黄豆中蛋白质含量测定
大豆蛋白的提取与含量测定
法和Folin酚法是一般实验室中常用的方法，它们操作简便
，迅速，不需要复杂而昂贵的仪器。Folin酚法灵敏度高，
比双缩脲法灵敏100倍。
5.
Folin酚法所用试剂是由两部分组成，试剂甲相当于双
缩脲试剂，可与蛋白质中的肽链起显色反应。试剂乙中的
磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下不稳定，易被酚类还原而呈
兰色（钼兰和钨兰混合物）。
3、器材：
1. 试管10支 2. 试管架一个 3. 移液管：（5ml、1ml） 4. 移液管架 5. 洗瓶 6. 恒温水浴 7. 723型分光光度计
Folin-酚法测定蛋白质含量工作曲线的制作：
取6支试管（干燥的）按下表顺序分别加入各种试剂并进行反应和测定 K=0.308 B=--0.009 R*R=0.9909
试管号 0 1 2 3 4 5 S
蛋白质标准液（ml） 0 （mg) 0
提取的样品液（ml）
0.2 0.04
0.4 0.08
0.6 0.12
0.8
1.0
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
0.16 0.2
0.8
PH7.8的buffer（ml）
1 0.8 0.6 0.4 0.2
0
0.2
） Folin-甲试剂 （ml
1
1
1
1
1
1
1
于室温下不停地振荡10min
实验原理
大豆中含有丰富的蛋白质、根据提取方法及其其性质的不
同，可以分为水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白、碱溶蛋白。 将豆粉依次用上述溶剂提取，并用有机溶剂沉淀，可制得各 部分蛋白质的干粉。本实验主要是水溶提取大豆蛋白。
•
称出提出蛋白质的重量，已知原料重量，可以求出蛋白质
大豆中蛋白质含量的测定实验报告
大豆中蛋白质含量的测定实验报告大豆是一种富含蛋白质的植物，因此对大豆中蛋白质含量的测定非常重要。
本实验旨在通过化学方法测定大豆中蛋白质的含量，并对结果进行分析和讨论。
实验材料和仪器：1. 大豆样品2. 硫酸钠溶液3. 氢氧化钠溶液4. 酸性消化液5. NaOH溶液6. 氮气吹扫装置7. 精密天平8. 恒温水浴9. 离心机10. 紫外分光光度计实验步骤：1. 准备大豆样品：将大豆磨成粉末，并将其过筛以获得均匀的颗粒大小。
2. 水解反应：取一定量的大豆样品加入酸性消化液中，放入恒温水浴中进行水解反应，使蛋白质完全水解为氨基酸。
3. 碱解反应：将水解后的溶液中加入适量的NaOH溶液，使溶液呈碱性，以便将其他干扰物质转化为不溶性沉淀。
4. 沉淀处理：将碱解后的溶液进行离心处理，将沉淀分离出来。
5. 沉淀洗涤：用硫酸钠溶液对沉淀进行洗涤，去除杂质。
6. 干燥：将洗涤后的沉淀放入烘箱中干燥，直至恒定质量。
7. 称重：使用精密天平称取干燥后的沉淀质量。
8. 光度计测定：将一定量的沉淀溶解于适量的NaOH溶液中，使用紫外分光光度计测定溶液的吸光度。
9. 蛋白质含量计算：根据标准曲线，计算出大豆中蛋白质的含量。
实验结果与分析：根据实验测定，我们得到了大豆样品中蛋白质的含量。
通过对标准曲线的分析，我们可以得知大豆样品中蛋白质的浓度。
从实验结果中可以看出，大豆中蛋白质的含量较高，这也符合我们对大豆富含蛋白质的认识。
在实验中，我们采用了水解和碱解的方法，这是常用的蛋白质测定方法之一。
水解反应将蛋白质水解为氨基酸，使其更容易测定；碱解反应则将其他干扰物质转化为不溶性沉淀，方便后续步骤的进行。
