观察细胞骨架实验报告
细胞骨架的染色与观察实验报告

细胞骨架的染色与观察实验报告一、实验背景细胞骨架是指细胞内由蛋白质构成的一种网状结构,可以支撑细胞的形态、维持细胞的内部有序、参与细胞的运动和分裂等生命活动。
细胞骨架的主要成分包括微丝、中间丝和微管,这三种蛋白质纤维在细胞内的分布和作用有所不同。
本实验旨在通过细胞骨架的染色与观察,了解细胞骨架的结构和特点。
二、实验材料和方法1. 材料:小鼠肝脏组织样本、PBS缓冲液、甲醛、甲醛酸化钠、丙酮、甲醛氧化物、溴化乙酰、荧光素鸟嘌呤、荧光偶氮染料等试剂。
2. 方法:(1)将小鼠肝脏组织取出,加入PBS缓冲液冲洗去血液和其他保留物,然后用甲醛固定细胞构象。
(2)将甲醛酸化钠液加入细胞中,使细胞膜通透性增加,便于荧光偶氮染料和溴化乙酰进入细胞。
(3)加入荧光偶氮染料和溴化乙酰,使细胞骨架染色。
(4)用溶液冲洗染色的细胞样本,使细胞骨架显色。
(5)观察染色后的细胞骨架结构,并记录观察结果。
三、实验结果经过实验操作和观察,我们可以发现小鼠肝脏细胞中微丝和微管的分布是在细胞膜内外,其网状结构是有规律的。
中间丝则是位于细胞的核周以及胞质中,主要作用是支撑和维持细胞形态。
在荧光显微镜下观察,细胞骨架结构清晰,可见荧光偶氮染料和溴化乙酰显色的微丝、中间丝和微管纤维。
四、实验结论通过本实验,我们知道细胞骨架是由微丝、中间丝和微管等纤维蛋白质组成的一种网状结构,主要作用是支撑细胞的形态,参与细胞的运动和分裂等生命活动。
通过细胞骨架的染色与观察,可以了解细胞骨架的结构和特点。
实验结果显示,细胞骨架结构清晰,可见微丝、中间丝和微管纤维的荧光显色。
观察细胞骨架实验报告

观察细胞骨架实验报告观察细胞骨架实验报告细胞是构成生物体的基本单位,而细胞骨架则是维持细胞形态和功能的重要组成部分。
通过观察细胞骨架实验,我们可以深入了解细胞骨架的结构和功能,进而探索细胞内部的奥秘。
实验过程中,我们选取了小鼠肺组织中的细胞进行观察。
首先,我们将细胞固定在载玻片上,并用甲醛进行固定处理。
接下来,我们使用荧光染料标记细胞骨架的主要成分,如微丝、中间丝和微管。
通过荧光显微镜观察,我们可以清晰地看到细胞骨架在细胞内的分布情况。
在实验中,我们发现细胞骨架呈现出丰富的结构。
微丝是由肌动蛋白蛋白质组成的细丝状结构,主要分布在细胞的边缘和质膜下。
中间丝是由多种细胞骨架蛋白组成的纤维状结构,主要分布在细胞核周围和细胞质中。
微管是由α-和β-微管蛋白组成的管状结构,主要分布在细胞质中,并参与细胞分裂和细胞器运输等重要生物学过程。
通过观察细胞骨架的实验,我们还发现细胞骨架在细胞内的功能十分重要。
微丝可以通过收缩和伸长调控细胞的形态变化和运动。
中间丝可以提供细胞的结构支持,维持细胞的形态稳定。
微管则可以作为细胞器运输的轨道,将细胞器从一个位置运输到另一个位置。
此外,我们还观察到细胞骨架与其他细胞结构之间的相互作用。
例如,细胞骨架与细胞质基质之间通过细胞外基质蛋白相互连接,形成细胞外基质-细胞骨架-细胞膜的结构。
这种结构可以提供细胞的支持和稳定,并参与细胞的信号传导和细胞外基质的合成。
通过观察细胞骨架的实验,我们不仅可以深入了解细胞骨架的结构和功能,还可以进一步研究细胞骨架与细胞生理过程的关系。
例如,我们可以通过干扰细胞骨架的形成和功能,来研究其对细胞分裂、细胞运动和细胞信号传导等过程的影响。
这些研究将有助于我们更好地理解细胞生物学的基本原理,为疾病的治疗和细胞工程的应用提供理论基础。
