论转录组的研究方法及当前进展
水产动物基因转录组学研究进展
水产动物基因转录组学研究进展摘要：我国作为最大的发展中国家和传统的农业大国，农业有着巨大的应用空间和广阔的发展前景。
而在农业中，水产方面又是一大类重要的发展方面。
近年来，水厂养殖相关技术不断更新发展，我国的水产行业发展水平日新月异，而在相关研究中，分子生物学与水产的结合吸引了更多人的目光。
本文将就分子生物学与水产养殖的结合进行综述，主要方面为外界环境条件改变、饲料营养成分改变对基因表达的影响以及转录组学技术在水产动物研究中的应用。
关键词：水产养殖；分子生物；基因表达；转录组学1 基因转录组学在水产动物研究中的应用近年来，转录组学技术及其在水产动物中的研究备受研究者的广泛关注。
转录组学技术主要有基于杂交技术和测序技术为基础的两大类技术; 两类技术在水产动物的转录组学研究中均得到了广泛运用。
以下就近年来水产动物在免疫应答、生长发育、生物进化和毒理学方面的转录组学研究进展进行整理。
转录组学、基因组学和蛋白质组学等各种组学技术在揭示水产动物抗病免疫、生长发育、系统进化和生物毒理过程及相应机理方面的研究中越来越重要。
通过组学研究，可以深刻理解水产动物各种生命活动规律的内在联系和分子机制，并根据相应结果进一步运用到抗病育种、药物筛选、种质资源保护和环境监测等多个研究领域。
转录组学是研究特定细胞、组织或器官在特定生长发育阶段或某种生理状况下所有转录本的科学。
这所有的转录本就称之为转录组，包括编码蛋白质的mRNA和非编码RNA( rRNA，tRNA和其他ncRNA)。
与基因组相对稳定不同的是，转录组是随着生长发育阶段、生理状态和外界环境的改变而变化的。
因此，转录组分析成为研究生物生长发育、应激生理、抗病免疫等作用机制的有力工具。
依据转录组学技术原理的不同，可以将其划分为两类技术，一种是基于杂交的转录组学技术，如利用cDNA微阵列(cDNA microarray) 和DNA宏阵列( DNA macroarray) 进行检测的转录组学技术; 一种是基于测序的转录组学技术，如cDNA 文库或表达序列标签( expressed sequence tags，EST) 文库测序技术，基因表达系列分析( serial analysis of gene expression，SAGE) 技术和大规模平行测序( massively parallel signature sequencing，MPSS) 技术，以及近年来发展起来的下一代高通量测序技术( next generation sequencing，NGS) ，即RNA测序( RNA sequencing，RNA-seq) 技术等。
转录组分析报告
转录组分析报告介绍转录组分析是研究基因组中转录过程的研究领域。
通过转录组分析，我们可以了解到在特定条件下细胞中正在转录的所有基因。
这些信息对于理解细胞功能、疾病发展以及生物技术的开发都非常重要。
本报告将介绍转录组分析的一般步骤和常用方法。
步骤一：实验设计转录组分析的第一步是设计实验。
在这个步骤中，我们需要确定要研究的样本类型、实验条件和重复次数。
合理的实验设计可以最大程度地减少误差，并提高结果的可靠性。
步骤二：RNA提取在转录组分析中，我们需要从样本中提取RNA。
RNA是细胞中转录的产物，它可以反映细胞中正在表达的基因信息。
RNA提取的质量和纯度对后续的转录组分析非常重要。
常用的提取方法包括酚氯仿法、磁珠法和硅胶膜法等。
步骤三：RNA测序RNA测序是转录组分析的核心步骤之一。
通过RNA测序，我们可以将RNA样本转化为对应的DNA序列，并确定每个基因的表达水平。
常见的RNA测序技术包括Sanger测序、二代测序和三代测序等。
二代测序技术如Illumina和Ion Torrent等已经成为转录组分析的主流技术。
步骤四：数据预处理RNA测序会产生大量的原始数据，这些数据需要进行预处理以去除噪音和提高数据质量。
数据预处理包括去除低质量的reads、去除接头序列、去除重复序列和过滤低表达基因等。
预处理后的数据可以为后续的分析提供可靠的基础。
步骤五：差异表达基因分析差异表达基因分析是转录组分析的重要环节之一。
通过比较不同条件下基因的表达水平，我们可以找到与特定条件相关的差异表达基因。
常用的差异表达基因分析方法包括DESeq、edgeR和limma等。
这些方法可以帮助我们发现与特定条件相关的生物学过程和信号通路。
步骤六：功能注释和富集分析一旦确定了差异表达基因，我们可以对这些基因进行功能注释和富集分析。
功能注释可以帮助我们了解差异表达基因的功能和参与的生物学过程。
