正常骨髓细胞形态学检查
骨髓细胞形态学检查标准操作程序
骨髓细胞形态学检查标准操作程序1.检验目的借以了解造血功能，常用以确诊、协助诊断、鉴别诊断血液病和其他疾病。
2.检验原理通过对骨髓细胞涂片进行瑞氏-姬姆萨染色后，计算一定数量的细胞，观察其骨髓与血液中各种细胞数量和质量的变化，借以了解造血功能。
通过血细胞化学染色是在观察形态基础上进一步了解细胞化学成分，对血细胞各种生化成分及代谢产物作定性、定位和定量的观察。
3.标本新鲜外周血、骨髓4.试剂瑞氏-姬姆萨A液瑞氏-姬姆萨B液5.环境与安全5.1环境要求环境温度要求：18~30℃（最佳温度：25℃）。
环境相对湿度要求：20% ~ 70%。
操作台应放置在通风良好、灰尘少的地方，尽量平稳坚固，避免晃动，仪器附近无强电磁干扰、无剧烈震动、无腐蚀性气体。
5.2人员安全工作中所有与病人的样本接触或有潜在性接触可能的样本都视为污染物。
在操作时有必要穿戴保护性的工作服、外套和手套。
在处理废弃样本时不可触摸废弃物，一定戴手套和穿工作服以避免直接接触。
如果操作人员不小心接触血液、试剂、废弃物，皮肤或衣物上沾到了样本、试剂及废液，用大量清水冲洗并适当考虑必要的医疗措施。
6.操作步骤6.1骨髓取材6.1.1骨髓穿刺部位：一般取胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等部位。
两岁以内小儿主张用胫骨穿刺。
穿刺部位不同，取材可能有明显差异。
如再生障碍性贫血的患者进行不同部位骨穿，可发现不同的细胞增生程度，以胸骨穿刺最好，棘突次之，髂骨最差。
故必要时应多部位取材，以便能全面地了解骨髓情况。
6.1.2吸骨髓液：一般不超过0.2ml，否则易于稀释。
6.1.3骨髓取材满意的几项指标：抽吸骨髓时，患者有特殊酸痛感，骨髓液中应含有骨髓小粒。
显微镜下观察涂片，可发现骨髓特有细胞，如巨细胞、浆细胞、网状细胞、组织嗜碱细胞、幼稚红细胞、幼稚粒细胞。
6.2涂片检查6.2.1涂片制备：要求涂片均匀，有头、体、尾三部分，血膜面积约1.5cm*3cm，厚度以透过血膜可看清字迹为限。
《实验诊断学》骨髓细胞形态学检查
四.血细胞的细胞化学染色
细胞化学染色是以细胞形态学 为基础，根据化学反应的原理应 用骨髓涂片进行固定，化学反应 显色，复染等程序染色光学显微 镜下观察
㈠过氧化物酶染色（ Peroxidase POX）
Peroxidase( POX ) Staining
骨髓涂片和染色注意事项
➢ 载玻片要洁净；推端要光滑 ➢ 推玻片与载玻片呈约30度角 ➢ 骨髓抽取后要立即涂片,推制骨髓片约8张左右
送检 ➢ 涂片一般不用抗凝剂 ➢ 涂片时要保留片尾和边缘 ➢ 涂片制成后，快速摇动或扇干，不可火烤 ➢ 染色太浅－干燥后重染，若太深－干燥后－滴
数滴甲醇－稍停片刻－冲洗
为0.1－0.2ml ➢多部位穿刺：可提高某些疾病诊断率
骨髓取材满意的指标
➢抽取时病人有短暂的疼感 ➢骨髓液中可见到淡黄色骨髓小粒或油滴 ➢涂片检查有骨髓特有的细胞 ➢含大量幼稚细胞，杆状核多于分叶核
干抽
❖概念：是指非技术错误或穿刺位置不当 而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。
❖原因： ➢原发性和继发性骨髓纤维化症 ➢骨髓极度增生 ➢骨髓增生减低 ➢肿瘤骨髓浸润
骨髓细胞形态学检查 Xiaoyan Zhang
概念
骨髓象检查是用细胞形态学检查的方法 来观察骨髓中细胞的数量和质量的变化， 借以了解骨髓的造血功能，对疾病的诊 断、疗效观察、预后的判断等都具有重 大价值。
骨髓细胞形态学检查的临床应用
⒈确诊某些造血系统或非造血系统疾病
特征性细胞形态改变
各类白血病
恶性组织细胞增生症 海兰组织细胞增生症
Rubricyte （中幼红细胞） 8-12 u Nucleus no nucleoli with clumpy chromatin Cytoplasm moderate amount gray-blue with pink-tan
