细胞培养基及其添加物
mem培养基
mem培养基MEM培养基摘要：MEM（Minimal Essential Medium）是一种常用的细胞培养基，被广泛应用于生物医学研究领域。
本文将介绍MEM的组成成分、配制方法、应用领域以及常见的注意事项，以帮助读者更好地了解和使用MEM培养基。
1. 引言细胞培养是生物医学研究的重要手段之一。
为了保证细胞正常生长和增殖，在进行细胞培养时，需要提供适当的培养基。
MEM培养基作为一种全面适用的基础培养基，被广泛应用于各个领域的细胞培养工作中。
2. MEM培养基的组成成分MEM培养基由多种成分组成，包括无机盐、氨基酸、维生素、能源源和其他添加物。
其中无机盐的主要成分有钾、钙、镁、磷等。
氨基酸是细胞合成蛋白质的基本组成部分，维生素则是细胞正常代谢所需的营养物质。
能源源包括葡萄糖等糖类，提供细胞生长所需的能量。
除此之外，MEM培养基还添加了胎牛血清（FBS）等血清成分，来提供细胞所需的生长因子和其他重要成分。
3. MEM培养基的配制方法MEM培养基的配制可以通过两种方式进行：一种是购买现成的MEM培养基粉末，按照说明书配制；另一种是自行配制。
自行配制时，可以根据需要将相应的成分按照一定比例加入无菌蒸馏水中，然后通过无菌过滤器过滤，得到最终的MEM培养基。
4. MEM培养基的应用领域MEM培养基被广泛应用于细胞生物学的各个领域，包括细胞培养、细胞增殖、细胞扩增、病毒培养等。
它为细胞提供了适宜的环境，使得细胞能够在培养皿中正常生长和增殖，并可用来进行细胞系的维护和传代。
5. MEM培养基的注意事项在使用MEM培养基时，需要注意以下几点：- 必须保持培养基的无菌性，在制备和使用过程中严格遵循无菌操作规范；- 使用培养基前，应将其保存在4℃下，避免暴露于高温和阳光直射下；- 在配制培养基时，按照比例准确称量各个成分，并充分溶解均匀；- 培养基中的胎牛血清应选用优质的血清，并在使用前进行热灭菌处理。
另外，一些特殊细胞株（如原代细胞）也可以选择使用无血清培养基；- 培养基的pH值需要调整到适宜范围内（通常为7.2-7.4），可以使用缓冲液进行调节。
gibco多聚-d-赖氨酸 用法
gibco多聚-d-赖氨酸用法
Gibco多聚D赖氨酸是一种生物化学试剂，用于生命科学研究中的细胞培养和实验。
具体用法如下：1. 培养基中的添加物：可以将Gibco多聚D赖氨酸添加到细胞培养基中，作为细胞的营养物来源之一。
通常的用量是每升培养基添加10-50 mg的多聚D赖氨酸。
2. 包被培养皿表面：可以在培养皿表面预先涂覆Gibco多聚D赖氨酸，从而提供细胞附着的基质。
在培养皿中加入适量的多聚D赖氨酸水溶液，让其在表面均匀涂敷，并在室温下干燥。
3. 组织工程和支架材料：Gibco多聚D赖氨酸也可以用于组织工程和支架材料的制备。
可以将多聚D赖氨酸加入到生物降解材料中，用于细胞生长和组织修复。
需要注意的是，具体的用法可能因研究目的、细胞类型和实验条件而有所不同。
在使用Gibco 多聚D赖氨酸前，最好参考相关的文献或咨询厂家提供的技术手册，以获取更详细的用法指导。
干细胞相关基础培养基和添加剂
干细胞相关基础培养基和添加剂
干细胞是一种具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞类型，对于干细胞的培养基和添加剂的选择对于干细胞的生长、增殖和分化起着至关重要的作用。
基础培养基通常包括培养基基础液和必需的添加剂，以提供细胞所需的营养物质和生长因子。
常用的干细胞培养基基础液包括DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）、RPMI（Roswell Park Memorial Institute）1640、F12（Ham's F-12）等。
这些基础培养基液提供了细胞所需的营养物质，如氨基酸、维生素、糖类等，并且含有适当的缓冲剂来维持培养液的pH值。
在基础培养基中添加的生长因子和添加剂也起着至关重要的作用。
常见的添加剂包括胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）、人血清（Human Serum，HS）、胰岛素、转铁蛋白、EGF（表皮生长因子）、FGF（成纤维细胞生长因子）等。
这些添加剂可以提供细胞生长和增殖所需的营养物质和生长因子，促进干细胞的自我更新和增殖。
此外，针对不同类型的干细胞，还可以根据需要添加特定的生
长因子和细胞因子，以促进干细胞的特定分化方向。
例如，对于造血干细胞，可以添加血清素、Thrombopoietin等因子来促进其向血细胞系的分化。
总之，选择适合的基础培养基和添加剂对于干细胞的培养和研究至关重要，科学合理的培养条件可以有效地维持干细胞的稳定生长状态并促进其分化，为干细胞研究和应用提供坚实的基础。
细胞培养基及其配制方法
DMEM(A) 细胞培养基（粉末型）成分DMEM(H) 细胞培养基（粉末型）成分DMEM(L) 细胞培养基（粉末型）成分【DMEM专题】DMEM细胞培养基（二）配制方法及注意事项配制方法：（1）在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5％的双蒸水。
（2）在室温（20℃到30℃）的水中加入干粉培养基，轻轻搅拌，不要加热。
（3）水洗包装袋的内部，转移全部的痕量干粉到容器内。
（4）加NaHCO3到培养基中。
（5）用双蒸水稀释到想要的体积，搅拌溶解。
注意不要过分搅拌。
（6）通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值，由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3，因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0. 2到0.3。
培养基在过滤前要保持密封。
配制培养基要注意以下问题：●认真阅读说明书。
说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHC O3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。
这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。
●配制是要保证充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。
●配制所用的水应是三蒸水，离子浓度很低。