而富集分析可以帮助我们发现差异表达基因在特定功能和通路中的富集情况。
植物在非生物胁迫下代谢组学与转录组学的研究进展
植物在非生物胁迫下代谢组学与转录组学的研究进展一、本文概述随着全球气候变化的加剧，非生物胁迫如干旱、高温、盐碱等已成为影响植物生长和产量的重要因素。
为了深入理解和应对这些环境压力，植物代谢组学和转录组学的研究逐渐受到广泛关注。
本文旨在概述植物在非生物胁迫下的代谢组学和转录组学研究的最新进展，探讨这些技术在揭示植物响应非生物胁迫机制中的应用，以及未来可能的研究方向。
文章将首先介绍代谢组学和转录组学的基本概念和研究方法，然后重点分析近年来在植物非生物胁迫响应领域的代谢组学和转录组学研究成果，最后讨论这些技术在实际应用中的挑战和前景。
二、非生物胁迫的类型及其对植物的影响非生物胁迫是植物在生长和发育过程中面临的主要环境压力之一，包括但不限于盐胁迫、干旱胁迫、冷胁迫、热胁迫、重金属胁迫以及UV辐射等。
这些胁迫条件通常会对植物的生长、发育和生理代谢产生显著影响，严重时甚至导致植物死亡。
盐胁迫主要发生在盐碱地或海水灌溉地区，过高的盐浓度会导致植物细胞内的渗透压失衡，从而影响细胞的正常功能。
干旱胁迫则常见于水资源短缺的地区，长时间的干旱会导致植物水分亏缺，影响光合作用和其他代谢过程。
冷胁迫和热胁迫则分别由低温和高温引起，它们会干扰植物细胞的膜结构和酶活性，从而影响植物的正常生长。
重金属胁迫通常发生在工业污染地区，过量的重金属会干扰植物体内酶的活性，造成代谢紊乱。
UV辐射则主要来自太阳，过量的UV辐射会损害植物细胞的DNA和蛋白质，对植物造成直接伤害。
为了应对这些非生物胁迫，植物会启动一系列的生理和分子机制。
在代谢组学层面，植物会通过调整代谢途径，合成和积累一些特定的代谢产物，如渗透调节物质、抗氧化物质等，以维持细胞的正常功能。
在转录组学层面，植物会调整基因的表达模式，表达和上调一些与胁迫响应相关的基因，如转录因子、激酶等，以响应和适应胁迫环境。
研究植物在非生物胁迫下的代谢组学和转录组学变化，有助于深入理解植物应对环境压力的机制，为植物抗逆性的遗传改良和农业生产的可持续发展提供理论依据。
转录组的研究技术方法及当前
转录组的研究技术方法及当前
一、概述
转录组技术是基于分子生物学技术，对特定的物种或细胞样品中所有RNA分子进行直接测定，即对其转录上游的基因表达进行全面性研究的方法。
它是分子生物学的重要组成部分，可用于研究基因的表达模式、表达
调控机制以及基因的结构和功能。
转录组技术也可以揭示特定细胞中不同
类型RNA的表达情况，深入研究基因，从而开发更多的抗病毒和抗癌药物。
二、研究方法及技术
1、基于生物信息学的转录组分析技术
顾名思义，基于生物信息学的转录组分析技术利用生物信息学技术将
转录组数据分析成有意义的结果。
基于生物信息学的转录组分析中最常使
用的技术是最大似然估计、聚类分析、共表达网络分析和差异表达分析。
2、高通量测序技术
高通量测序技术是转录组技术中最重要的技术，包括Illumina测序
和SOLiD测序。
Illumina高通量测序技术不仅可以准确测定出物种或细
胞的所有mRNA，而且可以提供全面性转录组测序数据，从而深入了解转
录组结构和表达模式的变化。
SOLiD测序技术可用于研究基因的表达模式
和调控机制，以及基因功能的结构和变化。
3、芯片技术
DNA芯片测序技术在转录组分析中已经被广泛应用。
转录组学 表观组学研究方法和技术路线
转录组学表观组学研究方法和技术路线1. 引言1.1 研究背景转录组学和表观组学作为生物学研究领域的新兴技术，在基因调控和表观遗传学研究中发挥着越来越重要的作用。
随着高通量测序技术的发展和成熟，研究人员可以更深入地了解细胞内基因的表达调控和表观遗传修饰，为解决生物学中的重大科学问题提供了强大的工具和方法。
转录组学研究方法主要关注细胞内所有基因的转录活动，通过测定RNA的种类和数量来揭示基因表达的模式，从而帮助揭示基因调控网络和疾病发生机制。
而表观组学研究方法则更多关注基因组DNA的表观遗传修饰，如DNA甲基化和组蛋白修饰，这些修饰能够影响基因的表达和染色体结构，从而影响细胞功能和生物表现。
在当前生物技术发展的大背景下，转录组学和表观组学的研究方法和技术路线不断完善和创新，为生命科学研究开辟了新的领域。
随着应用的深入和研究者对这些技术的掌握，转录组学和表观组学的未来发展前景广阔，但也面临着一系列挑战和机遇。
【研究背景】中的2000字内容到此结束。
1.2 研究意义研究表观组学和转录组学的方法和技术路线对于理解基因组的调控机制、揭示疾病发生的分子机制，以及发展个性化医学具有重要的意义。