总之,通过观察细胞骨架的实验,我们可以深入了解细胞骨架的结构和功能,进一步探索细胞内部的奥秘。
细胞骨架在维持细胞形态和功能方面起着重要作用,与其他细胞结构之间存在着相互作用。
细胞骨架实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 理解细胞骨架的基本概念及其在细胞生物学中的重要性。
2. 掌握使用荧光显微镜观察细胞骨架的方法和技巧。
3. 认识细胞骨架的主要组成成分,包括微丝、微管和中间纤维。
4. 分析细胞骨架在不同细胞类型和生理状态下的形态和分布。
二、实验原理细胞骨架是真核细胞内由微丝、微管和中间纤维组成的网状结构,负责维持细胞形态、细胞运动、物质运输、信号传导等重要功能。
微丝主要由肌动蛋白组成,微管主要由α-和β-微管蛋白组成,而中间纤维则由多种蛋白质组成。
细胞骨架的结构和动态变化对细胞的正常生理功能至关重要。
三、实验材料与仪器材料:1. 植物细胞样本(如洋葱鳞片叶表皮细胞)2. 动物细胞样本(如小鼠成纤维细胞)3. 荧光标记的细胞骨架蛋白抗体4. 抗荧光标记的抗体5. 胶体金标记的抗体6. 封片剂仪器:1. 荧光显微镜2. 激光共聚焦显微镜3. 冷冻切片机4. 液氮5. 恒温培养箱6. 电子显微镜四、实验步骤1. 样本制备:- 植物细胞样本:取洋葱鳞片叶表皮细胞,用2%的戊二醛固定,进行冷冻切片。
- 动物细胞样本:培养小鼠成纤维细胞,用2%的戊二醛固定,进行冷冻切片。
2. 荧光标记:- 将切片置于含有荧光标记的细胞骨架蛋白抗体的溶液中,室温孵育一段时间。
- 洗涤切片,去除未结合的抗体。
3. 抗荧光标记抗体:- 将切片置于含有抗荧光标记抗体的溶液中,室温孵育一段时间。
- 洗涤切片,去除未结合的抗体。
4. 胶体金标记抗体:- 将切片置于含有胶体金标记抗体的溶液中,室温孵育一段时间。
- 洗涤切片,去除未结合的抗体。
5. 封片:- 将切片置于封片剂中,覆盖玻片,封片。
6. 显微镜观察:- 使用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察细胞骨架的形态和分布。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶表皮细胞:- 在荧光显微镜下观察到洋葱鳞片叶表皮细胞的细胞骨架主要由微丝和微管组成。
- 微丝呈网状分布,主要位于细胞质膜内侧。
- 微管呈束状分布,主要位于细胞核周围。
骨架的实验报告

一、实验目的1. 了解细胞骨架的基本概念和组成成分。
2. 掌握观察细胞骨架的原理和方法。
3. 通过实验,认识细胞骨架的形态结构及其功能。
二、实验原理细胞骨架是真核细胞中的一种网状结构,由蛋白质纤维组成,主要包括微丝、微管和中间纤维。
细胞骨架在维持细胞形态、细胞运动、物质运输、信号传导和细胞分裂等方面发挥着重要作用。
观察细胞骨架的方法主要有荧光标记法和化学染色法。
本实验采用化学染色法观察细胞骨架。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:洋葱鳞片叶、显微镜、载玻片、盖玻片、TritonX-100、Mbuffer、考马斯亮蓝R250等。
2. 实验仪器:光学显微镜、离心机、冰箱、高压蒸汽灭菌器等。
四、实验步骤1. 取洋葱鳞片叶,用刀片切下薄层,置于载玻片上。
2. 将载玻片置于室温下,用吸水纸吸去多余的水分。
3. 向载玻片上的洋葱鳞片叶加入2ml PBS液,湿润5分钟。