正常骨髓细胞形态学检查
单核细胞(monocyte)：染色质疏 松，可呈条索状、小块状。胞质 可见细尘样淡紫红色颗粒，常有 空泡。
幼单（premonocyte)： 核仁模 糊或消失。浆内可见许多细小嗜 天青颗粒和空泡。
巨核细胞系统
原巨(megakaryoblast) ：核圆或不规则，染色质 较其他原始细胞粗。胞质 较少，常见不规则突起及 少许血小板附着。
幼巨(promegakaryocyte)：胞体明显增大。染色质粗或小块状。细胞 质丰富，近核处有少许细小的淡紫红色颗粒而使该处呈淡红色。
颗粒巨(granular megakaryocyte）：胞体明显增大，胞质极丰富，其内充 满大量细小紫红色颗粒，无或少许血小板形成。核巨大，分叶后常重叠。
产板巨(thromocytogenic megakaryocyte）：胞质颗 粒很丰富并可聚集成簇（雏形血小板），外侧常有释放的 血小板。
巨核细胞裸核（naked megakaryocyte)：可因涂片所致 。
组织细胞（histocyte) 脂肪细胞 (fatty cell) a 其它骨髓细胞肥大细胞 （ast cell）成骨细胞
(osteoblast)
纤维细胞(fibrocyte)
内皮细胞
○ (endothelial cell)
掌 握 淋 巴 、 浆
正
常
骨
髓
细
胞
形
态
学
检
查
(
二
)
、单核、巨核细
胞各系统、各阶
段的形态特点。
原淋（lymphoblast)：核染色质细致颗粒状，较原 粒细胞稍粗，核仁1-2个，较清楚。
淋巴细胞系统
幼淋(prelymphocyte）：有时核凹陷，胞质内偶有少许嗜天青颗粒。
骨髓细胞形态学检查
3、淋巴细胞系统 原淋（Lymphoblast） 幼淋（prolymphocyte） 淋巴（lymphocyte） 大淋巴细胞 小淋巴细胞
嗜酸性杆状核粒细胞：细胞呈圆形，直径10～15um。胞核狭长，弯曲呈带状，两端钝圆。核染色质粗糙呈块状，染深紫红色。胞质中含特异性嗜酸性颗粒
嗜酸性分叶核粒细胞：胞体直径11～16um。胞核多分为近似对称的两叶。胞质中充满密集粗大、大小均匀的桔红色嗜酸性颗粒。
嗜碱性中幼粒细胞：胞体直径10~15um。胞核与上述细胞相似，但轮廓不清，染色质结构模糊。胞质内含数量不多、大小不一但较粗大、分布散乱的紫黑色特异性嗜碱性颗粒，颗粒也可覆盖在细胞核上。
骨髓穿刺的适应证 骨髓穿刺的禁忌证 骨髓穿刺检查的临床意义 骨髓穿刺部位的选择、注意事项
复习内容
禁忌症
严重出血倾向者
适应证
血液系统疾病的诊断、分型、疗效观察及预后判断 某些感染性疾病的辅助诊断 判断恶性疾病的骨髓转移 协助诊断某些代谢性疾病
骨髓细胞形态学检查的 注意事项
某些疾病骨髓中的病理变化呈局灶性改变，一次穿刺只能反映穿刺部位的骨髓功能或病理状况，不能反映骨髓的全面状况。
Obvious proliferation
10:1
Leukemia, hyperplastic anemia
Active proliferation
20:1
Normal BM, some anemia
Hypoplasia
50:1
some hypoplastic anemia
骨髓细胞形态学检查-协和医院血研所李景岗
10-18um
核圆形居中，染色质粗颗 粒状有部分块状聚集，核 仁模糊或消失 胞质较多，深蓝色，无颗 粒，可有核周浅染及瘤状 突起
8-15um
核圆形居中，染色质凝集 呈块状如碎墨砚感，副染 色质明显，无核仁 胞质多，呈多色性（灰蓝 色、灰红色），无颗粒。
7-10um
核圆形，染色质固缩呈团 块状(碳核样) 胞质较多，颜色接近成熟 红细胞，无颗粒
胞核同产血小板型巨核 细胞，常不规则 胞质少或无
巨核细胞的演变
（四）淋巴细胞系统 lymphocyte 原始淋巴细胞、幼稚淋巴细胞 淋巴细胞（大、小）
10-18um 胞体较小，圆形或类圆形 胞质少，淡蓝色，无颗粒 胞核圆形或类圆形，染色 质较细，核仁1-2个，较 清晰
