石见穿提取物多糖对SGC-7901肿瘤细胞的作用
本组 实验应 用热水 提取法 以及 乙醇沉 淀法提 取 多糖 ，２ ０ ０ ｇ 石
用 于肝炎 、妇科 以及 癌症 等方 面 。近 期有 较 多文献 研究 表 明，石 见穿经 过 Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ ｅ 法除 蛋 白得 到 ３ ． ６ ０ ｇ 石 见穿粗 多糖 ，有 效提取 率 见 穿有效 成分 对于抗 肿瘤 有显 著 的作用 ，石见 穿主 要成分 偶 多糖 为 １ ． ８ ％ 。 类 、多酚类 、三 枯类 以及醇 类 Ⅲ。本文 为研 究分析 石见 穿提取 物 对Ｓ Ｇ Ｃ ７ ９ ０ １ 细 胞 的作用 ，应用 热水 提取 法 以及 乙醇沉 淀法 提取 石
３ 结论
与对 照 组 相 比较 ，岬 ＜ ０ ． ０ ５
我 国在应 用天 然药物 方面 有着 悠久 的历 史，尤 其是在 肿瘤 疾 病 治疗 中对 中草药 的抗 癌作用 的研 究 ，许 多 中草药 提取 物对抗 肿
瘤 的研 究均被 深入 研究和 临床 应用 。众 多药理 研究 证实 ，石见 穿 无 水 乙醇 ，在 ４ ０ ℃ 环境 下放 置 ２ ４小时 后 过滤 、干燥 ，再将 其样 有 抗肿瘤 的作 用 ，临床 中多见 与其 他药 物配合 用于 肝癌 、 胃癌 的 治疗中 。本文 将 人体 胃癌 Ｓ Ｇ Ｃ 一 ７ ９ ０ １ 肿 瘤 细胞 作 为 评价 体 系 ， 研究石 见穿提 取物多糖 对抗肿瘤 的作用 。 在石 见穿多糖 的提取 中，
肿瘤 是人 体组 织的某 个细 胞在 各种致 癌 因素 的作用 下 ，失去 的肿 瘤细 胞并 以 １ ×１ ０ 个／ 孔接 种， ｌ Ｏ Ｏ ｕ ｌ ／ 孔 。４ ８ ｈ 后 将其 分为 了原 本基 因水 平的 正常 生长调 控， 出现异 常细 胞增 生 问题 ，造 成 １ Ｏ 、２ Ｏ 、４ Ｏ 、８ ０ 、１ ６ ０ ｕ ｇ ／ ｍ ｌ 多糖 组 以及等 体积 培 养液 的对 照 组 ６ 异常 的病变 。因此临 床治疗 中抑 制肿瘤 细胞 的生 长至关 重要 ， 组 ，各 组均 设 ５ 个 平行 孔并 分别加 入 ｌ Ｏ Ｏ ｕ ｌ同等浓 度 的多糖 ，在 本 组在 石见 穿多糖 对 Ｓ Ｇ Ｃ 一 ７ ９ ０ １ 肿瘤 细 胞抑 制 率 的实 验 结果 中 发 孵箱 内分别培 养 ２ ４ ｈ 、４ ８ ｈ ，培养 条件要 求 ３ ７ ￣ Ｃ、饱和 湿度 以及 ５ ％ 现 ，不 同浓 度 的石 见 穿多糖 对肿 瘤细 胞均 有抑制 作用 ，浓度 越 高
经 验 交 流
石见 穿提取物 多糖对 Ｓ Ｇ Ｃ － ７ ９ ０ １ 肿瘤细胞 的作用
代 贵江 刘晓冬 郑科文 。 吴宜艳 。
１ ． 牡丹江医学 院第二 附属医院
【 摘
１ ５ ７ ０ ０ ９ ：２ ．牡丹江医学 院附属红旗医 院
１ ５ ７ ０ １ １ ；３ ．牡丹江医学院药学院
１ ５ ７ ０ １ １
要 】 目的 ：研究分析石见 穿提取 物多糖对 Ｓ ＧＣ一 ７ ９ ０ １ 肿 瘤细胞 的作用。方 法：应 用热水提取 、４ ０ 、８ ０ 、１ ６ ０ ｕ ｇ ／ ｍｌ 不 同浓度 的 多糖组 以及等体积 培养液对 照组 共 ６组 ，应用 ＭＴ Ｔ法测定石见 穿提取
２ ． ２石 见穿多糖对 Ｓ Ｇ Ｃ 一 ７ ９ ０ １ 肿瘤 细胞 的抑制率
Ｍ Ｔ Ｔ 测 定显示 石见 穿提取物 多糖 对 Ｓ Ｇ Ｃ － ７ ９ ０ １ 肿 瘤细胞 有 明显
见穿有 效成分 多糖 ， 并应用 Ｍ Ｔ Ｔ 法分析 其对抑 制肿 瘤 活动的作用 ， 的抑 制作用 ，并 且呈现 时 间和剂 量 的依赖 性 ，各 浓度 石见 穿组 较
物 多糖的肿瘤抑 制率 ，对 比分析 ６组 ２ ４ ｈ 、４ ８ ｈ的 Ｓ ＧＣ － ７ ９ ０ １ 肿瘤 细胞 抑制率 。结 果 ：ＭＴ Ｔ测定显 示石见 穿多糖 对 Ｓ ＧＣ 一
７ ９ ０ １细胞有 明显的抑制作 用，并且呈现 时间和计量的依赖性。结论 ：石见 穿提取物通过 乙醇提 取法充分提 取石见 穿提取物 多糖 ，石见 穿多糖对 Ｓ Ｇ Ｃ－ ７ ９ ０ １ 肿瘤 细胞 的抑制作 用随着浓度和作 用时间的升 高而增强 。另外石见 穿多糖属于纯天然药材 ，
应用 热水 提取 法 以及 乙醇沉淀 法提 取多糖 ，石 见穿 多糖 的提取 率 可达 １ ． ８ ％ 。这种 工艺提 取率较 高稳定 可行 。
空干 燥所见 的黑色粗 便为石 见穿多糖 。 １ ． ３ 石见穿 多糖抗肿 瘤活性 的试验方 法
取Ｓ Ｇ Ｃ 一 ７ ９ ０ １ 肿瘤 细胞 接种 在 ９ ６孔板 中 ，要 求 为对 数生 长期
石见 穿提取 物 由笔者所 在 的药 学实验 室 自制，石 见 穿购于 上
海 市 中药饮片厂 ，生产批 号 ９ ８ １ １ ０ １ ，Ｓ Ｇ Ｃ 一 ７ ９ ０ １ 细 胞瘤株 由中 国医
学科 学院肿 瘤研 究所 提供 。 乙醇 、丙 酮 、氯 仿 、正丁 醇 以及源 化 钾 等全 部为分析纯 试剂 。 １ 。 ２石 见穿提取物 多糖 的提取 方法 将 石见 穿粉 ２ ０ ０ ｇ 放 置于 １ ５ ０ ０ ｍ ｌ的烧 杯 中，倒入 １ ０ ０ ０ ｍ ｌ的石 油 醚 ，将其 浸泡 ２ ４小 时进 行脱脂 ，浸泡后 过滤 ，药渣干烧 ，之后 采 用热 水 回流 的方式 提取 ３ 次 ，每 次提 取 ２小 时，三次 后合 并提
取 液 ，采 用旋 蒸 的方法将提 取液 浓缩 到 ３ ０ ０ ｍ ｌ 。再加 入 １ ２ ０ ０ ｍ ｌ的 品用 ４ ： １ 的Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ ｅ 试剂 （ 氯 仿和正 丁醇 ）除蛋 白， 连 续操作 六次 。 后得 到 的样 品醇沉 后依 次用 乙醇 、丙酮及 乙醚洗涤 两次 ，最 后真