为了准确测定大豆中蛋白质的含量，我们进行了沉淀处理和洗涤步骤，以去除杂质。
这些步骤的目的是提高测定的准确性和精确度。
同时，干燥步骤的进行可以保证质量的恒定，进一步提高测定结果的可靠性。
通过紫外分光光度计的测定，我们可以得到溶液的吸光度，进而计算出蛋白质的浓度。
凯氏定氮法大豆实验报告
一、实验目的1. 掌握凯氏定氮法的原理和操作步骤。
2. 学会使用凯氏定氮仪进行蛋白质含量的测定。
3. 了解大豆蛋白质含量的测定方法及其在食品分析中的应用。
二、实验原理凯氏定氮法是一种经典的蛋白质含量测定方法，其原理是将样品中的蛋白质与浓硫酸共热，使蛋白质中的氮元素转化为无机氮，即硫酸铵。
通过测定硫酸铵中的氮含量，即可计算出样品中蛋白质的含量。
实验过程中，样品的消化、蒸馏、吸收和滴定是关键步骤。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：大豆样品、浓硫酸、30%氢氧化钠溶液、克氏催化剂、2%硼酸、指示剂、0.1M HCl、蒸馏水等。
2. 实验仪器：凯氏定氮仪、凯氏烧瓶、电炉、锥形瓶、100mL容量瓶、酸式滴定管、电子天平、移液管等。
四、实验步骤1. 样品消化：准确称取0.5g大豆样品（精确至0.0001g），置于凯氏烧瓶中，加入5mL浓硫酸，再加入2g硫酸钾、0.1g硫酸铜和0.5mL过氧化氢，充分混合后，置于电炉上加热消化，直至样品完全消化。
2. 蒸馏：将消化后的溶液转入凯氏定氮仪反应室，加入过量的浓氢氧化钠，加热蒸馏，使氨气释放。
3. 吸收与滴定：将蒸馏出的氨气导入装有2%硼酸溶液的锥形瓶中，待吸收完全后，用0.1M HCl标准溶液滴定，直至溶液由蓝紫色变为红紫色为止。
4. 计算蛋白质含量：根据滴定消耗的HCl标准溶液的体积，计算出样品中氮含量，再根据氮含量计算出蛋白质含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：本次实验测得大豆样品中的蛋白质含量为37.2%。
2. 结果分析：凯氏定氮法是一种准确、可靠的蛋白质含量测定方法。
实验过程中，样品的消化、蒸馏、吸收和滴定等步骤严格按照操作规程进行，确保了实验结果的准确性。
本次实验测得的大豆蛋白质含量与文献报道基本一致，表明实验方法可靠。
六、实验总结1. 凯氏定氮法是一种经典的蛋白质含量测定方法，具有操作简便、结果准确等优点。
2. 实验过程中，严格遵循操作规程，注意样品的消化、蒸馏、吸收和滴定等步骤，确保实验结果的准确性。
大豆蛋白质含量的测定
大豆蛋白质含量的测定实验方案1 原理试样在催化剂存在下用硫酸消解,反应产物用碱中和后蒸馏。
释放出的氨被硼酸溶液吸收,吸收液用硫酸溶液滴定,测定氮含量并计算粗蛋白质含量。
2试剂除参考物质外,只使用经确认无氮的分析纯试剂,试验用水为蒸馏水或去离子水或同等纯度水.警告:2.4、2.8、2.ll和 2.12中提到的试剂应谨慎使用。
2.1 硫酸钾 (K2SO4)。
2.2 五水硫酸铜 (CuSO4·5H20)。
2.3 二氧化钛 (TiO2)。
2.4 硫酸(H2SO4):c(H2SO4)=18mol/L,ρ20(H2SO4)=1.84g/mL。
2.5 石蜡油。
2.6 N-乙酰苯胺 (C8H9NO):熔点114℃,氮含量10.36g/100g。
2.7 色氨酸(C11H12N22):熔点282℃,氮含量13.72g/100g。
2.8 五氧化二磷(P205 )。
2.9 硼酸:水溶液 ,ρ20(H3BO3)=40g/L,或所使用仪器推荐的浓度。
