生物信息学分析方法
生物信息分析

生物信息分析生物信息分析是一种基于计算机及相关技术,对生物学信息进行获取、存储、处理、分析和应用的学科。
生物信息学是生命科学和信息科学的交叉学科,包括生物信息的理论、实验方法及应用。
近年来,随着高通量测序技术的发展,大量的生物学数据被积累和存储,这些数据包括基因组、转录组、蛋白质组和代谢组等多个层次的信息。
如何通过生物信息分析提取这些信息的有用性和潜在的意义,成为了当前生物学研究中的一个重要问题。
因此,生物信息分析已经成为生物学研究不可或缺的方法。
1. 生物信息分析的基本方法(1)序列比对:序列比对是一种将不同序列比较并寻找相似性的方法。
在基因组和转录组测序中,序列比对是分析的第一步之一。
它可以标识注释基因、发现新的易位、同源基因家族和零件的可变性等。
(2)基因结构分析:基因结构分析可以预测跨越宿主基因和非编码RNA的内含子和外显子的位置。
基因结构分析的结果有助于预测转录本的存在和函数。
(3)功能注释:功能注释是为了确定一个生物学实体分子对生物学过程的贡献。
生物信息学的方法可以用于预测蛋白质序列和mRNA的结构和功能,或类似生物分子。
(4)通路分析:通路分析是一种方法,可以确定基因和蛋白质在一系列代谢和信号传导通路中的作用。
软件解析得到通路信息,有助于确定基因的作用。
2. 生物信息分析的应用(1)药物开发:生物信息分析对药物开发起到一定的推动作用。
基于结构与功能的生物信息学方法可以有效地预测药物的作用机制、筛选潜在的药物靶标和化合物。
(2)基因组学:基因组学可以分析基因组上发生的变异,揭示DNA上的变异与生理疾病的联系,如人类基因组计划,以及许多基于测序的疾病筛查项目都应用了基因组学技术。
(3)生物信息学在医药相关领域的应用(生物医学工程)以及医疗系统的开发也非常重要。
通过利用基因遗传数据将个体化医疗结合到临床实践中,可以通过个体化管理降低医疗费用、提高健康状况和临床结果。
(4)微生物组:利用微生物组测序技术,可以快速识别和鉴定微生物组成体,研究微生物的代谢途径及作用机制,在微生物发酵、生产和利用方面具有很好的应用前景。
生物信息学的数据挖掘和分析方法

生物信息学的数据挖掘和分析方法随着生物技术的飞速发展,生物数据的增长速度也越来越快,生物信息学已成为了生物学的一门重要分支。
而生物信息学的研究领域之一就是数据挖掘和分析。
生物信息学中的数据挖掘和分析方法主要包括以下几个方面:基因富集分析、序列比对和分析、蛋白质相互作用网格图分析和基因调控网络分析。
一、基因富集分析基因富集分析是一种研究生物信息中基因调控和功能的方法。
基因富集分析通过比较一组基因与整个基因组进行比较,寻找出差异明显的基因。
这个方法是通过一个或多个数据库的信息,找出差异显著的功能或通路。
例如在研究某一种疾病时,可以将该疾病相关的一组基因与整个基因组进行比较,从而发现与该疾病相关的通路和功能。
这种方法对于研究疾病的病理机制和寻找治疗靶点很有帮助。
二、序列比对和分析序列比对和分析是生物信息学中最基本的方法之一。
它可以将序列数据进行比对,并用其他的生物信息学方法进行分析。
序列比对可以揭示序列之间的相似性和差异性,而序列分析可以根据序列的特征进行分类、研究序列的结构和功能等方面的研究。
此外,序列比对和分析还包括了基本的序列处理技术,如序列剪切、最短路径、序列最优比对等。
三、蛋白质相互作用网格图分析蛋白质相互作用网格图分析是基于蛋白质相互作用的方法,用于研究蛋白质相互作用网络的结构。
该方法可以构建蛋白质相互作用网络(PIN),并通过分析网络的特征,提取关键节点,从而了解蛋白质相互作用的特定模式。
四、基因调控网络分析基因调控网络分析是研究基因调控的一种方法。
该方法可以清晰地建立基因调控网络,包括基因之间的相互作用和影响。
基因调控网络分析主要通过对调控元件和基因表达数据的处理和分析,构建出基因调控网络,并挖掘潜在的生物学功能和机器。
总的来说,生物信息学的数据挖掘和分析方法在生物学研究领域中扮演着越来越重要的角色。
通过这些方法,我们可以挖掘出生物学中隐藏的规律,更好地理解生命的基本机理。
生物信息学分析的新方法和工具