●所用器皿应严格消毒。
●配制好的培养基应马上过滤，无菌保存于4度。
●液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基，它是一种灭菌后保证无菌的溶液，必要时可制成无内毒素等的溶液，可节省科研人员的工作量。
DMEM各种成分都有什么作用一般的基础培养基包括四大类物质：无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物。
（1）无机盐：对调节细胞渗透压、某些酶的活性及溶液的酸碱度都是必须的。
（2）氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸(L型)都是细胞用以合成蛋白质的必需氨基酸，不能由其他氨基酸或糖类转化合成。
除此之外，还需要谷氨酰胺(glutamine)。
谷氨酰胺具有特殊的作用，对细胞的培养特别重要，能促进各种氨基酸进入细胞膜；它所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶的来源，还是合成—磷酸腺苷、二磷酸腺甘和三磷酸腺苷的原料。
细胞培养基的基本要求
细胞培养基的基本要求体外培养的细胞直接生活在培养基中，因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。
营养成分：1.氨基酸：所有细胞都需要12 种必须氨基酸：缬、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精、胱氨酸。
2.单糖：六碳糖是主要能源，也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。
细胞对葡萄糖的吸收能力最高，半乳糖最低。
体外培养动物细胞时，几乎所有的培养基或培养液中都以葡萄糖作为必含的能源物质。
3.维生素：生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素、维生素B12 都是培养基常有的成分。
4.无机离子与微量元素：细胞生长除需要钠、钾、钙、镁、氮和磷等基本元素，还需要微量元素，如铁、锌、硒、铜、锰、钼、钒等。
5.促生长因子及激素：o 各种激素、生长因子对于维持细胞的功能、保持细胞的状态（分化或未分化）具有十分重要的作用。
有些激素对许多细胞生长有促生长作用，如胰岛素，它能促进细胞利用葡萄糖和氨基酸。
有些激素对某一类细胞有明显促进作用，如氢化可的松可促进表皮细胞的生长，泌乳素有促进乳腺上皮细胞生长作用等。
6.渗透压：细胞必须生活在等渗环境中，大多数培养细胞对渗透压有一定耐受性。
人血浆渗透压290mOsm/kg, 可视为培养人体细胞的理想渗透压。
鼠细胞渗透压在320mOsm/kg左右。
对于大多数哺乳动物细胞，渗透压在260～320mOsm/kg的范围都适宜。
7.pH、气体：是细胞生存的必需条件之一，所需气体主要是氧和二氧化碳。
氧参与三羧酸循环，产生能量供给细胞生长、增殖和合成各种成分。
一些细胞在缺氧情况下，借糖酵解也可获取能量，但多数细胞缺氧不能生存。
在开放培养时，一般置细胞于95％空气加5％二氧化碳的混合气体环境中培养。
二氧化碳既是细胞代谢产物，也是细胞所需成分，它主要与维持培养基的pH 有直接关系。
动物细胞大多数需要轻微的碱性条件，pH值约在7.2 ～7.4 ，在细胞生长过程中，随细胞数量的增多和代谢活动的加强，二氧化碳不断被释放，培养液变酸，pH 值发生变化。
sciencell内皮细胞培养基说明书
sciencell内皮细胞培养基说明书Sciencell内皮细胞培养基是一种特异性和高效性培养内皮细胞的基质，能够有效地维持和生长内皮细胞，并促进它们的分化和功能发挥。
以下是Sciencell内皮细胞培养基的详细说明：一、培养基配方Sciencell内皮细胞培养基主要包含以下成分：1. DMEM/F12培养基2. 10% FBS3. 内皮细胞生长因子（EGF、VEGF、FGF、呋喃丙酸等）4. 抗生素/抗菌素（penicillin和streptomycin）5. L-酪氨酸、谷氨酰胺和葡萄糖等。
二、适用范围Sciencell内皮细胞培养基适用于以下内皮细胞的培养：1. 人类内皮细胞（HEC、HUAEC、HPMEC等）2. 小鼠内皮细胞（MEC、MAEC等）3. 大鼠内皮细胞（REPEC、RAEC等）4. 其他动物内皮细胞。
三、培养条件1. 培养温度：37℃2. CO2浓度：5%3. 外源性添加物：Sciencell内皮细胞培养基中已经包含了必要的营养因子、生长因子和抗生素/抗菌素，不需要额外添加外源性添加物。
4. 培养密度：内皮细胞的培养密度应当根据不同细胞类型和研究需要适当调整，一般为1-3x10^4 cells/cm2。
5. 培养时间：培养时间应当根据不同细胞类型和实验需要适当调整，一般为4-7天。
四、保存条件Sciencell内皮细胞培养基应当在4℃低温保存，避免阳光直射和冻结。
保存期长达6个月，但是在保质期内使用会更好。
打开后，建议在一个月内使用完毕。
五、使用说明1. 移液操作：使用Sciencell内皮细胞培养基时应当采用无菌条件下的移液操作，并避免出现气泡和异物。
2. 细胞接种：将内皮细胞接种到预先涂覆的细胞培养底物上，并根据需要进行细胞划分和培养状态监测。
3. 细胞增殖：使用Sciencell内皮细胞培养基可促进内皮细胞的增殖和生长，建议每3-4天更换新的培养基。
4. 细胞检测：在细胞培养期间需监测细胞的培养状态、生长状态和增殖情况。
细胞培养各种培养基简介
DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识培养细胞的完全培养基由基础培养基（如MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。
一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。
最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。
而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。
MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。
Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM 含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。