10-16um 胞体较小，圆形或类圆形 胞质少，淡蓝色 胞核圆形或类圆形，染色 质较原始淋巴细胞粗，核 仁模糊或消失
6-9um(小) 胞体较小，圆形或卵圆形， 胞质极少，淡蓝色，无颗 粒。大淋巴细胞(1215um)胞质较多，可见少 量紫红色颗粒 胞核圆形或卵圆形，染色 质聚集呈大块状
（五）单核细胞系统 monocyte 原始单核细胞、幼稚单核细胞、单核细胞
14-25um 胞体较大，圆形或不规则， 可有伪足 胞质较多，灰蓝色不透明， 毛玻璃样，颗粒无或少许 胞核圆形或不规则，可有扭 曲凹陷折叠，染色质细致疏 松呈细丝网状，核仁清晰1-2 个
10-14um 胞质及核上有少量嗜碱性 颗粒 其他基本同中性晚幼粒细 胞
10-15um 核凹陷>1/2,弯曲呈带状、 “S”形、“U”形，染色 质粗糙，块状，副染色质 明显 胞质成熟，有较多淡红色 中性颗粒
骨髓细胞形态学-正常血细胞形态
骨髓细胞形态学-正常血细胞形态关键字：骨髓细胞形态学骨髓细胞形态学－正常血细胞形态1．正常血细胞形态学（Wright染色）（1）粒细胞系统形态1）原始粒细胞胞体直径10～18μm，圆形或类椭圆形。
胞核较大，约占细胞的2/3以上,核染色质呈细粒状，排列均匀，无浓集，核膜较模糊。
核仁2～5个，较小，清楚。
胞质量少，呈透明天蓝色，绕于核周，无颗粒。
2）早幼粒细胞胞体直径12～20μm，圆或椭圆形。
胞核大，核染色质较原粒粗糙，核仁可见或消失。
胞质量较多，呈淡蓝、蓝或深蓝色，浆内含紫红色非特异性的天青胺蓝颗粒。
3）中幼粒细胞①中性中幼粒细胞胞体直径10～18μm，圆形。
胞核椭圆形或一侧开始扁平，占细胞的2/3～1/2，染色质聚集成索块状，核仁消失。
胞质量多，内含中等量、大小较一致的特异的中性颗粒。
②嗜酸性中幼粒细胞胞体直径15～20μm，胞核与中性中幼粒细胞相似。
胞质内充满粗大、均匀、排列紧密、桔红色的特异的嗜酸性颗粒。
③嗜碱性中幼粒细胞胞体直径10～15μm。
胞核椭圆形，轮廓不清楚，核染色质较模糊。
胞质内及核上含有数量不多、排列零乱、大小不等的紫黑色特异的嗜碱性颗粒。
4）晚幼粒细胞①中性晚幼粒细胞胞体直径10～16μm，呈圆形，胞核明显凹陷，但其凹陷程度一般不超过核假设直径的一半。
核染色质粗糙，排列更紧密。
胞质量多，染浅红色，充满中性颗粒。
②嗜酸性晚幼粒细胞胞体直径10～16μm，胞核在中央或偏一侧，呈肾形或椭圆形。
胞质充满着嗜酸性颗粒。
③嗜碱性晚幼粒细胞胞体直径10～14μm。
胞核固缩呈肾形，轮廓模糊。
胞质内及核上含有少量、分布不匀的嗜碱性颗粒。
5）杆状核粒细胞①中性杆状核粒细胞胞体直径10～15μm，圆形。
胞核凹陷程度超过核假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1／3以上，形态弯曲成带状，核染色质粗糙呈块状，核两端钝圆染深紫红色。
胞质充满中性颗粒。
②嗜酸性杆状核粒细胞胞体直径11～16μm，圆形。
胞核与中性杆状粒细胞相似。
骨髓细胞形态学检查
骨髓细胞形态学检查
骨髓细胞形态学检查是一种用于定量分析骨髓中细胞形态学特征的实验方法。
它可以
评估骨髓细胞情况，发现和诊断疾病，监测疾病治疗效果，评估患者病情状态等。
骨髓细
胞形态学检查主要根据细胞外部特征和细胞内部结构特征对其判断。
它可以用于检查大血小板、网织红细胞、骷髅细胞、特殊细胞和白细胞的情况。
网织
红细胞检查是检测呈椭圆形的网纹状的细胞，它们在块状结构上有一定的样式。
正常检查，网织红细胞大小一般是细小的，内部结构也基本完善，中央有个芯片或者其他形状的细胞
构造。
单倔状的细菌和某些病毒也可以在网织红细胞检测中被发现。
白细胞检查是检测不同形状的粒状结构体，其中最常见的是着丝点状的构造。
根据细
胞外部特征不同，白细胞可以分为多种，包括淋巴细胞、单核细胞、浆细胞和嗜中性粒细胞。
在正常情况下，白细胞大小不一样，形状也不一，内部结构有变化，有鲜明的着丝点，而且仍有少量核影可见。