4. 吸去PBS液,向载玻片上加入1.5ml 1% TritonX-100,浸没20分钟。
5. 吸去TritonX-100,向载玻片上加入2ml Mbuffer,置于摇床上5分钟,重复两次。
6. 将载玻片上的洋葱鳞片叶加入适量考马斯亮蓝R250染色液,染色5分钟。
7. 吸去染色液,用蒸馏水冲洗载玻片。
8. 将盖玻片置于载玻片上,用显微镜观察细胞骨架。
五、实验结果与分析在显微镜下观察,可见洋葱鳞片叶表皮细胞呈现出明显的细胞骨架结构。
细胞骨架主要由微丝和微管组成,呈现出网状结构。
微丝直径约为7nm,微管直径约为25nm。
细胞骨架在细胞膜周围分布较为密集,细胞核周围分布相对较少。
细胞骨架在维持细胞形态、细胞运动、物质运输、信号传导和细胞分裂等方面发挥着重要作用。
以下是细胞骨架的主要功能:1. 维持细胞形态:细胞骨架在细胞内起到支撑作用,使细胞保持一定的形态和结构。
2. 细胞运动:细胞骨架参与细胞内物质运输、细胞迁移和细胞分裂等过程,为细胞运动提供动力。
细胞骨架实验报告分析

细胞骨架实验报告分析
实验目的:分析细胞骨架的结构和功能。
实验方案:
1. 从培养皿中取出细胞样本。
2. 用PBS缓冲液洗涤样本,去除杂质。
3. 采用适当的方法对细胞样本进行固定,如使用甲醛或冷冻固定法。
4. 进行细胞透明化处理,如使用醋酸正己酯或醋酸乙腈进行处理。
5. 使用荧光染料标记细胞骨架,如荧光标记的抗体。
6. 进行显微观察,使用显微镜观察细胞骨架的形态和结构,并记录观察结果。
7. 分析细胞骨架的组成和功能。
实验结果:
观察细胞骨架后,我们发现细胞骨架主要由微观结构组成,包括微丝、微管和中间丝。
微观结构在细胞内起着维持细胞形态、细胞运动和细胞分裂等重要功能。
微丝由细胞骨架蛋白聚合体组成,主要存在于细胞质中。
微丝的直径约为7纳米,长度可变。
微丝在细胞运动、肌肉收缩等方面起到重要作用。
微管由微管蛋白聚合物组成,是一种管状结构。
微管的直径约为25纳米。
微管在细胞分裂、细胞内物质运输等过程中起到
重要作用。
中间丝是由中间丝蛋白聚合物组成的,直径约为10纳米。
中间丝在细胞内提供机械支持,使细胞具有较强的抗压性。
实验结论:
细胞骨架是细胞内的重要组成部分,对维持细胞形态、细胞运动和细胞分裂等过程起着重要作用。
细胞骨架的主要组成包括微丝、微管和中间丝,它们通过不同的机制实现细胞的各种功能。
对于进一步研究细胞活动、细胞生物学和生物医学领域的研究具有重要意义。
实验三细胞骨架的光学显微镜观察(5篇)

实验三细胞骨架的光学显微镜观察(5篇)第一篇:实验三细胞骨架的光学显微镜观察实验三细胞骨架的光学显微镜观察一、实验目的掌握植物细胞骨架的光镜标本制作方法。
细胞骨架是指细胞质中纵横交错的纤维网络结构,按组成成分和形态结构的不同可分为微管、微丝和中间纤维。
它们对细胞形态的维持、细胞的生长、运动、分裂、分化和物质运输等起重要作用。
光学显微镜下细胞骨架的形态学观察多用1% Triton X-100处理细胞,可使细胞膜溶解,而细胞骨架系统的蛋白质被保存,再用考马斯亮兰R250染色,使得胞质中细胞骨架得以清晰显现。
