免疫学检验基础理论知识

1、已知抗体包 被于载体表面
1、已知抗体包 被于载体表面
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竞争法测抗原
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3、加酶作用 的底物不显色 或显色弱
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2、加待检物 抗原与酶标抗 原竞争与抗体 结合
2、加待测物 和酶标抗原， 酶标抗原与抗 体结合
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3、加酶作用 的底物显色

捕获法 最常用于IgM抗体检测。先将针对IgM的第二抗 体连接于固相载体，用以结合样品中所有的IgM 抗体，然后加入特异抗原与待检IgM抗体结合； 再加入抗原特异的梅标抗体，最后形成固相二抗IgM-抗原-梅标抗体复合物。
4、加酶标抗体 无抗原结合， 加底物不显色
捕获法原理
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谢谢
IgD:血清型IgD作用尚不清楚。

定义：抗原与相应抗体之间的特异性结合反应。 原理：抗原抗体的特异性结合是基于抗原决定簇与 抗体超变区分子间的结构互补性和亲和性。这种特 性是有抗原、抗体分子空间构型所决定的。

特异性
空间结构互补，如同钥匙和锁，一一对应。
共同抗原：物质表面往往不止一种抗原决定簇， 两种不同抗原物质可具有部分相同或类似结构的 抗原决定簇。能与彼此相应的抗体出现交叉反应。
免疫系统
免疫器官 中枢免疫器 官 外周免疫器 官
免疫细胞
免疫分子
淋巴细胞 单核巨嗜细 胞 参与免疫应 答的细胞
免疫球蛋白
补体
细胞因子等
抗体: 机体受到抗原物质刺激后，由B淋巴细胞转
化为浆细胞产生的，能与相应抗原发生特异性结合 的免疫球蛋白(Ig)。
抗体的基本结构
所有种类Ig的单体分子结构都是相似的，即由两 条相同的重链(H)和两条相同的轻链(L)四条肽链构 成的“Y”字形的分子。
胡琳琳

抗原: 凡能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞并能 与之发生特异性结合的物质称为抗原(antigen、 Ag)。

抗原物质具有免疫原性与反应原性。 免疫原性（抗原作用）: 指能刺激机体产生抗体和 致敏淋巴细胞的特性。 反应原性（抗原反应）: 指抗原与相应的抗体或致 敏淋巴细胞发生反应的特性。
完全抗原与半抗原 完全抗原: 具有免疫原性与反应原性的物质，多为 分子量大于5000的蛋白质。 半抗原: 只具有反应原性而无免疫原性的物质，一 般为小分子化合物，例如某些激素、药物等。
反应环境条件



电解质 反应必须要有电解质参与。 酸碱度 一般以pH6～9为易 温度 一般以15 ～ 40℃，最适温度为37 ℃。范围内 温度越高反应速度越快，温度越低反应越慢但结 合的越牢固。>56 ℃会导致解离甚至变性。

双抗体夹心法 适用于检测分子中具有至少两个抗原决定簇的多 价抗原，而不能用于小分子半抗原。 利用连接在固相载体上的抗体和酶标抗体可分别 与样品中被检测抗原分子上的两个不同抗原决定 簇结合，形成固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合 物。
1、固相化抗人 IgM 2、加待测物 特异性IgM与 非特异性IgM 和抗人IgM结合
1、固相化抗人 IgM 2、加待测物 非特异性IgM 和抗人IgM结合
3、加特异性 抗原，与特异 性抗体结合
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3、加特异性抗 原，不能与非 特异性IgM结合
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4、加酶标抗体 与特异性抗原结 合，加底物显色

IgM:分子量最大的免疫球蛋白，抗原刺激诱导的体液免


疫应答中最先产生的抗体。在感染过程中血清IgM水平升 高，说明有近期感染，有助于早期诊断。 IgG:血清中含量最高，是再次免疫应答的主要抗体，是唯 一能够通过胎盘的抗体。感染后出现时间较晚，持续时间 较长，是既往感染的标志。 IgA:分为血清型和分泌型，分泌型IgA是参与粘膜局部免 疫的主要抗体。 IgE:血清中含量最少，介导1型超敏反应。
比例性
指抗原与抗体特异性结合反应时，生成肉眼可见 结合物的量与反应物浓度的关系，只有当二者浓 度比例适当是，才出现可见反应。 钩状效应（倒钩）：抗体过量-前带，抗原过量 -后带。
可逆性
抗原与相应抗体结合复合物后，在一定条件下又 可解离为游离抗原与抗体的特性称为抗原抗体结 合的可逆性。 复合物解离因素：1.抗体对相应抗原的亲和力。 2.环境因素。PH值，离子强度。
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双抗体夹心法测抗原
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间接法 此法是测抗体的常用方法。将抗原连接在固相载 体上，样本中待检抗体与之结合成 固相抗原-待 检抗体复合物，再用酶标二抗（针对待检抗体的 抗体）与固相复合物中的抗体结合。
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间接法测抗体
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竞争法 竞争法可用于抗原和半抗原的定量测定，也可对 抗体进行测定。 酶标记抗原（抗体）与待测品中的抗原（抗体） 具有相同的与固相抗体结合的能力；反应体系中， 固相抗体（抗原）和酶标抗原（抗体）是固定限 量，且前者的结合位点少于酶标记与待测抗原 （抗体）分子数量和；反应后，结合于固相载体 上的复合物中被测定的酶标抗原（抗体）的量与 待测品中的抗原（抗体）的浓度成反比。
反应物自身因素

抗原：理化性状，表面抗原决定簇的种类和数目 抗体：
来源：来源不同动物的免疫血清，等价带宽窄不同。 浓度：与相应抗原浓度合适才易出现可见反应。 特异性与亲和力：早期获得的抗血清亲和力低，特异性 好；后期获得的往往亲和力高。诊断试剂尽可能选高特异 性、高亲和力的抗体。才能提高试验的可靠性。