组培苗遗传稳定性的问题
浅谈林木植物组织培养技术中存在的问题及对策
浅谈林木植物组织培养技术中存在的问题及对策林木植物组织培养技术是一种重要的植物繁殖和种质改良方法，它在林木栽培和林业生产中具有重要意义。
然而在实际应用中，我们也会面临一些问题和挑战，需要通过对策来解决。
本文将就林木植物组织培养技术中存在的问题进行探讨，并提出相应的对策。
问题一：杂交胚发育受阻在林木植物组织培养中，比较常见的问题之一是杂交胚发育受阻。
由于林木植物杂交种子的发育过程受到外界环境和内部基因因素影响，导致杂交胚发育不够完善，甚至完全停滞。
这给组织培养带来了很大的困难。
对策：1. 优化杂交技术，提高杂交胚发育率。
通过提高杂交时配对的质量和频率，可以有效地提高杂交胚的发育率。
2. 优化培养基配方，提供适宜的营养条件。
合理的培养基搭配可以提供充足的养分，促进杂交胚发育。
问题二：离体组织死亡率偏高在林木植物的组织培养过程中，离体组织死亡率偏高也是一个比较普遍的问题。
离体组织易受外界环境的影响，死亡率高会影响到组织培养的效果。
对策：1. 选择适宜的离体组织来源。
尽量选择健康、生长良好的母本材料进行组织培养。
2. 优化培养条件，包括温度、湿度、光照等，提供良好的生长环境。
3. 添加生长调节物质，如激素、细胞分裂素等，以促进离体组织的生长和增殖。
问题三：植株再生率低在林木植物组织培养过程中，植株再生率低也是一个常见的难题。
植株再生率低会严重影响植物的繁殖效率和培育效果。
对策：1. 优化培养基，提供适宜的营养物质和生长激素，促进植株再生。
2. 采用生物技术手段，如基因编辑和转基因技术，对植物进行改良，提高其再生能力。
3. 选择适宜的组织培养方法，如愈伤组织培养、离体叶片培养等，以提高植株再生率。
问题四：遗传变异率高在林木植物组织培养中，有时会出现遗传变异现象，这对植物材料的繁殖和种质改良带来了一定的困扰。
对策：1. 严格选择培养基和生长激素。
合理搭配培养基成分和生长激素种类和比例，以减少遗传变异的可能性。
利用ISSR检测桉树组培苗遗传稳定性的研究
ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ ｓ ｉ ｎ ｅ ｕ ｃ ａ ｌ ｙ ｐ ｔ ｕ ｓ ｈ ａ ｄ ｈ ｉ ｇ ｈ ｅ ｒ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｉ ｙ ，ｗｈ ｔ ｉ ｃ ｈ ｃ ａ ｎ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｄ ｉ ｎ ｔ ｒ ａ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｉ ｆ ｃ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ
２ ０ １ ３年 ４月
Ａｐ ｒ ．２ ０１ ３
热 带 农 业 科 学
ＣＨＩ ＮＥ Ｓ Ｅ Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＴＲＯＰ Ｉ Ｃ ＡＬ ＡＧＲＩ ＣＵＬ Ｔ ＵＲＥ
第３ ３卷第 ４期
Ｖｏ １ ． ３ ３，Ｎｏ ． ４
利用 Ｉ Ｓ Ｓ Ｒ检测桉树组培苗遗传稳定性的研究①
（ １ Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ，Ｎａ ｎ ｎ ｉ ｎ ｇ ，Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ ５ ３ ０ ０ ０ １
２ Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ Ｎ ａ ｎ ｎ ｉ ｎ ｇ Ｌ ｉ ａ ｎ ｇ ｆ ｅ ｎ ｇ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ Ｐ ａ ｒ ｋ ，Ｎ ａ ｎ ｎ ｉ ｎ ｇ ， Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ ５ ３ ０ ０ ３ １）
关键 词
分类号
Байду номын сангаас
桉 树 属 ；组 培 苗 ；继 代 次 数 ；遗 传 变 异 ；Ｉ Ｓ Ｓ Ｒ
￥ ７ ９ ２ ＋ ３ ９：Ｑ ２ ９ １
Ｇｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ Ｓ ｔ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｅ ｕ ｃ ａ ｌ ｙ ｐ ｔ ｕ ｓ Ｒｅ ｐ ｅ ａ ｔ ｅ ｄ ｌ ｙ Ｓ ｕ ｂ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｄ
植物组培面临的问题及发展前景
植物组培面临的问题及发展前景植物组培面临的问题及发展前景植物的组织培养指在含有营养物质及植物生长必需物质的培养液中，培养离体植物组织(器官或细胞)并诱导使其长成完整植株的技术，植物组织培养技术起始于1902年德国植物学家哈伯兰特提出的植物细胞全能性的概念。
根据这个理论基础，经过五十多年，Steward和Reinert用胡萝卜韧皮部细胞培养出了完整的植株，进一步证实了植物细胞具有全能性。
应用近年来，我国植物组织培养技术得到了迅速发展，已经渗透到植物生理学、病理学、药学、遗传学、育种以及生物化学等各个研究领域，并广泛应用于农业、林业、园艺、工业、医药业等多种行业，产生巨大的经济效益和社会效益，被认为是一项很有潜力的高新技术。
因此，植物组织培养的应用领域相当广阔，归纳起主要有以下儿方面：1苗木的离体快繁快速繁殖是组织培养在生产上应用最广泛、最成功的一个领域。
当前微繁最主要的用途是替代传统的营养繁殖方法以增加繁殖系数。
这样可以节省常规营养繁殖所需的大量母株及因栽培和保持这些母株所需的土地和人力资源。
另外，植物离体快繁也适合于一些价值较高的杂种植株的繁殖。
快繁的优点:应用于用其他方式不能繁殖，或繁殖效率低的植物;快繁技术容易掌握，繁殖率高;无性繁殖避免了有性繁殖过程中发生变异，能够保持某一品种的基因型稳定。
2培育无病毒植株病毒能引起植物的严重病害，经过逐代传递和积累，危害口趋加重，可导致种性退化，严重时可使品种灭绝。
茎尖分生组织不含病毒或浓度很低，通过茎尖的离体培养便可以得到无病毒再生植株。
目前国内外已通过茎尖培养的方法得到大量甘薯、苹果、月季、菊花、康乃馨等数百种经济植物的脱病毒苗，减少或者消除了山病毒引起的植物病害。
3在植物育种上的应用植物组织培养在育种上的应用主要有单倍体育种、原生质体融合以及胚和胚乳的培养。
我国在小麦、烟草、橡胶、柏树、辣椒等植物的单倍体育种的工作处于领先地位。
原生质体融合技术在植物育种上有着较广阔的应用前景，通过原生质体融合可以克服远缘杂交不亲和，获得属间甚至种间的杂交体细胞，产生新的植株品种，在生产上可产生巨大的经济和社会效益。
农作物品种改良及其遗传稳定性分析
农作物品种改良及其遗传稳定性分析一、品种改良1.1 什么是农作物品种改良农作物品种改良是指通过基因敲定、转基因等方法，选择和培育适应性更强、产量更高、抗病虫更强的新品种。
品种改良旨在提高农作物的生产效率和经济效益，且受到广泛关注。
1.2 遗传多样性和农作物品种改良遗传多样性是指一个品种内部个体间的基因差异和品种之间的基因差异。
农作物品种改良需要选择一个合适的母本和父本，以达到选择高遗传多样性的目的。
在品种选育中保持遗传多样性，可以避免单一品种遭受严重疫病和逆境的农作物。
1.3 品种改良的方法品种改良的方法有传统培育和基因工程法。