二、材料、试剂和仪器1.材料新鲜洋葱鳞茎、人口腔上皮细胞2.试剂1)M缓冲液(pH 7.2)各成分终浓度为:50mmol/L咪唑(MW:68.08),50mmol/L KCl(MW:74.55),0.5mmol/L MgCl2?6H2O(MW:203.30),1mmol/L EGTA(MW:380.36),0.1mmol/L EDTA-Na2(MW:372.24),1mmol/L DTT(MW:154.3)2)6mmol/L PBS磷酸缓冲液(pH 6.5):KH2PO4 : Na2HPO4?2H2O = 7:3(见附录3 查磷酸缓冲液的配置)3)0.7% NaCl生理盐水4)1% Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)溶于 M-缓冲液5)3% 戊二醛100mL: 25% 戊二醛取12mL ,PBS 88mL6)0.2% 考马斯亮蓝R250染液 200mL:考马斯亮蓝R250 0.2g,甲醇46.5mL,冰乙酸7mL,蒸馏水46.5 mL3.仪器光学显微镜,镊子,剪刀,试管,表面皿,滴管,载玻片,盖玻片,灭菌牙签,1.5mL离心管,1mL吸头,1mL取液器,酒精灯,染色缸细胞骨架动画三、实验程序四、结果与分析洋葱鳞茎外层与内层的表皮细胞比较(放大倍数10×20)五、思考题1.光镜下观察到的细胞骨架有何形态特征?2.对实验成功或失败的原因进行讨论。
细胞骨架的观察实验报告

细胞骨架的观察实验报告细胞骨架的观察实验报告细胞是生命的基本单位,它们构成了人体和其他生物体的组织和器官。
细胞内存在着许多重要的结构,其中之一就是细胞骨架。
细胞骨架是由微观的蛋白质纤维组成的网络结构,它在细胞内起着支撑和维持细胞形态、运动和分裂等重要功能。
为了更好地理解细胞骨架的结构和功能,我们进行了一系列的观察实验。
实验一:荧光染色观察细胞骨架我们首先使用了一种叫做荧光染色的技术来观察细胞骨架。
在实验中,我们选取了一种叫做荧光素的染料,它能够与细胞骨架中的蛋白质结合,并发出荧光信号。
我们将这种染料加入到培养皿中的细胞培养液中,让其与细胞骨架结合。
然后,我们使用荧光显微镜观察细胞,并通过摄像机将观察到的图像记录下来。
在观察的过程中,我们发现细胞骨架呈现出一种网状结构。
这个结构覆盖了整个细胞,并且与细胞膜相连。
通过进一步的观察,我们发现细胞骨架在不同类型的细胞中有所差异。
在肌肉细胞中,细胞骨架形成了一种有序的纤维排列,这种排列有助于肌肉的收缩和运动。
而在神经细胞中,细胞骨架则呈现出一种分支状结构,这种结构有助于神经细胞的延伸和传导。
实验二:细胞骨架的动态观察为了更深入地了解细胞骨架的功能,我们进行了细胞骨架的动态观察实验。
在这个实验中,我们使用了一种叫做活细胞荧光显微镜的仪器,它能够实时观察细胞骨架的运动和变化。
通过实验,我们发现细胞骨架是一个动态的结构,它可以根据细胞的需要进行重组和重塑。
当细胞需要移动或分裂时,细胞骨架会重新组织,形成一个新的结构,以支撑和维持细胞的活动。
而当细胞需要改变形态或进行细胞内物质的运输时,细胞骨架会发生变化,以适应细胞的需求。
此外,我们还观察到细胞骨架在细胞运动中的重要作用。
通过实验,我们发现细胞骨架能够通过与细胞膜的相互作用,推动细胞的移动。
当细胞需要移动时,细胞骨架会向前伸展,并与细胞膜相连,通过收缩和伸展的运动,推动细胞的移动。
细胞骨架在细胞分裂中也起着重要的作用。
细胞骨架的显示 (实验)

实验项目名称细胞骨架的显示一、实验目的1.掌握细胞骨架的显色方法2.掌握荧光显微镜的使用方法3.了解荧光显微镜观察细胞骨架的基本形态结构二、实验原理1. 细胞骨架(cytoskeleton)是真核细胞中由蛋白质聚合而成的三维的纤维状网架体系。
细胞骨架包括微丝、微管和中间纤维。
