五日生化需氧量的测定分析
GB7488-87水质五日生化需氧量BOD5
中华人民共和国国家标准水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法(GB7488-87)本标准参照采用国际标准ISO5815-1983，本国家标准规定采用稀释与接种法作为测定水中生化需氧量的标准方法。
这是一种经验的常规方法。
1适用范围本方法适用于BOD5大于2mg/L并且不超过6000mg/L的水样。
BOD5大于6000mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。
本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。
本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。
水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果。
2定义生物化学需氧量(BOD)：在规定条件下，水中有机物和无机物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧(以质量深度表示)3原理将水样注满培养瓶，塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。
培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗氧的质量，即BOD5值。
由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧(DO)量，因此在培养前需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧(DO)符合规定。
一般水质检验所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。
有进需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。
常用的区别含碳和氮的硝化耗氧量的方法是向培养瓶中投加硝化抑制剂，加入矢量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量即为含碳物质的耗氧量。
在5天培养时间内，硝化作用的耗氧取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显著量的还原性氮，而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。
五日生化需氧量(BOD5)的测定
五日生化需氧量(BOD5)的测定日生五需化量(氧od5)的测b定、实验目一的掌生活握污或工业水废水日五生需化量氧测的。
定二、实验原理生化氧需是指量在好氧件条下微生，物分解中的水机物有生物化的过程学中消所耗解溶氧的量此生化。
全程进过行时的间很，如在长02下℃养，培完此过成程1需00多。
天目国前外内都采20℃用养培天五为检验作标指，为五称生日需氧量(化od5b。
)分测别样品定培前养的溶解后氧二者之，差即为odb值，以氧5的g/l表示m 。
水样稀用释稀释，水定合确的倍数非适重常。
稀要释数倍大或太太，小五则培天养后余剩的溶解太氧多或太，甚至为少零都，不得能可到的靠果结。
释的稀程应使五天培养度中消耗所溶解的氧大2m于g/l而剩余,溶解氧在1g/l以上。
m此在前提件下，稀条释倍可数估以算，也可依据经验以法来值确定对于不。
含或含少生微的物水，废测在bod定时应进5行接种。
三实、验仪培器箱，大养玻瓶璃1，000m量筒，blo培养瓶d各，规的格(胖、肚刻)度液移管等。
、四实验试剂除测定溶解所需氧试的外，还需剂列下试剂：化钙溶液氯三，氯化溶铁，液酸镁溶硫液，酸盐磷缓冲溶液。
等、实验五骤1.步2.3.稀释的配制水使蒸：水的馏解氧为2溶℃0的时饱和解溶氧在这含有饱，和溶氧蒸解水中馏，每00lm0加入l上述种四液各溶1l。
m测定水的c污odn值或cdr。
值调节水ph值至样中性。
样水培液养配制的：()1据根得测的cod值计出算释稀数倍，一般时同3~做4种释稀倍。
数2)(用即吸虹把一些先释水引稀入1000lm量的中(约所需体积的筒1/)，3用再液移管吸所需取水的体积样，加量筒入。
移取中样水3()稀用释水释到所稀需的积体注意（本次：验实稀释的总体积为700m所），小心摇l匀将，配此的好样用虹吸法水入引带号编的2培个瓶养中，至全完充，满好盖盖，水子封。
此为一种稀第释倍的数培液(在养整操作个过程应免产生避气泡。
其)的几种余释稀倍数养液培，亦按法上作操。
