多聚二磷酸腺苷(ADP)核糖聚合酶-1(PARP-1)在高糖致大鼠肾脏系膜细胞细胞外基质沉积中的作用
前列腺素E1对大鼠脊髓损伤后PARP-1表达
前列腺素E1对大鼠脊髓损伤后PARP-1表达摘要】目的:观察前列腺素E1对大鼠脊髓损伤后多聚ADP核糖聚合酶(PPRP-1) 表达的影响。
方法成年SD大鼠30只，采用Allen重物打击法制作大鼠脊髓损伤模型，随机分为前列腺素E1治疗组及对照组各15只。
治疗组每日尾静脉注射前列腺素E15ug/d，对照组尾静脉注射等量生理盐水。
取损伤段脊髓组织，免疫组化检测6小时及12小时后PPRP-1的表达变化。
结果 6小时及12小时后，前列腺素E1治疗组PARP-1表达均低于对照组(P<0.05)。
结论前列腺素E1可减少大鼠继发性脊髓损伤时的氧化应激反应，可能作为脊髓损伤的一种有潜力的新药。
【关键词】前列腺素E1；脊髓损伤；多聚ADP核糖聚合酶【中图分类号】R352【文献标识码】A【文章编号】1005-0515(2011)03-0010-01继发性脊髓损伤与脊髓序列性组织自毁性破坏发生的继发性性损伤相关，其中，氧化应激反应在损伤的继发性病理变化中有着重要作用[1]。
多聚ADP核糖聚合酶(poly(ADP-ribose)polymerase PARP)是一种DNA修复酶，DNA受到氧化损伤时被活化，参与脊髓继发性损伤[2]。
手术、药物及基因治疗的运用对脊髓损伤带来一定的效果，但脊髓损伤所致的致残率仍相当高。
前列腺素E1 (prostaglandin E1, PGE1) 是一种具有高度生物活性物质,它可舒张血管平滑肌，降低外周阻力,扩张微血管，改善全身血流动力学，并可抑制血小板聚集。
本实验通过观察PARP-1的表达，探讨PGE1对脊髓继发性损害的保护作用。
1材料与方法1.1材料:成年健康雄性SD大鼠30只，3~4月龄，体重(250±30) g，由湖北省实验动物中心提供。
实验器材为Allen打击器，FA2004A电子天平，OLYMPUS显微镜，荧光显微镜。
具体试剂及来源如下：PGE1注射液(北京泰德公司)，多聚ADP核糖聚合酶(PARP-1)兔抗大鼠多克隆抗体(eBioscience公司)，FITC标记的山羊抗兔抗体IgG(北京中杉金桥生物技术公司)。
【国家自然科学基金】_parp-1_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140803
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
科研热词 脑损害 脑损伤 肠损伤 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(parp-1) 缺血再灌注 深低温停循环 核转录因子-κ b 心室重构 心力衰竭 基质金属蛋白酶 分子机制 凋亡诱导因子(aif) 体外循环 低血糖 1型多聚adp核糖聚合酶
科研热词 推荐指数 脑卒中 2 神经退行性疾病 2 多聚adp核糖聚合酶 2 靶向治疗 1 重症急性胰腺炎 1 肾上腺皮质细胞 1 聚adp核糖聚合酶类 1 氧化应激 1 抑制剂 1 多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 1 多柔比星 1 增殖 1 基因表达 1 合成致死策略 1 前庭毛细胞 1 前列腺癌 1 凋亡诱导因子 1 凋亡 1 依托泊苷 1 乳腺肿瘤 1 三阴性乳腺癌 1 retina pigment epithelial cells 1 parthanatos 1 parp-1抑制剂 1 parp-1依赖性细胞死亡 1 parp 1 oxidative stress 1 nf-κ b 1 brca1蛋白 1 age-related macular degeneration 1 acetylcholinesterase 1 5-氨基异喹啉酮 1
2012年 科研热词 推荐指数 序号 科研热词 推荐指数 凋亡 3 1 细胞增殖 3 血管内皮生长因子c 2 2 细胞凋亡 3 肿瘤淋巴管形成 2 3 凋亡 3 细胞凋亡 2 4 骨髓间充质干细胞 2 慢性粒细胞性白血病 2 5 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 2 nf-κ b 2 6 大鼠 2 bcr/abl 2 7 食管癌 1 黄酮 1 8 遗传性乳腺癌 1 阿尔茨海默病 1 9 转染 1 转录因子-kappab 1 10 表皮生长因子 1 英文摘要 1 11 血管瘤内皮细胞 1 自噬 1 12 蛋白激酶b(akt)磷酸化 1 肝癌细胞 1 13 蛇毒 1 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 1 14 脑卒中 1 聚adp-核糖聚合酶-1 1 15 肝转移 