传统培育方法是在不改变基因序列的情况下，通过种植、筛选、插接和杂交技术等手段，来培植下一代植物。
而基因工程法则是直接改变某些基因序列，来培植新品种。
此外，基因敲定、无性繁殖等最新技术也有望为品种改良提供新方法。
二、遗传稳定性分析2.1 遗传稳定性概述遗传稳定性是指一种生物体在传递遗传特征方面的稳定性，是指不会发生突变的一个生物个体遗传性状。
对于农作物品种改良，遗传稳定性分析是品种选育的一个重要环节。
2.2 遗传稳定性分析的原因品种培育和筛选过程中会选取出一些具体的优势品种，然而随着派生次数的增加，品种变异和缺陷也会相应增加。
因此，一个新培育的农作物品种的遗传稳定性是品种改良过程的重要衡量标准。
2.3 遗传稳定性分析的方法目前较常用的遗传稳定性分析方法有RAPD、SSR、AFLP等方法。
每种方法都有着自身的独特优势和不足，需要在具体情况下选择合适的技术手段。
其中，RAPD分析方法是最常用的一种分子手段，同时具备成本低、高效、简便和灵敏度较高的特点。
2.4 遗传稳定性的判断标准对于品种选育而言，如果品种中控制着某项特性的基因可靠地被遗传到下一代，就意味着该品种遗传稳定性较高。
而基因型的突变、异源性和杂交性等也是衡量品种遗传稳定性的重要标准。
三、总结农作物品种改良的成功，直接关系到粮食生产能力和质量。
组培中常见问题分析
组培苗在培养过程中常见问题分析一、植物褐化A、原因可能有：1、植物本身含有较多的酚类物质，在切割外植体时，从伤口渗透出来，直接渗入培养基中，或在继代培养时不断形成并渗出。
2、（1）外植体的取材部位及季节（2）培养基成分，浓度过高的无机盐和高浓度6-BA、KT 等容易加重褐化。
（3）培养条件不当，温度过高培养时间过长、光照过强，均可以提高多酚氧化酶的活性。
B、防止措施：1、选择合适的外植体：选取幼龄材料，选合适部位，时间一般在初冬或初春2、暗培养或勤转瓶3、弱光培养、低温培养4、添加活性炭或抗氧化剂等5、可以降低无机盐含量，由全量降为半量，减少铵态氮的含量。
二、玻璃化现象A、原因可能有：1、培养温度高2、生长素种类及其配制比例不合适。
铵态氮及碳源对某些植物培养不适宜。
B、防止措施：1、降低培养瓶内的湿度，增加琼脂量，每瓶接种量减少三分之一2、降低培养温度3、增加光照4、降低培养温度5、降低培养基中细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸。
也可以降低或去除铵态氮。
6、在培养基中加入1.0~5.0g/L活性炭。
三、黄化现象A、原因可能有：1、培养基中铁元素含量不足，激素配比不当，糖用量不足。
2、培养瓶温度不适，光照不足。
3、pH值有问题。
（培养基配置不正确）B、防止措施：1、检查培养基配置过程，保证培养基成分正确添加2、调节培养基的成分和pH值3、控制培养室温度，增加光照，用透气盖改善瓶内通气情况四、污染现象A、原因可能有：1、原瓶苗有污染2、接种工具灭菌不彻底3、操作时认为带入菌4、接种环境不干净5、原瓶苗细菌性污染（浑浊水渍状、或泡沫发酵状）常由于灭菌锅未排尽冷空气、灭菌锅压力温度不够，计时不准确造成。
6、原瓶苗真菌性污染（出现各种颜色的孢子），可能是由于空气、瓶口及瓶盖真菌孢子引起。
B、防止措施：1、正确使用灭菌锅2、接种工具每次使用完后要消毒灭菌，接种时，手不要碰盘子的任何地方，用镊子夹盘子。
3、污染的原瓶苗要及时淘汰，如果原瓶苗数量少要进行灭菌4、接种时，要保证接种环境的干净卫生，台内工具不宜放太多。
组培中易出现的问题及解决措施
组培中易出现的问题及解决措施组织细胞培养是一项非常重要的生物技术，它可以用来从单个细胞中培养出成千上万个细胞。
组织细胞培养的应用非常广泛，从基础生物学到医学应用都有着重要的作用。
组织细胞培养的成功需要正确的实验计划、培养条件和技术操作等多个方面因素的支持。