2.10 指示剂:按照所使用仪器的推荐,加入一定体积的溶液A(2.10.1）和溶液B(2.10.2 )(例如:5体积溶液A和1体积溶液B)。
注1:有可能准各使用的硼酸溶液中含有指示剂（2.9+2.10）。
注2:溶液A和溶液B的比例可根据仪器进行调整。
也可以使用pH电极进行电位滴定，PH电极需要每天校准。
5.10.1溶液A:200mg溴甲酚绿（C21H14Br4O5S）溶于体积分数为95%的乙醇（C2H5OH），配制成100mL溶液。
5.10.2溶液B:200mg甲基红（C15H15N3O2）溶于体积分数为95%的乙醇（C2H5OH）,配制成100mL溶液。
5.11 氢氧化钠水溶液（NaOH）:质量分数33%或40%，含氮量少于或等于0.001%。
也可以使用含氮量少于或等于0.001%的工业级氢氧化钠。
5.12 硫酸:标准滴定溶液，c（H2SO4）=0.05mol/L因为硫酸在连接管中不产生气泡，所以推荐用硫酸代替盐酸。
黄豆中各种营养成分的测定实验设计
黄豆中各种营养成分的测定实验设计
1. 样品准备：将一定量的黄豆样品研磨成细粉。
2. 碘值法测定淀粉含量：取一定量的黄豆粉，加入适量的碘试剂，观察颜色变化，根据颜色变化程度可测定淀粉的含量。
3. 还原糖测定：取一定量的黄豆粉，加入酸性溶液，进行酸水解，然后加入邻苯二酚试剂，通过比色法测定还原糖的含量。
4. 水分含量测定：将一定量的黄豆样品在高温下烘干，直至质量不再变化，记录最终质量，通过质量差计算水分含量。
5. 脂肪含量测定：取一定量的黄豆粉，加入适量的有机溶剂，进行浸提，浓缩溶剂，然后称重，通过质量差计算脂肪的含量。
6. 蛋白质含量测定：采用Kjeldahl法，将一定量的黄豆样品与硫酸进行消解，然后通过蒸馏和滴定的方法测定氨含量，再计算蛋白质的含量。
7. 矿物质含量测定：取一定量的黄豆样品，用酸进行消解，然后通过原子吸收光谱法或离子色谱法测定矿物质的含量。
8. 维生素含量测定：取一定量的黄豆样品，用适当溶剂进行提取，然后通过高效液相色谱法或比色法测定维生素的含量。
9. 分析结果计算：根据实验数据，计算出黄豆中各种营养成分的含量，比如淀粉、还原糖、水分、脂肪、蛋白质、矿物质和维生素的含量。
10. 数据分析和结果讨论：对实验结果进行统计分析，比较黄豆中各种营养成分的含量差异，探讨可能的原因和影响因素。
注意事项：
- 在实验过程中，应遵守实验操作规范和安全操作要求，确保实验结果准确可靠。
- 样品选取要具有代表性，以获得较为准确的结果。
- 实验过程中需控制环境条件，保持恒定的温度、湿度等，以减小误差。
- 实验中使用的试剂和仪器设备要符合相关标准，以获得准确的测定结果。
凯氏定氮法--测定黄豆中的粗蛋白
实验7凯氏定氮法测定黄豆的粗蛋白含量一、原理利用硫酸及催化剂与食品试样一同加热消化，使蛋白质分解，其中C、H形成CO2、H2O逸出，而氮以氨的形式与硫酸作用，形成硫酸铵留在酸液中。
然后将消化液碱化，蒸馏，使氨游离，用水蒸气蒸出，被硼酸吸收。
用标准盐酸溶液滴定所生成的硼酸铵，从消耗的盐酸标准液计算出总氮量，再折算为粗蛋白含量。
2 NH2-(CH2)2 -COOH + 13H2SO4 → (NH4)2 SO4 + 6CO2 + 12SO2 +16H2O(NH4)2 SO4 + 2NaOH → 2NH3 + Na2SO4 + 2H2O2NH3 + 4H3BO3 → (NH4)2 B4O7 + 5H2O(NH4)2 B4O7 + 2HCl + 5H2O → 2NH4Cl + 4H3BO3二、仪器与试剂1、100mL凯氏烧瓶2、微量凯氏定氮装置3、试剂硫酸铜 硫酸钾 硫酸 2%硼酸溶液混合指示剂:0.1%甲基红乙醇溶液与0.1%甲基蓝乙醇溶液,临用时按2:1的比例混合.或0.1%甲基红乙醇溶液与0.1%溴甲酚绿乙醇溶液,临用时按1:5的比例混合。