1 聚(腺苷酸二磷酸核糖)聚合酶-1 1 16 聚腺苷二磷酸核糖水解酶(parg) 1 聚(腺苷二磷酸核糖)水解酶 1 17 聚腺苷二磷酸核糖 1 编辑工作 1 18 聚adp核糖聚合酶类 1 细胞周期 1 19 聚adp核糖聚合酶1(parp-1) 1 糖原合酶激酶-3 1 20 聚adp-核糖聚合酶-1(parp-1) 1 磷酸化 1 21 羟基喜树碱 1 磷酰化 1 22 结肠癌 1 白杨素 1 23 细胞死亡 1 氢醌 1 24 细胞周期 1 标记 1 25 短发夹rna 1 期刊 1 26 相互作用 1 放射性核素 1 27 番荔枝内酯类聚醚类似物aa005 1 抗肿瘤药物 1 28 生物学性状 1 扫描电镜 1 29 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1 微绒毛 1 30 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 1 多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1基因 1 31 活性氧 1 多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶 1 32 氯通道 1 多聚(腺苷二磷酸核糖)水解酶 1 33 氧化应激 1 基因,肿瘤抑制 1 34 氢醌 1 单核苷酸多态性 1 35 急性早幼粒细胞白血病 1 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 1 36 平阳霉素 1 内容介绍 1 37 多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1 1 人肝细胞癌 1 38 多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶 1 乳腺癌 1 39 受体 1 tk6细胞 1 40 单核苷酸多态性 1 tau蛋白 1 41 前列腺肿瘤 1 rna干扰 1 42 前列腺增生 1 poly （adp-ribose） polymerase-l, 1 poly （adp-ribosyl）ation, 43 凋亡诱导因子(aif) inflammation, lung 1 injury, inhibitor, parp-j基因 1 44 乳腺肿瘤 1 parp-1抑制剂 1 45 中华眼镜蛇 1 nf-kb 1 46 一氧化氮多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(parp-1) 1 microrna 1 47 sirtuins 1 ku80 1 48 phⅱ-7 1 49 parp-1抑制剂 1 50 parp-1 1 51 p-gp 1 52 nu1025 1
PARP-1、 Caspase-3在子宫内膜癌组织中的表达变化及意义
PARP-1、 Caspase-3在子宫内膜癌组织中的表达变化及意义宫莹莹;何玉;席玉玲【摘要】目的探讨多聚ADP核糖聚合酶1(PARP-1)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)在子宫内膜癌组织中的表达变化及其临床意义.方法收集子宫内膜癌组织60例份、正常子宫内膜组织20例份、子宫内膜增生组织20例份,采用免疫组化法检测各组织PARP-1、Caspase-3蛋白表达,分析子宫内膜癌组织PARP-1、Caspase-3表达与患者临床病理参数的关系及二者的相关性.结果子宫内膜癌组织、正常子宫内膜组织及子宫内膜增生组织PARP-1阳性表达率分别为73.33％、15.00％、45.00％,不同组织间PARP-1阳性表达率比较P＜0.05或＜0.01.子宫内膜癌组织、正常子宫内膜组织及子宫内膜增生组织Caspase-3阳性表达率分别为41.67％、85.00％、45.00％,正常子宫内膜组织Caspase-3阳性表达率高于子宫内膜癌组织及子宫内膜增生组织(P均＜0.01).子宫内膜癌组织PARP-1阳性表达与患者的临床分期、分化程度、浸润深度均有关(P均＜0.05),与淋巴结转移无关(P＞0.05).子宫内膜癌组织Caspase-3阳性表达与患者的临床分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移均无关(P均＞0.05).子宫内膜癌组织PARR-1、Caspase-3阳性表达率呈负相关(r=-0.64,P＜0.01).结论子宫内膜癌组织PARP-1表达升高、Caspase-3表达降低;PARP-1表达升高可能参与子宫内膜癌的发生与发展.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2017(057)044【总页数】3页(P92-94)【关键词】子宫内膜癌;多聚ADP核糖聚合酶1;半胱氨酸蛋白酶3【作者】宫莹莹;何玉;席玉玲【作者单位】蚌埠医学院第一附属医院,安徽蚌埠233004;蚌埠医学院第一附属医院,安徽蚌埠233004;蚌埠医学院第一附属医院,安徽蚌埠233004【正文语种】中文【中图分类】R737.33子宫内膜癌占女性生殖系统恶性肿瘤的20%～30%，其具体发病机制尚未研究清楚[1]。