细胞骨架在维持细胞形态,承受外力、保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用2.细胞骨架研究中常用药物及荧光标记物三、实验仪器和材料、试剂1.材料:A549(人肺泡腺癌基底上皮细胞)2.试剂:0.01M PBS,0.5%Triton X-100,4%多聚甲醛,FlTC-phalloidin3.仪器:荧光显微镜四、实验步骤(一)细胞骨架的显示1.吸出培养皿中的培养基,加入2mlPBS 静置2min洗涤,重复洗涤2次;2.加入 2ml37℃预温过的 4%多聚甲醛固定15min,吸出,PBS洗涤2次(方法同上)3.加入2ml0.5%TritonX-100 处理10min,吸出,PBS洗涤2次(方法同上)4.在第一块平整的封口膜(疏水面)上滴加20ul稀释好的FITC-phalloidin(染色液),小心取出细胞爬片,细胞面向下孵育于染色液中,室温下避光染色30min:5.爬片边沿位置用吸水纸吸干染液,PBS洗涤3次(虹吸法)。
洗涤步骤:在爬片—5端用注射器加入PBS约0.1ml,吸水纸在爬片另一端吸出PBS,即完成1次洗涤。
(尽量避光,且不要移动细胞爬片,防止细胞落):6.在第二块平整的封口膜(疏水面)上滴加20ul稀释好的DAP1,将步骤5的爬片平移至第二块封口膜上,室温避光孵育10min;7.吸水纸吸干DAPI,PBS虹吸法洗涤2次(尽量避光)。
8、取出爬片平移到载玻片上(讲台领)(1块载玻片可放2张爬片):9、荧光显微镜下观察并拍照。
先用UV光拍摄,再用蓝光拍摄。
10.图片处理。
请务必按照老师示范图进行排版并彩色打印出来。
(二)荧光显微镜使用步骤1.将已处理好的样本放到载物台上2.将10X物镜转入光路,调节载物台纵横移动手轮,将标本移入光路3.调节滤光片转换器,选择3档UV光观察:4.调节粗条手轮,看清荧光图片轮廓后,再调节微调手轮调节,直至看到清晰的荧光图像。
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观察细胞骨架实验报告篇一:洋葱鳞片叶表皮细胞的细胞骨架观察实验报告洋葱鳞片叶表皮细胞的细胞骨架观察实验报告吴若自然科学大类单周四 119 XX/11/17一、实验目的:1. 掌握用光学显微镜观察植物细胞骨架的原理及方法。
2. 认识细胞骨架的形态,联系细胞骨架的功能。
二、实验原理:细胞骨架是指真核细胞中的蛋白纤维网架体系。
广义的细胞骨架包括细胞核骨架、细胞质骨架、细胞膜骨架和细胞外基质。
根据蛋白质纤维的直径、组成成分和组装结构的不同可分为微丝、微管和中间纤维。
细胞骨架对于维持细胞的形态结构及细胞运动、物质运输、能量转换、信号传导和细胞分裂等有重要的作用。
本试验采用去垢剂TritonX-100 的缓冲液处理植物材料时,可将细胞的膜结构和大部分蛋白质抽提掉,但细胞骨架系统的蛋白却被保存下来,后者用考马斯亮蓝R250 染色,在光学显微镜下可见一种网状结构。
三、操作步骤:1. 取洋葱内皮表层膜1cm2(可多取两片)左右置于含2mlPBS液的小皿中湿润5min后,吸去PBS2. 向小皿中加入1.5mlTritonX-100(1%),浸没20min后,吸走TritonX-1003. 向小皿中加入2mlMbuffer浸没置于摇床上5min,重复两次后,吸走Mbuffer4. 向小皿中加入105ml戊二醛(3%),浸没30min后,吸走戊二醛5. 向小皿中加入2mlPBS,浸没置于摇床上5min,重复两次6. 取出表皮平铺于载玻片上,滴加100微升,静置100min后吸取染料7. 向表面滴加蒸馏水洗涤后用纸巾洗去液体,重复两次8. 盖上盖玻片,擦去残余液体,用光学显微镜观察并拍照记录四、实验结果:如图所示,洋葱内表皮细胞轮廓清晰可见,细胞壁及其分界明显可见。
