实验二十四从牛乳中分离酪蛋白
实验报告-从牛奶中分离酪蛋白
实验报告一、实验名称：从牛奶中分离酪蛋白二、实验目的：1.学习从胶体中提取某一类物质的方法。
2.学习蛋白质的各种颜色反应及其原理。
三、实验原理：1.蛋白质是两性化合物，溶液的酸碱性直接影响蛋白质分子所带的电荷。
当调节牛奶的p H值达到酪蛋白的等电点（p l）4.8左右时，蛋白质所带正、负电荷相等，呈电中性，此时酪蛋白的溶解度最小，会以沉淀形式从牛奶中析出。
2.缩二脲反应原理：具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应,生成红紫色的络合物。
所有的蛋白质均有此显色反应。
3.蛋白黄色反应原理：硝酸将蛋白质分子中的苯环硝化，在加热状态下产生了黄色硝基苯衍生物，再加碱颜色加深呈橙黄色。
这是含有芳香族氨基酸特别是含有酪氨酸和色氨酸的蛋白质所特有的颜色反应。
4.茚三酮反应原理：蛋白质与茚三酮共热，产生蓝紫色的还原茚三酮、茚三酮和氨的缩合物。
此反应为一切氨基酸及α-氨基酸所共有。
四、实验步骤及现象：1.取50mL脱脂牛奶于150mL烧杯中，用热水浴加热至40℃，维持此温度，边搅拌边加稀醋酸（1：9）溶液约2mL——有白色沉淀析出。
2.继续搅拌并使悬浊液冷却至室温，然后将混合物转入离心杯中，于3000r/min离心15min。
3.离心完毕后，上清液倒入乳糖回收瓶中，沉淀用95%的乙醇（20ml）搅匀，然后用布氏漏斗减压过滤，用乙醇-乙醚（1：1）混合液洗涤沉淀2次，每次约10ml，最后用5ml乙醚洗涤沉淀一次，减压过滤至干——得到干燥的白色固体。
4.将干粉铺于表面皿上，称量并计算牛奶中酪蛋白含量。
5.称取0.5g酪蛋白，溶解于0.4M氢氧化钠溶液的生理盐水（5mL）中，然后滴加3-4滴1%硫酸铜溶液，振荡试管——溶液变成紫色。
五、实验数据：空表面皿的质量m0=28.15g表面皿与酪蛋白的总质量m1=31.78g牛奶中酪蛋白的质量m=m1-m0=3.63g六、讨论与感想：1.牛奶是一种胶体，在正常情况下是均一稳定的，要想分离出其中的某一成分，就应该想办法使这种成分变成沉淀析出。
酪蛋白的提取
实验原理
酪蛋白是乳蛋白质中最丰富的一类蛋白质，占乳蛋白的 80%~82%，酪蛋白不是单一的蛋白质，是一类含磷的复合 80%~82%，酪蛋白不是单一的蛋白质，是一类含磷的复合 蛋白质混合物，以一磷酸酯键与苏氨酸及丝氨酸的羟基相 结合。它还含有胱氨酸和蛋氨酸这两种含硫氨基酸，但不 含半胱氨酸。它在牛乳中的含量约为35g/L，比较稳定， 含半胱氨酸。它在牛乳中的含量约为35g/L，比较稳定， 利用这一性质可以检测牛乳中是否掺假。 酪蛋白在其等电点时由于静电和为零，同种电荷间的排斥 作用消失，溶解度很低，利用这一性质，将牛乳调到 pH4.6，酪蛋白就可从牛乳中分离出来。酪蛋白不溶于乙 pH4.6，酪蛋白就可从牛乳中分离出来。酪蛋白不溶于乙 醇，这个性质被用来从酪蛋白粗制剂中将脂类杂志除去。
仪器、 仪器、原料和试剂
仪器：温度计、布氏漏斗、pH试纸、抽滤瓶、电炉、烧杯、 仪器：温度计、布氏漏斗、pH试纸、抽滤瓶、电炉、烧杯、 量筒、表面皿、天平等 原料：市售牛乳 试剂：95%乙醇和乙醚 试剂：95%乙醇和乙醚 pH4.6乙酸钠缓冲液0.2mol/L pH4.6乙酸钠缓冲液0.2mol/L 乙醇、乙醚混合液：乙醇：乙醚=1： 乙醇、乙醚混合液：乙醇：乙醚=1：1（体积比）
实验步骤