二甲双胍通过调控PARP-1活性对Ⅱ型糖尿病肾脏的保护作用
kidney under the high glucose environment caused by diabetes through regulating the expression of PARP-1，downregulating the expression of NF-kB in the DN model， inhibiting NF-kB/iNOS/NO pathway， inhibiting oxidative damage，and reducing inflammation.
[摘要] 目的 研究二甲双胍通过调控多聚（ADP-核糖）聚合酶 1（PARP-1）的活性，对Ⅱ型糖尿病肾脏的保 护作用及其机制。方法 Wistar 大鼠分为正常组（n = 12），DN 组（n = 12），DN+DPQ 组（n = 12），DN+二甲双胍 组（n = 12）以及 DN+二甲双胍+DPQ 组（n = 12）。建模后检测各组大鼠空腹血糖含量，尿素氮含量，肌酐含量以 及尿蛋白浓度等生化指标，HE 染色和 TUNEL 染色观察肾脏病理情况，Western blot 检测 PARP-1，iNOS，NFκB 及 caspase-3 的蛋白表达，ELISA 检测炎性因子 TNF-α 及 IL-1β 的表达，免疫组化测定 3-硝基酪氨酸（3nitrotyrosine，3-NT）的表达。结果 （1）3 组治疗组大鼠的各项生化指标相较于 DN 组均有下降，其中 DN + 二甲 双胍 + DPQ 组大鼠生化指标改变最为明显（P < 0. 01）；（2）3 组治疗组大鼠 PARP-1 的表达较于 DN 组下降，其 中 DN + 二甲双胍 + DPQ 组的表达下降最为明显（P < 0.05）；（3）3 组治疗组大鼠肾脏组织的病理变化及肾脏细胞 的凋亡较于 DN 组减缓，其中 DN + 二甲双胍 + DPQ 组的改善最为明显；（4）3 组治疗组大鼠炎性因子的表达以 及 NF-kB，iNOS 及 3-NT 的表达较于 DN 组下降，其中 DN + 二甲双胍 + DPQ 组的表达下降最为明显（P < 0.05）。 结论 二甲双胍通过调控 PARP-1 的表达，下调 DN 模型中 NF-kB 的表达，抑制 NF-kB/iNOS/NO 通路，抑制 氧化损伤，减轻炎症反应，从而起到在糖尿病导致的高糖环境下，对肾脏的保护作用。
parp蛋白定位
parp蛋白定位
PARP（聚（腺苷二磷酸-核糖）多聚酶）是一种真核DNA结合蛋白，主要定位在细胞核中。
PARP蛋白具有依赖Zn2+的结构特点，可以特异性地识别DNA断裂末端并结合，是一种重
要的DNA修复酶。
在细胞凋亡发生的早期，PARP是caspase家族（如caspase3和7）的
作用底物，后者可使PARP的DNA修复功能丧失。
PARP蛋白在细胞中的分布与其功能密切相关。
在正常细胞中，PARP蛋白主要分布在细胞
核中，参与DNA损伤修复和细胞凋亡等过程。
在凋亡早期，PARP蛋白被caspase家族酶
切割，使其DNA修复功能丧失，从而促使细胞进入凋亡通道。
在癌症研究中，PARP蛋白的表达和定位也受到关注。
研究发现，PARP7与多种癌症相关，如肺鳞状细胞癌、非小细胞肺癌等。
PARP7表达水平的上升使肿瘤细胞逃避衰老，并且避
免被免疫系统识别和消灭。
因此，针对PARP蛋白的靶向治疗成为近年来癌症研究的热点
之一。
例如，Ribon Therapeutics公司研发的RBN-2397和RBN-3143，分别为PARP7
和PARP14，用于治疗实体瘤和炎症疾病。
多方向聚(ADP-核糖)聚合酶-1在神经系统疾病中的作用
多方向聚（ADP-核糖）聚合酶-1在神经系统疾病中的作用高丰度蛋白核聚（ADP-核糖）聚合酶-1（PARP-1）可被DNA损伤激活，而PARP-1激活与DNA修复，细胞死亡和在炎症相关联。
因为氧化应激会诱导严重的DNA损伤，而炎性反应的广泛传播在各种中枢神经系统疾病中是常见病理特征，因此PARP-1作为治疗靶点的研究方向已经开始引起科学家们的注意。
印度药学教育与研究国立研究所的Chandra Shekhar Sriram教授及其同事在发表于《中国神经再生研究（英文版）》的评论文章（2015年1月1期）中，着重报道了PARP-1在神经系统疾病中的多重作用以及PARP-1抑制剂转化为临床研究的潜在能力。