选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。
例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。
F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。
在所有这些培养基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度，这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。
对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸（若培养基中这两种物质缺乏时）。
MEM与F12均要用5%的CO2来平衡，DMEM含更高浓度的NaCO3，要用10%的CO2来平衡，当然也可以在较低CO2浓度下使用。
这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的，但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。
原则上，HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。
实际操作中并非如此简单。
显然，溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。
一种成纤维细胞培养基及其应用
一种成纤维细胞培养基及其应用一、引言成纤维细胞是一种重要的细胞类型，其在组织修复和再生过程中起着关键的作用。
成纤维细胞培养基是一种为成纤维细胞提供适宜生长环境的培养基。
本文将介绍一种常用的成纤维细胞培养基及其应用。
二、成纤维细胞培养基的组成一种常用的成纤维细胞培养基的基本组成包括培养基基础液和一系列的添加剂。
培养基基础液通常由DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）和FBS（Fetal Bovine Serum）组成，提供了细胞所需的营养物质和生长因子。
添加剂包括抗生素、胰岛素、转铁蛋白、胆固醇等，可以提供细胞生长所需的辅助物质。
三、成纤维细胞培养基的制备方法1. 将DMEM和FBS按照一定比例混合，得到培养基基础液。
2. 将培养基基础液加热至37摄氏度，然后加入适量的抗生素和其他添加剂，充分混合。
3. 将混合液过滤消毒，得到成纤维细胞培养基。
四、成纤维细胞培养基的应用成纤维细胞培养基广泛应用于生物医学研究、组织工程和药物筛选等领域。
1. 生物医学研究：成纤维细胞是体内最常见的细胞类型之一，其在炎症反应、创伤修复和疾病发展等过程中起着重要作用。
通过使用成纤维细胞培养基，研究人员可以对成纤维细胞进行体外实验，深入了解其生物学特性和功能，以及其与其他细胞类型的相互作用。
2. 组织工程：成纤维细胞培养基可用于培养和扩增成纤维细胞，为构建组织工程材料提供细胞来源。
成纤维细胞在组织工程中可以作为种子细胞，与生物支架相结合，用于修复和再生受损组织。
3. 药物筛选：许多疾病的发生和发展与成纤维细胞的功能紊乱密切相关。
通过使用成纤维细胞培养基，可以建立疾病模型，用于评估潜在药物的疗效和毒性。
这为药物研发提供了重要的工具和平台。
五、成纤维细胞培养基的优势和挑战1. 优势：成纤维细胞培养基提供了适宜的生长环境，可以促进成纤维细胞的增殖和细胞周期的稳定。
同时，培养基的成分可以根据具体需求进行调整和优化，以满足不同实验的要求。
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6. 培养细胞时应使用5%还是10%CO2，或者根本没有影响? 答：一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。 当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10% CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5g 时，则应使用5%CO2培养 细胞。 7. Hepes的作用 HEPES溶液：是一种弱酸，中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸，主要作 用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时培 养基脱离了 5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若 加了HEPES，此时可以维持pH7.0左右。 8. NaHCO3 培养基中使用了NaHCO3-CO2缓冲系统，并采用开放培养，使细胞 代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，再通过稳定调节温箱中CO2浓度 (5%)，与培养基中的NaHCO3处于平衡状态，从而调节培养基的PH 值。
9. NEAA：非必须氨基酸 NEAA(非必需氨基酸)是含几种非必需氨基酸的合剂，添加到的原培养基不同， 10. 氯化钙 氯化钙对成骨细胞培养有毒性，所以成骨细胞的培养基中应不含氯化钙。 11. 什么培养基中可以省去加酚红? 酚红在培养基中用作pH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时 为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响，可以通过纯化技术去除， 但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长，当然这种作 用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分，很多国外 的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。 研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，(特别是雌激素)。为避免固醇 类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红 干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。