五日生化需氧量(BOD5)的测定
五日生化需氧量（BOD 5）的测定1.用BOD 营养盐缓冲剂粉枕包2.选择样品体积。
详见样品容量3.用移液管轻轻搅匀样品。
向第4.向另一个BOD 瓶中加入稀释水。
这瓶就是稀释水空白。
准备稀释水。
详见稀释水准备。
选择。
一个BOD 瓶中加入最小采样量 注：如果最小采样量在3mL 左 的样品。
右，不需稀释直接测溶解氧。
再向另外4个BOD 瓶中加入不当测生活污水或沉降后的污水 同体积的样品。
做好标记，并等溶解氧浓度约为0mg/L 的样记录下每瓶水样的体积。
品时，这一步可以省略。
5.如果测试CBOD ，向每个瓶中6.向每个瓶中倒稀释水至瓶口7.小心地盖上瓶塞防止气泡。
按8.测试每个瓶中最初的溶解氧 浓度。
使用电极、仪器或滴定 法。
若使用滴定法则需准备2套BOD 瓶。
记得测量稀释水空白的溶解氧 浓度。
加入2管硝化抑制剂（约 边缘，沿着瓶壁倒入以防产生 住瓶塞并上下颠倒瓶子数次以 0.16g ）。
阻止氮化合物的氧化， 气泡。
混匀液体。
结果是CBOD 。
9.小心地盖上瓶塞防止气泡。
10.在每个BOD 瓶上置一个塑 料盖。
将BOD 瓶置于20（±1）°C 的培养箱内培养5天。
11.5天后测每瓶中剩余溶解氧 12.计算BOD 值。
（详见计算方法——标准方法） 向每个BOD 瓶内倒入稀释水作的浓度。
每瓶中剩余溶解氧的浓度至少 为水封。
应为1.0mg/L 。
稀释水准备•为了得到最好的结果，使用经过碱性高锰酸盐蒸馏的水。
•不要使用经离子交换柱所得的去离子水。
柱中的树脂(尤其是新柱)有时会释放有需氧量的有机物。
另外，细菌会在柱中滋生污染稀释水。
•在20°C条件下将蒸馏水储存在干净的容器里并放在培养箱中。
向容器中倒入蒸馏水至3/4体积，并摇晃容器使得空气进入水中饱和，或者较松地盖住容器并放置 24 小时或更久，以使氧气溶解。
•使用小型玻璃抽水泵或者气体压缩机使水中的空气饱和。
确保空气是经无菌过滤器过滤的。
五日生化需氧量的测定
实验七五日生化需氧量的测定生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。
测定BOD 的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。
本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。
该方法也称五天培养法(BOD5)，即取一定量水样或稀释水样，在20℃±1℃培养五天，分别测定水样培养前、后的溶解氧，二者之差为BOD5值，以氧的mg/L表示，其相关内容参阅教材第二章第五节。
一、实验目的和要求1．掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。
2．复习第二章第五节中的相关内容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。
二、仪器1．恒温培养箱。
2．5～20L细口玻璃瓶。
3．1000～2000mL量筒。
4．玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板。
5．溶解氧瓶：200～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口。
6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。
三、试剂1．磷酸盐缓冲溶液：将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4)，2. 75g磷酸氢二钾(K 2HPO4)，33.4g磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中，稀释至1000mL。
此溶液的pH 应为7.2。
2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000mL。
3．氯化钙溶液；将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。
4，氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。
5．盐酸溶液(0.5mol/L)：将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至1000mL。
6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。
五日生化需氧量(BOD5)的测定——压差法