1、酪蛋白等电点沉淀 将100mL牛乳放到500mL烧杯中，加入至40℃左右的乙 100mL牛乳放到500mL烧杯中，加入至40℃ 酸钠缓冲液，直到pH达4.6左右，用pH试纸或酸度剂调试。 酸钠缓冲液，直到pH达4.6左右，用pH试纸或酸度剂调试。 将上述悬浮液冷却至室温，然后放置5min，用细布过滤， 将上述悬浮液冷却至室温，然后放置5min，用细布过滤， 收集沉淀。 2、除脂类杂质 将上述沉淀用少量水洗数次，然后悬浮于30mL95%的 将上述沉淀用少量水洗数次，然后悬浮于30mL95%的 乙醇中。将此悬浮液倾入布氏漏斗中，抽滤除去乙醇溶液， 再倒入乙醇再倒入乙醇-乙醚混合液洗涤沉淀两次，最后再用乙醚洗 涤沉淀两次，抽干。将沉淀从布氏漏斗中移去，在表面皿 上摊开以除去乙醚，干燥后得到的是酪蛋白纯品。准确称 重后，计算出每100mL牛乳所制备出的酪蛋白质量 重后，计算出每100mL牛乳所制备出的酪蛋白质量 （g/100mL），并与理论产量（3.5g/100mL）相比较，求 g/100mL），并与理论产量（3.5g/100mL）相比较，求 出实际获得百分率。
牛乳中酪蛋白的制备
思考题
1．制备高产率纯蛋白的关键是什么？
试剂和器材
• 试剂：
95%乙醇；乙醇—乙醚混合液 (V/V=1∶1);无水乙醚 0.2mol/L pH4.7醋酸—醋酸钠缓冲液
• 材料
纯牛奶(蒙牛)
操作方法
1．将25mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、 pH4.7醋酸缓冲液25mL。用精密试纸调pH值至4.7。
2. 将上述悬浮液冷却至室温。离心10min(3000r/min)弃 去上清液，得酪蛋白粗制品。
实验七 牛乳中酪蛋白的制备
目的要求 学习从牛乳中分离纯化酪蛋白的原理和方法。
实验原理
牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋 白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点 时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉 淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，乙醚除去脂类杂质后便可得 到纯的酪蛋白。
3．用水洗沉淀两次，离心5min(3000r/min)，弃去上清液。
3．用乙醇洗沉淀1次，离心5min(3000r/min)，弃去上清 液。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀1次。最后用乙醚洗沉淀1次， 各离心5min(3000r/min) 。
4．将沉淀摊开在表面皿上，风干；得酪蛋白纯品。
5．准确称重，计算含量酪蛋白g/100mL牛乳（g%）,并和 理论含量为3.5g/100mL牛乳相比较，求出实际得率。
实验从牛乳中分离酪蛋白
实验从牛乳中分离酪蛋白一、目的要求掌握从牛乳中分离酪蛋白的原理，学会操作方法。
二、实验原理牛乳中含有多种蛋白质，它们有着不同的性质，在脱脂牛乳的蛋白质中酪蛋白约占80%，酪蛋白是一类含磷蛋白质的复杂混合物。
利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调到4.7（酪蛋白的等电点）时，酪蛋白就沉淀析出。
再用乙醇和乙醚洗涤沉淀，除去脂类杂质，便可制得纯酪蛋白。
三、实验器材恒温水浴、普通离心机、精密pH试纸或酸度计、布氏漏斗、抽滤瓶、表面皿、离心管（80 mL）、量筒、烧杯（100 mL）、玻棒、电子天平。
新鲜牛乳。
四、实验试剂1．95%乙醇2．乙醚3．0.2 mol/L醋酸溶液4．0.2 mol /L pH 4.7醋酸–醋酸钠缓冲液，配制方法如下：先分别配制A 液和B 液：O）27.22A 液（0.2 mol / L 醋酸钠溶液）称取分析纯醋酸钠（NaAc·3H2g溶于蒸馏水中，定容至1 000 mL。
B 液（0.2 mol / L 醋酸溶液）称取分析纯冰醋酸（含量大于99.8%）12.0 g溶于蒸馏水中，定容至1000 mL。