可观察到线性纤维交织而成的网状结构,同一细胞内各处骨架密集度不均匀,细胞核区域纤维较密集,蓝色较重。
调节显微镜焦距可观察到细胞不同横切面的网络结构的变化,表明细胞骨架以三维立体结构的形式分布在整个细胞内。
五、思考题:1. 简述细胞质骨架的基本类型及结构特征答:微管:中空的圆筒状结构,直径为18nm~25nm,构成微管的主要成分是微管蛋白。
这种蛋白有两个亚基,即α,β亚基它们成螺旋形排列。
进化高度保守。
微丝:由肌动蛋白组成的直径约为7nm的骨架纤维,单体形式的球形肌动蛋白聚合形成纤维形肌动蛋白,在微丝结合蛋白的辅助作用下形成微丝高级结构,行使功能。
中间纤维:中空的骨状结构,直径介于微管微丝之间,具有明显的组织细胞特异性,基本结构为一个中央α螺旋杆状区辅以两侧大小和化学组成不同的端区。
2. 本实验观察到的蓝色纤维主要是哪种细胞骨架?答:应为微丝和中间纤维。
3. 考马斯亮蓝染色方法的优缺点。
答:优点:反应相对迅速,其结合物在室温下1h内保持稳定,试剂配置简单,操作简便。
缺点:用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,仍有一些物质干扰此法的测定。
六、实验讨论:1. 观察和分析细胞骨架的意义?答:细胞骨架是细胞结构的重要组成部分,也是细胞行为与功能的重要调节系统,观察和分析细胞骨架的性质与变化将帮助我们更好地认识和研究细胞性质、功能与机制。
2. 考马斯亮蓝是一个理想的细胞骨架染料吗?本实验的优点和缺点是什么?答:不是,特异性荧光染料可能更好。
本实验优点是反应相对迅速,其结合物在室温下1h内保持稳定,试剂配置简单,操作简便。
缺点是无法直观分辨微管,微丝和中间纤维等。
篇二:实验四细胞骨架观察实验五细胞骨架观察一、实验目的了解用光学显微镜观察植物细胞骨架的原理及方法,观察光学显微镜下细胞骨架的网状结构。
二、实验原理细胞骨架(cytoskeleton)是指细胞质中纵横交错的纤维网络结构,按组成成分和形态结构的不同可分为微管(MT,20-25nm)、微丝(MF,5-7nm)和中间纤维(IF,8-11nm)。
它们对细胞形态的维持、细胞的生长、运动、分裂、分化和物质运输等起重要作用。
光学显微镜下细胞骨架的观察多用1% Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚,是一种非离子型表面活性剂或称去污剂)处理细胞,可使细胞膜和细胞质中的蛋白质和全部脂质被溶解抽提掉,而细胞骨架系统的蛋白质不受破坏被保存,经戊二醛固定,考马斯亮兰R250(Coomassie brilliant blue R250是一种蛋白质染料)染色后,用光学显微镜观察,可以见到一种网状结构,即是细胞骨架结构。
微管不够稳定,其他类型纤维太细,无法分辨,只能观察到由微丝组成的微丝束(40nm)为网状结构。
M缓冲液使细胞骨架中的微丝保持稳定,在M缓冲液中,其中咪唑是缓冲剂EGTA 和EDTA螯合Ca离子,溶液并提供Mg离子,在低钙条件下,骨架纤维保持聚合状态并且较为舒张,便于观察。
三、实验仪器、材料和试剂(一)仪器、用具:光学显微镜,镊子,剪刀,试管,载玻片,盖玻片,培养皿,烧杯。