生物信息学分析的新方法和工具生物信息学是研究生物信息的原理、方法、算法及应用的一个学科,是生命科学和计算机科学的交叉学科。
生物信息学分析的方法和工具是生物信息学的重要组成部分,多年来,随着科学技术的进步,生物信息学分析的方法和工具也在不断更新和发展。
在此,我们将介绍一些新的生物信息学分析方法和工具。
1. 基于机器学习的生物信息学分析方法随着计算机技术的提高,机器学习在各个领域得到了广泛的应用,也在生物信息学分析中有了愈来愈多的应用。
机器学习是一种基于数据分析的方法,通过学习数据模式来预测未知的结果或分类新的数据。
在生物信息学分析中,机器学习可以应用于蛋白质结构预测、基因功能注释、癌症诊断等领域。
例如,机器学习可以通过学习蛋白质序列和已知蛋白质结构的关系,预测未知蛋白质的三维结构。
此外,机器学习也可以应用于基因功能注释。
在人类基因组计划中,发现了众多与人类疾病相关的基因,但这些基因的功能还不是很清楚。
使用机器学习方法可以从基因组数据中发现一些新的生物学规律,并预测基因的功能。
2. 基于人工智能的生物信息学分析方法人工智能是一种模拟人类智能过程的一种方法。
在生物信息学分析中,人工智能可以帮助预测和鉴定重要生物分子的活性,如药物分子、蛋白质分子等。
例如,在新药开发中,需要评估候选药物分子的活性和毒性。
使用传统方法,需要进行大量的化学实验,而使用人工智能的方法,可以预测分子的活性和毒性,从而节省时间和成本。
此外,人工智能也可以用于基因组学研究。
例如,基于人工智能的方法可以从癌症组织中识别具有危险突变的基因等。
3. 基于深度学习的生物信息学分析工具深度学习是一种机器学习的进化,它可以自动地从数据中学习复杂的特征,如图像和语音识别等。
深度学习在生物信息学分析中也得到了广泛的应用,例如基因模拟和基因表达分析等。
基于深度学习的生物信息学分析工具,如DeepSEA、DeepBind和CADD等,可以帮助研究人员快速地预测新基因或突变对基因表达和功能的影响。
生物信息学分析

生物信息学分析随着科技的不断进步,生物信息学已成为现代生物学研究的重要工具。
生物信息学分析不仅帮助我们更好地理解生命现象,还在疾病诊断、药物研发等领域发挥着重要作用。
本文将介绍生物信息学分析的基本概念、方法和应用。
一、生物信息学分析的基本概念生物信息学分析是指利用计算机技术、数学和统计学方法对生物数据进行分析、处理和解释的过程。
生物数据包括基因组序列、蛋白质序列、基因表达谱、蛋白质蛋白质相互作用等。
通过对这些数据进行生物信息学分析,我们可以揭示生物分子之间的相互关系,了解生命现象的内在规律。
二、生物信息学分析的方法1. 序列比对:序列比对是生物信息学分析中最基本的方法,用于比较不同生物分子之间的相似性。
常用的序列比对工具有BLAST、Clustal Omega等。
2. 蛋白质结构预测:蛋白质结构预测是根据蛋白质序列预测其三维结构的过程。
常用的蛋白质结构预测工具有AlphaFold、Rosetta等。
3. 基因表达谱分析:基因表达谱分析用于研究基因在不同生物过程、不同环境条件下的表达水平变化。
常用的基因表达谱分析工具有DESeq2、EdgeR等。
4. 蛋白质蛋白质相互作用网络分析:蛋白质蛋白质相互作用网络分析用于研究蛋白质之间的相互作用关系,揭示生命活动的分子机制。
常用的蛋白质蛋白质相互作用网络分析工具有Cytoscape、Gephi等。
三、生物信息学分析的应用2. 药物研发:生物信息学分析可以帮助我们筛选潜在的药物靶点,预测药物分子的生物活性,加速药物研发过程。
例如,通过蛋白质结构预测,可以筛选出具有特定功能的蛋白质作为药物靶点。
3. 个性化医疗:生物信息学分析可以帮助我们了解个体的基因组、蛋白质组等信息,为个性化医疗提供依据。
例如,通过对个体基因组的分析,可以预测个体对特定药物的反应,为临床用药提供指导。
生物信息学分析在生命科学研究中发挥着越来越重要的作用。
随着生物数据量的不断增加和计算技术的不断进步,生物信息学分析将为我们揭示生命现象的奥秘提供更多有力工具。
生物信息学中的数据挖掘与分析方法研究