随着高通量测序技术的不断发展，研究者们能够更加全面地解读基因组中的信息，揭示基因和环境之间的相互作用，从而为疾病的预防、诊断和治疗提供更为精准的依据。
表观组学的研究方法能够揭示基因组中的表观修饰在基因表达调控中的作用，为我们理解基因组不同部分之间的相互联系提供了重要线索。
转录组学的研究方法则可以帮助我们了解细胞中基因的表达情况，进一步揭示基因功能和调控机制。
这些研究方法和技术路线的持续发展，为科学家们提供了更多的工具和资源，帮助他们更好地解读基因组中的信息，并将其应用于疾病的研究和治疗中。
深入研究表观组学和转录组学的研究方法和技术路线不仅对于推动基础科学研究具有重要意义，更对于促进医学领域的发展和进步具有积极的意义。
通过这些研究，我们可以更好地理解生命的奥秘，为人类健康和生命质量的提高做出更为重要的贡献。
论转录组的研究方法及当前进展
论转录组的研究方法及当前进展转录组学是研究基因组所有转录本的一项技术。
转录组研究方法是通过使用高通量测序技术对组织或个体在特定条件下的所有mRNA进行测序，并利用生物信息学方法对所得数据进行分析和解读。
转录组研究旨在了解基因组在转录水平上的整体表达差异和调控机制，揭示基因在特定生物学过程中的功能和相互关系，以及识别与疾病相关的基因表达异常。
转录组研究方法主要包括实验设计、样品采集、RNA提取、文库构建、高通量测序和数据分析等步骤。
在实验设计阶段，研究者需要确定研究目的、选择样本类型和条件、确定对照组，以及确定测序平台等。
在样品采集和RNA提取步骤中，研究者需选择适当的组织或细胞类型、采集足够数量的样品，并使用RNA提取试剂盒提取内源性RNA。
文库构建步骤中，研究者需要通过将RNA逆转录合成cDNA，进行文库构建，并利用文库建设试剂盒进行PCR扩增。
高通量测序阶段，常用的技术包括RNA-Seq和微阵列。
RNA-Seq技术通过构建cDNA文库，并使用Illumina HiSeq等高通量测序平台进行测序，生成大量的RNA序列数据。
微阵列技术通过将RNA与探针杂交，利用辨识标记杂交到探针上的RNA的方式检测基因表达水平。
数据分析阶段主要包括数据预处理、基因差异表达分析、功能注释和通路分析等。
预处理步骤包括清洗、质量控制和对齐等，以确保后续分析的可靠性和准确性。
基因差异表达分析可通过比较两个或多个条件的转录组数据得出差异表达的基因集合。
功能注释和通路分析通过对差异表达的基因进行功能注释和通路富集分析，揭示不同基因的功能和相互作用过程。
转录组学的研究方法在生命科学领域取得了重要的进展。
它广泛应用于生物学、医学和农业等领域。
在生物学研究中，转录组学为生物进化、发育和适应性提供了重要的证据和洞察。
在医学研究中，转录组学为疾病的发病机制和治疗靶点的发现提供了新的方法和工具。
在农业研究中，转录组学有助于了解植物对环境和胁迫的适应机制，为植物的改良和遗传育种提供了新的思路和方法。
转录组测序技术的应用及发展综述
转录组测序技术的应用及发展综述摘要：转录组测序（RNA-Seq）作为一种新的高效、快捷的转录组研究手段正在改变着人们对转录组的认识。
RNA—Seq利用高通量测序技术对组织或细胞中所有RNA 反转录而成cDNA文库进行测序，通过统计相关读段（reads）数计算出不同RNA的表达量，发现新的转录本;如果有基因组参考序列,可以把转录本映射回基因组，确定转录本位置、剪切情况等更为全面的遗传信息，已广泛应用于生物学研究、医学研究、临床研究和药物研发等。
文章主要比较近年来转录组研究的几种方法和几种RNA—Seq的研究平台，着重介绍RNA—Seq 的原理、用途、步骤和生物信息学分析，并就RNA—Seq技术面临的挑战和未来发展前景进行了讨论及在相关领域的应用等内容，为今后该技术的研究与应用提供参考。
关键词: RNA-Seq；原理应用；方法;挑战；发展前景Abstract：Transcriptome sequencing （RNA-Seq) is a kind of high efficiency, quick transcriptome research methods are changing our understanding of transcriptome。