(二)材料:新鲜洋葱鳞茎。
(三)试剂:1.2%考马斯亮蓝R250染色液:0.2g考马斯亮蓝R250粉加入甲醇46.5mL、冰醋酸7mL、蒸馏水46.5mL。
2.磷酸缓冲液(pH 6.8):0.2149g Na2HPO4·12H2O、0.0816g KH2PO4 加入100ml 蒸馏水。
3.M缓冲液(pH7.2)50mmol/L咪唑,50mmol/L)氯化钾、0.5mmol/L氯化镁、1mmol/L 乙二醇(a-氨基乙基)醚四乙酸、0.1mmol/L乙二胺四乙酸; 1mmol/L巯基乙醇,调至pH 7.2。
4.1%Trion X-100(聚乙二醇辛基苯基醚):0.5ml 100%TritonX-100加入M缓冲液49.5ml。
5.3%戊二醛:6mL25%戊二醛加入磷酸缓冲液44mL。
四、实验方法与步骤1.用镊子撕取洋葱鳞叶内侧的表皮若干片约1cm2大小若干片),置于50mL烧杯中,加入pH6.8磷酸缓冲液,使其下沉;2.吸去磷酸缓冲液,用1%Triton X—100 处理20min。
3.吸去Triton X—100,用M缓冲液洗3 次,每次5min。
4.用3%戊二醛固定30min。
5.磷酸缓冲液(pH 6.8)洗3次,每次5min。
6.0.2%考马斯亮蓝R250染色10min。
7.蒸馏水洗2次,然后将样品置于载玻片上,加盖玻片,于普通光学显微镜下观察。
8.如果染色效果好,则可依次用50%乙醇、70%乙醇,95%乙醇、正丁醇、二甲苯处理样品,各5min,然后将样品平展于载玻片上,加一滴中性树胶,盖上盖玻片封片,制成永久切片。
五、结果光学显微镜下洋葱内表皮细胞的轮廓清晰可见(如图),细胞壁及其分界明显。
10×10倍镜下可粗略观察到细胞内粗细不等的蓝色纤维、团块形成的网状结构。
同一细胞内各处骨架的密集度不均匀,细胞核区域的纤维相对密集,蓝色浓重,甚至分辨不出网络结构,另外可见细胞壁区域有零星蓝色纤维分布;相邻细胞的密集程度基本一致,但有少数细胞有较大不同。
10×40倍镜下可清楚观察到蓝色的网状结构确实由线性纤维交织成,纤维间的结合点稍膨大。
细胞边缘骨架较稀疏,但可见由与胞壁相同走向的纤维形成的细胞质膜的轮廓,与细胞内部的纤维通过纵向的纤维相连。
相邻细胞有纤维穿过胞间的细胞壁。
调节显微镜焦距可观察到细胞不同横切面的网络结构的变化,表明细胞骨架以三维立体结构的形式分布在整个细胞内。
篇三:细胞生物学实验报告实验一:细胞的形态观察及其大小测量一、实验目的:1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察,了解细胞的形态及其显微结构;2、学习显微测量的方法,对细胞的大小有一直观认识。
二、实验材料和仪器:小白鼠肝细胞切片;鸡血红细胞;蚕豆叶片横切片;普通光学显微镜;目镜测微尺;镜台测微尺;载玻片;盖玻片。
三、实验步骤:(一)细胞形态观察l、动物细胞的观察(1)人肝细胞切片:在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。
(2)鸡血细胞涂片的观察:观察血细胞的组成;红细胞、白细胞、血小板的形态特点。
2、植物细胞的观察(1)取蚕豆叶片横切片的观察:注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。
(二)细胞的大小和测量1、卸下目镜的上透镜,将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上,再旋上目镜的上透镜。