生物信息学中的数据挖掘与分析方法研究引言:随着生物学和计算机科学的迅猛发展,生物信息学已经成为一个独立的学科领域。
生物信息学旨在通过利用计算机科学的方法来解析和理解生物学数据,从而推动生物学的研究。
在生物信息学的研究领域中,数据挖掘与分析方法被广泛应用于生物信息的处理和生物学知识的发现。
本文将介绍生物信息学中常用的数据挖掘与分析方法以及它们的应用。
一、生物信息学中的数据挖掘方法1. 序列分析:序列分析是生物信息学中一个重要的数据挖掘方法。
在基因组学的研究中,序列分析被用来识别基因、寻找编码区域、解析基因调控元件等。
常见的序列分析方法包括序列比对、序列分类和序列比较等。
2. 数据聚类:数据聚类是生物信息学中常用的一种数据挖掘方法,它用于将相似的样本归为一类,以便进行更深入的研究。
在基因表达谱的分析中,数据聚类被广泛应用于识别基因表达的模式和鉴定与生物学特征相关联的基因集。
3. 异常检测:在生物信息学中,异常检测是识别与正常生物状态不一致的样本或信号的一种方法。
在基因组学中,异常检测用于鉴定基因组异常,如染色体缺失、复制数变异等。
异常检测方法包括统计学方法、机器学习方法和聚类分析等。
4. 关联规则挖掘:关联规则挖掘是发现数据集中项之间关联关系的一种方法。
在生物信息学中,关联规则挖掘被用于寻找基因之间的相互作用关系,从而揭示生物学系统的复杂性。
二、生物信息学中的数据分析方法1. 基因表达谱分析:基因表达谱分析是研究基因组中表达的基因在不同组织、发育阶段和环境条件下的变化规律的一种方法。
基因表达谱分析可以帮助我们理解基因调控网络和功能基因的发现。
2. 蛋白质结构预测:蛋白质结构预测是根据蛋白质的氨基酸序列推断蛋白质的三维结构的过程。
蛋白质结构预测可以为药物设计、疾病治疗等提供重要的理论依据。
3. 基因组注释:基因组注释是将DNA序列与基因和蛋白质功能相联系的过程。
基因组注释可以帮助我们理解基因的功能,预测基因的调控元件以及研究基因组的进化。
生物信息学的研究方法

生物信息学的研究方法生物信息学是一个交叉学科领域,它涵盖了统计学、计算机科学、生物学等多个学科。
目前,它已成为现代生物学研究的重要工具,并在医疗、农业、环保等领域中得到了广泛的应用。
生物信息学的研究方法有哪些呢?接下来,就让我们一起来了解一下吧。
1、序列比对序列比对是生物信息学首要的研究方法之一。
利用反向比对算法,可以将多个基因组、DNA或蛋白质序列进行比较,找出它们之间的相似性和区别,从而分析生物体中的基因和蛋白质等分子。
序列比对对于人类基因组计划、植物基因组计划、癌症研究等领域的研究起着至关重要的作用。
2、结构预测结构预测是生物信息学中的另一种重要的研究方法。
它能够预测蛋白质的立体结构和功能。
利用基于物理原理的模型,可以预测蛋白质的结构,进而预测蛋白质所具有的功能。
结构预测的方法包括生物信息学和计算化学等技术,对于药物设计、蛋白质功能研究、分子生物学研究等领域提供了强有力的支持。
3、基因表达谱分析基因表达谱分析是利用生物信息学方法来分析不同生物样本中基因表达的差异,从而发现关键基因与生理进程的关联。
它可以帮助研究人员在大规模基因组测序数据中追踪表达模式的变化,找到引发生命过程以及疾病形成的潜在机制,在肿瘤学、免疫学、生殖学等领域中有着广泛应用。
4、蛋白质互作网络分析蛋白质互作网络分析是利用生物信息学方法,从已知的蛋白质互作信息出发,建立蛋白质互作网络,探究蛋白质分子之间的相互作用关系,发现蛋白质功能与生理进程的关联,为疾病的分子诊断和治疗提供重要参考。
蛋白质互作网络分析方法被广泛应用于蛋白质组学、细胞信号转导和药物发现领域。
5、计算机模拟计算机模拟是一种利用计算机进行理论模拟研究的方法。
在生物信息学中,计算机模拟被广泛应用于研究蛋白质的性质和功能,探究生物反应机制,设计新型药物等领域。
它可以从分子层面上了解生命的运作机理,为生物学的深度理解提供了帮助。
综上所述,生物信息学作为一个复杂的交叉学科领域,在研究生命科学中起着举足轻重的作用。
生物信息学的基本方法和应用
生物信息学的基本方法和应用生物信息学是一门近几十年来发展迅速的交叉学科,涉及生物学、物理学、计算机科学、数学等多个领域,其主要任务是利用计算机技术来处理、分析和利用生物信息数据,以解决生物学中的重大问题。