尽管组织细胞培养已经有着相对成熟的技术和应用，但是在实验过程中还是经常会出现一些问题，这些问题可能会导致实验出现失败，影响实验的准确性和可靠性。
因此，在组织细胞培养中，我们需要特别注意常见问题，并尝试寻找解决方案。
一、细胞培养过程中细胞死亡在组织细胞培养过程中，细胞死亡是一个非常常见的问题。
细胞死亡可能是由于培养环境不适宜、细胞器受损等多种原因引起的。
首先，我们需要确认细胞死亡的原因。
若是由于细胞培养环境不适宜所引起的，则我们可以通过调整培养条件来解决问题。
例如，我们可以改变培养基配方、调整 pH 值或温度来提高培养环境的适宜性。
此外，如果细胞死亡是由于受到刺激性化合物的作用或者细胞器损伤所致，我们可以考虑加入一些细胞保护剂或体外作用因子，保护细胞的生命活力。
如果细胞死亡造成严重损失，我们需要重新设计和实施实验。
二、细胞表型不稳定在细胞培养中，细胞表型不稳定也是一个常见问题。
细胞表型不稳定有时候可能由于细胞培养环境的改变，例如培养温度或半衰期等变化，也可能由于细胞的遗传学变异。
为了解决这个问题，我们需要尽可能保持细胞培养环境的稳定性并且进行维护，避免温度、血清物质浓度和酸碱度等变化。
此外，通过使用抗生素、氢化叶酸和选择性试剂等方法可以限制细胞遗传学变异的发生。
三、细菌侵染在细胞培养中，细菌侵染也是一个常见的问题，尤其在长期培养和细胞密度过高的情况下。
细菌侵染可能会损害细胞生长、侵入细胞免疫系统，甚至造成病毒和真菌感染。
为了解决这个问题，我们需要加强无菌技术操作，避免细菌的外源性污染，并及时采取细胞毒性药物或细菌毒素的处理措施来杀灭细菌。
四、细胞品种污染细胞品种污染也是组织细胞培养中经常遇到的问题之一。
亚龙组培分享组培商业生产中的常见问题之四 (遗传稳定性)
组培商业生产中的常见问题之四（遗传稳定性）组培商业化生产中的问题之四，遗传稳定性问题，即保持原有良种特性问题。
虽然植物组织培养中可获得大量形态、生理特性不变的植株，但通过愈伤组织或悬浮培养诱导的苗木，经常会出现一些体细胞变异个体，虽然其中有些是有益变异但更多的是不良变异诸如观赏植物不开花、花小或花色不正，果树植物不结果、抗性下降或果小、产量低、品质差等问题，在生产上造成很大损失。
许多研究表明，在植物组织与细胞培养过程中，细胞、组织和再生植物以及后代中会出现各种变异，这种变异具有普遍性，即不限于某些物种，也不局限于某些器官。
变异所涉及到的性状也相当广泛。
一、变异和畸形组培过程中，由于激素、环境等因素的作用和影响，使组培苗的外部形态和内部生理发生变化，引起的畸形、矮化、丛生、叶片增厚、茎秆变扁呈扫把型、甚至种性也发生变化的现象。
发生变异和畸形的原因主要由激素的种类和浓度决定，其次温度过高时也会有一定的影响。
不同种类和品种发生变异的频率和程度各不同，香石竹在使用BA时比KT更容易发生丛生变异，而且在较低的浓度下，就会产生三叶轮生甚至成丛状的形态变异，这些变异植株下地后不能正常的生长和开花，是生产上不能使用的无效苗。
在环境条件恶化和不适时，也会发生一些比较明显的形态变异和畸形。
长时间的过低温度会使组培苗僵化、节间矮缩；而温度过高时，苗会徒长、细弱。
根据各个花卉品种的组培生长习性，可以通过降低细胞分裂素的浓度，调整生长素与细胞分裂素的比列，改善环境条件等措施来减轻变异和畸形的发生及缓解发生的程度。
二、影响遗传稳定性的因素1、基因型基因型不同，发生变异的频率也不同，在玉簪中，杂色叶培养的变异频率为43%，而绿色叶仅为1.2%，甘蔗品系H37-1933和H50-7290中得到的再生植株分别有12.1%和34.8%变异，嵌合体植株通过组培，其嵌合性更大，单倍体和多倍体变异大于二倍体。
2.继代次数根据报道试管苗的继代培养次数和时间影响植物稳定性，是造成变异因素的关键，一般随继代次数和时间的增加，变异频率不断提高。
植物组织培养技术的研究进展