PARP-1抑制剂已经在多个神经系统疾病的临床前研究治疗中显示出可喜的成果。
现在，PARP-1可能是神经系统疾病领域内开发出的较新可靠药物靶标。
但PARP-1抑制剂疗法同样有其自身的一些限制。
PARP-1的主要功能是DNA损伤修复，PARP-1抑制剂的广泛使用可能留下带有大量DNA异常的细胞，这会增加基因组的不稳定性风险。
DNA损伤的存活神经元可能会因此造成机能失调，随后发生凋亡。
另外，PARP-1的延长性抑制可能具有超出遗传稳定性的负面影响。
为了解决这些问题，仍需要进一步研究证实该种治疗方法的安全性和稳定性。
Article: "Multiple facets of poly(ADP-ribose) polymerase-1 in neurological diseases" by Chandra Shaker Sriram1, Ashok Jangra1, Rajaram Mohanrao Madhana1, Satendra Singh Gurjar2, Pritam Mohan3, Babul Kumar Bezbaruah1,4 (1Department of Pharmacology & Toxicology, National Institute of Pharmaceutical Education & Research (NIPER), Guwahati, Assam-781032, India; 2 Department of Biotechnology, National Institute of Pharmaceutical Education and Research (NIPER), Guwahati, Assam-781032, India; 3Department of Pharmacology, College of Veterinary Sciences, AAU, Khanapra, Guwahati, Assam-781022, India; 4Department of Pharmacology, Gauhati Medical College, Guwahati, Assam-781032, India (Bezbaruah BK))Sriram CS, Jangra A, Madhana RM, Gurjar SS, Mohan P, Bezbaruah BK (2015) Multiple facets of poly(ADP-ribose) polymerase-1 in neurological diseases. Neural Regen Res 10(1):49-51.欲获更多资讯：Neural Regen ResMultiple facets of poly(ADP-Ribose) polymerase-1 in neurological diseasesThe highly conserved abundant nuclear protein poly(ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) is activated by DNA damage. PARP-1 activation is associated in DNA repair, cell death and inflammation. Since oxidative stress induced robust DNA damage and wide spread inflammatory responses are common pathologies of various CNS diseases, the attention towards PARP-1 as a therapeutic target has been amplifying. Dr. Chandra Shaker Sriram and his coworkers (National Institute of Pharmaceutical Education & Research (NIPER), India) published a commentaries in Neural Regeneration Research (January 2015, Volume 10 Number 1) highlight the multiple roles of PARP-1 in neurological diseases and potential of PARP-1 inhibitors to enter clinical translation.Extreme severity and restricted clinical options are making neurological indications