生物信息学常用的工具包括基于序列的分析、基于结构的分析、基于功能的分析和生物网络分析等。
下面我们就来看一下生物信息学的基本方法和应用。
一、基于序列的分析基于序列的分析是生物信息学中最基本的分析方法。
它主要基于DNA、RNA或蛋白质序列的比对和相似性计算来进行。
常见的序列分析工具包括BLAST、FASTA、ClustalW等。
BLAST是目前最常用的序列比对工具之一,它能够通过比对相似序列来推测未知序列的功能。
FASTA和ClustalW也是常用的序列比对工具,它们可以比较多个序列间的相似性,较好地完成序列比对工作。
基于序列的分析可应用于基因注释、基因组比较、系统发育分析等,是生物信息学研究的重要工具。
二、基于结构的分析基于结构的分析主要是通过计算蛋白质的二级结构、三级结构或结合位点等信息进行分析。
通过蛋白质结构的比对和相似性计算可以推测其功能、进行药物研究等。
常见的基于结构的分析工具包括PDB、MolProbity、DOCK等。
PDB是全球公认的蛋白质结构数据库,提供了大量的蛋白质结构信息。
MolProbity可以用于评价蛋白质结构的质量,DOCK则可用于药物分子的分子对接和筛选。
基于结构的分析可以应用于药物设计、酶学研究、基因调控研究等,其研究价值非常高。
三、基于功能的分析基于功能的分析主要是通过对基因、基因产物的功能进行预测和分析。
常见的基于功能的分析工具包括KEGG、GO、DAVID 等。
KEGG是一种常用的基因注释工具,它提供了大量的代谢通路、遗传学和蛋白质家族信息。
GO是一个功能注释数据库,通过对GO注释进行统计分析,可以推测某个基因是否与某个生物过程或功能相关。
DAVID则可以进行大规模基因列表的分析和注释。
生物信息学分析方法
生物信息学分析方法生物信息学是一门综合利用计算机科学、数学、统计学等方法分析生物学数据的学科,它在克隆基因组学、蛋白质预测、基因表达谱分析、蛋白质相互作用预测、药物设计等方面都发挥了重要作用。
生物信息学分析方法主要包括序列比对、结构预测、基因表达谱分析、蛋白质相互作用分析和药物设计等几个方面。
序列比对是生物信息学中的基础方法之一,它用于比较两个或多个生物序列之间的相似性和差异性。
序列比对可以通过全局比对和局部比对来进行。
全局比对方法适用于两个序列整体相似的情况,而局部比对方法则适用于在一个序列中寻找与另一个序列相似的片段。
序列比对方法有Smith-Waterman算法、Needleman-Wunsch算法、BLAST算法等。
结构预测是生物信息学中一个重要的研究方向,它旨在通过计算预测蛋白质分子的三维结构。
蛋白质的结构与其功能密切相关,因此蛋白质结构的准确预测对于理解蛋白质的功能和相互作用具有重要意义。
结构预测方法主要分为基于比对和基于模型两种。
基于比对的方法包括同源建模、远程同源建模和折叠库等,而基于模型的方法包括分子力学模拟和蒙特卡洛方法等。
基因表达谱分析是研究在不同生理条件下基因表达差异的一种方法。
基因表达谱分析可以帮助研究者了解基因在不同组织、器官或生理状态下的表达模式,从而进一步理解基因编码的蛋白质的功能和调控机制。
基因表达谱分析包括芯片组学和测序组学两种方法。
芯片组学通过芯片上的探针检测基因的表达水平,而测序组学则通过高通量测序技术直接测定基因的表达水平。
蛋白质相互作用分析是研究蛋白质与其他分子之间相互作用的一种方法。
蛋白质相互作用是维持细胞内各种生物学过程的关键。
通过分析蛋白质相互作用网络可以揭示细胞内分子之间的调控关系和信号传导途径。
蛋白质相互作用分析方法主要包括基于实验和基于计算的方法。
基于实验的方法包括酵母双杂交、免疫沉淀和质谱分析等,而基于计算的方法则包括结构基因组学和机器学习等。
生物信息学中的系统生物学分析方法
生物信息学中的系统生物学分析方法生物信息学是一门涉及生物学、计算机科学和统计学等多学科的交叉领域,其主要研究对象是利用计算方法对生物大数据进行分析和挖掘,以揭示生命现象的本质和规律。