植物组织培养技术的研究进展一、本文概述植物组织培养技术，作为一种在无菌条件下，通过人工操作将离体的植物组织、细胞或器官培养在人工配制的培养基上，使其再生为完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术，自其诞生以来，就在生物学、农业、林业、医药等领域引发了广泛的关注和研究。
本文旨在全面综述植物组织培养技术的研究进展，探讨其在实际应用中的潜力与挑战，以期为推动该领域的发展提供有益的参考。
本文将首先回顾植物组织培养技术的发展历程，梳理其从早期的摸索阶段到现代的精细化、高效化发展的主要历程。
接着，我们将重点关注近年来在植物组织培养技术方面取得的重要突破，包括培养基的优化、外植体选择的新策略、基因编辑技术在组织培养中的应用等。
我们还将探讨植物组织培养技术在植物育种、脱毒、次生代谢产物生产、生物反应器等方面的应用，并分析其在实际应用中的优势和局限性。
我们将对植物组织培养技术的未来发展进行展望，探讨如何通过技术创新和方法优化，进一步提高植物组织培养的效率和质量，以满足日益增长的农业生产需求和社会经济发展要求。
我们也将关注植物组织培养技术在应对全球气候变化、生物多样性保护等重大问题中的潜在作用，以期为推动植物组织培养技术的可持续发展提供新的思路。
二、植物组织培养技术的基本原理和方法植物组织培养技术，又称为植物微繁殖或植物细胞培养，是一种通过控制环境条件，利用植物细胞或组织的再生能力，在无菌条件下进行植物繁殖或遗传改良的技术。
其基本原理主要基于植物细胞的全能性，即植物体的每一个活细胞都含有该物种的全套遗传信息，并有能力发育成完整的植株。
植物组织培养的基本方法主要包括以下几个步骤：从植物体上获取所需的外植体（如叶片、茎尖、花药等）。
然后，通过表面消毒和切割处理，将外植体接入含有适当营养成分和植物生长调节剂的培养基中。
这些调节剂如细胞分裂素和生长素，对细胞的分裂和分化起着重要的调控作用。
接着，将接种后的外植体置于适宜的光照、温度和湿度条件下进行培养。
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组培苗遗传稳定性的问题
遗传稳定性问题，即保持原有物种特性的问题。
虽然植物组织培养中可获得大量形态、生理特性不变的植株，但通过愈伤组织或悬浮培养诱导的组培苗，经常会出现一些变异个体，其中有些是有益变异，而更多的不良变异。
如观赏植物不开花、花小或花色不正，果树不结果、抗性下降或果小、产量低、品质差等，给生产造成很大损失。
因此，组培苗遗传稳定性问题是植物组织培养的一个重要问题。
(一)影响组培苗遗传稳定性的因素
1.基因型
基因型不同，发生变异的频率也不同。
如在玉簪组培过程中，杂色叶培养的变异频率为43％，而绿色叶仅为1.2％；香龙血树愈伤组织培养再生植株全部发生变异。
嵌合体植株通过组培，其嵌合性变异更大。
单倍体和多倍体变异大于二倍体。
同一植株的不同器官的外植体对无性系变异率也有影响，在菠萝组织培养中，来自幼果的再生植株几乎100%出现变异，而来自冠芽的再生植株的变异率只有7%，似乎表明从分化水平高的组织产生的无性系较从分生组织产生的无性系更容易出现变异。
2.继代次数与继代时间
据报道，试管苗的继代培养的次数和时间的长短影响植物的稳定性，是造成变异的关键因素。
一般随着继代次数和培养时间的增加，变异频率不断提高。
朱靖杰（1995）报道，香蕉诱导不定芽产生，其变异率继代5次为2.14％；10次为4.2％；继代20次后则100％发生变异，因而香蕉继代培养不能超过一年。
研究表明，变异往往出现
在由年龄渐老的培养物所再生的植株中，而由幼龄培养物再生的植株一般较少发生。
另外，长期营养繁殖的植物变异率较高，有人认为这是由于在外植体的体细胞中已经积累着遗传变异。
3.发生方式
离体器官发生有多种类型，以茎尖、茎段等发生不定芽的方式繁殖，不易发生变异或变异率极低。