取A液885 mL和B液615 mL混合，即得pH 4.7 的醋酸－醋酸钠缓冲液1 500 mL。
五、操作步骤1．取30 mL鲜牛乳，置100 mL烧杯中，加热至40 ℃。
在搅拌下慢慢加入预热至40 ℃、pH 4.7的醋酸–醋酸钠缓冲溶液40 mL，用精密pH试纸或酸度计检查pH，再用0.2 mol / L醋酸溶液调至pH 4.7，静置冷至室温。
2．悬浮液出现大量沉淀后，转移至离心管中，在3 500 r / min下离心10 min，弃去上清液，所得沉淀为酪蛋白的粗制品。
3．用40 mL蒸馏水洗涤沉淀，将沉淀搅起，同上离心分离职，弃去上清液。
加入30 mL 95%乙醇，把沉淀充分搅起至成悬浊液，将其转移到布氏漏斗中抽滤，先用30 mL 95%乙醇洗涤，再用30 mL乙醚洗涤，最后抽干制得酪蛋白。
酪蛋白的提取与测定
牛乳中酪蛋白的制备与浓度测定一、实验目的1、学习从牛乳中分离酪蛋白的原理和方法2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法3、了解紫外吸收法测定蛋白质浓度的原理，熟悉紫外分光光度计的使用4、学会用考马斯亮蓝结合法测定蛋白质浓度二、实验原理1、准备酪蛋白原理：牛乳中主要含有酪蛋白和乳清蛋白两种蛋白质，其中酪蛋白占了牛乳蛋白质的80%。
牛乳在PH4.7时酪蛋白等电聚沉后剩余的蛋白质统称为乳清蛋白。
酪蛋白是白色、无味的物质，不溶于水、乙醇等有机溶剂，但溶于碱溶液。
乳清蛋白不同于酪蛋白，其粒子的水和能力很强，分散性高，在乳中呈高分子状态。
本法利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的PH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。
用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。
2、紫外吸收法测定蛋白质浓度的原理：大多数蛋白质由于有酷氨酸和色氨酸的存在，在紫外光280nm有吸收高峰，可以进行蛋白质含量的测定。
但是核酸在280nm也有吸收，干扰测定，不过核酸的最大吸收峰在260nm，通过测定在280nm和260nm时A的比值，然后通过计算消除核酸存在的影响，可以求得有核酸存在时蛋白质的浓度。
3、考马斯亮蓝结合法测定蛋白质浓度原理：考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水微区相结合，这种结合具有高敏感性。
考马斯亮蓝G250的磷酸溶液呈棕红色，最大吸收峰在465nm。
当它与蛋白质结合形成复合物时呈蓝色，其最大吸收峰改变为595nm，考马斯亮蓝G250—蛋白质复合物的高消光效应导致了蛋白质定量测定的高敏感度。
在一定范围内，考马斯亮蓝G250—蛋白质复合物呈色后，在595nm下，吸光度与蛋白质含量呈线性关系，故可以用于蛋白质浓度的测定。
三、实验器材与试剂1、制备酪蛋白：烧杯、玻璃棒、量筒、精密PH试纸、离心机、布氏漏斗、表面皿、恒温水浴锅牛奶、醋酸缓冲液、冰醋酸、95%乙醇、无水乙醚2、紫外光吸收法：紫外可见光分光光度计、容量瓶50ml(×1)、石英比色皿0.9%NaCl、1mol/LNaOH溶液、1mol/L乙酸溶液3、考马斯亮蓝法：紫外可见光分光光度计、试管1.5cm×15cm(×9)、玻璃比色皿牛血清白蛋白（0.1mg/ml）、考马斯亮蓝、0.9%NaCl四、实验步骤制备酪蛋白1、将20mL pH4.7的醋酸-醋酸钠缓冲液预热至40℃2、将20mL牛奶加热至40℃，在搅拌下缓慢地加入20mL预热的pH4.7的醋酸-醋酸钠缓冲液3、用精密pH试纸调pH至4.7，可见溶液变为乳白色悬浮液4、待悬浮液冷却至室温，4000rpm离心5min，弃上清，得酪蛋白粗制品5、用蒸馏水洗沉淀3次，3000rpm离心5min，弃上清6、在沉淀中加入20mL95％乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤7、用乙醇-乙醚混合液洗涤沉淀2次（10ml/次），最后用乙醚洗涤沉淀2次（10ml/次），抽干8、将沉淀摊开在表面皿上，风干，得酪蛋白纯品9、准确称量，计算含量和得率紫外光吸收法1．