可降低肿瘤患者脏 器负担 ，值得 临床推 广应用。
【 关键词 】石见 穿提取物 ；多糖 ；肿瘤抑制率
石见 穿学名华 鼠尾草 ，中医理论 中有活 血化瘀 、清 热解 毒、 活血 理气 等作 用 ，临床 中主要 将石 见穿 与其他 中药 配合 使用 ， 多 ２ ． １石见 穿多糖提 取率
为石 见穿 的医学 应用 提供 参考 ，为 中医治疗 肿瘤 和进 一步 研究 天 对 照组 Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ，如表 １ 。
然药物 及北药 开发奠定 基础 。
１材料 与方法 １ ． １药 品、试剂 与仪器
表 １ 石见穿提取物多糖对 Ｓ Ｇ Ｃ 一 ７ ９ ０ １ 肿瘤细胞 的抑制 率 （ ｘ±Ｓ ）
治疗恶性肿瘤常用的有效药物——石见穿
治疗恶性肿瘤常用的有效药物——石见穿石见穿为唇形科植物中华鼠尾草的全草。
性味：味辛，苦，性微寒。
归肝、脾经。
别名：紫参、五凤花、小丹参、月下红、乌沙草、墨面风、大发汗、石打穿、石大川、山缝拿、紫丹花、红根参、半枝莲、田芹菜、活血草。
资源分布：分布于江苏、安徽、江西、湖北、湖南、广东、广西、四川、云南等地。
近年来由于其多糖成分具有抗癌活性，成为研究热点。
它具有活血化瘀、清热利湿、散结消肿之功效。
临床应用功能主治：活血化瘀，清热利湿，散结消肿。
主治月经不调，痛经，经闭，崩漏，便血，湿热黄疸，热毒血痢，淋痛，带下，风湿骨痛，凛疡，疮肿，乳痈，带状疱疹，麻风，跌打伤肿。
用法用量：内服，煎汤，6~15g，或绞汁。
外用：适量，捣敷。
各家论述：《本草纲目》中讲到主骨痛、大风、痈肿，《苏州本产药材》中讲到治噎膈、痰饮气喘，《江苏药材志》中讲到治瘰疬。
1.妇科蔡小荪临床上子宫肌瘤和子宫内膜异位症，分经间期和月经期两步治疗。
经间期：于经净后治以桂枝茯苓丸（茯苓12g，桂枝3g，赤芍，丹皮，桃仁各10g），体质虚弱者则再加党参以扶正祛邪。
子宫内膜异位症加皂角刺30g，炙甲片9g，石见穿10g，三棱10g，莪术10g，水蛭10g等。
子宫肌瘤加鬼箭羽20g，水蛭5g，地鳖虫5g，夏枯草12g，海藻10g，专以活血化瘀消癥。
三棱、我术逐瘀通经消积；鬼箭羽既有破瘀散结之功，又有疗崩止血之效；夏枯草、海藻软坚散结；皂角刺、炙甲片同用通络排毒消肿；石见穿清热解毒，活血消肿；方中加人水蛭、地鳖虫以增消坚搜剔之力，《神农本草经》言其能“逐恶血、瘀血、月闭，破血积聚，利水道”。
子宫肌瘤的部分患者往往经量偏多或妄行，该方应在经净后服，3个月为1个疗程（内异Ⅲ号方：云茯苓12g，桂枝4.5g，赤芍、丹皮、桃仁各10g，皂角刺20g，鬼箭羽20g，石见穿15g）。
有文献报道，取石见穿15g自拟通管饮用于治疗输卵管阻塞性不孕，自拟石见穿汤治疗慢性盆腔炎。
丝石竹皂甙对人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响
青岛医药卫生2016年第48卷第3期•161 ••论丝石竹皂甙对人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响辛超1，彭玲2，张海平3，张倩3，孙珍妮4，岳麓4(1.青岛大学，山东青岛266000;2.青岛市卫生计生科技教育中心；3.青岛大学附属医院；4.青岛市市立医院）摘要：目的探讨丝石竹提取物丝石竹皂甙在体外对人胃腺癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡的影响 及其机制。
方法取对数生长期的SGC-7901细胞，加人含不同浓度（20、40、80吨/!!^)的丝石竹 皂甙分别培养处理24、48、72 h，以不含丝石竹皂甙细胞作为对照组。
M T T比色法检测细胞增殖 活性；流式细胞仪A n ne xin V/P I双染法检测细胞凋亡；流式细胞仪分析细胞周期；实时荧光定量 P C R检测W n t5a、W n t8b基因的表达情况。
结果M T T表明，丝石竹皂甙对胃癌细胞株SGC-7901 增殖的抑制随处理时间 的延长和浓度 的增加而增强 ，其 24h 的 IC50 值为 4(^g/m L;细胞凋亡分析显示，丝石竹皂甙作用24h，细胞凋亡率呈浓度依赖性增加，细胞G0/G1期阻滞，S期细胞数量 显著减少；定量P C R结果表明，丝石竹皂甙能下调W n t5a、W n t8b m R N A的表达，且呈浓度依赖性。
结论丝石竹皂甙通过下调W n t通路关键基因的表达，抑制胃癌细胞的增殖、促进其凋亡。
关键词：丝石竹皂甙；胃癌；增殖；凋亡；W n t基因中图分类号：R735. 2 文献标识码：A doi：10. 3969/j. issn.1006-5571. 2016. 03. 001Effect of Gypsophila saponins on proliferation andapoptosis of gastric adenocarcinoma SGC-7901 cellsX I N C h a o*，PEJS!G L in g，Z H A N G H a i-p i n g C}i a n，SUJS[ Zhen—n i，YU E L u.