9、Leibovitz Medium (L-15) L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养，用于 在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株。此培养液 采用磷酸盐缓冲体系，氨基酸组成进一步改良， 并由半乳糖替代了葡萄糖。 10、Ham’s F-10培养基：适应小鼠细胞、人类 二倍体的培养。 11、Ham’s F-12培养基：可以在加入很少血清 的情况下应用，特别适合单细胞培养和克隆化培 养，是无血清培养中常用的基础培养液。
细胞培养基和添加物
细胞培养基的基本成分 不同培养基之间的区别 常用的几种培养基及其组成成分
细胞培养基中的添加剂及其作用
细胞培养基的基本成分
氨基酸 维生素
碳水化合物
无机盐
缓冲系统
HEPES (NaHCO3)与CO2体系进行缓冲
常用培养基
3. 培养基中丙酮酸钠的作用是什么? 丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为 碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。 4. Hank′s 平衡盐溶液(HBS)和Earle′s平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能 差别? HBS和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagle′s (2.2g/L)中比在 Hanks′ (0.35g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的 PH值。Eagle′s液在空气水平的CO2 中，溶液会变碱，Hanks′液在CO2培 养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagle′s液，。 如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks′液就可以了。 5. 培养液pH对细胞生长的影响? 由于大多数细胞适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围可能对细胞生长将产生有害 的影响。但各种细胞对pH的要求也不完全相同，原代培养细胞一般对pH变 动耐受差，无限细胞系耐受力强。但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些。 在配制培养用液时，需要注意一点：培新配的培养基在经过0.10um或 0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
5、DMEM/F12 DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂，含有多种微量 元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium)，作 为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓 度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。 为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12(1：1)中加入 15mMHEPES缓冲液。 6、McCoy’s 5A 7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM) Guilber 和Iscove将Dulbecco’Medium 改良为 Iscove’s Medium，此种培养液含 有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。 IMDM为营养非常丰富的培养液。 8、M-199 Medium
细胞培养基中的添加剂及其作用
1. L-谷氨酰胺(L-Glutamine)在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳 定吗? 是细胞生长的必须氨基酸，为培养的细胞提供重要的能量来源。脱掉 氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成 和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，降解率随 保存温度而变。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞 具有毒性。 2. GlutaMAX-I是什么?培养细胞如何利用GlutaMAX-I?这个二肽有 多稳定? GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽，是一个L-谷氨酰胺的衍生物，其不稳 定的alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20 分钟，GlutaMAX-I 二肽溶液有最小的降解，如果在相同条件下，L谷氨酰胺几乎完全降解。
1、RPMI-1640 Medium RPMI是Roswell Park Memorial Institute的缩写，代指洛斯维.帕 克纪念研究所。 2、Minimum Essential Medium(MEM) 也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维 生素。成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动 物细胞类型的培养。MEM-Alpha 3、dulbecco‘s modified eagle medium(DMEM) 其特点主要包括以下： （1）氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸，如 甘氨酸等； （2）维生素含量为依格尔培养基的4倍； （3）含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸； （4）含有微量的铁离子。