取待测样品溶液置于的石英比色皿中，于分光光度计波长280nm和260nm，分别读取A280nm和A260nm，用生理盐水为比色空白对照。
从牛奶中提取酪蛋白实验报告
从牛奶中提取酪蛋白实验报告实验目的：通过牛奶中的酪蛋白提取实验，学习酪蛋白的结构、性质和提取方法，掌握酪蛋白的分离技术和纯化技术，进一步了解蛋白质的基本研究方法。
实验原理：酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质成分，它具有重要的营养和功能作用。
酪蛋白是一种具有多种构象和功能的复合蛋白质，在水溶液中可形成多种不同类型的聚集体，如微胶粒、聚集和凝胶，这些聚集类型与酪蛋白的结构和功能密切相关。
酪蛋白具有一定的疏水性，分子内具有四个疏水和一个亲水的疏水环和亲水链结构，酪蛋白还含有大量的氨基酸残基，其中包括5%左右的带电氨基酸。
牛奶中的酪蛋白可以通过离心、酸沉淀、盐析和凝胶过滤等方法进行分离和纯化。
酸沉淀法是目前常用的分离和提取方法，其原理是在酸性条件下，酪蛋白分子失去电荷平衡，发生凝固，形成凝胶状物，从而与其他物质分离。
实验步骤：1、准备工作(1) 将所有试剂和设备准备好，并洗涤干净。
(2) 将牛奶样品加热至80℃，进行杀菌处理。
2、酸沉淀法提取酪蛋白(1) 取适量的牛奶样品置于容器中，加入适量的盐酸调节至pH值为4.6，搅拌均匀。
(2) 加入同等体积的乙醇，混合均匀。
(3) 离心分离出沉淀，用纯净水洗涤数次，使沉淀中的酸性物质除去。
(4) 将沉淀转移到干燥皿，放置于低温干燥箱中干燥。
(5) 称取干燥后的酪蛋白样品重量，计算得到收率。
3、检测酪蛋白的含量和纯度(1) 构建标准曲线，按照酪蛋白样品体积一定比例浓度溶液进行稀释，分别取10μl、20μl、30μl、40μl、50μl的样品，加入PBS缓冲液中，浓度从高到低依次用Bradford 法进行检测吸光度，并通过标准曲线计算出待测样品的酪蛋白含量。
(2) 通过SDS-PAGE方法检测酪蛋白的纯度和电泳图谱。
将待测样品和已知浓度的酪蛋白标准品一同进行SDS-PAGE电泳，经过染色和脱色处理后，观察分离出的蛋白条带，利用比色、图像分析软件等工具进行定量测定，并计算出待测样品中酪蛋白的纯度和分子大小。
牛奶中酪蛋白的提取与分析
实验题目：牛奶中酪蛋白的提取与分析实验材料：牛奶小组成员：实验时间：一：实验题目：牛奶中酪蛋白的提取与分析二：报告撰写者三、小组成员实验仪器 温度计、布氏漏斗（*）、pH 试纸（*）、抽滤瓶（*）水浴锅、烧杯、量筒、表面皿（*）、电子天平（*）、2个1000ml 的容量瓶（*）、2张醋酸纤维薄膜（2cm ×8cm 厚度120nm ）成品（*）、培养皿9—10cm （*）、毛细管（*）、尺子、铅笔、单面刀片（*）、镊子、普通滤纸（*）、电泳槽、玻璃板8cm ×12cm （*）、752型分光光度计（*）、细布（*）0.5ml 、1.0ml 、2.0ml 、5.0ml 的移液管、试管、试管架、 四、实验材料牛奶（蒙牛特仑苏和伊利金典） 五、实验试剂 特仑苏400ml 、金典200ml 、1.66g 巴比妥（*）、12.76g 巴比妥钠（*）、0.5g 氨基黑10B （*）、50ml 甲醇AR （*）、100ml 冰醋酸AR （*） 