*Q ingdao U niversity ^ Q ingdao ^ Shandong 266000 ^ChinaAbstract：Objective T o investigate the a nti-p ro life ra tive a c tiv ity and apoptotic effect of G ypsophila saponins on human gastric adenocarcinoma SGC-7901 cells and its underlying m echanism.Methods SGC-7901 cells at lo g arith m ic g ro w th phase were obtained and cultured w ith G ypsophi-la saponins of d iffe re n t concentrations(20,40,80jLtg/m L)fo r 24,48 and 72h.Cells cultured w ithout G ypsophila saponins were served as co n tro ls.The cell v ia b ility was measured by M T T assay, cell apoptosis rate was determ ined by A n ne xin V/P I double staining flo w c y to m e try,cell cycle was analyzed by flo w cytom etry and the expressions of W n t5a and W n t8b m R N A were detected by quantitative R T-PCR.Results M T T assay showed G ypsophila saponins inh ibite d p ro life ratio n of SGC-7901 cells in a tim e and dose-dependent m anner,w ith IC50 value about 40jLtg/mL at 24h.A poptosis analysis revealed apoptotic SGC-7901 cells sign ifican tly increased in a dose-dependent manner after treatm ent w ith G ypsophila saponins fo r24h.Cell cycle analysis dem onstrated G ypsophila saponins trea ting fo r24h arrested m ost cells at G0/G1phases and sign ifican tly reduced cells at S phase in a dose-dependent m anner.Quantitative RT-PCR implied that the expression of W n t5a and W n t8b m R N A was down-regulated in a dose-dependent manner w ith the increased concentration of Gypsophila saponins.Conclusion Gypsophila saponins inhibit proliferation and promote apoptosis of gastric cancer cells through down-regulation of W nt genes expression.基金项目：山东省自然科学基金（编号：ZR2015H M085;ZR2015PH013)作者简介：辛超，在读硕士研究生，研究方向：消化道肿瘤通讯作者：彭玲，E-m ail:chaoranl07@Qingdao Med J ，2016，V 〇1 48 No. 3Key words ：G ypsophila saponins ； G astric cancer ；胃癌是我国常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率 呈逐年增加的趋势[1]。
穿破石、石见穿、穿山龙研究概况
穿破石、石见穿、穿山龙研究概况李勇华，杨勤中药穿破石、石见穿、穿山龙从药名看均有“穿”字，均有活血、疏筋、通络、散结功效，常用于治疗痹证、癞瘕、积聚等病证。
现对三药的研究概况综述如下。
1 传统认识穿破石为桑科植物小柘树或柘树的根。
味淡、微苦，性凉，人心、肝二经，功能止咳化痰、祛风清热、利湿通络、活血通经、散瘀止痛、解毒消肿。
主治风湿关节疼痛、黄疸、淋浊、蛊胀、闭经、劳伤咳血、跌打损伤、疔疮痈肿及用于晚期消化道癌肿、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌、鼻咽癌、肺癌、晚期恶性肿瘤等。
内服煎汤9 30g，鲜者可用至120g，或浸酒，外用适量捣敷。
石见穿，为唇形科植物华鼠尾草的全草。
味辛、苦，性微寒，归肝、脾经，功能活血化瘀镇痛、清热利湿解毒、化痰散结消肿、平喘。
主治月经不调、痛经、经闭、崩漏、带下、乳痈、湿热黄疸、便血、热毒血痢、淋痛、噎膈、痰喘、风湿骨痛、瘰疬、疮肿、带状疱疹、麻风、跌打伤肿等。
内服煎汤15 ~30g，或捣汁和服，外用适量捣敷。
穿山龙即薯蓣科薯蓣属植物穿龙薯蓣，以根状茎入药。
性温，味甘、苦，归肝、肾、肺经，功能舒筋活血、止咳化痰、祛风止痛。
主治腰腿疼痛、风湿痛、筋骨麻木、大骨节病、跌打损伤、咳嗽喘息等。
内服煎汤干品6 ~9g、鲜品30 45g，或浸酒，外用适量鲜品捣敷。
化学成分梁云贞等-t 从穿破石挥发性挥发油成分中鉴定出成分20种，其中正十六烷酸含量最高( 28.41% ) ，l 、2一苯二羧基丁基2一乙基已基酯含量次之( 14.06%) ，其他成分由高到低依次为蒿脑、胡椒基胺、二十六烷、枯茗醛和二丁基邻苯二甲酸酯。