五日生化需氧量（BOD5）的测定——压差法1 适用范围本方法适用于天然水、地表水、生活污水及工业废水中BOD5的测定，其测定范围是(0～1000)mg/L。
2 分析原理将仪器放入培养箱中，并按预先选择的量程范围，量好一定体积的水样倒入培养瓶中，并将培养瓶放在培养箱内仪器上连续搅拌。
培养箱内温度控制在20℃±1℃，水样恒温后进行五日培养。
培养瓶中必须保证足够的溶解氧。
样品中的有机物经过生物氧化作用，转变为氮、碳和硫的氧化物，在这一过程中，从水样中跑出来的为唯一气体二氧化碳被氢氧化钠（或氢氧化钾）吸收。
因此，瓶中空气压力减少量，相当于微生物所消耗的溶解氧量，这样，样品BOD5值与瓶中空气压力减少的程度成正比，通过测量空气压力的变化可以得到BOD5值。
增加或减少所取样品的量可以增加或降低压力减少值。
这样操作者无须繁杂的稀释步骤就能准确测量很宽范围的BOD5值。
3 试剂和仪器3.1 试剂3.1.1 1mol/L的NaOH溶液。
3.1.2 C（1/2H2SO4）＝1mol/L。
3.2 仪器3.2.1 880型数字式BOD5测定仪：附BOD培养瓶8个。
3.2.2 pH计，精度±0.1pH单位。
4 分析步骤4.1 培养箱温度的设置接通培养箱电源，将培养箱上温度开关拨至“设置”位置，调节温度电位器旋钮，使表头显示温度为20℃，再把温度开关拨至“测量”位置（培养温度允许±1℃的差值）。
4.2 水样pH的调节见表4-7（见下页）用C（1/2H2SO4）＝1mol/L的硫酸溶液和1mol/L的NaOH溶液调节待测水样的pH值为6.7～5。
4.3 待测水样量的确定预先估计被测样品的BOD5值范围，选择接近的量程。
如无法估计，可先测定该样品的COD值，然后根据该样品COD值来确定该样品的BOD5值，（通常BOD5值约为该样品COD值的0.8倍左右）。
若样品BOD5值在0mg/L～1000mg/L范围内，则样品不需稀释，若样品有足够的微生物，则样品不需要接种，按表1根据估算的样品BOD5值选择合适的量程，并使用干净的量杯，量取所需体积的水样倒入已清洗干净的培养瓶中。
实验五日生化需氧量的测定
1、记录与计算 a. 将每种水样测定结果及时记录在表1中。 b. 按下式计算五日生化需氧量
BOD 5 ( D1 D2 ) ( D3 D4 ) f1 f2
式中：BOD5－五日生化需氧量mg/L； D1 －样品在培养前的溶解氧mg/L； D2－样品 在培养后的溶解氧mg/L； D3－稀释水在培 养前的溶解氧mg/L；D －稀释水在培养后的 V4 V 溶解，mg/L； f1= V V ，f2= V V ，其中 V3为稀释水的体积（mL），V4为水样的体积 （mL）。
2．试剂 氯化钙溶液（27.5g/L）：溶解27.5gCaCl2于水中 稀释至1L。 三氯化铁溶液（0.25g/L）：溶解 0.25gFeCl3· 6H2O于水中，稀释至1L。 硫酸镁溶液（22.5g/L）：溶液 22.5MgSO4· 7H2O于水中，稀释至1L。 磷酸盐缓冲溶液（pH=7.2）：溶解8.5g KH2PO4, 21.75g K2HPO4, 33.4g Na2HPO4· 7H2O和 1.7g NH4Cl于约500mL水中，稀释至1L。 测定DO和CODMn所需试剂。
3
4
3
4
3
4
4．BOD2（二日生化需氧量）的测定与BOD5一 样，只是培养温度为30℃，培养时间为二天。 BOD2与BOD5之间换算有一关系式：
BOD
20 5
1.171 BOD
30 2
（二）CODMn的测定
方法原理： 在碱性加热条件下，用已知量并且是过量的 高锰酸钾，氧化海水中的需氧物质，然后在硫酸 酸性条件下，用碘化钾还原过量的高锰酸钾和二 氧化锰，所生成的游离碘用硫代硫酸钠标准溶液 滴定。
(3)
对特定海区水流流速是可测值，因此可并入 常数项，即令K1=k1/V，则（3）式可改写成：
化验室测定水质五日生化需氧量操作规程
化验室测定水质五日生化需氧量操作规程一、实验目的测定水样的五日生化需氧量（BOD5），了解水样的有机物污染程度。
二、实验原理五日生化需氧量（BOD5）是指一定温度下，在条件适宜的细菌作用下，有机物被生物氧化所需的氧量。
实验中，将水样与添加细菌的琼脂糖培养液混合并置于恒温器内，五天后再测定混合液中的溶解氧浓度，根据溶解氧浓度差计算得到水样的BOD5值。
三、实验仪器和试剂1.恒温器：可控制温度为20±1℃。
2.恒温水浴槽：用于调节实验所需恒定温度。
3.溶解氧电极：用于测量水样中溶解氧浓度。
4.密封玻璃瓶：容量为300mL，用于混合水样和琼脂糖培养液。
5.搅拌器：用于溶解氧的均匀分布。
6.pH计：用于测量水样的酸碱度。
7.琼脂糖培养液：配制培养细菌的营养液。
四、实验步骤1.准备实验设备并调节恒定温度为20±1℃。
2.选取适当的密封玻璃瓶，并清洗干净。