而系统生物学则是生物信息学中的一个重要分支,它通过系统性地收集和整合生物组学、表观基因组学、代谢组学等多种高通量技术所生产的数据,并采用网络分析和生物统计学等多种方法,帮助我们解决生命科学中的一系列复杂问题。
1. 基于网络的生物信息学分析方法网络分析是系统生物学中常用的一种方法,其基本思想是将一些生物分子或基因之间的相互作用关系或者调控机制以网络的形式进行描述,并采用图论的方法对其进行分析。
网络分析的基本指标有连通性、节点度数、中心性、聚类系数等,这些指标可以帮助我们寻找到一些重要的调控关系或者生物通路。
例如,在分析蛋白质相互作用网络时,我们可以利用网络分析方法挖掘出网络中的中心节点和关键通路,以便我们更好地理解蛋白质相互作用网络的调控机制和生物学功能。
此外,网络分析方法还可以用于挖掘基因调控网络,帮助我们研究转录因子、表观遗传学调控机制等多种生物过程。
2. 基于机器学习的生物信息学分析方法机器学习是一种通过计算机算法自动地对数据进行学习和预测的方法。
在生物信息学中,机器学习可以用于分类、聚类、回归、特征选择等多种任务,可以帮助我们更准确地鉴定生物分子或基因的功能和调控机制。
例如,在分析基因表达谱数据时,我们可以利用机器学习方法对不同样本间的差异进行分析,以确定哪些基因或具有生物学功能的通路与样本的类别相关。
此外,机器学习方法还可以用于挖掘生物标记物、预测药物靶点等多种任务。
3. 基于动态系统的生物信息学分析方法动态系统理论是研究变化过程的数学分支领域,而在生物学中,很多生物过程都是动态变化的。
因此,基于动态系统的生物信息学分析方法也成为研究动态生物过程的重要工具。
例如,在研究基因调控网络时,我们可以将其看作是一个动态系统,并采用微分方程或差分方程对其进行建模和模拟。
生物信息学分析方法
生物信息学分析方法生物信息学是一门综合应用信息学、生物学和统计学等相关知识和技术的学科,旨在通过利用计算机和信息技术处理和分析生物学数据,揭示生物系统的结构和功能,并解决生物学研究中的问题。
生物信息学分析方法主要包括序列比对、基因预测、蛋白质结构与功能预测、基因表达谱分析、基因调控网络构建和演化分析等。
以下将对其中几种常见的生物信息学分析方法进行详细介绍。
1. 序列比对:序列比对是生物信息学中最基本、最常用的方法之一、通过将待比对的序列与已知数据库中的序列进行比对,可以判断序列的相似性和进化关系,从而推断序列的功能和结构。
序列比对方法主要包括全局比对、局部比对和多序列比对等。
常用的序列比对工具有BLAST、ClustalW等。
2.基因预测:基因预测是指通过对DNA序列进行分析和预测,确定其中的基因位置和结构。
基因预测方法主要包括基于序列、基于比对和基于表达等方法。
其中,基于序列的方法依据基因的核苷酸组成、序列保守性和启动子顺应性等特征进行预测;基于比对的方法通过将待预测序列与已知基因进行比对,从而确定基因位置和结构;基于表达的方法则通过分析基因的表达模式和转录组数据,推断基因的存在和功能。
3.蛋白质结构与功能预测:蛋白质结构与功能预测是指通过分析蛋白质序列和结构,预测其二级结构、三级结构和功能。
蛋白质结构预测方法主要包括同源建模、蛋白质折叠动力学和序列匹配等方法。
同源建模是最常用的蛋白质结构预测方法,其基本原理是通过将待预测蛋白质序列与已知结构的同源蛋白质进行比对,并从中找到最佳匹配。
蛋白质功能预测方法主要包括结构域分析、功能域预测和功能注释等方法。
4.基因表达谱分析:基因表达谱分析是通过对基因在不同组织或条件下的表达水平进行比较和分析,揭示基因在生物体内的功能和调控机制。
常见的基因表达谱分析方法有RT-PCR、微阵列和高通量测序等。
RT-PCR是一种常用的基因表达定量方法,可以通过测定特定基因在RNA水平的表达量推断基因的转录水平;微阵列技术则可以同时检测数千个基因的表达水平,从而了解基因在不同组织和条件下的表达情况;高通量测序技术可以对整个转录组进行测序,从而揭示基因的全局表达谱。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
核酸和蛋白质序列分析蛋白质, 核酸, 序列关键词:核酸序列蛋白质序列分析软件在获得一个基因序列后,需要对其进行生物信息学分析,从中尽量发掘信息,从而指导进一步的实验研究。