20%NaOH溶液 0.01mol/L HCl标准溶液三、测定方法1、样品消化：准确称取粉碎均匀的黄豆粉0.3g左右，小心移入干燥的凯氏烧瓶中（勿粘附在瓶壁上），加入0.5g CuSO4、3g K2SO4及10mL浓硫酸，于瓶口倒插入一口径适宜的干燥管，用胶管与水力真空管相连接，利用水力抽出消化过程所产生的烟气。
先以小火缓慢加热，待内容物完全炭化，泡沫消失后再加大火力，消化至溶液透明呈蓝绿色。
取下抽气管，继续加热 0.5h,冷却至室温。
取20mL蒸馏水，徐徐加入烧瓶中，待样品冷至室温，移入100mL的容量瓶中，用蒸馏水冲洗烧瓶数次，并入容量瓶，旋转混匀放冷，再用蒸馏水定容，备用。
同时做一空白消化。
2、蒸馏与吸收：1>按蒸馏装置图安装好装置，将所有的夹子打开。
大豆种子蛋白质鉴定
大豆种子蛋白质鉴定大豆种子蛋白质鉴定在世界各地的饮食中，大豆是一种常见且重要的食物。
其不仅被用作主食、蛋白质来源，还可以制成豆腐、豆浆等多种豆制品。
然而，大豆中的蛋白质组成及其鉴定一直是研究者和消费者们关注的热点问题。
本文将从多个角度探讨大豆种子蛋白质的鉴定方法、组成及其健康影响，帮助读者更全面地理解这一主题。
1. 蛋白质组成与鉴定方法大豆种子中的蛋白质是其主要营养组分之一。
在鉴定大豆种子蛋白质时，常用的方法包括电泳分析、质谱分析和基因组学方法。
其中，电泳分析是最常见的鉴定大豆种子蛋白质的方法之一，可以通过比较不同品种和不同处理条件下的电泳图谱，了解大豆蛋白质的组成变化。
2. 大豆蛋白质的主要成分大豆种子中的蛋白质主要由两类组分组成，即7S和11S蛋白。
7S蛋白是一种富含亮氨酸和蛋氨酸的球蛋白，具有较高的营养价值和生物活性。
11S蛋白是一种含有富含硫氨酸和色氨酸的球蛋白，具有较高的稳定性和水溶性。
这两类蛋白质在大豆中的比例会受到多种因素的影响，如品种、种植环境和加工方法等。
3. 健康影响及应用大豆种子中的蛋白质以其丰富的营养价值和多种生物活性成分而闻名于世。
其具有降低胆固醇、预防心血管疾病、抗氧化和抗肿瘤等多种健康功能。
大豆蛋白质还可以用作食品配料、功能性食品和保健品等多个领域的原料。
在日本、中国等亚洲国家，大豆蛋白质已经被广泛应用于食品工业，并取得了显著的经济和社会效益。
4. 个人观点与理解就我个人而言，大豆种子蛋白质鉴定是一项重要且有挑战性的研究领域。
通过了解大豆种子蛋白质的组成及其健康影响，我们可以更好地利用大豆蛋白质的营养和功能特性来改善人们的饮食结构和生活质量。
我也认为在大豆蛋白质鉴定的过程中，需要综合运用不同的分析方法，以获得更准确、全面的结果。
总结回顾：通过本文的探讨，我们深入了解了大豆种子蛋白质的鉴定方法、组成及其健康影响。
电泳分析、质谱分析和基因组学方法是常用的鉴定大豆种子蛋白质的方法。
大豆蛋白的提取与含量测定
• 引言 • 大豆蛋白的提取 • 大豆蛋白含量的测定 • 实验结果与分析 • 结论 • 参考文献
01
引言
大豆蛋白简介
大豆蛋白是大豆中的重要成分，具有 丰富的营养价值，包括提供人体所需 的氨基酸、蛋白质等。
大豆蛋白具有低脂肪、低胆固醇的优 点，对于降低心血管疾病风险、保持 健康体重等方面具有积极作用。
实验结果
实验结果显示，采用本实验方法提取的大豆蛋白 具有较高的纯度和收率，且操作简便，可用于实 际生产。
对未来研究的建议