RNA—Seq to use high-throughput sequencing of tissues or cells of all RNA reverse transcription into cDNA library were sequenced, through statistical correlation read paragraph (reads）numbers were calculated from the expression of different RNA transcripts, find new; if the genome reference sequence，the transcripts mapped to genomic, determine the position of the transcription shear condition, more genetic information，has been widely used in biological research，medical research，clinical research and drug development。
转录组学技术在生物医学研究中的应用
转录组学技术在生物医学研究中的应用随着生物学和医学研究的不断深入，生物医学研究中出现了越来越多的复杂性问题。
为了更深入地了解生物体内基因调控和信号传递等机制，在转录组学技术的发展过程中，高通量测序技术的成熟应用为生物医学研究提供了新的思路和方法。
在生物医学研究中，转录组学技术已经被广泛应用，并带来了许多重要的进展。
本文将对转录组学技术在生物医学研究中的应用进行详细探讨。
一、转录组学技术的基本原理转录组学是系统性地研究生物体内所有基因的转录产物的科学，它是继基因组学之后的又一个重要的生物学研究方向。
从基因组到转录组，转录组学技术中最核心的就是RNA测序技术，而高通量测序技术作为其中最典型的代表，被广泛用于转录组学研究。
高通量测序技术的出现和应用为转录组学研究提供了新的途径。
二、转录组学技术在生物医学研究中的应用1.疾病诊断转录组学技术广泛用于疾病的分子诊断。
它可以通过检测不同基因表达的变化，快速诊断疾病的类型和程度。
例如，在肿瘤研究中，通过转录组学技术可以快速鉴别出不同类型的肿瘤，同时还可以通过对基因表达谱的分析推断出患者的病程和预后情况。
2.新药开发转录组学技术广泛用于新药的研发。
它可以快速筛选出治疗特定疾病的新药物，同时还可以分析药物的作用机制。
例如，在对某种新型药物的作用机制研究中，通过转录组学技术可以分析出药物对基因表达的调控情况，从而确定其作用机制，为药物研发提供有效的理论基础。
3.基因治疗基因治疗是使用基因工程技术来治疗某些疾病。
转录组学技术被广泛应用于基因治疗中，可以用来寻找合适的基因修复方案，并评估其治疗效果。
例如，在研究某种基因治疗技术时，转录组学技术可以用来分析修复后的基因表达情况，为治疗效果的评估提供有力的支持。
4.疾病机理研究转录组学技术还被广泛应用于疾病机理的研究中，可以帮助研究人员更深入地了解疾病形成的机制。
例如，在研究癌症发生机理时，转录组学技术可以用来分析癌症相关基因的表达情况，寻找发病的关键环节，并开发靶向治疗的策略。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
论转录组的研究方法及当前进展郑忠巧(生物工程一班生命科学学院黑龙江大学150080)摘要：转录组是特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA 的集合。
转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构, 揭示特定生物学过程以及疾病发生过程中的分子机理。
转录组分析的研究方法。
研究平台发生着日新月异的变化,同时生物信息分析学分析的内容也在逐步完善。
本文对转录组的研究方法及当前进展作了一个综合论述。
关键词：转录组、SAGE、MPSS、RNA-Seq、方法、特点On the transcriptome research methods and current progressZhengZongqiao(The first class of Biotechnology , College of Life Science, Heilongjiang University, Harbin,150080)Abstract: the transcriptome is a particular tissue or cell in a certain developmental stage or function state all the set of RNA transcription. Transcriptome research to research from the overall level