通过染色体定位分析、内含子/外显子分析、ORF分析、表达谱分析等,能够阐明基因的基本信息。
通过启动子预测、CpG岛分析和转录因子分析等,识别调控区的顺式作用元件,可以为基因的调控研究提供基础。
通过蛋白质基本性质分析,疏水性分析,跨膜区预测,信号肽预测,亚细胞定位预测,抗原性位点预测,可以对基因编码蛋白的性质作出初步判断和预测。
尤其通过疏水性分析和跨膜区预测可以预测基因是否为膜蛋白,这对确定实验研究方向有重要的参考意义。
此外,通过相似性搜索、功能位点分析、结构分析、查询基因表达谱聚簇数据库、基因敲除数据库、基因组上下游邻居等,尽量挖掘网络数据库中的信息,可以对基因功能作出推论。
上述技术路线可为其它类似分子的生物信息学分析提供借鉴。
本路线图及推荐网址已建立超级链接,放在北京大学人类疾病基因研究中心网站(/science/bioinfomatics.htm),可以直接点击进入检索网站。
下面介绍其中一些基本分析。
值得注意的是,在对序列进行分析时,首先应当明确序列的性质,是mRNA序列还是基因组序列?是计算机拼接得到还是经过PCR扩增测序得到?是原核生物还是真核生物?这些决定了分析方法的选择和分析结果的解释。
(一)核酸序列分析1、双序列比对(pairwise alignment)双序列比对是指比较两条序列的相似性和寻找相似碱基及氨基酸的对应位置,它是用计算机进行序列分析的强大工具,分为全局比对和局部比对两类,各以Needleman-Wunsch 算法和Smith-Waterman算法为代表。
由于这些算法都是启发式(heuristic)的算法,因此并没有最优值。
根据比对的需要,选用适当的比对工具,在比对时适当调整空格罚分(gap penalty)和空格延伸罚分(gap extension penalty),以获得更优的比对。
除了利用BLAST、FASTA等局部比对工具进行序列对数据库的搜索外,我们还推荐使用EMBOSS软件包中的Needle软件(http://bioinfo.pbi.nrc.ca:8090/EMBOSS/),和Pairwise BLAST(/BLAST/)。
以上介绍的这些双序列比对工具的使用都比较简单,一般输入所比较的序列即可。
(1)BLAST和FASTAFASTA(/fasta33/)和BLAST(/BLAST/)是目前运用较为广泛的相似性搜索工具。
这两个工具都采用局部比对的方法,选择计分矩阵对序列计分,通过分值的大小和统计学显著性分析确定有意义的局部比对。
使用FASTA和BLAST,进行数据库搜索,找到与查询序列有一定相似性的序列。
一般认为,如果蛋白的序列一致性为25-30%,则可认为序列同源。
BLAST 根据搜索序列和数据库的不同类型分为5种(表2),另外PSI-BLAST通过迭代搜索,可以搜索到与查询序列相似性较低的序列。
其中BLASTN、BLASTP在实践中最为常用,TBLASTN 在搜索相似序列进行新基因预测时特别有用。
使用BLAST时,先选择需要使用的BLAST程序,然后提供相应的查询序列,选择所比对的数据库即可。
(2)Needle和Pairwise BLAST:其中Needle适用于蛋白质和DNA序列,而Pairwise BLAST 仅适用于DNA序列(3)相似性和同源性:必须指出,相似性(similarity)和同源性( homology)是两个完全不同的概念。
同源序列是指从某一共同祖先经过趋异进化而形成的不同序列。
相似性是指序列比对过程中检测序列和目标序列之间相同碱基或氨基酸残基序列所占比例的大小。
经过比对,当相似性高于一定程度,可以推测序列可能是同源序列,具有一定同源性。
2、多序列比对和进化树在研究生物问题时,常常需要同时对两个以上的序列进行比对,这就是多序列比对。
多序列比对可用于研究一组相关基因或蛋白,推断基因的进化关系,还可用于发现一组功能或结构相关基因之间的共有模式(pattern)。
最常用的多序列比对工具为ClustalW (/clustalw/),多用于比较蛋白序列。
