形态特征，如菌落形态、菌体形态等，进行初步鉴定。

3. 生理学鉴定：通过对益生菌生理特性的研究，如产酸、产气、耐酸碱等，进一步鉴定益生菌的种属。

4. 分子生物学鉴定：利用PCR技术对益生菌的16S rDNA进行扩增和测序，通过比对NCBI数据库中的序列，鉴定母乳中益生菌的亲缘关系。

二、母乳中益生菌的分类和特征1. 乳酸菌：包括双歧杆菌、乳酸杆菌、轮状乳杆菌等。

乳酸菌具有产酸、抗菌、调节肠道菌群等功能。

2. 双歧杆菌：是最常见的母乳中益生菌之一，具有调节免疫功能、促进钙吸收等作用。

3. 双叉杆菌：主要存在于母乳中，能够抑制致病菌的生长，增强免疫系统的功能。

4. 嗜酸乳杆菌：具有抑制肠道致病菌生长的作用，有助于维持肠道菌群的平衡。

三、母乳中益生菌的潜在益生特性1. 免疫调节：母乳中的益生菌能够通过调节免疫细胞的功能，增强婴儿的免疫系统。

研究发现，摄入乳酸菌可以增加婴儿体内免疫球蛋白的水平，提高抗体的产生能力。

2. 肠道健康：益生菌可以调节肠道的菌群结构，增加有益菌的数量，抑制有害菌的繁殖。

同时，益生菌产生的乳酸和短链脂肪酸有助于维持肠道的酸碱平衡，促进肠道的健康。

3. 营养吸收：益生菌可以分解食物中难以消化的纤维素，产生有益的代谢产物，提高营养物质的吸收率。

研究表明，双歧杆菌能够促进钙、铁等矿物质的吸收。

4. 抗菌作用：益生菌能够产生抑菌物质，抑制病原菌的繁殖。

乳酸菌和双歧杆菌制剂对小鼠肠道菌群失调模型的调节作用

第１３卷
第１６期
２０１３年６月
科
学
技
术
与
工
程
Ｖｏ１．１３Ｎｏ．１６Ｊｕｎ．２０１３
１６７１ —１８１５（２０１３）１６－４４９７ — ０４
ＳｃｉｅｎｃｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
于选择肠球菌；乳酸杆菌选择培养基（ＭＲＳ）用于
菌、乳酸菌、双歧杆菌的菌落数，并以每克盲肠内容物中菌落数的常用对数表示。
１．３．４双歧杆菌和乳酸杆菌的调节治疗
选择乳酸杆菌；双歧杆菌选择培养基（ＢＢＬ）选择
后，检测被检菌群的数量。结果不同剂量头孢曲松钠灌胃的小鼠盲肠体积均有所增大，模型组的优势菌的数量显著减少。通
过口服乳酸菌和双歧杆菌制剂，可以适当的恢复乳酸菌和双歧杆菌的数量。与对照组比较差异显著。说明实验成功地制备了小鼠的肠道菌群失衡模型，模拟长期应用抗生素的机能环境，通过外源性的补充乳酸菌和双歧杆菌，对保持肠道菌群的平衡具有调节和修复作用。
关键词
乳酸菌
双歧杆菌
抗生素文献标志码
菌群失调Ｂ
中图法分类号
１１３７８．９１；
哺乳动物肠道内存在数量庞大、结构复杂的正常菌群，对宿主具有营养、免疫和生物拮抗等作

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BBL培养基
双歧杆菌选择性培养基成份
蛋白胨
酵母粉
葡萄糖
可溶性淀粉
氯化钠
5%半胱氨酸
西红柿浸出液
吐温80
肝提取液
琼脂
蒸馏水
MRS培养基
乳酸细菌培养基（MRS）
蛋白胨 g
牛肉膏 g
酵母膏 g
柠檬酸氢二铵[（NH4）2HC6H5O7] g
葡萄糖(C6H12O6·H2O) g
吐温80 mL
乙酸钠（CH3COONa·3H2O） g
磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O） g
硫酸镁（MgSO4·7H2O） g
硫酸锰（MnSO4·H2O） g
琼脂 g
蒸馏水 1 000 mL
pH ~
当乳酸菌生长代谢出乳酸后，会使pH下降而使颜色由绿变为黄绿，也由于pH
值降低再加上抗生素及厌氧培养的作用，所以一般的微生物不容易在此培养基上生长，因此十分容易鉴别乳酸菌。