3.取300mL水样并过滤，以去除不溶物。
4.在过滤的水样中测量初始溶解氧浓度，并记录。
5.在密封玻璃瓶中加入200mL过滤的水样和100mL琼脂糖培养液。
6.用搅拌器均匀混合水样和琼脂糖培养液。
7.将密封玻璃瓶置于恒温器内，保持20±1℃的温度。
8.在五天后取出密封玻璃瓶，使用溶解氧电极测量溶解氧浓度。
9.计算BOD5值：BOD5=初始溶解氧浓度-五天后溶解氧浓度。
五、实验注意事项1.实验环境应保持清洁，避免外界有机物污染。
2.水样和琼脂糖培养液的配制要准确，避免对实验结果产生干扰。
3.实验过程中应严格控制温度，以确保实验条件一致。
4.混合水样和琼脂糖培养液时要充分搅拌，确保溶解氧均匀分布。
5.溶解氧电极的使用要准确、标定和校准，以获得准确的溶解氧浓度值。
6.实验过程中应注意个人安全，避免接触有害物质。
六、实验结果记录和分析1.记录水样的初始溶解氧浓度和五天后的溶解氧浓度。
2.计算水样的BOD5值，并用于分析水样的有机物污染情况。
五日生化需氧量简易测定方法
五日生化需氧量简易测定方法五日生化需氧量（BOD）是指一定量生物反应物在一定条件下，经过5天的反应时间的后，由溶于水中的物质所需氧量的量值。
需氧量的测定是废水污染控制中最重要的分析之一，它是把废水排放进各类水体当中发生污染的危害程度的决定性指标。
五日生化需氧量简易测定方法是指用简易工具和步骤，实现现场测定五日生化需氧量的方法，可以准确快速地测得需氧量的变化情况。
本方法主要利用生化需氧量计实现快速简易测定需氧量的值，从而可以准确测定采样水体的水质，大大提高监测水质的效率。
五日生化需氧量简易测定方法包括生化需氧量计（BODbottle）、高精度千分表、KL-1温度计、生化瓶罩、搅拌器、原始水样及稀释水样等，实现快速简易测定需氧量的步骤如下：
1.将稀释水料放入生化瓶中，用KL-1温度计测量温度，确保温度在20℃以内；
2.将生化需氧量计的液面上的气体释放出去，密封好生化需氧量计；
3.将生化瓶罩放入生化需氧量计内，再加入原始水样和稀释水样；
4.加入还原剂，即蒸馏水或淡公和的氯化钠溶液；
5.用搅拌器搅拌均匀，用高精度千分表记录生化需氧量计的初始液面位或需氧量；
6.将生化需氧量计密封好，分别在两温室中连续五天放置；
7.第二天和第五天，重复步骤5中记录需氧量的步骤；
8.计算需氧量的变化，即可得出采样水体的五日生化需氧量。
本方法相比传统法具有优势：
1.简单快捷：操作简单，一次测定时间只需5天，运行费用低，污染物的测定结果可靠；
2.现场实时性：可以实时现场测试水体需氧量；
3.准确度高：可以准确测定水质指标，保证数据准确度。
本文介绍了五日生化需氧量简易测定方法，并阐述了它的相关特点和优势，为现场环境质量监测工作提供了有用的参考。
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2.5.2
抑制硝化作用 水中有机物的生物氧化过程可分为两 个阶段，第一阶段主要是碳氢化合物被氧化， 称为碳化阶段，在20℃下约需20d才能完成， BOD测定的一般是该阶段的耗氧量。第二 阶段是含氮化合物及部分氨氧化为亚硝酸盐 及硝酸盐，称为硝化阶段，在20℃约需 100d 。对一般水样，测定BOD5时的硝化作 用并不显著。但对于生化处理的出水，因其 含有大量的硝化细菌，在测定BOD5时也包 括了部分含氮化合物的需氧量，因此需要加 入硝化抑制剂，抑制硝化作用对BOD5测定 的影响。可在每升稀释水样中加入2ml浓度 为500mg /L的丙烯基硫脲。
由高锰酸盐指数与一定的系数的乘积 求得的稀释倍数
高锰酸盐指数（mg/L）
＜5 5-10
系数
0.2 0.3
高锰酸盐指数（mg/L）
10-20 ＞20
系数
0.4、0.6 0.5、0.7、1.0
对地表水稀释倍数的确定，也同样如此。比如， 高锰酸盐指数的浓度为5-10mg/L之间时，我们可 以在系数0.2-0.3之间，再增加0.22，0.25，0.28等 几个系数。
2. 稀释接种法测定BOD5时需注意的问题
2.1 样品的采集及保存 采集样品时应充满并密封于瓶中，在0-4℃ 条件下进行保存，一般应在6h内进行分析。 若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时 间不应超过24h。 2.2 时间的影响 样品中的BOD5浓度易随时间的变化而变化， 样品储存时间、测定过程时间和培养时间均 会对测定结果产生影响。这就要求我们在进 行BOD5的测定时需要严格控制培养时间和 样品储存时间。
上清液的接种量，按水样的性质确定。 啤酒厂： 接种量一般以7-8ml/L水为宜。 印染废水：上清液2ml/L,再加入7ml/L驯化接种液。 葡萄糖谷氨酸标准溶液：接种量一般以2-3ml/L水 为宜。