、95%的乙醇250ml （*)、95%的乙醚100ml （*）、0.2mol/L 的乙酸100ml （*）、0.2mol/L 的乙酸钠100ml （*）、25g 氢氧化钠固体（*）标准酪蛋白、15mg 五水硫酸铜（*）、60mg 酒石酸钾钠（*） 所需试剂配制方法：乙醇乙醚混合液的配制： 10ml95%的乙醇10ml95%的乙醚乙醇钠缓冲液的配制： 0.2mol/L 的乙酸51ml0.2mol/L 的乙酸钠49ml 巴比妥钠缓冲液的配制： 巴比妥1.66g巴比妥钠12.76g染色液的配制： 0.5g 氨基黑10B 50ml 甲醇AR 10ml 冰醋酸AR 漂洗液的配制： 45ml95%乙醇AR 5ml 冰醋酸AR 蒸馏水透明液的配制： 25ml 的冰醋酸AR 75ml 的无水乙醇AR0.05mol/L 氢氧化钠溶液的配制： 16g 的氢氧化钠固体定容至1000ml 10%氢氧化钠溶液的配制： 5g 的氢氧化钠固体定容至50ml 双缩脲试剂的配制：15mg 五水硫酸铜60mg 酒石酸钾钠标准酪蛋白溶液A 的配制（10mg/ml ）： 用0.05mol/L 氢氧化钠溶液配制10ml从特仑苏和金典中提取的酪蛋白样品液1、2的配制（2-9mg/ml ）：配制巴比妥钠缓冲液（pH8.6,0.06mol./L ）,将上述二者混合后定容于1000ml+40ml 蒸馏水，混匀既得染色液配制乙醇乙醚1:1的混合液配制pH4.6的乙酸钠缓冲液（0.2mol/l ）混匀得染色液混匀得透明液溶于5ml 蒸馏水，在搅拌情况下，加入10%氢氧化钠溶液3ml ，用蒸馏水稀释到10ml ，用棕色瓶避光保存用0.05mol/L氢氧化钠溶液配制10ml标准酪蛋白溶液B的配制（1500μg/ml）：用0.05mol/L氢氧化钠溶液配制从特仑苏和金典中提取的酪蛋白样品液3、4的配制（50-1500μg /ml）：用0.05mol/L氢氧化钠溶液配制七、实验目的1.掌握从牛奶中提取酪蛋白的方法2.了解蛋白质分离纯化的基本办法3.学习电泳的基本原理及掌握醋酸纤维素薄膜电泳分离酪蛋白的具体操作4.掌握双缩脲法和紫外吸收法测定蛋白质含量的原理及操作方法并比较两种方法5.熟悉分光光度计的原理和操作6.比较特仑苏与金典中的酪蛋白含量八、实验原理酪蛋白在其等电点时静电荷为零，同种电荷的相互排斥作用消失，溶解度很低，利用这一性质，将牛乳调节到PH4.6，酪蛋白就可以从牛乳中分离出来。
牛乳中酪蛋白的制备
目的要求
学习从牛乳中分离纯化酪蛋白的原理和方法。
实验原理
牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。 35g/L 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白 ， 含量约为 35 g/L。 酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物 等电点为4 混合物， 酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。 利用等电点时溶解度最低的原理， 将牛乳的pH pH调至 利用等电点时溶解度最低的原理 ， 将牛乳的 pH 调至 酪蛋白就沉淀出来。 4.7时，酪蛋白就沉淀出来。
离心注意事项： 离心注意事项：
1.样品倒入玻璃离心管不能太满； 1.样品倒入玻璃离心管不能太满； 样品倒入玻璃离心管不能太满
2.离心前玻璃离心管（套上塑料管套） 2.离心前玻璃离心管（套上塑料管套）放在 离心前玻璃离心管 天平上平衡 平衡好 天平上平衡好； 3.离心机中对称放置； 3.离心机中对称放置； 离心机中对称放置 4.接通电源前确认速度旋钮是否归零， 4.接通电源前确认速度旋钮是否归零，调节 接通电源前确认速度旋钮是否归零 定时旋钮设定时间，按开始键开始离心， 定时旋钮设定时间，按开始键开始离心， 缓慢调节速度至实际需要速度。 缓慢调节速度至实际需要速度。 5.等到离心机完全停止后，机盖取出离心管。 5.等到离心机完全停止后，机盖取出离心管。 等到离心机完全停止后