甘肃农业大学通过茎尖培养法繁殖名贵葡萄品种，经5～8年继代培养，其变异频率与常规方法相同，在数万株中仅发现1株变异；菊花通过茎尖、腋芽培养变异较低，而从花瓣诱导的植株变异率则较高。
通过胚状体发生途径再生植株变异较少，而通过愈伤组织和悬浮培养分化不定芽的方式而获得再生植株的变异率则较高。
4.外源激素
培养基中的外源激素是诱导体细胞无性系变异的重要原因之一。
一般认为，较低浓度的外源激素能够有选择地刺激多倍体细胞的有丝分裂，而较高浓度的激素则能抑制多倍体细胞的有丝分裂。
Kallack&Yarve kylg(1971)的研究指出，如果2,4-D的作用浓度为0.25 mg/L,能够增加多倍体细胞的有丝分裂，减少二倍体细胞的有丝分裂，但若2,4-D的作用浓度为20 mg/L时,则能促进二倍体细胞的分裂。
在高浓度激素的作用下，细胞分裂和生长加快，不正常分裂频率增高，再生植株变异也增多。
(二)减少变异，提高遗传稳定性的措施
在组培工厂化快繁过程中，产生大量与亲本性状完全一致的个体是很重要的。
进行植物快速微繁时，应尽量采用不易发生体细胞变异的增殖途径，以减少或避免植物个体或细胞发生变异。
具
体措施如下：①采用生长点、腋芽生枝、胚状体繁殖方式，可有效减少变异；②缩短继代时间，限制继代次数，每隔一定继代次数后，重新进行初代培养；③取幼龄的外植体材料；④采用适当的激素种类和较低的浓度；⑤培养基中减少或不使用容易引起诱变的化学物质；⑥定期检测，及时剔除生理、形态异常苗，并进行多年跟踪检测，调查再生植株开花结实特性，以确定其生物学性状和经济性状是否稳定。
影响茎尖和茎段培养的因素
1. 基因型
茎尖培养与其他组织培养一样，受基因型的影响很大，不同科、属植物要求的条件差别较大，甚至同一属的不同种类以及品种间的表现也不一样。
有时也有分类地位相距甚远的植物间，可能恰好可以用完全相同的培养基的现象存在。
2．取材的时间、部位与芽的生理状态
(1)取芽时间与芽的生理状态在某些温带木本观赏植物的萌芽只限于春季，所以茎尖和茎段培养最好在春季进行，并且在芽已经膨大，但芽鳞片还没有张开时取芽最合适。
因为此时的芽生长旺盛，并有芽鳞片保护，不受污染。
对处于休眠期的块茎、鳞茎、球茎等进行茎段培养，则必须经过高温、低温处理或特殊光周期处理之后再进行。
如李属植物在培养之前必须把茎保存在4℃下近6个月之久。
另外，茎尖培养的效率还与茎的生根能力有关。
如大多数马铃薯品种中，在春季和初夏采集的茎尖比在较晚季节采集的容易生根。
从芽的生理状态来说，一般活动芽的茎尖比休眠芽的茎尖培养效果好。
(2)取材部位一般而言，茎的基部比顶部的切段、侧芽比顶芽的成活率低，顶芽或上部的芽(茎段)比侧芽或基部的芽(茎段)培养效果好，这可能与它们生长较为旺盛有关。
由于顶芽的数量有限，也经常使用侧芽(带侧芽的茎段)做外植体，但对草莓等一些植物而言，顶
芽和腋芽的茎尖培养效果相同。
所以，芽的着生部位对茎尖培养的影响不能一概而论。
另外，从取材植株的年龄来说，从幼年树木取材较成年树容易培养；一年生或多年生草本植物的营养生长早期取材较营养生长后期容易培养。
3.外植体大小
培养的茎尖材料过大，不利于丛生芽与不定芽的形成，也容易污染，但外植体过小，其存活率会很低。
研究证明，石竹茎尖的大小为0.09mm时，无形态发生能力；当茎尖达到0.35mm时，就可以大量产生嫩茎；当外植体为0.5mm时，嫩茎的产生又下降。
另外，生长健壮而饱满的茎尖微繁殖容易成功。
4.极性
极性在不同的植物离体培养中有不同的反应。
如将杜鹃茎切段的形态学下端竖插在培养基上，从远离基部的表面上诱导出茎芽的数目较多；而当把唐菖蒲外植体的基部向上放置时，也可以产生茎，但数目较少；水仙花茎切段只有倒放在培养基上才有器官发生。
注意使用适当的激素后，能削弱或加强极性的影响
5.培养基和培养条件
6.褐化和玻璃化。