当废水中存在着难于被一般生活污水中 的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧 毒物质时，在其排污口的下游3-8km处取水 样做为废水的驯化接种液，同时加入适量表 层土壤或生活污水，使能适应该种废水的微 生物大量繁殖。 当水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、 氰等有毒物质时，可使用经驯化的微生物接 种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数以 减少毒物的浓度。
ห้องสมุดไป่ตู้
溶解氧消耗量小于 2mg/L，有两种可能， 一是稀释倍数过大；另一种可能是微生物菌 种不适应，活性差，或含毒物质浓度过大。 对工业废水稀释倍数的确定，书上列出 了三个系数：0.075，0.15，0.225。根据本 站以往的经验，在选择系数的时候，可以在 0.075-0.15 之间， 0.15-0.225 之间多选择几 个系数。比如某水样CODcr浓度为100mg/L, 我们可 以选择 系数为 0.11 ， 0.13 ， 0.14 ， 0.15。
3． 样品分析过程中应注意的细节： 3.1 固定溶解氧的时候，应将吸管插入溶解氧瓶的 液面下。 3.2 加入硫酸后混合摇匀，一定要确保沉淀物全部 溶解。 3.3 在稀释水样时，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀 释水（或接种稀释水）于 1000ml 量筒中，加入需 要量的均匀水样，再加入稀释水（或接种稀释水） 至定量 , 用带胶板的玻棒小心上下混匀，混匀时勿 使搅拌棒的胶板露出水面，防止产生气泡。
2.3. 温度的影响 温度与微生物的增长速率相关，直接影响 微生物的生长繁殖，进而影响BOD5的测定 结果。另外，温度的变化还会引起溶解氧的 变化。因此，应严格控制采样温度、样品储 存温度、实验室温度及培养箱温度。
2.4
pH值的影响 水样的pH若超出6.5-7.5范围时，应加酸或 碱调节至此范围；稀释水和接种稀释水的 pH值应为7.2。
2.5. 2.5.1
生物因素的影响 接种液的质量 对于一般的地表水、生活污水或者不含 或少含微生物的工业废水的测定，在测定时 应进行接种，以引入能分解废水中有机物的 微生物。接种液一般采用城市污水或表层土 壤浸出液。 城市污水，一般采用生活污水，在室温 下放置一昼夜，取上清液供用。 表层土壤浸出液，取100g花园土壤，加 入1L水，混合并静置10min，取上清液供用。
五日生化需氧量的测定 稀释接种法
1.方法原理： 生化需氧量是指在规定条件下，微生 物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有 机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
对某些地表水及大多数工业废水，因 含较多的有机物，需要稀释后再培养测定， 以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。为了 保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通 常要通入空气或氧气进行曝气，使稀释水中 溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量 的无机营养盐和缓冲物质 , 以保证微生物生 长的需要。
4. 验证试验
为了检查接种稀释水，接种水和分析人 员的技术，需进行验证试验。将每升含葡萄 糖和谷氨酸各150mg的标准溶液以1：50稀 释比稀释后（用接种稀释水），与水样同步 测定BOD5，测得值应在180-230 mg/L之间。
5.CODcr和BOD5的关系
测定CODcr采用的是强氧化剂，水中有 机物可被氧化到 85%-95% ，所以，同一种 水质的 CODcr 浓度一般应高于 BOD5 ，其间 的差值能够粗略地表示不能为微生物所降解 的有机物，一般来说，CODcr＞BOD5。
2.6 稀释倍数的确定
确定合理的稀释倍数是成功测定 BOD5 的关键之一，稀释的倍数一般以五日培养后 消耗的溶解氧占原有溶解氧的 40%-70% 为 宜，也就是恰当的稀释比应使培养后的剩余 溶解氧≥1mg/L，消耗的溶解氧大于≥2mg/L。 先测定水样的 CODcr 值，然后根据水样的 CODcr浓度选用合适的稀释倍数，一般一个 样品应做 3-4 个不同的稀释比，如果经 5d培 养后，测其溶解氧时，当向水样中加 1mlMnSO4 及 2ml 碱性碘化钾溶液后，瓶内 出现白色絮状沉淀，说明此培养液剩余溶解 氧为零，应加大稀释比。