of gene function and gene structure, reveal the specific molecular mechanism in the process of biological processes and disease. Transcriptome analysis of research methods. Research platform with rapid changes, at the same time, the content of the bioinformatics analysis has also been gradually perfected. In this paper, the research methods and the current progress of the transcriptome made a comprehensive review.Key words: the transcriptome, SAGE, MPSS, RNA - Seq, methods and characteristics.一、转录组的定义遗传学的研究对象由少量基因及其功能转变为生物体的全基因组结构、基因功能、表观修饰、细胞调控等, 遗传学研究进入了基因组和后基因组时代。
其中, 通过细菌基因组和转录组研究来揭示生命基本过程, 如生命形成、生物进化、基础代谢、疾病发生、药物靶点等, 成为生物学研究的重要手段。
广义转录组（Transcriptome）系指从一种细胞或者组织的基因组所转录出来的RNA的总和，包括编码蛋白质的mRNA和各种非编码RNA（rRNA,tRNA,snoRNA,snRNA,microRNA 和其他非编码RNA等）。
狭义转录组系指所有参与翻译蛋白质的mRNA 总和。
二、研究转录组的原因转录组是特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有的RNA 的集合。
转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构, 揭示特定生物学过程以及疾病发生过程中的分子机理。
转录组是连接基因组遗传信息与生物功能的蛋白质组的纽带，转录水平的调控是最重要也是目前研究最广泛的生物体调控方式。
转录组的研究比基因组的研究能给出更高效的有用信息。
比如，人类基因组包含有30亿个碱基对，其中大约只有5万个基因转录成mRNA分子，而转录后的mRNA仅部分被翻译生成功能性的蛋白质。
与基因组不同，转录组更有时间空间性。
比如，我们人体大部分细胞具有一模一样的基因，而即使同一细胞在不同的生长时期及生长环境下，其基因表达情况也是不完全相同的。
所以，除了异常的mRNA降解现象（如转录衰减）以外，转录组反映的是特定条件下活跃表达的基因。
三、研究转录组的基本方法及各种方法的特点目前研究转录组的方法主要有:（1）基于杂交技术，如cDNA芯片和寡聚核苷酸芯片；（2）基于测序技术，如早先给予Sanger测序的SAGE(Serial Analysis of Gene Expression)和MPSS(Massively Parallel Signature Sequencing),全长cDNA文库和EST文库的测序分析.现在对cDNA、EST等的测序工作已升级为代测序技术，第一代测序技术较Sanger测序技术通量更高，运行时间更短，测序片段更长；（3）基于新一代高通量测序技术的转录组测序，现在通常将基于第二代测序技术的转录组测序分析称为RNA-Seq。
（1）基于杂交技术的特点基于杂交技术的DNA芯片技术只适用于检测已知序列，却无法捕获新的mRNA。
细胞中mRNA的表达丰度不尽相同，通常细胞中约有不到100种的高丰度mRNA，其总量占总mRNA一半左右，另一半mRNA由种类繁多的低丰度mRNA组成。
因此由于杂交技术灵敏度有限，对于低丰度的mRNA，微阵列技术难以检测，也无法捕获到目的基因mRNA表达水平的微小变化。
（2）SAGE法的特点SAGE是以Sanger测序为基础用来分析基因群体表达状态的一项技术。
SAGE 技术首先是提取实验样品中RNA并反转录成cDNA，随后用锚定酶(Anchoring enzyme)切割双链cDNA，接着将切割的cDNA 片段与不同的接头连接，通过标签酶酶切处理并获得得到SAGE 标签，然后PCR 扩增连接SAGE 标签形成的标签二聚体，最后通过锚定酶切除接头序列，以形成标签二聚体的多聚体并对其测序. SAGE可以在组织和细胞中定量分析相关基因表达水平。