more difficult to handle. However, the treatment with PARP-1 inhibitors showing promising results for neurological indications in multiple preclinical studies. Now PARP-1 could be reliable target for newer drug developments in the field of neurological diseases. In spite of this much propitious situation, PARP-1 inhibition therapy having its own set of limitations also. The primary function of PARP1 is in DNA-damage repair, widespread PARP-1 inhibition may leave cells with larger number of DNA anomalies which may amplify the risk of genomic instability. Surviving neurons with DNA damage might be dysfunctional and thus later on undergo apoptosis. Additionally, the prolonged PARP1 inhibition might have negative effects beyond the genetic stability. To combat these issues some more studies are still required to corroborate the safety of the therapeutic approach.Article: "Multiple facets of poly(ADP-ribose) polymerase-1 in neurological diseases" by Chandra Shaker Sriram1, Ashok Jangra1, Rajaram Mohanrao Madhana1, Satendra Singh Gurjar2, Pritam Mohan3, Babul Kumar Bezbaruah1,4 (1Department of Pharmacology & Toxicology, National Institute of Pharmaceutical Education & Research (NIPER), Guwahati, Assam-781032, India; 2 Department of Biotechnology, National Institute of Pharmaceutical Education and Research (NIPER), Guwahati, Assam-781032, India; 3Department of Pharmacology, College of Veterinary Sciences, AAU, Khanapra, Guwahati, Assam-781022, India; 4Department of Pharmacology, Gauhati Medical College, Guwahati, Assam-781032, India (Bezbaruah BK))Sriram CS, Jangra A, Madhana RM, Gurjar SS, Mohan P, Bezbaruah BK (2015) Multiple facets of poly(ADP-ribose) polymerase-1 in neurological diseases. Neural Regen Res 10(1):49-51.。
parp作用机制
parp作用机制PARP（聚合酶）是一类广泛存在于细胞中的酶，它可以在DNA损伤修复和细胞死亡的过程中发挥重要作用。
本文将从以下几个方面详细介绍PARP的作用机制。
一、PARP基本概念PARP全称聚合酶（Poly(ADP-ribose) polymerase），是一类催化作用于核苷酸的酶。
PARP的主要催化作用是在DNA损伤修复和细胞死亡的过程中将NAD+转化为聚合ADP-核糖（PAR），PAR作为DNA损伤后细胞自愈机制的一个重要组成部分，参与了细胞的DNA修复、基因表达等生命物质代谢过程中的多种生物学效应。
二、PARP作用机制（一）PARP在DNA修复中的作用当DNA受到损伤时，PARP会被激活并进入DNA损伤部位，将NAD+转化为PAR。