刘建华等在穿破石挥发性成分的研究中，共提取出94个化合物，检测出64个，其中含量较高的是L一芳樟醇( 9.85% ) ，其次是石竹烯氧化物( 6.32% ) ，A 一草烯( 5.50%) ，1一辛醇( 5.06% ) ，草烯环氧化物( 4.23% ) ，橙花醇乙酸酯( 3.69% ) ，B一石竹烯( 3.68% ) 。
化痰通瘀解毒方水提取物对胃癌SGC-7901细胞划痕愈合及E-cadherin和MMP-2表达的影响
化痰通瘀解毒方水提取物对胃癌SGC-7901细胞划痕愈合及E-cadherin和MMP-2表达的影响刘蕾;彭佳;黄金玲;施慧;洪星辉;方海雁;刘亚运【摘要】目的观察化痰通瘀解毒方(Huatan Tongyu Jiedu Decoction,HTJD)水提取物对胃癌细胞SGC-7901E-钙黏蛋白(Epithelial cadherin,E-Cad)、基质金属蛋白酶-2(matrix metallopro-teinase 2,MMP-2)表达及其侵袭转移能力的影响.方法分别用含化痰通瘀解毒方水提取物5、10、20、30、40μg/mL的培养基干预人胃癌SGC-7901细胞24h后,采用划痕实验检测人胃癌细胞SGC-7901的侵袭迁移能力,采用酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测SGC-7901细胞中和E-Cad、MMP-2的表达水平.结果HTJD 10、20、30、40μg/mL浓度组与空白对照组相比,划痕愈合距离(△d)明显减小(P＜0.05或P＜0.01);HTJD 10、20、30、40μg/mL浓度组SGC-7901细胞上清液中E-Cad比空白对照组含量升高;细胞上清液中MMP-2的含量与空白对照组相比明显减少(P＜0.05或P＜0.01).结论化痰解毒方可抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭和迁移能力,其作用机制可能与下调MMP-2表达水平,上调E-Cad的表达水平有关.【期刊名称】《云南中医学院学报》【年(卷),期】2016(039)006【总页数】5页(P1-4,9)【关键词】化痰通瘀解毒方;胃癌细胞SGC-7901;侵袭转移;E-钙黏蛋白;基质金属蛋白酶-2【作者】刘蕾;彭佳;黄金玲;施慧;洪星辉;方海雁;刘亚运【作者单位】安徽中医药大学,安徽合肥230038;安徽中医药大学,安徽合肥230038;安徽中医药大学中西医结合研究所,安徽合肥230038;安徽中医药大学,安徽合肥230038;安徽中医药大学中西医结合研究所,安徽合肥230038;安徽中医药大学科技处,安徽合肥230012;安徽中医药大学,安徽合肥230038【正文语种】中文【中图分类】R285.5侵袭转移是恶性肿瘤细胞的重要生物学特征，也是胃癌患者肿瘤复发和死亡的重要原因之一[1]。
石见穿多糖浸膏提取方法的考察
石见穿多糖浸膏提取方法的考察
蔡锡潮;周海玲;郑显辉;罗明超;覃军
【期刊名称】《北方药学》
【年(卷),期】2014(000)012
【摘要】目的：研究石见穿多糖浸膏提取方法。
方法：以煎煮次数、加水量和加
热时间为考察因素，根据因素水平表，以干膏得率为评价指标，利用正交分析，优化提取工艺。
结果：最佳工艺为采用12倍水量，每次提取3h，共提取3次。
结论：该方法简单可行，符合研究要求。
【总页数】2页(P14-14,15)
【作者】蔡锡潮;周海玲;郑显辉;罗明超;覃军
【作者单位】广东省中医院药学部广州 510120;广东省中医院药学部广州510120;广东省中医院药学部广州 510120;广东省中医院药学部广州 510120;广东省中医院药学部广州 510120
【正文语种】中文
【中图分类】R283
【相关文献】
1.石见穿多糖对脂多糖和D-氨基半乳糖胺联合诱导小鼠急性肝衰竭的保护作用 [J], 黄旭;张浪;郝吉;程卓;冯天辉;舒广文
2.石见穿多糖抑制人胃癌细胞系MGC-803细胞迁移及其机制的初步研究 [J], 朱红岩;孙玉国;曲杰;卞永生
3.石见穿多糖对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫调节作用 [J], 程卓;赵文豪;黄旭;王冠;
吕叙鹏;吴超群;舒广文
4.石见穿提取物多糖对SGC-7901肿瘤细胞的作用 [J], 代贵江;刘晓冬;郑科文;吴宜艳
5.石见穿多糖通过Wnt/β-catenin信号通路调控骨肉瘤细胞的迁移和侵袭 [J], 李增;张瑞;张晓坚;杜书章
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
石见穿多糖对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫调节作用
石见穿多糖对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫调节作用程卓;赵文豪;黄旭;王冠;吕叙鹏;吴超群;舒广文【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2016(028)006【摘要】前期研究发现石见穿多糖(polysaccharides from Salvia chinensis Benth.,PSSC)能有效抑制H22肝癌细胞在昆明小鼠体内的生长.在此基础上,本研究进一步探讨了PSSC对H22荷瘤小鼠免疫器官和免疫细胞的影响.通过在昆明小鼠右腋皮下注射H22肝癌细胞构建荷瘤小鼠模型.采用流式细胞术、免疫组织化学染色、酶联免疫法等实验方法评价PSSC对CD4+T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)抗肿瘤免疫能力的影响.