4．用95%乙醇洗沉淀1次，离心5min(3000r/min)，弃去上 95%乙醇洗沉淀1 乙醇洗沉淀 离心5min(3000r/min)， 清液。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀1 最后用乙醚洗沉淀1 清液。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀1次。最后用乙醚洗沉淀1 各离心5 洗涤试剂用量4毫升/ 次， 各离心5min(3000r/min) 。洗涤试剂用量4毫升/管 5．将沉淀摊开在培养皿上，电吹风吹干；得酪蛋白纯品。 将沉淀摊开在培养皿上，电吹风吹干；得酪蛋白纯品。 6．准确称重，计算含量酪蛋白g/100mL牛乳（g%）,并和 准确称重，计算含量酪蛋白g/100mL牛乳（g%） g/100mL牛乳 理论含量为3.5g/100mL牛乳相比较，求出实际得率。 理论含量为3.5g/100mL牛乳相比较，求出实际得率。 3.5g/100mL牛乳相比较
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实验二十四从牛乳中分离酪蛋白
实验二十四从牛乳中分离酪蛋白
1、目的
掌握从牛乳中分离酪蛋白的原理，学会操作方法。
2、原理
牛乳中含有多种蛋白质，它们有着不同的性质，在脱脂牛乳的蛋白质中酪蛋白约占80%，酪蛋白是一类含磷蛋白质的复杂混合物。
利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳
的pH 调到4.7（酪蛋白的等电点）时，酪蛋白就沉淀析出。
再用乙醇和乙醚洗涤沉淀，
除去脂类杂质，便可制得纯酪蛋白。
3、实验材料与仪器
3.1材料
新鲜牛乳
（1）95%乙醇
（2）乙醚
（3）0.2 mol/L醋酸溶液
（4）0.2 mol /L pH 4.7醋酸–醋酸钠缓冲液，配制方法如下：先分别配制A 液
和B 液：
A 液（0.2 mol / L 醋酸钠溶液）称取分析纯醋酸钠（NaAc ·3H 2O ）27.22g
溶于蒸馏水中，定容至1000 ml。
B 液（0.2 mol / L 醋酸溶液）称取分析纯冰醋酸（含量大于99.8%）12.0g 溶于蒸馏水中，定容至1000 ml。
取A 液885 ml 和B 液615 ml 混合，即得pH 4.7 的醋酸－醋酸钠缓冲液1500 ml 。
3.2仪器
恒温水浴、普通离心机、精密pH 试纸或酸度计、布氏漏斗、抽滤瓶、表面皿、离心
管（80 ml、量筒、烧杯（100 ml）、玻棒、电子天平
4、操作步骤
（1）取30 ml鲜牛乳，置100 ml烧杯中，加热至40 ℃。
在搅拌下慢慢加入预热至40 ℃、pH 4.7的醋酸–醋酸钠缓冲溶液40 ml，用精密pH 试纸或酸度计检查pH ，再用0.2 mol/L醋酸溶液调至pH 4.7，静置冷至室温。
（2）悬浮液出现大量沉淀后，转移至离心管中，在3 500 r /min下离心10 min，弃去上清液，所得沉淀为酪蛋白的粗制品。
（3）用40 ml 蒸馏水洗涤沉淀，将沉淀搅起，同上离心分离，弃去上清液。
加入30 ml 95%乙醇，把沉淀充分搅起至成悬浊液，将其转移到布氏漏斗中抽滤，先用30 ml 95%乙醇洗涤，再用30 ml乙醚洗涤，最后抽干制得酪蛋白。
（4）将酪蛋白白色粉末摊在表面皿上风干，于电子天平称重M 。
5、计算
X=M/V
式中：M---酪蛋白白色粉末的重量（g ） V---鲜牛乳体积（ml ）。