PAR能够与DNA结合，从而在伤口周围形成一个称为“PAR云”（Paraspeckle Associated Repository Cloud）的结构，吸附或筛选DNA修复蛋白到受损区域，大大提高了DNA修复的效率。
PAR还会吸附其他细胞信号蛋白，参与调节DNA损伤响应和细胞死亡等生命过程。
（二）PARP在细胞死亡中的作用PARP在细胞凋亡、坏死和激活性氧自由基诱导的细胞毒性中发挥作用。
在上述过程中，细胞发生DNA的单链和双链断裂，PARP会被大量激活并消耗大量的NAD+，致使细胞内NAD+枯竭，能量代谢混乱，进而导致细胞坏死。
此外，当PARP的活性被抑制时，可以减少细胞对DNA断裂的响应，从而抑制细胞死亡。
三、PARP的研究与应用PARP在铂类化疗、放疗、DNA损伤和炎症等生理和病理过程中发挥着重要的作用。
近年来，PARP成为了肿瘤治疗的重要研究领域之一。
PARP抑制剂能够通过阻止PARP催化酶活性，诱导肿瘤细胞凋亡，从而增强化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用。
此外，PARP对衰老、肿瘤、心肌缺血再灌注等多个方面都具有广泛的研究意义。
总之，PARP作为一种催化酶，在DNA损伤修复和细胞死亡的过程中具有重要作用。
PARP-1抑制剂与其他药物联用克服耐药性的研究进展
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ２０１９，５０（５）：５２３－５３０
５２３
ＰＡＲＰ１抑制剂与其他药物联用克服耐药性的研究进展
施锦渝，柏 英，彭珂文，张文慧，朱启华 ，徐云根
（中国药科大学药物化学系，南京 ２１１１９８）
摘 要 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶１（ＰＡＲＰ１）在 ＤＮＡ修复和细胞凋亡中发挥着至关重要的作用，ＰＡＲＰ１抑制剂在肿瘤 治疗领域取得了突破性的进展，但耐药性的出现限制了其在临床上的进一步应用。本文就 ＰＡＲＰ１抑制剂与其他药物联用 克服耐药性的研究进展进行了综述，重点介绍了临床上现有的药物组合方法及其疗效，并对药物联用策略进行了评价与展 望，提出双靶点或多靶点药物的开发将成为克服 ＰＡＲＰ１抑制剂耐药性、拓宽适应证的新思路。 关键词 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶１；聚腺苷二磷酸核糖聚合酶１抑制剂；抗肿瘤；耐药性；药物联用 中图分类号 Ｒ９１４２；Ｒ９７９１ 文献标志码 Ａ 文章编号 １０００－５０４８（２０１９）０５－０５２３－０８
收稿日期 ２０１９０３２９ 通信作者 Ｔｅｌ：１５９５１９３０５８９ Ｅｍａｉｌ：ｚｈｕｑｉｈｕａ＠ｖｉｐ１２６ｃｏｍ Ｔｅｌ：０２５－８３２７１２４４ Ｅｍａｉｌ：ｘｙｇ６４＠１２６ｃｏｍ
基金项目 国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１５０２９２８）；江苏高等学校优秀科技创新团队资助项目（２０１５）
聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（ｐｏｌｙ（ＡＤＰｒｉｂｏｓｅ） ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，ＰＡＲＰ）是存在于真核细胞中参与 ＤＮＡ 损伤修复 的 一 种 多 功 能 蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 酶［１］。 ＰＡＲＰ通过识别并结合断裂的 ＤＮＡ链，募集烟酰 胺腺嘌 呤 二 核 苷 （ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅａｄｅｎｉｎｅｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉ ｄｅ，ＮＡＤ）依赖的 ＡＤＰ核糖单位、组蛋白以及各种
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高血糖作为糖尿病的最基本生化特性,通过多种机制引起糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN），其中氧化应激是一个重要损伤机制。
而有研究发现高血糖介导的ROS可以激活多聚ADP核糖聚合酶[poly（ADP-ribose）polymerase，PARP][1]。
PARP是一种存在于除酵母外所有真核细胞核内对DNA断裂敏感的蛋白酶，目前其在DN发病机制中的作用尚未完全阐明。