此外，骨髓细胞形态学检查还可以用来检测小板血细胞、红细胞和核糖体细胞等情况。
小板血细胞的检查通常是颗粒状的，形状圆润完整，内部结构规则，表面有毛刺突起，且基本没有核影。
而红细胞检查常常是椭圆形或其他形状，并含有某些少量核影；核糖体
细胞常常呈圆状或多形状，内部有某种可以观察到的核糖体沉积，形状保持比较稳定。
通过对骨髓细胞形态学检查得出的结论，可以正确诊断患者的真实病情。
因此，它是
诊断和治疗病人的一种重要依据，特别是在贫血症、白血病等疾病的诊断中，其重要性无
可低估。
骨髓细胞形态学检查
[骨髓象]
（1）增生极度活跃或明显活跃，粒红比 例↑↑ （2）某一系细胞极度增生，但以中幼以 下为主。 （3）红系受抑制； （4）巨核正常或 ↑↑，晚期↓ 慢粒会在晚期发生急变
三、骨髓增生异常综合症（MDS）
主要表现：
难治性贫血 外周血细胞减少而骨髓增生增多 成熟和幼稚细胞形态异常 又有人称之为白血病前期、难治性贫血等。
[骨髓象]
（1） （ 2） （ 3） （4） 增生明显活跃或极度活跃 一系或两系原始细胞明显增多，≥30％ 其他系细胞受抑制 急淋：蓝细胞多见 急粒、急单 见 Auer小体 急性红白血病见巨幼红细胞
（一）分型
1、 临床分型：急性白血病 慢性白血病 特殊类型白血病
2、
MICM分型法
M—Morphology 形态学 I—Immunology 免疫学 C—Cytogenetics 细胞遗传学 （以细胞染色体为基础） M—Molecular biology 分子生物学
谢 谢
骨 髓 细 胞 形 态 学 检 查
第 一 军 医 大 学 珠 江 医 院 刘 兰 平
一、 骨髓细胞形态学检查 的临床应用
（一）临床应用： 1、诊断造血系统疾病及非造血系统疾病 明确诊断： 各型白血病、多发性骨髓瘤、巨幼细 胞性贫血、ITP、恶性组织细胞病、 铁粒幼细胞性贫血、尼曼-匹克病、 原发性转移癌、黑热病或疟疾等。
4) 红系增生良好： a.占有核细胞的20%左右 b. 各阶段比例适当； c．形态无明显异常或红细胞形态大致正 常。 5) 淋巴细胞及单核细胞系统百分率、 形态无异常（主要是成熟细胞） 6）浆细胞系统百分率、形态无异常
（主要是成熟细胞）
7) 巨核细胞 a.数量/全片：7-35个； b.各阶段情况正常； c.血小板形态正常。 8)其他细胞: 网状细胞及组织嗜碱细胞等未见异常。 9)无特殊细胞及寄生虫。
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产板巨 (thromocytogenic megakaryocyte）：胞 质颗粒很丰富并可聚集成 簇（雏形血小板），外侧 常有释放的血小板。
巨核细胞裸核（naked
megakaryocyte)：可医学因课件ppt
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其它骨髓细胞
组织细胞 （histocyte)
脂肪细胞 (fatty cell)
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肥大细胞 （mast cell）
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成骨细胞 (osteoblast)
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破骨细胞 (osteoclast)
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纤维细胞(fibrocyte)
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内皮细胞 (endothelial cell)
退化细胞