ClustalW用法:(1)输入:序列以FastA格式输入。
(2)输出:除了以文本形式外,还可以通过JalView显示和编辑结果。
此外,还可以另外使用GeneDoc(常见于文献)及DNAStar软件等显示结果。
多序列比对的结果还用于进一步绘制进化树。
3、ORF(Open Reading Frame)分析从核酸序列翻译得到蛋白质序列,需要进行ORF分析,每个生物信息学分析软件包几乎都带有翻译功能。
推荐使用NCBI的ORF Finder(/gorf/gorf.html)软件或EMBOSS中的getorf(http://bioinfo.pbi.nrc.ca:8090/EMBOSS/)软件。
ORF Finder 以图形方式,分为正链+1、+2、+3和反链+1、+2、+3六个相位预测ORF;Getorf可指定预测ORF的长度下限和指定预测正反链。
进行ORF分析虽然比较简单,但应注意以下几点:(1)序列的准确性:尤其是通过计算机拼接的序列,需要根据EST和基因组序列进行反复校正。
(2)ORF是否完整:看在ORF上游同一相位是否具有终止码,或者具有起始密码子。
(3)参考Kozak一致性规律,即起始密码子位点符合A/GCCATGG。
(4)不要忽略反义读框。
4、染色体定位根据基因组图谱对序列进行染色体定位和浏览其基因组上下游基因。
具体方法为:(1)进行Genomic BLAST搜索。
(2)通过“Genome view”观察基因组结构。
(3)点击相应染色体区域,通过表意图(ideogram)和相应区域上下游的基因进行精确定位。
5、基因结构分析根据基因的mRNA序列及基因组序列,可以进行基因结构的分析。
推荐使用BLAST或BLAT(/cgi-bin/hgBlat?command=start)进行分析。
由于真核生物转录后内含子将被剪切,因此将mRNA和基因组进行比对以后,会发现mRNA的每个外显子与基因组序列片断匹配,根据这些片段可以判断外显子的数目和大小。
外显子和内含子具体边界的确定,可以参考GT/AG一致性规则。
BLAT的结果直接显示外显子数目、大小及边界。
6、基因上游调控区分析(1)启动子预测:推荐使用冷泉港开发的FIRSTEF程序(/tools/FirstEF/)进行启动子预测。
用RT-PCR等实验方法获得的mRNA往往缺少完整的5’端,采用FirstEF 程序可以对第一外显子(尤其是非编码的第一外显子)和CpG相关启动子进行预测。
方法:以FastA格式输入起始密码子上游序列。
(2)转录因子结合位点分析:推荐使用TFSEARCH程序(http://www.cbrc.jp/research/db/TFSEARCH.html)及MATCH程序(/pub/programs.html#match)对转录因子数据库TRANSFAC(http://transfac.gbf.de/TRANSFAC/)进行搜索,寻找可能的转录因子结合位点。
方法:输入起始密码子上游序列。
结果将给出很多可能的转录因子结合位点,注意选择其中分值较高的位点。
(二)蛋白质序列分析1、跨膜区预测各个物种的膜蛋白的比例差别不大,约四分之一的人类已知蛋白为膜蛋白。
由于膜蛋白不溶于水,分离纯化困难,不容易生长晶体,很难确定其结构。
因此,对膜蛋白的跨膜螺旋进行预测是生物信息学的重要应用。
推荐使用TMHMM软件(http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/)对蛋白进行跨膜预测。
TMHMM综合了跨膜区疏水性、电荷偏倚、螺旋长度和膜蛋白拓扑学限制等性质,采用隐马氏模型(Hidden Markov Models),对跨膜区及膜内外区进行整体的预测。
TMHMM是目前最好的进行跨膜区预测的软件,它尤其长于区分可溶性蛋白和膜蛋白,因此首选它来判定一个蛋白是否为膜蛋白。
所有跨膜区预测软件的准确性都不超过52%,但86%的跨膜区可以通过不同的软件进行正确预测。
因此,综合分析不同的软件预测结果和疏水性图以获得更好的预测结果。
方法:输入待分析的蛋白序列即可。
2、信号肽预测信号肽位于分泌蛋白的N端,当蛋白跨膜转移位置时被切掉。