DN时，肾小球系膜细胞是多种致病因子作用的主要靶细胞，主要表现为肾小球的肥大、细胞外基质的堆积、肾小多聚二磷酸腺苷（ADP）核糖聚合酶-1（PARP-1）在高糖致大鼠肾脏系膜细胞细胞外基质沉积中的作用朱恒梅祝胜郎▲陈结慧叶玲蒋莹李向阳广东省深圳市第六人民医院肾内科，广东深圳510082[摘要]目的探讨多聚二磷酸腺苷（ADP）核糖聚合酶-1（PARP-1）在高糖（25mM）致大鼠肾脏系膜细胞细胞外基质沉积中的作用。
方法①体外培养大鼠肾脏系膜细胞株（MCs1097），使用高糖（25mM）处理大鼠肾脏系膜细胞，部分实验组中应用PARP-1抑制剂PJ34（3×10-6M）进行干预处理。
②RT-PCR和Western blot检测PARP-1、纤维粘连蛋白（FN）、胶原Ⅳ（COLⅣ）的mRNA及蛋白表达。
③高通量比色测定法检测PARP-1的活性。
结果①高糖显著诱导大鼠肾脏系膜细胞PARP-1mRNA和蛋白的表达，分别较低糖对照组增加72.3%和68.4%（P<0.05），PJ34可明显抑制高糖诱导的PARP-1mRNA和蛋白的过度表达，mRNA和蛋白分别为高糖组的31.8%和55.5%（P<0.05）。
同时，高糖显著诱导大鼠肾脏系膜细胞PARP-1激活，高糖组为低糖对照组活性的1.77倍（P<0.05），PJ34可显著抑制高糖诱导的PARP激活，活性降低为高糖组的67.8%（P<0.05）。
②高糖显著增加COLⅣ和FN表达，PJ34显著抑制高糖诱导的COLⅣ和FN mRNA过度表达（分别为高糖组的68.2%和54.7%（P<0.05）；COLⅣ和FN蛋白水平的变化与RNA水平变化相一致，PJ34可显著抑制高糖诱导的COLⅣ和FN蛋白表达（分别为高糖组的54.0%及66.6%（P<0.05）。
结论高糖可以诱导培养的大鼠肾脏系膜细胞内PARP激活，PARP-1表达增加，PJ-34预处理可以明显降低高糖诱导的大鼠肾脏系膜细胞内PARP的激活以及下游FN及COLⅣ的高表达，提示PARP1参与了肾脏系膜细胞细胞外基质沉积的发生发展过程。
[关键词]系膜细胞；PARP；高血糖；细胞外基质[中图分类号]R587.2[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2012）11（a）-0008-04Poly(ADP-ribose)polymerase-1mediates high glucose-induced extracel-lular matrix accumulation in rat mesangial cellsZHU Hengmei ZHU Shenglang▲CHEN Jiehui YE Ling JIANG Ying LI XiangyangDepartment of Nephrology,the Sixth People's Hospital of Shenzhen City,Guangdong Province,Shenzhen510082,China [Abstract]Objective To investigate the role of Poly(ADP-ribose)Polymerase-1(PARP-1)in high glucose-induced accu-mulation of extracellular matrix(ECM)in rat mesangial cells(RMCs).Methods RMCs were treated with or without high glucose(25mmol/L).In some experimental groups,cells were pre-treated with PARP-1inhibitor PJ34(3×10-6mol/L).RT-PCR was employed to detect the mRNA expression for ADP-ribose polymerase-1(PARP-1),fibronectin(FN).collagen Ⅳ(COLⅣ),and all those proteins expression were examined by Western blot.The activity of PARP-1was examined by Colorimetric assay.Results high glucose significantly stimulated both PARP-1mRNA and protein overexpression in RM-Cs.the mRNA and protein expression of PARP-1were up-regulated by72.3%and68.4%(P<0.05).PJ34reduced high glucose-induced upregulation of PARP-1mRNA and protein to31.8%and55.5%(P<0.05),compared with high glucose