结果表明PSSC可以有效增加小鼠的脾脏/胸腺指数并促进Con A/LPS刺激的脾细胞增殖.同时,PSSC剂量依赖性地增加了荷瘤小鼠外周血单核细胞、脾脏及淋巴结中CD8+T细胞比例并提高CD8+T细胞与NK细胞在肿瘤组织中的组分含量.注射PSSC后,CD4+T细胞分泌免疫促进因子IFN-γ和IL-2的量增加,而分泌免疫抑制因子IL-4和IL-10的量减少.这一系列实验研究结果表明PSSC具有显著的抗肿瘤免疫增强活性.【总页数】7页(P846-851,915)【作者】程卓;赵文豪;黄旭;王冠;吕叙鹏;吴超群;舒广文【作者单位】中南民族大学药学院化学生物学教研室,武汉 430074;中南民族大学药学院化学生物学教研室,武汉 430074;中南民族大学药学院化学生物学教研室,武汉 430074;中南民族大学药学院化学生物学教研室,武汉 430074;中南民族大学药学院化学生物学教研室,武汉 430074;中南民族大学药学院化学生物学教研室,武汉430074;中南民族大学药学院化学生物学教研室,武汉 430074【正文语种】中文【中图分类】R967【相关文献】1.4—硒（代）硫酸酯多糖的抗肿瘤免疫调节作用及其机制研究 [J], 索金良2.刺五加多糖对Lewis荷瘤小鼠抗肿瘤免疫调节作用及机制的研究 [J], 周丽菁;龙婷婷;周星;鲍依稀3.石见穿多糖对脂多糖和D-氨基半乳糖胺联合诱导小鼠急性肝衰竭的保护作用 [J], 黄旭;张浪;郝吉;程卓;冯天辉;舒广文4.鳖甲多糖抗肿瘤免疫调节作用及其机理的研究 [J], 王慧铭;孙炜;黄素霞;潘宏铭;项伟岚5.甘草多糖对H22荷瘤小鼠的免疫调节作用 [J], 李晓冰;何小鹃;刘彪;徐荔;鞠大宏;姜淼;吕爱平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
半枝莲多糖对胃癌细胞SGC—7901的细胞活性影响
半枝莲多糖对胃癌细胞SGC—7901的细胞活性影响目的：研究半枝莲多糖（scutellaria barbata polysaccharides，SBP）对胃癌细胞SGC-7901细胞活性的影响。
方法：利用不同质量浓度半枝莲多糖处理SGC-7901胃癌细胞，对SBP处理后的SGC-7901进行细胞计数，利用MTT法检测半枝莲多糖对胃癌细胞SGC-7901的细胞活性的影响；采用荧光定量RT-PCR 对SGC-7901细胞中的野生型P53基因的表达进行检测。
结果：经SBP处理后胃癌细胞SGC-7901的细胞数明显减少，SBP对SGC-7901的细胞活性的抑制呈剂量依赖性，其中20 μg/ml SBP组的活性抑制率最高，野生型P53基因表达量随SBP质量浓度升高而增加，10、20 μg/ml SBP组P53基因的表达量高于阴性对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。
结论：半枝莲多糖通过上调抑癌基因P53以抑制胃癌细胞SGC-7901的生长活性。
[Abstract] Obejective：To study the effect of SBP（scutellaria barbata polysaccharides）on SGC-7901 gastric cancer cellular activity.Method：SGC-7901 gastric carcinoma cell was handled with SBP in different mass concentration，the cellular activity that SGC-7901 under the treatment of SBP was observed by MTT，the expression of wt-P53 gene was detected in SGC-7901 including which cultured by SBP.Result：The count of SGC-7901 which had been handled by SBP reduced significantly，the depression of cellular activity had dose-dependent，the most obvious depressive activity was in the 20 μg/ml SBP group，the level of wt-P53 expression in SBP cultured SGC-7901 cell group elevated with the increase of mass concentration of SBP.The level of P53 expression in the 10 and 20 μg/ml SBP group were higher than the negative control，the differences were statistically significant（P＜0.01）.Conclusion：SBP depresses the growth of SGC-7901 gastric tumor cell by upregulating P53 gene.[Key words] Scutellaria barbata polysaccharides；Gastric cancer；Depression of proliferation；Regulation of genome expression；Cell culture半枝蓮（Scutellaria barbata），作为一种民间常用中草药，其性寒，味辛、苦，具有清热解毒、散癖止血、利尿消肿等功效，常用于治疗咽喉肿痛、跌打伤痛、疗疮肿毒、水肿、黄疽、蛇虫咬伤等[1]。