在差异表达谱的研究中，SAGE 可以获得完整的转录组学图谱以及发现新的基因并鉴定其功能、作用机制和通路等。
（3）MPSS法的特点MPSS是SAGE的改进版，MPSS 技术首先是提取实验样品RNA并反转录为cDNA，接着将获得的cDNA克隆至具有各种adaptor 的载体库中，并PCR 扩增克隆至载体库中的不同cDNA 片段，然后在T4 DNA 聚合酶和dGTP 的作用下将PCR产物转换为单链文库，最后通过杂交将其结合在带有Anti-adaptor 的微载体上进行测序。
MPSS 技术对于功能基因组研究非常有效，能在短时间内捕获细胞或组织内全部基因的表达特征。
MPSS技术对于鉴定致病基因并揭示该基因在疾病中的作用机制等发挥了重要作用。
(4）高通量测序技术—RNA-Seq的特点a)数字化信号：直接测定每个转录本片段序列, 单核苷酸分辨率的精确度, 可以检测单个碱基差异、基因家族中相似基因以及可变剪接造成的不同转录本的表达, 同时不存在传统微阵列杂交的荧光模拟信号带来的交叉反应和背景噪音问题, 能覆盖信号超高的动态变化范围；b)高灵敏度：能够检测到细胞中少至几个拷贝的稀有转录本；c)任意物种的全基因组分析：无需预先设计特异性探针, 因此无需了解物种基因信息, 能够直接对任何物种进行转录组分析, 这对非模式生物的研究尤为重要,例如Wang等、Xiang等和Vera 等利用RNA-Seq技术分别对白粉虱、海鲈鱼和蝴蝶转录组进行了研究。
同时能够检测未知基因, 发现新的转录本, 并精确地识别可变剪切位点及cSNP, UTR 区域；d)更广的检测范围：高于6个数量级的动态检测范围, 能够同时鉴定和定量稀有转录本和正常转录本; 而芯片对过低或过高表达的基因缺乏敏感性, 因而动态检测范围小。
此外, RNA-Seq 重复性好, 无需技术重复, 而且起始样品比芯片技术要少得多, 尤其适用于来源极为有限的生物样品分析, 如癌症干细胞。
四、转录组的研究进展（1）单细胞转录组的分析转录组分析应该以单细胞为研究模型，科学家应用单细胞RNA-seq技术即可获得单细胞的转录组信息。
2009年Surali Azim和Lao Kaiqin领导的课题组通过对单个小鼠卵裂球细胞的RNA- Seq数据进行分析，分析发现至少5个测序所获得的reads比微阵列技术多出75％（5270）的表达基因，并鉴定了1753个崭新的剪切位点。
除此以外，单细胞的RNA-seq结果表明了在相同的卵裂球或卵母细胞中，至少有8-19％的基因存在两个以上的转录异构体，该现象清楚表明了在胚胎发育过程中单细胞转录组的复杂性。
最后，通过对单个Dicer1-/- 和Ago2-/-卵母细胞的转录组测序，相对野生型来说，Dicer1-/- 和Ago2-/-卵母细胞分别发现1696和1553个基因异常上调，1571和1121个基因异常下调，而619基因是相同的。
这种单细胞RNA-Seq技术检测将大大提高我们对单个细胞在哺乳动物发育中转录复杂性的理解。
（2）转录组测序确定RNA结构2010年12月份美国加州大学圣克鲁兹分校霍华德·休斯医学研究院Sofie Salama教授所领导的课题组描述了一种通过转录组高通量测序方法测定RNA结构的方法(Fragmentation sequencing ，FragSeq)，该方法发表在《自然—方法学》。
该方法利用核酸酶P1只切割单链RNA的特性对小鼠RNA进行片段化，片段化RNA 的大小在20–100nt之间，然后在片段的5’和3’端分别加上测序接头，再进行逆转录和PCR扩增，最后构建FragSeq文库并对其进行高通量测序。
同时作者通过生物信息学分析大量的高通量测序结果，并辅以实验数据成功测定了小鼠的非编码RNA的二级结构。
（3）转录组测序在疾病方面的应用转录组测序(RNA-seq) 是最近发展起来的利用高通量测序技术进行转录组分析的一种技术, 可全面快速地获得特定细胞或组织在某一状态下的几乎所有的成熟mRNA和ncRNA。
相对于传统的基因芯片技术，RNA-seq技术不需要针对已知序列设计探针，即可检测细胞或组织的整体转录水平。
RNA-seq技术具有更灵敏的数字化信号更高的通量以及更广泛的检测范围。
在疾病的机制研究以及疾病治疗领域，转录组测序作为一个有力的工具已经被广泛使用。
2010 年7 月, 密歇根大学Arul MChinnaiyan实验室分析了15 例前列腺癌样本的转录组测序结果, 研究发现其中有两例前列腺癌样本的ETS基因没有发生融合，进一步的研究表明存在于Raf信号途径中的BRAF和RAF1基因会发生融合现象，作者同时利用q-PCR 和FISH技术验证了上述现象的存在。