stimulation group.At the same time,high glucose obviously stimulated PARP-1activation,the PARP-1activity of high glucose group was upregulated by1.77fold(P<0.05),compared with control cells.PJ34effectively inhibited the activa-tion of PARP-1by32.2%(P<0.05),compared with the cells treated with high glucose alone.Also,high glucose in-creased COLⅣand FN pared with high glucose stimulation group,PJ34suppressed high glucose-induced upregulation of COLⅣand FN mRNA by31.8%and45.3%,respectively(P<0.05).The changes in COLⅣand FN were confirmed at protein level.the inhibition rate of COLⅣand FN protein expression were54.0%and66.6%,respec-tively,compared with high glucose stimulation group(P<0.05).Conclusion Our data suggest that PARP-1mediates high glucose-induced accumulation of ECM in rat mesangial cells and thus may represent a potential therapeutic target in the management of glomerular disease.[Key words]Mesangial cells;PARP;Extracellular matrix[基金项目]2011广东省医学科研立项（编号：A2011570）。
2011年广东省深圳市科技局科技立项（编号：201102134）。
广东省深圳市南山区科技局基金（编号：南卫2011004）。
▲通讯作者8中国医药导报CHINA MEDICAL HERALD球基底膜的增厚和肾小球滤过屏障功能的异常，其中肾脏细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的蓄积引起的肾小球硬化与间质纤维化是DN发展至终末期肾功能衰竭的主要病理表现[2]。
因此本实验以大鼠肾脏系膜细胞作为研究对象，探讨多聚二磷酸腺苷（ADP）核糖聚合酶-1（PARP-1）在高糖致外细胞基质沉积中的作用，以探讨PARP在DN发生发展中的作用。
1材料与方法1.1材料D-Glucose购自Sigma公司，PJ34购自默克公司；细胞培养用RPMI1640，胎牛血清购自Gibco公司；Trizol溶液购自美国Invitrogen公司；胰岛素购自甘李药物公司，Trizol Reagent购自Invitrogen公司；细胞裂解液、HRP标记的兔抗大鼠Ⅱ抗、小鼠抗大鼠Ⅱ抗购自Cell signaling公司，小鼠抗大鼠COLⅣ、FN一抗，兔抗大鼠PARP-1一抗购自CHEMICON公司；PARP/Apoptosis检测试剂盒购自trevigen 公司；RevertAidTM FirstStrand cDNA逆转录试剂盒购自Fer-mentas公司，Taq DNA聚合酶购自Takaka公司。
其余化学试剂为国产分析纯。
1.2方法1.2.1细胞培养及分组大鼠肾脏系膜细胞株（MCs1097，购自美国ATCC公司）培养于含有15%胎牛血清及0.6U/mL 胰岛素的RPMI1640培养基中。
细胞培养至85%融合后，换用无血清培养基培养24h，后换用新鲜无血清的DMEM低糖（5mmol/L）培养基，分别加入药物刺激干预：高糖刺激组中高糖浓度为25mmol/L，刺激时间为24h。
PJ34干预组先给予3×10-6mol/L PJ34孵育1h后，加入高糖刺激24h。
单纯使用PJ34组作为对照。
1.2.2细胞总蛋白提取细胞用PBS清洗后加入细胞裂解液，冰上放置5min。
用细胞刮刮取细胞，收集至1.5mL Eppen-dorf管中，放置于冰上。
用超声粉碎仪在冰上进行超声粉碎，500W、1s×15次，以剪切DNA，降低黏稠度。
4℃，12000r/min 离心10min，留取上清。
取10μL上清测定浓度，余储存于-80℃备用。
细胞总蛋白提取物做Western blot分析高糖对于大鼠肾脏系膜细胞PARP-1表达的影响。