石见穿萃取物对体外培养成骨细胞活性的影响
石见穿萃取物对体外培养成骨细胞活性的影响王朝元;徐宗【摘要】石见穿以95%乙醇抽提得总提物.分别用不同试剂萃取总提物,获得其石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物以及其水溶性成分.以体外培养成骨细胞MC3T3-E1为模型,用cck-8法测定细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒法测定了上述不同萃取物对成骨细胞增殖和分化的影响.结果表明:总提物在浓度10～-3、10-4、10-5mg/mL时和10-3mg/mL乙酸乙酯萃取物具有极显著的促进细胞增殖(P＜0.01)作用.10-4mg/mL总提物和10-3mg/mL乙酸乙醇萃取物显著促进成骨细胞ALP活性(P＜0.05).研究表明石见穿乙酸乙酯萃取物舍有能促进成骨细胞增殖和成骨活性的有效成分.【期刊名称】《中南民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2011(030)001【总页数】4页(P33-36)【关键词】石见穿;萃取物;成骨细胞;细胞增殖;成骨活性【作者】王朝元;徐宗【作者单位】中南民族大学,生命科学学院,武汉,430074;中南民族大学,生命科学学院,武汉,430074【正文语种】中文【中图分类】Q949.777.6;Q253石见穿(S alvia chinensisBenth)为唇形科植物华鼠尾草的地上部分[1,2],作为常用草药,其名见于《本草纲目》仅有疗效记载,本品曾收载于《中国药典》(1997年版)一部,为中草药的一种.其疗效包括清热解毒,活血止痛等.在中医中可用于治疗急慢性肝炎[3]、肾炎、风湿骨痛、癌症[4]、面神经麻痹、白带、痛经[5]、淋巴结结核、乳腺炎、跌打损伤、蛇咬伤、痈肿热痛等症,尤其具有治疗骨病的疗效.李时珍在《本草纲目》卷二十一草部记载有石见穿用于治疗骨痛.中医临床研究证实其具有一定的治疗骨相关疾病的疗效,包括:治疗风湿骨痛,跌打损伤的疗效[2].但是,其何种成分对成骨细胞的增殖和成骨活性有促进作用还不明确.石见穿对成骨细胞的代谢的影响尚未见相关的报道.因此,本研究旨在通过分离石见穿的不同组分,研究其具有治疗骨病疗效的有效成分,以期进一步研究其作用机理[6-10].1.1.1 药品与试剂石见穿药材采自湖北省利川县并保存于中南民族大学药学院标本馆,经中南民族大学药学院万定荣教授鉴定确认后用于本实验.其它主要试剂:己烯雌酚(DES)(购自武汉银信);新生小牛血清(美国Gibco Corporation);DEM E培养基(新西兰HyClone Corporation)、胰蛋白酶(杭州吉诺公司);CCK-8(日本同仁化学公司);碱性磷酸酶(AL P)试剂盒(南京建成生物技术有限公司)、考马斯亮兰试剂盒(南京建成生物技术有限公司).小鼠成骨样细胞系M C3T3-E1(购自中科院上海细胞研究所).1.1.2 仪器CO2培养箱(HF151UV CO2培养箱,上海力申科学仪器有限公司);XDS-1B型倒置生物显微镜(重庆光电仪器总公司);ELX808型酶标仪(美国Bio-Tek公司);旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂).1.2.1 药物的制备称取石见穿5 kg,经95%的乙醇浸泡24 h后过滤,残渣继续经95%的乙醇浸泡24 h,过滤,如此反复3次,合并滤液,减压回收溶剂获得浸膏189 g.浸膏用90%的甲醇溶液溶解,为总提物.部分总提物用石油醚萃取.溶液分为2层,上层为石油醚部位,减压回收得石油醚萃取物;下层部分用乙酸乙酯萃取.溶液分为2层,上层为乙酸乙酯部位,减压回收得乙酸乙酯萃取物;下层为水层加入等量正丁醇萃取,回收上层得正丁醇萃取物;下层为水部位,减压回收得水萃取物.称取已经真空干燥后所得恒重的总提物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物及水萃取物浸膏各0.01 g,加200μL DM SO 溶解,取其中100μL加入50mL培养基,用微孔滤膜过滤除菌,制成浓度10-1mg/mL药液.取此药液用培养基逐级稀释为10-2、10-3、10-4、10-5mg/mL不同浓度梯度备用.阳性对照:称取0.01 g己烯雌酚,用200μL DM SO 溶解,再以含10%小牛血清M EM 培养基稀释成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5mg/mL 过滤除菌备用. 阴性对照液:不加药的10% 小牛血清培养基.1.2.2 细胞培养用10%小牛血清的DM EM培养基培养M C3T3-E1细胞.细胞传代时,将长满M C3T3-E1细胞的培养瓶中的培养液倾倒,用PBS清洗2次,在培养瓶中加入0.25%胰蛋白酶0.5 mL,消化2～3 m in,待大多数细胞变圆脱落,加入4 mL灭菌的10%的小牛血清和双抗的培养液终止消化.1500 r/m in离心沉淀细胞.1.2.3 成骨细胞增殖实验1)CCK-8法吸光度与细胞数目曲线测定.将收获的成骨细胞分别以密度0、0.2×104、0.4×104、0.8×104、1.6×104细胞/孔接种于96孔板培养24 h,每种处理设5个复孔.采用cck-8法[11],用酶标仪于450 nm处测定各孔的吸光度. 2)不同萃取物对成骨细胞增殖影响.按密度0.4×104细胞/孔接种于96孔板,培养24 h,换液,加入含相应萃取物的培养基100μL,每组设5个复孔.