深入研究不同溶剂和条件对大豆蛋白提取效果的影响，以进一步优化提取工艺。 探讨大豆蛋白的结构与功能特性，为其在食品、医药等领域的应用提供理论支持。
开展大豆蛋白与其他植物蛋白的比较研究，以全面了解其营养价值和功能特性。
碱提取法
利用碱性溶剂溶解大豆中的 蛋白质，该方法能够较好地 保持蛋白质的生物活性，但 操作较为复杂。
离子交换法
利用离子交换剂吸附大豆中 的蛋白质，该方法具有较高 的选择性，但需要使用大量 的离子交换剂。
膜分离法
利用膜分离技术将大豆中的 蛋白质进行分离，该方法具 有操作简便、分离效果好等 优点。
提取流程
06
参考文献
参考文献
01
参考文献1
大豆蛋白的提取方法主要有碱溶酸沉法、膜分离法、离子交换法等。其
中，碱溶酸沉法是最常用的一种方法，通过调节pH值使大豆蛋白溶解，
再通过调节pH值使其沉淀析出。
02
参考文献2
大豆蛋白的含量测定方法主要有凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法等。
其中，凯氏定氮法是最常用的一种方法，通过测定大豆样品中氮的含量
应用前景
分析大豆蛋白提取与含量测定的实际应用价值，探讨 其在食品、饲料等领域的应用前景。
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黄豆中蛋白质含量测定——凯氏定氮法
一、仪器和试剂
主要仪器:
定氮仪。
试剂（除注明外均为分析纯）：
1. 浓硫酸。
2. 30%氢氧化钠溶液。
3. 2～4%硼酸溶液。
4. 0.1mol/L 盐酸溶液。
5. 催化剂：硫酸钾——硫酸铜的混合物（K 2SO 4:CuSO4·5H 2O=3.5g:0.1g ）。
二、操作步骤
1. 消化
准确称取粉碎均匀的黄豆粉0.5g 左右，小心移入干燥的消化瓶中（注意用称量纸将样品加入到消化管底部，勿粘附在瓶壁上），加入适量催化剂及10mL 浓硫酸，按要求安装好消化装置后,设置好消化程序,打开冷凝水, 开始消化程序。
(160℃, 40min; 250℃, 20min; 350℃, 60min; 420℃, 30min)消化程序结束后，消化至溶液透明呈蓝绿色，冷却至室温。
同时做空白对照。
2． 蒸馏、吸收及滴定
按要求安装好UDK142蒸馏仪，并将蒸馏仪与自动电位滴定仪连接好。
将所需试剂装到相应的试剂瓶中。
设置好蒸馏程序及滴定程序后，将冷却好的消化管装到蒸馏仪上，打开冷凝水，然后开始程序。
三、结果计算
X ——试样中蛋白质的含量，单位为克每百克（g/100g ）
C —— HCl 标准溶液的浓度mol/L
V 1 —— 滴定样品吸收液消耗的HCl 标准溶液的体积mL
V 2 —— 滴定样品空白液消耗的HCl 标准溶液的体积mL
0.0140——1.0mL 盐酸（C(HCl)＝1.000mol/L ）标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克（g ）
m ——试样的质量或体积，单位为克或mL
1000140.0)(21⨯⨯⨯⨯-=F m
c V V X
F ——氮换算为蛋白质的系数。
一般食物为6.25，乳制品为6.38，面粉为
5.70，玉米、高粱为
6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，肉与肉制品为6.25，大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83，芝麻、向日葵5.30。
计算结果保留三位有效数字。