信号肽的特征是包括一个正电荷区域、一个疏水性区域和不带电荷但具有极性的区域。
信号肽切割位点的-3和-1位为小而中性氨基酸。
推荐使用SignalP软件2.0版(http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP-2.0/)对PDCD5N 端序列进行信号肽分析。
SignalP2.0根据信号肽序列特征,采用神经网络方法或隐马氏模型方法,根据物种的不同,分别选择用真核和原核序列进行训练,对信号肽位置及切割位点进行预测。
信号肽切割位点预测用Y-score maximum来判断,对是否分泌蛋白用mean S-score来判断:如果mean S-score大于0.5,则预测为分泌蛋白,存在信号肽,但II型跨膜蛋白的N端序列可能被错误预测为分泌蛋白的信号肽。
方法:输入待分析的蛋白序列,如为原核基因选择原核训练集,否则选择真核训练集。
3、亚细胞定位预测亚细胞定位与蛋白质的功能存在着非常重要的联系。
亚细胞定位预测基于如下原理:(1)不同的细胞器往往具有不同的理化环境,它根据蛋白质的结构及表面理化特征,选择性容纳蛋白。
(2)蛋白质表面直接暴露于细胞器环境中,它由序列折叠过程决定,而后者取决于氨基酸组成。
因此可以通过氨基酸组成进行亚细胞定位的预测。
推荐使用PSORT(http://psort.nibb.ac.jp/)II软件对PDCD5蛋白的细胞内定位进行预测。
PSORT将动物蛋白质定位于10个细胞器:(1)细胞浆,(2)细胞骨架,(3)内质网,(4)胞外,(5)高尔基体,(6)溶酶体,(7)线粒体,(8)胞核,(9)过氧化物酶体(peroxisome)和(10)细胞膜。
DNA序列分析技术路线图cDNAFeatuesAATAAA signal,PolyadenylationElectronic elongation(EST)ORFs(ORF Finder, getorf)Restriction site(DNASIS)Expression profileESTSAGEmap,SAGE GenieMicroarray(WormBase)Genomic sequenceFeatureschromosome location(Human Genome)MW, base compositon(DNAMAN)Exon-intron(SIM4)Repeats(RepeatMasker)SNPs(dbSNP, TSC)5' flanking sequencePromoter, TATA box(FIRSTEF)CpG island(cpgplot)Transcription factor binding site(TFSEARCH, match) Novel gene prediction(EST, stackPACK)蛋白序列分析技术路线图ProteinfeaturesMW,pi,AA composition(EMBOSS) Hydrophobicity(BioEdit)Transmembrane region(TMHMM)Signal peptide(Signal P)subcellular location(PSORT)Coiled coil(COILS)Antigenic site(DNAStar)Function inferenceGene knockouts(WormBase)Similarity searchAlignment(BLAST,FASTA,CLUSTALW) Phylogenic analysis(DNANAN)Genome context(COG)Motif,profile,domain(PROSITE,Pfam,SMART) Expression 'topology'(WormBase) Structure informationSecondary structure prediction(PHP) Structure classification(SCOP)Structure modeling(HOMOLOGY,DISCOVER) Binding site analysis(Binding site)。