2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好,使测微尺分度位于视野中央。
调焦至能看清镜台测微尺的分度。
3、小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊,可转动目镜上透镜进行调焦),使两尺左边的一直线重合,然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。
4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。
按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm:镜台测微尺的格数目镜测微尺每格的微米数=—————————×10目镜测微尺的格数四、实验结果:1、目镜校正:40倍显微镜目镜测微尺每格的微米数=17/70=0.242、细胞大小的测量:五、作业与思考:1、血细胞按含量高低,主要含有:红细胞,白细胞,血小板。
白细胞最大,红细胞次之,血小板最小。
红细胞:主要的功能是运送氧。
白细胞:主要扮演了免疫的角色,当病菌侵入人体时,白细胞能穿过毛细血管壁,集中到病菌入侵部位,将病菌包围,吞噬。
血小板:止血过程中起着重要作用。
细胞形态见下图。
2、植物细胞一般比动物细胞大一些。
形态图见下。
3、在不同放大倍数下,测定的细胞大小基本一致,但有一些偏差。
放大倍数越大,在视野中同等实际距离下的两点视野距离更大,而更容易测量准确。
实验二:PAS(Periodic Acid Schiff)反应显示糖原和其它多糖物质一、实验目的1、熟悉PAS法原理及操作步骤;2、观察PAS反应的染色结果,并观察多糖在组织细胞中的分布。
二、实验原理多糖是由多个单糖分子缩合脱水而生成的化合物。
一些不溶性的多糖构成植物和动物的骨架,如植物的纤维素和动物的甲壳素,一般称为结构多糖。
另一些多糖在生物体内作为能量贮存,如淀粉(植物)和糖元(动物),在需要时可以通过生物体内酶系统的作用分解,释放出单糖。
三、实验用品:过碘酸酒精溶液、Schiff试剂、亚硫酸水溶液、苏木精溶液、二甲苯、100%乙醇+二甲苯(1:1)。
梯度乙醇溶液:100%,95%,90%,80%,70%,50%各两份,一份用于脱腊复水,一份用于脱水。
载玻片、盖玻片、染色缸、显微镜、小烧杯、胶头滴管、镊子、刀片、土豆;小鼠肝细胞石蜡切片。
四、实验步骤:(一)土豆切片的观察制作土豆徒手切片→过碘酸处理15~30min→70%乙醇1min→ schiff 试剂15min →亚硫酸水漂洗2~3次→蒸馏水漂洗→镜检(二)小鼠肝细胞切片的观察取鼠肝石蜡切片→二甲苯脱蜡约 10min →二甲苯+100%乙醇(3 min)→梯度乙醇脱二甲苯,在各浓度乙醇(100%,95%,90%,80%,70%,50%)中约 2~3 min →过碘酸氧化 15~30 min →蒸馏水漂洗→ Schiff 试剂 15~30 min →亚硫酸水漂洗 2~3 次→蒸馏水漂洗→苏木精染色 10 min →流水冲洗→梯度乙醇脱水(50%,70%,80%,90%,95%,100%),在各乙醇浓度中约 2~3 min →100%乙醇+二甲苯 2~3 min→二甲苯适度透明→指甲油封片→镜检五、实验结果:六、作业与思考:1、描述土豆切片和鼠肝切片中糖原分布特点。