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幼巨 (promegakaryocyte) ：胞体明显增大。染色 质粗或小块状。细胞质 丰富，近核处有少许细 小的淡紫红色颗粒而使 该处呈淡红色。
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颗粒巨(granular megakaryocyte）： 胞体明显增大，胞质极 丰富，其内充满大量细 小紫红色颗粒，无或少 许血小板形成。核巨大， 分叶后常重叠。
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成熟大淋巴：染色质紧 密而均匀。胞质内可有 少量大而稀疏的嗜天青 颗粒。
成熟小淋巴：胞质量极少，源自裸核，常无颗粒。医学课件ppt
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浆细胞系统
原浆（plasmablast) ：圆或不规则，核染 色质呈粗颗粒状，核 仁2-5个。胞质不含 颗粒。
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幼浆 (proplasmacyte)： 核染色开始聚集，核 仁基本消失。
正常骨髓细胞形态学检查 (二)
掌握淋巴、浆、单核、巨核细胞各系统、各 阶段的形态特点。
了解骨髓其它常见细胞的形态学特点。
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淋巴细胞系统
原淋（lymphoblast) ：核染色质细致颗粒 状，较原粒细胞稍粗 ，核仁1-2个，较清 楚。
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幼淋 (prelymphocyt e）：有时核凹陷 ，胞质内偶有少许 嗜天青颗粒。
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6
浆细胞（plasmacyte) ：
核染色质聚集成块，车 轮状。有明显的核周 淡染区，常有较多空 泡（泡沫浆）。
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单核细胞系统
原单(monoblast)： 染色质纤细疏松呈网 状。胞质浅灰蓝色， 半透明如毛玻璃样， 可见伪足状突起，无 颗粒。
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幼单（premonocyte)： 核仁模糊或消失。浆内 可见许多细小嗜天青颗 粒和空泡。
吞噬细胞(phagocyte)
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有核红细胞造血岛 ： 正中有一巨噬细胞， 周围有若干幼红细胞 （往往为同期幼红细 胞），排列呈星状。
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骨髓小粒：一堆 紫兰色的细胞团 ，其间有油滴。
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Thank you！
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单核细胞(monocyte)：
染色质疏松，可呈条索
状、小块状。胞质可见
细尘样淡紫红色颗粒，
常有空泡。
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单核细胞与中性中幼粒细胞的鉴别
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巨核细胞系统
原巨(megakaryoblast) ：核圆或不规则，染色质 较其他原始细胞粗。胞质 较少，常见不规则突起及 少许血小板附着。