实验四 根系活力的测定
实验四 根系活力的测定
实验四根系活力的测定一、意义根系是植物对水分和矿质营养的主要吸收器官，同时又是植物体中重要物质如氨基酸、激素等物质合成、同化、转化的器官，因此根的生长情况和活动能力直接影响植物个体的生长情况、营养水平和产量水平等具有重要的实际意义。
在科学研究中常把根系的呼吸强度、阳离子代还量（CEC）、对有色物质的吸附量和ATP酶的活性等作为作物根系活力的指标。
二、测定原理TTC（2，3，5－氯化三苯基四氮唑）的氧化态是无色的，可被氢还原成不溶性的红色三苯基甲月朁（TTF）。
具有活力的组织和细胞在呼吸作用中，脱氢酶催化底物氧化脱氢产生NADH、NADPH 等还原性物质，当TTC渗入组织或细胞时呼吸过程产生的还原物质可将其还原成TTF（红色），组织或细胞被染成红色。
死细胞无呼吸，不发生这样的氧化还原反应。
应用这一原理，可根据组织或细胞染色情况来检测种子、花粉、根系等的活力。
植物根引起的TTC还原，可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到加强；而被丙二酸、碘乙酸所严重抑制。
还原强度（即根系活力强弱）可用TTF的生成量来表示。
TTF在485 nm 处有吸收峰，用乙酸乙酯提取后测定OD485，通过标准曲线计算TTF的生成量，用单位时间内单位根重产生的TTF表示根系的活力。
三、仪器设备1.分光光度计；2.分析天平（感量0.1mg）；3.托盘天平（感量0.1 g）；4.温箱；5.研钵：1套；6．4 cm漏斗：2 个；7.量筒10 mL：1 个；8.刻度移液管：0.5 mL、2 mL、5 mL；9．10 mL容量瓶（或10 mL具塞刻度试管）：8个；10．试管架：1 个；11.石英砂适量；12.高型称量瓶（30×60 mm）：2 个。
四、试剂1.乙酸乙酯（分析纯）；2.连二亚硫酸钠（Na2S2O4），分析纯，粉末；3．1 %TTC溶液：准确称取TTC 1.0000 g，溶于少量水中，定容到100 mL，用时稀释至需要浓度；4．0.1 mol ·L -1 pH 7.5磷酸缓冲液；5．1 mol ·L -1 硫酸：用量筒取比重1.84的浓硫酸55 mL，边搅拌边加入盛有500 mL蒸馏水的烧杯中，冷却后稀释至1000 mL；6．0.4 mol ·L -1琥珀酸：称取琥珀酸4.72 g，溶于水中，定容至100 mL。
实验植物根系活力的测定
实验植物根系活力的测定植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量水平。
本实验学习测定根系吸收面积和活力的方法。
、根系总吸收面积和活跃吸收面积的测定【原理】根据植物矿质吸收的理论，植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性，并假定这时在根系表面均匀地覆盖了一层被吸附物质的单分子层，因此可以根据根系对某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。
常用甲烯蓝作为被吸附物质，它的被吸附量可以根据供试液浓度的变化用比色法准确地测出。
已知1mg甲烯蓝成单分子层时所占面积为 1.1m2,据此即可求出根系的总吸收面积。
当根系在甲烯蓝溶液中已达到吸附饱和而仍留在溶液中时，根系的活跃部分能把原来吸附的物质吸收到细胞中去，因而继续吸附甲烯蓝。
从后一吸附量求出活跃吸收面积，可作为根系活力指标。
【仪器与用具】分光光度计1台；100ml烧杯3只；50或100ml量筒1个(依根系大小而定)；吸量管1ml 1支，10ml 1支；试管(15 X150mm) 10支；容量瓶1000ml 1个，100ml 1个；吸水纸适量；试管架1个。
【试剂】0.0002mol/L甲烯蓝溶液：精确称取74.8mg甲烯蓝(C16H18N3SCI • 3H2O),加水溶解，定容至1000ml。
此溶液每ml含甲烯蓝0.0748mg。
0.010mg/ml的甲烯蓝溶液：用刻度吸管吸取0.0002mol/L甲烯蓝13.37ml定容至100ml, 摇匀即成。