2005-03-10 08:08 消息引用收藏分享
奉上一篇实验，以供参考！厌氧菌的分离和培养目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有：厌氧箱培养技术；厌氧罐培养技术；厌氧袋培养技术；亨盖特厌氧滚管技术。

这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术。

亨盖特厌氧滚管技术是美国微生物学家亨盖特（Hungate）于1950年首次提出并应用于瘤胃厌氧微生物研究的一种厌氧培养技术。

以后这项技术又经历了几十年的不断改进，从而使亨盖特厌氧技术日趣完善，并逐渐发展成为研究厌氧微生物的一整套完整技术。

而且多年来的实践已经证明它是研究严格、专性厌氧菌的一种极为有效的技术。

亨盖特厌样滚管培养技术不仅可用于有益厌氧菌如双歧杆菌等的分离、与活菌培养计数，还可以用于有害***菌（如酪酸菌）或病原菌（如肉毒梭状芽孢杆菌）的分离与鉴定。

1材料样品双歧酸奶（液体）、双歧杆菌制剂（固体）。

培养基改良MRS培养基，PTYG 培养基。

仪器和器具亨盖特厌氧滚管装置一套，厌氧管，厌氧瓶，滚管机，定量加样器。

2 流程铜柱除氧→预还原培养基→稀释用液制备→稀释样品→滚管→培养→计数3方法铜柱系统除氧铜柱是一个内部装有铜丝或铜屑的硬质玻璃管。

此管的大小为40—400mm，两段被加工成漏斗装，外壁绕有加热带，并与变压器相连来控制电压和稳定铜柱的温度。

铜柱两端连接胶管，一端连接气钢瓶，一端连接出气管口。

由于从气钢瓶出来的气体如N2、CO2和H2等通常都含有O2，故当这些气体通过温度约360℃的铜柱时，铜和气体中的微量O2化合生成CuO，铜柱则由明亮的黄色变为黑色。

当向氧化状的铜柱通入H2时，H2与CuO中的氧就结合形成H2O，而CuO又被还原成了铜，铜柱则又呈现明亮的黄色。

此铜柱可以反复使用，并不断起到除氧的目的。

当然H2源也可以由氢气发生器产生。

预还原培养基及稀释液的制备制作预还原培养基及稀释液时，先将配制好的培养基和稀释液煮沸驱氧，而后用半定量加样器趁热分装到螺口厌氧试管中，一般琼脂培养基装，稀释液装9ml，并插入通N2气的长针头以排除O2。

此时可以清楚地看到培养基内加入的氧化还原指示剂—刃天青由蓝到红最后变成无色，说明试管内已成为无氧状态，然后盖上螺口的丁烯胶塞及螺盖，灭菌备用。

双歧杆菌样品不同稀释度的制备在无菌条件下准确称取1g固体或用无菌注射器吸取1ml混合均匀的液体样品，而后加入装有预还原生理盐水的厌氧试管中，用震荡器将其震荡均匀，制成10-1稀释液。

用无菌注射器吸取1ml 10-1稀释液至另一支装有9ml生理盐水的试管中，制成10-2稀释液。

按此操作方法依次进行10倍系列稀释至10-7，制成不同浓度的样品稀释液。

通常选10-5、10-6、10-7三个稀释度进行滚管培养计数。

厌氧滚管培养法将盛有融化的无菌无氧琼脂培养基试管放置于50℃左右的恒温水浴中，用1ml无菌注射器分别吸取10-5、10-6、10-7三个稀释度的稀释液各于融化了的琼脂培养基试管中，而后将其平放于盛有冰块的盘中或特制的滚管机上迅速滚动，这样带菌的融化培养基在试管内壁立即凝固成一薄层。

每个稀释度重复3次，而后置于37℃（酸奶样品42℃）恒温培养箱中培养。

一般培养24—48小时后，即可在厌氧管的琼脂层内或表面长出肉眼可见的菌落。

双歧杆菌活菌（分离）计数选择分散均匀，数量在几十~几百个菌落的厌氧试管进行活菌计数，即可得出每克或每毫升样品中含有的双歧杆菌数量。

计算双歧杆菌的活菌数量cfu/g(ml)样品=滚管计数的实际平均值×10×稀释倍数。