同时以不加药培养基为空白对照,以己烯雌酚为阳性对照.培养72 h后,向每孔加入10 μL cck-8,3 h 时后测定OD值[11].1.2.4 成骨细胞分化功能测定1)AL P试剂盒标准曲线测定.细胞悬液分别以密度 0、0.2×104、0.4×104、0.8×104、1.6×104、3.2×104细胞/孔接种于96孔板,每孔设5个复孔,培养24 h,加0.1%T riton X-100/PBS液裂解细胞12 h,按AL P试剂盒介绍的方法测定成骨细胞的碱性磷酸酶的活性.2)不同萃取物对成骨细胞活性的影响.细胞悬液按1×105细胞/孔密度接种于96孔板,培养24 h,更换含药培养基,每孔100μL,继续培养7 d后裂解细胞,按AL P试剂盒法于520 nm处测定吸光度,按考马斯亮兰法于595 nm处测定蛋白质含量(g/L).AL P活性以U/gprot表示.1.2.5 统计方法实验所得数据用SPSS10.0软件系统进行显著性差异分析处理,当P≤0.05,表示两者有显著差异;当P≤0.01,表示两者有极显著差异.2.1.1 CCK-8法线性关系考察以5孔吸光度的平均值(y)与细胞数(x)作线性回归,得回归方程:y=0.2396x+2.5503(R2=0.9981,n=5).由图1可见,在(0～1.6×104)细胞/孔范围内,细胞数与吸光度具有良好的线性关系.2.1.2 不同萃取物对成骨细胞增殖的影响以图1结果为基础,按0.4×104细胞/孔接种96孔板,并用萃取物处理细胞,结果见表1.由表1可知,10-3～10-5mg/mL总提物明显促进成骨细胞的增殖(P＜0.05);10-3～10-5mg/mL乙酸乙酯萃取物能极明显地促进成骨细胞的增殖(P＜0.01),增值率达到39%,正丁醇部位10-1、10-2、10-5能明显地促进成骨细胞的增殖(P＜0.05).且所有药物处理组的细胞增殖率均高于阳性对照组.2.2.1 AL P试剂盒法线性关系的考察以5孔吸光度的平均值(y)与细胞数目(x)作线性回归,得回归方程:y=0.03955x+1.1067(R2=0.9741,n=5).由图2可见,在(0～3.2×104)细胞/孔范围内,细胞数与吸光度(AL P活性)呈良好的线性关系.2.2.2 石见穿萃取物对成骨细胞分化的影响成骨细胞总蛋白测定结果见表2.以图2结果为基础,细胞悬液按1×105细胞/孔接种于96孔板,并用萃取物处理成骨细胞,结果见表3.由表3可知,10-3～10-5mg/mL 总萃取物,10-4～10-5mg/mL乙酸乙酯萃取物,10-3mg/mL正丁醇萃取物能明显提高成骨细胞AL P活性水平(P＜0.05),尤其10-3mg/mL乙酸乙酯萃取物能极显著提高成骨细胞AL P活性水平(P＜0.01).其它萃取物对成骨细胞的分化均无明显影响.本研究首次以体外培养的成骨细胞M C3T3-E1为模型,研究了石见穿萃取物对骨细胞增殖和成骨活性的影响.结果表明石见穿的部分萃取物对成骨细胞均具有一定的促进增殖和成骨活性的影响.由此对于进一步研究石见穿治疗骨折药效的机理提供了基础.研究结果表明,石见穿的多种萃取物对成骨细胞均具有一定的促进增殖的作用.其中,以乙酸乙酯萃取物的效果最好.一般乙酸乙酯萃取物的成分主要为黄酮类化合物,该类化合物已证实对骨折的愈合具有较好的促进作用.而骨折的愈合与成骨细胞的增殖和分化有密切关系.因此,笔者初步判断,石见穿的乙酸乙酯萃取物可能含有促进成骨细胞成骨活性的该类化合物.碱性磷酸酶是成骨细胞活性的主要标志.在骨骼发育及骨折愈合等情况下,旺盛生长和分化的成骨细胞表现出强烈的碱性磷酸酶活性.与上述细胞增殖结果一致,石见穿的乙酸乙酯萃取物对成骨细胞碱性磷酸酶活性具有较强的诱导作用.此研究初步证实了石见穿治疗骨折的药效,笔者下一步将进一步分离纯化石见穿的化学组分,分析各组分对成骨细胞的增殖和分化的影响,以期查明其治疗骨病的有效成分,为未来开发该药提供依据.【相关文献】[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典:一部[M].北京:人民卫生出版社,1977:138.[2] 万定荣,陈家春,余汉华.湖北药材志[M].北京:科学技术出版社,2002:90-94.[3] 郑海英,武一曼,林信宽,等,流式细胞术检测石见穿多糖诱导的肝癌细胞凋亡率[J].福建中医学院学报,2009;19(3):20-21.[4] 郑海英,徐炜,郑晓燕,等,石见穿多糖的提取及其对肝癌细胞增值的抑制作用[J].中国中医药科技,2008;15(5):360-362.[5] 王梅,韦小芳,杨艳琪.石见穿对大鼠子宫内膜异位症模型形态及结构的影响[J].中医药学报,2006.34(1):18-22.[6] 许美娟,林永东.石见穿化学成分的研究[J],中草药,1987,18(9):430-432.[7] Hou G Q,Xue L X.A n activated mTOR/p 70S6K signaling pathway in esophageal squamous cell carcinoma cell lines lines and inhibition of the pathway by rapamycin and siRNA against mTOR[J].Cancer L etters,2007,253:236-248.[8] Hu YM,L iu C,Cheng KW,et al.Sesquiterpenoids from Homalomena Occulta affect osteoblast proliferation, differentiation and m ineralization in vitro[J].Phytochemistry,2008,69:2367-2373.