【方法】1.植物材料的准备本实验最好采用水培玉米根或砂培植物，以获得完整而无损伤的根系。
系发达，是较好的材料。
如无水培、砂培试材，也可用盆栽植物，用水将盆土仔细冲净后使用。
田间栽培的材料因不可能无损地挖出全部根系，最好避免在正式试验中使用。
2.甲烯蓝溶液标准曲线的制作取试管7支编号，按表14-1次序加入各溶液，即成甲烯蓝系列标准液。
以第1管(水)为参比在分光光度计下比色，取波长660nm,读出光密度，以甲烯蓝浓度为横坐标，光密度为纵坐标绘成标准曲线。
根活力测试实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解根活力测试的基本原理和方法。
2. 通过实验，掌握根活力测试的操作步骤和数据处理方法。
3. 分析不同处理条件下根活力的变化，为植物生长发育提供理论依据。
二、实验原理根活力是指植物根系对营养物质、水分和氧气等环境因素的吸收、转运和利用能力。
根活力测试是研究植物根系生理生态的重要手段之一。
常用的根活力测试方法有电导率法、过氧化氢酶活性法、丙二醛含量法等。
本实验采用电导率法测定根活力。
电导率法测定根活力的原理是：在一定条件下，植物根系在逆境条件下（如缺氧、干旱、盐害等）产生的电解质增多，导致根系细胞膜透性增加，电解质外渗，从而降低根系的电导率。
通过测定根系在逆境条件下的电导率变化，可以反映根活力的大小。
三、实验材料与方法1. 实验材料：小麦（Triticum aestivum L.）幼苗、蒸馏水、NaCl溶液、pH试纸、电导率仪等。
2. 实验方法：（1）选取生长状况良好、长势相近的小麦幼苗，随机分为对照组和实验组。
（2）对照组：将幼苗置于正常生长条件下培养。
实验组：将幼苗分别置于不同逆境条件下培养，包括干旱、盐害、缺氧等。
（3）培养一段时间后，取幼苗根系，分别用蒸馏水和NaCl溶液冲洗，去除根系表面污物。
（4）将根系放入电导率仪中，测定根系在蒸馏水和NaCl溶液中的电导率。
（5）计算根活力指数：根活力指数 = 根系在NaCl溶液中的电导率 / 根系在蒸馏水中的电导率。
四、实验结果与分析1. 对照组根活力指数为100%，说明根系在正常生长条件下具有较好的活力。
2. 实验组在不同逆境条件下，根活力指数有所下降，具体如下：（1）干旱条件下：根活力指数为75%，说明干旱对小麦根系活力有显著影响。
（2）盐害条件下：根活力指数为60%，说明盐害对小麦根系活力有显著影响。
（3）缺氧条件下：根活力指数为50%，说明缺氧对小麦根系活力有显著影响。
五、结论1. 根活力测试是一种有效的研究植物根系生理生态的方法。
2014 根系活力测定(4种)
2. TTC又名红氮四唑，标准氧化还原电位为-80mv。 3. 三苯基甲腙（TTF triphenyl formazan）红色 4. TTC是用HCl配制的，当它溶于水中，pH为3~5，因此要
加入等体积的0.1M pH7.5的磷酸缓冲液（该实验用的为 1/15）。这样反应液的pH为6.8左右。如不用，TTC反应 液过酸，会杀死根。另外TTC加磷酸缓冲液后要避光，最 好临时配制使用，在暗处保存时间要短。否则见光会变红， 影响反应的准确性。
在试管中加入95%乙醇至5 mL刻度线 ，沸水水浴抽提10 min，冷却后用95%乙醇定容至5mL刻度线 （如果颜色深可 以增加体积，以便比色，两个处理定容体积一致），溶液混 匀后，在530 nm处测定吸光值（水为空白比色）。根据OD 值计算根系相对活力（B÷A) ×100%。
2. Evans blue ： A、B两组分别0.3 g根尖段放入15ml试管中 （标号为EA、EB），加入6 mL0.125％ Evans blue 染色液 染色，15min后将Evans blue染色液倾倒回公用烧杯（回 收！！），随后用水充分洗净根系表面色素（冲洗3-5次）。
实验原理
1. TTC法：
氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准的氧化还原色素， 其氧化态无色并溶于水，还原态则是不溶于水的三苯 基甲腙（TTF）红色物质，它在空气中不会自动氧化、 相当稳定。根系细胞中脱氢酶（如琥珀酸脱氢酶） （或活细胞的NADH，NADPH）可பைடு நூலகம்为TTC的氢供体， 从而将TTC还原为TTF。外加琥珀酸可增强TTC的还原。
3. FDA方法※
FDA ：二乙酸荧光素（Fluoresencein diacetate，母液为 5 mg/mL的FDA DMSO溶液，储存在0℃） FDA是一种非极性酯类物质，可以通过质膜进入细胞质， 在细胞内酯酶的作用下水解脱去酯基团后在490-500 nm 激发光下产生绿色荧光。 FDA （2µg/mL）被普遍用于细胞活力的测定 活力低的细胞具有较低的酯酶活性，因此绿色荧光较弱
根系活力的测定实验报告
根系活力的测定实验报告
《根系活力的测定实验报告》
根系是植物的重要器官之一，它承担着吸收水分和养分的功能，同时也是植物生长的重要支撑。
因此，了解根系活力对于研究植物生长发育具有重要意义。
为了深入了解根系活力的测定方法，我们进行了一项实验。
实验方法：
1. 实验材料：本实验选取了小麦种子作为实验材料。
2. 实验步骤：
a. 将一定数量的小麦种子放入含有适量水的培养皿中，让其在恒温恒湿的条件下进行发芽。
b. 在小麦种子发芽后，选取相同大小的小麦幼苗，将其根系放入适量的生理盐水中浸泡一段时间。
c. 将浸泡后的小麦根系取出，用酒精进行漂白处理，然后将其放入含有适量三氧化二砷的溶液中浸泡。
d. 观察小麦根系的活力情况，并记录下根系的长度、数量和形态等数据。
实验结果：
经过实验测定，我们得到了小麦根系的活力数据。
通过对比实验前后小麦根系的长度、数量和形态等数据，我们可以清晰地了解到小麦根系的生长情况。
在实验中，我们发现浸泡后的小麦根系长度有所增加，数量也有所增加，形态也更加健康。
实验结论：
通过本次实验，我们成功测定了小麦根系的活力情况。
根据实验结果，我们可
以得出结论：浸泡处理可以促进小麦根系的生长，增强其活力。
这为我们进一步研究植物生长发育提供了重要的参考依据。
总结：
根系活力的测定是研究植物生长发育的重要手段之一，通过实验测定，我们可以了解根系的生长情况，为进一步研究提供重要数据支持。
希望本次实验结果能够对相关领域的研究工作提供一定的参考价值。
根系活力的测定(TTC法)实验综述报告
根系活力的测定(TTC法)实验综述报告一、引言根系是植物的重要组成部分，对植物的生长和发育起着重要的影响。
因此，准确测定根系活力对于研究和监测植物生长状态、生理代谢以及适应环境的能力具有重要意义。
TTC法是一种常用且经典的根系活力测定方法，可以通过测定细胞色素酶的活性来反映细胞线粒体的代谢能力。
本综述将详细介绍TTC法的原理、实验步骤、结果分析以及存在的局限性，旨在为相关科研人员提供参考和指导。
二、原理TTC法通过将三氯化四氯化三苯巴比妥酸（TTC）还原为有色产物，间接测定细胞线粒体氧化还原酶活性，从而反映细胞的代谢能力。
在活力高的细胞中，细胞色素酶能将TTC迅速还原为甲基砌和氯化苯胺，溶液呈现出红色。
而在活力低或死亡的细胞中，由于细胞色素酶活性降低或丧失，不能将TTC完全还原，溶液呈现淡红色或无色。
三、实验步骤1. 实验前准备：准备好所需材料和试剂，如TTC、缓冲液、植物根系样品等。
2. 根系样品处理：将根系样品取出，并进行清洗和去皮处理。
3. 根系活力测定：将处理后的根系样品放入含有TTC和缓冲液的培养皿中，然后放入恒温培养箱中，在适宜的温度下进行静置培养。
4. 反应终止：在适当时间后，将培养皿取出，加入适量酸性水溶液终止反应。
5. 读取吸光度：使用分光光度计读取反应溶液的吸光度值，得到各组的吸光度数据。
6. 结果分析：根据吸光度数据，计算出样品的根系活力值。
四、结果分析通过TTC法测定的根系活力实验结果，可以从吸光度值得出根系活力的信息。
活力高的根系样品，其吸光度值较高，溶液呈现出深红色；活力低或死亡的根系样品，吸光度值较低，溶液呈现淡红色或无色。
同时，根据根系活力值的大小可以进行不同样品之间的比较，从而判断不同处理或条件对根系活力的影响。
五、存在的局限性尽管TTC法是一种常用的根系活力测定方法，但其也存在一些局限性。
首先，TTC法只能反映细胞线粒体氧化还原酶活性，对其他代谢能力不能进行直接测定。
根系活力测定实验报告
根系活力测定实验报告根系活力测定实验报告引言：植物是地球上最为重要的生物之一，其根系是植物生长发育的基础。
根系的健康与否直接影响着植物的生长和产量。
因此，了解根系的活力对于研究植物生长机理和提高农作物产量具有重要意义。
本实验旨在通过测定根系活力的方法，探究不同因素对根系活力的影响。
实验材料与方法：实验材料：小麦种子、滤纸、无水乙醇、甲醇、硝酸钠等。
实验步骤：1. 将小麦种子清洗干净，用无水乙醇浸泡15分钟，以去除种子表面的杂质。
2. 取一张滤纸，用无菌针将其刺破，然后将种子均匀地分布在滤纸上。
3. 将滤纸卷起，放入已加入甲醇和硝酸钠的试管中，加热至沸腾。
4. 取出滤纸，用去离子水冲洗干净，然后用无菌针将其刺破。
5. 将滤纸放入含有无菌培养基的培养皿中，放入恒温培养箱中，以28℃恒温培养。
6. 观察根系的生长情况，并记录。
实验结果与讨论：经过一段时间的培养，我们观察到小麦种子的根系开始生长。
根系的生长情况与根系活力密切相关。
在本实验中，我们采用了甲醇和硝酸钠的处理方式，这是因为甲醇和硝酸钠可以提供植物生长所需的营养物质，并刺激根系的生长。
实验结果显示，经过甲醇和硝酸钠处理的小麦种子的根系生长速度较快，根系活力较高。
根系活力的测定方法有很多种，除了本实验中采用的方法外，还有其他的测定方法。
例如，可以通过测定根系的呼吸速率来评估根系的活力。
根系的呼吸速率是指根系在单位时间内消耗的氧气量或释放的二氧化碳量。
根系的呼吸速率越高，说明根系的活力越强。
此外，根系的形态特征也可以反映根系的活力。
例如，根系的长度、分支数、根毛的密度等都可以用来评估根系的活力。
根系越发达、分支越多、根毛越密集，说明根系的活力越高。
根系活力的测定对于研究植物的生长发育机制具有重要意义。
通过了解根系活力的变化规律，可以揭示植物对环境变化的适应机制，为改良农作物品种、提高农作物产量提供理论依据。
此外，根系活力的测定还可以用于评估土壤质量和环境污染程度，为土壤修复和环境保护提供参考。
根系活力的测定[TTC法]
![根系活力的测定[TTC法]](https://img.taocdn.com/s3/m/ac8ec1ea5727a5e9846a619d.png)
六、思考题
1.植物的根与地上部分有何关系? 2.反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、苹
果酸各起何作用？ 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位？
为什么？ 4.为什么要以杀死根系作为空白对照？
精品课件
丙二酸 碘乙酸
抑制
精品课件
三、实验材料
水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
精品课件
四、实验步骤—制作TTTCT含C量（标μg）准曲线
0.25m
Na2S2O4 L
25
乙酸乙酯 0.50m L
50
1.00m L
100
1.50m
L
150
乙酸乙酯作 参比，测定 485nm下 光密度值， 绘制标准曲
线
2.00m
吸取0.25mL
加少许 乙酸乙 L
200
TTC加入10mL Na2S2O4 酯定容 容量瓶
精品课件
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实验四根系活力的测定
一、意义
根系是植物对水分和矿质营养的主要吸收器官，同时又是植物体中重要物质如氨基酸、激素等物质合成、同化、转化的器官，因此根的生长情况和活动能力直接影响植物个体的生长情况、营养水平和产量水平等具有重要的实际意义。
在科学研究中常把根系的呼吸强度、阳离子代还量（CEC）、对有色物质的吸附量和ATP酶的活性等作为作物根系活力的指标。
二、测定原理
TTC（2，3，5－氯化三苯基四氮唑）的氧化态是无色的，可被氢还原成不溶性的红色三苯基甲月朁（TTF）。