[9] Isama K,T suchiya T.Enhancing effect of poly(L-lactide)on the differentiation ofmouse osteoblast-like M C3T3-E1 cells[J].Biomaterials,2003,24:3303-3309.[10] Kanazawa I,Yamaguchi T,Yano S,et al.M etform in enthances the differentiation and m ineralization of osteoblasticM C3T3-E1 cells via AM P kinase activation as well as eNOS and BM P-2 expression[J]. Biochem ical and Biophysical Research Communications,2008,375:414-419.[11] Ryuji Hamamoto,Yoichi Furukawa,M asashiM orita,et al.SM YD3 encodes a histone methyltransferase involved in the proliferation of cancer cells[J].N atureCellBiology,2004(6):731-740.。
化痰通瘀解毒方提取物对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响
化痰通瘀解毒方提取物对人胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力的影响方海雁;刘蕾;施慧;黄金玲;洪星辉【摘要】目的观察化痰通瘀解毒方提取物对人胃癌细胞株SGC-7901侵袭转移能力的影响。
方法 10、20、40μg/mL化痰通瘀解毒方提取物分别干预人胃癌细胞SGC-7901 24h后,采用Transwell小室法检测人胃癌细胞SGC-7901的侵袭、迁移能力,分别采用酶联免疫吸附试验和Western blot法检测SGC-7901细胞中基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP-9）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达水平。
结果 4组SGC-7901的侵袭细胞数和迁移细胞数以及E-cadherin和MMP-9表达水平比较,差异均具有统计学意义（P〈0.05）,呈现明显的剂量依赖性,以高剂量化痰解毒方提取物的效应最明显。
结论化痰解毒方可抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭和迁移能力,其作用机制可能与上调E-cadherin表达,下调MMP-9的表达有关。
【期刊名称】《安徽中医药大学学报》【年(卷),期】2016(035)003【总页数】4页(P67-70)【关键词】化痰通瘀解毒方胃癌细胞 SGC-7901 侵袭转移 E-钙黏蛋白基质金属蛋白酶9【作者】方海雁;刘蕾;施慧;黄金玲;洪星辉【作者单位】[1]安徽中医药大学科技处,安徽合肥230012;[2]安徽中医药大学研究生院,安徽合肥230038;[3]安徽中医药大学中西医结合研究所,安徽合肥230038【正文语种】中文【中图分类】R285.5胃癌是临床常见的消化道恶性肿瘤之一，其发病率和病死率均居于恶性肿瘤的第3位[1]。
胃癌细胞的浸润、侵袭和转移是导致胃癌进展及术后复发的主要原因[2]。
既往研究[3-4]发现，化痰通瘀解毒方(Huatan-Tongyu-Jiedu Decoction，HTJD)能有效抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖和移植瘤小鼠微血管的生成。
石见穿多糖的提取及其对肝癌细胞增殖的抑制作用
２ 方 法 与 结 果
石见穿为唇形科植 物华 鼠尾 Ｓ／ ｈｎｎ／Ｂｎ ．的全 ａｖ ／ ｓ ｅｔ ￣ｃ ｅ ￣ ｈ
草 。 味苦 、 ， 平 。 具 有 清 热 解 毒 、 血 镇 痛 之 功 能 。 临床 辛 性 活
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３０ ・ ６
中国 中医药科技 ２０ 年 ９ ０８ 月第 １ 卷第 ５ ｓ ２０ ｏ １ Ｎ ． ５ 期 印． ８Ｖ１ ５ ｏ５ 细 胞 增 殖 的 抑 制 作 用 ＊
郑海音 徐 伟 郑晓 燕 汤须 崇
（ 建 中医 学 院 ・ 州 ３０ ０ ） 福 福 ５ １８
摘
要 目的 ： 究石见 穿中多糖提取 的最优条件及 其在 体外对人 肝癌 细胞增 殖的抑制作 用。方 法： 研 通
过正交实验确定提取 多糖 的优化条件 ， 用蒽酮 一硫酸 法测定 多糖 的含量 。噻唑蓝还原法（ Ｔ Ｍ ｒ法） 检测石 见穿多糖对体￣ ｚ 肝癌 细胞增 殖的抑制作 用。结果 ： ｌ． － 水浴温度 ９ ℃， ０ 料液 比 ｌ１ ， 取 时间 ２５小时， ：０ 提 ． 提 取 ４次为石见 穿提 取的最佳 工艺 ， 该条 件下石见 穿 多糖含 量最 高， 均为 ０００ ｇ 。３剂量 的石见 穿多 平 ．３８／ ｇ 糖对肝癌 细胞增殖 的抑 制率 分别为 ２ ．２ ，８２ ％和 ５９ ％。结论 ： 工 艺可用 于石见 穿 多糖 的提 ６９ ％２ １．６ ．５ 该 取， 石见 穿多糖对肝癌细胞的增殖有明显抑 制作 用。 主题 词 石见 穿／ 分析 多糖 工艺学， 制药 石见 穿多糖／ 药理 学 购 自福建 同春药业有限公司 ， 我院 中药鉴定教研室鉴定为 经