具有活力的组织和细胞在呼吸作用中，脱氢酶催化底物氧化脱氢产生NADH、NADPH 等还原性物质，当TTC渗入组织或细胞时呼吸过程产生的还原物质可将其还原成TTF（红色），组织或细胞被染成红色。
死细胞无呼吸，不发生这样的氧化还原反应。
应用这一原理，可根据组织或细胞染色情况来检测种子、花粉、根系等的活力。
植物根引起的TTC还原，可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到加强；而被丙二酸、碘乙酸所严重抑制。
还原强度（即根系活力强弱）可用TTF的生成量来表示。
TTF在485 nm 处有吸收峰，用乙酸乙酯提取后测定OD485，通过标准曲线计算TTF的生成量，用单位时间
内单位根重产生的TTF表示根系的活力。
三、仪器设备
1.分光光度计；
2.分析天平（感量0.1mg）；
3.托盘天平（感量0.1 g）；
4.温箱；
5.研钵：1套；
6．4 cm漏斗：2 个；
7.量筒10 mL：1 个；
8.刻度移液管：0.5 mL、2 mL、5 mL；
9．10 mL容量瓶（或10 mL具塞刻度试管）：8个；
10．试管架：1 个；
11.石英砂适量；
12.高型称量瓶（30×60 mm）：2 个。
四、试剂
1.乙酸乙酯（分析纯）；
2.连二亚硫酸钠（Na2S2O4），分析纯，粉末；
3．1 %TTC溶液：准确称取TTC 1.0000 g，溶于少量水中，定容到100 mL，用时稀释至需要浓度；
4．0.1 mol ·L -1 pH 7.5磷酸缓冲液；
5．1 mol ·L -1 硫酸：用量筒取比重1.84的浓硫酸55 mL，边搅拌边加入盛有500 mL蒸馏水的烧杯中，冷却后稀释至1000 mL；
6．0.4 mol ·L -1琥珀酸：称取琥珀酸4.72 g，溶于水中，定容至100 mL。
五、材料
种子萌发后用Hoagland营养液进行培养，采用水培或砂培的方法培养植物材料。
生长一定时间后取根系作为实验材料。
六、方法步骤
1.定性测定
（1）配制反应液：把1 %的TTC溶液，0.4％mol ·L -1的琥珀酸和0.1 mol ·L -1 pH 7.5磷酸缓冲液按1∶5∶4的比例混合。
（2）将根仔细洗净，把地上部分从茎基切除。
然后将根放入带盖的称量瓶中，倒入反应液，以浸没根为度。
置37 ℃暗箱中1 h，以观察着色情况。
新根尖端几毫米以及侧根部分明显地变成红色，表明该处具有活跃的脱氢酶存在。
2.定量测定
（1）TTC标准曲线的制作：吸取0.1 mLTTC标准液（含TTC 10 mg ·mL -1）放入10 mL容量瓶，加少许Na2S2O4粉末，摇匀后即产生红色的甲月朁。
再用乙酸乙酯定容至刻度，摇匀。
然后分别取此液0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 mL置10 mL容量瓶中，以乙酸乙酯定容至刻度，即得到含甲月朁0.025、0.05、0.10、0.15、0.20 mg的标准比色系列。
以空白作参比，在485 nm 波长下测定吸光度（OD485），以甲月朁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
（2）取根尖1cm切段0.5 g，放入称量瓶，加入1 % TTC溶液和0.1 mol ·L -1磷酸缓冲液的等量混合液10 mL，把根充分浸没在溶液内，在37 ℃下保温1 h。
加入1 mol ·L-1硫酸2 mL，以终止反应。
（3）取出根尖，擦干水分后与3～5 mL乙酸乙酯和少量石英砂一起在研钵内研碎，以提取甲月朁。
把红色浸提液滤入试管，并用少量乙酸乙酯把残渣洗涤2～3次，滤入试管，最后
用乙酸乙酯定容10 mL。
在波长485 nm下比色，以空白试验（先加入硫酸再加入根样品，其他步骤同上）作参比读取吸光度。
七、结果计算
查标准曲线，即可求出TTC还原量。
TTC还原强度＝
TTC还原量（g）根重（g） 时间（h）
八、注意事项
在对材料根系的操作中切忌对根的损伤，以免对实验结果带来影响。
九、思考题
试分析活力测定中根系着色深浅不同的原因。